Xác định đồng thời methanol và ethanol trong huyết tương người bằng phương pháp sắc ký khí (GC)

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN ======= NGUYỄN THỊ HỒNG NHUNG XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI METHANOL VÀ ETHANOL TRONG HUYẾT TƢƠNG BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ KHÍ (GC) LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Chun ngành: Hóa phân tích Mã số: 60440118 Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS TẠ THỊ THẢO TS ĐẶNG VĂN ĐOÀN HÀ NỘI - 2019 LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, xin đ t i nl n iết n tr n tr n n ất tới PGS.TS Tạ Thị Thảo TS Đặn Văn Đoàn tận tìn ớng dẫn tạo m i điều ki n iúp đỡ tơi suốt q trình thực hi n đề tài viết luận văn Tôi xin đ c gửi lời cảm n n t àn tới ban lãn đạo, thầy cô anh chị Vi n khoa h c hình - Bộ Cơn an tạo điều ki n thuân l i cho tơi h c tập thực hi n khóa luận Tơi xin bày tỏ lòng biết n tới thầy giáo giảng dạy khoa Hố , tr ờn Đại h c Khoa h c Tự Nhiên, Đại h c Quốc Gia Hà Nội, đặc bi t thầy mơn Hố Phân tích, o tơi n ững kiến thức q giá q trình h c tập thực hi n đề tài Tôi ũn xin ửi lời cảm n an đặc bi t nhữn n ị, bạn bè lớp cao h c hố K27, ời bạn nhóm hố phân tích K27 góp ý kiến, động viên, chia sẻ nhữn k ó k ăn tron suốt q trình h c tập thực hi n đề tài Cuối xin gửi lời cảm n tới ia đìn ạn è ln động viên, chia sẻ m i khó k ăn ùn tơi Mặ dù ó n iều cố gắng hồn thi n luận văn ằng tất nhi t tình năn lực mình, nhiên khơng th tránh khỏi thiếu sót, tơi mong nhận đ c nhữn đón tri n có tính ứng dụn óp q áu quý Thầy Cô bạn đ đề tài phát n Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội ngày 10 tháng 02 năm 2019 Học viên Nguyễn Thị Hồng Nhung MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ C ƯƠNG 1: TỔNG QUAN .3 1.1 Tổn quan methanol ethanol 111 Tn t un 112 C u n m t m t no v no v t t no no tron t s n v ộ tn n .5 1121 C u n 1122 m t ộ tn 1.2 Cá p no v m t t no v no tron t t s n nol .8 n p áp xá định methanol ethanol 10 121 P n p ps C 10 1211 P n p p C-FID .11 1.2.1.2 P n p p C-MS .13 122 P 123 C n p ps p n p n u năn o P C 14 p qu n 15 1.2.3.1 P n p p qu n p 1.2.3.2 P n p áp p ổ hấp thụ phân tử (UV-Vis) .16 1.2.3.3 P n p áp p ổ hồng ngoại gần (NIR) 19 124 P 13 C n p p p 14 T n n p t C ƯƠNG 2: T 2.1 ẫu p n t n p un p R m n .15 .20 m usn p nt m t no v t no 20 n t n qu n 22 C NG 23 23 2.2 Chất chuẩn, hoá chất, thiết bị 24 2.2.1 Ch t chuẩn 24 2.2.2 Hoá ch t 24 2.2.3 Thi t bị, dụng cụ .24 2.3 P n p áp n iên ứu 25 2.3.1 Nghiên cứu xây dựn qu trìn ịn ợng methanol ethanol 25 2.3.1.1 Chuẩn bị mẫu chuẩn 25 2.3.1.2 Xử lý mẫu p n t 2.3.1.3 232 t từ huyết t ảo sát điều ki n sắ ký đ địn l n p n p 2.3.2.1 Tính ch n l pp nt độ đặ n 26 ng MeOH, EtOH 26 M O , EtO tron i u p u tt n 27 n p áp 27 2.3.2.2 Khoảng nồn độ tuyến tính 28 2.3.2.3 Giới hạn phát hi n giới hạn địn l 2.3.2.4 Đán n p n p áp 28 iá độ đún (độ thu hồi) độ chụm (độ lặp lại) .29 2.3.2.5 Một số p n p áp ảo quản mẫu ản ởn đến nồn độ MeOH, EtOH máu theo thời gian bằn p n p