XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI PARACETAMOL VÀ IBUPROFEN TRONG CÁC DƯỢC PHẨM BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO - HPLC

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HỒ CHÍ MINH KHOA HÓA HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI PARACETAMOL VÀ IBUPROFEN TRONG CÁC DƯỢC PHẨM BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO - HPLC Giáo viên hướng dẫn: Th.S Nguyễn Ngọc Hưng Sinh viên thực hiện: Nguyễn Thành Lộc Lớp: Hóa 4C Thành phố Hồ Chí Minh – tháng năm 2013 MỤC LỤC MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN 1.1 Paracetamol 1.1.1 Cấu tạo 1.1.2 Tính chất vật lý hóa học 1.1.3 Dược tính 1.2 Ibuprofen 1.2.1 Cấu tạo 1.2.2 Tính chất vật lý hóa học 1.2.3 Dược tính 1.3 Các loại dược phẩm chứa Paracetamol Ibuprofen 1.4 Tình hình nghiên cứu nước 1.4.1 Phân tích Paracetamol 1.4.2 Phân tích Ibuprofen 1.4.3 Phân tích đồng thời Paracetamol Ibuprofen 1.5 Cơ sở lý thuyết phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao 1.5.1 Khái niệm 1.5.2 Nguyên tắc trình sắc ký 1.5.3 Phân loại sắc ký hấp phụ 1.5.4 Các đại lượng đặc trưng sắc ký đồ 1.5.5 Hệ thống HPLC 13 1.5.6 Phương pháp chọn điều kiện sắc ký 16 1.5.7 Các bước tiến hành sắc ký 19 Chương THỰC NGHIỆM 21 2.1 Hóa chất dụng cụ 21 2.1.1 Hóa chất 21 2.1.2 Dụng cụ - Thiết bị 22 2.2 Nội dung nghiên cứu 23 2.2.1 Khảo sát điều kiện tối ưu cho hệ thống sắc ký HPLC 23 2.2.2 Xây dựng phương pháp định lượng hỗn hợp Paracetamol Ibuprofen 26 2.2.3 Ứng dụng quy trình phân tích mẫu dược phẩm 27 2.2.4 Phương pháp xử lý đánh giá kết 29 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 31 3.1 Khảo sát điều kiện phân tích sắc ký 31 3.1.1 Chọn cột thể tích vòng mẫu 31 3.1.2 Đặt bước sóng cho detector 31 3.1.3.Khảo sát nồng độ acid phosphoric 33 3.1.4 Khảo sát thành phần pha động 35 3.1.5 Khảo sát tốc độ dòng 37 3.2 Xây dựng phương pháp định lượng 39 3.2.1 Xác định LOD LOQ thiết bị 39 3.2.2 Khảo sát khoảng nồng độ tuyến tính 39 3.2.3 Khảo sát độ lặp lại phép đo 42 3.3 Ứng dụng quy trình phân tích mẫu thật 43 3.3.1 Quy trình chiết mẫu 43 3.3.2 Xác định hệ số thu hồi phương pháp 44 3.3.3 Định lượng Paracetamol Ibuprofen số mẫu dược phẩm 44 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 48 4.1 Kết luận 48 4.2 Đề xuất 49 TÀI LIỆU THAM KHẢO 50 Trang MỞ ĐẦU Ngày với tốc độ phát triển nhanh chóng khoa học kỹ thuật, công nghệ bào chế thuốc không ngừng có bước đột phá số lượng chất lượng Cùng với xu hội nhập giới, Việt Nam chế phẩm thuốc chuyên giảm đau, hạ sốt, kháng viêm… sản xuất đa dạng, thành phần không chứa dược chất có hoạt tính mà chứa nhiều loại tá dược nhằm tăng hiệu điều trị Dược phẩm loại hàng hóa đặc biệt nên khâu kiểm nghiệm chất lượng thuốc trở nên quan trọng; điều đem lại cho người bệnh hiệu an toàn Trên thị trường nay, chế phẩm nước có tác dụng điều trị bệnh thông thường cảm cúm, nhức đầu, giảm đau, kháng viêm, hạ sốt… thường có thành phần Paracetamol, Ibuprofen Caffein… Vì nhu cầu phân tích định tính định lượng dược chất quan tâm Ở Việt