NGHIÊN cứu HIỆU QUẢ CỦA PHƯƠNG PHÁP NUÔI cấy PHÔI NANG ở NỒNG độ OXY THẤP 5% TRONG THỤ TINH ỐNG NGHIỆM

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y NGUYỄN THỊ MINH NGHIÊN CỨU HIỆU QUẢ CỦA PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY PHÔI NANG Ở NỒNG ĐỘ OXY THẤP 5% TRONG THỤ TINH ỐNG NGHIỆM LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI - 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y NGUYỄN THỊ MINH NGHIÊN CỨU HIỆU QUẢ CỦA PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY PHÔI NANG Ở NỒNG ĐỘ OXY THẤP 5% TRONG THỤ TINH ỐNG NGHIỆM Chuyên ngành: Khoa học y sinh Mã số: 9720101 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS TS Quản Hồng Lâm GS TS Ngũn Viết Tiến HÀ NỢI - 2019 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi thực Các số liệu, kết quả luận án trung thực chưa công bố nghiên cứu khác TÁC GIẢ LUẬN ÁN Nguyễn Thị Minh LỜI CẢM ƠN Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám đốc Học viện Quân y, phòng sau đại học, Ban Giám đốc Bệnh viện Phụ sản Trung ương, Ban lãnh đạo Viện Mô phôi Lâm sàng Quân đội, Ban lãnh đạo Trung tâm Hỗ trợ Sinh sản Quốc gia Bệnh viện Phụ sản Trung ương tạo điều kiện cho tơi q trình học tập, nghiên cứu hồn thành luận án Tơi xin bày lịng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Quản Hoàng Lâm, GS.TS Nguyễn Viết Tiến, thầy trực tiếp tận tâm hướng dẫn, tạo điều kiện cho kinh nghiệm quý báu suốt thời gian nghiên cứu hồn thành luận án Tơi xin trân trọng cảm ơn nhà khoa học, Thầy (Cô) Hội đồng chấm luận án cấp sở, cấp trường đóng góp ý kiến q báu để tơi hồn thiện luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn tập thể cán Viện Mô phôi Lâm sàng Quân đội động viên, giúp đỡ tơi q trình học tập hồn thành luận án Tơi xin chân thành cảm ơn tập thể cán bộ, nhân viên Trung tâm Hỗ trợ Sinh sản Quốc gia Bệnh viện Phụ sản Trung ương giúp đỡ tơi q trình thực luận án Tôi xin chân thành cảm ơn gia đình, người thân bạn bè động viên, hỗ trợ mặt sống, học tập công tác Hà Nội ngày 12 tháng năm 2019 Nguyễn Thị Minh MỤC LỤC Trang phụ bìa Lời cam đoan Lời cảm ơn Mục lục Danh mục chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục biểu đồ Danh mục hình ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tình hình vơ sinh phương pháp điều trị 1.1.1 Khái niệm vô sinh 1.1.2 Tình hình vơ sinh giới 1.1.3 Tình hình vơ sinh Việt Nam 1.2 Thụ tinh ống nghiệm 1.2.1 Định nghĩa TTTON có nghĩa cho tinh trùng thụ tinh với nỗn ni cấy thành phơi ống nghiệm Sau đó, số phôi chuyển trở lại vào buồng tử cung [13] 1.2.2 Chỉ định thụ tinh ống nghiệm 1.3 Một số kỹ thuật hỗ trợ sinh sản thụ tinh ống nghiệm 1.3.1 Trữ lạnh phôi 1.3.2 Trữ lạnh tinh trùng 1.3.3 Trữ lạnh noãn 1.3.4 Tiêm tinh trùng vào bào tương noãn 1.3.5 Kỹ thuật lấy tinh trùng từ tinh hoàn mào tinh 1.3.6 Hỗ trợ phơi màng 1.3.7 Chẩn đoán di truyền trước làm tổ 1.3.8 Ni trưởng thành nỗn ống nghiệm 1.3.9 Chuyển phôi nang 1.3.10 Xin, cho phơi, nỗn, tinh trùng 1.3.11 Mang thai hộ 1.4 Hệ thống nuôi cấy phôi quản lý chất lượng hệ thống nuôi cấy phôi thụ tinh ống nghiệm 1.4.1 Hệ thống nuôi cấy phôi người 1.4.2 Quản lý chất lượng hệ thống ni cấy phơi người 1.5 Q trình phát triển làm tổ phôi 12 * Quá trình tạo giao tử 12 1.6 Nuôi cấy phôi nang .18 1.6.1 Cấu tạo phôi nang 1.6.2 Lợi ích nuôi phôi nang 1.6.3 Hạn chế nuôi cấy phôi nang 1.7 Ảnh hưởng nồng độ Oxy cao lên phát triển phơi 22 Oxy đóng vai trị chủ ́u chuyển hố phát triển phơi, Oxy vừa ảnh hưởng có lợi vừa nhân tố gây hại phôi nếu nồng độ Oxy cao Các Phản ứng phosphoryl-Oxy hoá tiêu thụ Oxy để sinh lượng cung cấp cho tế bào, đồng thời đào thải gốc tự (được sinh từ thoát điện tử lượng cao bẻ gãy chuỗi vận chuyển điện tử) Các gốc tự nhân tố khử phản ứng cực mạnh gây độc cho sinh hoá tế bào, bao gồm cả gen di truyền [36] .22 1.7.1 Ảnh hưởng gốc tự sinh từ Oxy lên phát triển phôi 1.7.2 Các biện pháp giảm tính độc Oxy hệ thống nuôi cấy phôi 1.8 Một số quan điểm nuôi cấy phôi ống nghiệm người 26 1.8.1 Phác đồ nuôi cấy phôi 1.8.2 Ni cấy hở hay ni cấy có phủ dầu 1.8.3 Nuôi cấy phôi nuôi cấy theo nhóm 1.9 Các nghiên cứu liên quan đến vấn đề nuôi cấy phôi nồng độ Oxy thấp .28 1.9.1 Các nghiên cứu giới liên quan đến vấn đề nuôi cấy phôi nồng độ Oxy thấp 5% 1.9.2 Nghiên cứu nước CHƯƠNG 36 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .36 2.1 Đối tượng địa điểm nghiên cứu 36 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu 2.1.3 Thời gian nghiên cứu: từ tháng 1/2011 đến tháng 5/2015 2.2 Phương pháp nghiên cứu 37 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu: Nghiên cứu thử nghiệm labo kết hợp với đánh giá lâm sàng có đối chứng 2.2.2 Chọn mẫu 2.2.3 Các bước tiến hành nghiên cứu 2.2.4 Các số, biến số nghiên cứu 2.2.5 Kỹ thuật thu thập số liệu 2.2.6 Xử lý phân tích số liệu 2.2.7 Một số sai số cách khắc phục 2.2.8 Khía cạnh đạo đức nghiên cứu CHƯƠNG 59 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 59 3.1 Đặc điểm đối tượng nghiên cứu 59 3.1.1 Các kỹ thuật tạo phôi thực thụ tinh ống nghiệm bệnh nhân hai nhóm Kỹ thuật tạo phơi góp phần ảnh hưởng đến kết thụ tinh, tỷ lệ hình thành phơi, chất lượng phơi nhóm nghiên cứu 3.1.2 Đặc điểm vô sinh bệnh nhân hai nhóm 3.1.3 Đặc điểm dự trữ buồng trứng hai nhóm 3.1.4 Đặc điểm kích thích buồng trứng bệnh nhân hai nhóm 3.1.5 Bệnh nhân có hỗ trợ phơi màng hai nhóm 3.1.6 Phân loại noãn thu hoạch sau chọc hút noãn tỷ lệ thụ tinh bệnh nhân hai nhóm 3.2 So sánh chất lượng phơi hai nhóm nghiên cứu .63 3.2.1 Chất lượng phôi ngày bệnh nhân hai nhóm 3.2.2 Mối liên quan kỹ thuật thụ tinh chất lượng phơi ngày nhóm Oxy 5% 3.2.3 Số lượng bệnh nhân trữ lạnh phôi ngày 2, số lượng phôi trung bình trữ lạnh ngày 3.2.4 Số lượng phơi trung bình ngày ni tiếp ngày 5, tỷ lệ hình thành thành phơi nang chất lượng phôi nang 3.2.5 Tỷ lệ bệnh nhân có phơi dư trữ lạnh ngày *Nguồn: Bệnh nhân: Phạm Vân Ph, HS 1473/10, nhóm 3.2.6 Số phôi chuyển trung bình độ dày niêm mạc bệnh nhân chuyển phơi nang tươi hai nhóm 3.3 So sánh kết quả thai nghén bệnh nhân chuyển phôi nang tươi hai nhóm .71 3.3.1 Kết có thai bệnh nhân chuyển phơi nang hai nhóm 3.3.2 Tỷ lệ làm tổ bệnh nhân chuyển phôi nang 3.3.3 Mối liên quan đến chất lượng phôi tỷ lệ có thai lâm sàng hai nhóm nghiên cứu 3.3.4 Tỷ lệ cố xẩy thai nghén bệnh nhân chuyển phôi nang 3.3.5 Tỷ lệ tình trạng trẻ sinh sống bệnh nhân chuyển phôi nang hai nhóm 3.4 Các kết quả đông trữ, rã đông chuyển phôi đông lạnh ngày bệnh nhân hai nhóm 76 3.4.1 Số lượng bệnh nhân chuyển phôi rã lần 1, lần 3.4.2 Kết chuyển phôi rã đông sau rã đông lần 3.4.3 Kết chuyển phôi rã đông sau rã đông lần 3.4.4 Kết sau chuyển phôi rã lần lần 3.5 Thai cộng dồn chu kỳ kích thích buồng trứng hai nhóm ni cấy Oxy nồng độ 5% Oxy nồng độ 20% nghiên cứu .81 CHƯƠNG 82 BÀN LUẬN 82 4.1 Bàn luận đối tượng phương pháp nghiên cứu .85 4.1.1 Bàn đối tượng nghiên cứu Để so sánh hiệu nuôi cấy phôi nang nồng độ Oxy thấp 5% so với hiệu nuôi cấy phôi nang nồng độ Oxy khơng khí 20% cần đảm bảo tính xác đồng nhóm nghiên cứu Chúng tiến hành chọn ngẫu nhiên 172 bệnh nhân đủ tiêu chí lựa chọn vào nghiên cứu (tương đương với 172 chu kỳ kích thích nang noãn) với 1803 noãn thực kỹ thuật cấy tinh trùng với noãn tiêm tinh trùng vào bào tương nỗn thu 1579 phơi Nghiên cứu thực Trung tâm Hỗ trợ Sinh sản Quốc gia, Bệnh viện Phụ sản Trung ương, sở nhà nước thứ hai nước thực thành công thụ tinh ống nghiệm, có số lượng bệnh nhân lớn có uy tín lâu năm lĩnh vực Các bệnh nhân chia thành nhóm nghiên cứu: - Nhóm 1: 86 bệnh nhân (với 884 nỗn tạo 769 phơi) nuôi cấy nồng độ Oxy thấp 5% (bảng 3.6) 11 Macro O.R.C., World Health Organization (2017) Infecundity, infertility, and childlessness in developing countries Demographic and Health Surveys (DHS) Comparative reports No , accessed: 05/01/2017 12 Nguyễn Viết Tiến, Ngơ Văn Tồn, Ngơ Thị Ngọc Phụng (2012) Dịch tễ học vô sinh phương pháp điều trị, Nhà xuất bản y học, Hà Nội, 42-43 13 Wood C., Traunson A.O (1999) Historical perspectives of IVF Handbook