Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 10116-2:2013 qui định phương pháp gián tiếp để xác định hàm lượng chất béo dạng rắn trong dầu mỡ động vật và thực vật (được gọi là chất béo) sử dụng phép đo phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) tạo xung độ phân giải thấp.
TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 10116-2 : 2013 ISO 8292-2:2008 DẦU MỠ ĐỘNG VẬT VÀ THỰC VẬT - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CHẤT BÉO DẠNG RẮN BẰNG PHỔ CỘNG HƯỞNG TỪ HẠT NHÂN TẠO XUNG (NMR) - PHẦN 2: PHƯƠNG PHÁP GIÁN TIẾP Animal and vegetable fats and oils - Determination of solid fat content by pulsed NMR - Part 2: Indirect method Lời nói đầu TCVN 10116-2:2013 hồn tồn tương đương với ISO 8292-2:2008; TCVN 10116-2:2013 Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F2 Dầu mỡ động vật thực vật biên soạn Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học Công nghệ công bố Bộ tiêu chuẩn TCVN 10116 (ISO 8292) Dầu mỡ động vật thực vật - Xác định hàm lượng chất béo dạng rắn phổ cộng hưởng từ hạt nhân tạo xung (NMR) gồm có phần sau: TCVN 10116-1:2013 (ISO 8292-1:2008), Phần 1: Phương pháp trực tiếp TCVN 10116-2:2013 (ISO 8292-2:2008), Phần 2: Phương pháp gián tiếp DẦU MỠ ĐỘNG VẬT VÀ THỰC VẬT - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CHẤT BÉO DẠNG RẮN BẰNG PHỔ CỘNG HƯỞNG TỪ HẠT NHÂN TẠO XUNG (NMR) - PHẦN 2: PHƯƠNG PHÁP GIÁN TIẾP Animal and vegetable fats and oils - Determination of solid fat content by pulsed NMR Part 2: Indirect method Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn qui định phương pháp gián tiếp để xác định hàm lượng chất béo dạng rắn dầu mỡ động vật thực vật (được gọi "chất béo") sử dụng phép đo phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) tạo xung độ phân giải thấp Hai phương pháp xử lý nhiệt sơ qui định: phương pháp dùng cho mục đích chung chất béo khơng thể rõ nhiều hình thái phần lớn ổn định dạng '-polymorph; phương pháp dùng cho chất béo tương tự bơ cacao thể rõ nhiều hình thái ổn định dạng '-polymorph Phương pháp xử lý nhiệt bổ sung phù hợp cho mục đích cụ thể nêu Phụ lục Phương pháp gián tiếp khó thực có độ tái lập phương pháp trực tiếp cho kết xác áp dụng phổ biến cho tất chất béo CHÚ THÍCH: Phương pháp trực tiếp quy định TCVN 10116-1 (ISO 8292-1) Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn Đối với tài liệu viện dẫn ghi năm cơng bố áp dụng phiên nêu Đối với tài liệu viện dẫn không ghi năm cơng bố áp dụng phiên nhất, bao gồm sửa đổi, bổ sung (nếu có) TCVN 6128 (ISO 661), Dầu mỡ động vật thực vật - Chuẩn bị mẫu thử TCVN 6121 (ISO 3960), Dầu mỡ động vật thực vật - Xác định trị số peroxit - Phương pháp xác định điểm kết thúc chuẩn độ iôt (quan sát mắt thường) TCVN 10116-1 (ISO 8292-1), Dầu mỡ động vật thực vật - Xác định hàm lượng chất béo dạng rắn phổ cộng hưởng từ hạt nhân tạo xung (NMR) - Phần 1: Phương pháp trực tiếp Thuật ngữ định nghĩa Trong tiêu chuẩn sử dụng thuật ngữ định nghĩa TCVN 10116-1 (ISO 8292-1) Ký hiệu từ viết tắt f hệ số chuyển đổi (ngoại suy) để hiệu tín hiệu NMR quan sát 11 s với tín hiệu thời điểm zero nP số lượng xung S1 tín hiệu phân rã từ hóa đo khoảng 11 s S2 tín hiệu phân rã từ hóa đo khoảng 70 s SFC hàm lượng chất béo dạng rắn SL tín hiệu phân rã từ hóa tương ứng với pha lỏng SS tín hiệu phân rã từ hóa tương ứng với pha rắn SS+L tín hiệu phân rã từ hóa tương ứng với pha lỏng lẫn pha rắn trep thời gian lặp lại wSFC,i SFC "thực" [đo theo