TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 8374 : 2010 THỦY SẢN VÀ SẢN PHẨM THỦY SẢN – XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG FLORFENICOL BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC)

14 414 0
TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 8374 : 2010 THỦY SẢN VÀ SẢN PHẨM THỦY SẢN – XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG FLORFENICOL BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC)

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

FF được chiết tách ra từ mẫu thủy sản bằng etyl axetat. Dịch chiết được thổi khô và được làm sạch bằng chiết lỏng lỏng với nhexan và dung dịch đệm. Hàm lượng FF có trong dịch được đo trên máy HPLC với đầu dò UVVIS hoặc DAD ở bước sóng 220 nm. Mẫu có hàm lượng vượt quá ngưỡng dư lượng tối đa cho phép (MRL= 1 mgkg) được khẳng định lại bằng đầu dò DAD đảm bảo phổ hấp thụ phải đạt cực đại ở bước sóng 225 nm.

TIÊU CHUẨN VIỆT NAM TCVN 8375 : 2010 THỦY SẢN VÀ SẢN PHẨM THỦY SẢN – XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG METYLTESTOSTERON VÀ DIETYLSTILBESTROL BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG - KHỐI PHỔ - KHỐI PHỔ (LC-MS/MS) Fish and fishery products – Determination of methyltestosteron and diethylstibestrol content by liquid chromatographytandem mass spectrometry (LC-MS/MS) Lời nói đầu TCVN 8375 : 2010 Cục Quản lý Chất lượng Nông Lâm sản Thuỷ sản biên soạn, Bộ Nông nghiệp Phát triển Nông thôn đề nghị, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học Công nghệ công bố Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn quy định phương pháp xác định hàm lượng metyltestosteron [(17β)-17-hydroxy17-methylandrost-4-ene-3-one] dietylstilbestrol [4,4'-(3E)-hex-3-ene-3,4-diyldiphenol] sản phẩm thủy sản phương pháp sắc ký lỏng - khối phổ - khối phổ (LC-MS/MS) Giới hạn phát phương pháp 0,5 µg/kg Giới hạn định lượng 1,5 µg/kg Nguyên tắc Mẫu thủy phân với subtilin để giải phóng metyltestosteron dietylstilbestrol Metyltestosteron dietylstilbestrol tự chiết tách khỏi mẫu tert-butyl metyl ete Dịch chiết loại chất béo trình chiết lỏng-lỏng với n-hexan sau làm cách chiết pha rắn Hàm lượng metyltestosteron dietylstilbestrol dịch giải hấp xác định LC-MS/MS Thuốc thử Chỉ sử dụng thuốc thử tinh khiết phân tích sử dụng nước cất loại dùng cho HPLC, trừ có quy định khác 3.1 Chuẩn metyltestosteron, biết độ tinh khiết 3.2 Chuẩn metyltestosteron-d3, biết độ tinh khiết 3.3 Chuẩn dietylstilbestrol, biết độ tinh khiết 3.4 Metanol 3.5 n-Hexan 3.6 Axeton 3.7 Tert-butyl metyl ete (TBME) 3.8 Proteaza subtilisin, Sigma-Aldrich, Đức tương đương 3.9 Tris (hydroxymetyl) aminometan (Tris) 3.10 Dung dịch amoniac 25 % 3.11 Dung dịch chuẩn gốc metyltestosteron (SM0), nồng độ 000 mg/l Cân xác 100 mg ± 0,1 mg chuẩn metyltestosteron cân phân tích Thêm khoảng 80 ml metanol, đặt vào bể siêu âm đến metyltestosteron hoà tan hoàn toàn, chuyển dung dịch vào bình định mức 100 ml Thêm metanol đến vạch mức Đậy chặt nắp, trộn Dung dịch bền năm bảo quản nhiệt độ –20 oC 3.12 Dung dịch chuẩn gốc dietylstilbestrol (SD0), nồng độ 000 mg/l Cân xác 100 mg ± 0,1 mg chuẩn dietylstilbestrol