ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư biểu mô tế bào gan (gọi tắt là ung thư tế bào gan - UTTBG) đại diện cho hơn 90% ung thư gan nguyên phát, là một vấn đề lớn về sức khỏe toàn cầu. Ung thư gan có tỷ lệ mắc đứng hàng thứ 6, tỷ lệ tử vong cao thứ 4 trong các loại ung thư phổ biến trên thế giới [1]. Theo thống kê của Globocan 2018, UTTBG là loại ung thư đứng hàng đầu về tỷ lệ mắc và tỷ lệ tử vong ở Việt Nam, nhiều nghiên cứu trong nước cho thấy trên 80% bệnh nhân UTTBG có liên quan đến tình trạng nhiễm vi rút viêm gan B (HBV) [2], [3]. Phần lớn bệnh nhân UTTBG khi được phát hiện đã ở giai đoạn muộn, bệnh nhân không còn cơ hội điều trị phẫu thuật hay áp dụng các phương pháp trị liệu tích cực khác. Việc xác định được UTTBG ở giai đoạn sớm, khi khối u còn nhỏ có thể tiến hành phẫu thuật cắt bỏ khối u gan là một trong những sự lựa chọn hàng đầu đem lại hiệu quả tốt nhất [4]. Một chiến lược sàng lọc tốt sẽ giúp chẩn đoán sớm UTTBG, trong đó thường khuyến cáo phối hợp siêu âm bụng với Apha fetoprotein (AFP). Bên cạnh AFP cổ điển, một số dấu ấn sinh học khác cũng được nghiên cứu áp dụng như Alpha fetoprotein-L3 (AFP-L3), Des - γ - carboxyprothrombin (DCP)… tuy nhiên độ nhạy độ đặc hiệu của các dấu ấn này trong chẩn đoán, nhất là chẩn đoán sớm UTTBG vẫn còn hạn chế. Các nghiên cứu cho thấy 40% bệnh nhân UTTBG có AFP trong giới hạn bình thường, trên 23% UTTBG hoàn toàn không biến đổi về cả 3 dấu ấn AFP, AFP-L3 và DCP [5]. Do đó, việc tìm kiếm thêm các dấu ấn sinh học mới có giá trị trong sàng lọc và chẩn đoán UTTBG là hết sức cần thiết. MicroRNA (miRNA) là RNA nội sinh kích thước nhỏ, không mã hóa protein. MiRNA có vai trò then chốt trong điều hòa biểu hiện gen giai đoạn sau phiên mã, sửa đổi histone và methyl hóa promoter của gen [6]. Các miRNA đóng vai trò quan trọng trong các quá trình sinh lý cũng như bệnh lý của tế bào như điều hòa sự tăng sinh, biệt hóa, hay quá trình chết tế bào theo chương trình [7]. Các miRNA biểu hiện trong mô của từng cơ quan cụ thể, phân tích biểu hiện miRNA trong mô gan đã phát hiện miRNA có liên quan đến các giai đoạn khác nhau của bệnh lý gan, đặc biệt có liên quan đến tình trạng nhiễm HBV và UTTBG [8]. Ngoài biểu hiện trong mô miRNA còn lưu hành trong máu ngoại vi, miRNA từ mô gan có thể vào máu ngoại vi thụ động qua sự chết tế bào theo chương trình, hoại tử, hoặc thông qua các exosomes. Các miRNA được nhận thấy khá bền vững ở nhiệt độ phòng hay nhiệt độ âm trong điều kiện lưu trữ. Với các đặc tính đó miRNA trở thành một lựa chọn tối ưu cho khuynh hướng sử dụng như một chỉ dấu sinh học hữu ích đối với bệnh lý ung thư. Các nghiên cứu gần đây chỉ ra miR-21, miR-122 có nguồn gốc từ tế bào khối u gan và có biểu hiện tăng cao ở huyết tương bệnh nhân UTTBG ngay cả ở các trường hợp UTTBG giai đoạn sớm [9], [10]. Mức độ biểu hiện miR-21, miR-122 huyết tương được chứng minh có giá trị trong chẩn đoán, tiên lượng và đánh giá đáp ứng điều trị đối với UTTBG [11], [12], [13]. Ở Việt Nam, hiện chưa có nghiên cứu đánh giá biểu hiện của miRNA huyết tương ở bệnh nhân UTTBG nhiễm vi rút viêm gan B. Chính vì vậy, chúng tôi tiến hành đề tài: “Nghiên cứu biểu hiện microRNA-21, microRNA-122 huyết tương ở bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan nhiễm vi rút viêm gan B” với hai mục tiêu sau. 1. Đánh giá mức độ biểu hiện microRNA-21, microRNA-122 huyết tương ở bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan nhiễm vi rút viêm gan B. 2. Phân tích mối liên quan giữa microRNA-21, microRNA-122 huyết tương với một số chỉ số lâm sàng, cận lâm sàng và giai đoạn bệnh ở bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan nhiễm vi rút viêm gan B.