TCVN 10116-2 (ISO 8292-2)] wSFC,T SFC nhiệt độ đo, T Nguyên tắc Mẫu làm ổn định đến trạng thái ổn định nhiệt độ cụ thể, sau gia nhiệt, ổn định nhiệt độ đo Thơng thường nhiệt độ đo tất nhiệt độ sau: oC; oC; 10 oC; 15 oC; 20 oC; 25 oC; 27,5 oC; 30 oC; 32,5 oC; 35 oC; 37,5 oC; 40 oC; 45 oC; 50 oC; 55 o C; 60 oC, trừ có qui định khác Sau cân điện từ từ trường tĩnh máy đo phổ NMR áp dụng xung tần số radio 90 o đo tín hiệu phân rã từ, từ proton pha lỏng tính hàm lượng chất béo dạng rắn cách so sánh với mẫu chuẩn chứa toàn chất béo lỏng Với điều kiện phép đo chất béo lỏng thời điểm bắt đầu phép xác định SFC, kết hiển thị phương pháp trực tiếp Mẫu chuẩn triolein Mẫu chuẩn chất béo dạng lỏng phải chứa tối thiểu 99 % phần khối lượng triolein Trị số peroxit xác định theo TCVN 6121 (ISO 3960) phải nhỏ Bảo quản dung dịch gốc triolein nhiệt độ oC Bảo quản ống chuẩn chứa triolein tủ lạnh nhiệt độ từ oC đến o C không sử dụng thay sau tuần Thiết bị, dụng cụ 7.1 Máy đo phổ cộng hưởng từ hạt nhân tạo xung (NMR), độ phân giải thấp Máy đo phổ NMR phải có: a) nam châm có trường đồng đủ để đảm bảo chu kỳ bán rã từ tính mẫu chuẩn chất béo dạng lỏng dài 000 s; b) đo tự động tiến hành đo sớm tốt đưa ống đo vào (6.2.1) d) thời gian lặp lại phép đo điều chỉnh được; e) cuvet 10 mm/đầu dò để đo ống nhiệt độ kiểm soát 40 oC; Tốt thiết bị trang bị máy tính tự động để thực phép đo theo yêu cầu, tiến hành tính kết biểu thị kết trực tiếp hình máy tính cách hiển thị khác 7.2 Ống đo Ống đo làm thủy tinh có nắp đậy chất dẻo, có đường kính ngồi (10 ± 0,25) mm, chiều dày thành (0,9 ± 0,25) mm chiều dài 150 mm, theo qui định nhà sản xuất máy đo phổ NMR 7.3 Thiết bị trì nhiệt độ 7.3.1 Yêu cầu chung Về nguyên tắc, buồng kiểm sốt nhiệt độ (6.3.3) có lợi nồi cách thủy ống nghiệm khơng tiếp xúc với nước Thực tế, với giá nhôm nồi cách thủy ống nghiệm thời gian đáng kể để đạt đến nhiệt độ cài đặt Việc truyền nhiệt cải thiện khoang đựng ống nghiệm thổi khí khơ Các buồng khó kiểm sốt độ xác nồi cách thủy, việc kiểm soát điện tử đại cho độ chụm yêu cầu 7.3.2 Nồi cách thủy Nồi kiểm soát nhiệt độ (0 ± 0,1) oC, (60 ± 0,1) oC xác đến ± 0,1 oC, nhiệt độ đo nhiệt độ làm ổn định yêu cầu phụ thuộc vào qui trình đo chọn Ở nhiệt độ 60 oC, nhiệt độ đo, nồi ổn định nhiệt độ, buồng kiểm soát nhiệt độ (7.3.3) thay Mỗi nồi cách thủy phải trang bị giá nhôm (7.3.2.1) giá kim loại (7.3.2.2) để giữ ống đo (7.2) chìm nước đến độ sâu 60 mm Giá kim loại tốt nhôm, đặc biệt cần đo lượng lớn mẫu thử có SFC cao sử dụng qui trình đo nhanh cực nhanh Khi sử dụng giá nhơm, chờ khoảng thời gian đáng kể sau đưa ống đo vào trước chất béo ống đạt nhiệt độ cài đặt nồi cách thủy Tác dụng giá giữ ống nghiệm khơ khơng cần phải lau khô giấy lau trước đưa vào máy đo phổ Tuy nhiên thực tế, ống cần làm khô nước bắn ngưng tụ nước, xem Điều 7.3.2.1 Giá nhôm, có đường kính lỗ (10,35 ± 0,1) mm, sâu 70 mm Chiều dày kim loại lỗ khoảng cách mép lỗ ngoại biên bề mặt cạnh gần phải 10 mm Khoảng cách trục hai lỗ liền kề 17 mm (từ tâm đến tâm) 7.3.2.2 Giá kim loại, cạnh mở, có đường kính lỗ từ 11 mm đến 15 mm; khoảng cách trục hai lỗ liền kề 20 mm (từ tâm đến tâm) 7.3.3 Buồng kiểm sốt nhiệt độ, có lỗ Buồng có điều khiển điện tử, trì nhiệt độ cài đặt ± 0,1 oC Các buồng sử dụng thay cho nồi cách thủy [trừ nồi oC, cần làm mát lượng lớn] Đường kính lỗ phải (10,35 ± 0,1) mm Các buồng đặc biệt thích hợp với nhiệt độ 35 oC cao không cần làm mát (giả sử nhiệt độ phòng thấp 22 