Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 10132:2013 về Phomat whey - Xác định hàm lượng chất béo - Phương pháp khối lượng (phương pháp chuẩn) quy định phương pháp chuẩn để xác định hàm lượng chất béo trong phomat whey. Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết.
TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 10132:2013 ISO 1854:2008 PHOMAT WHEY - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CHẤT BÉO - PHƯƠNG PHÁP KHỐI LƯỢNG (PHƯƠNG PHÁP CHUẨN) Whey cheese - Determination of fat content - Gravimetric method (Reference method) Lời nói đầu TCVN 10132:2013 hoàn toàn tương đương với ISO 1854:2008; TCVN 10132:2013 Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F12 Sữa sản phẩm sữa biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học Công nghệ công bố PHOMAT WHEY - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CHẤT BÉO - PHƯƠNG PHÁP KHỐI LƯỢNG (PHƯƠNG PHÁP CHUẨN) Whey cheese - Determination of fat content - Gravimetric method (Reference method) CẢNH BÁO - Khi áp dụng tiêu chuẩn liên quan đến vật liệu, thiết bị thao tác gây nguy hiểm Tiêu chuẩn đưa hết vấn đề an toàn liên quan đến việc sử dụng chúng Người sử dụng tiêu chuẩn phải tự thiết lập thao tác an tồn thích hợp xác định khả áp dụng giới hạn quy định trước sử dụng tiêu chuẩn Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn quy định phương pháp chuẩn để xác định hàm lượng chất béo phomat whey Tiêu chuẩn không áp dụng cho sản phẩm không hòa tan hồn tồn dung dịch amoniac sản phẩm chứa lượng đáng kể axit béo tự CHÚ THÍCH: Nếu phomat whey khơng hòa tan hồn tồn dung dịch amoniac chúng chứa lượng đáng kể axit béo tự (ngoại trừ số trường hợp, nhận biết rõ qua khác biệt mùi), kết phép xác định thấp Đối với sản phẩm này, phương pháp sử dụng nguyên tắc Weibull-Berntrop thích hợp [xem TCVN 6688-3 (ISO 82623)[3]] Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn Đối với tài liệu viện dẫn ghi năm cơng bố áp dụng phiên nêu Đối với tài liệu viện dẫn khơng ghi năm cơng bố áp dụng phiên nhất, bao gồm sửa đổi, bổ sung (nếu có) TCVN 7150 (ISO 835), Dụng cụ thí nghiệm thủy tinh - Pipet chia độ TCVN 7153 (ISO 1042), Dụng cụ thí nghiệm thủy tinh - Bình định mức TCVN 8488 (ISO 4788), Dụng cụ thí nghiệm thủy tinh - Ống đong chia độ TCVN 9966 (ISO 3889), Sữa sản phẩm sữa - Yêu cầu kĩ thuật bình chiết chất béo kiểu Mojonnier Thuật ngữ định nghĩa Trong tiêu chuẩn áp dụng thuật ngữ định nghĩa sau: 3.1 Hàm lượng chất béo phomat whey (fat content of whey cheese) Phần khối lượng chất xác định quy trình quy định tiêu chuẩn CHÚ THÍCH: Hàm lượng chất béo biểu thị phần trăm khối lượng Nguyên tắc Dung dịch mẫu thử etanol amoniac chiết diethyl ete dầu nhẹ Loại bỏ dung môi cách chưng cất cho bay Xác định khối lượng chất chiết CHÚ THÍCH: Nguyên tắc thường gọi nguyên tắc Röse-Gottlieb Thuốc thử Chỉ sử dụng thuốc thử loại tinh khiết phân tích, trừ có quy định khác sử dụng nước cất nước khử khống nước có chất lượng tương đương Tất thuốc thử phép để lại lượng cặn không đáng kể thực phép xác định theo phương pháp quy định (xem 9.2.2) 5.1 Dung dịch amoniac, chứa NH3 khoảng 25 % khối lượng ( 20 = 910 g/l) CHÚ THÍCH: Nếu khơng sẵn có dung dịch amoniac nồng độ sử dụng dung dịch đậm đặc