PHÂN TÍCH TÍNH đa HÌNH (TG)m(T)n và một số đột BIẾN của GEN CFTR TRÊN BỆNH NHÂN bất sản ỐNG dẫn TINH

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI BỘ Y TẾ *** DƯƠNG THỊ HẢI VÂN PHÂN TÍCH TÍNH ĐA HÌNH (TG)m(T)n VÀ MỘT SỐ ĐỘT BIẾN CỦA GEN CFTR TRÊN BỆNH NHÂN BẤT SẢN ỐNG DẪN TINH ĐỀ CƯƠNG LUẬN VĂN BÁC SỸ NỘI TRÚ HÀ NỘI – 2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI *** BỘ Y TẾ DƯƠNG THỊ HẢI VÂN PHÂN TÍCH TÍNH ĐA HÌNH (TG)m(T)n VÀ MỘT SỐ ĐỘT BIẾN CỦA GEN CFTR TRÊN BỆNH NHÂN BẤT SẢN ỐNG DẪN TINH Chuyên ngành : Y sinh học- Di truyền Mã số : 62720301 ĐỀ CƯƠNG LUẬN VĂN BÁC SỸ NỘI TRÚ Người hướng dẫn khoa học: TS BS Lương Thị Lan Anh HÀ NỘI – 2016 MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Chương 1: TỔNG QUAN .2 1.1 Bất sản ống dẫn tinh 1.1.1 Khái niệm .2 1.1.2 Dịch tễ học .2 1.1.3 Đặc điểm lâm sàng bất sản ống dẫn tinh 1.1.4 Nguyên nhân 1.1.5 Chẩn đoán bất sản ống dẫn tinh 1.2 Gen điều hòa vận chuyển màng xơ nang CFTR 1.2.1 Đặc điểm gen CFTR 1.2.2 Những đột biến gen CFTR liên quan đến bệnh xơ nang .8 1.2.3 Những đột biến gen CFTR liên quan đến bất sản ống dẫn tinh 1.3 Xét nghiệm liên quan tới chẩn đoán bất sản ống dẫn tinh 12 1.3.1 Tinh dịch đồ 12 1.3.2 Fructose tinh dịch 14 1.3.3 Xét nghiệm di truyền phân tử xác định đột biến CFTR 14 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU .20 2.1 Thời gian nghiên cứu 20 2.2 Tiêu chuẩn chọn đối tượng 20 2.3 Phương pháp nghiên cứu .20 2.3.1 Tiến hành nghiên cứu 21 2.3.2 Quy trình tách chiết tách DNA 21 2.3.3 Kiểm tra độ tinh DNA 22 2.3.4 Kỹ thuật Realtime- PCR 22 2.3.5 Giải trình tự gen 24 Chương 3: DỰ KIẾN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 26 3.1 Đặc điểm chung nam giới bất sản ống dẫn tinh 26 3.1.1 Phân bố theo tuổi 26 3.1.2 Đặc điểm tinh dịch nam giới bất sản ống dẫn tinh 26 3.1.3 Độ pH tinh dịch nam giới bất sản ống dẫn tinh 27 3.1.4 Đặc điểm fructose tinh dịch bệnh nhân bất sản ống dẫn tinh 27 3.2 Đặc điểm đa hình (TG)m(T)n số đột biến gen CFTR khác bệnh nhân bất sản ống dẫn tinh 28 3.2.1 Đặc điểm tính đa hình (TG)m(T)n bệnh nhân bất sản ống dẫn tinh 28 3.2.2 Đặc điểm đa hình M470V 28 3.2.3 Đặc điểm loại đột biến gen CFTR khác .29 3.3 Đặc điểm mối tương quan đa hình (TG)m(T)5 đột biến gen CFTR khác 30 Chương 4: DỰ KIẾN BÀN LUẬN .32 4.1 Đặc điểm chung bệnh nhân bất sản ống dẫn tinh 32 4.2 Đặc điểm đa hình (TG)m(T)n số đột biến CFTR 32 4.3 Mối tương quan đa hình (TG)m(T)n đột biến gen CFTR khác 32 DỰ KIẾN KẾT LUẬN 33 DỰ KIẾN KIẾN NGHỊ 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ACMG American College Medical Genetics - Đại học Y khoa Di CBAVD truyền Hoa Kỳ Congenital bilateral aplasia of the vas deferens - Bất sản ống CFTR dẫn tinh Cystic fibrosis transmembrane conductance regular - Điều CFTR- RDs hòa vận chuyển màng bệnh xơ nang Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator related DNA mPCR disorder - Rối loạn liên quan tới gen CFTR Deoxyribonucleic acid Mutilplex polymerase chain reaction - Phản ứng khuếch đại WHO chuỗi World heath organization - Tổ chức