oC) kiểm sốt nhiệt độ xác không cần thiết mức chất béo dạng rắn thấp 7.4 Tủ sấy, có quạt Tủ sấy trì nhiệt độ (80 ± 2) oC Mục đích tủ làm tan chảy phần mẫu thử hủy bỏ trình gia nhiệt trước mẫu, nhiệt độ phải cao nhiệt độ nóng chảy chất béo, 20 oC Nếu không, cần tăng dần nhiệt độ tủ ghi lại nhiệt độ thực tế báo cáo thử nghiệm (Điều 12) Điều xảy chất béo có chứa lượng lớn axit béo bão hòa mạch dài, ví dụ: dầu thực vật dạng lỏng hydro hóa hồn tồn Mặc dù sử dụng nồi cách thủy (7.3.2) buồng kiểm soát nhiệt độ (7.3.3) đạt nhiệt độ 80 oC tốt sử dụng tủ sấy Trong buồng kiểm soát nhiệt độ nồi cách thủy hầu hết tránh chất béo tiếp xúc với thành, nhiệt độ phía phần nhúng chìm ống nghiệm đổ đầy mẫu Tủ sấy cần đảm bảo tất chất béo đựng ống nghiệm tan chảy hồn tồn khơng hạt kết tinh Do đó, sử dụng tủ kết lặp lại đáng tin cậy 7.5 Đồng hồ bấm Đồng hồ có kim giây dải quét rộng tốt nhất, sử dụng đồng hồ điện tử Lấy mẫu Mẫu gửi đến phòng thử nghiệm phải mẫu đại diện không bị hư hỏng thay đổi suốt trình bảo quản vận chuyển Việc lấy mẫu khơng quy định tiêu chuẩn Nên lấy mẫu theo TCVN 2625 (ISO 5555) Tiến hành 9.1 Qui trình đo mẫu thử Chọn qui trình đo từ Bảng theo loại mẫu yêu cầu khác Đối với số loại mẫu ứng dụng chất béo qui trình nêu Bảng khơng thích hợp Có thể qui trình đo nêu Phụ lục C phù hợp Chuẫn bị mẫu thử theo TCVN 6128 (ISO 661) 9.2 Tủ sấy, nồi cách thủy buồng kiểm soát nhiệt độ Cài đặt thiết bị nhiệt độ yêu cầu qui định qui trình chọn 9.3 Máy đo phổ NMR Cài đặt điều kiện cho máy đo phổ theo qui trình đo chọn 9.1 9.4 Làm đầy ống đo Làm đầy hai ống đo mẫu thử Ngoài ra, làm đầy hai ống đo mẫu đối chứng triolein (Điều 6) Phương pháp gián tiếp có độ lặp lại thấp phương pháp trực tiếp nên dùng hai ống để thu độ lặp lại cho hai phương pháp Bảng - Các qui trình đo Qui trình đo Số a Tên Áp dụng cho Làm ổn định Lần thứ Lần thứ o hai oC Điều kiện thiết bị C Thời gian Nhiệt độ o h C 1l Chất béo hỗn hợp (chứa chủ Thời gian nhắc lạia, yếu chất béo thực vật, hydro t = s; hóa và/hoặc este hóa) kết tinh rep Ổn định số lượng xungb, dạng '-polymorph dùng trực tiếp cho magarin, chất béo dạng phết, np = shortening ứng dụng khác cho thực phẩm - 2l Bơ cacao, loại tương đương bơ Thời gian nhắc lạia, cacao chất béo tương tự có trep = s; -ổn định chứa lượng lớn 2-oleo-ditrực tiếp triacyglycerol bão hòa làm kết số lượng xungc, tinh dạng -polymorph np = (90 ± 2) - (40 ± 0,5) 26 Điều kiện đo Kiểu Thời gian (60 ± 2) Theo dãy (30 ± 1) (90 ± 2) Theo dãy (60 ± 2) Cần đến s chất béo dạng -polymorph b Dữ liệu xung lấy trung bình theo thiết bị Tốt sử dụng ba xung, vài thiết bị cũ đặt bốn xung (12 22), trường hợp sử dụng bốn xung c Sử dụng ba xung cho thời gian đủ để làm tan chảy phần mẫu thử SFC giảm cuvet đo suốt trình đo Đổ đầy ống đến độ sâu khoảng 10 mm theo qui định nhà sản xuất thiết bị CHÚ THÍCH: Với phương pháp gián tiếp nên sử dụng độ sâu 10 mm, khuyến cáo nhà sản xuất thiết bị cần có miếng đệm khác để nâng ống lên, cho tất phần thử nằm ống xoắn thu nhận máy đo phổ NMR Thực tế, tất ống đổ đầy đến chiều cao, cho kết có độ sai lệch nhỏ, ống làm đầy theo cách dùng cho phương pháp trực tiếp, nghĩa đổ đầy đến độ sâu 30 mm đến 50 mm sử dụng miếng đệm Đậy ống đặt lên giá để giữ ống thẳng đứng Nếu dùng giá kim loại (7.3.2.2) thuận tiện tiết kiệm thời gian đặt ống làm đầy trực tiếp vào giá Các phần mẫu thử chuyển vào tủ cho vào nồi cách thủy mà không cần dịch chuyển xử lý tiếp 9.5 Loại bỏ nhiệt trước Khi tất