of In Vitro Fertilization, Australia 14 Lai Q., Zhang H., Zhu G et.al (2013) Comparison of the GnRH agonist and antagonist protocol on the same patients in assisted reproduction during controlled ovarian stimulation cycles Int J Clin Exp Pathol, 6(9): 1903–1910 15 Bongso A (1999) Handbook on Blastocyst culture Sydney Press Indusprint, Sydney, 49 - 63 16 Dale B., Elder K (1997), In Vitro Fertilization, the United Kingdom at the University press, London 17 Annan J J., Gudi A., Bhide P., et al (2013) Biochemical Pregnancy During assisted Conception: A Little Bit Pregnanct, Journal of Clinical Medicine Research, 5(4): 269 – 274 18 Vishvanath K., (2017), Newer indications for In Vitro Fertilization (2017) 19 Gardner D.K., Lane M (2009) Culture systems for the human embryo, In Text book Assisted Reproductive technologies, 250-271, Inferma Healthcare, Telephone House, 69-77 Paul Street, London 20 Figueira R d.S.C, Braga D.P.A.F, Francisco L S., et al (2008) Effect of ovarian stimulation protocol and ovarian response on oocyte quality Fertility and Sterility, 90(32): 325 21 Shrestha D., La X., Feng H.L (2015) Comparison of different stimulation protocols used in in vitro fertilization: a review, Annals of Translational Medicine, 3(10): 137 22 Van der Auwera I., Pijnenborg R., Koninckx P.R (1999) The influence of in-vitro culture versus stimulated and untreated oviductal environment on mouse embryo development and implantation Human Reproduction, 14(10): 2570-2574 23 Simón C., Velasco J.J.G., Valbuena D., et al (1998) Increasing uterine receptivity by decreasing estradiol levels during the preimplantation period in high responders with the use of a follicle-stimulating hormone step-down regimen Fertility and Sterility, 70(2): 234–239 24 Kelley R.L., (2006) Recombinant human follicle-stimulating hormone alters maternal ovarian hormone concentrations and the uterus and perturbs fetal development in mice, AJP Endocrinol Metab, 291(4): 761–770 25 Cheryl J A., Luza M T., Hunter M.G (2009) Nutritional effects on oocyte and embryo development in mammals: implications for reproductive efficiency and environmental sustainability, Philos Trans R Soc Lond B BioSci, 364(1534): 3351–3361 26 Hou Y.J., Zhu C.C., Duan X., et al (2016) Both diet and gene mutation induced obesity affect oocyte quality in mice, Scientific Reports, 6, 18858 27 McCulloh D.H (2009) Quality control: maintaining stability in the laboratory Text book Assisted Reproductive technologies, 9-24 Inferma Healthcare, Telephone House, 69-77 Paul Street, London 28 Ðỗ Kính (2001), Phôi thai học người, Nhà xuất bản Y học Hà Nội, Hà Nội 29 Gonzales D.S., Bavister B.D (1995) Zona pellucida escape by hamster blastocysts in vitro is delayed and morphologically different compared with zona escape in vivo Biol Reprod, 52(2): 470–480 30 Gonzales D.S., Jones J M., Pinyopummintr T et al (1996) Trophectoderm projections: a potential means for locomotion, attachment and implantation of bovine, equine and human blastocysts Human Reproduction, 11(12): 2739-2745 31 Montag M., Koll B., Holmes P., et al (2000) Significance of the number of embryonic cells and the state of the zona pellucida for hatching of mouse blastocysts in vitro versus in vivo Biol Reprod, 62(6): 1738–1744 32 https://www.google.com/search? biw=1536&bih=696&tbm=isch&sa=1&ei=x6GZXMDFJ8T_wAO3wq vwDQ&q=implantation+book+imaging+atlas+human+embryo+the+m c+graw+hill+companies&oq=implantation+book+imaging+atlas+huma n+embryo+the+mc+graw+hill+companies&gs_l=img.3 29304.72905 73587 0.0 0.99.2171.27 1 gws-wizimg.Q_61bR6tlaU#imgrc=qcyiInIMJtxePM: 33 Nguyễn Thị Đức, Trần Văn Hanh, Ngũn Đình Tảo cs (1998) Phơi thai học người, Nhà xuất bản Quân đội nhân dân, Hà Nội 34 https://www.google.com/search? q=blastocyst&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=0ahUKEwjImsaz9 57hAhXZyosBHcNeBokQ_AUIDigB&biw=1536&bih=696#imgdii=b 1EkhREMw6GYeM:&imgrc=dnFKm-UXAXjZhM: 35 Gardner D.K., Lane M., Calderon