Nghiên cứu chiết xuất, phân lập một số hợp chất từ lá cây gan heo (dicliptera chinensis (l ) ness)

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƢỢC MAI DIỄM QUỲNH NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT TỪ LÁ CÂY GAN HEO (Dicliptera chinensis (L.) Ness) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƢỢC HỌC Khóa : QH.2013.Y Ngƣời hƣớng dẫn : TS VŨ ĐỨC LỢI PGS.TS NGUYỄN QUỐC HUY HÀ NỘI – 2018 LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, xin chân thành cảm ơn sâu sắc đến người thầy hướng dẫn cho TS Vũ Đức Lợi – giảng viên Khoa Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội Thầy tận tình bảo, hướng dẫn, động viên, khích lệ tạo điều kiện tốt để hồn thành tốt khóa luận Tơi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến PGS.TS Nguyễn Quốc Huy, đơn vị Cục Khoa học công nghệ Đào tạo, Bộ Y Tế bảo thêm nhiều kiến thức mới, truyền đạt kinh nghiệm q báu để tơi hồn thành tốt khóa luận Tơi xin gửi lời cảm ơn đến thầy cô, kĩ thuật viên Bộ môn Dược liệu - Dược học cổ truyền, Bộ môn Bào chế Cơng nghệ dược phẩm, Bộ mơn Hóa dược Kiểm nghiệ m thuốc Khoa Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội giúp đỡ nhiều q trình học tập thực khóa luận Tôi xin gửi lời cảm ơn tới Ban chủ nhiệm Khoa Y Dược, thầy cô dạy dỗ, dìu dắt tơi suốt năm học vừa qua Cảm ơn đề tài khoa học công nghệ cấp Đại học Quốc gia Hà Nội, mã số: QG.17.28 hỗ trợ kinh phí để chúng tơi hồn thành khóa luận Tơi xin gửi lời c ảm ơn sâu sắc tới gia đình, người thân bạn bè, bên cạnh - đồng hành, cổ vũ, tiếp thêm sức mạnh cho tơi q trình học tập, rèn luyện thực khóa luận Cuối tơi xin kính chúc thầy - ln ln mạnh khỏe, hạnh phúc thành công công việc nghiệp trồng người Xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 10 tháng năm 2018 Sinh viên Mai Diễm Quỳnh DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 DANH MỤC CÁC BẢNG STT Bảng 1.1: Kết định phương pháp hóa học Bảng 1.2: Bảy hợp chất axetat Bảng 1.3: Ảnh hưởng tớ sản chuột Bảng 3.1: Dữ liệu phổ N so sánh L DANH MỤC CÁC HÌNH STT Hình 1.1: Hình 1.2: Hình 1.3: Hình 2.1: Hình 2.2: Hình 3.1: Chinensis Hình 3.2: ethyl acet Hình 3.3: Hình 3.4: MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC TÊN KÍ HIỆU, VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Vị trí phân loại, đặc điểm thực vật, phân bố 1.1.1 Vị trí phân loại chi Dicliptera 1.1.2 Đặc điểm thực vật chi Dicliptera 1.1.3 Số lượng, đặc điểm loài thuộc chi Dicliptera 1.1.4 Đặc điểm thực vật Gan heo 1.1.5 Đặc điểm bột dược liệu vi phẫu Gan heo 1.2 Thành phần hóa học củ a Gan heo .7 1.3 Một số tác dụng dược lý nghiên cứu 11 1.3.1 Tác dụng chống xơ gan 11 1.3.2 Tác dụng bảo vệ gan 12 1.3.3 Tác dụng chống oxy hóa 13 1.3.4 Tác dụng chức sinh sản chuột 13 1.4 Tác dụng công dụng theo y học cổ truyền 15 CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 