Luận văn Nghiên cứu tối ưu hóa quá trình sản xuất Chitin theo phương pháp sinh học kết hợp hóa học doc

i Luận văn Nghiên cứu tối ưu hóa q trình sản xuất Chitin theo phương pháp sinh học kết hợp hóa học ii LỜI CẢM ƠN Qua tháng nỗ lực phấn cuối với giúp đỡ tận tình thầy bạn bè em hồn tất đề tài Qua em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Tiến sĩ: Nguyễn Duy Nhứt cô giáo: Phan Thị Thương người tận tình truyền đạt kiến thức trình thự tập trực tiếp hướng dẫn, bảo kinh nghiệm quý báu để em hoàn thành tốt đề tài Em xin bày tỏ lòng biết ơn trân trọng tới thầy khoa cơng nghệ hố phân tích nhiệt tình truyền đạt cho em kiến thức năm học vừa qua Em xin bày tỏ lịng biết ơn đến thầy, phụ trách phịng thí nghiệm hố phân tích, thầy mơn cơng nghệ hố, mơn hố phân tích công nghệ thực phẩm, anh chị cô Viện nghiên cứư ứng dụng công nghệ Nha Trang tạo điều kiện thuận lợi suốt thời gian thực tập Chân thành cảm ơn bạn sinh viên lớp CĐH 29, bạn sinh viên thực tập phịng thí nghiệm Viện nhiệt tình giúp đỡ động viên em Cuối xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến bố, mẹ kính mến anh chị em thân yêu Những người ủng hộ nhiệt tình vật chất lẫn tinh thần trình học tập thực đề tài Sinh viên Trần Thị Mỹ Châu iii MỤC LỤC DANH MỤC CÁC BẢNG .iv a.Khử lần 1: Dùng acid benzoic 39 iv DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Một số tiêu chất lượng chitosan từ vỏ tôm sú theo phương pháp xử lý kiềm giai đoạn (Trần Thị Luyến, 2003) 23 Bảng Một số tiêu chất lượng chitosan sản xuất theo quy trình Papain (Trần Thị Luyến, 2003) 27 Bảng 3.Bố trí thí nghiệm chạy đường chuẩn phương pháp Microbiuret 34 Bảng Bố trí thí nghiệm chạy đường chuẩn phương pháp Biuret 34 Bảng Bố trí thí nghiệm theo qui hoạch thực nghiệm với biến ảo công đoạn khử protein enzyme Alcalase .36 Bảng Bố trí thí nghiệm tâm phương án công đoạn khử protein enzyme Alcalase .36 Bảng Bố trí thí nghiệm theo qui hoạch thực nghiệm với biến ảo công đoạn khử protein NaOH 38 Bảng Bố trí thí nghiệm tâm phương án công đoạn khử protein NaOH 38 Bảng Bố trí thí nghiệm theo qui hoạch thực nghiệm với biến ảo cơng đoạn khử khống C6H5COOH 39 Bảng 10 Bố trí thí nghiệm tâm phương án cơng đoạn khử khoáng C6H5COOH 40 Bảng 11 Bố trí thí nghiệm theo qui hoạch thực nghiệm với biến ảo cơng đoạn khử khống HCl 41 Bảng 12 Bố trí thí nghiệm tâm phương án cơng đoạn khử khoáng HCl 41 Bảng 13 Thành phần hóa học phế liệu tơm thẻ chân trắng (%) .46 Bảng 14 Kết hàm lượng protein lại chế độ khử protein enzyme Alcalase .47 Bảng 15 Thí nghiệm tâm phương án công đoạn khử protein enzyme Alcalase .47 Bảng 16 Kết hàm lượng protein thí nghiệm tối ưu theo đường dốc 48 Bảng 17 Kết hàm lượng protein chế độ khử protein NaOH 49 v Bảng 18 Thí nghiệm tâm phương án công đoạn khử protein NaOH 50 Bảng 19 Kết hàm lượng protein thí nghiệm tối ưu theo đường dốc 50 Bảng 20 Thành phần hóa học phế liệu