Mục tiêu của nghiên cứu này nghiên cứu tỉ lệ đột biến gene K-RAS ở bệnh nhân ung thư đại trực tràng, tìm hiểu mối liên quan giữa đột biến gene K-RAS với một số đặc điểm mô bệnh học ở bệnh nhân ung thư đại trực tràng.
nghiên cứu khoa học NGHIÊN CỨU TỈ LỆ ĐỘT BIẾN GENE K-RAS VÀ MỐI LIÊN QUAN ĐỘT BIẾN GENE K-RAS VỚI MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM MÔ BỆNH HỌC UNG THƯ ĐẠI TRỰC TRÀNG Lê Văn Thiệu* *Bệnh viện Việt Tiệp Hải Phịng TĨM TẮT Mục tiêu: Nghiên cứu tỉ lệ đột biến gene K-RAS bệnh nhân UTĐTT Tìm hiểu mối liên quan đột biến gene K-RAS với số đặc điểm mô bệnh học bệnh nhân UTĐTT Đối tượng phương pháp: Nghiên cứu mô tả cắt ngang 79 bệnh nhân UTĐTT Xác định đột biến gene kỹ thuật giải tình tự gene, thực Trung tâm nghiên cứu gene protein Trường Đại học Y Hà Nội Kết kết luận: Tỉ lệ đột biến gene K-RAS UTĐTT 58,2% Tỉ lệ đột biến gene K-RAS nam giới chiếm 63% nữ giới 37% (p > 0,05) Nhóm tuổi ≤ 40 có tỉ lệ đột biến 8,7% nhóm tuổi > 40 91,3% (p > 0,05) Mức độ xâm lấn u vào thành đại trực tràng có mối liên quan với đột biến gene K-RAS (p < 0,05) Týp mô bệnh học, độ ác tính, tình trạng có hay chưa có di hạch khối u chưa thấy có mối liên quan với đột biến gene K-RAS (p > 0,05) Từ khóa: Ung thư đại trực tràng, đột biến gene K-RAS I ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư đại trực tràng (UTĐTT) bệnh phổ biến giới nguyên nhân gây tử vong cao hàng thứ tử vong ung thư (UT) nói chung Theo Hiệp hội phịng chống UT quốc tế (Union for International Cancer Control UICC), ước tính giới năm có khoảng 1.000.000 trường hợp UTĐTT phát khoảng 500.000 người chết bệnh [3] Tỉ lệ mắc bệnh vùng miền, châu lục có khác Ở Việt Nam, UTĐTT đứng thứ sau UT dày, phổi, vú vòm họng Trong UT đường tiêu hóa UTĐTT đứng thứ 2, sau UT dày Tuy nhiên, so với UT đường tiêu hóa UTĐTT loại có tiên lượng tốt [1] Cơ chế hình thành phát triển UTĐTT biến đổi tích lũy gene tế bào niêm mạc đại trực tràng (ĐTT) Sự tích lũy dần biến dị di truyền thường phải trải qua nhiều năm (từ 10 - 20 năm), điều phù hợp với nghiên cứu dịch tễ học di truyền diễn biến UTĐTT trải qua nhiều bước [2], [8] Ở Việt Nam, có nhiều nghiên cứu UTĐTT, chủ yếu đặc điểm lâm sàng, hình ảnh nội soi mơ bệnh học (MBH), cịn thấy có nghiên cứu đột biến gene UT nói chung UTĐTT nói riêng Vì vậy, tiến hành nghiên cứu đề nhằm mục tiêu: Nghiên cứu tỉ lệ đột biến gene K-RAS bệnh nhân ung thư đại trực tràng Tìm hiểu mối liên quan đột biến gene K-RAS với số đặc điểm mô bệnh học bệnh nhân ung thư đại trực tràng II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu Gồm 79 bệnh nhân (BN) UTĐTT chẩn đoán xác định mô bệnh học (MBH) Bệnh viện Việt Tiệp Hải Phịng từ tháng 1/2010 đến tháng 7/2012 Tạp chí Tài liệu Hội nghị Khoa học Nội khoa Toàn