biết nồng độ 5.2 Etanol (C2H5OH) etanol bị biến tính metanol, chứa 94 % (thể tích) etanol (xem A.5) 5.3 Dung dịch đỏ Congo Hòa tan g đỏ Congo (C32H22N6Na2O6S2) vào nước đựng bình định mức vạch 100 ml (6.14) Thêm nước đến vạch CHÚ THÍCH: Dung dịch giúp quan sát rõ lớp phân cách dung môi lớp nước, việc sử dụng dung dịch tùy chọn (xem 9.4.4) Có thể sử dụng dung dịch thị khác có dung mơi nước, với điều kiện không ảnh hưởng đến kết phép xác định 5.4 Dietyl ete (C2H5OC2H5), không chứa peroxit (xem A.3), có hàm lượng chất chống oxy hóa khơng q mg/kg, phù hợp với yêu cầu phép thử trắng (xem 9.2.2, A.1 A.4) CẢNH BÁO - Việc sử dụng dietyl ete dẫn đến tình nguy hiểm Cần tuân thủ cảnh báo an toàn việc thao tác, sử dụng thải bỏ dietyl ete 5.5 Dầu nhẹ, có dải sôi từ 30 0C đến 60 0C pentan [CH3(CH2)3CH3] có điểm sơi 36 0C phù hợp với yêu cầu phép thử trắng (xem 9.2.2, A.1 A.4) Nên sử dụng pentan pentan có độ tinh khiết cao chất lượng ổn định 5.6 Dung môi hỗn hợp Ngay trước sử dụng, trộn thể tích dietyl ete (5.4) dầu nhẹ (5.5) Thiết bị, dụng cụ CẢNH BÁO - Vì phép xác định buộc phải sử dụng dung môi bay dễ cháy, nên thiết bị điện dùng phải tuân theo quy định an tồn sử dụng dung mơi Sử dụng thiết bị, dụng cụ thơng thường phòng thử nghiệm thiết bị, dụng cụ sau: 6.1 Cân phân tích, cân xác đến mg, đọc đến 0,1 mg 6.2 Máy ly tâm, ly tâm bình ống chiết chất béo (6.6) quay với tốc độ từ 500 r/min đến 600 r/min để tạo gia tốc quay khoảng 80g đến 90g miệng bình chiết ống chiết Việc sử dụng máy ly tâm tùy chọn, khuyến cáo sử dụng loại thiết bị (xem 9.4.7) 6.3 Thiết bị chưng cất thiết bị làm bay hơi, để chưng cất dung mơi etanol khỏi bình nón bình đun sôi, để làm bay từ cốc có mỏ đĩa (xem 9.4.14) nhiệt độ khơng 100 0C 6.4 Tủ sấy, đốt nóng điện, có cửa thơng gió mở hồn tồn, trì nhiệt độ 102 0C ± 0C toàn khoang sấy Tủ phải gắn với nhiệt kế thích hợp 6.5 Nồi cách thủy, trì nước điểm sơi 6.6 Bình chiết chất béo kiểu Mojonnier, quy định TCVN 9966 (ISO 3889) CHÚ THÍCH: Cũng dùng ống nghiệm chiết chất béo, có si phơng nối với chai rửa, quy trình có khác nêu Phụ lục B Các bình phải đậy nút bần chất lượng tốt dùng nắp làm vật liệu khác (ví dụ: cao su silicon polytetraflouroetylen) không bị ảnh hưởng thuốc thử sử dụng Nút bần chiết dietyl ete (5.4), ngâm nước nhiệt độ 60 0C nhiệt độ lớn 15 min, sau làm nguội nước cho chúng bão hòa nước sử dụng 6.7 Giá, để giữ bình (hoặc ống) chiết chất béo (6.6) 6.8 Chai rửa, thích hợp để dùng với dung mơi hỗn hợp (5.6) Khơng dùng chai rửa làm chất dẻo 6.9 Bình thu nhận chất béo, như: bình đun sơi (đáy phẳng), có dung tích từ 125 ml đến 250 ml, bình nón có dung tích 250 ml đĩa kim loại Nếu sử dụng đĩa kim loại đĩa phải làm vật liệu thép không gỉ, đáy phẳng, đường kính từ 80 mm đến 100 mm, chiều cao khoảng 50 mm 6.10 Hạt trợ sôi, không chứa chất béo, sứ không xốp silic cacbua (tùy chọn trường hợp dùng đĩa kim loại) 6.11 Ống đong, dung tích ml 25 ml, phù hợp với loại A TCVN 8488 (ISO 4788) dụng cụ khác phù hợp với sản phẩm có liên quan 6.12 Pipet chia vạch, dung tích 10 ml, phù hợp với loại A TCVN 7150 (ISO 835) 6.13 Bộ kẹp, kim loại để giữ bình, cốc có mỏ đĩa 6.14 Thiết bị nghiền thích hợp 6.15 Bình định mức vạch, dung tích 100 ml, phù hợp với loại A TCVN 