ống làm đầy theo yêu cầu, chuyển ống vào tủ (7.4) Giữ nhiệt độ tủ 15 9.6 Cân nhiệt độ ban đầu đo tín hiệu mẫu chất lỏng 100 % Chuyển tất ống vào nồi cách thủy 60 oC (7.3.2) buồng kiểm soát nhiệt độ (7.3.3) Giữ tối thiểu 15 Thời gian dài khơng ngắn hơn, khơng khơng thể đạt cân hồn tồn Đối với tất phần mẫu thử mẫu chuẩn triolein (Điều 6), ghi lại tín hiệu phân rã từ hóa chất lỏng đo khoảng 70 s, S2 Nếu có phần mẫu thử chưa hồn tồn hóa lỏng cần lặp lại qui trình đo sử dụng nhiệt độ 60 oC, nhiệt độ phần mẫu thử biết hóa lỏng hồn toàn 9.7 Kết tinh ổn định nhiệt Từ giai đoạn trở đi, tất thời gian phải trì dung sai qui định qui định qui trình đo Nếu chọn theo qui trình đo, chuyển ống vào nồi cách thủy oC Để ống nồi cách thủy nhiệt độ oC khoảng thời gian qui định cột "lần thứ oC" qui trình đo Nếu chọn theo qui trình đo, chuyển ống sang nồi cách thủy ổn định nhiệt cài đặt nhiệt độ qui định Để yên nồi cách thủy khoảng thời gian qui định Bắt đầu với triolein đối chứng, khoảng thời gian (1,0 ± 0,5) min, chuyển ống vào nồi cách thủy oC Để nồi cách thủy oC thời gian qui định cột "lần thứ hai oC" qui trình đo 9.8 Đo SFC Đối với phép đo gián tiếp, tiến hành phép đo theo dãy Ở khoảng thời gian (1,0 ± 0,5) min, theo xác trình tự đặt vào nồi cách thủy o C, chuyển hai ống chứa phần mẫu thử sang nồi cách thủy buồng kiểm soát nhiệt độ đo thấp CHÚ THÍCH: Kinh nghiệm cho thấy rằng, dễ dàng chuyển ống thử khỏi nồi cách thủy nồi cách thủy kiểm soát nhiệt độ vào máy đo phổ tiến hành đo khoảng 15 s Do đó, tiến hành hai ống vòng Sau thời gian qui định qui trình đo, tiếp tục theo xác trình tự, chuyển ống vào máy đo phổ Lau nhanh ống giấy lụa mềm để loại hết nước, trước đặt vào cuvet đo Ghi lại số đọc SFC (hoặc tính tự động ghi lại tín hiệu phân rã từ hóa chất lỏng đo khoảng 70 s, S2) Nếu máy đo phổ NMR không trang bị máy tính, ống mẫu chuẩn triolein đo lần đầu tiên, giá trị SFC hiển thị theo cách phương pháp trực tiếp Chuyển ống đo chứa phần mẫu thử vào nồi cách thủy đo nhiệt độ buồng kiểm soát nhiệt độ thứ hai (sau nhiệt độ đo thấp nhất) khoảng thời gian (1,0 ± 0,5) Lặp lại qui trình đo từ đoạn hai đến tất ống đo Nếu cần, tính SFC sử dụng Cơng thức (1) (xem Điều 10) ĐIỀU QUAN TRỌNG - Để có kết đáng tin cậy tái lập cần tuân thủ thời gian dung sai qui định Điều dễ đạt cách sử dụng đồng hồ bấm phòng thử nghiệm (6.5), tốt dùng đồng hồ có kim giây dải quét rộng, lấy ống kim giây quay vòng Ngồi ra, sử dụng đồng hồ điện tử nên cài đặt 0:00 12:00 để bắt đầu 9.9 Số phép xác định Thực hai phép xác định (9.4) phần mẫu thử riêng rẽ từ mẫu thử 9.10 Lau ống đo Trước đổ đầy phần mẫu thử, ống đo phải sạch, khơ khơng có chất béo từ phép đo trước Do đường kính ống hẹp nên việc làm thường khó khăn Thường sử dụng dung mơi bàn chải nhỏ Các ống làm máy rửa tự động phòng thử nghiệm máy rửa gia dụng chuẩn Tuy nhiên, để làm hiệu cần đảm bảo ống hồn tồn khơng có chất béo giữ thẳng đứng máy rửa Có thể thực sau: Sử dụng máy rửa phòng thử nghiệm có dụng cụ rửa chuyên dụng phù hợp với ống bơm dung dịch rửa nóng vào bên Hoặc sử dụng máy rửa khơng có dụng cụ rửa chun dụng, có giá đựng ống nghiệm lưới có khe hở Giá đựng cần có nắp đậy lưới kim loại để giữ ống nghiệm giá úp xuống Việc sử dụng giá tiện lợi cho phép đo tiếp theo, ống úp trực tiếp xuống giá sau giá đầy ống đặt vào tủ nhiệt độ 80 oC chất béo tan chảy rửa hồn tồn Khi úp xuống, giá chuyển vào máy rửa Sau rửa sấy khơ, giá đựng ống sử dụng làm giữ ống ống lấy bảo quản