Đối tượng nghiên cứu 16 2.1.1 Nguyên vật liệu 16 a ch t v dung i s dụng 17 2.1.3 Trang thiết bị, dụng cụ, máy móc .17 2.2 Phương pháp nghiên cứu 18 Phương pháp chiết xu t, phân lập hợp ch t .18 Phương pháp xác định c u trúc hợp ch t 19 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN……………………………… 20 3.1 Kết chiết xuất, phân lập hợp chất 23 3.2 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập từ Gan heo .27 3.2.1 Hợp ch t 27 3.2.2 Hợp ch t 30 3.3 Bàn luận 31 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 34 Kết luận 34 Kiến nghị 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Việt Nam có vị trí địa lý nằm gần vành đai nhiệt đới, cối mà có sinh trưởng, phát triển mạnh mẽ Thực vật không dùng làm lương thực cho người mà kho thuốc điều trị bệnh quý giá Ngu ồn dược liệu nước ta vô đa dạng, phong phú Hiện giới nói chung Việt Nam nói riêng, xu hướng sử dụng sản phẩm có nguồn gốc thiên nhiên ngày phát triển Do vậy, nghiên cứu phát triển thuốc sản phẩm chữa bệnh từ thực vật xu hướng quan tâm Cây Gan heo có tên khoa học Dicliptera chinensis (L.) Nees thuộc chi Dicliptera họ Acanthaceae thuốc phổ biến sử dụng từ lâu đời Trong đời sống, việc sử d ụng Gan heo để nhuộm thực phẩm Y học Việt Nam Trung Quốc, cịn dùng để chữa cảm mạo, sốt cao, lên sởi, giảm niệu; dùng ngồi trị lở, sưng, rơm sẩy, mụn nhọt [2, 12] Ngày nay, nhà khoa học phát thấy tác dụng hiệu điều trị gan bị tổn thương viêm, xơ gan, tác dụng chống oxy hóa [22, 24, 30] Hiện nhà khoa học tiếp tục nghiên cứu lồi thuộc chi Dicliptera để tìm tác dụng ứng dụng điều trị bệnh Việc nghiên cứu Gan heo giúp xác định thành phần hóa học tác dụng sinh học thuốc để sử dụng chúng hợp lý, an toàn hiệu Sử dụng phương pháp chiết xuất, phân lập để xác định thành phần hóa học thuốc Tuy nhiên, nghiên cứu Việt Nam giới cịn ít, vậy, tơi tiến hành đề tài: “Chiết xuất, phân lập số hợp chất từ Gan heo (Dicliptera chinensis (L.) Ness)” với mục tiêu: Chiết xuất, phân lập đƣợc số hợp chất từ Gan heo Xác định đƣợc cấu trúc hóa học hợp chất phân lập CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Vị trí phân loại, đặc điểm thực vật, phân bố 1.1.1 Vị trí phân loại chi Dicliptera Theo Hệ thống phân loại ngành Ngọc Lan (Magnoliophyta tác giả Takhtajan, chi Dicliptera có vị trí phân loại sau [30]: Giới thực vật: Plantae Ngành Ngọc Lan: Magnolipphyta Lớp ỏ Tháp út: Equisetopsida C Agardh Phân lớp Mộc Lan: Magnoliidae Novák ex Takht ộ Hoa Môi: Lamiales Họ Rô: Acanthaceae Chi: Dicliptera 1.1.2 Đặc điểm thực vật chi Dicliptera - Dạng sống: dạng thân thảo - Lá: đơn mọc cách, hình trứng Lá bắc hình bầu dục, có lơng hình trứng ngược - Cụm hoa: dạng xim, dạng chùy hay chùm nách hay đỉnh cành, có thân Đơi hoa đơn độc nách đỉnh cành - Hoa: Tất chi có hoa lưỡng tính Hoa mẫu mẫu - Tràng: Tràng dạng ống, môi khía, mơi ngun - Bao phấn : thường ơ, bao