Ureaplasma urealitycum (U.urealitycum) và Chlamydia trachomatis là những tác nhân quan trọng gây viêm vùng chậu và vô sinh. Mục đích của nghiên cứu này nhằm xác định tỉ lệ nhiễm U.urealitycum và Chlamydia trachomatis và đánh giá mối liên quan với hình ảnh tổn thương vòi tử cung
PHỤ KHOA – NỘI TIẾT, VÔ SINH LÊ QUANG ĐÔ, LÊ MINH TÂM, NGUYỄN HỒNG BÁCH, NGƠ VIẾT QUỲNH TRÂM, CAO NGỌC THÀNH NHIỄM UREAPLASMA UREALITYCUM VÀ CHLAMYDIA TRACHOMATIS Ở PHỤ NỮ VÔ SINH THỨ PHÁT VÀ MỐI LIÊN QUAN VỚI TỔN THƯƠNG VỊI TỬ CUNG Lê Quang Đơ(1), Lê Minh Tâm(2), Nguyễn Hồng Bách(2), Ngơ Viết Quỳnh Trâm(2), Cao Ngọc Thành(2) (1) Bác sĩ Nội trú Sản Phụ Khoa, (2) Đại học Y Dược Huế Tập 16, số 02 Tháng 08-2018 Từ khóa: Ureplasma urealitycum, chlamydia, vịi tử cung, vô sinh thứ phát Keys word: Ureplasma urealitycum, chlamydia, secondary infertility 92 Tác giả liên hệ (Corresponding author): Lê Quang Đô, email: lequangdo2013@gmail.com Ngày nhận (received): 08/06/2018 Ngày phản biện đánh giá báo (revised): 25/06/2018 Ngày báo chấp nhận đăng (accepted): 29/06/2018 Tóm tắt Mục tiêu: Ureaplasma urealitycum (U.urealitycum) Chlamydia trachomatis tác nhân quan trọng gây viêm vùng chậu vô sinh Mục đích nghiên cứu nhằm xác định tỉ lệ nhiễm U.urealitycum Chlamydia trachomatis đánh giá mối liên quan với hình ảnh tổn thương vịi tử cung Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Nghiên cứu cắt ngang từ tháng 7/2017 đến 5/2018 phụ nữ vô sinh thứ phát đến khám Trung tâm nội tiết sinh sản vô sinh, Bệnh viện trường Đại Học Y Dược Huế Sự diện U.urealitycum Chlamydia phát xét nghiệm PCR với dịch lấy từ ống cổ tử cung Phim chụp tử cung vòi tử cung (HSG) thực để đánh giá độ thơng vịi tử cung Tất số liệu phân tích thống kê phần mềm SPSS 20.0 Kết quả: Trong 77 bệnh nhân nữ vô sinh thứ phát, tỉ lệ U.urealitycum Chlamydia 40,3% 2,6% Sự khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê việc nhiễm U.urealitycum Chlamydia nhóm tuổi, trình độ học vấn, nghề nghiệp, tiền sử sảy thai, nhiễm khuẩn đường sinh dục, tiền sử phẫu thuật, thời gian vơ sinh (p >0,05) Nhưng có liên quan có ý nghĩa thống kê việc nhiễm U.urealitycum với tổn thương vòi tử cung phim chụp tử cung vòi tử cung (p< 0,05) Kết luận: Nên tầm sốt nhiễm U.urealitycum bệnh nhân vơ sinh thứ phát lưu ý mối liên quan với tổn thương vịi tử cung Từ khóa: Ureplasma urealitycum, chlamydia, vịi tử cung, vô sinh thứ phát Abstract UREAPLASMA UREALITYCUM (U.UREALITYCUM) AND CHLAMYDIA TRACHOMATIS ARE IMPORTANT PATHOGENS RESULTING IN PELVIC INFLAMMATORY DISEASES AND INFERTILITY Objectives: The aim of this study was to determine the prevalence Tập 16, số 02 Tháng 08-2018 Theo thống kê tổ chức giới (WHO), ngày có triệu người mắc bệnh lây truyền qua đường tình dục, tương đương khoảng 400 triệu người/năm toàn giới [13] Hiện số ngày gia tăng, tính chất lây nhiễm phức tạp với biến chứng gây khơng chẩn đốn điều trị nên việc kiểm soát bệnh cần thiết Trước người ta chủ yếu quan tâm nhiều đến vài trò gây bệnh vi khuẩn lậu cầu vi khuẩn thường gặp, với phát triển kỹ thuật vi sinh, có nhiều nghiên cứu giới vai trò quan trọng vi khuẩn U.urealyticum gây viêm niệu không lậu cầu với biến chứng