để sẵn sàng dùng lại 10 Biểu thị kết Nếu máy đo phổ NMR không trang bị máy tính dụng cụ tính tốn tự động khác để đọc kết sử dụng tín hiệu ghi lại để tính SFC nhiệt độ cho, wSFC,T, tính theo phần trăm phần khối lượng, sử dụng Công thức (1): wSFC ,T S 2, ref ,60 S 2, SFC ,T S 2, SFC ,60 S 2, ref ,T 100 (1) Trong đó: S2,ref,60 tín hiệu phân rã từ hóa triolein đối chứng sử dụng nồi cách thủy buồng kiểm soát nhiệt độ 60 oC, đo khoảng 70 s; S2,ref,T tín hiệu phân rã từ hóa triolein đối chứng nhiệt độ đo, đo khoảng 70 s; S2,SFC,60 tín hiệu phân rã từ hóa phần thử sử dụng nồi cách thủy buồng kiểm soát nhiệt độ 60 oC, đo khoảng 70 s; S2,SFC,T tín hiệu phân rã từ hóa phần thử nhiệt độ đo, đo khoảng 70 s Chi tiết lý thuyết xem Phụ lục B Biểu thị kết trung bình cộng hai phép xác định (9.9) đáp ứng yêu cầu độ lặp lại (11.2) giá trị wSFC,T Báo cáo kết đến chữ số thập phân 11 Độ chụm 11.1 Phép thử liên phòng thử nghiệm Chi tiết phép thử liên phòng thử nghiệm độ chụm phương pháp nêu Phụ lục A Các giá trị thu từ phép thử liên phòng thử nghiệm khơng áp dụng cho dải SFC chất béo khác với dải SFC chất béo nêu Có liệu không đầy đủ tiến hành đánh giá thống kê theo TCVN 6910-1 (ISO 5725-1) TCVN 6910-2 (ISO 5725-2) Do đó, Phụ lục A đưa kết thực 11.2 Độ lặp lại Có liệu không đầy đủ tiến hành đánh giá thống kê trung bình theo TCVN 6910-1 (ISO 5725-1) TCVN 6910-2 (ISO 5725-2) 11.3 Độ tái lập Có liệu khơng đầy đủ tiến hành đánh giá thống kê trung bình theo TCVN 6910-1 (ISO 5725-1) TCVN 6910-2 (ISO 5725-2) 12 Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải nêu rõ: a) thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ mẫu thử; b) chi tiết máy đo phổ NMR sử dụng; c) phương pháp sử dụng, viện dẫn tiêu chuẩn này; d) qui trình đo sử dụng; e) nhiệt độ đo sử dụng; f) nồi cách thủy có giá nhơm, nồi cách thủy có giá kim loại buồng kiểm soát nhiệt độ dùng để kiểm soát nhiệt độ; g) kết thu được; h) chi tiết thao tác không quy định tiêu chuẩn xem tùy chọn, với tình bất thường ảnh hưởng đến kết Phụ lục A (Tham khảo) Kết phép thử liên phòng thử nghiệm Bảng A.1 - Kết tất phòng thử nghiệm - Qui trình đo 1l Dầu đậu Hỗn hợp Hỗn hợp Stearin dầu tương shortening, shortening, cọ hydro hóa (nguyên nguyên liệu (D) liệu cứng) cứng (A) qua qua trình hydro trình este hóa hóa lại (B) (C) Dầu dừa (E) Dầu cọ/hỗn hợp stearin dầu cọ (F) Điểm nóng chảy ~ 37 oC ~ 40 oC ~ 40 oC - - ~ 45 oC Trị số iốt - - - ~7 - - Số phòng thử Mẫu nghiệm 10 oC 76,6 10 oC 72,8 72,6 66,0 66,3 72,1 72,5 97,2 97,3 75,8 75,4 56,7 56,5 13 10 oC 78,4 78,8 67,6 67,5 77,9 77,9 96,0 96,1 81,8 81,5 57,1 57,4 15 10 oC 89,5 89,9 83,9 84,4 85,5 87,0 100,0 100,0 92,5 93,1 79,4 79,6 17 10 oC 80,9 81,2 71,2 71,0 80,0 80,0 96,4 96,3 84,0 83,8 61,9 61,8 18 10 oC 78,0 78,3 65,9 66,1 77,7 77,8 96,8 96,8 81,4 81,5 55,3 55,1 21 10 oC 52,0 51,6 23 10 oC 20 oC 56,7 20 oC 56,1 55,9 45,6 45,8 53,9 54,0 94,8 95,0 39,6 39,8 37,2 37,2 13 20 oC 55,9 56,2 44,9 44,8 54,2 54,3 94,9 94,8 36,1 36,6 37,1 37,1 15 20 oC 74,8 75,7 64,4 66,5 69,6 73,6 100,0 100,0 49,7 47,3 53,9 59,4 17 20 oC 59,3 59,6 48,5 48,3 57,2 56,8 95,2 95,1 40,0 40,0 39,8 40,1 18 20 oC 55,8 55,7 43,7 43,8 53,6 53,7 95,2 95,2 36,4 36,6 35,3 35,4 21 20 oC 27,1 25,9 78,3 78,6 77,7 75,0 91,2 91,3 70,5 69,9 80,6 80,8 23 20 oC 56,2 55,7 42,7 44,0 54,2 53,7 95,0 94,4 37,6 37,7 35,8 36,4 25 oC 43,1 85,0 25 oC 40,1 40,3 31,8 31,8 39,2 39,6 87,6 87,3 5,6 5,8 25,1 25,0 13 25 oC 40,7 41,0 32,1 31,9 40,7 40,7 