y tế giới DANH MỤC BẢNG ( mục bảng them bảng bạn them vào mục lục cho mình) Bảng 1.1: Danh sách 23 đột biến gen CFTR phổ biến theo ACMG 2008 Bảng 1.2: Chỉ số xét nghiệm tinh dịch đồ bình thường theo WHO 2010 .13 Bảng 1.3: Những kỹ thuật phát đột biến gen CFTR thường sử dụng châu Âu .16 Bảng 2.1: Chu kì luân nhiệt chạy Reatime- PCR 23 Bảng 2.2: Trình tự mồi nhân đoạn đặc hiệu intron8 exon 10 24 Bảng 2.3: Thành phần phản ứng PCR nhân đoạn intron exon 10 24 Bảng 2.4: Chu trình luân nhiệt mPCR intron8 exon 10 25 Bảng 3.1: Phân bố tuổi bệnh nhân bất sản ống dẫn tinh 26 Bảng 3.2: pH tinh dịch nam giới bất sản ống dẫn tinh 27 Bảng 3.3: Những kiểu gen (TG)m(T)n bệnh nhân bất sản ống dẫn tinh 27 Bảng 3.4: Phân bố số lượng đột biến gen CFTR phát 28 Bảng 3.5: Phân bố loại đột biến gen CFTR 29 Bảng 3.6: Phân bố kết hợp đa hình (TG)m(T)n đột biến CFTR khác .29 Bảng 3.7: Tương quan (TG)m(T)5 đột biến CFTR khác 30 DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1: Phân bố thể tích tinh dịch nam giới bất sản ống dẫn tinh 27 Biểu đồ 3.2: Phân bố tính đa hình M470V 28 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Sơ đồ chẩn đoán nam giới CBAVD CFTR- RDs theo khuyến cáo châu Âu 2009 Hình 1.2 Mơ tả gen CFTR nhiễm sắc thể số Hình 1.3 Mơ tả cấu trúc protein CFTR Hình 4: Sơ đồ hệ thống máy giải trình tự tự động 19 Hình 2.1: Mơ tả phân tích kết Realtime- PCR 24 Hình 2.2: Máy giải trình tự tự động Biosystems 3500 25 ĐẶT VẤN ĐỀ Bất sản ống dẫn tinh tình trạng ống dẫn tinh khơng hình thành đầy đủ từ lúc trước sinh Bệnh lý xuất bên hai bên ống dẫn tinh [1], [2] Bất sản ống dẫn tinh chiếm khoảng ÷ 2% vơ sinh nam chiếm 6% số nam giới vô sinh khơng có tinh trùng [3], theo Rapour cộng bất sản ống dẫn tinhc ó thể chiếm tới 10% nam giới khơng có tinh trùng [4] Ngun nhân gây bệnh phần lớn bệnh nhân bất sản ống dẫn tinh có liên quan đến đột biến gen điều hòa vận chuyển màng CFTR bệnh xơ nang – bệnh di truyền gen lặn nhiễm sắc thể [1], [2] Hơn 95% trường hợp bệnh nhân xơ nang có kèm bất sản ống dẫn tinh [5] Bất sản ống dẫn tinh xếp vào nhóm rối loạn có liên quan đến gen CFTR (CFTR- RDs) [6] Nghiên cứu đột biến kiểu gen đa hình gen CFTR bệnh nhân bất sản ống dẫn tinh thực nhiều nước phương Tây Tuy nhiên, Đông Nam Á, nghiên cứu bệnh lý Điều tỉ lệ mang gen bệnh cộng đồng khu vực thấp hạn chế điều kiện, khả thực Theo thống kê Đại học Di truyền Y học Hoa Kỳ (ACMG), người Mỹ gốc Á, tỉ lệ người mang gen bệnh xơ nang CFTR 1/ 8780 tỉ lệ sinh trẻ bị bệnh 1/ 35100 [7] Thống kê nghiên cứu CFTR châu Á, đặc biệt Việt Nam chưa nhiều Để góp phần tìm hiểu đột biến gen CFTR bệnh nhân bất sản ống dẫn tinh, chúng tơi thực đề tài “Phân tích đa hình (TG)m(T)n số đột biến gen CFTR bệnh nhân bất sản ống dẫn tinh” nhằm mục tiêu sau: Xác định tỷ lệ đa hình (TG)m (T)n intron số đột biến khác gen CFTR bệnh nhân bất sản ống dẫn tinh Mô tả tương quan (TG)m (T)n số đột biến gen CFTR bệnh nhân bất sản ống dẫn tinh Chương TỔNG QUAN 1.1 Bất sản ống dẫn tinh 1.1.1 Khái niệm Bất sản ống dẫn tinh tình trạng ống dẫn tinh khơng