phấn hình thn, gần trịn hình đường; bao phấn đính lưng, mở dọc; gốc bao phấn thường có phần phụ dạng móc lơng Bao phấn đính nhị lệch - Bộ nhụy: Tất có bầu thượng Bầu hình trịn, gần trịn, bầu dục; bầu phủ lơng mịn nhẵn - Quả: Việt Nam có dạng nang, mở mảnh, có lơng, giá nỗn dựng đứng gốc - Hạt ép dẹt, bề mặt nhiều điểm nốt, bề mặt hạt thường có lơng [9] Hình 1.1 Một số hình vẽ phận chi Dicliptera [9] Lá hình trứng Hạt Quả nang 1.1.3 Số lượng, đặc điểm loài thuộc chi Dicliptera - Trên giới Chi Dicliptera họ Acanthaceae) bao gồm 150 loài vùng nhiệt đới cận nhiệt đới hi phân bố hâu : Trung Quốc, Lào, ampuchia, Thái Lan, Indonesia, Malaysia, hâu Phi, hâu c Mỹ [2, 4, 10] - Việt Nam Chi Dicliptera gồm lồi [4 ; [8]: • Lồi D bupleuroides Nees in all Lưỡng thiệt : ây cỏ cứng cao 30cm; thân vng, thường đen khơ, có nâu đậm, khơng có lơng, lóng dài 3-4cm Lá mọc đối, phiến hình trái xoan, mặt nâu đen, mặt nâu Hoa hình mơi mọc thành chùm hoa mọc nách lá; đài 6-8mm; vành cao 1,5mm • Lồi D.chinensis Nees in D ửu : ây cỏ thân có bốn cạnh, có lơng mịn Lá mọc đối hình bầu dục thon, có lơng mịn Hoa hình mơi bẹt, mơi ngun Quả nang, hạt có lơng Phân đoạn ethyl acetat từ Gan heo phân lập thô cột silica gel sau: Giai đoạn phân lập Sử dụng phương pháp sắc kí cột  - Chuẩn bị cột: + Cặn chiết ethyl acetat (50,0 g triển khai sắc ký cột silica gel pha thường, trộn cặn với lượng tối thiểu silicagel, sấy khô nghiền mịn + Cột rửa sạch, đáy cột lót l p bơng mỏng Đổ vào cột 40ml chloroform mở khóa cho dung mơi ch ảy từ từ để đẩy hết bọt khí lớp bơng ngồi Khi lớp dung mơi cịn khoảng cm khóa cột + Cột nhồi phương pháp nhồi cột ướt: trộn silica gel với lượng vừa đủ dung môi chloroform thành hỗn dịch đổ lên cột, vừa đổ vừa gõ nhẹ quanh cột để hạt nén, hết bọt khí cột phân bố đều, mặ t, rửa thành cột chloroform + Ổn định cột: Sau luyện cột, ta kiểm tra cột xem có thẳng, khơng cịn bọt khí ta đậy nắp cột ổn định cột vịng 24h - Tiến hành sắc kí cột hấp thụ + Mở khóa cột cho dung mơi chloroform chảy đến sát bề mặt silica gel, khóa cột lại + Đưa chất lên cột: Đổ phần cặn trộn với silica gel lên trên, v ừa dội vừa gõ nhẹ để phần cặn sát bề mặt silica gel, lót lớp bơng mỏng lên bề mặt silica gel + Sau rửa giải dung mơi bắt đầu chạy cột Hệ dung môi rửa giải chloroform/methanol, tỉ lệ thay đổi từ 30:1 đến 1:1 + Điều chỉnh tốc độ rửa giải 1ml/1 phút 25 + Mỗi ống nghiệm hứng khoảng 10ml dung dịch Kiểm tra dịch rửa giải sắc kí lớp mỏng thu phân đoạn giống Thu phân đoạn E1 (6,0 g), E2 (14,2 g), E3 (6,3 g), E4 (8,4 g)  Giai đoạn phân lập + Phân đoạn E4 tiếp tục phân tách sắc ký cột silica gel pha thường, rửa giải hỗn hợp chloroform/ aceton/ nước (3:4:0,1), thu phân đoạn nhỏ E4.1 (1,6 g), E4.2 (1,4 g) E4.3 (1,2 g), E4.4 (0,8 g) E4.5 (0,6 g) + Tinh chế phân đoạn E4.1 cột sắc ký pha đảo RP-18 với hệ dung môi rửa giải aceton/nước 