cân phân tích Thêm khoảng 80 ml metanol, đặt vào bể siêu âm đến dietylstilbestrol hoà tan hoàn toàn, chuyển dung dịch vào bình định mức 100 ml Thêm metanol đến vạch mức Đậy chặt nắp, trộn Dung dịch bền năm bảo quản nhiệt độ –20 oC 3.13 Dung dịch chuẩn hỗn hợp metyltestosteron dietylstilbestrol (SMD1), nồng độ 10 mg/l Pha lỗng xác 0,1 ml dung dịch chuẩn gốc SM0 (3.11) 0,1 ml dung dịch chuẩn gốc SD0 (3.12) với metanol định mức đến 10 ml Đậy chặt nắp, trộn Dung dịch bền tháng bảo quản nhiệt độ –20 oC 3.14 Dung dịch chuẩn hỗn hợp làm việc metyltestosteron dietylstilbestrol (SMD2), nồng độ 100 µg/l Pha lỗng xác 0,1 ml dung dịch chuẩn hỗn hợp SMD1 (3.13) với metanol định mức đến 10 ml Dung dịch bền tháng bảo quản nhiệt độ –20 oC 3.15 Dung dịch nội chuẩn gốc metyltestosteron-d3 (ISM0), nồng độ 000 mg/l Cân xác 100 mg ± 0,1 mg chuẩn metyltestosteron-d cân phân tích Thêm khoảng 80 ml metanol, đặt vào bể siêu âm đến metyltestosteron-d hồ tan hồn tồn, chuyển dung dịch vào bình định mức 100 ml Thêm metanol đến vạch mức Đậy chặt nắp, trộn Dung dịch bền năm bảo quản nhiệt độ –20 oC 3.16 Dung dịch nội chuẩn gốc dietylstilbestrol-d6 (ISD0), nồng độ 000 mg/l Cân xác 100 mg ± 0,1 mg chuẩn dietylstilbestrol-d cân phân tích Thêm khoảng 80 ml metanol, đặt vào bể siêu âm đến dietylstilbestrol-d hoà tan hoàn toàn, chuyển dung dịch vào bình định mức 100 ml Thêm metanol đến vạch mức Đậy chặt nắp, trộn Dung dịch bền năm bảo quản nhiệt độ –20 oC 3.17 Dung dịch nội chuẩn hỗn hợp metyltestosteron-d dietylstilbestrol-d6 (ISMD1), nồng độ 10 mg/l Pha lỗng xác 0,1 ml dung dịch chuẩn gốc ISM0 (3.15) 0,1 ml dung dịch chuẩn gốc ISD0 (3.16) với metanol định mức đến 10 ml Đậy chặt nắp, trộn Dung dịch bền tháng bảo quản nhiệt độ –20 oC 3.18 Dung dịch nội chuẩn hỗn hợp làm việc metyltestosteron-d3 dietylstilbestrol-d6 (ISMD2), nồng độ 100 µg/l Pha lỗng xác 0,1 ml dung dịch nội chuẩn ISMD1 (3.17) với metanol định mức đến 10ml Dung dịch bền tháng bảo quản nhiệt độ –20 oC 3.19 Dung dịch đệm Tris 0,1 M (pH 9,5) Hòa tan 12,1 g Tris (3.9) 000 ml nước 3.20 Dung dịch % amoniac nước Pha loãng ml dung dịch amoniac 25 % (3.10) 92 ml nước Thiết bị, dụng cụ Sử dụng thiết bị, dụng cụ phịng thử nghiệm thơng thường cụ thể sau: 4.1 Máy ly tâm, tốc độ 000 r/min 4.2 Máy lắc vortex 4.3 Bộ thổi khí nitơ làm khơ 4.4 Bể điều nhiệt 4.5 Tủ ủ, hoạt động 55 0C 4.6 Cân, cân xác đến 0,01 g 4.7 Cân phân tích, cân xác đến 0,0001 g 4.8 Hệ thống LC - MS/MS Hệ thống sắc ký lỏng gồm lò cột, bơm hệ thống tiêm mẫu – cột sắc ký pha đảo C18 dài 150 mm, đường kính 2,0 mm, kích thước hạt µm (hoặc tương đương) có cột bảo vệ C18 dài 20 mm, đường kính 2,0 mm, kích thước hạt µm – đầu dò khối phổ dạng tứ cực kép với nguồn ion hóa ESI 4.9 Máy lắc ngang 4.10 Cột chiết pha rắn SPE Oasis HLB (60 mg, ml) 4.11 Cột chiết pha rắn SPE Amino Supelco NH2 (500 mg, ml) 4.12 Micropipet, dung tích 100 µl, 000 µl ml 4.13 Ống ly tâm nhựa có nắp, dung tích 15 ml 50 ml 4.14 Màng lọc PTFE, kích thước 0,2 µm Cách tiến hành 5.1 Chuẩn bị mẫu 5.1.1 Xử lý mẫu Tách thịt từ vị trí khác mẫu Cắt phần mẫu vừa lấy thành miếng nhỏ từ cm đến cm Cho phần mẫu vừa cắt (khoảng 100 