83,5 83,8 0,4 0,6 25,8 26,0 15 25 oC 17 25 oC 42,8 43,1 33,9 33,7 42,4 42,3 84,9 85,0 2,5 2,2 27,0 27,2 18 25 oC 41,5 41,5 32,1 32,0 40,4 40,5 84,1 84,6 1,7 1,7 25,4 25,5 21 25 oC 23,9 23,1 72,8 72,8 72,3 72,6 89,7 89,5 56,7 57,2 68,2 68,2 23 25 oC 43,0 42,4 32,7 33,8 41,3 41,1 84,8 84,9 -1,0 -0,8 26,9 27,7 30 oC 26,5 41,2 30 oC 22,6 22,5 19,7 19,6 24,6 24,5 48,2 48,2 0,0 0,0 15,6 15,6 13 30 oC 23,4 23,3 21,2 20,9 26,6 26,3 36,0 36,6 0,3 0,3 17,0 17,0 15 30 oC 37,1 38,1 33,8 37,3 40,9 44,6 47,6 47,3 2,5 0,6 30,1 34,3 17 30 oC 25,4 25,1 22,1 22,1 28,0 28,2 43,4 43,3 0,0 0,0 17,9 17,8 18 30 oC 24,7 24,7 21,3 21,4 26,5 26,7 36,6 37,1 0,2 0,1 16,8 16,8 21 30 oC 20,9 20,0 48,6 48,9 50,0 50,5 82,0 82,2 31,0 30,9 41,0 41,4 23 30 oC 26,7 26,3 22,4 23,6 28,1 27,8 40,6 40,0 -2,7 -2,3 19,1 19,5 35 oC 14,0 4,2 35 oC 8,4 65,4 43,8 30,0 20,2 13,6 8,3 75,8 53,8 40,5 27,1 18,1 10,5 10,6 12,9 13,0 95,7 78,9 94,3 2,6 55,0 38,0 35,9 2,3 24,3 < 2,0 16,6 < 2,0 3,0 0,0 11,6 0,0 9,2 9,2 13 35 oC 9,4 12,2 12,3 15,0 14,9 2,9 3,0 0,0 0,2 10,9 10,9 15 35 oC 19,3 20,9 23,6 27,0 28,9 30,7 5,6 5,7 2,5 1,6 20,7 23,5 17 35 oC 10,6 10,7 13,2 12,9 16,6 26,3 4,3 4,0 0,0 0,0 11,3 11,4 18 35 oC 11,6 11,4 13,3 13,5 16,3 16,3 3,7 3,8 0,2 0,3 12,0 12,0 21 35 oC 16,3 15,0 2,2 32,7 33,8 1,6 2,0 4,4 4,6 23 35 oC 12,4 11,8 13,7 14,9 16,4 16,3 3,7 3,3 -2,1 -1,8 14,6 15,3 40 oC 3,7 40 oC 1,6 1,4 3,9 4,0 3,0 3,1 0,0 0,0 0,0 0,0 5,1 5,3 13 40 oC 1,6 1,5 4,6 4,8 5,0 5,2 0,1 0,0 0,0 0,2 6,7 6,6 15 40 oC 5,6 6,7 9,9 12,7 13,9 17,6 0,4 1,6 0,9 2,6 11,9 21,9 17 40 oC 1,6 1,7 4,9 4,5 5,2 5,4 0,0 0,0 0,0 0,0 6,1 6,0 18 40 oC 2,1 2,1 5,6 5,6 6,5 6,4 0,4 0,5 0,1 0,0 8,8 9,0 21 40 oC 11,8 10,8 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 23 40 oC 45 oC 5,9 45 oC 2,3 2,4 13 45 oC 4,6 4,6 15 45 oC 17 45 oC 3,3 3,5 18 45 oC 5,1 5,4 21 45 oC 23 45 oC 9,2 1,2 1,2 4,8 1,5 7,2 < 2,0 < 2,0 9,3 Bảng A.2 - Kết tất phòng thử nghiệm - Qui trình đo 2l Hỗn hợp Bơ cacao Bơ cacao, Bơ lllipe (mỡ Bơ cacao Dầu cọ dạng dầu loại Brazil loại Tây động vật loại chuẩn, miếng cọ/stearin mềm Phi chuẩn Borneo, chất wSFC,30 35 cứng/hạng dầu cọ béo CBE % đến 40 (G) (H) Tengkawang) % (F) (K) (I) (J) Điểm nóng chảy ~ 45 oC - - - - - Trị số iốt - - - ~7 - ~ 34 oC Số Mẫu phòng thử nghiệm F F 10 oC - - 15 o 10 C 64,4 64,3 G G H H I I J J K K 18 10 oC 52,3 51,9 21 10 oC 52,0 51,6 23 10 oC 20 oC 25,9 26,9 80,1 80,2 80,0 79,9 94,2 94,9 71,3 71,1 83,3 83,5 15 20 oC 36,9 39,1 86,6 86,8 87,6 87,8 96,9 97,0 80,4 79,7 87,6 87,6 18 20 oC 25,6 25,4 80,0 79,8 80,3 80,0 91,9 91,8 70,8 71,0 81,3 81,5 21 20 oC 27,1 25,9 78,3 78,6 77,7 75,0 91,2 91,3 70,5 69,9 80,6 80,8 23 20 oC 25,9 25,9 77,1 76,7 77,1 76,6 91,4 91,6 70,0 70,0 80,6 80,5 25 oC 24,5 24,5 75,6 76,0 75,6 76,6 93,5 92,8 59,7 59,3 71,9 71,9 15 25 oC 18 25 oC 22,4 22,4 73,2 73,0 73,6 73,6 90,0 90,0 56,6 56,8 69,8 69,7 21 25 oC 23,9 23,1 72,8 72,8 72,3 72,6 89,7 89,5 56,7 57,2 68,2 68,2 23 25 oC 23,1 23,1 72,5 72,0 72,6 72,0 89,9 90,0 57,6 58,0 68,9 68,7 30 oC 20,8 20,7 49,3 50,4 50,9 51,5 85,3 85,3 33,2 32,5 43,9 43,7 15 30 oC 28,7 31,8 52,7 51,3 59,9 60,4 89,8 90,0 30,0 29,9 46,5 45,5 18 30 oC 19,4 19,3 46,2 46,1 49,0 49,0 82,6 82,6 28,5 28,7 40,8 40,9 21 30 oC 20,9 20,0 48,6 48,9 50,0 50,5 82,0 82,2 31,0 30,9 41,0 41,4 23 30 oC 20,0 20,1 46,9 46,4 49,6 48,8 82,5 82,6 30,8 31,6 41,2 40,5 35 oC 16,0 16,0 < 2,0 < 2,0 < 2,0 < 2,0 36,5 36,5 2,2 2,0 4,7 5,5 15 35 oC 21,6 24,4 0,2 0,6 2,2 3,5 39,9 39,7 