3:2, v/v thu hợp chất (23 mg) Phân tách phân đoạn E4.3 sắc ký cột silica gel với hệ dung môi hexan/ aceton 7:3, v/v thu hợp chất (11 mg) 26 Cao Ethyl acetat 50 g Silica gel pha thuận Cloroform/ methanol (30:1 đến 1:1) E1 (6 g) Silica gel pha thuận Cloroform/aceton/H₂O (3:4:0.1) E4.1 (1,6 g) Hợp chất (23 mg) Hình 3.2 Sơ đồ phân lập hợp chất từ phân đoạn ethyl acetat 3.2 Xác định cấu trúc số hợp chất từ Gan heo 3.2.1 Hợp ch t Tính chất: Chất bột màu trắng, vơ định hình Độ quay cực: [α 25D = -64,2(c =0,1, MeOH) Phổ ESI-MS: m/z 277,0 [M+H]+ Khối lượng phân tử: 276 Công thức phân tử: C16H22O4 Phổ NMR trình bày Bảng 3.1 27 Bảng 3.1 Dữ liệu phổ NMR hợp ch t C16H22O4 ch t so sánh L Vị trí C 3a 4a 8a 28 9a 10 11 12 Hợp chất thu dạng bột màu trắng Phổ ESI-MS hợp chất xuất pic ion phân tử m/z 277,0 [M+H]+, tương ứng với M= 276 có cơng thức phân tử C16H20O4 Phổ 1H-NMR hợp chất thấy có tín hiệu proton olefin ; nhóm methoxy nhóm methyl Phổ 13CNMR DEPT hợp chất xuất 16 carbon có: carbonyl, carbon khơng liên kết với hydro, carbon methin, carbon methylen carbon methyl Trên phổ HMBC hợp chất xuất tương tác HM H-10 δH 1,41)/H -11 δH 1,23) với C-3a δC 171,0)/C-4 δC 38,6)/C-4a δC 47,1); H-3 δ H 5,912) với C-2 δC168,9)/C-3a δC 171,0)/C-9a δC 106,8 xác định vị trí nhóm methyl C-4, liên kết đơi C-3/C-3a Tương tác HM nhóm methoxy δH 3,20) C-9a δC 106,8 xác định vị trí nhóm methoxy gắn trực tiếp C-9a Dựa vào liệu phổ hợp chất so sánh với số liệu công bố hợp chất O-methyl-6-oxofurodysinin lacton [22] thấy trùng khớp vị trí tương ứng 29 Vì vậy, xác định hợp chất O-methyl-6-oxofurodysinin lacton Hình 3.3 C u trúc phân t 3.2.2 Hợp ch t Tính chất: Hợp chất có dạng tinh thể khơng màu, tan CHCl3 Phổ 1H-NMR (500MHz, CDCl3 δ ppm có kết sau: 7,59 (1H, d, J = 15,8 Hz, H-3′ , 7,09 1H, dd, J = 8,1, 1,8 Hz, H-9′ , 7,05 1H, d, J = 1,8 Hz, H-5′ , 6,93 1H, d, J = 8,1 Hz, H-8′ , 6,30 1H, d, J = 16,1 Hz, H-2′ , 5,85 (1H, br s, OH-7′ , 4,72 1H, d, J = 8,8 Hz, H-3), 5,10 (1H, br t, J = 6,6 Hz, H-24), 3,94 (3H, s, OCH3-6′ , 1,68 3H, s, H3-26), 1,62 (3H, s, CH3-27), 0,98 (3H, s, CH3-29), 0,97 (3H, s, CH3-18), 0,91 (3H, s, CH3-30), 0,90 (3H, s, CH3-28), 0,89 (3H, d, J = 6,2 Hz, CH3-21), 0,60 (1H, d, J = 4,0 Hz, CH 2-19), 0,38 (1H, d, J = 4,4 Hz, CH2-19) Phổ 1H-NMR hợp chất cho thấy hợp chất triterpenoid có dạng khung cycloartane Các tín hiệu cyclopropane methylene δ H 0,38 (1H, d, J =4,4 Hz, CH 2-19) 0,60 (1H, d, J = 4,0 Hz, CH 2-19); bốn nhóm methyl bậc ba δH 0,98 (3H, s, CH3-29), 0,97 (3H, s, CH3-18), 0,91 (3H, s, CH3-30), 0,90 (3H, s, CH3-28); nhóm methyl bậc hai δH 0,89 (3H, d, J = 6,2 Hz, CH3-21); nhóm methylene δ H 5,10 (1H, br t, J = 6,6 Hz, H-24) Một nhóm feruloyl xác định dựa tín hiệu proton [δ H 7,59 (1H, d, J =15,8 Hz, H-3′ , 7,08 1H, dd, J = 8,1, 1,8 Hz, H-9′ , 7,04 1H, d, J = 1,8 Hz, H-5′ , 6,92 1H, d, J = 8,1 