7153 (ISO 1042) Lấy mẫu Mẫu gửi đến phòng thử nghiệm phải mẫu đại diện Mẫu không bị hư hỏng thay đổi suốt trình vận chuyển bảo quản Việc lấy mẫu không quy định tiêu chuẩn Nên lấy mẫu theo TCVN 6400 (ISO 707) [1] Chuẩn bị mẫu thử Sử dụng thiết bị thích hợp (6.14) để chuẩn bị mẫu thử Trộn nhanh mẫu phomat nghiền xay nghiền lần thứ hai, cần Trộn kỹ lại lần Làm thiết bị sau lần chuẩn bị mẫu Nếu mẫu thử khơng thể nghiền xay trộn kỹ cách nhào trộn mạnh ví dụ cối chày Chú ý để thất ẩm mẫu q trình nghiền xay tốt Bảo quản mẫu thử vật chứa kín khí phân tích, nên tiến hành phân tích ngày chuẩn bị Nếu chưa thể thực phân tích phải ý bảo quản mẫu thử cách Nếu bảo quản lạnh phải đảm bảo tất ẩm ngưng tụ thành vật chứa kết hợp hết vào mẫu thử 9 Cách tiến hành CHÚ THÍCH 1: Nếu cần kiểm tra đáp ứng yêu cầu giới hạn độ lặp lại (11.2) thực hai phép xác định đơn lẻ theo 9.1 đến 9.4 CHÚ THÍCH 2: Quy trình thay khác sử dụng ống chiết chất béo có gắn si phơng chai rửa (xem Chú thích 6.6) nêu Phụ lục B 9.1 Phần mẫu thử Trộn mẫu thử (Điều 8) cách khuấy trộn nhẹ cách quay đảo chiều vật chứa mẫu vài lần Cân 3,000 g mẫu thử chuẩn bị, xác đến mg, cho trực tiếp gián tiếp vào bình chiết chất béo (6.6) Chuyển phần mẫu thử triệt để tốt sang bầu (bầu nhỏ) bình chiết chất béo 9.2 Phép thử trắng 9.2.1 Phép thử trắng phương pháp Tiến hành phép thử trắng đồng thời với phép xác định, sử dụng quy trình dùng loại thuốc thử thay phần mẫu thử hòa tan nêu 9.4.1 10 ml nước (xem A.2) Khi sử dụng mẫu trắng cho mẻ mẫu thử gồm mẫu riêng khơng có điều kiện giống hệt nhau, cần đảm bảo quy trình dùng để thu giá trị trắng sử dụng công thức tính kết hồn tồn tương đương với quy trình thực mẫu riêng Khi giá trị thu phép thử trắng vượt 1,0 mg kiểm tra thuốc thử trước chưa kiểm tra (9.2.2) Việc điều chỉnh giá trị lớn 2,5 mg cần nêu báo cáo thử nghiệm 9.2.2 Phép thử trắng thuốc thử Để kiểm tra chất lượng thuốc thử, tiến hành phép thử trắng theo 9.2.1 Ngồi ra, sử dụng bình thu nhận chất béo rỗng, chuẩn bị theo 9.3 cho mục đích kiểm sốt khối lượng Thuốc thử khơng để lại dư lượng 1,0 mg (xem A.1) Nếu dư lượng toàn phép thử trắng thuốc thử vượt 1,0 mg xác định dư lượng dung môi riêng rẽ cách chưng cất tương ứng 100 ml dietyl ete (5.4) dầu nhẹ (5.5) Sử dụng bình thu nhận chất béo rỗng dùng cho mục đích kiểm sốt đoạn nêu để thu khối lượng thực dư lượng không vượt q 1,0 mg Rất dung mơi chứa chất bay bị giữ lại nhiều chất béo Nếu có mặt chất tiến hành phép thử trắng tất thuốc thử dung môi, sử dụng bình thu nhận chất béo với khoảng g butterfat khan Nếu cần, chưng cất lại dung mơi với có mặt g butterfat khan cho 100 ml dung môi Sử dụng dung môi khoảng thời gian ngắn sau dung môi chưng cất lại Thay thuốc thử dung mơi khơng thích hợp chưng cất lại dung mơi 9.3 Chuẩn bị bình thu nhận chất béo Làm khơ bình thu nhận chất béo (6.9) vài hạt trợ sôi (6.10) tủ sấy (6.4) trì 102 C h CHÚ THÍCH 1: Hạt trợ sơi để giúp cho sơi nhẹ suốt q trình loại bỏ dung mơi, đặc biệt trường hợp sử dụng bình thu nhận chất béo thủy tinh: tùy ý sử dụng trường hợp dùng đĩa kim loại Để bình thu nhận chất béo nguội đến nhiệt độ phòng cân, tránh bụi (bình thủy tinh để h, đĩa kim loại 30 min) Khơng nên đặt bình thu nhận chất béo bình hút ẩm để tránh chưa