0,2 4,5 3,3 2,2 18 35 oC 14,4 14,2 0,4 0,1 1,5 1,7 37,7 37,1 1,0 1,3 4,4 3,8 21 35 oC 16,3 15,0 1,2 1,2 1,5 2,2 32,7 33,8 1,6 2,0 4,4 4,6 23 35 oC 14,9 15,0 -1,3 -1,4 -0,1 0,1 36,0 36,0 -0,3 -0,2 2,0 1,8 40 oC 11,5 11,3 < 2,0 < 2,0 < 2,0 < 2,0 < 2,0 < 2,0 < 2,0 < 2,0 < 2,0 15 40 oC 15,5 18,1 1,2 0,5 -0,9 7,6 1,2 2,5 -0,9 2,5 0,2 1,2 18 40 oC 10,1 10,1 0,2 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,1 0,0 0,0 21 40 oC 11,8 10,8 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 23 40 oC 45 oC 15 45 oC 18 45 oC 5,5 5,5 21 45 oC 7,5 6,3 23 45 oC - - Phụ lục B (Tham khảo) < 2,0 Lý thuyết phương pháp gián tiếp Xung tần số radio ngắn áp dụng làm quay từ trường qua 90 o, nghĩa vng góc với từ trường phổ biến áp dụng nam châm vĩnh cửu Phần lớn hồi phục spin-spin mà tín hiệu từ hóa detector phân rã vài trăm miligiây Hình B.1 CHÚ DẪN xung thời gian chết S tín hiệu phân rã từ đo S1 tín hiệu phân rã từ đo khoảng 11 s S2 tín hiệu phân rã từ đo khoảng 70 s SL tín hiệu phân rã từ tương ứng với pha lỏng sau khoảng 70 s SS tín hiệu phân rã từ tương ứng với pha rắn thời gian S’S tín hiệu phân rã từ tương ứng với pha rắn sau khoảng 11 s SS+L tín hiệu phân rã từ tương ứng với pha rắn pha lỏng thời gian S’S+L tín hiệu phân rã từ tương ứng với pha rắn pha lỏng sau khoảng 11 s t thời gian Hình B.1 - Độ phân rã tín hiệu từ hóa từ mẫu chất béo sau áp dụng xung tần số radio đơn 90o Độ phân rã tín hiệu từ proton trạng thái rắn xảy nhanh, xuất mười phần triệu giây, độ phân rã tín hiệu từ proton trạng thái lỏng phân rã chậm nhiều, xuất hàng chục đến hàng trăm phần triệu giây Thực tế, thiết bị bench-top bán sẵn có tín hiệu lỏng phân rã vài phần triệu giây Bằng kỹ thuật điện tử thích hợp, đo tín hiệu pha rắn cộng pha lỏng tín hiệu pha lỏng riêng rẽ, xác định SFC Tuy nhiên, Hình B.1 cho thấy thiết bị có thời gian chết sau xung khơng tiến hành đo Do đó, tín hiệu tổng S2 khơng thể đo mà đo S'S+L sau khoảng 11 s Máy đo phổ NMR ghi lại hai tín hiệu, S1 S2 khoảng 11 s 70 s, tương ứng với S'S+L SL Khi chất béo biết khơng dạng '-polymorph, ví dụ: bơ cacao ( ) salatrim1) ( ) chưa biết hình thái chúng phương pháp trực tiếp gây sai số đáng kể 1) Salatrim phân tử acyl triglycerit mạch ngắn mạch dài (xem Tài liệu tham khảo [6], trang 251-2) phép đo SFC Để khắc phục điều để tránh việc đánh giá khơng xác sử dụng hệ số f đo tín hiệu chất lỏng S2 phương pháp gián tiếp SFC nhiệt độ đo, wSFC,T, tính phần trăm khối lượng, đưa theo công thức (B.1): w SFC ,T nprot ,liq,T nprot ,liq,melt 100 (B.1) Trong đó: nprot,liq,T số proton pha lỏng nhiệt độ đo, T; nprot,liq,melt số proton pha lỏng nhiệt độ chất béo tan chảy hồn tồn Phép đo tín hiệu chất béo tan chảy hồn tồn phải xác độ giãn nở chất béo nhiệt độ, T, sử dụng dầu chuẩn (triolein), dạng lỏng tất nhiệt độ đo, Công thức (1) là: w SFC ,T S2,ref ,60 S2,SFC,T S2,SFC,60 S2,ref ,T 100 (1) Trong đó: S2,ref,60 tín hiệu phân rã từ hóa triolein chuẩn sử dụng nồi cách thủy buồng kiểm soát 60 oC, đo khoảng 70 s; S2,ref,T tín hiệu phân rã từ hóa triolein đối chứng nhiệt độ đo, đo khoảng 70 s; S2,SFC,60 tín hiệu phân rã từ hóa phần thử chuẩn sử dụng nồi cách thủy buồng kiểm soát nhiệt độ 60 oC, đo khoảng 70 s; S2,SFC,T tín hiệu phân rã từ hóa phần thử nhiệt độ đo, T, đo khoảng 70 s Có thể có sai số nhỏ mật độ proton chất đối chứng mẫu giống nhau, nghĩa chúng có thành phần axit béo triacylglycerol, thực tế bỏ qua phương pháp gián tiếp đưa phép xác định SFC tương đối xác