quốc lần IX Nội khoa Việt Nam 359 nghiên cứu khoa học 2.1 Các tiêu nghiên cứu - Tiêu chuẩn chọn BN: BN chẩn đoán xác định UTĐTT MBH BN bị UTĐTT, ngồi khơng bị bệnh ung thư khác kèm theo Có đầy đủ liệu lưu trữ hồ sơ bệnh án - Đặc điểm chung nhóm BN nghiên cứu: tuổi, giới - MBH: Phân týp MBH, phân giai đoạn TNM - Tiêu chuẩn loại trừ: BN có bệnh ung thư khác kèm theo; khơng có đầy đủ hồ sơ bệnh án phân độ ác tính khối u theo Tổ chức Y tế giới năm 2000 - Cỡ mẫu cách chọn mẫu: - Xác định tỉ lệ đột biến gene K-RAS: + Chọn mẫu: Chọn mẫu có chủ đích, BN chẩn đoán xác định UTĐTT MBH + Bằng kỹ thuật giải trình tự gene Trung tâm nghiên cứu gene protein Trường Đại học + Cỡ mẫu: Gồm 79 BN UTĐTT đủ tiêu chuẩn lựa chọn nêu Y Hà Nội + Đánh giá kết xác định đột biến gene: Phương pháp nghiên cứu Có đột biến; khơng đột biến Nghiên cứu thực theo phương pháp mô tả, cắt ngang, tiến cứu 2.2 Xử lý số liệu: Bằng phần mềm SPSS 20.0 III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Tỉ lệ đột biến gene K-RAS bệnh nhân ung thư đại trực tràng Bảng Tỉ lệ đột biến gene K-RAS Đột biến N = 79 Tỉ lệ % Có đột biến 46 58,2 Không đột biến 33 41,8 Tổng 79 100 Tỉ lệ đột biến gene K-RAS BN UTĐTT 58,2% Bảng Đột biến gene K-RAS theo giới tính Có đột biến Giới Không đột biến Tổng N = 46 % N = 33 % N = 79 % Nam 29 63,0 19 57,6 48 60,8 Nữ 17 37,0 14 42,4 31 39,2 Tổng 46 100 33 100 79 100 p > 0,05 Đột biến gene K-RAS nam chiếm tỉ lệ 63,0%; nữ chiếm tỉ lệ 37,0% Bảng Đột biến gene K-RAS theo nhóm tuổi Có đột biến Tuổi Không đột biến Tổng N = 46 % n = 33 % N = 79 % ≤ 40 8,7 3,0 6,3 > 40 42 91,3 32 97,0 74 93,7 Tổng 46 100 33 100 79 100 p > 0,05 Đột biến gene K-RAS nhóm tuổi ≤ 40 chiếm tỉ lệ 8,7%; nhóm tuổi > 40 chiếm tỉ lệ 91,3% 360 Tạp chí Nội khoa Việt Nam Tài liệu Hội nghị Khoa học Nội khoa Toàn quốc lần IX nghiên cứu khoa học Mối liên quan đột biến gene K-RAS với số đặc điểm mô bệnh học bệnh nhân ung thư đại trực tràng 2.1 Đột biến gene K-RAS với týp mô bệnh học Bảng Mối liên quan đột biến gene K-RAS với týp mơ bệnh học Có đột biến Mô bệnh học Không đột biến Tổng n = 46 % n = 33 % N = 79 % UTBMT Biệt hóa cao 19 43,3 13 39,4 32 40,5 UTBMT Biệt hóa vừa 15 32,6 12 36,4 27 34,2 UTBMT Biệt hóa thấp 15,2 3,0 10,1 UTBM tuyến nhày 8,7 18,2 10 12,7 UTBM tế bào nhẫn 2,2 3,0 2,5 46 100 33 100 79 100 Tổng P > 0,05 > 0,05 Chưa thấy mối liên quan đột biến gene K-RAS với týp MBH BN UTĐTT (p > 0,05) 2.2 Đột biến gene K-RAS với độ ác tính khối u Bảng Mối liên quan đột biến gene K-RAS với độ ác tính khối u Có đột biến Độ ác tính Khơng đột biến Tổng n = 46 % n = 33 % N = 79 % Thấp 34 73,9 25 23,3 59 74,7 Cao 12 26,1 76,7 20 25,3 Tổng 46 100 33 100 79 100 P > 0,05 Chưa thấy mối liên quan đột biến gene K-RAS với mức độ ác tính khối