đủ nguội thời gian làm nguội bị kéo dài Dùng kẹp (6.13) đặt bình thu nhận chất béo lên cân Cân bình xác đến mg CHÚ THÍCH 2: Dùng kẹp để tránh làm thay đổi nhiệt độ 9.4 Phép xác định 9.4.1 Thực phép xác định sau chuẩn bị mẫu thử Thêm 10 ml nước gia nhiệt trước nhiệt độ 65 0C ± 0C vào phần mẫu thử bình chiết chất béo (9.1) để thu tổng thể tích từ 10 ml đến 11 ml Dùng nước để rửa hết phần mẫu thử vào bầu nhỏ bình chiết chất béo Trộn kỹ với phần mẫu thử bầu nhỏ 9.4.2 Làm nóng lượng chứa bình chiết chất béo nồi cách thủy sôi (6.5) Thỉnh thoảng lắc nhẹ phần mẫu thử phân tán hồn tồn Để n bình chiết 20 nồi cách thủy sơi Sau làm nguội bình dòng nước chảy đến nhiệt độ phòng 9.4.3 Thêm ml dung dịch amoniac (5.1) thể tích tương đương dung dịch amoniac đặc (xem Chú thích 5.1) vào bình chiết chất béo Trộn kỹ với phần mẫu thử bầu nhỏ bình chiết 9.4.4 Thêm 10 ml etanol (5.2) Trộn kỹ cách cho lượng chứa bình chiết chất béo chảy chảy lại nhẹ nhàng bầu nhỏ bầu lớn Không chất lỏng dâng lên gần cổ bình Tốt thêm giọt dung dịch đỏ Congo (5.3) Làm nguội bình chiết dòng nước chảy nhiệt độ phòng, cần 9.4.5 Thêm 25 ml dietyl ete (5.4) Đậy bình chiết nút bần bão hòa nước đậy nút làm chất liệu khác làm ướt nước (6.6) Lắc mạnh bình vòng khơng lắc mạnh để tránh tạo nhũ bền Trong trình lắc, giữ bình nằm ngang với bầu nhỏ hướng lên trên, định kỳ cho chất lỏng bầu lớn chảy sang bầu nhỏ Nếu cần, làm mát bình dòng nước chảy gần nhiệt độ phòng, cẩn thận tháo nút, tráng nút cổ bình chiết dung môi hỗn hợp (5.6) Dùng chai rửa (6.8) cho nước rửa chảy vào bình chiết chất béo 9.4.6 Thêm 25 ml dầu nhẹ (5.5) Đậy bình chiết nút bần nút khác làm ướt lại nước (ngâm nước) Lắc nhẹ bình chiết 30 s mơ tả 9.4.4 Thực lắc bình mơ tả 9.4.5 9.4.7 Cho ly tâm bình chiết chất béo đậy kín, tiến hành thời gian từ đến với gia tốc quay từ 80g đến 90g Nếu khơng có máy ly tâm (6.2) đặt bình chiết đậy kín giá đỡ (6.7) 30 có lớp bề mặt rõ rệt phân biệt rõ với lớp chất lỏng Làm mát bình chiết dòng nước chảy nhiệt độ phòng, cần 9.4.8 Cẩn thận lấy nút ra, dùng dung mơi hỗn hợp (5.6) để tráng nút tráng phía cổ bình chiết chất béo Dùng chai rửa (6.8) để tráng bình cho nước rửa chảy vào bình chiết Nếu mặt lớp phân cách thấp chỗ thắt cổ bình cần nâng cao mức lên chút cách nhẹ nhàng cho thêm nước theo thành bình (xem Hình 1) để gạn dung mơi dễ dàng CHÚ THÍCH: Trong Hình Hình có mơ tả ba loại bình chiết chất béo quy định TCVN 9966 (ISO 3889) chọn, khơng có nghĩa ưu tiên loại khác 9.4.9 Giữ bình chiết chất béo bầu nhỏ, cẩn thận gạn nhiều tốt lớp bề mặt vào bình thu nhận chất béo chuẩn bị (xem 9.3) có chứa vài hạt trợ sơi (6.10) trường hợp dùng bình nón bình đun sơi (đối với đĩa kim loại tùy chọn) Không gạn chút chất lỏng vào bình (xem Hình 2) 9.4.10 Tráng phía ngồi cổ bình chiết chất béo dung mơi hỗn hợp (5.6) Thu lấy nước rửa vào bình thu nhận chất béo Chú ý không để dung môi hỗn hợp tràn thành ngồi bình chiết Tốt loại bỏ dung mơi phần dung mơi khỏi bình thu nhận chất béo cách chưng cất làm bay mô tả 9.4.14 CHÚ DẪN CHÚ DẪN Dung môi Lớp phân cách Lớp phân cách Lớp nước Lớp nước a Ở lần chiết thứ hai lần chiết thứ ba a b Ở lần chiết thứ Ở lần chiết thứ hai lần chiết thứ ba b Ở lần chiết thứ Hình - Trước gạn Hình - Sau gạn 9.4.11 