Đánh giá tương đương sinh học viên felodipin giải phóng kéo dài theo cơ chế bơm thẩm thấu kéo - đẩy

Mục tiêu nghiên cứu của bài viết nhằm đánh giá tương đương sinh học viên FE 5 mg thẩm thấu 2 lớp giải phóng kéo dài 24 giờ so sánh với felutam CR 5 mg là viên nén giải phóng có kiểm soát hiện đang lưu hành trong nước.

TạP CHí Y - DƯợc học quân số chuyên ®Ị d−ỵc-2016 ĐÁNH GIÁ TƯƠNG ĐƯƠNG SINH HỌC VIÊN FELODIPIN GIẢI PHÓNG KÉO DÀI THEO CƠ CHẾ BƠM THẨM THẤU KÉO - ĐẨY Vũ Thị Thanh Huyền*; Phạm Thị Minh Huệ**; Nguyễn Thị Kiều Anh** Tạ Mạnh Hùng***; Nguyễn Thanh Hải**** TÓM TẮT Mục tiêu: đánh giá tương đương sinh học viên nén felodipin (FE) mg giải phóng kéo dài theo chế bơm thẩm thấu kéo - đẩy (push - pull osmotic pump - PPOP) so với thuốc đối chứng felutam CR người tình nguyện Phương pháp: thiết kế nghiên cứu theo mơ hình chéo, ngẫu nhiên, đơn liều, mù đơn, hai thuốc, hai trình tự, hai giai đoạn, thời gian nghỉ hai giai đoạn 08 ngày Xác định nồng độ FE huyết tương phương pháp sắc ký lỏng siêu hiệu ghép nối với detector khối phổ (UPLC-MS/MS) Kết quả: khoảng tin cậy 90% tỷ lệ giá trị trung bình thông số dược động học Cmax, AUC0-t, AUC0-∞ thuốc thử so với thuốc chứng, tính số liệu chuyển logarit 88,29 - 138,97%; 88,36 - 109,22%, 83,93 - 119,09% Kết luận: viên FE nghiên cứu tương đương sinh học với viên felutam CR lưu hành thị trường Vì vậy, hai chế phẩm dùng thay lâm sàng * Từ khóa: Felodipin; Bơm thẩm thấu kéo - đẩy; Tương đương sinh học Study of Bioequivalence of Extended Release Push-Pull Osmotic Tablets of Felodipine Summary Objectives: A bioequivalence study between the extended release push-pull osmotic tablets of mg FEe and felutam CR mg tablet (Vietnam Vellpharm Pharmaceuticals Ltd, Vietnam) as reference was carried out in 12 healthy human volunteers Methods: The study design was an open label, randomised, 2-period, 2-treatment, 2-sequence, crossover, single-dose bioequivalence study The estimation of FEe in plasma samples was carried out by a validated UPLC-MS/MS method Results: The pharmacokinetic parameter Cmax, AUC0-t and AUC0-∞ were tested for bioequivalence after log-transformation of data, while the differences of Tmax were evaluated non-parametrically 90% confidence intervals of the mean values for Cmax, AUC0-t and AUC0-∞ were 88.29 - 13.97%; 88.36 - 109.22% and 83.93 - 119.09%, respectively All of these values were within the bioequivalence acceptance range Conclusion: There was no statistically significant difference between two formulations of FEe, so both formulations of FEe were bioequivalent and therefore interchangeable in clinical practice * Key words: Felodipine; Push-pull osmotic pump; Bioequivalence * Học viện Quân y ** Trường Đại học Dược Hà Nội *** Viện Kiểm nghiệm Thuốc Trung ương **** Trường Đại học Quốc gia Hà Nội Người phản hồi (Corresponding): Vũ Thị Thanh Huyền (huyenbmai@gmail.com) Ngày nhận bài: 20/07/2016; Ngày phản biện đánh giá báo: 26/08/2016 Ngày báo đăng: 14/09/2016 45 T¹p chÝ y - dợc học quân số chuyên đề dợc-2016 ĐẶT VẤN ĐỀ Felodipin dược chất chẹn kênh canxi chậm có tính chất chọn lọc thuộc dẫn chất 