Đang tải... (xem toàn văn)
Phương pháp sắc ký lỏng ghép nối khối phổ plasma cao tần cảm ứng (LC-ICP-MS) đã được nghiên cứu ứng dụng nhằm xác định đồng thời hàm lượng của ba dạng thủy ngân (thủy ngân, methyl thủy ngân và ethyl thủy ngân) trong mẫu hải sản đã được trình bày trong bài viết này. Mời các bạn cùng tham khảo để nắm chi tiết hơn nội dung nghiên cứu.
NGHIÊN CỨU KHOA HỌC XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG MỘT SỐ DẠNG THỦY NGÂN TRONG HẢI SẢN BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG GHÉP NỐI KHỐI PHỔ PLASMA CAO TẦN CẢM ỨNG (LC-ICP-MS) Phạm Công Hiếu1,2, Đinh Viết Chiến2*, Nguyễn Văn Ri1 Nguyễn Thị Ánh Hường1, Lê Thị Hồng Hảo1,2, Nguyễn Thị Minh Lợi3 Khoa Hóa học Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Đại học Quốc gia Hà Nội Viện Kiểm nghiệm An toàn vệ sinh thực phẩm Quốc gia Trường Đại học Quảng Bình (Ngày đến tòa soạn: 10/10/2019; Ngày sửa sau phản biện: 18/11/2019; Ngày chấp nhận đăng: 28/11/2019) Tóm tắt Phương pháp sắc ký lỏng ghép nối khối phổ plasma cao tần cảm ứng (LCICPMS) nghiên cứu ứng dụng nhằm xác định đồng thời hàm lượng ba dạng thủy ngân (thủy ngân, methyl thủy ngân ethyl thủy ngân) mẫu hải sản Các thông số quan trọng tối ưu ảnh hưởng dung môi hữu cơ, tốc độ dòng pha động, nồng độ 2mercaptoethanol, nhiệt độ thời gian chiết Phương pháp đánh giá với thông số giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng, độ lặp lại, hiệu suất thu hồi phù hợp với tiêu chuẩn AOAC Phương pháp xác nhận độ xác dựa phân tích mẫu chuẩn chứng nhận DORM4 áp dụng để phân tích đồng thời hàm lượng ba dạng thủy ngân 30 mẫu hải sản Kết cho thấy hàm lượng dạng thủy ngân mẫu phân tích thấp mức cho phép theo quy định QCVN 82:2011/BYT Từ khóa: Các dạng thủy ngân, Hg, methyl thủy ngân, ethyl thủy ngân, hải sản, LCICPMS MỞ ĐẦU Thủy ngân nguyên tố kim loại dạng lỏng, chiếm tỉ lệ nhỏ vỏ trái đất, lại sử dụng rộng rãi sống, từ lĩnh vực y học (nhiệt kế, trám men răng, thuốc, ) nông nghiệp (thuốc trừ sâu, diệt cỏ, diệt nấm,…) đặc biệt ngành công nghiệp như: luyện kim, sản xuất xi măng, khai thác khống vàng,… Từ đó, thủy ngân dễ dàng phát tán vào mơi trường thủy sinh, sau tích lũy chuyển hóa vi khuẩn để tạo thành hợp chất thủy ngân hữu cơ, ethyl thủy ngân, methyl thủy ngân với độc tính cao [6, 14] Các hợp chất thủy ngân tích tụ lồi hải sản gây ảnh hưởng đến sức khỏe người thông qua chuỗi thức ăn Khi xâm nhập vào thể người, thủy ngân tích lũy thời gian dài khó bị loại bỏ [6, 11, 12, 14] Do vậy, việc xác định hàm lượng số dạng thủy ngân thủy ngân, methyl thủy ngân ethyl thủy ngân hải sản cần thiết, nhằm cảnh báo ngăn ngừa mối nguy ô nhiễm thủy ngân cho người tiêu dùng Để xác định riêng rẽ đồng thời dạng thủy ngân, số phương pháp thường sử dụng như: quang phổ hấp