Bài viết xác định kiểu hình và kiểu gen kháng kháng sinh của giống Lactobacillus spp. đã được phân lập từ thực phẩm lên men và thực phẩm bổ sung.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Nghiên cứu Y học NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG KHÁNG SINH CỦA LACTOBACILLUS SPP PHÂN LẬP TỪ THỰC PHẨM LÊN MEN VÀ THỰC PHẨM BỔ SUNG TẠI THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Trần Nguyễn Minh Đoan*,**, Lê Thị Hiên*, Ngơ Thanh Phong* TĨM TẮT Đặt vấn đề: Lactobacillus spp loại vi khuẩn “thân thiện” sống thể người không gây bệnh Chúng cịn tìm thấy thực phẩm lên men thực phẩm bổ sung Tuy nhiên, số kết nghiên cứu đưa cảnh báo khả đề kháng kháng sinh giống lợi khuẩn Lactobacillus spp sử dụng thực phẩm lên men thực phẩm bổ sung Mục tiêu nghiên cứu: Xác định kiểu hình kiểu gen kháng kháng sinh giống Lactobacillus spp phân lập từ thưc phẩm lên men thực phẩm bổ sung Phương pháp nghiên cứu: Xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC – Minimum Inhibitory concentration) kháng sinh erythromycin, tetracycline chloramphenicol chủng vi khuẩn Lactobacillus phương pháp pha loãng kháng sinh thạch xác định kiểu gen kháng kháng sinh phương pháp khuếch đại chuỗi polymerase (PCR) Kết quả: Tỷ lệ chủng Lactobacillus spp kháng cao với tetracycline (148/164, 90,2%) chloramphenicol (100/164, 61%), chủng phân lập từ sữa chua cho tỷ lệ kháng tetracycline (28/30, 93,3%) chloramphenicol (30/30, 100%) cao Tuy nhiên, 100% chủng phân lập từ sữa chua nhạy cảm với erythromycin Thêm vào đó, 5/79 (6,3%) chủng mang gen tetM phân lập từ rau muối chua 4/9 (44,4%) chủng mang gen ermB phân lập chủ yếu từ thực phẩm bổ sung Mặt khác, khơng có chủng Lactobacillus spp mang gen cat liên quan đến kiểu hình kháng chloramphenicol Kết luận: Các vi khuẩn Lactobacillus spp phân lập từ thực phẩm lên men thực phẩm bổ sung có tỷ lệ kháng cao với kháng sinh tetracycline (> 80%) chloramphenicol (>40%) Điều đưa cảnh báo việc sử dụng hai loại kháng sinh điều trị bệnh nhiễm trùng Từ khóa: kháng kháng sinh ABSTRACT ANTIBIOTIC RESISTANCE OF LACTOBACILLUS SPP ISOLATED FROM FERMENTED FOODS AND SUPPLEMENT FOOD SUPERVISION AT HOCHIMINH CITY Tran Nguyen Minh Doan, Le Thi Hien, Ngo Thanh Phong * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Supplement of Vol 23 – No - 2019: 483 – 489 Background: Lactobacillus spp is a kind of friendly bacteria that live in our digestive system without causing disease They are also found in some fermented foods and supplement food supervision However, recently, some research results have given a warning about antibiotic resistance of Lactobacillus spp is being used in fermented and functional foods Objectives: To identify phenotypic and genotypic antimicrobial resistance of Lactobacillus spp isolated from fermented foods and supplement food supervision *Trung tâm kiểm nghiệm an toàn thực phẩm khu vực phía Nam – Viện Y tế cơng cộng TP HCM **Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Thành phố Hồ Chí Mnh Tác giả liên lạc: ThS.Trần Nguyễn Minh Đoan ĐT: 0935901760 Email: sandytran1410@gmail.com Chuyên Đề Y Tế Công Cộng 