Thêm ml etanol (5.2) vào lượng chứa bình chiết chất béo Dùng etanol để tráng phía cổ bình trộn theo mơ tả 9.4.4 9.4.12 Thực chiết lần hai cách lặp lại thao tác mô tả 9.4.5 đến hết 9.4.9 Dùng 15 ml dietyl ete (5.4) 15 ml dầu nhẹ (5.5) thay dùng thể tích 25 ml Dùng dietyl ete để tráng thành cổ bình chiết chất béo Nếu cần, nâng cao mặt lớp phân cách đến cổ bình chiết cách nhẹ nhàng cho thêm nước theo thành bình (xem Hình 1) để gạn dung mơi nhiều tốt (xem Hình 2) 9.4.13 Thực chiết lần ba cách lặp lại thao tác mô tả 9.4.5 đến hết 9.4.9 không thêm etanol Chỉ sử dụng 15 ml dietyl ete (5.4) 15 ml dầu nhẹ (5.5) Dùng dietyl ete để tráng bên cổ bình chiết chất béo Nếu cần, nâng cao mặt lớp phân cách đến cổ bình chiết cách nhẹ nhàng cho thêm nước theo thành bình (xem Hình 1) để gạn dung mơi nhiều tốt (xem Hình 2) CHÚ THÍCH: Có thể bỏ qua lần chiết thứ ba sản phẩm có hàm lượng chất béo nhỏ % khối lượng 9.4.14 Loại bỏ dung môi (kể etanol) khỏi bình thu nhận chất béo triệt để tốt cách chưng cất dùng bình nón bình đun sơi, cách làm bay sử dụng cốc có mỏ đĩa (6.3) Tráng thành cổ bình nón bình đun sơi dung mơi hỗn hợp (5.6) trước bắt đầu chưng cất 9.4.15 Sấy bình thu nhận chất béo h tủ sấy (6.4) nhiệt độ 102 0C, đặt nghiêng bình nón bình đun sơi tủ sấy để dung mơi dễ Lấy bình thu nhận chất béo khỏi lò sấy kiểm tra xem chất béo hay chưa Nếu chất béo khơng chất béo bị coi có tạp chất phải lặp lại tồn quy trình Nếu chất béo bảo quản bình thu nhận chất béo khỏi bụi để nguội bình (khơng để bình hút ẩm) đến nhiệt độ phòng cân (đối với bình thu nhận chất béo thủy tinh để tối thiểu h đĩa kim loại để tối thiểu 30 min) Khơng lau bình thu nhận chất béo trước lúc cân Dùng kẹp để đặt bình thu nhận chất béo lên cân Cân bình thu nhận chất béo xác đến 1,0 mg 9.4.16 Sấy bình thu nhận chất béo 30 tủ sấy (6.4) nhiệt độ 102 0C, đặt nghiêng bình nón bình đun sơi tủ sấy để dung mơi dễ Để nguội cân lại theo 9.4.15 Nếu cần, lặp lại quy trình sấy cân chênh lệch khối lượng bình thu nhận chất béo hai lần cân liên tiếp nhỏ 1,0 mg Ghi khối lượng tối thiểu khối lượng bình thu nhận chất béo chất chiết 10 Tính biểu thị kết 10.1 Tính kết Tính hàm lượng chất béo có mẫu thử, wf, biểu thị phần trăm khối lượng theo Công thức (1): wf m1 m2 m3 m4 m0 100 (1) Trong đó: m0 khối lượng phần mẫu thử (9.1), tính gam (g); m1 khối lượng bình thu nhận chất béo với chất chiết được, xác định 9.4.16, tính gam (g); m2 khối lượng bình thu nhận chất béo chuẩn bị (9.3), tính gam (g); m3 khối lượng bình thu nhận chất béo sử dụng phép thử trắng (9.2) chất chiết xác định 9.4.16, tính gam (g); m4 khối lượng bình thu nhận chất béo (9.3) sử dụng phép thử trắng (9.2), tính gam (g) 10.2 Biểu thị kết Làm tròn kết đến hai chữ số thập phân 11 Độ chụm 11.1 Phép thử liên phòng thử nghiệm Các chi tiết phép thử liên phòng thử nghiệm theo ISO 5725:1986 1) (xem Tài liệu tham khảo [2]) độ chụm phương pháp nêu Tài liệu tham khảo [4] Các giá trị giới hạn lặp lại giới hạn tái lập biểu thị mức xác suất 95 % khơng áp dụng cho dải nồng độ mẫu khác với dải nồng độ mẫu nêu 11.2 Độ lặp lại Chênh lệch tuyệt đối hai kết thử nghiệm độc lập, đơn lẻ, thu sử dụng phương pháp, loại vật liệu thử, phòng thử nghiệm, người phân tích sử dụng thiết bị khoảng