g) vào máy xay mẫu, xay đến mẫu đồng 5.1.2 Chuẩn bị mẫu trắng Cân 5,0 g mẫu thủy sản trắng (không chứa metyltestosteron dietylstilbestrol) vào ống nghiệm nhựa 50 ml có nắp Thêm xác 100 µl dung dịch hỗn hợp nội chuẩn ISMD2 (hàm lượng nội chuẩn mẫu µg/l), để yên 30 5.1.3 Chuẩn bị mẫu thêm chuẩn để xây dựng đường chuẩn (0; 0,5; 1,0; 1,5; μg/kg) Cân 5,0 g mẫu thủy sản trắng vào ống ly tâm 50 ml Thêm xác dung dịch chuẩn nội chuẩn nội theo quy định Bảng để yên 30 Tiến hành chuẩn bị mẫu thêm chuẩn giống chuẩn bị với mẫu thử theo quy định 5.1 Bảng – Chuẩn bị mẫu thêm chuẩn để xây dựng đường chuẩn Nồng độ mẫu, µg/kg Thể tích chuẩn hỗn hợp SMD2, µl Thể tích nội chuẩn hỗn hợp ISMD2, µl 2,0 100 2,0 25 100 Metyltestosteron / dietylstilbestrol Metyltestosteron-d3/ dietylstilbestrol-d6 0,5 1,0 2,0 50 100 1,5 2,0 75 100 2,0 2,0 100 100 5.1.4 Chuẩn bị mẫu thử Cân 5,0 g mẫu thử nghiền vào ống nghiệm nhựa 50 ml có nắp Thêm xác 100 µl dung dịch hỗn hợp nội chuẩn ISMD2 (hàm lượng nội chuẩn mẫu µg/l), để yên 30 5.2 Xác định 5.2.1 Chiết tách metyltestosteron dietylstilbestrol từ mẫu Thêm 15 ml dung dịch đệm Tris 0,1 M (pH 9,5) chứa mg subtilisin vào ống nghiệm chuẩn bị 5.1.2, 5.1.3, 5.1.4 Lắc trộn máy lắc (vortex) Ủ hỗn hợp h 52 0C tủ ủ Sau làm lạnh hỗn hợp đến nhiệt độ phòng Thêm 10 ml TBME Lắc trộn 10 máy lắc Ly tâm mẫu với tốc độ 000 r/min Dùng pipet hút lớp TBME sang ống nghiệm 50 ml Thêm 10 ml TBME vào cặn mẫu Lắc trộn 10 máy lắc Ly tâm mẫu với tốc độ 000 r/min Dùng pipet hút lớp TBME sang ống nghiệm 50 ml chứa TBME trước Thổi khơ dung dịch TBME ống nghiệm dịng khí nitơ 55 0C Thêm ml hỗn hợp metanol : nước (tỷ lệ : theo thể tích) vào ống nghiệm, lắc Thêm ml hexan Lắc mạnh 30 s Ly tâm với tốc độ 000 r/min Loại bỏ lớp hexan Thêm ml hexan Lắc mạnh 30 s Ly tâm với tốc độ 000 r/min Loại bỏ lớp hexan Cô dung dịch ống nghiệm dịng khí nitơ 55 oC đến khoảng 0,5 ml Thêm ml hỗn hợp metanol : nước (tỷ lệ : theo thể tích) Lắc 5.2.2 Làm dịch mẫu cột chiết pha rắn Oasis HLB cột Amimo Hoạt hóa cột Oasis HLB ml metanol ml nước Hoạt hóa cột amino ml hỗn hợp axeton : metanol (tỷ lệ 80 : 20 theo thể tích) Cho dung dịch mẫu qua cột Oasis HLB hoạt hóa Rửa cột lần, lần dùng ml metanol % hỗn hợp ammoni % nước (theo thể tích), lần dùng ml metanol 40 % hỗn hợp ammoni % nước (theo thể tích), lần dùng ml nước Giải hấp ml dung dịch giải hấp (hỗn hợp axeton : metanol, tỷ lệ 80 : 20 theo thể tích) Cho dịch giải hấp bước vào cột amino hoạt hóa, hứng trực tiếp dịch qua cột vào ống nghiệm 15 ml Thổi khô dung dịch qua cột đến khơ dịng khí nitơ 55 oC Hồ tan cặn khơ 0,6 ml metanol, lắc máy lắc 20 s Lọc qua màng lọc 0,2 µm Tiêm 20 µl dung dịch vào hệ thống LC-MS/MS 5.3 Thông số cài đặt thiết bị 5.3.1 Thông số cài đặt cho LC – Pha động A: nước HPLC – Pha động B: metanol HPLC – Thành phần pha động thay đổi theo thời gian (chế độ gradient) mô tả Bảng Bảng – Thành phần pha động theo thời gian Thời gian, Pha động A, % thể tích Pha động B, % thể tích Tốc độ dịng, ml/min 60 40 0,7 12 30 70 0,7 22 30 70 0,7 22,1 15 85 0,7 23,1 15 85 0,7 24,1 60 40 0,7 28 60 40 0,7 – thể tích tiêm: 20 µl – tốc độ dịng: 0,7 ml/min – thời gian