Nghiên cứu được tiến hành với mục tiêu nhằm nghiên cứu các điều kiện thủy phân flavonoid toàn phần để thu được flavonoid dạng aglycon và áp dụng phần mềm tối ưu hoá để xác định các điều kiện thuỷ phân flavonoid tối ưu. Từ đó xây dựng qui trình định lượng quercetin và kaempferol bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC).
Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học TỐI ƯU HỐ QUI TRÌNH THUỶ PHÂN FLAVONOID VÀ XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG FLAVONOID TỪ DỊCH THUỶ PHÂN LÁ TRINH NỮ HOÀNG CUNG BẰNG PHƯƠNG PHÁP HPLC Hoàng Anh Việt*, Dương Thị Đan Thanh*,Nguyễn Thị Kim Oanh, *Nguyễn Hữu Lạc Thủy*, Võ Thị Bạch Huệ* TÓM TẮT Mục tiêu: Nghiên cứu điều kiện thủy phân flavonoid toàn phần để thu flavonoid dạng aglycon áp dụng phần mềm tối ưu hoá để xác định điều kiện thuỷ phân flavonoid tối ưu Từ xây dựng qui trình định lượng quercetin kaempferol phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) Phương pháp: Khảo sát phương pháp chiết xuất flavonoid toàn phần tối ưu hoá điều kiện thủy phân flavonoid toàn phần từ TNHC Từ mẫu thử flavonoid aglycon thu được, xây dựng thẩm định qui trình định lượng đồng thời quercetin kaempferol TNHC phương pháp HPLC Kết quả: Tìm phương pháp chiết xuất flavonoid phương pháp chiết lỏng siêu tới hạn điều kiện thủy phân flavonoid đến dạng aglycon Xây dựng qui trình định lượng đồng thời quercetin kaempferol phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao tối ưu hóa thơng số thủy phân flavonoid theo mơ hình Box-Behnken Kết luận: Các kết nghiên cứu ứng dụng chiết flavonoid tồn phần thuỷ phân dịch chiết với điều kiện tối ưu để thu flavonoid aglycon với lượng lớn, qui trình định lượng đạt yêu cầu thẩm định nên sử dụng để kiểm tra chất lượng ngun liệu TNHC Từ khóa: Trinh Nữ Hồng Cung, flavonoid, chiết lỏng siêu tới hạn, sắc ký lỏng hiệu cao, kaempferol, quercetin ABSTRACT OPTIMIZED FLAVONOID HYDROLYSIS AND CONSTRUCTION FLAVONOID QUANTITATIVE PROCESS BY HPLC FROM HYDROLYSIS EXTRACT OF CRINUM LATIFOLIUM LEAVES Hoang Anh Viet, Dương Thi Dan Thanh, Nguyen Thi Kim Oanh, Nguyen Huu Lac Thuy, Vo Thi Bach Hue* Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 15 - Supplement of No - 2011: 455 - 462 Objectives: In oder to improve the quality control as well as to isolate flavonoid compounds from Crinum latifolium L Conditions for flavonoid extraction and simultaneous quantitation of quercetin and kaempferol in the leaf extract by HPLC was established Methods: Study on conditions for total flavonoid extraction by super - critical fluid and hydrolysis conditions for flavonoid in the leaf powder of Crinum latifolium L was done The simultaneous quantitation quercetin and kaempferol in leaf extract by HPLC was established Results: The assay simultaneous of theses flavonoids was studied by LC-DAD method We also presented the optimization of the hydrolysis procedure (Box-Behnken schema) Conclusions: The simultaneous quantitation method of quercetin and kaempferol in leaf extract *Bộ mơn Phân tích – Kiểm nghiệm - Khoa Dược - Đại học Y Dược Tp HCM Tác giả liên hệ: ThS Hoàng Anh Việt ĐT: 0908260987 Email: viethoanganh82@yahoo.com.vn Chuyên Đề Dược Khoa 455 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 was built and validated with all requirements such as specificity, repeatability, accuracy, linearity and system suitability This is the first time of fast, simple HPLC method is reported for the simultaneous quantitative determination of quercetin and kaempferol in Crinum latifolium L material Key words: Crinum latifolium, flavonoid, HPLC, quercetin, kaempferol… ĐẶT VẤN ĐỀ Phương pháp nghiên cứu: Cho đến nay, có nhiều cơng trình nghiên cứu lâm sàng chứng minh Trinh Nữ Hồng Cung (TNHC) có tác d thống Bảng Kết khảo sát tính phù hợp hệ thống mẫu đối chiếu quercetin α Số lần bơm t S H K>2 R TB SD RSD% 18,21 18,20 18,28 18,27 18,25 18,26 18,24 0,03 0,18 2398536 2396844 2427682 2435825 2454094 2409690 2420445 22689 0.94 86530 87573 86301 86622 86356 86301 86614 488 0,56 12,01 12,00 12,06 12,05 12,03 12,05 12,03 0,02 0,19 1,05 2000 10.04 10.11 9.87 10.08 10.43 10.02 10.09 0.19 1.86 1.20 1.19 1.14 1.17 1.15 1.18 1.17 0.02 1.81 15663 15518 15342 15294 15407 15185 15401 170 1,10 Bảng Kết khảo sát tính phù hợp hệ thống mẫu đối chiếu kaempferol Rs α Số lần bơm tR S H K’>2 TB SD RSD% 35.44 35.62 35.60 35.44 35.45 35.82 35.56 0.15 0.42 3284688 3270266 3290887 3204003 3190312 3312896 3258842 49901.45 1.53 73618 72880 72634 73474 72235 71765 72768 712.71 0.98 24.20 24.08 24.39 24.84 24.53 24.70 24.46 0.29 1.18 1,05