hình thành đầy đủ từ lúc trước sinh Bệnh lý xuất bên hai bên ống dẫn tinh [1], [2] 1.1.2 Dịch tễ học Tỷ lệ bất sản ống dẫn tinh chiếm khoảng ÷ 2% vơ sinh nam tới 6% nam giới vơ sinh khơng có tinh trùng [3] Theo tác giả Radpour cộng sự, tỷ lệ bất sản ống dẫn tinh lên đến 10% nam giới khơng có tinh trùng [4] Tại Việt Nam, nghiên cứu Lê Thế Vũ cộng nguyên nhân gây vô sinh nam cho thấy tỉ lệ bất sản ống dẫn tinh chiếm 1% nam giới khơng có tinh trùng [8] Nghiên cứu đặc điểm tinh dịch đồ 1.000 cặp vợ chồng cho thấy ngun nhân vơ sinh khơng có tinh trùng chiếm 8% [9] 1.1.3 Đặc điểm lâm sàng bất sản ống dẫn tinh Bất sản ống dẫn tinh xuất bệnh lý đơn độc nam giới triệu chứng kèm với bệnh xơ nang Đây bệnh di truyền lặn nhiễm sắc thể thường tuyến nhầy, gây tổn thương tiến triển hệ thống hô hấp bệnh hệ tiêu hóa mạn tính Hơn 95% nam giới xơ nang bị vơ sinh khơng có tinh trùng gây khơng có, thiểu sản hay xơ hóa cấu trúc ống Wolffian xảy từ thời kì bào thai [5] 30 Nhận xét: 3.3 Đặc điểm mối tương quan đa hình (TG)m(T)5 đột biến gen CFTR khác Bảng 3.8: Tương quan (TG)m(T)5 đột biến CFTR khác Đột biến gen CFTR del21kb L138ins delI507 delF508 394delTT 604insA 1677delTA 2143delT 2184insA 3821delT 3944delTG 470MM M470V 470VV Tổng số Kiểu đa hình (TG)m(T)5 (TG)11T5 (TG)12(T)5 (TG)13(T)5 R p 31 Chương DỰ KIẾN BÀN LUẬN 4.1 Đặc điểm chung bệnh nhân bất sản ống dẫn tinh • Đặc điểm tuổi • Đặc điểm tinh dịch đồ: thể tích tinh dịch, pH, fructose tinh dịch 4.2 Đặc điểm đa hình (TG)m(T)n số đột biến CFTR  Đặc điểm đa hình (TG)m(T)n  Đặc điểm số đột biến gen CFTR 4.3 Mối tương quan đa hình (TG)m(T)n đột biến gen CFTR khác 1.1 32 DỰ KIẾN KẾT LUẬN Đặc điểm đa hình (TG)m(T)n bệnh nhân bất sản ống dẫn tinh Mối tương quan đa hình (TG)m(T)n đột biến gen CFTR khác bệnh nhân bất sản ống dẫn tinh 33 DỰ KIẾN KIẾN NGHỊ TÀI LIỆU THAM KHẢO 10 11 12 Ana Grangeia, et al., Molecular characterization of the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator gene in congenital absence of the vas deferens Genetics in Medicine, 2007 9: p 163–172 T.J McCallum, et al., Unilateral renal agenesis associated with congenital bilateral absence of the vas deferens: phenotypic findings and genetic considerations Human reproduction, 2001 16(2): p 282- 288 Wang, Z., Milunsky, J., Yamin, M., Maher, T., Oates, R & Milunsky, A, Analysis by mass spectrometry of 100 cystic fibrisis gene mutations in 92 patients with congenital bilateral absence of the vas deferens Human reproduction, 2002 17: p 2066-2072 Ramin Radpour, et al., Correlation Between CFTR Gene Mutations in Iranian Men With Congenital Absence of the Vas Deferens and Anatomical Genital Phenotype Journal of Andrology, 2008 29(1): p 35-40 SM, M., et al., CFTR-Related Disorders 2001 Bombieri, C., et al., Recommendations for the classification of diseases as CFTR-related disorders Journal of Cystic Fibrosis, 2011 10, Supplement 2: p S86-S102 Jean Amos, et al., American College of Medical Genetics STANDARDS AND GUIDELINES FOR CLINICAL GENETICS LABORATORIES 2008 Vũ, L.T and N.