thụ nguyên tử kết hợp kỹ thuật hóa lạnh (CVAAS)2 [5, 7, 9], sắc ký khí [4, 12], sắc ký lỏng hiệu cao ghép nối quang phổ hấp thụ nguyên tử (HPLC AAS) khối phổ plasma cao tần cảm ứng (LCICPMS),…[2, 7, 8, 10, 11, 13] Với ưu điểm độ nhạy cao, độ ổn định tốt, thời gian phân tích phù hợp, quy trình xử lý mẫu không phức tạp, * Điện thoại: 0987980874 Email: chemvietchien@gmail.com Tạp chí KIỂM NGHIỆM VÀ AN TỒN THỰC PHẨM (Số 4-2019) 33 NGHIÊN CỨU KHOA HỌC nghiên cứu này, phương pháp sắc ký lỏng phép nối khối phổ plasma cao tần cảm ứng (LCICPMS) lựa chọn nhằm xác định đồng thời ba dạng: thủy ngân, methyl thủy ngân ethyl thủy ngân số mẫu hải sản HĨA CHẤT VÀ THIẾT BỊ 2.1 Hóa chất Tất hóa chất, thuốc thử sử dụng nghiên cứu thuộc loại tinh khiết phân tích: chất chuẩn Hg 1000 ppm (Merck), methyl thủy ngân (MeHg) > 99,8%, (Sigma Aldrich), ethyl thủy ngân (EtHg) > 99,9% (TRC), mẫu chuẩn chứng nhận DORM4 (Canada), hóa chất khác: HCl 37% (Merck), methanol (MeOH), isopropanol (IsP), 2mercaptoethanol (2ME) > 99,9 (Sigma), muối amonium acetate > 99% (Merck), khí argon có độ tinh khiết 99,999% (Messer), nước deion Ngồi ra, dung dịch chuẩn hóa thiết bị hãng Perkin Elmer dung dịch làm mát (cho Chiller) sử dụng 2.2 Thiết bị Thiết bị sắc ký lỏng phép nối khối phổ plasma cao tần cảm ứng LCICPMS (Model Nex ION 350X) hãng Perkin Elmer có trang bị hệ thống buồng động học (hình 1) sử dụng nghiên cứu Hình Hệ thiết bị LCICPMS sử dụng nghiên cứu KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 Lựa chọn, tối ưu điều kiện phân tích ICPMS Trong nghiên cứu này, số khối Hg202 lựa chọn, bị ảnh hưởng trùng khối đồng vị phổ biến thủy ngân tự nhiên (29,86%), phân tích chế độ chuẩn (standard mode) Các thơng số khác có ảnh hưởng đến độ xác, độ nhạy, độ ổn định phép phân tích cơng suất RF, lưu lượng khí mang, độ sâu plasma, thấu kính ion,… tối ưu tự động hệ thống (sử dụng phần mềm dung dịch chuẩn hóa thiết bị hãng Perkin Elmer cung cấp) Kết thể bảng Bảng Các thông số tối ưu tự động thiết bị ICPMS 7K{QJV͙ *LiWU͓ÿ˱ͫFFK͕Q 7K{QJV͙ *LiWU͓ÿ˱ͫFFK͕Q &{QJVX̭W5) : 6ӕOҫQTXpWNKӕL OҫQ /˱XO˱ͫQJNKt P/SK~W 6ӕOҫQÿROһS OҫQ /˱XO˱ͫQJNKtW̩R SODVPD /SK~W ĈӝVkXSODVPD &KӍQKӣWӕLѭX 9 &KӃÿӝÿR &KXҭQ 6WDQGDUG 7ӵÿӝQJWKHRP= &iFWK{QJVӕNKiF 7ӵÿӝQJ $XWR 7K͇[XQJF̭S 7K͇TXpWSK͝WU˱ͥQJ WͱFF 34 Tạp chí KIỂM NGHIỆM VÀ AN TỒN THỰC PHẨM (Số 4-2019) NGHIÊN CỨU KHOA HỌC Các thông số ảnh hưởng (bảng 1) tối ưu đồng thời cho vừa đạt tín hiệu cao chất phân tích (thủy ngân), vừa giảm ảnh hưởng nhiễu Việc tối ưu thực dung dịch chuẩn hóa thiết bị hãng có chứa nguyên tố có số khối từ nhỏ Be (9), đến số khối trung bình In (115) số khối lớn U (238), để đại diện cho nguyên tố nghiên cứu Sau thực tối ưu tự động, thông số cần phải kiểm tra để đạt giá trị yêu cầu tương ứng Trong đó, độ nhạy thiết