I., et al (1996) Environment of the preimplantation human embryo in ivo: metabolite analysis of oviduct and uterine fluids and metabolism of cumulus cells Fertil Steril, 65(2): 349–353 36 Catt J.W., Henman M (2000) Toxyc effects of Oxygen on human embryo development Hum Reprod, 15(2): 199–206 37 Trounce I (2000) Genetic control of Oxydative phosphorylation and experimental models of defects Hum Reprod, 15(2): 18–27 38 Shigenaga M.K., Hagen T.M., Ames B.N (1994) Oxydative damage and mitochondrial decay in aging Proc Natl Acad Sci, 91(23): 10771– 10778 39 Piko L., Taylor K.D (1987) Amounts of mitochondrial DNA abundance of mitochondrial gene transcripts in early mouse embryos Developmental Biology, 123: 364-374 40 Orrenius S., Burkitt M.J., Kass G.E., et al (1992) Calcium ions and Oxydative cell injury Ann Neurol, 32(1): 33–42 41 Tarin J.J (1996) Potential effects of age-associated Oxydative stress on mammalian oocytes/embryos Mol Hum Reprod, 2(10): 717–724 42 Noda Y., Goto Y., Umaoka Y., et al (1994) Culture of human embryos in alpha modification of Eagle’s medium under low Oxygen tension and low illumination Fertility and Sterility, 62(5): 1022-1027 43 Endrich M.M., Grossenbacher D., Geistlich A., et al (1996) Apoptosisinduced concomitant release of cytosolic proteins and factors which prevent cell death Biol Cell, 88(1–2): 15–22 44 Bongso A (1999) Embryo Culture Systems Handbook onBlastocyst culture, Sydney Press Indusprint, Sydney, 55 – 56 45 Gardner DK, Lane M (1996) Alleviation of the ‘2-cell block’ and development to the blastocyst of CF1 mouse embryos: role of amino acids, EDTA and physical parameters Human Reproduction,11(12): 2703-2712 46 Nasr-Esfahani M.H., Winston N.J., Johnson M.H (1992) Effects of glucose, glutamine, ethylenediaminetetraacetic acid and Oxygen tension on the concentration of reactive Oxygen species and on development of the mouse preimplantation embryo in vitro J Reprod Fertil, 96(1): 219–231 47 Fischer B., Bavister B.D (1993) Oxygen tension in the oviduct and uterus of rhesus monkeys, hamsters and rabbits J Reprod Fertil, 99(2): 673–679 48 Mastroianni L., Richard J (1965) Oxygen tension within the rabbit fallopian tube Reprod Fertil, 9(1): 99–102 49 Mitchell J.A., Yochim J.M (1968) Measurement of intrauterine Oxygen tension in the rat and its regulation by ovarian steroid hormones Endocrinology, 83(4): 691–700 50 Kaufman D.L., Mitchell J.A (1994) Intrauterine Oxygen tension during the oestrous cycle in the hamster: patterns of change The Endocrine Society 51 Biggers J.D., Summers M.C (2008) Choosing a culture medium: making informed choices Fertility and Sterility, 90(3): 473-483 52 Sherbahn R., Frasor J., Radwanska E., et al (1996) Comparison of mouse embryo development in open and microdrop co-culture systems Human Reproduction, 11(10): 2223-2229 53 Otsuki J., Nagai Y., Chiba K (2007) PerOxydation of mineral oil used in droplet culture is detrimental to fertilization and embryo development Fertil Steril, 88(3): 741-743 54 Miller K.F., Goldberg J.M., Collins RL (1994) Covering embryo cultures with mineral oil alters embryo growth by acting as a sink for an embryotOxyc substance Journal of Asisted Reproduction and Genetics, 11(7): 342-345 55 Tao T., Robichaud A., Mercier J., et al (2013) Influence of group embryo culture strategies on the blastocyst development and pregnancy outcome J Assist Reprod Genet, 30: 63-68 56 Reed M.L., Woodward B.J., Swain J.E (2011) Single or group culture of mammalian embryos: the verdict of the literature J Reprod Stem Cell Biotechnol, 2(2): 77-87 57 Dumoulin J.C.M., Rosie C M., Vanvuchelen M.T., et al (1995) Effect of Oxygen concentration on in vitro fertilization and embryo culture in the human and the mouse Fertility and Sterility, 63(1): 115-119 58 Bahceci M., Ciray H.N., Karagenc L., et al (2005) Effect of Oxygen concentration during the incubation of embryos of women undergoing ICSI and embryo transfer: a prospective