tôm thẻ Chân Trắng sau khử lý khử protein enzyme Alcalase NaOH điều kiên tối ưu 52 Bảng 21 Kết hàm lượng khống cịn lại phế liệu tơm chế độ khử khoáng C6H5COOH 53 Bảng 22 Thí nghiệm tâm phương án cơng đoạn khử khống C6H5COOH 53 Bảng 23 Thành phần hóa học phế liệu tơm thẻ Chân Trắng sau khử protein enzyme Alcalase, NaOH C6H5COOH điều kiên tối ưu .55 Bảng 24 Kết hàm lượng khống cịn lại phế liệu tôm chế độ khử khoáng HCl 55 Bảng 25 Thí nghiệm tâm phương án cơng đoạn khử khống HCl 55 Bảng 26 Kết đo OD330nm .1 Bảng 27 Kết đo OD570nm .1 Bảng 28 Bảng bố trí thí nghiệm Bảng 29.Các thí nghiệm tâm phương án Bảng 30 Các thí nghiệm tâm phương án công đoạn khử protein enzyme Alcalase .3 Bảng 31.Các số liệu dùng để tính tốn Bảng 32 Kết thực nghiệm tối ưu hóa cơng đoạn thủy phân khử protein enzyme Bảng 33.Các thông số tối ưu Bảng 34 Bảng bố trí thí nghiệm Bảng 35.Các thí nghiệm tâm phương án Bảng 36.Các thí nghiệm tâm phương án cơng đoạn khử protein NaOH Bảng 37 Các số liệu dùng để tính tốn Bảng 38.Kết thực nghiệm tối ưu hóa cơng đoạn khử protein NaOH 10 vi Bảng 39.Các thông số tối ưu 10 Bảng 40 Bảng bố trí thí nghiệm 11 Bảng 41 Các thí nghiệm tâm phương án 12 Bảng 42 Các thí nghiệm tâm phương án cơng đoạn khử khống C6H5COOH 12 Bảng 43.Các số liệu dùng để tính tốn 13 Bảng 44 Kết thực nghiệm tối ưu hóa cơng đoạn khử khống C6H5COOH 14 Bảng 45 Các thông số tối ưu .14 Bảng 46 Bảng bố trí thí nghiệm 15 Bảng 47 Các thí nghiệm tâm phương án 16 Bảng 48 Các thí nghiệm tâm phương án công đoạn khử protein NaOH .16 Bảng 49 Các số liệu dùng để tính tốn .17 Bảng 50 Kết thực nghiệm tối ưu hóa cơng đoạn khử khống HCl 18 Bảng 51 Các thông số tối ưu .18 vii DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.Cấu tạo Chitin .4 Hình Cấu tạo Chitosan Hình 3.Quy trình Stevens (2002) Học Viện Cơng Nghệ Châu Á .15 Hình 4.Quy trình sản xuất chitosan từ vỏ tôm hùm Hackman 17 Hình 5.Quy trình nhiệt Yamashaki Nakamichi (Nhật Bản) 17 Hình 6.Quy trình sản xuất Pháp 18 Hình 7.Quy trình Đỗ Minh Phụng, trường Đại học Thủy Sản 20 Hình Quy trình sản xuất Chitosan Trung tâm cao phân tử thuộc Viện khoa học Việt Nam 21 Hình Quy trình sản xuất Chitosan từ vỏ tơm Sú phương pháp hóa học với công đoạn xử lý kiềm (Trần Thị Luyến, 2003) 22 Hình 10 Quy trình Trung tâm Chế biến Đại học Thủy sản 24 Hình 11 Quy trình sản xuất chitin Holanda Netto (2006) 25 Hình 12 Quy trình sử dụng Enzyme papain để sản xuất chitosan 26 Hình 13.Quy trình dự kiến sản xuất 32 Hình 14.Quy trình sản xuất Chitin khơng dùng acid benzoic.