Đ Hinh, Nghiên cứu số nguyên nhân vô sinh nam 2009, Đại học Y Hà Nội: Hà Nội Bái, N.X and N.T Bình, Nghiên cứu đặc điểm tinh dịch đồ 1000 cặp vợ chồng vô sinh 2002, Đại học Y Hà Nội M, C., et al., Mutions in the cystic fibrosis gene in patients with congenital absence of vas defenens 1995 Els Dequeker, et al., Best practice guidelines for molecular genetic diagnosis of cystic fibrosis and CFTR-related disorders – updated European recommendations Eur J Hum Genet, 2009 17(1): p 51-65 M, C., Molecular pathology of the CFTR locus in male infertility Reproductive biomedicine online, 2005 10(1): p 14-41 13 C Bombieri, et al., Recommendations for the classification of diseases as CFTR-related disorders Journal of Cystic Fibrosis 2011 10(2): p 86-102 14 Listens, W., et al., Cystic fibrosis and infertility caused by congenital bilateral absense of vas deferens and related clinical entities Human reproduction, 1996 11(46): p 55 -80 15 Ni, W.-H., et al., The CFTR polymorphisms poly-T, TG-repeats and M470V in Chinese males with congenital bilateral absence of the vas deferens Asian Journal of Andrology, 2012 14: p 687–690 16 Hợp, T.V and T.Đ Phấn, Hoàn chỉnh Kỹ thuật xác định đột biến gen CFTR nam giới khơng có tinh trùng 2015, Đại học Y Hà Nội: Hà Nội 17 Mai H Nam, et al., Variations of the CFTR gene in the Hanoi-Vietnamese, in Am J Med Genet A 2005 p 249-53 18 Massie RJ, et al., Intron-8 polythymidine sequence in Australasian individuals with CF mutations R117H and R117C Eur Respir J, 2001 17: p 1195–2000 19 Kiesewetter S, et al., A mutation in CFTR produces different phenotypes depending on chromosomal background Nat Genet, 1993 5: p 274–8 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 Chmiel JF, et al., Pitfall in the use of genotype analysis as the sole diagnostic criterion for cystic fibrosis Pediatrics, 1999 103: p 823–6 Radpour, R., et al., Molecular study of (TG)m(T)n polymorphisms in Iranian males with congenital bilateral absence of the vas deferens Journal of Andrology, 2007 28(4): p 541546 Du, Q., et al., The CFTR M470V, Intron Poly-T, and TG- repeats detection in Chinese Males with congenital bilateral absence of vas deferens Biomed research international, 2014 Xu, X., et al., Meta-analyses of CFTR variants associated with the risk of the congenital bilateral absence of the vas deferens J Clin Bioinforma, 2014 4: p 11 WHO, WHO laboratory manual for the Examination and processing of human semen 2010 Audrézet MP, et al., Genomic rearrangements in the CFTR gene: extensive allelic heterogeneity and diverse mutational mechanisms Hum Mutat 2004 23: p 343–357 Hantash FM, et al., Novel and recurrent rearrangements in the CFTR gene: clinical and laboratory implications for cystic fibrosis screening Hum Genet, 2006 17: p 1–11 Niel F, et al., Rapid detection of CFTR gene rearrangements impacts on genetic counselling in cystic fibrosis J Med Genet 2004 41: p e118 C Bombieri , et al., Frequency of large CFTR gene rearrangements in Italian CF patients Eur J Hum Genet 