483 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Methods: To determine the minimum inhibitory concentration (MIC – Minimum Inhibiotry concentration) of erythromycin, tetracycline and chloramphenicol for those strains and identify genotypic antibiotic resistance for those strains by PCR Results: The results showed that the ratio high resistance of Lactobacillus spp strains with tetracycline (148/164, 90.2%) and chloramphenicol (100/164, 61%), in which the strains had percentage of high tetracycline resistance (28/30, 93.3%) and chloramphenicol resistance (30/30, 100%), were isolated from yogurt However, 100% of strains were isolated from yogurt still sensitive to erythromycin In addition, 5/79 (6.3%) strains carried tetM gene were isolated from pickled vegetables and 4/9 (44.4%) strains carried ermB gene were isolated mainly from supplement food supervision In the other hands, there was no Lactobacillus spp carring cat gen related to chloramphenicol resistance phenotype Conclusion: Lactobacillus spp were isolated from fermented foods and supplement food supervision with high resistance to tetracycline antibiotics (> 80%) and chloramphenicol (> 40%) The results give a warning about the usage of these two antibiotics in the treatment of infections Keywords: antibiotic resistance ĐẶT VẤN ĐỀ Lactobacillus spp thường sống thể người khơng gây bệnh Ngồi ra, chúng cịn tìm thấy hệ tiêu hóa, hệ tiết hệ sinh dục Các chủng lợi khuẩn tìm thấy loại thực phẩm lên men sữa chua, kim chi, rau muối thực phẩm bổ sung probiotic Lactobacillus spp có tác động giúp hỗ trợ điều trị ngăn ngừa nhiều loại bệnh triệu chứng bệnh tiêu chảy, nhiễm trùng, tăng mỡ máu, bệnh đái tháo đường, vấn đề da số bệnh liên quan đến hệ thống tiêu hóa Trong kỷ qua, trường hợp nhiễm khuẩn Lactobacillus spp xảy tỷ lệ thấp dân số khỏe mạnh, ước tính khoảng 1/10 triệu người(2) Ngồi ra, số nghiên cứu giới cho thấy, Lactobacillus spp nguồn chứa gen kháng kháng sinh – yếu tố nguy cao sức khỏe cộng đồng xuất trình chuyển gen ngang chủng vi khuẩn có lợi sang chủng vi khuẩn thường trú ruột người, có vi khuẩn gây bệnh Tại Việt Nam, thực phẩm lên men thực phẩm bổ sung sử dụng từ lâu đời lợi ích mà mang tới, nhiên, nghiên cứu khả kháng kháng sinh giống 484 Lactobacillus spp sản phẩm cịn hạn chế Để có số liệu khả đề kháng kháng sinh giống lợi khuẩn Lactobacillus spp, thực khảo sát mức độ đề kháng kháng sinh gen đề kháng kháng sinh chủng thực phẩm lên men thực phẩm bổ sung thành phố Hồ Chí Minh Mục tiêu nghiên cứu Xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) kháng sinh erythromycin, tetracycline chloramphenicol chủng vi khuẩn Lactobacillus spp Xác định kiểu gen kháng kháng sinh giống Lactobacillus spp có kiểu hình kháng với erythromycin, tetracycline chloramphenicol phương pháp PCR ĐỐITƯỢNG–PHƯƠNG PHÁP NGHIÊNCỨU Đối tượng nghiên cứu 164 chủng vi khuẩn Lactobacillus spp phân lập năm 2016 từ rau muối chua (n=88) (bao gồm: dưa cải muối chua, kim chi), sữa chua (n=30) (bao gồm: Vinamilk, sữa chua uống Yakult sữa chua tự làm) thực phẩm bổ sung (n=46) (bao gồm: men tiêu hóa đơng khơ có bổ sung men giống Lactobacillus spp nghi bao bì sản xuất) Chuyên Đề Y Tế Công Cộng Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Chứng dương bao gồm chủng Lactobacillus spp., L pentosus, L acidophilus, L fermentum, L plantarum, L bulgaricus, L rhamnosus, L sakei, L casei trình tự tổng hợp tetO, tetM, tetW, ermB, ermC cat Phương pháp nghiên cứu Tách chiết DNA vi khuẩn phương pháp đun sôi Dịch nuôi cấy vi khuẩn tăng sinh qua đêm môi trường canh thang MRS Hút 1mL dịch nuôi cấy tăng sinh vi khuẩn cho vào tube 1,5mL, ly tâm 10,000g/ phút/ 20 – 250C Sau ly tâm, đổ bỏ dịch rửa sinh khối 1mL NaCl 0,9% Vortex hỗn dịch ly tâm 10,000g/ 10 phút/ 20 – 250C Loại bỏ dịch huyền phù sinh khối 0,5mL TE 1X Đun sôi 950C/15 phút, đặt ống đá phút Ly tâm 10,000g/ phút/ 20 – 250C Chuyển 400µL dịch chứa DNA vi khuẩn sang tube 1,5mL DNA vi khuẩn sau tách chiết bảo quản -200C Nghiên cứu Y học Môi trường thạch CAMHA (Cationadjusted Mueller Hinton Agar – BD, Mỹ) bổ sung thêm 3% máu cừu dung dịch kháng sinh từ stock 10X Vi khuẩn cấy môi trường thạch MRS (De Man, Rogosa and Sharpe agar – Biokar, Pháp) qua 24h hòa vào 3mL dung dịch đệm đo độ đục ống Mc Farland 0,5 Tiếp tục pha lỗng để có đậm độ vi khuẩn khoảng 1,0 x 106 CFU/ml Hút 2µL huyền dịch (106 CFU/ml) cho vào ơ, theo sơ đồ chủng ghi sẵn hộp Sau cho huyền dịch lên đĩa thạch, chờ cho đĩa thạch khô (các giọt nước chân đường cấy thấm vào thạch, khoảng 15 – 20 phút), sau đĩa thạch ủ kị khí 370C/24 – 48h Kết MIC chủng biện luận theo tiêu chuẩn EUCAST (2019)(8) CLSI M45-A2 (2016)(5) Tiêu chuẩn kháng với erythromycin ≥ 8µg/ml (theo CLSI 2016), tetracycline chloramphenicol ≥ 8µg/ml (EUCAST 2019) Xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC – Xác định kiểu gen kháng kháng sinh vi Minimum Inhibitory concentration) khuẩn thuộc giống Lactobacillus spp kháng kháng sinh erythromycin, tetracycline phương pháp PCR chloramphenicol chủng vi khuẩn Sử dụng cặp mồi đặc hiệu để phát Lactobacillus spp diện nhóm gen kháng biết có Trong nhiều nghiên cứu giới cho liên quan đến loại kháng sinh erythromycin thấy Lactobacillus spp thường kháng với (ermA, ermB ermC), chloramphenicol (cat) erythromycin, chloramphenicol tetracycline tetracycline (tetK, tetL, tetM, tetO, tetS tetW) đặc biệt gen mã hóa cho tính kháng thường Thành phần phản ứng PCR (20 µL) bao nằm plasmid transposon(3,4,11,16,17,18) Vì thế, gồm µL mồi xi ngược (0,5 µM), 10 µL nghiên cứu này, tập trung vào 2X G2 Green Go Taq buffer (Promega, Mỹ) việc xác định MIC giống Lactobacillus 1µL DNA vi khuẩn (30 – 50ng) Sản phẩm PCR spp ba loại kháng sinh điện di gel agarose 2%, chạy điện Kiểu hình kháng kháng sinh giống 100V 35 phút; cuối cùng, gel Lactobacillus spp thử nghiệm dựa nhuộm với thuốc nhuộm Diamond Nucleic phương pháp xác định nồng độ ức chế tối thiểu Acid Dye (Promega, Mỹ) quan sát đèn kháng sinh (MIC) phương pháp pha UV (Bảng 1) loãng kháng sinh thạch sau: Bảng 1: Trình tự nucleotide số cặp mồi gen kháng kháng sinh Primer ermA_F ermA_R Trình tự Nucleotide 5’ – 3’ AAGCGGTAAACCCCTCTGA TTCGCAAATCCCTTCTCAAC Chuyên Đề Y Tế Công Cộng Sản phẩm PCR (bp) Nhiệt độ bắt cặp ( C) Tham khảo 190 57 C 19 485 Nghiên cứu Y học Primer ermB_F ermB_R ermC_F ermC_R tetK_F tetK_R tetL_R tetL_R tetM_F tetM_R tetO_F tetO_R tetS_F TetS_R tetW_F tetW_R cat_F cat_R Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Trình tự Nucleotide 5’ – 3’ TTTTGAAAGCCGTGCGTCT CTGTGGTATGGCGGGTAAGTT AATCGTCAATTCCTGCATGT TAATCGTGGAATACGGGTTTG CAATACCTACGATATCTA TTGAGCTGTCTTGGTTCA TGGTCCTATCTTCTACTCATTC TTCCGATTTCGGCAGTAC GGTGAACATCATAGACACGC CTTGTTCGAGTTCCAATGC AACTTAGGCATTCTGGCTCAC TCCCACTGTTCCATATCGTCA ATCAAGATATTAAGGAC TTCTCTATGTGGTAATC GAGAGCCTGCTATATGCCAGC GGGCGTATCCACAATGTTAAC GGATATGAAATTTATCCCTC CAATCATCTACCCTATGAAT KẾT QUẢ Xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) kháng sinh erythromycin, tetracycline chloramphenicol chủng vi khuẩn Lactobacillus spp Chúng thực thử nghiệm xác định MIC loại kháng sinh 164 chủng vi khuẩn Lactobacillus spp phân lập từ thực phẩm lên men thực phẩm bổ sung, kết khảo sát thể Hình Kết Hình cho thấy 164 chủng Lactobacillus spp phân lập từ mẫu khác nhau, tỷ lệ chủng kháng cao với tetracycline (>80%) chloramphenicol (>40%) Trong đó, chủng phân lập từ sữa chua có tỷ lệ kháng cao Sản phẩm PCR (bp) Nhiệt độ bắt cặp ( C) Tham khảo 202 14 299 19 352 14 385 20 20 401 55 C 515 573 10 168 13 486 50 C với tetracycline chloramphenicol 28/30 (93,3%) 30/30 (100%) Ngược lại, tỷ lệ chủng phân lập từ mẫu có tỷ lệ kháng thấp với erythromycin ( 64 µg/ml, chủng có tỷ lệ kháng với tetracycline nồng độ 64 µg/ml 105/164 (64%), có 17/164 (10,4%) chủng kháng chloramphenicol nồng độ 16 µg/ml Đặc biệt, 164 chủng Lactobacillus spp có 152 (92,7%) chủng cịn nhạy cảm với kháng sinh erythromycin Hình 1: Biểu đồ so sánh tỷ lệ phát kiểu hình kháng kháng sinh 164 chủng Lactobacillus spp phân lập từ mẫu thực phẩm khác 486 Chuyên Đề Y Tế Công Cộng Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Xác định kiểu gen kháng kháng sinh chủng vi khuẩn Lactobacillus spp kháng với erythromycin, tetracycline chloramphenicol Chúng thực thử nghiệm xác định kiểu gen kháng kháng sinh chủng Lactobacillus spp kháng với loại kháng sinh phương pháp khuếch đại PCR gen liên quan đến kháng với chloramphenicol (cat – gen Chloramphenicol Acetytransferase), erythromycin (ermA, ermB, ermC) tetracycline (tetM, tetO, tetS, tetW – gen mã hóa protein bảo vệ ribosome tetK, tetL – gen mã hóa protein bơm thải) Kết phân tích khảo sát kiểu gen đề kháng thể Bảng Bảng 2: Tần suất tỷ lệ kiểu gen kháng chủng có kiểu hình kháng với loại kháng sinh Loại kháng sinh tetK tetL tetM tetO Tetracycline tetS tetW ND Tổng ermA ermB ermC Erythromycin ND Tổng cat Chloramphenicol ND Tổng Tần suất (Tỷ lệ) Rau, Thực muối Sữa chua phẩm chua bổ sung (0%) (0%) (0%) (0%) (0%) (0%) (6,3%) (3,6%) (7,3%) (1,3%) (0%) (0%) (0%) (0%) (0%) (1,3%) (0%) (0%) 72(91,1%) 27(96,4%) 38 (92,7%) 79 28 41 (0%) (0%) (0%) (33,3%) (0%) (44,4%) (66,7%) (0%) (11,2%) (0%) (0%) (44,4%) (0%) (0%) (0%) (0%) (0%) (0%) 38 30 32 ND: không phát Theo kết Bảng cho thấy có 7/79 (8,9%) chủng kháng với tetracycline phân lập từ rau muối chua có mang gen kháng với tetracycline, tần suất xuất gen kháng tetM phổ biến 5/79 (6,3%), 