Hz, H-8′ , 6,30 5,85 (1H, br s, OH-7′ ; 3,94 3H, s, O 30 1H, d, J = 16,1 Hz, H-2′ , H3-6′ liên kết với C-3 xác định dựa vào độ chuyển dịch hóa học trường thấp H-3 δ H 4,72 so sánh với cycloartenol δH-3 4,72) tài liệu [29] Nhóm feruloyl xác định định hướng β dựa số ghép cặp proton-proton H-2ax H3ax (J = 8,8 Hz) Dựa vào liệu phổ hợp chất so sánh v ới liệu phổ công bố hợp chất cycloartanyl ferulat [37 , xác định hợp chất Cycloartenyl ferulat Hình 3.4 C u trúc phân t 3.3 Bàn luận Đề tài chiết xu ất cao toàn phần từ phần mặt đất Gan heo phương pháp ngâm nhiệt độ 50 oC với dung mơi cồn 96° Phương pháp có ưu điểm đơn giản, dễ thực hiện, thiết bị đơn giản, rẻ tiền thu khối lượng cắn toàn phần đạt 9,69% so với lượng dược liệu ban đầu Cắn toàn phần sau chiết lỏng – lỏng với dung mơi có độ phân cực tăng dần nhexan, ethyl acetat , thu cắn phân đoạn với khối lượng đạt 0,48% ; 0,86% ; so với nguyên liệu khô ban đầu Đề tài phân lập 02 hợp chất từ phân đoạn ethyl acetat mẫu nghiên cứu Dựa theo đặc điểm lý hóa (cảm quan, nhiệt độ nóng chảy), phổ khối (APCI-MS, ESI-MS), phổ cộng hưởng từ hạt nhân NMR ( 1H-NMR, 13CNMR, D PT qua đối chiếu với tài liệu công bố, hợp chất 31 xác định là: O-methyl-6-oxofurodysinin lacton (1) Cycloartenyl ferulat (2) Cả hợp chất chưa công bố cơng trình khoa học trước Gan heo Vì vậy, đóng góp đề tài, làm phong phú tri thức thành phần hóa họ c Gan heo Hợp chất o-methyl-6-oxofurodysinin lacton Hợp chất o-methyl-6-oxofurodysinin lacton tìm thấy hai loài Hải miên Dysidea Fragilis Haliclona Oculata [5] da loài Cadlina Luteomarginata [23] Hợp chất o-methyl-6-oxofurodysinin lacton chứng minh có tác dụng : chống hoạt tính gây độc tế bào ung thư ác hợp chất phân lập từ loài hải miên Dysidea fragilis đánh giá sàng lọc sơ nồng độ 100 g/mL có hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư KB, LU-1, HL-60, LnCaP, SK-MeI2, HepG2, MCF-7, PC-3 Kết cho thấy, hợp chất có khả ức chế >50% phát triển tế bào ung thư [5] Hợp chất cycloartenyl ferulat Hợp chất cycloartenyl ferulat tìm thấy dầu cám Là loại -Oryzanol, hợp chất tạo thành từ : este axit ferulic rượu triterpene với phytosterols Chúng có nhiều lợi ích sức khoẻ khảo sát từ gạo s ản phẩm gạo Nhóm chất chứng minh khoa học có chất chống oxy hoá, chống viêm, chống khối u, làm giảm kali máu, được ch ấp thuận để điều trị cân thần kinh rối loạn mãn kinh [37] Cụ thể hơn, hợp chất cycloartenyl ferulate, thành phần gammaoryzanol có nguồn gốc từ dầu cám gạo làm suy giảm phân huỷ tế bào Mast Trong nghiên cứu này, nhà khoa học kiểm tra ảnh hưởng cycloartenyl ferulate (cycloartenolferulic axit este; CAF) phản ứng dị ứng Khi CAF gamma-oryzanol tiêm da với DNP (phức DNA 32 protein) chống lại IgE vào da lưng chuột, phản ứng mẫn da da thụ thể kháng nguyên DNP-HSA giảm F gamma-oryzanol ức chế giải phóng hạt tế bào Mast IgE kết hợp với CAF phát