u (p > 0,05) 2.3 Mối liên quan đột biến gene K-RAS với ung thư biểu mô nhày ung thư biểu mô tuyến nhày Bảng Mối liên quan đột biến gene K-RAS với ung thư biểu mô tuyến nhày ung thư biểu mơ tuyến nhày Có đột biến MBH Khơng đột biến Tổng P n = 46 % N = 33 % N = 79 % UTBMT nhày 8,7 7,6 10 12,7 Không phải UTBMT nhày 42 91,3 27 92,4 69 87,3 Tổng 46 58,2 33 41,8 79 100 > 0,05 Chưa thấy mối liên quan đột biến gene K-RAS với UTBMT nhày UTBMT nhày (p > 0,05) Tạp chí Tài liệu Hội nghị Khoa học Nội khoa Toàn quốc lần IX Nội khoa Việt Nam 361 nghiên cứu khoa học 2.4 Đột biến gene K-RAS với mức độ xâm lấn khối u vào thành đại trực tràng Bảng Mối liên quan đột biến gene K-RAS với mức độ xâm lấn khối u vào thành đại trực tràng Có đột biến Khơng đột biến Tổng Mức độ Xâm lấn u N = 46 % n = 33 % N = 79 % Lớp 15,2 13 39,4 20 25,3 Thanh mạc 15 32,6 10 30,3 25 31,7 Qua mạc 24 52,2 10 30,3 34 43,0 Tổng 46 100 33 100 79 100 P < 0,05 Tỉ lệ đột biến gene K-RAS tăng dần theo mức độ xâm lấn khối u vào thành ĐTT (p < 0,05) 3.2.5 Đột biến gene K-RAS với ung thư đại trực tràng có chưa có di hạch Bảng 3.8 Mối liên quan đột biến gene K-RAS với ung thư đại trực tràng có chưa có di hạch Di hạch Có đột biến Không đột biến Tổng N = 46 % n = 33 % N = 79 % Có di hạch 19,6 27,3 18 22,8 Chưa di hạch 37 80,4 24 72,7 61 77,2 Tổng 46 100 33 100 79 100 P > 0,05 Chưa thấy mối liên quan đột biến gene K-RAS với UTĐTT có chưa có di hạch (p > 0,05) IV BÀN LUẬN Tỉ lệ đột biến gene K-RAS bệnh nhân ung thư đại trực tràng Cho đến nay, có 3000 đột biến điểm gene K-RAS báo cáo, đột biến hay gặp đột biến thay nucleotit codon 12 (chiếm 82%) codon 13 (chiếm 17%) exon gene K-RAS [6] Đột biến codon 12 13 chứng minh đóng vai trị quan trọng trình tiến triển UT nguy kháng thuốc ức chế EGFR khối u Đột biến vị trí khác codon 61 146 báo cáo thường chiếm tỉ lệ nhỏ ảnh hưởng dạng đột biến lên lâm sàng chưa làm sáng tỏ [7], [11] Như vậy, việc xác định đột biến gene K-RAS BN UTĐTT có ý nghĩa quan trọng việc tiên lượng điều trị Tuy nhiên, hạn chế mặt kinh phí nên nghiên cứu chúng tơi dừng lại nghiên cứu tỉ lệ đột biến gene K-RAS mối liên quan đột biến gene K-RAS với số đặc điểm MBH BN UTĐTT Trong nghiên cứu này, xác định đột biến gene 362 Tạp chí K-RAS codon 12 codon 13 tiến hành 79 BN bị UTĐTT, kết nghiên cứu bảng cho thấy tỉ lệ đột biến gene K-RAS BN bị UTĐTT nghiên cứu 58,2% Kết nghiên cứu phù hợp với nghiên cứu tác giả khác giới [5], [9] Nhiều kết nghiên cứu dịch tễ học chứng bệnh UTĐTT gặp nhiều lứa tuổi 40 Trong nghiên cứu này, tiến hành khảo sát đột biến gene K-RAS tuổi BN UTĐTT (bảng 3) cho thấy tỉ lệ đột biến gene K-RAS BN bị UTĐTT nhóm tuổi ≤ 40 (8,7%); nhóm tuổi > 40 (91,3%) (p > 0,5) Như vậy, kết nghiên cứu phù hợp với nhiều kết nghiên