áp sắc ký khí .30 2.3.2.6 Độ ổn địn mẫu tron trìn ảo quản 30 2.3.3 Phân tích m u thực t .30 C ƯƠNG 3: ẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 31 3.1 Tối u óa điều ki n phân tích methanol, ethanol thiết bị GC-FID 31 3.1.1 Khảo s t ều ki n nhi t ộ detector 31 3.1.2 Khảo s t ều ki n nhi t ộ 313 ảo s t 3.1.4 n n trìn n n t 315 n 3.1.5.1 m m u .33 t ộ cột tách 34 ộ dòng khí mang 35 uẩn ợn n t ịn M O , EtO , np p nt iữa di n t n điều ki n xử lý mẫu uyết t 321 ảo s t n n 322 ảo s t t huy t t 323 ảo s t t n n n pi nồn độ ất ợn t t ị D 40 3.2 N iên ứu lựa 33 n ịn 37 3.1.5.2 Khảo sát gi i h n phát hi n gi i h n ịn Q n, t ị .37 ảo sát p ụ t uộ tuyến t n v t trị s ộ un ụn ị n 40 ACN 41 n /ACN .42 o 43 p n p pp nt .46 331 ộ u p np t 3.3.2 G n p pp n, nt n ịn 46 ợn v n uẩn p n p p 46 3.3.2.1 Giới ạn p át i n ( n 3.3.2.2 uẩn ) ịn m t iới ạn địn l no , t n ( ) 46 no tr n u t t n tr n .47 333 n 334 n ộ ộ p nt p ụm ộ n p uẩn p 51 p v t p p n p p 52 3341 ộ ụm 3342 ộ ụm t 3.3.5 n n n p 52 p 53 np p ảo quản m u t o t n 55 3.3.6 ộ n ịnh 57 3.4 Phân tích mẫu thực tế 58 Nhận xét: 61 ẾT UẬN .62 TÀI LI U THAM KHẢO 64 DANH SÁCH HÌNH Hình 1.1: Q trình chuy n t no tron Hình 1.2: Quá trình chuy n m t t no tron n t i .6 n i Hình 1.3: C u trúc phức hợp màu tím 17 ìn 1: thị khảo sát nhi t ộ detector 31 ìn S m t ìn 3 S t ìn S 220oC .31 no no 220oC 32 n ợp m t no - t ìn 5: thị khảo sát nhi t ộ ìn 6: thị khảo s t n trìn n ìn 7: t ị ộ ảo s t t ìn 8: S ìn n n m m u 33 t ộ cột tách 34 n 35 t tron un ị uẩn 36 thị bi u diễn phụ thuộc n tính tín hi u p ứng v i 39 ộ c a methanol .39 ìn 10 n n n 220oC 32 no thị bi u diễn phụ thuộc n tính tín hi u p ứng v i 39 ộ c a ethanol 39 ìn 11: S ìn 12: S ảo s t n n quy trình x ìn 13: S ộ ACN 100 41 M O , EtO tron m u u t t M O , EtO tron u tt n n 45 uẩn p ụn qu trìn m u ìn 12 45 ìn 14: ộ n M O v EtO p n p p .46 ìn 15: ng chuẩn c a MeOH theo di n tích pic 48 ìn 16: ng chuẩn c a EtOH theo di n tích pic 50 ìn 17: S m u t ự t – m u s 60 ìn 18: S m u t ự t – m u s 11 60 ìn 19: S m u t ự t – m u s 16 60 DANH SÁCH BẢNG BIỂU Bản 1: n n Bản 2: n n n t ộ n t tor t ộ n n n tích pic c a MeOH EtOH 32 mm u n n tích pic c a MeOH EtOH 33 Bảng 3.3: K t t n trìn n Bản 4: n n i di n tích pic th u M O , EtO n t ộ cột tách 34 n t ộ n n t n i di n tích pic th u a MeOH, EtOH 35 Bảng 3.5 Di n tích pic c a methanol, ethanol Iso propanol 37 m t Bảng 3.6: K t khảo sát khoảng n tính c ị t no tron un uẩn 38 Bảng 3.7: n huy t t no v n n ng c ộ ACN n hi u chi t MeOH, EtOH kh i n 42 Bảng 3.8: n ng c a tỉ l huy t t kh i huy t t Bảng 3.9: n n /ACN n hi u chi t MeOH, EtOH n 43 ng c a th i gian l Bảng 3.10: N n o n trình chi t 44 ộ di n tích pic trung bình c M O / S tron u tt n tr n 47 Bảng 3.11: N n ộ di n tích pic trung bình c a EtOH/IS tron u tt n tr n 49 Bảng 3.12: K t ảo s t ộ n Bảng 3.13: K t ảo s t ộ ụm m t p p no v n p t no .51 pp nt 52 Bản 14: t ịn ộ n ịn tron n M O 53 Bản 15: t ịn ộ n ịn tron n EtO 53 Bảng 3.16: K t m ợng MeOH tìm l ợc bằn p n p pt m uẩn c a kỹ thu t viên