Nam, nhà phân tích nghiên cứu ứng dụng nhiều phương pháp phân tích đại trắc quang, điện di mao quản, sắc ký lỏng, sắc ký khí… để xây dựng quy trình phân tích cho loại dược phẩm khác Trên xu hướng đó, nhiều công trình nghiên cứu định tính định lượng Paracetamol, Ibuprofen Caffein loại dược phẩm thực Trong dược điển Mỹ USP30 (United State Pharmacy), phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (viết tắt HPLC) phương pháp quy định cho phép định lượng đồng thời Paracetamol Ibuprofen chế phẩm hai thành phần có chứa đồng thời hai dược chất chế phẩm thành phần chứa Paracetamol Ibuprofen Tuy nhiên nghiên cứu ứng dụng phương pháp HPLC để phân tích dược phẩm có chứa hai thành phần hạn chế, chưa nghiên cứu sâu Cùng với trang thiết bị đại sở vật chất vốn có phòng thí nghiệm Bộ môn Hóa Phân Tích – Trường Đại học Sư phạm Tp Hồ Chí Minh, định chọn đề tài: “Xác định đồng thời Paracetamol Ibuprofen dược phẩm phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC)” để nghiên cứu xây dựng quy trình phân tích mẫu dược phẩm có chứa Paracetamol Ibuprofen chứa hai thành phần Trang Chương TỔNG QUAN 1.1 Paracetamol [1] Paracetamol (còn gọi Acetaminophen) dược chất phổ biến nước ta có tác dụng giảm đau, hạ sốt nhanh… 1.1.1 Cấu tạo Công thức phân tử: C H NO Khối lượng phân tử: 151,17 g/mol Danh pháp IUPAC: N-(4-hydroxyphenyl)acetamide 1.1.2 Tính chất vật lý hóa học Tỷ trọng: 1,263 g/cm3 Nhiệt độ nóng chảy: 1690C (3360F) Độ hòa tan nước: 0,1 – 0,5 g/100 ml 200C Paracetamol chất không mùi, có vị đắng, tinh thể dạng bột màu trắng Nó hòa tan dung môi hữu methanol ethanol tan nước ether Dung dịch bão hòa có pH = 5,5 – 6,5 1.1.3 Dược tính Paracetamol thuốc giảm đau, hạ sốt có tác dụng chống viêm aspirin So với loại thuốc khác, Paracetamol có tác dụng phụ theo liều điều trị phép bán không cần kê đơn Điều trị nhanh chóng hiệu đau đầu, hạ sốt, triệu chứng cảm cúm, đau sau tiêm vaccin, đau mọc không trị viêm 1.2 Ibuprofen [1] Ibuprofen loại dược chất danh mục thuốc thiết yếu tổ chức Y tế Thế giới, biết đến loại thuốc chống viêm dùng liều thấp có hiệu cao điều trị 1.2.1 Cấu tạo Công thức phân tử: C 13 H 18 O Khối lượng phân tử: 206,28 g/mol Danh pháp IUPAC: 2-[4-(2-methylpropyl)phenyl]propanoic acid Trang 1.2.2 Tính chất vật lý hóa học Ibuprofen tồn dạng bột kết tinh không màu, có mùi đặc biệt Thực tế không tan nước, tan ethanol, cloroform, ether acetone Tan dung dịch kiềm loãng hydroxide carbonate Về mặt hóa học Ibuprofen acid hữu yếu Nhiệt độ nóng chảy 760C Ibuprofen ổn định môi trường O , nhiệt độ 105 – 1100C, Ibuprofen bền vững ngày 1.2.3 Dược tính Ibuprofen thuốc chống viêm không steroid, có tác dụng giảm đau, hạ sốt, chống viêm, dạng bào chế phổ biến viên nén Điều trị đau từ nhẹ đến vừa tình trạng viêm, đau bụng kinh, nhức nửa đầu, đau hậu phẫu, đau răng, bệnh xương khớp, viêm khớp, viêm đa khớp dạng thấp, thấp khớp niên, bệnh quanh khớp, viêm bao gân, mô mềm, bong gân, căng 1.3 Các loại dược phẩm chứa Paracetamol Ibuprofen Danh mục thuốc có chứa Ibuprofen: Alaxan, Amfadol plus, Apo – Ibuprofen, Doaxan – S, Do – Parafen F, Hagifen, Hapacol đau nhức, Ibuprovon, I – Pan, Mofen 400, Parofen, Protamol, Sotstop, Tatanol Extra, Vell, Ibufene Choay… Danh mục thuốc có chứa Paracetamol: Aceralgin, Alaxan, Andol S, Decolgen Forte, Panadol 500, Hapacol Extra, Efferalgan 500, Tiffy, Tatanol plus… Các loại thuốc bán rộng rãi nước, đại lý thuốc tây, bệnh viện nhà thuốc tư nhân 1.4 Tình hình nghiên cứu nước 1.4.1 Phân tích Paracetamol Nghiên cứu “Định lượng đồng thời Paracetamol Cafein chế phẩm phương pháp đo quang” năm 2008 tác giả Đặng Thanh Thủy xây dựng phép định lượng đồng thời hỗn hợp hai thành phần Paracetamol Cafeine phương pháp quang phổ tử ngoại đạo hàm đạo hàm tỷ đối Đồng thời áp dụng phương pháp để định lượng Paracetamol Cafeine số biệt dược thông dụng thị trường [2] Cũng năm 2008, tác giả Đặng Quỳnh Chi nghiên cứu đề tài: “Định lượng đồng thời Paracetamol Codein Phosphat phương pháp điện di mao quản” Với Trang nghiên cứu này, tác giả xây dựng phương pháp định lượng đồng thời Paracetamol Codein phosphat Trong điều kiện điện di, thời gian di chuyển Codein Phosphat 2,5 phút Paracetamol 2,9 phút, khoảng nồng độ tuyến tính 0,06 – 0,40 mg/ml Codein Phosphat 0,19 – 0,120 mg/ml Paracetamol Phương pháp nhằm khảo sát phù hợp độ lặp lại độ Những chế phẩm có hàm lượng hai thành phần chênh lệch 20 lần phân tích mẫu thử phải tiến hành độ pha loãng khác Phương pháp áp dụng để định lượng hàm lượng hoạt chất viên nén Para Codein công ty dược phẩm 3/2 [3] Năm 2009, tác giả Deodhar MN cộng áp dụng phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao dùng cột pha đảo (RP - HPLC) để phân tích định lượng Paracetamol Aceclofenac với điều kiện cột pha đảo C 18 ( 250x4,6 mm, 10 µm), pha động hỗn hợp methanol : nước có tỷ lệ 70 : 30 thể tích (v/v), tốc độ dòng ml/phút với đầu dò (detector) đặt bước sóng 275 nm Thời gian lưu Aceclofenac Paracetamol 1,8 2,7 phút Khoảng tuyến tính – 50 ppm cho Aceclofenac – 50 ppm cho Paracetamol Độ thu hồi cho Aceclofenac Paracetamol 100,6 % 100,7 % Phương pháp đánh giá có độ xác, độ chọn lọc cao nhanh chóng định lượng đồng thời Aceclofenac Paracetamol [4] 1.4.2 Phân tích Ibuprofen Một phương pháp thường gặp nghiên cứu định lượng Ibuprofen phương pháp phổ huỳnh quang Năm 2001, tác giả Patricia C Damiani cộng áp dụng phương pháp để phân tích Ibuprofen mẫu dược phẩm, kem si rô Bước sóng kích thích 263 nm phát xạ 288 nm Khoảng nồng độ tuyến tính – 73 mg/l Phương pháp có độ chọn lọc cao nên có mặt chất khác tá dược không ảnh hưởng đến kết phân tích, ngoại trừ Chlorzoxazone viên nén Chlorzoxazone hấp thụ mạnh mẽ phạm vi quang phổ Ngoài nhiều phương pháp khác biết đến nhiều phương pháp HPLC [5] Năm 2003, S.A Kulichenko S.O Fessenko nghiên cứu độ hòa tan tính acid – base Ibuprofen hệ có chất hoạt động bề mặt, sau đề xuất phương pháp chuẩn độ Ibuprofen dạng tinh khiết Giá trị pK a nhỏ (4,43) độ hòa tan lớn (8,1 mg/ml) Ibuprofen đạt sử dụng chất hoạt động bề mặt dung dịch tridecylpyridinium bromide 0,1 M Phép chuẩn độ thực với dung dịch chuẩn KOH 