1/79 (1,3%) mang gen tetO 1/79 (1,3%) mang gen tetW Mặt khác, chủng có mang gen tetM phân lập từ sữa chua thực phẩm bổ sung có tỷ lệ thấp 1/27 (3,6%) 3/41 (7,3%) Tuy nhiên, gen kháng Chuyên Đề Y Tế Công Cộng Nghiên cứu Y học tetracycline cịn lại khơng phát nghiên cứu Trong trường hợp gen kháng erythromycin, tỷ lệ gen ermB ermC (gen mã hóa cho enzyme methylase) xuất 1/3 (33,3%) 2/3 (66,7%) chủng có kiểu hình kháng với erythryomycin phân lập từ rau muối chua Trong đó, có chủng mang đồng thời gen ermB tetM, chủng mang gen ermC tetO, chủng mang đồng thời gen ermC tetW Tuy nhiên, không phát thấy chủng kháng với erythromycin mang gen ermA Ngoài ra, nghiên cứu khơng tìm thấy gen cat (mã hóa cho enzyme acetyltransferase chloramphenicol, chuyển chloramphenicol thành diacetyl chloramphenicol bất hoạt) 100 chủng kiểu kháng với chloramphenicol BÀN LUẬN Một số công bố giới Việt Nam tình hình kháng kháng sinh giống Lactobacillus spp phân lập từ nguồn mẫu khác cho biết xuất tình trạng kháng với nhiều loại kháng sinh Theo kết nghiên cứu Dương Nhật Linh cộng sự(7), mẫu rau lên men, sữa chua, kefir, phân su sữa mẹ cho thấy 4/19 chủng phân lập kháng với erythromycin Năm 2009, nhóm tác giả D Zonenschain(21) ghi nhận tính kháng erythromycin 30/60 (50%) chủng Lactobacillus spp phân lập từ xúc xích khơ lên men Ý Như vậy, kết nghiên cứu chúng tơi cho thấy có tương đồng tỷ lệ kháng erythromycin giống Lactobacillus spp với tác giả Dương Nhật Linh có khác biệt so với kết tác giả D Zonenschain Sự khác biệt phụ thuộc vào mẫu mà chủng vi khuẩn Lactobacillus spp phân lập Kết nghiên cứu chúng tơi có tỷ lệ kháng với chloramphenicol cao so với nghiên cứu Anja S Hummel cộng (2007)(12) (6,7% chủng vi khuẩn probiotic khởi đầu kháng với chloramphenicol) Theo nghiên cứu Nguyễn Phước Hiền(15) báo cáo 487 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 có 3/6 (50%) chủng vi khuẩn phân lập từ chế phẩm sinh học có biểu kháng với tetracycline nồng độ 64 mg/l Như vậy, thấy kết nghiên cứu chúng tơi có tương đồng tỷ lệ phần trăm chủng kháng với tetracycline nồng độ 64µg/ml Từ kết thu nghiên cứu này, chúng tơi nhận thấy có gia tăng tình trạng kháng tetracycline chloramphenicol vi khuẩn Lactobacillus phân lập mẫu thực phẩm lên men thực phẩm bổ sung, từ đưa cảnh báo việc sử dụng thực phẩm bổ sung nói riêng sử dụng thuốc kháng sinh điều trị nói chung; nhiên, cần thêm chứng khoa học xác thực để chứng minh điều Theo nghiên cứu công bố giới, đa số kiểu hình kháng tetracycline Lactobacillus chủ yếu qui định gen tetM, tetO, tetS, tetW – gen mã hóa protein bảo vệ ribosome tetK, tetL – gen mã hóa protein bơm thải(2,3) Kết phân tích chúng tơi có tỷ lệ mang gen kháng tetracycline thấp nghiên cứu Marta Dec cộng (2017)(6) 45% chủng Lactobacillus spp phân lập từ gà mang gen tetW, 26% mang gen tetM 24% mang gen tetL Sự khác biệt số lượng chủng vi khuẩn phân lập từ mẫu khác Các yếu tố định tính kháng erythromycin (ermA, ermB ermC) vi khuẩn Lactobacillus nghiên cứu công bố(4,5,6) Theo kết nghiên cứu Zonenschain cộng (2009)(21) gen ermB ermC tìm thấy chủng kháng erythromycin phân lập từ salami 17/20 