khác 54 Bảng 3.17: K t m ợng EtOH tìm l ợc bằn p n p pt m uẩn c a kỹ thu t viên khác 55 Bảng 3.18: K t p n p p ảo quản m u ản n nn n ộ .56 Bản 19: t ịn ộ n ịn ảo quản m u a MeOH, EtOH 57 Bảng 3.20: K t phân tích m u thực t GC – FID .58 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Tên viết tắt % RSD % RSDR ACN Tên tiếng anh % Relative standard deviation Tên Tiếng việt % Độ l uẩn t % Reproducibility standard % Độ l deviation đối Acetonitrile Acetonitril uẩn tái lặp t AS Asymmetry factor số đối xứn pi FID Flame ionization detector t tor ion óa n GC Gas chromatography HPLC High performance liquid Chromatography Sắ ký lỏn i u năn Methanol Methanol EtOH Ethanol Ethanol Isopropanol Isopropanol n lửa ao Giới ạn p át i n p MDL Method Detection Limit MQL Method Quantification Limit IDL Instrumental Detection Limit Giới ạn p át i n t iết ị IQL Instrumental Quantification Limit Giới ạn địn l n p n p áp Giới ạn địn l số t SD Standard deviation Độ l tR Retention time T ời ian l u P n t iết ị n quan Relative coefficient Ultraviolet-Visible n p áp R UV-VIS n Sắ ký k MeOH IS n đối uẩn n p áp quan p ổ ấp t ụ p n tử ĐẶT VẤN ĐỀ Sử dụn r nhiên, lạm dụn r u ia trở thành phổ biến quốc gia toàn giới, u bia lại nguyên nhân chủ yếu dẫn đến t nạn xã hội ki m soát hành vi, tai nạn giao thông, tử vong ngộ độc b nh không lây nhiễm Theo số li u tổ chức y tế giới – WHO, tiêu thụ r t n tron năm 2015 đạt 6,3 lít cồn nguyên chất n [43] Tron năm 2012, sử dụn r u bia làm 3,3 tri u n u bia giới ời (từ 15 tuổi trở lên) ời chết chiếm 5,9% tổng số ca tử vong toàn giới [55] Báo cáo ca lâm sàng ngộ độc methanol từ năm 1855 MacFarlan, với tri u trứn n t nhanh sâu, toan chuy n hóa, rối loạn ý thức từ lú lẫn đến hôn mê, suy thận cấp tụt huyết áp [14] Sau đó, có nhiều báo cáo ngộ độ đ c công bố [13], [30], [49] Tất đ lại hậu nặng nề với tỉ l tử vong cao:18 –56,3% Tại Vi t Nam, theo Cục Y tế Dự phòng (Bộ Y tế), nghiên cứu cho thấy Vi t Nam đan n ớc sử dụn r u bia mứ áo độn k i đứng thứ khu vực, đứng thứ 10 châu Á thứ 29 giới Theo thống kê tính đến tháng 1/2016, Vi t Nam tiêu thụ khoảng 3,4 tri u lít bia 10 tri u l t r Đặc bi t, tình trạng làm giả r u [7] u (trộn cồn cơng nghi p) ngun nhân gây tình trạng ngộ độ m t anol tron r u n ày àn áo động có th gây tử vong không xử lý kịp thời Các vấn đề sức khoẻ liên quan đến ngộ độc methanol tập th đ c quan sát thấy nhữn năm ần đ y n ớc ta Kon Tum, Ninh Thuận, Quảng Ninh.… đán áo độn vụ n ộ độc r u tập th n ày 13 2017 xã Ma Ly Chải, huy n Phong Thổ, Lai Châu làm nhiều n ngộ độc tập th i n ận ó 159 n nhẹ tới nặng, tron ó n ời tử von ũn n n ộ độc Vụ ời liên quan đến ngộ độc mứ độ từ ời tử vong Theo Cục An toàn thực phẩm (Bộ Y tế), báo cáo kết ki m nghi m mẫu r u ngày 15/2/2017 Vi n Ki m nghi m An toàn v sinh thực phẩm quốc gia, mẫu r u lấy vụ ngộ độc thực phẩm xảy + Không bảo quản: Mẫu chứa ống nghi m có nắp đậy kín, đ tự nhiên phòng thí nghi m, nhi t độ từ 20 - 350C + Bảo quản lạnh: Mẫu chứa ống nghi m có nắp đậy kín, đ tron n ăn lạnh, nhi t độ từ - 200C + Bảo quản đôn đá: ẫu chứa ống nghi m có nắp đậy kín, đ tron n ăn đá, nhi t độ < 00C - Tiến hành khảo sát: Mẫu thử: Là mẫu trắng thêm chuẩn có nồn độ MeOH 300µg/ml, EtOH 1000µg/ml, đ c chia làm phần đ bảo quản n - Ngoài ra, đ ó sở so sánh kết nồn độ cồn p n p áp ảo quản mẫu theo thời gian, chúng tơi tính nồn độ phần trăm EtOH giảm dần theo thời gian ( C%) n sau: ( Bảng 3.18: K t P p ) n p p ảo quản m u ản n nn n Nồn độ EtOH theo thời gian bảo quản n (mg/100ml) pháp bảo quản mẫu Không bảo quản Bảo quản lạnh Bảo quản đôn đá 95,03 84,83 27,78 96,59 92 68 99,7 99,7 98,56 99,7 56 98,18 76,37 ộ Nhận xét: ua ta t bảo quản mẫu t o p n p áp đôn đá tốt 3.3.6 Độ ổn định Trong phạm vi đ tài, tiến àn đán EtOH huyết t iá độ ổn định MeOH, n tron t ời gian phân tích Chuẩn bị mẫu n lấy phần mẫu xử lý ngay, phần lại bảo quản -25oC 28 ngày Lấy mẫu đan ảo quản xử lý tiến hành sắc ký ngày thứ 7, 14, 21 28 Bảng 3.19: t Ngày ịn ộ n ịn ảo quản m u c a MeOH, EtOH 14 21 28 RSD (%) ẫu MeOH (1) 298,98 297,46 297,06 295,28 294,27 0,626 MeOH (2) 297,56 298,02 297,54 296,16 295,08 0,411 MeOH (3) 298,64 298,34 297,14 295,73 295,31 0,504 EtOH (1) 999,97 997,66 996,48 993,87 993,74 0.265 EtOH (2) 998,58 998,52 997,65 995,22 993,02 0.243 EtOH (3) 999,86 998,99 997,82 996,13 993,32 0.260 Nhận xét thấy p n p áp ó độ tái lặp t cao, có th ứng dụn đ p n t n đối tốt iá trị sử dụng mẫu sau n iều n ày k từ k i lấy mẫu 57 3.4 Ph n t ch mẫu th c tế Sau k i k ảo sát đ t anol tron p nt uyết t điều ki n tối u xá địn đồn t ời n n ời ằn p n p áp sắ k k , t anol, ún tiến àn số mẫu t ự tế ết 20 mẫu t ự tế đ Nội, Hà Giang T an n n uốn p ải r u độ t u tỉn óa từ ó ứa àm l C u, P ú T , ắ Nin , n n n tai nạn iao t ôn n n m t anol, ethanol Bảng 3.20: K t phân tích m u thực t GC – FID STT T ôn tin mẫu SAN – P ú T MeOH (mg/100ml) EtOH (mg/100ml) - 136 - 222 - - 221 - 160 - 412 - 52.8 - 388 - 150 - (tai nạn giao thông) T – ắ Nin (tai nạn giao thông) Y – Đôn An (tai nạn giao thông) CLX – Lai Châu (n ộ độ r u) PV – C u (n ộ độ r u) G – C u (n ộ độ r u) CA – C u (n ộ độ r u) X – C u (n ộ độ r u) CST – C u (n ộ độ r u) 58 C G – C u (n ộ độ 10 r ẫu r 11 u đặ sản nếp quê – Nội VA – Gian (tai nạn 12 13 u) giao thông) NTV – T an Xu n (tai nạn giao thông) ẫu r 14 u nếp oa vàn – Đốn Đa ẫu r 15 Nội u sắn t u đ Nội NV – Gian (tai nạn 16 giao thông) NTĐ – Gian (tai nạn 17 giao thơng) TVT – T an 18 óa (tai nạn giao thông) NTS – ắ Nin (tai nạn 19 giao thông) T – Gian (tai nạn 20 giao thông) (-): 317 - 377 130 - 94,5 - - 128 257 308 77,7 - 488 - - - 294 - 226 - 72,4 ôn p át i n Sắ ký đồ số mẫu uyết t n t ự tế: 59 Hình 3.17: S m ut ự t –m us Hình 3.18: S m u t ự t – m u s 11 Hình 3.19: S m u t ự t – m u s 16 60 Nhận xét: -Mẫu (3), (13) mẫu (17) k ôn p át i n pi MeOH EtOH, ứn tỏ nạn n n t am ia iao t ôn tu n t ủ đún quy địn luật iao t ôn k ôn uốn r u ia, oặ ó sử dụn r un n àm l n t ấp lần uối xa t ời m t u mẫu - ẫu (11), (14) (15) d n t n với , EtOH + MeOH tron k oản 128 – 377 (mg/100ml) T o tá iả Kruse JA, nồng độ MeOH 0,18-0,24% (v/v) (150-200 