(đối chứng) 33 Hình 15.Công thức phức Biuret 42 Hình 16 Phương trình đường chuẩn phương pháp Microbiuret .45 Hình 17 Phương trình đường chuẩn phương pháp Biuret .46 Hình 18 Kết nghiên cứu tối ưu hóa chế độ thủy phân enzyme theo phương pháp đường “lên dốc” BoxWillson 49 Hình 19 Kết nghiên cứu tối ưu hóa chế độ ngâm NaOH theo phương pháp đường “lên dốc” BoxWillson 51 Hình 20 Kết nghiên cứu tối ưu hóa chế độ ngâm C6H5COOH theo phương pháp đường “lên dốc” BoxWillson 54 Hình 21 Kết nghiên cứu tối ưu hóa chế độ ngâm HCl theo phương pháp đường “lên dốc” BoxWillson 57 Hình 22.Thiết bị ổn nhiệt Memmert 19 Hình 23 Thiết bị đo Uvmini-1240 .19 Hình 24.Máy li tâm .20 viii Hình 25.Thiết bị Vortex 20 Hình 26.Sự bắt màu dung dịch BSA sau cho thuốc thử Biuret 20 Hình 27 Cơng thức cấu tạo Sodium citrate 20 Hình 28 Mono Sodium Citrate Anhydrous .21 Hình 29 Dung dịch protein thuốc thử Biuret .21 Hình 30 Thủy phân đầu tơm .21 Hình 31 Đầu tơm vơ hoạt enzyme sau thủy phân(dùng nhiệt) 22 Hình 32 Phế liệu tơm sau thủy phân 22 Hình 33 Phế liệu tơm sau thủy phân enzyme Alcalase xử lý NaOH 22 Hình 34 Phế liệu tơm khử protein khư khoáng lần C6H5COOH 23 Hình 35 Phế liệu tơm(PLT) khử protein enzyme(trái), PLT khử protein enzyme NaOH .23 Hình 36 PLT khử protein enzyme NaOH(trái), PLT khử protein khử khoáng C6H5COOH 23 LỜI MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài: Ở Việt Nam chủ yếu sản xuất chitin-chitosan theo phương pháp hoá học có sử dụng loại hố chất với nồng độ cao, thời gian xử lý dài gây ảnh hưởng tới chất lượng chitin-chitosan chế phẩm khác sản xuất từ phế liệu giáp xác Vì vậy, việc nghiên cứu quy trình kết hợp phương pháp hố học với phương pháp sinh học đồng thời giảm tối đa lượng hố chất sử dụng cần thiết góp phần giảm chi phí sản xuất, nâng cao chất lượng sản phẩm Ngồi ra, cịn có nhiều hướng nghiên cứu sử dụng phế liệu giáp xác sản xuất mặt hàng có giá trị khác như: Astaxanthin, thức ăn chăn nuôi, chiết rút chất mùi… công nghệ gây ô nhiễm nên không cho phép tận dụng chất có hoạt tính khác Do việc sử dụng nguồn phế liệu từ vỏ tôm triển khai nhiều khu vực nước Việc tận dụng phế liệu vỏ tôm tập trung chủ yếu vào sản xuất thức ăn cho gia súc, sản phẩm Chitin-Chitosan, glucosamine, oligosaccharide… Tuy nhiên theo điều tra ban đầu công nghệ sản xuất Chitin-Chitosan nước thực chủ yếu theo phương pháp hóa học dẫn đến chất lượng chưa cao, hầu hết sở sản xuất Chitin-Chitosan chưa có hệ thống xử lý nước thải đạt tiêu chuẩn Nguyên nhân chủ yếu hàm lượng chất lơ lửng, chủ yếu chất có nguồn gốc từ protein Chúng có tính chất khó lắng q trình xử lí Như vậy, thu hồi protein sau trình thủy phân enzyme Alcalase tận dụng nguồn chất dinh dưỡng phế liệu đầu vỏ tôm để làm bột dinh dưỡng cho người, thức ăn cho gia súc, gia cầm, từ nâng cao nâng cao giá trị nguyên liệu, giảm tải cho q trình xử lí nước thải, hạn chế ô nhiễm môi trường Đồng thời việc sử dụng thủy phân enzyme hạn chế việc sử dụng hóa chất, gây nhiễm mơi trường Trong thực tế sở sản xuất phải thu nhân nguyên liệu từ khu vực xa, khơng tập trung khối lượng khơng lớn gây khó khăn chi phí vận chuyển Do việc nghiên cứu ứng dụng chế độ thủy phân enzyme góp phần kéo dài thời gian bảo quản nguyên liệu, giảm chi phí phơi sấy khơ ngun