cứu cho tỉ đột biến gene K-RAS khơng có khác biệt lứa tuổi [4], [12] Mối liên quan đột biến gene K-RAS với số đặc điểm mô bệnh học bệnh nhân ung thư đại trực tràng Đột biến gene K-RAS với mức độ xâm lấn khối u vào thành đại trực tràng ung thư đại trực tràng có chưa có di hạch Nội khoa Việt Nam Tài liệu Hội nghị Khoa học Nội khoa Toàn quốc lần IX nghiên cứu khoa học Kết nghiên cứu bảng cho thấy tỉ lệ đột biến gene K-RAS theo mức độ xâm lấn u vào thành ĐTT là: khối u xâm lấn đến lớp (15,2%); lớp mạc (32,6%); qua lớp mạc (52,2%) (p < 0,05) Như vậy, khối u xâm lấn sâu vào thành ĐTT tỉ lệ đột biến gene K-RAS cao Kết nghiên cứu phù hợp với kết nghiên cứu Tai C.J (2012) nghiên cứu đột biến gene K-RAS 126 BN mắc UTĐTT nhận xét đột biến gene K-RAS BN bị UTĐTT thấy có khác biệt giai đoạn T1+2 giai đoạn T3+4 [10] Như vậy, có mối liên quan đột biến gene K-RAS với mức độ xâm lấn khối u vào thành ĐTT BN bị UTĐTT Tỉ lệ đột biến gene K-RAS bệnh nhân ung thư đại trực tràng - Tỉ lệ đột biến gene K-RAS ung thư đại trực tràng 58,2% - Tỉ lệ bệnh nhân ung thư đại trực tràng có đột biến gene K-RAS nam giới chiếm 63% nữ giới 37% (p > 0,05) - Tỉ lệ đột biến gene K-RAS bệnh nhân ung thư đại trực tràng có tuổi ≤ 40 8,7% tuổi > 40 91,3% (p > 0,05) Mối liên quan đột biến gene K-RAS với số đặc điểm mô bệnh học ung thư đại trực tràng V KẾT LUẬN + Mức độ xâm lấn u vào thành lịng đại trực tràng có mối liên quan với đột biến gene K-RAS (p < 0,05) Qua nghiên cứu 79 trường hợp ung thư đại trực tràng rút số kết luận sau: + Týp mơ bệnh học, độ ác tính, tình trạng có hay chưa có di hạch khối u chưa thấy có mối liên quan với đột biến gene K-RAS (p > 0,05) TÀI LIỆU THAM KHẢO Đoàn Hữu Nghị cs (2005), “Ghi nhận ung thư Viện E từ 2001 - 2005”, Tạp chí Thơng tin Y dược, tr.154-158 Ahnen D.J (1996), “The genetic basis of colorectal cancer risk”, Adv Intern Med, 41, p 531-52 Benson A.B (2007), “Epidemiology, disease progression, and economic burden of colorectal cancer”, J Manag Care Pharm, 13(6 Suppl C), p S5-18 Beranek M., Bures J., Palicka V., et al (1999), “A relationship between K-ras gene mutations and some clinical and histologic variables in patients with primary colorectal carcinoma”, Clin Chem Lab Med, 37(7), p 723-7 Cunningham C and Dunlop M.G (1996), “Molecular genetic basis of colorectal cancer susceptibility”, Br J Surg, 83(3), p 321-9 Garrett C.R and Eng C (2011), “Cetuximab in the treatment of patients with colorectal cancer”, Expert Opin Biol Ther, 11(7), p 937-49 Hsieh J.S., Lin S.R., Chang M.Y., et al (2005), “APC, K-ras, and p53 gene mutations in colorectal cancer patients: correlation to clinicopathologic features and postoperative surveillance”, Am Surg, 71(4), p 336-43 John S (2007), “Genetic