bị chủ yếu dựa tính đáp ứng cường độ nguyên tố Indium, tỉ lệ CeO/Ce Ce++/Ce Cường độ thực tế thông số sau lần kiểm tra hàng ngày thay đổi, phải đạt theo tiêu chuẩn kiểm tra hãng để đảm bảo độ ổn định, độ nhạy thiết bị 3.2 Khảo sát, tối ưu điều kiện phân tách định lượng methyl thủy ngân (MeHg) Những yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến trình tách HPLC (về thời gian lưu, độ phân giải, cường độ tín hiệu chất phân tích) như: ảnh hưởng dung môi hữu (loại nồng độ), tốc độ dòng pha động nồng độ chất tạo cặp (2ME) Các điều kiện LC khác bao gồm: cột sắc ký C18 (5 µm, 150 x 4,6 mm), pha động chứa CH3COONH4 20 mM giữ cố định 3.2.1 Khảo sát ảnh hưởng dung môi hữu Các dung môi lựa chọn để khảo sát nghiên cứu gồm: methanol (MeOH) isopropanol (IsP) với nồng độ ÷ 5% (trong phép đo ICPMS, nồng độ dung môi hữu khuyến cáo < 5% để đảm bảo nguồn ICP hoạt động hiệu quả) Tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng dung môi hữu đến thời gian lưu độ phân giải hai chất có độ phân cực lớn (thời gian lưu ngắn sử dụng cột C18) Hg2+ MeHg Trong pha động sử dụng MeOH, thời gian lưu rút ngắn so với khơng có mặt dung mơi hữu tổng thời gian phân tích cịn dài Trong đó, sử dụng isopropanol cho độ phân giải tốt chất phân tích với thời gian phân tích ngắn tín hiệu chất phân tích lớn trường hợp dùng MeOH [2] Do đó, dung mơi isopropanol lựa chọn Kết khảo sát nồng độ isopropanol dựa thơng số tín hiệu đo, thời gian lưu độ phân giải, nồng độ tối ưu isopropanol khoảng ÷ 5% cho thấy, nồng độ 4% cho tín hiệu chất rửa giải hồn toàn khỏi cột 20 phút, đồng thời chất có độ phân giải tốt, đáp ứng yêu cầu phân tích định lượng Vì nồng độ isopropanol 4% giữ cố định cho nghiên cứu 3.2.2 Khảo sát tốc độ dòng pha động Tốc độ pha động phải đảm bảo không nhỏ giúp giảm thời gian phân tích khơng nên vượt q 1mL/phút để giữ ổn định áp suất cho cột hệ thống bơm Do đó, tốc độ dịng khảo sát thay đổi từ 0,7 1,0 mL/phút (với bước nhảy khảo sát 0,1 mL/phút) Kết cho thấy, tốc độ dòng thay đổi từ 0,7 1,0 mL/phút, thời gian lưu rút ngắn qua khảo sát Tuy nhiên, để đảm bảo tính ổn định cột hệ thiết bị, tốc độ dòng 0,9 mL/phút (hình 2) lựa chọn cho khảo sát Hg2+ MeHg EtHg Hình Sắc ký đồ phân tích hỗn hợp chất nồng độ 10 ppb với tốc độ dòng 0,9 ml/phút Tạp chí KIỂM NGHIỆM VÀ AN TỒN THỰC PHẨM (Số 4-2019) 35 NGHIÊN CỨU KHOA HỌC 3.2.3 Khảo sát nồng độ chất tạo cặp 2ME thành phần pha động Sau tối ưu thành phần dung môi hữu tốc độ dòng, yếu tố khác thành phần pha động quan trọng cần nghiên cứu chất tạo cặp 2ME Các dạng thủy ngân hợp chất có độ phân cực cao, lực với cột C18 nhỏ, cần sử dụng thêm chất tạo cặp pha động giúp tăng khả tương tác chất phân tích với cột pha đảo, nhờ chất tách hiệu cột Các nồng độ khác 2ME khảo sát gồm: 0,05%, 0,10%, 