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO HỌC VIỆN QUÂN Y ĐẶNG CHIỀU DƯƠNG NGHIÊN CỨU BIỂU HIỆN MICRORNA-21, MICRORNA-122 HUYẾT TƯƠNG Ở BỆNH NHÂN UNG THƯ BIỂU MÔ TẾ BÀO GAN NHIỄM VI RÚT VIÊM GAN B LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI - 2020 MỤC LỤC Trang TRANG PHỤ BÌA LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG DANH MỤC BIỂU ĐỒ DANH MỤC HÌNH DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT STT Phần viết tắt 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 AASLD American Association for the Study of Liver AFB1 AFP AFP-L3 ALT APASL Diseases (Hội nghiên cứu bệnh gan Hoa Kỳ) Aflatoxin B1 Alpha fetoprotein Alpha fetoprotein-L3 Alanin amino transferase Asian Pacific Association for the Study of the liver AST AUC BCLC (Hội nghiên cứu gan Châu Á Thái Bình Dương) Aspartate amino transferase Area under the curve (Diện tích đường cong) Barcelona clinic liver cancer (Viện ung thư lâm BN BV TƯQĐ 108 CHT CLVT CI Ct DCP DNA ĐTNC EASL sàng gan Barcelona) Bệnh nhân Bệnh viện Trung ương Quân đội 108 Cộng hưởng từ Cắt lớp vi tính Confidence interval (khoảng tin cậy) Cycle threshold (Chu kỳ ngưỡng) Des - γ - carboxyprothrombin Deoxyribonucleic acid Đối tượng nghiên cứu European Association for the Study of the Liver ELISA (Hội nghiên cứu Gan Châu Âu) Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay STT Phần viết tắt 21 22 23 24 25 26 Phần viết đầy đủ Phần viết đầy đủ HBV HBeAg Hepatitis B virus (Vi rút viêm gan B) Hepatitis B e Antigen (Kháng nguyên e vi rút HBsAg viêm gan B Hepatitis B surface antigen (Kháng nguyên bề mặt HCV HIV IgM vi rút viêm gan B) Hepatitis C virus (Vi rút viêm gan C) Human Immunodeficiency Virus Immunoglobulin M 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 mRNA miRNA miR-21 miR-122 NKM NSAIDs Messenger RNA (RNA thông tin) MicroRNA MicroRNA-21 MicroRNA-122 Người khỏe mạnh Nonsteroidal anti-inflammatory drugs (Thuốc PET/CT chống viêm không steroid) Positron emission tomography/Computed RNA RT-PCR TMC TNF UTTBG VGBM Tomography Ribonucleic acid Reverse transcription polymerase chain reaction Tĩnh mạch cửa Tumor necrosis factor (Yếu tố hoại tử u) Ung thư biểu mô tế bào gan Viêm gan B mạn DANH MỤC BẢNG Bảng Tên bảng Trang DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ Tên biểu đồ Trang DANH MỤC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư biểu mô tế bào gan (gọi tắt ung thư tế bào gan - UTTBG) đại diện cho 90% ung thư gan nguyên phát, vấn đề lớn sức khỏe toàn cầu Ung thư gan có tỷ lệ mắc đứng hàng thứ 6, tỷ lệ tử vong cao thứ loại ung thư phổ biến giới [1] Theo thống kê Globocan 2018, UTTBG loại ung thư đứng hàng đầu tỷ lệ mắc tỷ lệ tử vong Việt Nam, nhiều nghiên cứu nước cho thấy 80% bệnh nhân UTTBG có liên quan đến tình trạng nhiễm vi rút viêm gan B (HBV) [2], [3] Phần lớn bệnh nhân UTTBG phát giai đoạn muộn, bệnh nhân khơng cịn hội điều trị phẫu thuật hay áp dụng phương pháp trị liệu tích cực khác Việc xác định UTTBG giai đoạn sớm, khối u nhỏ tiến hành phẫu thuật cắt bỏ khối u gan lựa chọn hàng đầu đem lại hiệu tốt [4] Một chiến lược sàng lọc tốt