2005 13: p 687–689 C, F., C T, and C.N.e al, Gross genomic rearrangements involving deletions in the CFTR gene: characterization of six new events from a large cohort of hitherto unidentified cystic fibrosis chromosomes and meta-analysis of the underlying mechanisms Eur J Hum Genet, 2006 14: p 567–576 Ratbi I, et al., Detection of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) gene rearrangements enriches the mutation spectrum in congenital bilateral absence of the vas deferens and impacts on genetic counselling Hum Reprod, 2007 22: p 1285– 1291 Trịnh Văn Bảo, T.T.T.H., Di truyền Y học 2011: Nhà xuất giáo dục Việt Nam HS Chiang, et al., CFTR (TG)m(T)n polymorphism in patients with CBAVD in a population expressing low incidence of cystic fibrosis Clinical genetics, 2009 76(3): p 282-6 TÀI LIỆU THAM KHẢO (in đóng vào cho phần tự đánh máy này, phần đánh endnote không chuẩn theo form tài liệu tham khảo trường) Grangeia A, Sa R, Carvalho F, et al (2007) Molecular characterization of the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator gene in congenital absence of the vas deferens Genetics in Medicine 9, 163– 172 McCallum T, Milunsky J, Munarriz R, et al (2001) Unilateral renal agenesis associated with congenital bilateral absence of the vas deferens: phenotypic findings and genetic considerations Human reproduction 16 (2 ), 282- 288 Wang Z, Milunsky J, Yamin M, et al (2002) Analysis by mass spectrometry of 100 cystic fibrisis gene mutations in 92 patients with congenital bilateral absence of the vas deferens Human reproduction, 17, 2066-2072 Ramin Radpour, Hamid Gourabi, Mohamad Ali Sadighi Gilani, et al (2008) Correlation Between CFTR Gene Mutations in Iranian Men With Congenital Absence of the Vas Deferens and Anatomical Genital Phenotype Journal of Andrology, 29 (1 ), 35- 40 (http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.2164/jandrol.107.002972/abstract) Samuel M Moskowitz, James F Chmiel, Darci L Sternen, et al (2001), CFTR-Related Disorders University of Washington, Seattle Bombieri C, Claustres M, De Boeck K, et al (2011) Recommendations for the classification of diseases as CFTR-related disorders Journal of Cystic Fibrosis, 10 (2 ), 86÷ 102 Jean Amos, et al., American College of Medical Genetics Standards and Guidelines For Clinical Genetics Laboratories 2008 Lê Thế Vũ, Trần Quán Anh, Nguyễn Đức Hinh (2009), Nghiên cứu số nguyên nhân vô sinh nam, Trường Đại học Y Hà Nội, Hà Nội Nguyễn Xuân Bái, Nguyễn Thị Bình (2002), Nghiên cứu đặc điểm tinh dịch đồ 1000 cặp vợ chồng vô sinh, Trường Đại học Y Hà Nội, Hà Nội 10 Chillon M, Casals T, Mercier B, et al (1995) Mutions in the cystic fibrosis gene in patients with congenital absence of vas defenens The New England journal of medicine, 332 (22), 1475- 1480 11 Els Dequeker, Manfred Stuhrmann, Michael A Morris, et al (2009) Best practice guidelines for molecular genetic diagnosis of cystic fibrosis and CFTR-related disorders– updated European recommendations, European Journal of Human Genetics, 