0,20% Kết cho thấy, nồng độ chất tạo cặp 2ME tăng lên, tín hiệu chất phân tích độ phân giải chất phân tích tăng khơng nhiều Do 2ME dung mơi có khả bay mạnh, mùi khó chịu, ảnh hưởng tới sức khỏe người sử dụng, đó, nồng độ 2ME 0,10% lựa chọn phù hợp cho khảo sát 3.3 Khảo sát điều kiện xử lý mẫu Các điều kiện cần khảo sát để đạt hiệu xử lý mẫu tốt môi trường acid chiết mẫu HCl có nồng độ mol/L [2, 9, 13] gồm: nhiệt độ thời gian chiết, tỷ lệ 2ME dung môi chiết 3.3.1 Khảo sát nhiệt độ chiết Nhiệt độ yếu tố ảnh hưởng trực tiếp tới trình xử lý mẫu, trình chiết nhiệt độ thấp làm giảm hiệu suất chiết, chất phân tích khơng tách hồn tồn khỏi mẫu, gây sai số cho phương pháp Tuy nhiên, thủy ngân kim loại dễ bay dạng thủy ngân hữu bền, chuyển dạng vô nhiệt độ cao, khoảng nhiệt độ khảo sát khơng nên q cao Trong nghiên cứu này, nhiệt độ khảo sát thay đổi khoảng 50 ÷ 80oC, với giá trị bước khảo sát 10oC Kết khảo sát cho thấy, hàm lượng chất phân tích tăng lên nhiệt độ tăng từ 50oC đến 60oC Tuy nhiên nhiệt độ tăng lên 70oC, 80oC hàm lượng MeHg có xu hướng giảm đáng kể Do đó, nhiệt độ chiết mẫu 60oC lựa chọn 3.3.2 Ảnh hưởng thời gian chiết Thời gian chiết thông số quan trọng ảnh hưởng đến hiệu suất chiết Các thời gian chiết lựa chọn khảo sát nghiên cứu 20, 30, 40, 50 60 phút Kết cho thấy, nhiệt độ tăng từ 20 đến 40 phút, hàm lượng MeHg tăng đạt mức tối đa 40 phút sau khơng có thay đổi đáng kể tăng thời gian chiết Do đó, thời gian chiết 40 phút lựa chọn điều kiện chiết tối ưu cho quy trình xử lý mẫu 3.3.3 Ảnh hưởng 2Mercaptoethanol Trong q trình chiết mẫu, dung mơi chọn có chứa mercaptoethanol (2ME), hợp chất có ảnh hưởng đáng kể đến hiệu chiết Do đó, nồng độ 2ME sử dụng trình chiết nghiên cứu khảo sát kết thể hình Hình Ảnh hưởng nồng độ 2Mercaptoethanol q trình chiết mẫu 36 Tạp chí KIỂM NGHIỆM VÀ AN TOÀN THỰC PHẨM (Số 4-2019) NGHIÊN CỨU KHOA HỌC Kết hình cho thấy, giá trị thu chất phân tích (đại diện MeHg) tăng nhanh tăng nồng độ 2ME từ đến 0,2%, nhiên khơng có thay đổi đáng kể MeHg nồng độ 2ME thay đổi từ 0,2 đến 0,4% Do đó, nồng độ 2ME 0,2% lựa chọn Từ kết khảo sát, quy trình xử lý mẫu với mẫu hải sản thể hình Hình Quy trình phân tích hàm lượng ba dạng thủy ngân mẫu hải sản LCICPMS Quy trình sử dụng để thẩm định phương pháp áp dụng phân tích mẫu thực tế 3.4 Đánh giá phương pháp phân tích Việc đánh giá phương pháp thực sở điều kiện tối ưu thu được, gồm: xây dựng đường chuẩn phân tích ba dạng thủy ngân (Hg2+, MeHg, EtHg), xác định giới hạn phát (LOD), giới hạn định lượng (LOQ), độ chụm (thông qua độ lặp, độ tái lặp), độ (thông qua độ thu hồi) phân tích mẫu chuẩn CRM Đường chuẩn xác định ba dạng thủy ngân phương pháp LCICPMS xây dựng khoảng nồng độ ÷ 20 ng/mL Kết phương trình đường chuẩn, giới hạn phát phương pháp (MDL) mẫu cá (khối lượng cân mẫu 2,5 gam thể tích định mức 50 mL) thể bảng Bảng Đường chuẩn phân tích dạng thủy ngân giới hạn phát phương pháp Ph˱˯ng trình ÿ˱ͥng chu̱n H͏ s͙ MDL Y = a + bx t˱˯ng quan (μg/kg) MeHg \ [ EtHg \ [ Hg2+ \ [ Ch̭t phân tích Độ lặp lại đánh giá mẫu cá với n = mức hàm lượng 1,0 mg/kg Kết độ lệch chuẩn tương đối (RSD) cho giá trị với ba dạng thủy ngân nằm khoảng 4,03 ÷ 5,52% Độ tái lặp thực hai ngày phân tích người thực khác với Tạp chí KIỂM NGHIỆM VÀ AN TOÀN THỰC PHẨM (Số 4-2019) 37 NGHIÊN CỨU KHOA HỌC n = cho kết RSDr khoảng 5,54 ÷ 8,63% Độ thu hồi mức thêm chuẩn 0,2 mg/kg (n = 6) mẫu trắng cho kết tương ứng với MeHg, EtHg Hg 96,35%, 93,10% 95,17% Các kết nằm giới hạn cho phép AOAC mức hàm lượng khảo sát tương ứng [3] Kết khảo sát cho thấy phương pháp có chụm độ xác tốt, phù hợp để xác định hàm lượng ba dạng thủy ngân mẫu hải sản Để kiểm chứng phương pháp, mẫu chuẩn DORM4 kim loại (Pb, Cd, As, MeHg…) mẫu cá phân tích Mẫu Hội đồng nghiên cứu Quốc Gia Canada (NRCCNRC) sản xuất chứng nhận phịng thí nghiệm uy tín giới Kết phân tích thể bảng Bảng Kết phân tích mẫu chuẩn (CRM) DORM4 DORM-4 Hàm l˱ͫng phân tích (mg/kg) MeHg Hg t͝ng s͙ Hg2+ MeHg Kết phân tích mẫu chuẩn DORM4 cho thấy hàm lượng MeHg đạt yêu cầu , chứng tỏ phương pháp có độ tin cậy tốt, hồn tồn phù hợp để phân tích dạng thủy ngân mẫu hải sản 3.5 Phân tích mẫu thực tế Các mẫu lựa chọn để phân tích lấy ngẫu nhiên địa bàn Hà Nội gồm 30 mẫu với 12 loại thủy hải sản Các mẫu nghiên cứu có lồi ăn thịt có nguy tích lũy hàm lượng thủy ngân cao (cá mút đá, cá ngừ,…) loại ăn thực vật vi sinh vật phù du nhỏ có mức độ tích lũy thủy ngân thấp (cá trắm, cá chép,…) Hàm lượng trung bình ba dạng thủy ngân mẫu khảo sát số sắc đồ minh họa thể bảng hình Bảng Kết phân tích hàm lượng ba dạng thủy ngân số mẫu hải sản Loài/s͙ l˱ͫng (n) MeHg (mg/kg) EtHg (mg/kg) Hg2+ (mg/kg) Cá mút ÿá (n=3) Mc nang (n=3) Cá ngͳ (n=2) Cá trͱng (n=3) Cá h͛i (n=3) Cá thu (n=4) Cá basa (n=3) Cá h͛ng (n=2) Cá nͭc (n=3) Cá tr̷m c͗ (n=2) Cá chép (n=1) Tôm xanh (n=1) Ghi () : Mẫu có hàm lượng chất phân tích nhỏ giới hạn phát phương pháp 38 Tạp chí KIỂM NGHIỆM VÀ AN TOÀN THỰC PHẨM (Số 4-2019) NGHIÊN CỨU KHOA HỌC Hình Sắc đồ phân tích dạng thủy ngân mẫu hải sản Từ kết bảng cho thấy, tất mẫu không phát hàm lượng EtHg, hàm lượng MeHg chiếm tới khoảng 90% so với hàm lượng thủy ngân tổng số mẫu hải sản có phát Các lồi ăn thịt có hàm lượng methyl thủy ngân cao loài chủ yếu ăn thực vật sinh vật phù du nhỏ phù hợp với quy luật tích lũy thủy ngân tự nhiên Tuy nhiên tất mẫu có hàm lượng MeHg nằm giới hạn cho phép Bộ Y tế (QCVN 82: 2011/BYT): ≤ mg/kg cá thịt, ≤ 0,5 mg/kg với tất lồi cá (khơng bao gồm cá cho thịt) [1] Như vậy, bước đầu nhận thấy mức độ ô nhiễm thủy ngân hải sản