randomized study Reproductive BioMedicine Online, 11(4): 438-443 59 Sobrinho D.B.G., Oliveira J (2011) IVF/ICSI outcomes after culture of human embryos at low Oxygen tension: a meta-analysis 60 Meintjes M., Chantilis S.J., Douglas J.D et al (2009) A controlled randomized trial evaluating the effect of lowered incubator Oxygen tension on live births in a predominantly blastocyst transfer program Hum Reprod, 24(2): 300–307 61 Kovacic B., Vlaisavljevic V (2008) Influence of atmospheric versus reduced Oxygen concentration on development of human blastocysts in vitro: a prospective study on sibling oocytes Reprod Biomed Online, 17(2): 229-236 62 Ciray H.N., Aksoy T., Yaramanci K et al (2009) In vitro culture under physiologic Oxygen concentration improves blastocyst yield and quality: a prospective randomized survey on sibling oocytes Fertil Steril, 91(4): 1459–1461 63 Kovacic B., Saijko M.C Vlaisavljevic V (2010) A prospective, randomized trial on the effect of atmospheric versus reduced Oxygen concentration on the outcome of intracytoplasmic sperm injection cycles Fertil Steril, 94(2): 511–519 64 Kea B., Gebhardt J., Watt J et al (2007) Effect of reduced Oxygen concentrations on the outcome of in vitro fertilization Fertil Steril, 87(1): 213–216 65 Santos M.J., Gamiz P., Albert C., et.al (2013) Reduced Oxygen tension improves embryo quality but not clinical pregnancy rates: a randomized clinical study into ovum donation cycles Fertil Steril, 109(4): 402-407 66 Kasterstein E., Strassburger D., Komarovsky D., et al (2013) The effect of two distinct levels of Oxygen concentration on embryo development in a sibling oocyte study J Assist Reprod Genet, 30(8): 1073-1079 67 Kovacs P., Matyas S.Z., Boda K et al (2003) The effect of endometrial thickness on IVF/ICSI outcome Human Reproduction, 18(11): 2337-2341 68 Zhao J., Zhang Q., Licor Y (2012) The effect of endometrial thickness and pattern measured by ultrasonography on pregnancy outcomes during IVF-ET cycles Reprod Biol Endocrinol, 10: 100 69 Mahajan N., Sharma S (2016) The endometrium in assisted reproductive technology: How thin is thin? Journal Human Reproductive Sciences, 9: 38 70 Annan J., Gudi A., Bhide P., et al (2013) Biochemical Pregnancy During Assisted Conception: A Little Bit Pregnant Journal of Clinical Medicine Research, 5(4): 269-274 71 Zegers - Hochschild F., Adamson G.D., de Mouzon J., et al (2009) International Committee for Monitoring Assisted Reproductive Technology (ICMART) and the World Health Organization (WHO) revised glossary of ART terminology, 2009, Fertil Steril, 92(5): 15201524 72 Landuyt L V (2010) Zygote and embryo morphology scoring < https://www.globalfertilityacademy.org> 73 Gardner D.K (2008) Dissection of culture media for embryos: the most important and less important components and characteristics Reprod Fertil Dev, 20(1): 74 Gardner D.K., Lane M., Stevens J., et al (2001) Noninvasive assessment of human embryo nutrient consumption as a measure of developmental potential Fertil Steril, 76(6): 1175–1180 75 Gideon A., Yedwab G.A., Paz G., et al (1976) The temperature pH and partial pressure of Oxygen in the cervix and uterus of women and uterus of rats during the cycles Fertility and Sterility 27(3): 304-309 76 Guérin P., El Mouatassim S., Menezo Y (2001) Oxydative stress and protection against reactive Oxygen species in the pre-implantation embryo and its surroundings Human Reproduction Update, 7(2): 175-189 77 Bedaiwy MA., Falcone T., Mhamed M.S., et al (2004) Differential growth of human embryos in vitro: role of reactive Oxygen species Fertility and Sterility, 82(3): 593-600 78 Goto Y., Noda Y., Mori T et al (1993) Increased generation of reactive Oxygen species in embryos cultured in vitro Free Radical Biology and Medicine, 15, 69-75 79 Fujitani Y., Kasai K., Ohtani S., et al (1997) Effect of Oxygen concentration and free radicals on in vitro development of in vitroproduced embryos Journal of