17(1 ), 51-65 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2985951/ 12 Claustres M (2005) Molecular pathology of the CFTR locus in male infertility Reproductive biomedicine online, 10(1), 14-41 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2985951/ 13 Bombieri c, Claustres M, De Boeck K, et al (2011) Recommendations for the classification of diseases as CFTR-related disorders Journal of Cystic Fibrosis, 10(2) 86-102 14 Listens, W., et al., Cystic fibrosis and infertility caused by congenital bilateral absense of vas deferens and related clinical entities Human reproduction, 1996 11(46): p 55 -80 15 Wu- Hua Ni, Lei Jiang, Qian- Jin Fei, et al (2012) The CFTR polymorphisms poly-T, TG-repeats and M470V in Chinese males with congenital bilateral absence of the vas deferens, Asian Journal of Andrology, 14, 687–690 16 Trương Văn Hợp, Trần Đức Phấn (2015) Hoàn chỉnh Kỹ thuật xác định đột biến gen CFTR nam giới khơng có tinh trùng, Đại học Y Hà Nội, Hà Nội 17 Mai H Nam, Hijikata M, Lê Anh Tuấn, et al (2005) Variations of the CFTR gene in the Hanoi-Vietnamese, American journal of Medical Genetics- part A, 136(3 ), 249- 253 18 Massie RJ, Poplawski N, Wilcken B, et al (2001) Intron-8 polythymidine sequence in Australasian individuals with CF mutations R117H and R117C, European Respiratory Journal, 17 (6 ), 1195–2000 19 Kiesewetter S, Macek M Jr, Davis C, et al (1993) A mutation in CFTR produces different phenotypes depending on chromosomal background, Nature Genetics, (3 ), 274– 278 20 Chmiel JF, Drumm ML, Konstan MW, et al (1999) Pitfall in the use of genotype analysis as the sole diagnostic criterion for cystic fibrosis Pediatrics, 103 (4), 823– 826 21 Radpour R, Gourabi H, Gilani MAS, et al (2007) Molecular study of (TG)m(T)n polymorphisms in Iranian males with congenital bilateral absence of the vas deferens, Journal of Andrology, 28(4), 541- 546 22 Qiang Du , Zheng Li, Yongfeng Pan, et al (2014) The CFTR M470V, Intron Poly-T, and TG- repeats detection in Chinese Males with congenital bilateral absence of vas deferens, Biomed research international 23 Xuting Xu, Jufen Zheng, Qi Liao, et al (2014) Meta-analyses of CFTR variants associated with the risk of the congenital bilateral absence of the vas deferens, Journal of Clinical Bioinformatics, 4, 11 24 WHO, WHO laboratory manual for the Examination and processing of human semen 2010 25 Audrézet MP, Chen JM, Raquénès O, et al (2004) Genomic rearrangements in the CFTR gene: extensive allelic heterogeneity and diverse mutational mechanisms,Human Mutation,23 (4 ), 343–357 26 Hantash FM, Redman JB, Starn K, et al (2006) Novel and recurrent rearrangements in the CFTR gene: clinical and laboratory implications for cystic fibrosis screening, Human Genetic, 17(1- 2), 126– 136 27 Niel F, Martin J, Dastot- Le Moal F, et al (2004) Rapid detection of CFTR gene rearrangements impacts on genetic counselling in cystic fibrosis,Journal of Medical Genetics, 41 (11), 118 28 Bombieri C, Bonizzato A, Castellani C , et al (2005) Frequency