giúp chẩn đoán sớm UTTBG, thường khuyến cáo phối hợp siêu âm bụng với Apha fetoprotein (AFP) Bên cạnh AFP cổ điển, số dấu ấn sinh học khác nghiên cứu áp dụng Alpha fetoprotein-L3 (AFP-L3), Des - γ - carboxyprothrombin (DCP)… nhiên độ nhạy độ đặc hiệu dấu ấn chẩn đoán, chẩn đoán sớm UTTBG hạn chế Các nghiên cứu cho thấy 40% bệnh nhân UTTBG có AFP giới hạn bình thường, 23% UTTBG hồn tồn khơng biến đổi dấu ấn AFP, AFP-L3 DCP [5] Do đó, việc tìm kiếm thêm dấu ấn sinh học có giá trị sàng lọc chẩn đoán UTTBG cần thiết MicroRNA (miRNA) RNA nội sinh kích thước nhỏ, khơng mã hóa protein MiRNA có vai trị then chốt điều hịa biểu gen giai đoạn sau phiên mã, sửa đổi histone methyl hóa promoter gen [6] Các miRNA đóng vai trị quan trọng q trình sinh lý bệnh lý tế bào điều hịa tăng sinh, biệt hóa, hay q trình chết tế bào theo chương trình [7] Các miRNA biểu mơ quan cụ thể, phân tích biểu miRNA mô gan phát miRNA có liên quan đến giai đoạn khác bệnh lý gan, đặc biệt có liên quan đến tình trạng nhiễm HBV UTTBG [8] Ngoài biểu mơ miRNA cịn lưu hành máu ngoại vi, miRNA từ mơ gan vào máu ngoại vi thụ động qua chết tế bào theo chương trình, hoại tử, thông qua exosomes Các miRNA nhận thấy bền vững nhiệt độ phòng hay nhiệt độ âm điều kiện lưu trữ Với đặc tính miRNA trở thành lựa chọn tối ưu cho khuynh hướng sử dụng dấu sinh học hữu ích bệnh lý ung thư Các nghiên cứu gần miR-21, miR-122 có nguồn gốc từ tế bào khối u gan có biểu tăng cao huyết tương bệnh nhân UTTBG trường hợp UTTBG giai đoạn sớm [9], [10] Mức độ biểu miR-21, miR-122 huyết tương chứng minh có giá trị chẩn đốn, tiên lượng đánh giá đáp ứng điều trị UTTBG [11], [12], [13] Ở Việt Nam, chưa có nghiên cứu đánh giá biểu miRNA huyết tương bệnh nhân UTTBG nhiễm vi rút viêm gan B Chính vậy, chúng tơi tiến hành đề tài: “Nghiên cứu biểu microRNA-21, microRNA-122 huyết tương bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan nhiễm vi rút viêm gan B” với hai mục tiêu sau Đánh giá mức độ biểu microRNA-21, microRNA-122 huyết tương bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan nhiễm vi rút viêm gan B Phân tích mối liên quan microRNA-21, microRNA-122 huyết tương với số số lâm sàng, cận lâm sàng giai đoạn bệnh bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan nhiễm vi rút viêm gan B 10 CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 MỘT SỐ ĐIỂM VỀ DỊCH TỄ UNG THƯ BIỂU MÔ TẾ BÀO GAN 1.1.1 Trên giới Theo đánh giá Tổ chức Y tế giới, UTTBG loại ung thư phổ biến, liên tục gia tăng thập kỷ gần Tỷ lệ mắc tỷ lệ tử vong khác vùng lãnh thổ, giới tính đặc biệt khác liên quan đến tỷ lệ yếu tố nguy Trong năm 1983-2007, tỷ lệ mắc UTTBG tăng liên tiếp hầu châu Âu, Ấn Độ, châu Đại Dương, Bắc Nam Mỹ Ngược lại, tỷ lệ mắc giảm số nước châu Á, Tây Ban Nha Ý Tỷ lệ mắc giảm nhận thấy rõ Trung Quốc, từ quốc gia đứng hàng đầu xuống vị trí thứ với 22,3/100.000 Hiện trạng giải thích giảm yếu tố nguy nhiễm aflatoxin HBV [3] Hiện nay, ung thư gan đứng hàng thứ ung thư có tỷ lệ mắc cao nhất, số mắc lên đến 854.000 người (chiếm % tổng số loại ung thư) Tỷ lệ mắc UTTBG tăng dần theo tuổi, tỷ lệ mắc cao ghi nhận độ tuổi 70 [14] Tỷ lệ mắc nam cao nữ dao động từ 2-5 lần Ngồi khác biệt giới tính, chênh lệch chủng tộc bên quần thể đa sắc tộc đáng ý Tại Hoa Kỳ năm 2006 2010, người gốc châu Á, Thái Bình Dương có tỷ lệ mắc cao mức 11,7/100.000, người gốc Tây Ban Nha 9,5/100.000, người da đen 