khác hệ sinh dục tiết niệu U urealyticum xem nguyên nhân gây viêm niệu đạo khơng lậu cầu chlamydia, cịn tác nhân gây viêm màng ối, gây sảy thai, sinh non, viêm âm đạo vi khuẩn viêm cổ tử cung [1] Các nghiên cứu giới thực vùng khác nhau, đối tượng khác cho thấy tỉ lệ nhiễm vi khuẩn khác Nghiên cứu Dhawan B cộng (2012), Ureaplasma phát 25,8% bệnh nhân viêm đường sinh dục 20,8% phụ nữ vô sinh [2] Theo Shahin Najar Peerayeh năm 2006 nghiên cứu bệnh phẩm lấy từ cổ tử cung phụ nữ vơ sinh: 30,7% dương tính với ureaplasma mycoplasma hominis, ureaplasma chiếm 51,7%, mycoplasma hominis 26,7%, 21,5% nhiễm loại [9] Nghiên cứu Joanna Grzesko cộng năm 2009 phụ nữ vơ sinh tỉ lệ nhiễm M.genitalium 19,6% [5] Nghiên cứu Atefeh Mousavi cộng năm 2014 nhóm 104 bệnh nhân nữ vô sinh Iran cho thấy tỉ lệ nhiễm U.urealyticum 37,5%, nhiễm M genitalium M hominis 2,9% [8] Vai trò vi khuẩn với vơ sinh nữ cịn nhiều tranh cãi Nhiều nghiên cứu cho việc khơng chẩn đốn, điều trị dẫn đến viêm mạn tính vơ sinh [3] Mục đích nghiên cứu xác định tỉ lệ nhiễm U urealyticum Chlamydia bệnh nhân nữ vô sinh thứ phát sinh học phân tử PCR mối liên quan với tổn thương vòi tử cung Tập 14, số 04 Tháng 05-2016 Đặt vấn đề TẠP CHÍ PHỤ SẢN - 16(02), 14(01), 92 XX-XX, - 96,2016 2018 of U urealitycum and Chlamydia trachomatis and their relation with tubal damages in women with secondary infertile Materials and methods: a cross-sectional study from 7/2017 to 5/2018, in secondary infertile women referring to the Center for Reproductive Endocrinology and Infertility, Hue University of Medicine and Pharmacy Hospital The presence of U.urealitycum and Chlamydia was detected by multiplex-PCR in swab taken from cervical chanel Hysterosalpingography was performed to assess tubal patency All data were analyzed statistically by SPSS 20.0 Results: Out of 77 secondary infertility women, the prevalence of U.urealitycum and Chlamydia was 40.3% and 2.6%, respectively There was no statistically significant difference between the infections and patient age, educational levels, situation of employment, history of abortion, genital infection and surgery, infertility duration (p value > 0.05) But there was a statistically significant correlation between U.urealitycum infection and tubal damage on hysterosalpingography (p value < 0.0.5) Conclusion: It is necessary to screen U.urealitycum infection in secondary infertile women and focus on the association with tubal damages Keyworks: Ureplasma urealitycum, chlamydia, secondary infertility 93 Tập 16, số 02 Tháng 08-2018 PHỤ KHOA – NỘI TIẾT, VÔ SINH LÊ QUANG ĐƠ, LÊ MINH TÂM, NGUYỄN HỒNG BÁCH, NGƠ VIẾT QUỲNH TRÂM, CAO NGỌC THÀNH 94 Đối tượng phương pháp nghiên cứu Nghiên cứu cắt ngang thực 77 phụ nữ lập gia đình độ tuổi từ 18-49 tuổi đến khám vô sinh trung tâm nội tiết sinh sản vô sinh, Bệnh viện Đại Học Y dược Huế từ tháng năm 2017 đến tháng năm 2018, chẩn đốn vơ sinh thứ phát thăm khám lâm sàng đầy đủ, xét nghiệm vi khuẩn học chụp phim tử cung vòi tử cung (HSG) Tất bệnh nhân không sử dụng kháng sinh tuần trước lấy mẫu, tư vấn đồng ý tham gia nghiên cứu Tiêu chuẩn loại trừ bệnh nhân dị dạng đường sinh dục, nghi