phân tích: 28 – nhiệt độ cột: 35 oC 5.3.2 Thông số cài đặt cho đầu dị khối phổ-khối phổ Thơng số cài đặt cho đầu dò khối phổ-khối phổ để xác định metyltestosteron – nguồn ion hóa: ESI (+) – điện mao quản: kV – điện tách chiết: 2,0 V – điện RF: 0,0 V – nhiệt độ nguồn: 120 oC – nhiệt độ khử dung mơi: 400 oC – tốc độ khí khử dung mơi: 460 l/h – phân tích + độ phân giải vùng khối lượng thấp LM1: 15,0 + độ phân giải vùng khối lượng cao HM1: 15,0 + lượng ion hoá 1: 0,5 eV + điện cửa vào: –1 V + điện cửa ra: V + độ phân giải vùng khối lượng thấp LM2: 15,0 + độ phân giải vùng khối lượng cao HM2: 15,0 + lượng ion hoá : + điện khuếch đại: 650 V + áp suất chân không: 4,5 x 10-3 mbar + chế độ vận hành: chuẩn Thơng số cài đặt cho đầu dị khối phổ-khối phổ để xác định dietylstilbestrol – nguồn ion hóa: ESI (-) – điện mao quản: kV – điện tách chiết: 2,0 V – điện RF: 0,0 V – nhiệt độ nguồn: 120 oC – nhiệt độ khử dung mơi: 400 oC – tốc độ khí khử dung mơi: 460 l/h – phân tích + độ phân giải vùng khối lượng thấp LM1: 15,0 + độ phân giải vùng khối lượng cao HM1: 15,0 + lượng ion hoá 1: eV + điện cửa vào: –1 V + điện cửa ra: V + độ phân giải vùng khối lượng thấp LM2: 15,0 + độ phân giải vùng khối lượng cao HM2: 15,0 + lượng ion hoá 2: 1,5 + điện khuếch đại: 650 V + áp suất chân không: 4,5 x 10-3 mbar + chế độ vận hành: chuẩn – điều kiện phân ly MS/MS: Bảng – Các điều kiện phân ly MS/MS Tên chất Metyltestosteron Dietylstilbestrol Metyltestosteron-d3 Dietylstilbestrol-d6 a) Ion sơ cấp, m/z Ion thứ cấp, m/z Thời gian Dwell, s Điện cone, V Năng lượng cone, eV 303 96,5 a) 0,1 35 26 108,6 0,1 35 26 0,1 45 31 222,5 0,1 45 41 306 96,5 0,1 35 26 273,2 225,5 0,1 45 41 267,2 237,0 a) Phân ly 303 > 96,5 267,2 > 237,0 có cường độ cao, sử dụng tính kết 5.3.3 Thứ tự tiêm mẫu – tiêm dịch mẫu xây dựng đường chuẩn – tiêm dịch mẫu trắng – tiêm dịch mẫu thử nghiệm Tính hàm lượng metyltestosteron dietylstilbestrol mẫu thử nghiệm 5.4 Dựng đường chuẩn Xây dựng đồ thị hệ số tín hiệu RF dịch mẫu xây dựng đường chuẩn (trục tung) với nồng độ chất chuẩn metyltestosteron/ dietylstilbestrol bổ sung (trục hồnh) theo phương pháp hồi quy tuyến tính: RF = ax + b Trong đó: b tung độ góc đường chuẩn; a hệ số góc đường chuẩn; x nồng độ chất chuẩn metyltestosteron bổ sung mẫu (µg/kg); RF hệ số tín hiệu, tính theo: Trong đó: Sp diện tích píc ion thứ cấp có cường độ cao metyltestosteron (303 > 96,5)/ dietylstilbestrol (267,2 > 237,0); SpIS diện tích píc ion thứ cấp metyltestosteron-d (306 > 96,5)/ dietylstilbestrol-d6 (273,2 > 225,5) Tính kết Hàm lượng metyltestosteron dietylstilbestrol có mẫu, C, biểu thị microgam kilogam (µg/kg) theo cơng thức sau: C = (RF – b) / a Trong đó: RF hệ số tín hiệu mẫu thử; a, b xem 5.4 Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ: - thông tin cần thiết việc nhận biết đầy đủ mẫu thử; - phương pháp lấy mẫu sử dụng, biết; - phương pháp thử sử dụng viện dẫn tiêu chuẩn này; - thao tác không quy định tiêu chuẩn này, điều coi tự chọn, chi tiết có ảnh hưởng đến kết quả; - kết thử nghiệm thu PHỤ LỤC A (Tham khảo) MỘT SỐ SẮC KÝ ĐỒ TIÊU BIỂU A.1 Các sắc ký đồ tiêu biểu xác định metyltestosteron