kháng thể chống lại IgE phân tích ELISA Mặc dù ủ IgE với CAF không làm giảm lượng Ig , kết tủa IgE cách ly tâm Kết chứng minh CAF bắt giữ Ig , ngăn cản gắn kết với FcepsilonRI, giảm giải phóng hạt tế bào Mast Chính thế, chúng có tác dụng điều trị viêm dị ứng [27] Một nghiên cứu khác chứng minh tác d ụng đa dạng hợp chất cycloartenyl ferulate Chiết xuất methanol cám gạo gamma-oryzanol ngăn chặn tình trạng gây viêm 12-o-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA) chuột Các thành phần hoạt tính củ a cám gạo, sitosterol ferulate , 24-methylcholesterol ferulate , cycloartenyl ferulate 24- metylenecycloartanol ferulate ức chế rõ ràng viêm TPA gây chuột Liều ức chế 50% hợp chất viêm TPA gây 0,2-0,3 mg / Hơn nữa, cycloartenyl ferulate ức chế đáng kể tác dụng thúc đẩy khối u TPA chuột nhắt Như vậy, chất khẳng định có hoạt tính chống viêm chống phát triển khối u chuột [33] Nhận xét: hợp chất phân lập được chứng minh có tác dụng sinh học, đồng th ời giúp ta định hướng việc nghiên cứu thêm thành phần hóa học tác dụng sinh học Gan heo 33 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Qua q trình hồn thành thực nghiệm, luận văn thu đươc kết sau đây: - Đã phân lập 02 chất phương pháp chiết dung môi ethanol sắc ký từ phân đoạn ethylacetat dịch chiết Gan heo - Đã xác định cấu trúc hóa học o-methyl-6- oxofurodysinin lacton (1) cycloartenyl ferulat (2) dựa theo liệu phổ thực nghiệm so sánh với tài liều công bố Cả hợp chất lần phân lập từ Gan heo Kiến nghị o Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học Gan heo thành phần phần mặt đất o Dựa kết nghiên cứu thành phần hóa học , tiến hành nghiên cứu tác dụng sinh học Gan heo người 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Nguyễn 2014 , điển ách h a thực vật h c iệt Nam, NX Giáo dục Việt Nam, tr 393 Đỗ Huy ích, Đặng Quang hung, ùi Xuân hương, Nguyễn Thượng Dong, Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Thu, Nguyễn Tập, Trần Toàn (2011), Cây thuốc v động vật làm thuốc Việt Nam, t ập III, Nhà xuất Kh học kỹ thuật, Hà Nội, tr 479-480 Võ Văn Giáo dục, tr 214-215 Võ Văn kỹ thuật, tr 957 Nguyễn Thị Cúc (2017) Luận văn Nghiên cứu thành phần hóa h c hoạt tính diệt tếung thư hai loài hải miên Dysidea fragilis alicl na culata (tt)”, luận án Tiến sĩ hóa học, học viện Khoa học Công nghệ Việt Nam Lưu Đàm (2005), “Nghiên cứu chiết tách nhuộm màu thực phẩm t kinh nghiệm s dụng thực vật đồng bào dân tộc thiểu số”, Trung tâm hỗ trợ nghiên cứu hâu , Đại học Quốc gia Hà Nội Nguyễn Thượng Dong (2006), Nghiên cứu thuốc t thả dược, NXB Khoa học Kỹ thuật Nguyễn Văn Đàn, Nguyễn Viết Tựu (1990), Phương pháp nghiên cứu hóa h c thuốc, NXB y học chi nhánh thành phố Hồ Chí Minh, Khoa Dược Đỗ Văn Hải, Dương Đức Huyến (2011 , Đặc điểm hình thái chi thuộc họ Ơ Rơ ( Acanthaceae Juss) Việt Nam Hội nghị khoa h c toàn quốc sinh thái