7,5/100.000 cuối người da trắng 4,2/100.000 Tỷ lệ ung thư gan dân tộc thay đổi tùy theo vị trí địa lý, tỷ lệ mắc quần thể người Trung Quốc bên Trung Quốc thấp so với quần thể người sống Trung Quốc [3] Ung thư gan có tỷ lệ tử vong đứng hàng thứ (chỉ sau ung thư phổi), ước tính có khoảng 810.000 người tử vong năm, chiếm 9,1% số 35 Khien V.V., Mao H.V., Chinh T.T., et al (2001) Clinical evaluation of lentil lectin-reactive alpha-fetoprotein-L3 in histology-proven hepatocellular carcinoma Int J Biol Markers, 16(2): 105-11 36 Sterling R.K., Jeffers L., Gordon F., et al (2009) Utility of Lens culinaris agglutinin-reactive fraction of alpha-fetoprotein and desgamma-carboxy prothrombin, alone or in combination, as biomarkers for hepatocellular carcinoma Clin Gastroenterol Hepatol, 7(1): 104-13 37 European Association for the Study of the Liver, European Organisation for Research and Treatment of Cancer (2012) EASL–EORTC Clinical Practice Guidelines: Management of hepatocellular carcinoma Journal of Hepatology 56j: 908–943 38 Hayes C.N., Chayama K (2016) MicroRNAs as Biomarkers for Liver Disease and Hepatocellular Carcinoma Int J Mol Sci, 17(3): 1-17 39 Zhao Y.J., Ju Q., Li G.C (2013) Tumor markers for hepatocellular carcinoma Mol Clin Oncol, 1(4): 593-598 40 Lee R.C., Feinbaum R.L., Ambros V (1993) The C elegans heterochronic gene lin-4 encodes small RNAs with antisense complementarity to lin-14 Cell, 75(5): 843-54 41 Reinhart B.J., Slack F.J., Basson M., et al (2000) The 21-nucleotide let7 RNA regulates developmental timing in Caenorhabditis elegans Nature, 403(6772): 901-6 42 Kozomara A., Griffiths-Jones S (2013) miRBase: annotating high confidence microRNAs using deep sequencing data Nucl Acids Res, (42): 68-73 43 Lai E.C (2015) Two decades of miRNA biology: lessons and challenges RNA, 21(4): 675-7 44 Lee I., Ajay S.S., Yook J.I., et al (2009) New class of microRNA targets containing simultaneous 5'-UTR and 3'-UTR interaction sites Genome Res, 19(7): 1175-83 45 Wang H., Hou L., Li A., et al (2014) Expression of serum exosomal microRNA-21 in human hepatocellular carcinoma Biomed Res Int, 2014: 15 46 Rissin D.M., Lopez-Longarela B., Pernagallo S., et al (2017) Polymerase-free measurement of microRNA-122 with single base specificity using single molecule arrays: Detection of drug-induced liver injury PLoS One, 12(7): e0179669 47 Thirion M., Ochiya T (2013) Roles of microRNAs in the hepatitis B virus infection and related diseases Viruses, 5(11): 2690-703 48 Mahmoudian-Sani M.R., Asgharzade S., Alghasi A., et al (2019) MicroRNA-122 in patients with hepatitis B and hepatitis B virusassociated hepatocellular carcinoma J Gastrointest Oncol, 10(4): 789796 49 Zhang G., Wang Q., Xu R (2010) Therapeutics Based on microRNA: A New Approach for Liver Cancer Curr Genomics, 11(5): 311-25 50 Hayes C.N., Akamatsu S., Tsuge M., et al (2012) Hepatitis B virusspecific miRNAs and Argonaute2 play a role in the viral life cycle PLoS One, 7(10): e47490 51 Shwetha S., Gouthamchandra K., Chandra M., et al (2013) Circulating miRNA profile in HCV infected serum: novel insight into pathogenesis Sci Rep, 3: 1-7 52 Novellino L., Rossi R.L., Bonino F., et al (2012) Circulating hepatitis B surface antigen particles carry hepatocellular microRNAs PLoS One, 7(3): e31952 53 Liu A.M., Yao T.J., Wang W., et al (2012) Circulating miR-15b and miR-130b in