of large CFTR gene rearrangements in Italian CF patients, Eur J Hum Genet , 13 (5), 687–689 29 Férec C, Casals T, Chuzhanova N, et al (2006) Gross genomic rearrangements involving deletions in the CFTR gene: characterization of six new events from a large cohort of hitherto unidentified cystic fibrosis chromosomes and meta-analysis of the underlying mechanisms, Eur J Hum Genet, 14 (5), 567–576 30 Ratbi I, Legendre M, Niel F, et al (2007) Detection of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) gene rearrangements enriches the mutation spectrum in congenital bilateral absence of the vas deferens and impacts on genetic counselling, Hum Reprod, 22 (5),1285–1291 31 Trịnh Văn Bảo, Trần Thị Thanh Hương (2011), Di truyền Y học Nhà xuất giáo dục Việt Nam 32 Chiang HS, Lu JF, Liu CH, et al (2009) CFTR (TG)m(T)n polymorphism in patients with CBAVD in a population expressing low incidence of cystic fibrosis, Clinical genetics, 76 (3), 282- 286 PHỤ LỤC BỆNH ÁN NGHIÊN CỨU Số thứ tự……………………………… Mã bênh án………………………… ngày xét nghiệm:…………………… I HÀNH CHÍNH: Họ tên:…………………………………….tuổi:…………Giới: Nam □ Nữ □ Địa chỉ:………………………………………………………………………… Nghề nghiệp:…………………………………………………… Số điện thoại:………………………………………………………………… II CHUN MƠN: 2.1 Tiền sử: Gia đình:……………………………………………………………………… Phả hệ: Nội khoa Ngoại khoa Sinh sản: Chậm con:………… năm Điều trị can thiệp: Quai bị: có/ khơng Mấy tuổi: Người vợ: II.2 Thăm khám: Bìu : Mào tinh hoàn ống dẫn tinh: tinh hoàn: II.3 Xét nghiệm: II.3.1 Tinh dịch đồ: Chỉ số Thể tích pH Mật độ Tổng số tinh trùng Lần1(……./……./……….) Lần 2(…./… /…… ) [[[[[ơ II.3.2 Xét nghiệm fructose- kẽm: Chỉ số Lần Lần Fructose Kẽm II.3.3 Siêu âm bìu Chỉ số Tinh hồn trái Tinh hồn phải Có Thể tích Mào tinh hồn: ống dẫn tinh: II.3.4 Siêu âm ổ bụng: Bình thường/ bât thường II.3.5 Siêu âm qua trực tràng: Túi tinh: có/ khơng ống dẫn tinh: có/ khơng II.4 Xét nghiệm đột biến CF: II.5 Xét nghiệm NST: II.6 Xét nghiệm ZFY:………………….… PHỤ LỤC 2: KÍ HIỆU PHÂN TỬ ACID AMIN Tên acid amin Glycine Histidine Isoleucine Lysine Leucine Methionine Asparagine Proline Glutamine Arginine Serine Threonine Valine Tryptophan Tyrosine Mã chữ G H I K L M N P Q R S T V W Y Mã ba chữ Gly Bộ ba mã hóa GGT, GGC, His Ile Lys Leu GGA, GGG CAT, CAC ATT, ATC, ATA AAA, AAG CCT, CTC, CTA, Met Asn Pro CTG ATG AAT, AAC CCT, CCC, CCA, Gln Arg Ser Thr CCG GAA, GAG AGA, AGG AGT, AGC ACT, ACC, ACA, Val ACG GTT, GTC, GTA, Trp Tyr GTG TGG TAT, TAC ... bất sản ống dẫn tinh 27 3.2 Đặc điểm đa hình (TG)m(T)n số đột biến gen CFTR khác bệnh nhân bất sản ống dẫn tinh 28 3.2.1 Đặc điểm tính đa hình (TG)m(T)n bệnh nhân bất sản ống dẫn tinh. .. đột biến gen CFTR liên quan đến bất sản ống dẫn tinh Đột biến gen CFTR gây bệnh nam giới bất sản ống dẫn tinh khác biệt so với đột biến gen CFTR tìm thấy bệnh nhân xơ nang Bệnh nhân bất sản ống. .. đa hình (TG)m(T)n số đột biến gen CFTR bệnh nhân bất sản ống dẫn tinh nhằm mục tiêu sau: Xác định tỷ lệ đa hình (TG)m (T)n intron số đột biến khác gen CFTR bệnh nhân bất sản ống dẫn tinh Mô