thời gian ngắn, không % trường hợp lớn 0,2 % phần khối lượng chất béo 11.3 Độ tái lập Chênh lệch tuyệt đối hai kết thử nghiệm độc lập, đơn lẻ, thu tiến hành ISO 5725:1986 (đã hủy) dùng để thu liệu độ chụm Tiêu chuẩn thay tiêu chuẩn ISO 5725 (gồm phần) chấp nhận thành TCVN 6910 (ISO 5725) 1) loại vật liệu thử, người khác thực hiện, sử dụng thiết bị khác phòng thử nghiệm khác nhau, không % trường hợp lớn 0,3 % phần khối lượng chất béo 12 Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải bao gồm thông tin sau: a) thông tin cần thiết nhận biết đầy đủ mẫu thử; b) phương pháp lấy mẫu sử dụng, biết; c) phương pháp thử sử dụng, viện dẫn tiêu chuẩn này; d) tất thao tác chi tiết không quy định tiêu chuẩn xem tùy chọn, với tình bất thường ảnh hưởng đến kết quả; e) việc hiệu phương pháp cho giá trị lớn 2,5 mg phép thử trắng; f) kết thử nghiệm thu kết cuối đáp ứng yêu cầu độ lặp lại Phụ lục A (Tham khảo) Các ý cách tiến hành A.1 Phép thử trắng để kiểm tra thuốc thử (xem 9.2.2) Trong phép thử trắng này, bình thu nhận chất béo (6.9) dùng để kiểm soát khối lượng sử dụng để đảm bảo thay đổi điều kiện môi trường phòng cân ảnh hưởng nhiệt độ bình thu nhận chất béo khơng làm ảnh hưởng đến việc xem xét có mặt hay khơng có mặt chất khơng bay có phần chiết thuốc thử Bình thu nhận chất béo dùng bình đối trọng dùng cân hai đĩa Mặt khác, chênh lệch khối lượng biểu kiến [(m3 - m4) 10.1] bình thu nhận chất béo dùng để kiểm soát phải xem xét kiểm tra khối lượng bình thu nhận chất béo dùng phép thử trắng Do đó, thay đổi khối lượng biểu kiến bình thu nhận chất béo dùng để kiểm soát, điều chỉnh theo thay đổi khối lượng biểu kiến bình thu nhận chất béo cho mục đích kiểm sốt, khơng tăng q 1,0 mg Rất dung mơi có chứa chất bay bị giữ lại nhiều chất béo Nếu thấy có mặt chất cần tiến hành phép thử trắng tất thuốc thử dung mơi, sử dụng bình thu nhận chất béo với khoảng g butterfat khan Nếu cần, chưng cất lại dung mơi với có mặt g butterfat 100 ml dung môi Sử dụng dung môi khoảng thời gian ngắn sau chưng cất lại A.2 Phép thử trắng tiến hành đồng thời với phép xác định (xem 9.2.1) Giá trị thu phép thử trắng, tiến hành đồng thời với phép xác định, cho phép khối lượng biểu kiến chất chiết từ phần mẫu thử (m1 - m2) điều chỉnh theo có mặt chất không bay chiết từ thuốc thử thay đổi điều kiện mơi trường phòng cân chênh lệch nhiệt độ bình thu nhận chất béo phòng cân hai lần cân (9.4.16 9.3) Trong điều kiện thích hợp (giá trị thấp phép thử trắng thuốc thử, nhiệt độ phòng cân ổn định, thời gian bình thu nhận chất béo đủ nguội), giá trị luôn nhỏ 0,5 mg sau bỏ qua tính kết phép xác định thơng thường Cũng thường gặp giá trị lớn (dương âm) lên đến 2,5 mg Sau hiệu giá trị thu kết Việc hiệu giá trị lớn 2,5 mg phải nêu báo cáo thử nghiệm (Điều 12) Nếu giá trị thu phép thử trắng thường lớn 1,0 mg cần kiểm tra lại thuốc thử trước chưa kiểm tra Thuốc thử khơng tinh khiết cần phải thay tinh lại (xem 9.2.2 A.1) A.3 Phép thử peroxit Để thử peroxit, cho ml dung dịch kali iodua 100 g/l chuẩn bị vào 10 ml dietyl ete (5.4) đựng ống đong nhỏ có nắp thủy tinh trước tráng ete Lắc ống đong để yên Không quan sát thấy màu vàng lớp dietyl ete Có thể sử dụng phương pháp thích hợp khác để thử peroxit Để đảm bảo cho dietyl ete không chứa peroxit khơng bị nhiễm peroxit, cần xử lý dietyl ete ba ngày trước sử dụng, sau: Cắt kẽm thành dải để chúng chạm đến nửa chai đựng dietyl ete, dùng khoảng 000 mm2 kẽm cho lít dietyl ete Trước sử dụng, nhúng toàn dải kẽm dung dịch chứa 10 g đồng (II) sulfat ngậm năm phân tử nước (CuSO4 5H2O) ml axit sulfuric (98 % khối lượng) đậm đặc lít Rửa kỹ dải nhẹ nhàng nước để dải mạ đồng ướt vào chai đựng dietyl ete Có thể sử dụng phương pháp khác với điều kiện không ảnh hưởng đến kết xác định A.4 Dietyl ete có chứa chất chống oxi hóa Dietyl ete có chứa chất chống oxi hóa với hàm lượng khoảng mg/kg có bán sẵn số quốc gia, đặc biệt dùng để xác định chất béo Hàm lượng khơng dùng cho mục đích đối chứng Tại số quốc gia có bán sẵn dietyl ete chứa hàm lượng chất chống oxi hóa cao hơn, ví dụ: đến mg/kg Những dietyl ete nên sử dụng phép xác định thường xuyên phải tiến hành phép thử trắng đồng thời với phép xác định, để điều chỉnh sai số hệ thống lượng dư chất chống oxi hóa gây Đối với mục đích đối chứng, loại dietyl ete phải chưng cất trước sử dụng A.5 Etanol Có thể sử dụng etanol bị metanol làm biến tính với điều kiện metanol khơng làm ảnh hưởng đến kết việc xác định Phụ lục B (Tham khảo) Cách tiến hành khác dùng ống chiết chất béo có si phơng có nối với chai rửa B.1 Yêu cầu chung Nếu sử dụng ống chiết chất béo (6.6) có nối với si phơng chai rửa thay cho bình chiết chất béo tiến hành theo quy định Phụ lục Các ống phải có nắp đậy nút bần chất lượng tốt quy định bình chiết chất béo theo 6.6 (xem ví dụ Hình B.1) B.2 Cách tiến hành B.2.1 Chuẩn bị mẫu thử Xem Điều B.2.2 Phần mẫu thử Tiến hành theo quy định 9.1 dùng ống chiết chất béo (xem Chú thích 6.6 Hình B.1) Phần mẫu thử phải chuyển hết vào đáy ống chiết chất béo B.2.3 Phép thử trắng Xem 9.2 A.2 B.2.4 Chuẩn bị bình thu nhận chất béo Xem 9.3 B.2.5 Xác định B.2.5.1 Tiến hành xác định Thêm 10 ml nước làm nóng trước nhiệt độ khoảng 65 0C vào phần mẫu thử đựng ống chiết chất béo (B.2.2) để thu tổng thể tích từ 10 ml đến 11 ml Dùng nước để rửa phần mẫu thử đáy ống chiết chất béo Trộn kỹ B.2.5.2 Làm nóng lượng chứa ống nồi cách thủy sôi (6.5) Thỉnh thoảng lắc nhẹ đến phomat phân tán hoàn toàn Để yên ống 20 nồi cách thủy sơi Kích thước tính milimet a) có gắn ống si phơng b) có gắn bình rửa CHÚ DẪN a Dung dịch tháo ống nối 105 ml ± ml b Độ dày thành 1,5 mm ± 0,5 mm Hình B.1 - Các ví dụ ống chiết chất béo B.2.5.3 Thêm ml dung dịch amoniac (5.1) thể tích tương đương dung dịch amoniac đậm đặc (xem Chú thích 5.1) vào ống chiết chất béo Trộn kỹ với phần mẫu thử xử lý đáy ống B.2.5.4 Thêm 10 ml etanol (5.2) Trộn kỹ cách nhẹ nhàng đáy ống chiết chất béo Nên bổ sung giọt dung dịch đỏ Congo (5.3) B.2.5.5 Thêm 25 ml dietyl ete (5.4) Đậy ống chiết nút bần bão hòa nước đậy nút làm chất liệu khác làm ướt nước (6.6) Lắc mạnh ống vòng khơng lắc q mạnh để tránh tạo nhũ bền Nếu cần, làm mát ống dòng nước chảy đến nhiệt độ phòng Cẩn thận tháo nút ống, tráng nút cổ ống chiết dung mơi hỗn hợp (5.6) Dùng chai rửa (6.8) cho nước rửa chảy vào ống B.2.5.6 Thêm 25 ml dầu nhẹ (5.5) Đậy ống chiết chất béo nút bần nút khác làm ướt lại nước (ngâm nước) Lắc bình chiết nhẹ nhàng 30 s mô tả B.2.5.5 B.2.5.7 Cho ly tâm ống chiết chất béo đậy kín