liệu, giảm ô nhiễm môi trường không vận chuyển tạm thời, đồng thời loại bỏ phần chất khoáng, protein Xuất phát từ thực tế trên, đồng ý Bộ môn Công nghệ Chế biếnKhoa Chế biến-Trường Đại học Nha Trang, hướng dẫn Thạc sĩ Ngơ Thị Hồi Dương, em thực đề tài: “ Nghiên cứu tối ưu hóa trình sản xuất Chitin theo phương pháp sinh học kết hợp hóa học.” 2.Mục đích đề tài: Xác định điều kiện tối ưu để khử protein từ phế liệu tôm thẻ chân trắng (Penaeus vannamei) enzyme Alcalase NaOH, đồng thời xác định điều kiện tối ưu để khử khoáng acid benzoic kết hợp HCl nhằm giảm thiểu hóa chất sử dụng, giảm nhiễm mơi trường, nâng cao chất lượng Chitin Tính khoa học thực tiễn đề tài: Thành công đề tài áp dụng sở sản xuất chitin với mục đích tận dụng nguồn protein từ đầu tơm, hạn chế sử dụng hóa chất nhằm giảm ô nhiễm môi trường sản xuất chitin-chitosan có chất lượng cao ứng dụng vào lĩnh vực đặc biệt ứng dụng y học, mỹ phẩm… Đề tài nguồn tài liệu hữu ích phục vụ cho công tác nghiên cứu chuyên sâu lĩnh vực Nội dung đề tài: - Tổng quan công nghệ sản xuất chitin-chitosan - Nghiên cứu sản xuất Chitin phương pháp sinh học Tối ưu hóa q trình khử protein enzyme kết hợp với NaOH Tối ưu hóa q trình khử khống có sử dụng acid benzoic - Đề xuất quy trình PHẦN 12 Bảng 41 Các thí nghiệm tâm phương án N0 U1 U2 Y(%) 0,015 26,05 10 0,015 25,14 11 0,015 26,23 Bảng 42 Các thí nghiệm tâm phương án cơng đoạn khử khoáng C6H5COOH 0 0 N0 A Y1u Y1 Y −Y1 1u 26,05 25,14 26,23 (Y 1u −Y1 ) 0,2433 ∑ Y10u u −1 = 25,8067 0,0592 - 0,6667 0,4444 0,4233 0,1792 Ta phương sai tái là: ∑ (Y S = th 1u u −1 ) − Y1 N0 − = A = 0.3414 N0 − N = : số thí nghiệm tâm phương án Kiểm định ý nghĩa hệ số hồi quy: Cấu trúc: H O : βi = Ha : β j ≠ tj = bj S bj = với S bj = S th = 0,2922 N Trong sbj độ lệch quân phương hệ số thứ j Tính tốn ta có: to= 96,907 t1= 6,2893 t2 =22,1881 ∑ (Y u −1 1u −Y ) = 0,6829 13 Tra bảng phân vị phân bố Student với p= 0,05; f = N - = Suy : t 0.05 ( ) = 4,3 Như hệ số t1,12 có ý nghĩa Khi phương trình hồi quy có dạng: Y1 = 26,3125 – 1,8375*X1 – 6,4825*X2 (3) Kiểm định tương thích mơ hình thực nghiệm thực nghiệm theo tiêu chuẩn Fisher Các số liệu dùng để tính tốn phương sai dư ( S th ) cho bảng sau: Bảng 43.Các số liệu dùng để tính tốn STT Yi ˆ Yi ˆ Yi − Yi ˆ Yi − Yi ) 35,21 36,6325 -1,4225 2,0235 34,38 32,9575 1,4225 25,09 23,6675 1,4225 18,57 19,9925 -1,4225 i =1 i ˆ − Yi ) = 8,09 2,0235 ∑ (Y 2,0235 N 2,0235 ∑ (Y − Yˆ ) N Phương sai dư S d = i =1 i N −1 i = 4,047 Trong đó: N: Số thí nghiệm 1: Số hệ số có nghĩa Sd 4,0470 = 11,853 Tiêu chuẩn Fisher : F = = 0,3414 S th Tra bảng phân vị phân bố Fisher F α (f1,f2) với: α =0,05 f1=N-L=2: Bậc tự tử f2=N0-1=2 : Bậc tự mẫu Tra bảng ta có: F0,05(2,2) =18,5 Vì F =11,853 < F0,05(2,2)=18,5; nên phương trình tương thích với thực nghiệm Nhìn vào phương trình hồi quy (3), ta có nhận xét: 14 Cả yếu tố nồng độ C6H5COOH, thời