serum as potential markers for detecting hepatocellular carcinoma: a retrospective cohort study BMJ Open, 2(2): e000825 54 Cortez M.A., Bueso-Ramos C., Ferdin J., et al (2011) MicroRNAs in body fluids the mix of hormones and biomarkers Nat Rev Clin Oncol, 8(8): 467-77 55 Lawrie C.H., Gal S., Dunlop H.M., et al (2008) Detection of elevated levels of tumour-associated microRNAs in serum of patients with diffuse large B-cell lymphoma Br J Haematol, 141(5): 672-5 56 Varkonyi-Gasic E., Wu R., Wood M., et al (2007) Protocol: a highly sensitive RT-PCR method for detection and quantification of microRNAs Plant Methods, 3: 12 57 Bustin S.A., Benes V., Garson J.A., et al (2009) The MIQE guidelines: minimum information for publication of quantitative real-time PCR experiments Clin Chem, 55(4): 611-22 58 Peltier H.J., Latham G.J (2008) Normalization of microRNA expression levels in quantitative RT-PCR assays: identification of suitable reference RNA targets in normal and cancerous human solid tissues RNA, 14(5): 84452 59 Xu X., Tao Y., Shan L., et al (2018) The Role of MicroRNAs in Hepatocellular Carcinoma J Cancer, 9(19): 3557-3569 60 Zhou L., Yang Z.X., Song W.J., et al (2013) MicroRNA-21 regulates the migration and invasion of a stem-like population in hepatocellular carcinoma Int J Oncol, 43(2): 661-9 61 Karakatsanis A., Papaconstantinou I., Gazouli M., et al (2013) Expression of microRNAs, miR-21, miR-31, miR-122, miR-145, miR146a, miR-200c, miR-221, miR-222, and miR-223 in patients with hepatocellular carcinoma or intrahepatic cholangiocarcinoma and its prognostic significance Mol Carcinog, 52(4): 297-303 62 Lee Y., Ahn C., Han J., et al (2003) The nuclear RNase III Drosha initiates microRNA processing Nature, 425(6956): 415-9 63 Zeng Y., Yi R., Cullen B.R (2005) Recognition and cleavage of primary microRNA precursors by the nuclear processing enzyme Drosha EMBO J, 24(1): 138-48 64 Bao L., Yan Y., Xu C., et al (2013) MicroRNA-21 suppresses PTEN and hSulf-1 expression and promotes hepatocellular carcinoma progression through AKT/ERK pathways Cancer Lett, 337(2): 226-36 65 Zhu Q., Wang Z., Hu Y., et al (2012) miR-21 promotes migration and invasion by the miR-21-PDCD4-AP-1 feedback loop in human hepatocellular carcinoma Oncol Rep, 27(5): 1660-8 66 Yoon J.S., Kim G., Lee Y.R., et al (2018) Clinical significance of microRNA-21 expression in disease progression of patients with hepatocellular carcinoma Biomark Med, 12(10): 1105-1114 67 Xu G., Zhang Y., Wei J., et al (2013) MicroRNA-21 promotes hepatocellular carcinoma HepG2 cell proliferation through repression of mitogen-activated protein kinase-kinase BMC Cancer, 13: 1-9 68 Suehiro T., Miyaaki H., Kanda Y., et al (2018) Serum exosomal microRNA-122 and microRNA-21 as predictive biomarkers in transarterial chemoembolization-treated hepatocellular carcinoma patients Oncol Lett, 16(3): 3267-3273 69 Tomimaru Y., Eguchi H., Nagano H., et al (2010) MicroRNA-21 induces resistance to the anti-tumour effect of interferon-alpha/5fluorouracil in hepatocellular carcinoma cells Br J Cancer, 103(10): 1617-26 70 Lagos-Quintana M., Rauhut R., Yalcin A., et al (2002) Identification of tissue-specific microRNAs from mouse Curr Biol, 12(9): 735-9 71 Wienholds E., Kloosterman W.P., Miska E., et al (2005) MicroRNA expression in zebrafish embryonic development Science, 309(5732): 3101 72 