A.1.1 Sắc ký đồ mẫu trắng Metyltestosteron-d3: thời gian lưu 11,86 min, 306 > 96,5 Metyltestosteron: thời gian lưu 11,86 min, 303 > 108,6, 303 > 96,5 A.1.2 Sắc ký đồ mẫu gây nhiễm metyltestosteron nồng độ 2,5 µg/kg Metyltestosteron-d3: thời gian lưu 11,88 min, 306 > 96,5 Metyltestosteron: thời gian lưu 11,90 min, 303 > 108,6, 303 > 96,5 A.1.3 Sắc ký đồ mẫu gây nhiễm metyltestosteron giới hạn phát (0,5 µg/kg) Metyltestosteron-d3: thời gian lưu 11,78 min, 306 > 96,5 Metyltestosteron: thời gian lưu 11,81 min, 303 > 108,6, 303 > 96,5 A.2 Các sắc ký đồ tiêu biểu xác định dietylstilbestrol A.2.1 Sắc ký đồ mẫu trắng A.2.2 Sắc ký đồ mẫu gây nhiễm dietylstilbestrol nồng độ 2,5 µg/kg A.2.3 Sắc ký đồ mẫu gây nhiễm dietylstilbestrol giới hạn phát (0,5 µg/kg) Dietylstilbestrol: thời gian lưu 8,90 min, 267,2 > 237, 267,2 > 222,5 PHỤ LỤC B (Tham khảo) DỮ LIỆU VỀ ĐỘ CHỤM B.1 Dữ liệu độ chụm phương pháp xác định metytestosteron STT Loại mẫu Cá cảnh Cá tra Kết phân tích Nồng độ chuẩn mẫu, Kết trung bình, Độ thu hồi, µg/kg µg/kg % 15 0,5 0,49 98 15 1,0 1,06 106 15 1,5 1,60 107 15 0,5 0,47 94 15 1,0 0,98 98 15 1,5 1,56 104 Số lượng mẫu Độ lặp lại, % Cá basa 15 0,5 0,48 96 15 1,0 0,98 98 15 1,5 1,48 99 B.2 Dữ liệu độ chụm phương pháp xác định metytestosteron STT Loại mẫu Tôm loại Cá tra Cá basa Kết phân tích Nồng độ chuẩn mẫu, Kết trung bình, Độ thu hồi, µg/kg µg/kg % 15 0,5 0,48 96 15 1,0 1,02 102 15 1,5 1,59 106 15 0,5 0,46 92 15 1,0 0,99 99 15 1,5 1,47 98 15 0,5 0,45 90 15 1,0 0,95 95 15 1,5 1,46 97 Số lượng mẫu Độ lặp lại, % THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] George Kaklamanos, Georgios Theodoridis, Themistoklis Dabalis, Journal of Chromatography A, (2009) [2] A Onal, Food Chem 103 (2007) 1475 [3] N Innocente, M Biasutti, M Padovese, S Moret, Food Chem 101 (2007) 1285 [4] G mo Dugo, F Vilasi, G.L La Torre, T.M Pellicano, Food Chem 95 (2006) 672 [5] Y.I Yashin, A.Y Yashin, J Anal Chem 59 (2004) 1121 [6] A.L Cinquina, A Cali, F Longoa, L De Santis, A Severoni, F Abballe, J Chromatogr A 1032 (2004) 73 [7] S Cortacero-Ramırez, D Arraez-Roman, A Segura-Carreteo, A Fernandez-Gutierrez, Food Chem 100 (2007) 383 [8] P Pastore, G Favaro, D Badocco, A Tapparo, S Cavalli, J Chromatogr A 1098 (2005) 111 [9] G Saccani, E Tanzi, P Pastore, S Cavalli, M Rey, J Chromatogr A 1082 (2005) 43 [10] F Calbiani, M Careri, L Eviri, A Mangia, L Ristara, I Zagnoni, J Agric Food Chem 53 (2005) 3779 [11] F Gosetti, E Mazzucco, V Gianotti, S Polati, M.C Gennaro, J Chromatogr A 1149 (2007) 151 ... phổ-khối phổ để xác định metyltestosteron – nguồn ion hóa: ESI (+) – điện mao quản: kV – điện tách chiết: 2,0 V – điện RF: 0,0 V – nhiệt độ nguồn: 120 oC – nhiệt độ khử dung môi: 400 oC – tốc độ khí... phổ-khối phổ để xác định dietylstilbestrol – nguồn ion hóa: ESI (-) – điện mao quản: kV – điện tách chiết: 2,0 V – điện RF: 0,0 V – nhiệt độ nguồn: 120 oC – nhiệt độ khử dung môi: 400 oC – tốc độ khí... MỘT SỐ SẮC KÝ ĐỒ TIÊU BIỂU A.1 Các sắc ký đồ tiêu biểu xác định metyltestosteron A.1.1 Sắc ký đồ mẫu trắng Metyltestosteron-d 3: thời gian lưu 11,86 min, 306 > 96,5 Metyltestosteron: thời gian lưu