2/20 chủng, nghiên cứu cho thấy phát có 27 chủng mang đa gen kháng, 59% có mặt gen erm tet Nghiên cứu cho kết tương đồng so với nghiên cứu nhóm nghiên cứu Anja S Hummel (2007)(12) việc khơng tìm thấy gen cat liên quan đến kháng chloramphenicol chủng Lactobacillus spp phân lập từ loại thực phẩm lên men sản phẩm probiotic thương mại 488 Ngồi gen cat mã hóa enzyme acetyltransferase chloramphenicol gen kháng chloramphenicol cịn bao gồm gen cmlA, floR, flexA, cfr fexB; nhiên nghiên cứu chúng tôi, tập trung vào gen cat, nên khả khơng tìm thấy gen cat tìm thấy gen cịn lại KẾT LUẬN Từ kết nghiên cứu 164 chủng Lactobacillus spp phân lập từ rau muối chua, sữa chua thực phẩm bổ sung TP HCM, kết luận rằng: Kiểu hình đề kháng kháng sinh: tỷ lệ chủng kháng cao với tetracycline (> 80%) chloramphenicol (> 40%), chủng phân lập từ sữa chua cho tỷ lệ kháng cao (> 90%) Đặc biệt 100% chủng Lactobacillus spp phân lập từ sữa chua nhạy cảm với erythromycin Kết nghiên cứu đưa cảnh báo tình trạng sử dụng kháng sinh tetracycline chloramphenicol điều trị nhiễm trùng Kiểu gen đề kháng kháng sinh: gen tetM gen ermB có tần suất phát cao so so với gen kháng tetracycline erythromycin khác 17,2% 77,7% Trong đó, 6,3% chủng mang gen tetM chủ yếu phân lập từ rau muối chua 44,4% chủng mang gen ermB phân lập chủ yếu từ thực phẩm bổ sung Mặt khác, khơng có chủng Lactobacillus spp mang gen cat liên quan đến biểu kháng với chloramphenicol TÀI LIỆU THAM KHẢO Aarestrup FM, Agerso Y, Gerner-Smidt P, Madsen M & Jensen LB (2000) Comparison of antimicrobial resistance phenotypes and resistance genes in Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium from humans in the community, broilers, and pigs in Denmark Diagn Microbiol Infect Dis, 37:127–137 Bernardeau M, Guguen M & Vernoux JP (2006) Beneficial lactobacilli in food and feed: Long-term use, biodiversity and proposals for specific and realistic safety assessments FEMS Microbiol Rev, 30:487–513 Chopra I & Roberts M (2001) Tetracycline Antibiotics : Mode of Action , Applications , Molecular Biology , and Epidemiology of Bacterial Resistance Tetracycline Antibiotics : Mode of Action, Applications, Molecular Biology, and Epidemiology of Bacterial Resistance Microbiol Mol Biol Rev, 65:232–260 Chuyên Đề Y Tế Công Cộng Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 10 11 12 13 14 Clewell DB, Flannagan SE, Jaworski DD & Clewell DB (1995) Unconstrained bacterial promiscuity: the Tn916-Tn1545 family of conjugative transposons Trends Microbiol, 3:229–236 CLSI (2016) M45-A2 Methods for Antimicrobial Dilution and Disk Susceptibility Testing of Infrequently Isolated or Fastidious Bacteria ; Proposed Guideline Guidelines CLSI, pp.35 Dec M, Urban-Chmiel R, Stȩpień-Pyśniak D & Wernicki A (2017) Assessment of antibiotic susceptibility in Lactobacillus isolates from chickens Gut Pathog, 9:1–16 Dương Nhật Linh, Nguyễn Văn Minh, et al (2011) Phân lập sàng lọc số vi khuẩn Lactic có tiềm làm probiotic Y Học TP Hồ Chí Minh, pp.182–188 European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (2019) Clinical breakpoints EUCAST, pp.0–99 Ge