Nghiên cứu hoạt tính ức chế enzyme acetylcholinesterase của rong padina australis thu hoạch tại vùng biển khánh hòa

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM  ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU HOẠT TÍNH ỨC CHẾ ENZYME ACETYLCHOLINESTERASE CỦA RONG PADINA AUSTRALIS THU HOẠCH TẠI VÙNG BIỂN KHÁNH HÒA Giảng viên hướng dẫn: ThS Trần Văn Vương TS Nguyễn Thế Hân Sinh viên thực : Huỳnh Võ Thanh Bình Mã số sinh viên: 57132564 Khánh Hịa - 2019 TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM  ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU HOẠT TÍNH ỨC CHẾ ENZYME ACETYLCHOLINESTERASE CỦA RONG PADINA AUSTRALIS THU HOẠCH TẠI VÙNG BIỂN KHÁNH HÒA GVHD: ThS Trần Văn Vương TS Nguyễn Thế Hân SVTH: Huỳnh Võ Thanh Bình MSSV: 57132564 Khánh Hịa – 7/2019 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan nghiên cứu thân tơi Báo cáo kết nghiên cứu trình bày đồ án tốt nghiệp hồn tồn trung thực chưa cơng bố nghiên cứu khoa học Khánh Hịa, ngày tháng năm Huỳnh Võ Thanh Bình i LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Bộ môn Công nghệ Thực Phẩm trường Đại học Nha Trang đồng ý cho em thực đề tài Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến Nhà trường thầy cô Khoa Công Nghệ Thực Phẩm tạo cho em môi trường học tập kiến thức, rèn luyện thân suốt năm vừa qua Chính tảng kiến thức học giúp em ứng dụng để hồn thành tốt đề tài Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến tập thể cán quản lý phòng thí nghiệm - Trung tâm Thí nghiệm Thực hành - Trường Đại học Nha Trang, anh chị bạn làm đề tài tạo điều kiện giúp đỡ em trình thực đề tài Đặc biệt, em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến thầy Trần Văn Vương thầy Nguyễn Thế Hân đồng hành, dành thời gian, tâm sức, tận tình hướng dẫn giúp đỡ em suốt trình tìm hiểu thực đề tài Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, người thân, bạn bè bên cạnh ủng hộ động viên em vượt qua khó khăn để em hoàn thành tốt đồ án Em cố gắng nỗ lực để hồn thành đồ án, nhiên khơng thể tránh khỏi sai sót q trình thực Em hi vọng nhận góp ý thầy cơ, bạn bè để đồ án hồn chỉnh Em xin chân thành cảm ơn! ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH SÁCH HÌNH vi DANH SÁCH BẢNG vii DANH SÁCH CÁC TỪ VIẾT TẮT viii LỜI MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan bệnh Alzheimer rong biển 1.1.1 Bệnh Alzheimer .3 1.1.1.1 Khái niệm bệnh Alzheimer 1.1.1.2 Phân loại mức độ bệnh .3 1.1.1.3 Điều trị bệnh Alzheimer .4 1.1.2 Acetylcholine, enzyme acetylcholinesterase giả thuyết vai trò hệ cholinergic bệnh Alzheimer 1.1.2.1 Acetylcholine 1.1.2.2 Enzyme acetylcholinesterase 1.1.2.3 Giả thuyết vai trò hệ cholinergic .8 1.1.3 Tổng quan rong nâu Padina australis 1.1.3.1 Đặc điểm .9 1.1.3.2 Phân bố đặc điểm sinh thái 1.2 Cơ sở lý thuyết 10 1.2.1 Một số phương pháp thường dùng nghiên cứu đánh giá khả ức chế enzyme acetylcholinsterase 10 1.2.1.1 Phương pháp sử dụng thuốc thử Ellman 10 1.2.1.2 Phương pháp sử dụng thuốc thử muối Fast Blue B 11 1.2.2 Cơ sở phương pháp tách chiết dung môi 12 1.2.2.1 Cơ sở trình tách chiết 12 1.2.2.2 Các phương pháp tách chiết dung môi 13 1.2.2.