Animal Science, 75(2): 483-489 80 Kwon H.C., Yang H.W., Hwang K.J., et al (1999) Effects of low Oxygen condition on the generation of reactive Oxygen species and the development in the mouse embryos culture in vitro J Obstet Gynaecol Res, 25(5): 359-366 81 Iwata H., Minami N., Imai H (2000) Postnatal weight of calves derived from in vitro matured and in vitro fertilized embryos developed under various Oxygen concentrations Reprod Fertil Dev, 12(8): 391 82 Harvey A.J (2004) Oxygen-Regulated Gene Expression in Bovine Blastocysts Biol Reprod, 71(4): 1108–1119 83 Glujovsky D., Farquhar C (2016) Cleavage-stage or blastocyst transfer: what are the benefits and harms? Fertil Steril, 106(2): 244-250 84 Andersen A.N., Carlsen E., Loft A (2008) Trends in the use of intracytoplasmatic sperm injection marked variability between countries Human Reproduction Update, 14(6): 593-604 85 Dương Đình Hiếu (2015) Nghiên cứu hình thái đánh giá liên tục phôi ngày tuổi bệnh nhân thụ tinh ống nghiệm Luận án tiến sỹ y học, Học viện Quân Y 86 Brugo-Olmedo S., Chillik C., Kopelman S (1997) Definition and causes of infertility Reproductive BioMedicine Online, 2(1): 41-53 87 Farhi J., Ben-Haroush A (2001) Distribution of causes of infertility in patients attending primary fertility clinics in Israel Isr Med Assoc, 13(1): 51-54 88 Yan J., Wu K., Tang R., et al (2012) Effect of maternal age on the outcomes of in vitro fertilization and embryo transfer (IVF-ET) Sci China Life Sci, 55(8): 694–698 89 Menken J., Trussell J., Larsen U (2014) Female ageing and reproductive outcome in assisted reproduction cycles Singapore Med J, 55(6): 305-309 90 Cheong Y., Brook N., Macklon N (2011) New concepts in ovarian stimulation", Human Assisted Reproductive Technology-Future Trends in Laboratory and clinical practice Human Assisted Reproductive Technology : Future Trends in Labaratory and Clinical Practive , ed David K gardner Published by Cambridge University Press, 54-73 91 Thum M.Y., KaLu E., Abdalla H (2009) Elevated basal FSH and embryo quality: lessons from extended culture embryos Assist Reprod Genet, 26(6): 313-318 92 Licciardi F.L., Liu HC., Rosenwaks Z (1995) Day estradiol serum concentrations as prognosticators of ovarian stimulation response and pregnancy outcome in patients undergoing in vitro fertilization Fertility and Sterility, 64(5): 991-994 93 Seckin B., Turkcapar F., Ozaksit G (2011) Elevated day FSH/LH ratio: a marker to predict IVF outcome in young and older women J Assist Reprod Genet, 29(3): 231–236 94 Tavmergen E., Goker EN., Sendag F., et al (2002) Comparison of short and long ovulation induction protocols used in ART applications according to the ovarian response and outcome of pregnancy Arch Gynecol Obstet, 266(1): 5-11 95 Hammadeh M.E., Hammadeh C.F., Ali K.R (2011) Assisted hatching in assisted reproduction: a state of the art J Asist Reprod Genet, 28, 119-128 96 The role of assisted hatching in vitro fertilization: A review of the literature A Committee opinion (2008) Fertility and Sterility 90(3): 348-351 97 Van der Gaast M.H., Eijkemans M.J., van der Net J.B., et al (2006) Optimum number of oocytes for a successful firt IVF treatment cycle Reproductive BioMedicine Online 13(4): 476-480 98 Sun B., Yu W., Wang F., et al (2014) Effects of group culture on the development of discarded human embryos and the construction of human embryonic stem cell lines J Assist Reprod Genet, 31, 1369–1376 99 Tao T., Robichaud A., Mercier J., et al (2013) Influence of group embryo culture strategies on the blastocyst development and pregnancy outcome J Assist Reprod Genet, 30(1): 63-88 100 Silverberg K.M., Turner T., Minter T., et al (2005) Choosing the optimal incubator environment for day culture: Triple gas vs 5% CO2 in air, a prospective, randomized trial Fertility and Sterility, 84: 88 101 Menken J., Trussell J., Larsen U.F.M., et al (2017) Impact of 3.5% O2 culture on embryo development and clinical outcomes: a