Fan C.G., Wang C.M., Tian C., et al (2011) miR-122 inhibits viral replication and cell proliferation in hepatitis B virus-related hepatocellular carcinoma and targets NDRG3 Oncol Rep, 26(5): 1281-6 73 Bai S., Nasser M.W., Wang B., et al (2009) MicroRNA-122 inhibits tumorigenic properties of hepatocellular carcinoma cells and sensitizes these cells to sorafenib J Biol Chem, 284(46): 32015-27 74 Fornari F., Gramantieri L., Giovannini C., et al (2009) MiR-122/cyclin G1 interaction modulates p53 activity and affects doxorubicin sensitivity of human hepatocarcinoma cells Cancer Res, 69(14): 5761-7 75 Lucanic M., Graham J., Scott G., et al (2013) Age-related micro-RNA abundance in individual C elegans Aging (Albany NY), 5(6): 394-411 76 Rieger J.K., Klein K., Winter S., et al (2013) Expression variability of absorption, distribution, metabolism, excretion-related microRNAs in human liver: influence of nongenetic factors and association with gene expression Drug Metab Dispos, 41(10): 1752-62 77 Bihrer V., Friedrich-Rust M., Kronenberger B., et al (2011) Serum miR122 as a biomarker of necroinflammation in patients with chronic hepatitis C virus infection Am J Gastroenterol, 106(9): 1663-9 78 Wang X., Zhang J., Zhou L., et al (2015) Significance of serum microRNA-21 in diagnosis of hepatocellular carcinoma (HCC): clinical analyses of patients and an HCC rat model Int J Clin Exp Pathol, 8(2): 1466-78 79 Qiao D.D., Yang J., Lei X.F., et al (2017) Expression of microRNA-122 and microRNA-22 in HBV-related liver cancer and the correlation with clinical features Eur Rev Med Pharmacol Sci, 21(4): 742-747 80 Meng F., Henson R., Wehbe-Janek H., et al (2007) MicroRNA-21 regulates expression of the PTEN tumor suppressor gene in human hepatocellular cancer Gastroenterology, 133(2): 647-58 81 Huang J.T., Liu S.M., Ma H., et al (2016) Systematic Review and MetaAnalysis: Circulating miRNAs for Diagnosis of Hepatocellular Carcinoma J Cell Physiol, 231(2): 328-35 82 Zhou J., Yu L., Gao X., et al (2011) Plasma microRNA panel to diagnose hepatitis B virus-related hepatocellular carcinoma J Clin Oncol, 29(36): 4781-8 83 Bharali D., Banerjee B.D., Bharadwaj M., et al (2019) Expression Analysis of MicroRNA-21 and MicroRNA-122 in Hepatocellular Carcinoma J Clin Exp Hepatol, 9(3): 294-301 84 Bộ Y tế (2014) Hướng dẫn chẩn đoán điều trị bệnh viêm gan vi rút B, Ban hành kèm theo Quyết định số: 5448/QĐ-BYT ngày 30 tháng 12 năm 2014 Bộ trưởng Bộ Y tế 85 Bộ Y tế (2017) Siêu âm can thiệp - Sinh thiết nhu mô gan tổn thương u gan súng Promag Hướng dẫn quy trình kỹ thuật nội khoa, chuyên ngành tiêu hóa, Nhà xuất Y học, 265-266 86 Bộ Y tế (2017) Siêu âm can thiệp - Chọc hút tế bào khối U gan, tụy, khối u ổ bụng kim nhỏ Hướng dẫn quy trình kỹ thuật nội khoa, chuyên ngành tiêu hóa, Nhà xuất Y học, 242-244 87 Lardizabal M.N., Nocito A.L., Daniele S.M., et al (2012) Reference genes for real-time PCR quantification of microRNAs and messenger RNAs in rat models of hepatotoxicity PLoS One, 7(5): e36323 88 Matouskova P., Bartikova H., Bousova I., et al (2014) Reference genes for real-time PCR quantification of messenger RNAs and microRNAs in mouse model of obesity PLoS One, 9(1): e86033 89 Livak K.J., Schmittgen T.D (2001) Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2(-Delta Delta C(T)) Method Methods, 25(4): 402-8 90 Zhu Z (2016) Milan criteria and