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến trình chiết 14 1.3 Các nghiên cứu liên quan khả ức chế enzyme acetylcholinesterase 16 1.3.1 Trong nước 16 iii 1.3.2 Ngoài nước 17 CHƯƠNG 2: NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.1 Nguyên liệu sử dụng nghiên cứu 20 2.2 Hóa chất, thiết bị dụng cụ 20 2.2.1 Hóa chất .20 2.2.2 Thiết bị, dụng cụ 20 2.3 Phương pháp nghiên cứu bố trí thí nghiệm .21 2.3.1 Sơ đồ bố trí thí nghiệm nghiên cứu tổng quát .21 2.3.2 Bố trí thí nghiệm xác định điều kiện chiết ảnh hưởng đến khả ức chế enzyme acetylcholinesterase rong Padina australis 22 2.3.2.1 Thí nghiệm xác định ảnh hưởng nồng độ dung môi chiết đến khả ức enzyme acetylcholinesterase rong Padina australis .22 2.3.2.2 Thí nghiệm xác định ảnh hưởng nhiệt độ chiết đến khả ức enzyme acetylcholinesterase rong Padina australis 24 2.3.2.3 Thí nghiệm xác định ảnh hưởng thời gian chiết đến khả ức enzyme Acetylcholinesterase rong Padina australis 25 2.3.2.4 Thí nghiệm xác định ảnh hưởng tỉ lệ NL/DM đến khả ức enzyme Acetylcholinesterase dịch chiết rong Padina australis 26 2.3.3 Bố trí thí nghiệm xác định phân đoạn có khả ức chế enzyme Acetylcholinesterase cao dịch chiết rong Padina australis 27 2.4 Phương pháp sử dụng phân tích 28 2.4.1 Phương pháp xác định số tiêu hóa lý rong Padina australis 28 2.4.2 Phương pháp đánh giá khả ức chế enzyme acetylcholinesterase 29 2.5 Phương pháp xử lý số liệu 29 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 30 3.1 Kết xác định số tiêu hóa lý rong Padina australis .30 3.1.1 Kết xác định số thành phần hóa học 30 3.1.2 Kết định tính số hợp chất có dịch chiết 31 3.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng điều kiện chiết đến khả ức chế enzyme acetylcholinesterase rong Padina australis 32 3.2.1 Ảnh hưởng nồng độ dung môi chiết đến khả ức chế enzyme acetylcholinesterase rong Padina australis 32 iv 3.2.2 Ảnh hưởng nhiệt độ chiết đến khả ức chế enzyme acetylcholinesterase rong Padina australis 35 3.2.3 Ảnh hưởng thời gian chiết đến khả ức chế enzyme Acetylcholinesterase rong Padina australis 36 3.2.4 Ảnh hưởng tỉ lệ nguyên liệu/dung môi đến khả ức chế enzyme acetylcholinesterase rong Padina australis 38 3.4 Đánh giá khả ức chế enzyme acetylcholinesterase rong Padina australis điều kiện thích hợp .39 3.5 Đánh giá khả ức chế enzyme acetylcholinesterase phân đoạn dung môi chiết rong Padina australis .41 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 45 4.1 Kết luận 45 4.2 Kiến nghị 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO .46 PHỤ LỤC 53 v DANH SÁCH HÌNH Hình 2.1 Rong nâu Padina australis 20 Hình 2.2 Sơ đồ quy trình nghiên cứu tổng quát 21 Hình 2.3 Bố trí thí nghiệm xác định ảnh hưởng nồng độ dung môi chiết đến khả ức chế enzyme AChE rong Padina australis 23 Hình 2.4 Bố trí thí nghiệm xác định ảnh hưởng nhiệt độ chiết đến khả ức chế enzyme AChE rong Padina australis .24 Hình 2.5 Bố trí thí nghiệm xác định ảnh hưởng thời gian chiết đến khả ức chế enzyme AChE rong Padina australis .25 Hình 2.6 Bố trí thí nghiệm xác định ảnh hưởng tỉ lệ NL/DM chiết đến khả ức chế enzyme AChE rong Padina australis .26 Hình 2.7 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định phân đoạn có khả ức chế enzyme AChE cao rong Padina australis .27 Hình 3.1 Ảnh hưởng nồng độ dung môi chiết đến khả ức chế enzyme AChE rong Padina australis; Các chữ khác cột khác có ý nghĩa thống kê (p