mg/100ml) dẫn đến tử vong b n n n k ôn đ điều trị [32] + EtOH tron k oản 77 – 257 (mg/100ml) đan tron mứ độ giảm ý thức: 0,25-0,4% (v/v) (200-300 mg/100ml) [21]  Ở n ữn n ời p ải tiến àn l 61 máu ấp p ụ KẾT LUẬN Với mụ tiêu n iên ứu đặt ra, Đã x y d n đ mẫu uyết t ún tơi t u đ quy trìn p n t kết n đồn t ời sau: t anol t anol n Tối u óa điều ki n sắ ký Cá điều ki n tối u ao ồm: - + Cột tá ột mao quản TG-ALC2 (30mm×0,32 mm id, 1,2 μm) + Tố độ d n k man : 1,5ml/phút + Khí ổ tr với tố độ 25ml p út + N i t độ d t tor: 220oC + Nhi t độ inlet 150oC +C n trìn n i t độ ột tá : n i t độ đầu đ đặt 40ºC tron p út nâng lên 90oC tố độ 7oC/phút trì phút +T t tiêm mẫu: 1µl + C ế độ m: ơn ia d n (spilitl ss) Điều ki n xử lý mẫu MeOH EtOH k ỏi mẫu uyết t - có ACN ly t m l + P đ lấy dun dị n p áp p n t p n trìn đ ờn n trìn đ ờn uẩn uẩn t n xá n t u tron k oản nồn độ từ 30-360 số số t n quan R2 = 0,9999 tron k oản nồn độ từ 200-3600 µg/ml có y = -0,0145 + 0,0005x với + Đã t ẩm địn p t ốn GC MeOH EtOH mẫu uyết t µg/ml ó y = -0,002 + 0,0001x với p xá địn n k i số số t n quan R2 = 0,9998 n p áp đề với phù h p h thốn độ tuyến tính phù h p với yêu cầu p độ đún độ n p áp ó độ nhạy tốt với MDLMeOH = µg/ml; MDLEtOH = 60 µ ml MDQMeOH = 29,97 µg/ml; MDQEtOH = 199,8 µg/ml P n p áp đ tron mẫu uyết t áp dụn đ xá địn đồn t ời n 20 t n n n n ộ độ tai nạn iao t ơn phòng hóa pháp lý – Vi n k oa 62 ìn Trong ó mẫu d n tính với methanol, mẫu d n t n với ethanol, mẫu âm tính với methanol ethanol, mẫu d n t n với methanol ethanol 63 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Bộ Khoa h c Công ngh (2013), TCVN 7043:2013 Tiêu chuẩn Qu c gia r ợu tr ng, Hà Nội ng d n chẩn o n v [2] Bộ Y tế (2015), trí Ngộ ộc, Hà Nội, tr 171- 176 [3] Bộ Y tế (2010) "T ôn t an àn uy uẩn kỹ thuật quố ia sản phẩm đồ uống có cồn" [4] Bộ y tế (2009), D ợ [5] n Vi t Nam IV Văn iên (2017) Chuy n r ợu tron t Tr ờn Đại h c Hà Nội [6] PGS.TS Thái Nguyễn Hùng Thu (2015), ộc ch t h c, Nhà xuất Y h c, Tr ờn đại h c Hà Nội, tr.77-84 [7] Thùy Linh (26/09/2016), "Vi t Nam đứn sử dụn r u bia", B o àn đầu khu vực giới o ộng, tr.106-107 [8] Vi n ki m nghi m v sinh an toàn thực phẩm quốc gia (2010), Thẩm ịnh p n p p tron p nt c vi sinh v t, Nhà xuất Khoa h c Kỹ thuật Hà Nội, tr 16-59 Tiếng Anh [9] Asean guidelines (2004), "The conduct of bioavailability and bioequivalence studies" [10] Ahmad Y al-Hassan (2001), Science and Technology in Islam: Technology and applied sciences 65-69 64 [11] Andrey Shishov, Anastasia Penkova, Andrey Zabrodin, Konstantin Nikolaev, Maria Dmitrenko, Sergey Ermakov, Andrey Bulatov (2016),"Vapor permeationstepwise injection simultaneous determination of methanol and ethanol in biodiesel with voltammetric detection", Talanta 666-672 [12] British national formulary : BNF 69 (2015), British Medical Association, 42838 [13] Barceloux D G Bond G R Krenzelok E P Cooper H.Vale J A (2002),"American Academy of Clinical Toxicology practice guidelines on the treatment of methanol poisoning", J Toxicol Clin