nước ta mức an toàn, nhiên, cần có nghiên cứu sâu nhằm có kết toàn diện để ngăn ngừa nguy ô nhiễm thủy ngân người tiêu dùng KẾT LUẬN Trong nghiên cứu này, thông số ảnh hưởng đến việc phân tách LCICPMS quy trình xử lí mẫu tối ưu nhằm xác định đồng thời ba dạng thủy ngân (Hg2+, MeHg, EtHg) số mẫu hải sản Phương pháp thẩm định cho giới hạn phát khoảng 10 ÷ 24 , với độ lặp lại Phương pháp áp dụng để phân tích 12 lồi với 30 mẫu thủy hải sản phát hàm lượng Hg, MeHg số mẫu nằm ngưỡng an toàn theo QCVN 82 : 2011/BYT TÀI LIỆU THAM KHẢO QCVN 82:2011/BYT, “Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia giới hạn ô nhiễm kim loại nặng thực phẩm” Phạm Công Hiếu, Chu Văn kết, Đinh Viết Chiến, Lê Đức Dũng, Nguyễn Văn Ri, Nguyễn Thị Ánh Hường, Lê Thị Hồng Hảo (2018), “Xác định methyl thủy ngân mẫu thủy sản phương pháp sắc ký lỏng ghép nối khối phổ plasma cao tần cảm ứng (LCICP/MS)”, Tạp chí phân tích Hóa, Lý Sinh học, (23), 173176 AOAC (2012), “Appendix F: Guidelines for standard method performance requirements”, AOAC official methods of Analysis, Tạp chí KIỂM NGHIỆM VÀ AN TỒN THỰC PHẨM (Số 4-2019) 39 NGHIÊN CỨU KHOA HỌC A.M Caricchia, G Minervini, P Soldati, S Chiavarini, C Ubaldi, R Morabito (1997), “GCECD determination of methylmercury in sediment samples using a SPB608 capillary column after alkaline digestion”, Microchem J., 55 (1), 44 55 A.Q.Shaha, T.G Kazia,*, J.A Baiga,1, H.IAfridia, M.B Arainb (2012) “Simultaneously determination of methyl and inorganic mercury in fish species by cold vapour generation atomic absorption spectrometry“, Food Chemistry, 134, 2345 2349 Council, N R (2000) “Toxicological effects of Methylmercury.”, National Academies Press, Washington D.C Corrado Sarzanini, Giovanni Sacchero, Maurizio Aceto, Ornella Abollino, Edoardo Mentasti (1992), “Simultaneous determination of methyl, ethyl, phenyl and inorganic mercury by cold vapour atomic absorption spectrometry with online chromatographic separation”, Journal of Chromatography A, (626), Issue 1, 151 157 J Retka, A M., D Karmasz (2011) “Determination of Cu, Ni, Zn, Pb, Cd by ICPMS and Hg by AAS in plant samples”, Accumulation in foods and crops, 15th ICHMET, 373 375 Koplík R., Klimešová I., Mališová K., Oto Mestek (2014), “Determination of Mercury Species in Foodstuffs using LCICP/MS: the Applicability and Limitations of the Method”, Czech Journal of Food Sciences, (3), 249 259 10 Sang Hak Lee, Jung Ki shu (2005), “Determination of mercury in tuna fish tissue using isotope dilutioninductively coupled plasma mass spectrometry”, Microchemical Journal, 80, 233 236 11 S Mishra, R M T., S Bhalke, V.K Shukla, V.D Puranik (2005), “Determination of Methyl mercury and mercury (II) in a marine ecosystem using solidphase microextraction