tài nguyên sinh vật lần thứ 4,Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật, tr 104-108 10 Phạm Hoàng Hộ (1999), Cây c Việt Nam, tập III, Nhà xuấ t trẻ, tr.73-74 11 Đỗ Tất Lợi (2001), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học, tr.518-520 12 Nguyễn tập I, NX 13 Viện Dược liệu (2004), Cây thuốc v NXB Khoa học Kỹ thuật, tr.432-438 14 Viện Dược liệu (2006), Phương pháp nghiên cứu tác dụng dược lý thuốc t 15 thả dược, NXB Khoa học kỹ thuật, tr 139-141 Phạm Kim Thoa (2017) Khóa luận “ Nghiên cứu đặc điểm thực vật thành phần hóa h c Lá Diễn”, khoa Y Dược, Đại học Quốc Gia Hà Nội 16 Nguyễn Văn Thu Trần Hùng (2011), ược liệu h c, I, NXB Y học 17 Nguyễn Tiến Vững, Vũ Đức Lợi (2017), Một số hợp chất phân lập từ Gan Heo ( Dicliptera chinensis (L.) Nees) Tạp ch ược h c, T 57, Số 7, trang 54 -57 Tài liệu Tiếng Anh 18 Abdullahi, S.M, Musa, A.M, Abdullahi, M.I, Sule M.Iand Sani, Y.M 2013 , Isolation of Lupeol from the Stem-bark of Lonchocarpus sericeus Papilionaceae , Scholars Academic Journal of Biosciences (SAJB), 1(1):18-19 19.hmad 1, Khan MR, Shah N , Khan R 2013 In vitro antioxidant potential of Dicliptera roxburghiana BMC Complement Altern Med, 13:140 20 Ankita Wal, Pranary Wal, A.K Rai, Kanwal raj (2010), Isolation and modification of pseudohybrid plant Lupeol , J.Pharm Sci & Res Vol.2(1),13-25 21 Bibhu Prasad Sahu, Panchanan Gouda and Chakrapani Patnaik (2016), Pandanus Odaritissimus Linn Prasad Sahu, Panchanan Gouda and Chakrapani Patnaik (2016), Pandanus Odaritissimus Linn: Isolation of Stigmast-5, 22-dien-3-β-ol from ethanolic extra of stem bark and study of antimicrobial activity , Journal of Chemistry and chemical Sciences, Vol.6(6), 574-585 22 Charoenchai P, Vajrodaya S, Somprasong W, Mahidol C, Ruchirawat S, Kittakoop P (2010), “Antiplasmodial, cytotoxic, radical scavenging and antioxidant activities of Thai plants in the family Acanthaceae , 23 Eric J Dumdei, Julia Kubanek, John E Coleman, Jana Pika, Raymond J Andersen, Jorge Rios Steiner and Jon Clardy (1997), New terpenoid metabolits from the skin extracts, an egg mass, and dietary sponges of the Northeastern Pacific dorid nudibranch Cadlina luteomarginata", Canadian Journal of Chemistry, 75 (6):773-789 24 Gao Ya, Zhong Mingli, Zhong Jialiang, Zhang Kefeng (2014) Oestrogenicity and effect on hepatic metabolism of the aqueous extract of the leaf mixture of Aloe buettneri, Dicliptera vertic Hibiscus macranthus and Justicia insularis , Journal of Gua University of Traditional Chinese Medicine, 6, 953-956 25 Gao YT, Yang X constituents in herbs of ethanolic extract from herbs of chinensis , Zhongguo Zhong Yao Za Zhi, 31(12), 985-987 26 Gao YT1, Yang X cerebroside from Dicliptera chinensis.” Journal of Asian Natural Products Research, page 763-770 27 Oka T, Fujimoto M, Nagaska R 2010 , ycloartenyl ferulate, a