gian ngâm có ảnh hưởng đến mức độ khử khống thời gian khử khống có ảnh hưởng mạnh Các hệ số b1, b2 dấu âm, có nghĩa Y(hàm lượng khống cịn lại) đồng biến với X1 (nồng độ C6H5COOH), X2 (thời gian ngâm) Từ phương trình (3) ta tiến hành tối ưu hóa theo phương pháp đường dốc Chọn bước chuyển động nồng độ C 6H5COOH 0.0006M Các bước chuyển động yếu tố X1, X2 tính theo cơng thức sau hay chọn theo kinh nghiệm δ = δ b1 ∆ = ,59 b2 ∆ Kết thực nghiệm tối ưu hóa cơng đoạn thủy phân khử khoáng acid benzoic ghi bảng : Bảng 44 Kết thực nghiệm tối ưu hóa cơng đoạn khử khoáng C6H5COOH Tên X1 X2 Mức sở 0,015 Hệ số bj - 1,8375 -6,4825 Khoảng biến thiên 0,003 bj ∆ j -0,000945 -1,845 Bước δ j 0,0006 0,59 Bước làm trịn 0,0006 0,6 Thí nghiệm 0,0156 7,6 25,01 Thí nghiệm 10 0,0162 8,2 22,29 Thí nghiệm 11 0,0168 8,8 20,83 Thí nghiệm 12 0,0174 9,2 19,02 Bảng 45 Các thông số tối ưu Y 15 Các thơng số tối ưu Hàm lượng khống (%) Nồng độ C6H5COOH : 0,0168M Thời gian: 8,8 Tỷ lệ w/v: 1/10 20,83 4) Phương pháp quy hoạch thực nghiệm để tối ưu hóa cho cơng đoạn khử khống từ phế liệu tơm HCl: Phương pháp quy hoạch thực nghiệm số thí nghiệm cần tiến hành để đánhgiá vai trò yếu tố là: N=nk Trong đó: N : Số thí nghiệm; n: Số mức, n=2 k: Số yếu tố ảnh hưởng; k=2 N = 22 = thí nghiệm Tính hệ số phương trình hồi quy: N X ∑ bj = i = ij Yi Ở đây: j = 0, 1,2, …k với k số yếu tố độc lập N số thí nghiệm ma trận quy hoạch thực nghiệm N=4 Bảng 46 Bảng bố trí thí nghiệm N U1(nồng độ M) U2(thời gian) X0 X1 X2 Y(%)lượng khống cịn lại 0,6 -1 -1 4,98 0,8 1 -1 2,24 0,6 10 -1 2,86 0,8 10 1 0,63 Thay số ta tính hệ số: b0 = 2,7025 ; b1= -1,2425; b2= -0,9325 16 Phương trình hồi quy tuyến tính dạng rút gọn là: Y = 2,7025 – 1,2425*X1 – 0,9325*X2 (4) Kiểm định tính ý nghĩa hệ số phương trình hồi quy Bố trí thí nghiệm song song khử khống phế liệu tơm C 6H5COOH theo điều kiện tâm phương án Các thí nghiệm bố trí sau: Bảng 47 Các thí nghiệm tâm phương án N0 U1 U2 Y(%) 0,7 1,94 10 0,7 1,81 11 0,7 1,79 Bảng 48 Các thí nghiệm tâm phương án công đoạn khử protein NaOH 0 0 N0 A Y1u 0 Y1 Y1u − Y 1 1,94 1,81 1,79 ∑Y 1u u −1 ∑ (Y S th = u −1 1u -0,0367 0,0013 0,0032 ) = A = 0,0066 N0 −1 Kiểm định ý nghĩa hệ số hồi quy: Cấu trúc: H O : βi = Ha : β j ≠ bj S bj = ) 0,0087 N = : số thí nghiệm tâm phương án tj = −Y1 -0.0567 = 1,8467 −Y1 N0 −1 1u 0,0933 Ta phương sai tái là: (Y với S bj = S th = N 0,0407 ∑ (Y u −1 1u −Y1 ) = 0.0133 17 Trong sbj độ lệch quân phương hệ số thứ j Tính tốn ta có: to= 65,7479 ; t1= 30,5113; t2 =22,89 Tra bảng phân vị phân bố Student với p= 0,05; f = N - = Suy : t 0.05 ( ) = 4,3 Như hệ số t1,12 có ý nghĩa Khi phương trình hồi quy có dạng: Y1 = 2,7025 – 1,2425*X1 – 0,9325*X2 (4) Kiểm định tương thích mơ hình thực nghiệm thực nghiệm theo tiêu chuẩn Fisher Các số liệu dùng để tính tốn phương sai dư ( S th ) cho bảng sau: Bảng 49 Các số liệu dùng để tính tốn STT Yi