Ngày đăng: 24/08/2017, 15:04

Từ khóa liên quan

Mục lục

  • 3.1 Chuẩn metyltestosteron, đã biết độ tinh khiết.

  • 3.2 Chuẩn metyltestosteron-d3, đã biết độ tinh khiết.

  • 3.3 Chuẩn dietylstilbestrol, đã biết độ tinh khiết.

  • 3.4 Metanol.

  • 3.5 n-Hexan.

  • 3.6 Axeton.

  • 3.7 Tert-butyl metyl ete (TBME).

  • 3.8 Proteaza subtilisin, Sigma-Aldrich, Đức hoặc tương đương.

  • 3.9 Tris (hydroxymetyl) aminometan (Tris).

  • 3.10 Dung dịch amoniac 25 %.

  • 3.12 Dung dịch chuẩn gốc dietylstilbestrol (SD0), nồng độ 1 000 mg/l

  • 3.13 Dung dịch chuẩn hỗn hợp metyltestosteron và dietylstilbestrol (SMD1), nồng độ 10 mg/l

  • 3.14 Dung dịch chuẩn hỗn hợp làm việc metyltestosteron và dietylstilbestrol (SMD2), nồng độ 100 µg/l

  • 3.15 Dung dịch nội chuẩn gốc metyltestosteron-d3 (ISM0), nồng độ 1 000 mg/l

  • 3.16 Dung dịch nội chuẩn gốc dietylstilbestrol-d6 (ISD0), nồng độ 1 000 mg/l

  • 3.17 Dung dịch nội chuẩn hỗn hợp metyltestosteron-d3 và dietylstilbestrol-d6 (ISMD1), nồng độ 10 mg/l

  • 3.18 Dung dịch nội chuẩn hỗn hợp làm việc metyltestosteron-d3 và dietylstilbestrol-d6 (ISMD2), nồng độ 100 µg/l

  • 3.19 Dung dịch đệm Tris 0,1 M (pH 9,5)

  • 4. Thiết bị, dụng cụ

    • 4.1 Máy ly tâm, tốc độ 3 000 r/min.

    • 4.2 Máy lắc vortex.

Tài liệu cùng người dùng

  • Đang cập nhật ...

Tài liệu liên quan