B, et al (2007) Identification and Antimicrobial Susceptibility of Lactic Acid Bacteria from Retail Fermented Foods J Food Prot, 70:2606–2612 Gevers D, et al (2000) Isolation and identification of tetracycline resistant lactic acid bacteria from pre-packed sliced meat products Syst Appl Microbiol, 23:279–284 Gyles C & Boerlin P (2014) Horizontally Transferred Genetic Elements and Their Role in Pathogenesis of Bacterial Disease Vet Pathol, 51:328–340 Hummel AS, Hertel C, Holzapfel WH & Franz CM (2007) Antibiotic resistances of starter and probiotic strains of lactic acid bacteria Appl Environ Microbiol, 73:730–739 Kastner S, et al (2006) Antibiotic susceptibility patterns and resistance genes of starter cultures and probiotic bacteria used in food Syst Appl Microbiol, 29:145–155 Klare I, et al (2007) Antimicrobial susceptibilities of Lactobacillus, Pediococcus and Lactococcus human isolates and cultures intended for probiotic or nutritional use J Antimicrob Chemother, 59:900–912 Chuyên Đề Y Tế Công Cộng Nghiên cứu Y học 15 Nguyễn Phước Hiền, Lê Diệp Thúy, et al (2016) Khảo sát khả chống chịu điều kiện pH thấp kháng thuốc kháng sinh hệ vi khuẩn acid lactic phân lập từ sữa dê chế phẩm sinh học Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ, pp.46-51 16 Perreten V, et al (1997) Antibiotic resistance spread in food Nature, 389:801–2 17 Salih MA, Abdalla AM & Masri MAR (2014) Detection of Erythromycin Resistance Genes erm(A), erm(B), erm (C) and msr(A) in Staphylococcus Nasal carriers in Khartoum State Nat Sci, 40:159–168 18 Skurray RA, et al (1988) Structural relationships among chloramphenicol-resistance plasmids of Staphylococcus aureus FEMS Microbiology Letters, 51:205–210 19 Strommenger B, Kettlitz C & Werner G (2003) Multiplex PCR assay for simultaneous detection of nine clinically relevant antibiotic resistance genes in Staphylococcus aureus J Clin Microbiol, 41:4089–4094 20 Werner G, Willems R, Hildebrandt B, Witte W & Klare I (2003) Influence of Transferable Genetic Determinants on the Outcome of Typing Methods Commonly Used for Enterococcus faecium Influence of Transferable Genetic Determinants on the Outcome of Typing Methods Commonly Used for Enterococcus faecium J Clin Microbiol, 41:1499–1506 21 Zonenschain D, Rebecchi A & Morelli L (2009) Erythromycinand tetracycline-resistant lactobacilli in Italian fermented dry sausages J Appl Microbiol, 107:1559–1568 Ngày nhận báo: 15/08/2019 Ngày phản biện nhận xét báo: 31/08/2019 Ngày báo đăng: 15/10/2019 489 ... liệu khả đề kháng kháng sinh giống lợi khuẩn Lactobacillus spp, thực khảo sát mức độ đề kháng kháng sinh gen đề kháng kháng sinh chủng thực phẩm lên men thực phẩm bổ sung thành phố Hồ Chí Minh. .. trạng kháng tetracycline chloramphenicol vi khuẩn Lactobacillus phân lập mẫu thực phẩm lên men thực phẩm bổ sung, từ đưa cảnh báo việc sử dụng thực phẩm bổ sung nói riêng sử dụng thuốc kháng sinh. .. khuẩn gây bệnh Tại Việt Nam, thực phẩm lên men thực phẩm bổ sung sử dụng từ lâu đời lợi ích mà mang tới, nhiên, nghiên cứu khả kháng kháng sinh giống 484 Lactobacillus spp sản phẩm cịn hạn chế