ˆ Yi ˆ Yi − Yi ˆ Yi − Yi ) 4,98 4,8525 0,1275 0,0163 2,24 2,3675 -0,1275 0,0163 2,86 2,9875 -0,1275 0,0163 0,63 0,5025 0,1275 0,0163 ∑(Y N Phương sai dư Sd = i =1 i ˆ − Yi ) N −1 = 0,0325 Trong đó: N: Số thí nghiệm 1: Số hệ số có nghĩa Sd 4.0470 = 4,9014 Tiêu chuẩn Fisher : F = = S th 0.3414 Tra bảng phân vị phân bố Fisher F α (f1,f2) với: α =0,05 f1=N-L=2: Bậc tự tử f2=N0-1=2 : Bậc tự mẫu Tra bảng ta có: F0,05(2,2) =18,5 N ∑ (Y i =1 i ˆ − Yi ) = 0,07 18 Vì F =4,9014 < F0,05(2,2) =18,5; nên phương trình tương thích với thực nghiệm Nhìn vào phương trình hồi quy (4), ta có nhận xét: Cả yếu tố nồng độ HCl, thời gian ngâm có ảnh hưởng đến mức độ khử khống nồng độ có ảnh hưởng mạnh Các hệ số b1, b2 dấu âm, có nghĩa Y(hàm lượng khống cịn lại) đồng biến với X1 (nồng độ HCl), X2 (thời gian ngâm) Từ phương trình (4) ta tiến hành tối ưu hóa theo phương pháp đường dốc Chọn bước chuyển động nồng độ HCl 0,02M Các bước chuyển động yếu tố X1, X2 tính theo cơng thức sau hay chọn theo kinh nghiệm δ2 = δ1 b1∆ = 0,579 b2 ∆2 Kết thực nghiệm tối ưu hóa cơng đoạn thủy phân khử khoáng acid chlohydric ghi bảng : Bảng 50 Kết thực nghiệm tối ưu hóa cơng đoạn khử khống HCl Tên X1 X2 Mức sở 0,7 Hệ số bj - 1,2425 -0,9325 Khoảng biến thiên 0,1 bj ∆ j -0,12425 -2,7975 Bước δ j 0,02 0,579 Bước làm tròn 0,02 0,6 Thí nghiệm 0,72 7,6 1,53 Thí nghiệm 10 0,74 8,2 0,98 Thí nghiệm 11 0,76 8,8 0,83 Thí nghiệm 12 0,78 9,2 0,77 Bảng 51 Các thông số tối ưu Các thơng số tối ưu Hàm lượng khống (%) Nồng độ HCl : 0,74M 0,98 Y 19 Thời gian: 8,2 Tỷ lệ w/v: 1/10 5) Một số thiết bị sử dụng đề tài: Hình 22.Thiết bị ổn nhiệt Memmert Hình 23 Thiết bị đo Uvmini-1240 20 Hình 24.Máy li tâm Hình 25.Thiết bị Vortex Hình 26.Sự bắt màu dung dịch BSA sau cho thuốc thử Biuret Hình 27 Cơng thức cấu tạo Sodium citrate 21 Hình 28 Mono Sodium Citrate Anhydrous Hình 29 Dung dịch protein thuốc thử Biuret Hình 30 Thủy phân đầu tơm 22 Hình 31 Đầu tơm vơ hoạt enzyme sau thủy phân(dùng nhiệt) Hình 32 Phế liệu tơm sau thủy phân Hình 33 Phế liệu tôm sau thủy phân enzyme Alcalase xử lý NaOH 23 Hình 34 Phế liệu tơm khử protein khư khoáng lần C6H5COOH Hình 35 Phế liệu tơm(PLT) khử protein enzyme(trái), PLT khử protein enzyme NaOH Hình 36 PLT khử protein enzyme NaOH(trái), PLT khử protein khử khoáng C6H5COOH ... yêu cầu sản phẩm cuối Có hai phương pháp để sản xuất chitin: phương pháp hóa học phương pháp sinh học -Phương pháp hóa học: Q trình khử khống thực việc sử dụng HCl acid hữu khác kết hợp hai nhiệt... đạt phương pháp hố học khơng thể đạt phương pháp sinh học Vì vậy, người ta kết hợp hai phương pháp nhằm khắc phục nhược điểm phương pháp Hiện nay, khó khăn phương pháp hố học để sản xuất chitin. .. 49 Hình 19 Kết nghiên cứu tối ưu hóa chế độ ngâm NaOH theo phương pháp đường “lên dốc” BoxWillson 51 Hình 20 Kết nghiên cứu tối ưu hóa chế độ ngâm C6H5COOH theo phương pháp đường “lên