gas chromatographymass spectrometry”, Analytic Chimica Acta, (551), 192 198 12 Walter Holak (1982), “Determination of Methylmercury in Fish by Highperformance Liquid Chromatography”, Analyst, Vol (107), 1457 1461 13 Hight, S C., and Cheng, J (2006), “Determination of Methylmercury and Estimation of Total Mercury in Seafood Using High Performance Liquid Chromatography (HPLC) and Inductively Coupled PlasmaMass Spectrometry (ICPMS): Method Development and Validation”, Anal Chim Acta, (567), 160 172 14 WHO (1989b), “Evaluation of certain food additives and contaminants”, Thirtythirt re port of the Point FAO/WHO Expert Committee on Food Additives , Gevena, World Health Organization (WHO Technical Report Series 776) Summary DETERMINATION OF MERCURY SPECIES IN SEAFOOD BY LIQUID CHROM TOGRAPHY - INDUCTIVELY COUPLED PLASMA MASS SPECTROMETRY (LC-ICP-MS) Pham Cong Hieu1,2, Dinh Viet Chien2*, Nguyen Van Ri1, Nguyen Thi Anh Huong1 Le Thi Hong Hao1,2, Nguyen Thi Minh Loi3 Faculty of Chemistry, VNU University of Science, Vietnam National UniversityHanoi National Institute for Food Control, Vietnam Quang Binh University Liquid chromatography hyphenated with inductively coupled plasma mass spectrometry (LCICPMS) was investigated to simultaneously determine three mercury species (mercury, 40 Tạp chí KIỂM NGHIỆM VÀ AN TOÀN THỰC PHẨM (Số 4-2019) NGHIÊN CỨU KHOA HỌC methyl mercury and ethyl mercury) in seafood samples Important parameters such as organic solvents, flow rate of the mobile phase, 2mercaptoethanol concentration, extraction time and temperature were optimized The method was validated in term of the limit of detection, limit of quantitation, repeatability, and recovery meeting the AOAC performance requirements The method has also been validated based on the analysis of certified standard samples DORM4, then applied to determine three mercury species in 30 seafood samples Results showed that the content of mercury species was below the maximum limit according to the QCVN 82 : 2011/BYT Keywords: Mercury species, Hg, methyl mercury, ethyl mercury, sea food, LCICPMS Tạp chí KIỂM NGHIỆM VÀ AN TỒN THỰC PHẨM (Số 4-2019) 41 ... cứu này, phương pháp sắc ký lỏng phép nối khối phổ plasma cao tần cảm ứng (LCICPMS) lựa chọn nhằm xác định đồng thời ba dạng: thủy ngân, methyl thủy ngân ethyl thủy ngân số mẫu hải sản HÓA CHẤT... Nguyễn Thị Ánh Hường, Lê Thị Hồng Hảo (2018), ? ?Xác định methyl thủy ngân mẫu thủy sản phương pháp sắc ký lỏng ghép nối khối phổ plasma cao tần cảm ứng (LCICP/MS)”, Tạp chí phân tích Hóa, Lý Sinh... phép AOAC mức hàm lượng khảo sát tương ứng [3] Kết khảo sát cho thấy phương pháp có chụm độ xác tốt, phù hợp để xác định hàm lượng ba dạng thủy ngân mẫu hải sản Để kiểm chứng phương pháp, mẫu chuẩn