từ đến gia tốc quay từ 80g đến 90g Nếu khơng có máy ly tâm đặt ống đậy kín giá đỡ (6.7) 30 thấy có lớp bề mặt rõ rệt phân biệt rõ với lớp nước Nếu cần, làm mát ống dòng nước chảy nhiệt độ phòng B.2.5.8 Cẩn thận lấy nút ra, dùng dung mơi hỗn hợp (5.6) để tráng nút tráng cổ ống chiết chất béo Dùng chai rửa (6.8) cho nước rửa chảy vào ống B.2.5.9 Lắp si phông chai rửa với ống chiết chất béo Đẩy ống nối bên cao mặt tiếp xúc lớp khoảng mm Ống nối phía bên phải song song với trục ống chiết chất béo Cẩn thận gạn lớp bề mặt ống chiết chất béo vào bình thu nhận chất béo (xem 9.3) có chứa vài hạt trợ sơi (6.10) trường hợp sử dụng bình nón bình đun sơi (còn đĩa kim loại tùy chọn) Khơng để lớp chất nước lẫn vào Tráng phía ngồi ống nối dung mơi hỗn hợp, thu lấy nước rửa vào bình thu nhận chất béo CHÚ THÍCH: Có thể gạn lớp bề mặt ống chiết chất béo bầu cao su gắn với ống ngắn để tạo áp lực B.2.5.10 Tháo ống nối khỏi cổ ống chiết chất béo Nâng nhẹ ống nối tráng phần thấp ống nối bên dung mơi hỗn hợp (5.6) Hạ thấp chèn lại ống nối chuyển nước rửa vào bình thu nhận chất béo Tráng rửa lại ống nối dung mơi hỗn hợp, cho nước rửa vào bình thu nhận chất béo Loại bỏ dung môi phần dung môi khỏi bình thu nhận chất béo cách chưng cất làm bay 9.4.14, cần B.2.5.11 Lại tháo ống nối khỏi cổ ống chiết chất béo Nâng nhẹ ống nối thêm ml etanol vào lượng chứa ống chiết chất béo Dùng etanol để tráng thành bên ống nối Trộn theo mô tả B.2.5.4 B.2.5.12 Thực chiết lần thứ hai cách lặp lại thao tác mô tả B.2.5.5 đến B.2.5.10 thay 25 ml 15 ml dietyl ete (5.4) 15 ml dầu nhẹ (5.5) Dùng dietyl ete để tráng thành ống nối suốt trình tháo ống nối khỏi ống chiết chất béo sau lần chiết lần trước B.2.5.13 Thực chiết lần thứ ba, cách lặp lại thao tác mô tả B.2.5.5 đến B.2.5.10 không thêm etanol, dùng 15 ml dietyl ete 15 ml dầu nhẹ Sử dụng dietyl ete để tráng thành ống nối mô tả B.2.5.12 CHÚ THÍCH: Có thể bỏ qua cần chiết thứ ba phomat có hàm lượng chất béo nhỏ % khối lượng B.2.5.14 Tiến hành mô tả 9.4.14 đến 9.4.16 THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] TCVN 6400 (ISO 707), Sữa sản phẩm sữa - Hướng dẫn lấy mẫu [2] ISO 5725:1986, Precision of test methods - Determination of repeatability and reproducibility for a standard test method by inter-laboratory tests [3] TCVN 6688-3 (ISO 8262-3), Sản phẩm sữa thực phẩm từ sữa - Xác định hàm lượng chất béo phương pháp khối lượng Weibull - Berntrop (Phương pháp chuẩn) - Phần 3: Các trường hợp đặc biệt [4] INTERNATIONAL DAIRY FEDERATION Interlaboratory collaborative studies, Second series Bull Int Dairy Fed 1988, (235) ... method by inter-laboratory tests [3] TCVN 668 8-3 (ISO 826 2-3 ), Sản phẩm sữa thực phẩm từ sữa - Xác định hàm lượng chất béo phương pháp khối lượng Weibull - Berntrop (Phương pháp chuẩn) - Phần 3: Các... tiến hành ISO 5725:1986 (đã hủy) dùng để thu liệu độ chụm Tiêu chuẩn thay tiêu chuẩn ISO 5725 (gồm phần) chấp nhận thành TCVN 6910 (ISO 5725) 1) loại vật liệu thử, người khác thực hiện, sử dụng... 9.4.14 đến 9.4.16 THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] TCVN 6400 (ISO 707), Sữa sản phẩm sữa - Hướng dẫn lấy mẫu [2] ISO 5725:1986, Precision of test methods - Determination of repeatability and reproducibility