its expansions in liver transplantation for hepatocellular carcinoma Hepatobiliary Surg Nutr, 5(6): 498-502 91 Okafor O., Ojo S (2004) A comparative analysis of six current histological classification schemes and scoring systems used in chronic hepatitis reporting Rev Esp Patol, 37(3): 269-277 92 Nguyễn Thị Vân Hồng (2015) Các bảng điểm ứng dụng thực hành tiêu hóa, Nhà xuất Y học 93 Nguyễn Tiến Thịnh (2011) Nghiên cứu hiệu điều trị ung thư biểu mô tế bào gan phương pháp tắc mạch hóa dầu đơn tắc mạch hóa dầu kết hợp với đốt nhiệt sóng cao tần, Luận án Tiến sĩ Y học, Viện Nghiên cứu khoa học Y Dược lâm sàng 108 94 Thái Doãn Kỳ (2015) Nghiên cứu kết điều trị ung thư biểu mô tế bào gan phương pháp tắc mạch hóa chất sử dụng hạt vi cầu DC BEADS, Luận án Tiến sĩ Y học, Viện Nghiên cứu khoa học Y Dược lâm sàng 108 95 El-Serag H.B., Mason A.C (1999) Rising incidence of hepatocellular carcinoma in the United States N Engl J Med, 340(10): 745-50 96 Webb G.J., Wright K.V., Harrod E.C., et al (2015) Surveillance for hepatocellular carcinoma in a mixed-aetiology UK cohort with cirrhosis: does alpha-fetoprotein still have a role? Clin Med (Lond), 15(2): 139-44 97 Tanaka H., Imai Y., Hiramatsu N., et al (2008) Declining incidence of hepatocellular carcinoma in Osaka, Japan, from 1990 to 2003 Ann Intern Med, 148(11): 820-6 98 Lu S.N., Su W.W., Yang S.S., et al (2006) Secular trends and geographic variations of hepatitis B virus and hepatitis C virusassociated hepatocellular carcinoma in Taiwan Int J Cancer, 119(8): 1946-52 99 Trần Hà Hiếu (2012) Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng, độ biệt hóa tế bào u đột biến gene HBx bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan nhiễm virus viêm gan B, Luận án Tiến sĩ Y học, Viện Nghiên cứu khoa học Y Dược lâm sàng 108 100 Đào Việt Hằng (2016) Đánh giá kết điều trị ung thư biểu mô tế bào gan đốt nhiệt sóng cao tần với loại kim lựa chọn theo kích thước khối u, Luận án Tiến sĩ Y học, Trường Đại học Y Hà Nội 101 Yu M.W., Chen C.J (1993) Elevated serum testosterone levels and risk of hepatocellular carcinoma Cancer Res, 53(4): 790-4 102 Yu M.W., Yang Y.C., Yang S.Y., et al (2001) Hormonal markers and hepatitis B virus-related hepatocellular carcinoma risk: a nested casecontrol study among men J Natl Cancer Inst, 93(21): 1644-51 103 Liu C., Xiao G.Q., Yan L.N., et al (2013) Value of alpha-fetoprotein in association with clinicopathological features of hepatocellular carcinoma World J Gastroenterol, 19(11): 1811-9 104 Abbasi A., Bhutto A.R., Butt N., et al (2012) Corelation of serum alpha fetoprotein and tumor size in hepatocellular carcinoma J Pak Med Assoc, 62(1): 33-6 105 Kim S.S., Nam J.S., Cho H.J., et al (2017) Plasma micoRNA-122 as a predictive marker for treatment response following transarterial chemoembolization in patients with hepatocellular carcinoma J Gastroenterol Hepatol, 32(1): 199-207 106 Guo X., Xiaohui L., Xing L., et al (2017) Circulating miR-21 serves as a serum biomarker for hepatocellular carcinoma and correlated with distant metastasis Oncotarget, 8(27): 44050-8 107 Lê Văn Trường (2006) Nghiên cứu điều trị ung thư biểu mơ tế bào gan kích thước 5cm phương pháp tắc mạch hoá dầu chọn lọc, Luận án Tiến sĩ Y học, Học viện Quân Y 108 Kojiro M (2004) 'Nodule-in-nodule' appearance in hepatocellular carcinoma: its significance as a morphologic marker