Toxicol, 40(4) 0731-3810 (Print) & 0731-3810 (Linking), 415-46 [14] Bennett I L Cary F H Mitchell G L Cooper M N (1953),"Acute methyl alcohol poisoning: a review based on experiences in an outbreak of 323 cases", Medicine, 32(4) 0025-7974 (Print) & 0025-7974 (Linking), 431-63 [15] Brett J Savary.Alberto Nuñez (2003),"Gas chromatography–mass spectrometry method for determining the methanol and acetic acid contents of pectin using headspace solid-phase microextraction and stable isotope dilution", Journal of Chromatography A, 1017, 151 - 159 [16] Borkowska Z Tymosiak-Zielinska A Shul G (2004), "Electrooxidation of methanol on polycrystalline and single crystal gold electrodes", Electrochim Acta, 49 pp, 1209–20 [17] Cederbaum Arthur I, (2012), "ALCOHOL METABOLISM", Clinics in liver Disease, 16(4) pp, 667-685 [18] Coldea T E, C Socaciu, F Fetea, F Ranga, R Pop and M Florea (2013), “Rapit uantitativ Analysis of t anol and Pr di tion of t anol Cont nt in Traditional Fruit Brandies from Romania, Using FTIR Spectrocopy and C mom tri s” Notulae Botanicae Horti Agrobotanici Cluj-Napoca, 41(1), pp 143-149 65 [19] Dominik R Haudenschild, Angela Eldridge, Pamela J Lein,Brett A, Chromy (2014),"High abundant protein removal from rodent blood for biomarker discovery" Biochemical and Biophysical Research Communications, 455, 84 - 89 [20] ri W N uy n uy n (2013) “Raman Sp tros opy for t anol Con ntrations in Al o oli t rmination of v s” Enwave Optronics, 28(12), pp.86 [21] Fernandez Elizabeth (2017), "Pediatric Ethanol Toxicity", Medscape [22] Guang-Chao Zhuang, Yu-Shih Lin Marcus Elvert, Verena B, Heuer.Kai-Uwe Hinrichs (2014),"Gas chromatographic analysis of methanol and ethanol in marine sediment pore waters: Validation and implementation of three pretreatment techniques", Marine Chemistry, 160, 82 -90 [23] Gabriele Reich (2005), "Near-infrared spectroscopy and imaging: Basic principles and pharmaceutical applications", Advanced Drug Delivery Reviews, 57, pp 1109-1143 [24] G oyianki omaitis and Stavrakas (2006) “ valuation of acetaldehyde and methanol in greek traditional alcoholic bevarages from varietal f rm nt d rap poma s” Science Direct, 18, pp.988-995 [25] H.Vaskova (2014), " Spectroscopic Determination of Methanol Content in Alcoholic Drinks", International journal of biology and biochemical engineering 8, pp, 27-34 [26] Heitor L Fernandes, Ivo M Raimundo Jr Celio Pasquini, Jarbas J.R Rohwedder (2008), "Simultaneous determination of methanol and ethanol in gasoline using NIR spectroscopy: Effect of gasoline composition", Talanta, 75, pp, 804-810 [27] Health US Department of, Services Human (2001), "Guidance for industry, bioanalytical method validation", http://www fda gov/cvm 66 [28] J W Goodman.D, S Goldfarb (2006),"The role of continuous renal replacement therapy in the treatment of poisoning", Semin Dial, 19(5), 0894-0959 (Print) & 0894-0959 (Linking), 402-7 [29] IPCS (1997)."Health and Safety guide No 105: Methanol", World Heath Organization: Geneva, 105 [30] K