0,05 M, thị xanh xylenol Qua đó, nghiên cứu đề xuất điều kiện xác định Ibuprofen Novocaine hydrocloride [6] Trang Năm 2007, Nguyễn Hữu Mỹ cộng nghiên cứu ứng dụng phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) để định lượng Ibuprofen huyết tương chó Với điều kiện sắc ký sau: cột pha đảo C 18 (RP-18) kích thước cột 150 x 4,6 mm, kích thước hạt µm; đầu dò (detector) đặt bước sóng 223 nm, pha động hỗn hợp acetonitril (ACN) dung dịch đệm phosphat 0,02 M có pH = 6,5 (tỷ lệ 30 : 70 v/v) với tốc độ dòng 1,2 ml/phút Khoảng nồng độ tuyến tính Ibuprofen từ - 20 μg/ml, giới hạn định lượng μg/ml Phương pháp có độ lặp lại cao, độ lệch chuẩn tương đối (RSD) < 3%, độ xác, hệ số thu hồi (R%) > 96%, hiệu suất chiết cao > 80%, trình chuẩn bị mẫu đơn giản, phù hợp cho nghiên cứu dược động học [7] Sau đó, năm 2008, tác giả Phạm Thanh Huyền dùng phương pháp HPLC để định lượng Ibuprofen huyết tương Nhưng đối tượng bệnh nhân nhi nhằm phục vụ công tác theo dõi điều trị bệnh Điều kiện tách sắc ký sử dụng cột RP 18 (150 x 4,6 mm; mm), đầu dò (detector) đặt bước sóng 223 nm, pha động hỗn hợp ACN dung dịch đệm phosphat 0,01M có pH = 6,5 (tỷ lệ 60 : 40 v/v) với tốc độ dòng 1,0 ml/phút Khoảng nồng độ tuyến tính Ibuprofen từ - 50 μg/ml, giới hạn định lượng μg/ml Phương pháp có độ lặp lại cao (RSD < 5%), độ xác (R% > 95%), hiệu suất chiết cao (83%) [8] 1.4.3 Phân tích đồng thời Paracetamol Ibuprofen Năm 2010, tác giả Phạm Thu Quế xây dựng phép định lượng đồng thời hỗn hợp hai thành phần Paracetamol Ibuprofen phương pháp quang phổ đạo hàm, lấy phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) làm phương pháp đối chiếu Ứng dụng phương pháp để định lượng Paracetamol Ibuprofen số lô chế phẩm: Alaxan, Dibulaxan Febro [9] Sau đó, tác giả M.R Khoshayand cộng ứng dụng phương pháp quang phổ định lượng ba thành phầnParacetamol, Ibuprofen Caffein loại thuốc, tiến hành quét phổ hấp thụ khoảng 200 nm đến 400 nm dung môi hỗn hợp methanol : HCl 0,1 M (3 : 1) [10] Năm 2005, phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC), tác giả Thái Duy Thìn cộng nghiên cứu định lượng Paracetamol, Ibuprofen nhiều dược chất khác mẫu chế phẩm dược nội ngoại Với điều kiện: cột pha đảo C 18 (5μm, 150mm x 4,6mm), pha động hỗn hợp ACN dung dịch axit phosphoric 0,1% (60: 40 v/v), tốc độ dòng 1,0 ml/phút với bước sóng đầu dò (detector) đặt miền tử ngoại 224 nm Thời gian lưu Ibuprofen Paracetamol 2,04 8,22 phút Với Trang điều kiện này, tiến hành khảo sát khoảng nồng độ tuyến tính, độ lặp lại, độ đúng, giới hạn phát (LOD) giới hạn định lượng (LOQ) [11] Tác giả Prasanna Reddy Battu MS Reddy năm 2009 định lượng thành công Paracetamol Ibuprofen phương pháp HPLC dùng cột pha đảo C 18 (5 µm, 150 mm x 4,6 mm), pha động hỗn hợp dung môi ACN dung dịch đệm phosphat (pH = 7,04) tỷ lệ 60: 40 v/v, tốc độ dòng 0,8 ml/phút với đầu đò UV 260 nm Thời gian lưu Ibuprofen, Paracetamol 2,48 4,45 phút Nghiên cứu khảo sát khoảng nồng độ tuyến tính, LOD, LOQ… định lượng Paracetamol, Ibuprofen loại dược phẩm bán thị trường [12] 1.5 