ngờ có thai khơng thăm khám, xét nghiệm đầy đủ Các bước tiến hành: Bệnh nhân hỏi bệnh, thăm khám, chẩn đốn vơ sinh thứ phát tức tiền sử họ có lần mang thai, sinh sẩy phá thai kế hoạch, thời hạn năm sau muốn có thai mà khơng có thai trở lại Hồn thành mục bảng câu hỏi, thăm khám toàn thân khám chuyên khoa Lấy mẫu bệnh phẩm tăm vô trùng: Tăm thứ 1: Lấy bệnh phẩm đồ sau để soi tươi, với NaCl 0,9% tìm nấm, trichomonas, vi khuẩn, tế bào; Tăm bơng thứ 2: Lấy cổ tử cung sử dụng chẩn đoán Chlamydia, U.urealyticum chuyển đến phòng xét nghiệm vi sinh Sau thăm khám loại trừ có thai, tổn thương cổ tử cung, xuất huyết bất thường âm đạo, bệnh nhân định chụp phim tử cung vòi tử cung vào ngày thứ 2-3 sau kinh Xét nghiệm PCR: DNA từ mẫu bệnh phẩm tách chiết với KIT tách chiết DNA phenol/chloroform (VA.A92-002A) Hỗn hợp phản ứng PCR bao gồm: 5uL DNA, 0,5uL primer F(0,25uM), 0,5uL primer R, 12,5uL 2X Green Go Taq PCR Mix, 6,5uL DW Hỗn hợp trải qua chu trình nhiệt bao gồm: Biến tính DNA 950C phút Sau thực 36 chu kỳ, chu kỳ gồm giai đoạn: giai đoạn biến tính DNA 950C 50 giây, giai đoạn gắn mồi 550C 50 giây, giai đoạn kéo dài mồi 720C 60 giây Sau hoàn thành 36 chu kỳ, kết thúc phản ứng 720C phút Sau điện di sản phẩm thạch agarose 1,5% dung dịch đệm Bản thạch sau chạy điện di ngâm dung dịch ethidium bromide 0,5µg/ml 30 phút rửa qua nước cất Xem chụp ảnh thạch buồng tối ánh sáng cực tím, băng DNA phát sáng So sánh kích cỡ sản với thang DNA chuẩn để kết luận sản phẩm có đặc hiệu cho Chlmaydia U.urealitycum hay khơng Phân tích xử lý số liệu: nhập xử lý số liệu với phần mềm SPSS 20, tỉ lệ của vi khuẩn xác định mối liên quan việc dương tính vi khuẩn với yếu tố nguy hình thái tổn thương vịi tử cung phụ nữ vơ sinh thứ phát phân tích việc sử dụng kiểm định bình phương (chi-square test) với độ tin cậy p< 0.05 Kết Bảng Đặc điểm chung bệnh nhân nữ vô sinh thứ phát nhiễm Chlamydia U.urelitycum U.urealitycum Chlamydia (-) (+) (-) (+) 46/77 (59,7%) 31/77 (40,3%) 75/77 (97,4%) 2/77 (2,6%) Tuổi = năm 27 (58,7%) 19 (41,3%) 45 (97,8%) (2,2%) P=0,82 P=1 Tỉ lệ dương tính U.urealitycum Chlmaydia bệnh nhân nữ vô sinh thứ phát 40,3% 2,6% Tuổi trung bình bệnh nhân 32,45 ± 4,731 tuổi, thấp 22 tuổi cao 44 tuổi Mối liên quan khơng có có Tiền sử viêm nhiễm sinh dục Có (47,1%) (52,2%) Khơng 38 (63,3%) 22 (36,7%) P=0,227 Tiền sử sảy thai Có 28 (57,1%) 21 (42,9%) Không 18 (64,3%) 10 (35,7%) P=0,539 Tiền sử phẫu thuật ổ bụng Khơng 29 (58,0%) 21 (42%) Có 17 (63,0%) 10 (37%) P=0,672 Triệu chứng tiết dịch âm đạo Có 22 (48,9%) 23 (51,1%) Khơng 24 (75%) (25,0%) P=0,021 Kết soi tươi Bình thường 39 (65,0%) 21 (35,0%) Nhiễm nấm (66,7%) (33,3%) Tạp khuẩn (35,7%) (64,3%) P=0,12 16 (94,1%) (5,9) 59 (98,3%) (1,7%) P=0,395 49 (100%) 26 (92,9%) (7,1%) P=0,129 48 (96%) (4,0%) 27 (100%) P=0,539 43 (95,6%) (4,4%) 32 (100%) P=0,508 60 (100%) (100%) 12 (85,7%) (14,3%) P=0,1 Mối liên quan khơng có ý nghĩa thống kê tiền sử viêm nhiễm sinh dục, tiền sử sảy thai, tiền sử phẫu thuật ổ bụng, kết soi tươi với việc dương tính U.urelitycum Chlamydia Tuy nhiên có liên quan có ý nghĩa thống kệ triệu chứng tiết dịch âm đạo với việc dương tính U.urealitycum (p=0,021,