Thậm chí, phương pháp trực tiếp ưu tiên xác hơn, cần dùng phương pháp gián tiếp để xác định hệ số hiệu chuẩn f chất béo -polymorphic đưa 8.3 TCVN 101161 (ISO 8292-1) Phụ lục C (Tham khảo) Các qui trình đo bổ sung Qui trình đo Số 3l Áp dụng cho Tên Chất béo Chất béo sữa phần chúng kết tinh hỗn hợp chứa chủ yếu chất béo chậm sữa; mỡ động vật thành phần chúng; hỗn hợp chứa chủ yếu mỡ động vật; chất béo kết tinh chậm khác Điều kiện thiết Lần thứ Làm ổn định Lần thứ bị hai oC Thời gian Nhiệt độ o C o C Thời gian nhắc lạia, - - Điều kiện đo Kiểu (16 ± 0,5) Theo dãy h trep = s; Thời gian (30 ± 2) số lượng xungb, np = 4l Chỉ số Chất béo hỗn hợp (chứa chủ Thời gian nhắc lạia, AOCS yếu chất béo thực vật, hydro trep = s; chất béo hóa và/hoặc este hóa) kết tinh c rắn dạng '-polymorph dùng cho số lượng xungb, margarin, chất béo dạng phết, n =3 shortening ứng dụng khác cho p thực phẩm (15 ± 1)d Áp dụng Hỗn hợp bơ cacao và/hoặc chất Thời gian nhắc lại cho sôcôla béo sữa và/hoặc tương tự bơ cacao trep = s; cần mô SFC thu sôcôla số lượng xung, (90 ± 2) (64 ± 0,5) h (30 ± 1) 26,7 20 (15 ± 1) Theo dãy (45 ± 2) 10,0 oC 21,1 oC 26,7 oC 33,3 oC 37,8 oC (90 ± 2) Theo dãy (30 ± 1) np = a Cần đến s chất béo dạng -polymorph b Dữ liệu thu từ xung lấy trung bình theo thiết bị Tốt nên sử dụng ba xung, vài thiết bị cũ cài đặt bốn xung (12 22), trường hợp sử dụng bốn xung c Áp dụng phương pháp làm ổn định theo phương pháp đo độ giãn nở AOCS để đo SFC gọi số chất béo rắn (phương pháp AOCS Cd 10-57) dùng để so sánh tốt SFC SFI, cần d Trước kết tinh lần thứ oC, giữ 26,7 oC (15 ± 1) THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] TCVN 2625 (ISO 5555) Dầu mỡ động vật thực vật - Lấy mẫu [2] TCVN 6910-1 (ISO 5725-1) Độ xác (độ độ chụm) phương pháp đo kết đo - Phần 1: Nguyên tắc định nghĩa chung [3] TCVN 6910-2 (ISO 5725-2) Độ xác (độ độ chụm) phương pháp đo kết đo - Phần 2: Phương pháp xác định độ lặp lại độ tái lập phương pháp đo tiêu chuẩn [4] GRIBNAU, M.C.M Determination of solid/liquid ratios of fats and oils by low-resolution pulsed NMR Trend Food Sci Technol 1992, 3, p 186-190 [5] SHUKLA, V.K.S Studies on the crystallization behaviour of the cocoa butter equivalents by pulsed nuclear magnetic resonance - Part 1: Fette Seifen Anstrichmittel, 1983, 85, p 467-471 [6] TIMMS, R.E Chapter 4, Section A In: Confectionery fats handbook, p 63-78 Oily Press, Bridgwater, 2003 [7] VAN DUYNHOVEN, J., DUBOURG, I., G-J GOUDAPPEL, G-J., ROIJERS, E Determination of MG and TG phase composition by time-domain NMR J Am Oil Chem Soc 2002, 79, p 383388 [8] WADDINGTON, D Some applications of wide-line NMR in the oils and fats industry In: HAMILTON, R.J., BHATI, A., editors Fas and oils: Chemistry and technology, p 25-45 Applied Science Publishers, London, 1980 [9] AOCS method Cd 10-57, Solid fat index ... theo TCVN 691 0-1 (ISO 572 5-1 ) TCVN 691 0-2 (ISO 572 5-2 ) Do đó, Phụ lục A đưa kết thực 11.2 Độ lặp lại Có liệu không đầy đủ tiến hành đánh giá thống kê trung bình theo TCVN 691 0-1 (ISO 572 5-1 ) TCVN. .. 691 0-1 (ISO 572 5-1 ) TCVN 691 0-2 (ISO 572 5-2 ) 11.3 Độ tái lập Có liệu không đầy đủ tiến hành đánh giá thống kê trung bình theo TCVN 691 0-1 (ISO 572 5-1 ) TCVN 691 0-2 (ISO 572 5-2 ) 12 Báo cáo thử nghiệm... (H) Tengkawang) % (F) (K) (I) (J) Điểm nóng chảy ~ 45 oC - - - - - Trị số iốt - - - ~7 - ~ 34 oC Số Mẫu phòng thử nghiệm F F 10 oC - - 15 o 10 C 64,4 64,3 G G H H I I J J K K 18 10 oC 52,3 51,9