alteration in sporadic and hereditary colorectal cancer: implementations for screening and follow-up”, Dig Dis, 25, p - 19 Stefanius K., Ylitalo L., Tuomisto A., et al (2011), “Frequent mutations of KRAS in addition to BRAF in colorectal serrated adenocarcinoma”, Histopathology, 58(5), p 679-92 10 Tai C.J., Chang C.C., Jiang M.C., et al (2012), “Clinical-pathological correlation of K-Ras mutation and ERK phosphorylation in colorectal cancer”, Pol J Pathol, 63(2), p 93-100 11 Weinstein I.B (2002), “Cancer Addiction to oncogenes the Achilles heal of cancer”, Science, 297(5578), p 63-4 12 Zulhabri O., Rahman J., Ismail S., et al (2012), “Predominance of G to A codon 12 mutation K-ras gene in Dukes’ B colorectal cancer”, Singapore Med J, 53(1), p 26-31 Tạp chí Tài liệu Hội nghị Khoa học Nội khoa Toàn quốc lần IX Nội khoa Việt Nam 363 nghiên cứu khoa học ABSTRACT RESEARCH K-RAS GENE MUTATIONS RATE AND RELATIONSHIP BETWEEN K-RAS GENE MUTATIONS WITH SOME CHARACTERISTIC HISTOPATHOLOGY IN COLORECTAL CANCER Objective: Research K-RAS gene mutations rate in colorectal cancers To find out the relationship between K-RAS gene mutations with some characteristic histopathology at patients colorectal cancer Subjects and methods: Cross-sectional descriptive study on 79 patients with colorectal cancer To determine the mutation of K-RAS gene by technical sequencing gene, performed in the Center for gene and protein research of Hanoi Medical University Results and Conclusions: The rate of K-RAS gene mutations in colorectal cancer is 58.2% The rate of K-RAS gene mutation in male patients is 63% and in female’s is 37% (p > 0,05) The age group ≤ 40 has the rate mutation is 8.7% and the age group > 40 is 91.3% (p > 0,05) The level of tumor invation into the wall of colorectal wall has relationship with K-RAS gene mutations (p < 0,05) Histopathological type, malignant, yes or no the status of lymph node metastasis of the tumor has not relationship with the K-RAS gene mutations (p> 0,05) Keywords: colorectal cancer, K-RAS gene mutations 364 Tạp chí Nội khoa Việt Nam Tài liệu Hội nghị Khoa học Nội khoa Toàn quốc lần IX ... liên quan đột biến gene K-RAS với số đặc điểm mô bệnh học bệnh nhân ung thư đại trực tràng 2.1 Đột biến gene K-RAS với týp mô bệnh học Bảng Mối liên quan đột biến gene K-RAS với týp mơ bệnh học. .. [12] Mối liên quan đột biến gene K-RAS với số đặc điểm mô bệnh học bệnh nhân ung thư đại trực tràng Đột biến gene K-RAS với mức độ xâm lấn khối u vào thành đại trực tràng ung thư đại trực tràng. .. CỨU Tỉ lệ đột biến gene K-RAS bệnh nhân ung thư đại trực tràng Bảng Tỉ lệ đột biến gene K-RAS Đột biến N = 79 Tỉ lệ % Có đột biến 46 58,2 Khơng đột biến 33 41,8 Tổng 79 100 Tỉ lệ đột biến gene K-RAS