comparative study Fertility and Sterility, 108(4): 635-641 102 Yoeli R., Orvieto R., Ashkenazi J., et al (2008) Comparison of embryo quality between intracytoplasmic sperm injection and invitro fertilization in slibling oocytes J Assist Reprod Genet; 25(1): 23-28 103 Sun H L., Jae H L., Yong S P., et al (2017) Comparison of clinical outcomes in vitro fertilization (IVF) and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) in IVF-ICSI split insemination cycle Journal List Clin Exp Reprod Med 44(2): 96-104 104 Maryam E., Farnaz M., Fariba Y., et al (2012) Comparison of conventional IVF versus ICSI in non-male factor, normoresponder patient Journal List Iran J Reprod Med 10 (2) PMC4163275 105 Salumets A (2003) Effect of developmental stage of embryo at freezing on pregnancy outcome of frozen-thawed embryo transfer Hum Reprod, 18(9): 1890–1895 106 Liu Y., Peirce K., Yap K., et al (2012) The fate of frozen human embryos when transferred either on the day of thawing or after overnight culture Asian Pac J Reprod, 1(3): 187–192 107 Đoàn Thị Hằng (2012), Nghiên cứu biến đổi hình thái cấu trúc phơi người ngày 3, ngày trước đông lạnh sau rã đông kỹ thuật thủy tinh hóa Luận án tiến sỹ y học, Học viện Quân y 108 Braude P., Bolyon V., Moore S (1988) Human gene expression first occurs between the four- and eight-cell stages of preimplantation development Nature, 332(6163): 459-461 109 Braude P., Bolyon V., Moore S (2006) Chromosome abnormalities and their relationship to morphology and development of human embryos Reproductive BioMedicine Online, 12(2): 234–253 110 Magli M.C., Gianaroli L., Ferraretti A.P., et al (2007) Embryo morphology and development are dependent on the chromosomal complement Fertility and Sterility, 87(3): 534-540 111 Finn A., Scott L., O’leary T., et al (2010) Sequential embryo scoring as a predictor of aneuploidy in poor-prognosis patients Reproductive Biomedicine Online, 21(3): 381 – 390 112 Momeni M., Rahbar M.H., Kovanci E (2011) A meta-analysis of the relationship between endometrial thickness and outcome of in vitro fertilization cycles J Hum Reprod Sci, 4(3): 130-137 113 Garcia J., Sepulveda S., Noriega - Hoces L et al (2010) Beneficial effect of reduced Oxygen concentration with transfer of blastocysts in IVF patients older than 40 years old Health, 2(9): 1010-1017 114 Alikani M (2003) Monozygotic twinning following assisted conception: an analysis of 81 consecutive cases Hum Reprod, 18(9): 1937–1943 115 Vitthala S., Gelbaya T.A., Brison D.R., et al (2008) The risk of monozygotic twins after assisted reproductive technology: a systematic review and meta-analysis Hum Reprod Update, 15(1): 45–55 116 Satio H., TSutumi O., Noda Y., et al (2000) Do assisted reproductive technologies have effects on the demography of monozygotic twinning Fertility and Sterility, 74(1): 178-179 117 Gerris J., Neubourg D.D., Mangelschots K., et al (1999) Prevention of twin pregnancy after invitro fertilization or intracytoplasmic sperm injection based on strict embryo criteria: a prospective randomized clinical trial Hum Reproduction, 14(10): 2581-2587 118 Staessen, C., Camus, M., Bollen, N et al (1992) The relationship between embryo quality and the occurrence of multiple pregnancies Fertility and Sterility, 57(3): 626-630 119 Yaron Y., Amit A., Kogosowski A., et al (1997) The optimal number of embryos to be transferred in oocyte donation: walking the thin line between low pregnancy rate and multiple pregnancies Hum Reproduction, 12(4): 699-702 120 Reynolds M.A., Schieve LA., Jeng G., et al (2001) Risk of multiple birth associated with invitro fertilization using donor eggs., American Journal of Epidemiology 154(11): 1043-1050 121 Khalaf Y., El-Toukhy T., Coomarasamy A., et al (2008) Selective single blastocyst transfer reduces the multiple pregnancy rate and increases pregnancy rates: a pre- and postintervention study BJOG Int J Obstet Gynaecol, 115(3): 385–390 122 Nguyễn Thị Minh (2012) Đánh giá hiệu quả chuyển phôi ngày 2, thụ tinh ống nghiệm Tạp chí Y Dược Học Quân sự, 38(2): 44–48 123 Mantikou E., Bontekoe S., van Wely M., et al (2013) Low Oxygen concentrations for embryo culture in assisted reproductive technologies Hum Reprod Update, 19(3): 209–209 124 125 Kalra S.K., Ratcliffe S.J., Coutifaris C et al (2011) Ovarian Stimulation and Low Birth Weight in Newborns Conceived Through In Vitro Fertilization: Obstet Gynecol, 118(4): 863–871 126 Hales C.N., Barker D.J (2001) The thrifty phenotype hypothesis British Medical Bulletin, 60: 5-20 127 Barker D.J., Hales C.N., Fall C.H., et al (1993) Type (noninsulindependent) diabetes mellitus, hypertension and hyperlipidaemia (syndrome X): relation to reduced fetal growth Diabetologia, 36: 62-67 128 Barker D.J., Osmond C., Forsén T.J., et al (2005) Trajectories of growth among children who have coronary events as adults The New EngLand Journal of Medicine, 353(17): 1802-1809 129 Skilton M.R., Viikari J.S.A., Juonala M., et al (2011) Fetal Growth and Preterm Birth Influence Cardiovascular Risk Factors and Arterial Health in Young Adults: The Cardiovascular Risk in Young Finns Study Arterioscler Thromb Vasc Biol, 31(12): 2975–2981 Số TT Số bệnh án PHIẾU THU THẬP SỐ LIỆU NGHIÊN CỨU Họ tên bệnh nhân: .tuổi Địa .ĐT Loại vô sinh: ☐Nguyên phát Nguyên nhân vô sinh: ☐Thứ phát Thời gian vô sinh năm ☐Do vòi tử cung ☐Do BTĐN ☐Do chồng ☐Không rõ nguyên nhân ☐Khác Nồng độ hormon: FSH LH E2 AMH Số nang thứ cấp Số lần IVF: Phác đồ thụ tinh ống nghiệm: ☐ IVF ☐ IVF/ICSI ☐ PESA/ICSI Phác đồ KTBT: ☐Phác đồ ngắn☐Phác đồ dài ☐Phác đồ antagonist Liều FSH Số ngày dùng .Tổng liều Nồng độ E2 ngày tiên hCG .Niêm mạc tử cung mm Ngày OR .ngày ET Số ngày ni phơi ngày Tổng số nỗn .; Chất lượng noãn: Số noãn MII: Số noãn MI Số noãn GV Kỹ thuật thụ tinh: ☐IVF ☐ICSI Tổng số phôi Số phôi nuôi tiếp từ ngày phôi Số phôi hủy không nuôi tiếp sau ngày Số phôi trữ lạnh ngày .phôi Chất lượng phôi N5: Phôi độ I Phôi độ II Phôi độ III Phơi độ IV Thối hóa khác Số phôi trữ lạnh ngày phôi Kỹ thuật chuyển phơi: ☐Dễ ☐Khó ☐sạch ☐có máu ☐chuyển phôi lần Số phôi chuyển phôi Hỗ trợ phơi màng: ☐Có ☐Khơng Chất lượng phơi chuyển: Phôi độ I .Phôi độ II Phôi độ III Phôi độ IV .(ghi ) Điểm chuyển phôi điểm Nồng độ βhCG sau 14 ngày UI/L Siêu âm sau 28 ngày: ☐1 túi thai ☐2 túi thai ☐3 túi thai ☐4 túi thai Diến biến thai nghén: ☐Thai tiến triển ☐Thai ngừng phát triển ☐Đẻ non ☐Đẻ sống ☐Sẩy ☐Khác Ghi chú: Rã đông lần (ngày rã đông: ) Số ngày dùng estrogen: ngày Niêm mạc tử cung .mm Số lượng phôi rã đông phôi Số lượng phôi chuyển Chất lượng phôi chuyển: Phôi độ I .Phôi độ II Phôi độ III Phôi độ IV (ghi ) Phôi màng: ☐ Có ☐ Khơng Điểm chuyển phơi: .điểm Nồng độ βhCG sau 14 ngày UI/L Siêu âm sau 28 ngày: ☐ túi thai ☐ túi thai ☐ túi thai ☐ túi thai Diến biến thai nghén: ☐ Thai tiến triển ☐ Đẻ non ☐ Sẩy ☐ Thai ngừng phát triển ☐ Đẻ sống ☐ Khác Rã đông lần (ngày rã đông: ) Số ngày dùng estrogen: ngày Niêm mạc tử cung mm Số lượng phôi rã đông phôi Số lượng phôi chuyển Chất lượng phôi chuyển: Phôi độ I Phôi độ II Phôi độ III Phôi độ IV .(ghi .) Phơi màng: ☐ Có ☐ Khơng Điểm chuyển phơi: .điểm Nồng độ βhCG sau 14 ngày UI/L Siêu âm sau 28 ngày: ☐ túi thai ☐ túi thai ☐ túi thai ☐ túi thai Diến biến thai nghén: ☐ Thai tiến triển ☐ Đẻ non ☐ Sẩy ☐ Thai ngừng phát triển ☐ Đẻ sống ☐ Khác ... QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y NGUYỄN THỊ MINH NGHIÊN CỨU HIỆU QUẢ CỦA PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY PHÔI NANG Ở NỒNG ĐỘ OXY THẤP 5% TRONG THỤ TINH ỐNG NGHIỆM Chuyên ngành: Khoa học y sinh Mã số:... Nam đến chưa có nghiên cứu ni phôi nang nồng độ Oxy thấp Nuôi cấy phôi nang nồng độ Oxy thấp thực có làm tăng số lượng chất lượng phôi nang so với phương pháp nuôi phôi nồng độ Oxy không khí hay... 1.6 Nuôi cấy phôi nang .18 1.6.1 Cấu tạo phôi nang 1.6.2 Lợi ích nuôi phôi nang 1.6.3 Hạn chế nuôi cấy phôi nang 1.7 Ảnh hưởng nồng độ Oxy cao lên phát triển phôi 22 Oxy