Cơ sở lý thuyết phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao HPLC chữ viết tắt chữ đầu tiếng Anh phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (High Performance Liquid Chromatography), trước gọi sắc ký lỏng cao áp (High Pressure Liquid Chromatography) Phương pháp đời năm 1967 – 1968 sở phát triển cải tiến từ phương pháp sắc ký cột cổ điển Hiện phương pháp HPLC ngày phát triển đại hóa cao nhờ phát triển nhanh chóng ngành chế tạo máy phân tích Hiện nay, phương pháp ứng dụng lớn nhiều ngành kiểm nghiệm kiểm nghiệm thuốc Và tại, công cụ đắt lực phép phân tích định tính định lượng loại dược phẩm đa thành phần 1.5.1 Khái niệm Sắc ký lỏng hiệu cao phương pháp chia tách pha động chất lỏng pha tĩnh chứa cột chất rắn phân chia dạng tiểu phân chất lỏng phủ lên chất mang rắn hay chất mang biến đổi liên kết hoá học với nhóm chức hữu Quá trình sắc ký lỏng dựa chế hấp phụ, phân bố, trao đổi ion hay phân loại theo kích cỡ (rây phân tử) 1.5.2 Nguyên tắc trình sắc ký Pha tĩnh yếu tố quan trọng định chất trình sắc ký lọai sắc ký Nếu pha tĩnh chất hấp phụ ta có sắc ký hấp phụ Nếu pha tĩnh chất trao đổi ion ta có sắc ký trao đổi ion Nếu pha tĩnh chất lỏng ta có sắc ký phân bố hay sắc ký chiết Nếu pha tĩnh gel ta có sắc ký gel hay rây phân tử Cùng với pha tĩnh để rửa giải chất phân tích khỏi cột, cần có pha động Như nạp mẫu phân tích gồm hỗn hợp chất phân tích A, B, C… vào cột phân tích, kết Trang chất A, B, C… tách khỏi sau qua cột Quyết định hiệu tách sắc ký tổng hợp tương tác Chất phân tích A +B+C F1 Pha tĩnh F2 F3 Pha động Hình 1.1 Sơ đồ thể ảnh hưởng lực rửa giải Tổng tương tác định chất rửa giải khỏi cột trước tiên lực lưu giữ cột nhỏ (F ) ngược lại Đối với chất, lưu giữ quy định ba lực F , F , F Trong F F giữ vai trò định, F yếu tố ảnh hưởng không lớn Ở F lực giữ chất phân tích cột, F lực kéo pha động chất phân tích khỏi cột Như với chất khác F F khác Kết chất khác di chuyển cột với tốc độ khác tách khỏi khỏi cột hình 1.2 Hình 1.2 Quá trình rửa giải tách peak chất A chất B 1.5.3 Phân loại sắc ký hấp phụ Quá trình sắc ký dựa hấp phụ mạnh yếu khác pha tĩnh chất tan rửa giải (phản hấp phụ) pha động để kéo chất tan khỏi cột Sự tách hỗn hợp phụ thuộc vào tính chất động học chất hấp phụ Trong loại có hai kiểu hấp phụ: + Sắc ký hấp phụ pha thường (NP): pha tĩnh phân cực, pha động không phân cực + Sắc ký hấp phụ pha đảo (RP): pha tĩnh không phân cực, pha động phân cực Trang TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Pharmacy Guide - Cẩm nang nhà thuốc thực hành, Vietnam Edition 2008, tr 136, 196 [2] Đặng Thanh Thủy (2008), “Định lượng đồng thời Paracetamol Ibuprofen chế phẩm dược phương pháp đo quang”, NXB ĐH Dược Hà Nội [3] Đặng Quỳnh Chi (2008), “Định lượng đồng thời Paracetamol Codein Phosphat phương pháp điện di mao quản”, NXB ĐH Dược Hà Nội [4] Deodhar MN et al (2009), “Reverse Phase HPLC Method for Determination of Aceclofenac and Paracetamol in Tablet Dosage Form”, Research Chem, page 37 – 40 [5] Patrica C Damiani, et al (2001), “Spectrofluorometric