component of rice bran oil-derived gamma-oryzanol, attenuates mast cell degranulation , Phytomedicine, 17(2):152-6 28 P.S Jain, S ari 2010 , Isolation of lupeol, stigmatsterol and campesteron from petrolium ether extract of woody stem of Wrightia tinctoria , Asian Journal of plant Sciences, 9(3): 1-5 29 Rita Aquino, Isabella Behar, Francesco de Simone, Cosimo Pizza,Mario d'Agostino (1985), "Dioscin and Gracillin from Tamus communis", Journal of Natural Products, 48 (3): 502–502 30 Takhtajan A.L (1997), Diversity and Classification of Flowering Plants, Columbia University Press, New York, USA 31 Telefo PB1, Moundipa PF, Tchana AN, Tchouanguep Dzickotze C, Mbiapo FT 1998 , ffects of an aqueous extract of Aloe buettneri, Justicia insularis, Hibiscus macranthus, Dicliptera verticillata on some physiological and biochemical parameters of reproduction in immature female rats , J Ethnopharmacol, 63(3):193-200 32 Telefo P 1, Moundipa PF, Tchouanguep FM 2002 , Oestrogenicity and effect on hepatic metabolism of the aqueous extract of the leaf mixture of Aloe buettneri, Dicliptera verticillata, Hibiscus macranthus and Justicia insularis , Fitoterapia, 73(6):472-8 33 Yasukawa K, Akihisa, Kimura Y 1998 , Inhibitory effect of cycloartenol ferulate, a component of rice bran, on tumor promotion in two -stage carcinogenesis in mouse skin , Biological & Pharmaceutical Bulletin, 21(10):1072-6 34 Zhang K, Gao Y, Zhong M, Xu Y, Li J, Chen Y, Duan X, Zhu H(2016), Hepatoprotective effects of Dicliptera chinensis polysaccharides on dimethylnitrosamine-induced hepatic fibrosis rats and its underlying mechanism , Journal of Ethnopharmacol, 179, 38-44 35 ZhangK, ZhuH, GaoY 2010 , Research on active extracts of Dicliptera chinensis on liver protection , ZhongguoZhong Yao ZaZhi, 35(4): 497498 36 Zhang X1, Zhang J2, Jia L3, Xiao S4 2016 , Dicliptera chinensis polysaccharides target TGF-β/Smad pathway and inhibit stellate cells activation in rats with dimethylnitrosamine-induced hepatic fibrosis Cell Mol Biol, ; 62(1):99-103 37 Zhimin Xu, J Samuel Godber (1999), "Purification and identification of components of gamma-oryzanol in rice bran oil , Journal of Agricultural Food Chemistry, 47(7): 2724-8 ... xuất, phân lập số hợp chất từ Gan heo (Dicliptera chinensis (L. ) Ness)? ?? với mục tiêu: Chiết xuất, phân lập đƣợc số hợp chất từ Gan heo Xác định đƣợc cấu trúc hóa học hợp chất phân lập CHƢƠNG 1:... cấu trúc phân tử hợp chất [16] 22 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 Kết chiết xuất, phân lập hợp chất Mẫu Gan heo chiết xuất sau: Mẫu Gan heo phơi khô, nghiền thành bột (6,5 kg), sau chiết ethanol... đồ phân lập hợp chất từ phân đoạn ethyl acetat 3.2 Xác định cấu trúc số hợp chất từ Gan heo 3.2.1 Hợp ch t Tính chất: Chất bột màu trắng, vơ định hình Độ quay cực: [α 25D = -64,2(c =0,1, MeOH)