of dedifferentiation Intervirology, 47(3-5): 179-83 109 Alvite-Canosa M., Pita-Fernandez S., Quintela-Fandino J., et al (2010) Prognostic and developmental factors in patients receiving liver transplant due to hepatocellular carcinoma: one center's experience in the north of Spain Transplant Proc, 42(10): 4578-81 110 Mitchell P.S., Parkin R.K., Kroh E.M., et al (2008) Circulating microRNAs as stable blood-based markers for cancer detection Proc Natl Acad Sci U S A, 105(30): 10513-8 111 Kutay H., Bai S., Datta J., et al (2006) Downregulation of miR-122 in the rodent and human hepatocellular carcinomas J Cell Biochem, 99(3): 671-8 112 Coulouarn C., Factor V.M., Andersen J.B., et al (2009) Loss of miR-122 expression in liver cancer correlates with suppression of the hepatic phenotype and gain of metastatic properties Oncogene, 28(40): 3526-36 113 Qi P., Cheng S.Q., Wang H., et al (2011) Serum microRNAs as biomarkers for hepatocellular carcinoma in Chinese patients with chronic hepatitis B virus infection PLoS One, 6(12): 1-8 114 Xu J., Wu C., Che X., et al (2011) Circulating microRNAs, miR-21, miR-122, and miR-223, in patients with hepatocellular carcinoma or chronic hepatitis Mol Carcinog, 50(2): 136-42 115 Koberle V., Kronenberger B., Pleli T., et al (2013) Serum microRNA-1 and microRNA-122 are prognostic markers in patients with hepatocellular carcinoma Eur J Cancer, 49(16): 3442-9 116 Luo J., Chen M., Huang H., et al (2013) Circulating microRNA-122a as a diagnostic marker for hepatocellular carcinoma Onco Targets Ther, 6: 577-83 117 Chen C.J., Yang H.I., Iloeje U.H., et al (2009) Hepatitis B virus DNA levels and outcomes in chronic hepatitis B Hepatology, 49(5 Suppl): 7284 118 Waidmann O., Bihrer V., Pleli T., et al (2012) Serum microRNA-122 levels in different groups of patients with chronic hepatitis B virus infection J Viral Hepat, 19(2): 58-65 119 Cho H.J., Kim J.K., Nam J.S., et al (2015) High circulating microRNA122 expression is a poor prognostic marker in patients with hepatitis B virus-related hepatocellular carcinoma who undergo radiofrequency ablation Clin Biochem, 48(16-17): 1073-8 120 Ha S.Y., Yu J.I., Choi C., et al (2019) Prognostic significance of miR122 expression after curative resection in patients with hepatocellular carcinoma Sci Rep, 9(1): 14738 PHỤ LỤC BỆNH ÁN NGHIÊN CỨU Số hồ sơ: ………………………… Phiếu theo dõi số: …………… SỐ BỆNH ÁN: ………………… Mã lưu huyết tương: …………… Họ tên: Năm sinh: Giới: Địa chỉ: Điện thoại NR: Điện thoại DĐ: Ngày vào viện: Ngày viện: Chẩn đoán: Tiền sử Bản thân: ………………… …… Gia đình: ………………………… Triệu chứng lâm sàng Triệu chứng Có Khơn Triệu chứng Có g Khơn g Mệt mỏi Bàn tay son Chán ăn, ăn Sao mạch Gầy sút cân Xuất huyết (kg/tháng) da Đau, tức bụng - HSP THBH Sốt Cổ trướng (ít, nhiều) Vàng da, củng mạc Gan to Phù Lách to (độ 1, 2, 3) Cận lâm sàng 3.1 Xét nghiệm huyết học, sinh hóa BC HC TC PT% GOT GPT BilTP BilTT Pro Albu (AST) (ALT) 3.2 Xét nghiệm miễn dịch, sinh học phân tử AFP HBsAg Anti-HCV HIV HBVDNA miR-21 miR-122 3.3 Siêu âm bụng Số lượng U Huyết khối TMC Kích thước U (cm) Hạch ổ bụng Giãn TMC Dịch ổ bụng 3.4 Chụp cắt lớp vi tính bụng Số lượng U Huyết khối TMC Kích thước U (cm) Hạch ổ bụng Giãn TMC Dịch ổ bụng 3.5 Xét nghiệm giải phẫu bệnh ………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………… Người lập phiếu NCS Đặng Chiều Dương BỘ GIÁOCAM DỤC VÀ ĐÀO TẠO