determination of ibuprofen in pharmaceutical formulations”, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, Vol 25, Issue – 4, pages 679 – 683 [6] S.A Kulichenko and S.O Fessenko (2003), “Determination of ibuprofen and novocaine hydrochloride with the use of water–micellar solutions of surfactants”, Analytica Chimica Acta, Vol 481, Issue 1, pages 149 – 153 [7] Nguyễn Hữu Mỹ cộng (2007), “Nghiên cứu ứng dụng phương pháp HPLC định lượng ibuprofen huyết tương chó”, Báo cáo y học, Học viện Quân Y, NXB Đại học Dược Hà Nội [8] Phạm Thanh Huyền (2008), “Nghiên cứu xây dựng phương pháp định lượng ibuprofen huyết tương sắc ký lỏng hiệu cao”, Khóa luận tốt nghiệp, Học viện Quân Y, NXB Đại học Dược Hà Nội [9] Phạm Thu Quế (2010), “Định lượng đồng thời Paracetamol Ibuprofen viên nén phương pháp quang phổ đạo hàm”, NXB ĐH Dược Hà Nội [10] M.R Khoshayand et al (2008), “Simultaneous spectrophotometric determination of paracetamol, ibuprofen and caffeine in pharmaceuticals by chemometric methods”, Iran, Spectrochimica Acta Part A: Molecular and Biomolecular Spectroscopy, Vol 70, Issue 3, pages 491 – 499 [11] Thái Duy Thìn cộng (2003), “Nghiên cứu ứng dụng phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) đo quang phổ UV – vis để định tính định lượng hoạt chất thuốc có từ đến thành phần”, Viện kiểm nghiệm thuốc Bộ Y tế, Trường Đại học Dược Hà Nội Trang 50 [12] Prasanna Reddy Battu and MS Reddy (2009), “RP-HPLC Method for Simultaneous Estimation of Paracetamol and Ibuprofen in Tablets”, Asian J Research Chem, page 70 – 72 [13] Dipankar Basu et al (1998), “Application of least squares method in matrix form: simultaneous determination of ibuprofen and paracetamol in tablets”, Original Research Article Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, Vol 16, Issue 5, pages 809 - 812 Trang 51 PHỤ LỤC PHỤ LỤC Một số sắc ký đồ dãy chất chuẩn Paracetamol Hình 1.1 Sắc ký đồ chất chuẩn Paracetamol, C = 360 ppm Trang 52 Hình 1.2 Sắc ký đồ chất chuẩn Paracetamol, C = 240 ppm Hình 1.3 Sắc ký đồ chất chuẩn Paracetamol, C = 115,2 ppm Trang 53 Hình 1.4 Sắc ký đồ chất chuẩn Paracetamol, C = 57,6 ppm Trang 54 Hình 1.5 Sắc ký đồ chất chuẩn Paracetamol, C = 28,8 ppm Hình 1.1 Sắc ký đồ chất chuẩn Paracetamol, C = 9,6 ppm Trang 55 Hình 1.7 Sắc ký đồ chất chuẩn Paracetamol, C = 4,8 ppm PHỤ LỤC 2: Một số sắc ký đồ dãy đường chuẩn Ibuprofen Trang 56 Hình 2.1 Sắc ký đồ chất chuẩn Ibuprofen, C = 360 ppm Hình 2.2 Sắc ký đồ chất chuẩn Ibuprofen, C = 240 ppm Trang 57 Hình 2.3 Sắc ký đồ chất chuẩn Ibuprofen, C = 115,2 ppm Trang 58 Hình 2.4 Sắc ký đồ chất chuẩn Ibuprofen, C = 57,6 ppm Hình 2.5 Sắc ký đồ chất chuẩn Ibuprofen, C = 28,8 ppm Trang 59 Hình 2.6 Sắc ký đồ chất chuẩn Ibuprofen, C = 9,6 ppm Hình 2.7 Sắc ký đồ chất chuẩn Ibuprofen, C = 4,8 ppm Trang 60 Trang 61 PHỤ LỤC Sắc ký đồ mẫu M 01 Hình 3.1 Sắc ký đồ mẫu M 01 tiêm lần Trang 62 Hình 3.2 Sắc ký đồ mẫu M 01 tiêm lần PHỤ LỤC Sắc ký đồ mẫu M 11 Hình 4.1 Sắc ký đồ mẫu M 11 tiêm lần Trang 63 Hình 4.1 Sắc ký đồ mẫu M 11 tiêm lần Trang 64