E Hovda, O H Hunderi, A B Tafjord, O Dunlop, N Rudberg.D Jacobsen (2005),"Methanol outbreak in Norway 2002-2004: epidemiology, clinical features and prognostic signs", J Intern Med, 258(2), 0954-6820 (Print) & 09546820 (Linking), 181-90 [31] Kalyani Korabathina (2017), "Methanol Toxicity", Medscape [32] Kruse JA (1992), "Methanol poisoning", Intensive care medicine, 18(7), pp, 391-397 [33] Kruse JA (2012), "Methanol and ethylene glycol intoxication," Critical care clinics 28 (4), pp, 661–711 [34] Kostik V, B Gjorgeska, B.Angelovska and I Kovacevska (2014), “ t rmination of som volatil ompounds in fruit spirits produ d from rap s (Vitis Vinif ) and plums (Prunus dom stri a ) ultivars” Science Journal of Analytical Chemistry, 2(4), pp.41 -46 [35] Lewis R Goldfrank Neal E Flomenbaum (2008),"Toxic alcohols", Toxicologic Emergency 6th edition, 64, 1051-1070 [36] Lei Jiang Lin He.Michael Fountoulakis (2004),"Comparison of protein precipitation methods for sample preparation prior to proteomic analysis", Journal of Chromatography A, 1023, 317 - 320 [37] Mei-Ling Wang Jih-Terng Wang.Youk-Meng Choong (2004),"A rapid and accurate method for determination of methanol in alcoholic beverage by direct 67 injection capillary gas chromatography", Journal of Food Composition and Analysis, 17, 187 - 196 [38] Cr ry N J unt W A (1978) “P ysi o-chemical correlates of alcohol intoxi ation” Neuropharmacology, 17 (7), pp.451-46 [39] Mizgunova U M, G A.Zolotova, and I.F.Dolmanova (1996) “ nzymi Method for the Determination of Ethanol and Methanol with Spectrophotometric t tion of t t Rat of t Pro ss” Analytical Chemistry, 121, pp.431-433 [40] Naser Nejadi, Setareh Mohammadpoor Masti, Mostafa Rezaei Tavirani, Taghi.Golmohammadi (2014),"Comparison of three routine protein precipitation methods: acetone TCA/acetone wash and TCA/acetone.", Journal of Paramedical Sciences (JPS) 5(4), ISSN 2008-4978, 58 -60 [41] Nairui Liu, Xiaoli Tian, Yu Sha (2009), A Simple Method for Measuring Methanol Content in Gas Field Wastewater, Bioinformatics and Biomedical Engineering , 2009, Beijing, China [42] Nicholson R S.; Irving Shain (1964), "Theory of Stationary Electrode Polarography, Single Scan and Cyclic Methods Applied to Reversible, Irreversible, and Kinetic Systems.", Analytical Chemistry, 36 (4), pp, 706–723 [43] Organization World Health, Global NCD target reduce the harmful use of Alcohol, 2015 [44] rt a C R op z and V rr i a (2001) “ ast analysis of importain win volatile compounds development and vadition of a new method based on gas chromatographic-flame ionisation detection analysis of dichloromethane microextra ts” Journal of Chromatography A, 923, pp.205-214 [45] Prashant Laxman Kole, Gantala Venkatesh, Jignesh Kotechac, Ravi Sheshalad (2011),"Recent advances in sample preparation techniques for effective bioanalytical methods", Biomedical Chromatography, 25, 199-217 68 [46] Polyana F, Pereira, Raquel M.F, Sousa, Rodrigo A.A, Munoz, Eduardo M, Richter (2013), "Simultaneous determination of ethanol and methanol in fuel ethanol using cyclic voltammetry", Fuel, 103, pp, 725-729 [47] Pedro Afonso de Paula Pereira Eliane Teixeira Sousa Santos, Tatiana de Freitas Ferreira, Jailson B de Andrade (1999), "Determination of methanol and ethanol by gas chromatrography following air sampling onto florisil cartridges and their concentrations at urban sites in the three largest cities in Brazil".,Talanta, 49, pp, 245-252 [48] Pont s P Gu d s and S Casal (2009) “GC A tald yd t anol and t anol in iolo i al t rmination of A ton atri s and C ll” Journal of Chromatographic Science, pp.215-220 [49] R Paasma, K E Hovda, A Tikkerberi.D, Jacobsen (2007),"Methanol mass poisoning in Estonia: outbreak in 154 patients", Clin Toxicol, 45(2), 1556-3650 (Print) & 1556-3650 (Linking), 152-7 [50] Shigetoshi Kage, Keiko Kudo, Hideaki Ikeda.Noriaki Ikeda (2004),"Simultaneous determination of formate and acetate in whole blood and urine from humans using gas chromatography–mass spectrometry", Journal of Chromatography B, 805, 113 - 117 [51] Skoog, Douglas A.; Holler, F James; Crouch, Stanley R (2007), Principles of Instrumental Analysis (6th ed.), pp, 169–173 [52] Su-Hwei Chen, Hsin-Lung Wu, Chih-Ho Yen, Shou-Mei Wu, Shun-Jin Lin, Hwang-Shang Kou (1998), " Trace determination of methanol in water–ethanol solution by derivatization and high-performance liquid chromatography", Journal of Chromatography A, 799, pp, 93-99 [53] The Economist (2003), Liquid fire - The Arabs discovered how to distil alcohol, They still it best, say some, 13/09/2017 [54] U.S Department of Health and Human Services (2001), Guidance for 69 Industry Bioanalytical Method Validation [55] World Health Organization, Global Health Observatory (GHO) data [56] Yi-Yun Chen, Shu-Yu Lin, Yuh-Ying Yeh, He-Hsuan Hsiao, Chi-Yue Wu, Shui-Tsung Chen.Andrew H.-J, Wang (2005),"A modified protein precipitation procedure for efficient removal of albumin from serum", Electrophoresis, 26, 2117– 2127 [57] Yarita T, R.Nakajima, S Otsuka, T Ihara, A Takatsu and M Shibukawa (2002) “ t rmination of t anol in An o ol v s y i -performence Liquid chromatography-Flame Ionization Detection Using Pure Water as Mobile P as ” Journal of Chromatography A, 976, pp.387-391 [58] Zuccotti, Gian Vincenzo, Fabiano,Valentina (2011),"Safety issues with ethanol as an excipient in drugs intended for pediatric use", Expert Opinion on Drug Safety, 10(4), 499-502 70 ... “X c định đồng thời Methanol Ethanol huyết tƣơng phƣơng ph p sắc ký khí (GC) với hai mục tiêu: Xây dựng thẩm dịnh phương pháp phát đồng thời Methanol, Ethanol huyết tương người phương pháp sắc. .. (HPLC) Tại Phòng hóa pháp lý – Vi n Khoa h c hình - Bộ Cơng An hi n đan sử dụng máy sắc ký khí đ xá định riêng methanol t anol mà huyết t a ón iên ứu xá địn đồng thời methanol ethanol n Vì vậy,... nồn độ ao n nhiều [35],[28] 1.2 C c phƣơng ph p x c định methanol ethanol Phương pháp sắc h Sắc ký khí (GC) q trìn tá trạn t k Tron kỹ t uật sắ ký k k man C ất k p trạn t k ất k man đ n ay p a