1,4-dihydropyridin, thường dùng để điều trị tăng huyết áp dự phòng đau thắt ngực [1] Tuy nhiên, FE có sinh khả dụng thấp thay đổi, dẫn tới phải dùng nhiều lần ngày Cách dùng nhiều lần ngày dẫn đến biến động nồng độ dược chất huyết tương không thuận lợi cho việc tuân thủ bệnh nhân [4] Ngoài ra, FE giải phóng nhanh sau dùng cho nồng độ dược chất huyết tương cao, gây tác dụng phụ đáng kể, nguy hiểm tụt huyết áp hệ thống nhịp tim nhanh phản xạ [5] Để giảm số lần dùng thuốc trì nồng độ dược chất máu vùng điều trị, dạng bào chế giải phóng kéo dài theo chế thẩm thấu nghiên cứu phát triển Trong đó, bơm thẩm thấu kéo đẩy (push-pull osmotic pump - PPOP) có nhiều ưu điểm dễ trì tốc độ giải phóng dược chất theo động học bậc khơng đến giải phóng hết dược chất, thích hợp với dược chất có độ tan khác nhau, đặc biệt dược chất tan… [6] Ứng dụng công nghệ PPOP bào chế FE, tối ưu hóa cơng thức viên FE mg thẩm thấu lớp giải phóng kéo dài 24 xây dựng quy trình thích hợp để bào chế quy mơ 10.000 viên Tiếp đó, tiến hành nghiên cứu đề tài nhằm: Đánh giá tương đương sinh học viên FE mg thẩm thấu lớp giải phóng kéo dài 24 so sánh với felutam CR mg viên nén giải phóng có kiểm sốt lưu hành nước 46 NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Nguyên liệu thiết bị * Chế phẩm nghiên cứu: - Chế phẩm thử: viên nén FE mg giải phóng kéo dài 24 theo chế PPOP bào chế (FE SR mg số lô: 0813, HD: 08 - 2015) - Chế phẩm đối chiếu: viên nén giải phóng có kiểm sốt felutam CR mg: số lơ 12 005; NSX: 27 - 07 - 2012; HD: 07 - 2014; SĐK: VD-12000-10 Công ty TNHH Dược phẩm Vellpharm Việt Nam sản xuất * Dung mơi, hố chất: - Chất chuẩn: + FE: Viện Kiểm nghiệm Thuốc Trung ương, SKS: WS.0107222, hàm lượng 99,30%; độ ẩm 0,06% + Glibenclamid: Viện Kiểm nghiệm Thuốc Trung ương, SKS 0103129, hàm lượng 99,70%; độ ẩm 0,09% Sử dụng glibenclamid làm chất nội chuẩn phương pháp phân tích - Dung mơi, hóa chất: đạt tiêu chuẩn tinh khiết dùng cho HPLC LC/MS - Huyết tương trắng: Viện Huyết học Truyền máu Trung ương cung cấp * Thiết bị nghiên cứu: Hệ thống sắc ký lỏng khối phổ Thermo Scientific (Mỹ) hiệu chuẩn, cân phân tích VKN/TĐSH/01.21 Sartorius-CP224S (Đức), máy lắc xoáy Velp (Ý), thiết bị bay dung môi Thermo Scientific (Mỹ), máy ly tâm lạnh VKN/TĐSH/46.04 Sigma 2-16K (Đức), thiết bị lọc nước TKA (Đức), máy lắc ngang (Đức), ống chiết thủy tinh 15 ml, micropipet, bình nh mc TạP CHí Y - DƯợc học quân số chuyên đề dợc-2016 Phng phỏp nghiờn cu * Thiết kế nghiên cứu: nghiên cứu chéo, ngẫu nhiên, đơn liều, mù đơn, hai thuốc, hai trình tự, hai giai đoạn Thời gian nghỉ hai giai đoạn 08 ngày Thử nghiệm 12 người tình nguyện khỏe mạnh Đề cương nghiên cứu Hội đồng Đạo đức Nghiên cứu Y Sinh học Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương phê duyệt (Phiếu chấp thuận số 29/2013/HĐ-ĐĐ ngày 12 - 11 - 2013) * Người tình nguyện: 12 người tình nguyện khoẻ mạnh, tuổi 18 - 55, số BMI từ 18 - 25 kg/m2, đáp ứng yêu cầu đánh giá sức khỏe theo đề cương, bao gồm khám tổng quát, xét nghiệm máu nói chung sàng lọc kháng thể HIV, kháng nguyên viêm gan B, xét nghiệm nước tiểu với nữ giới * Phác đồ thử nghiệm: - Liều dùng: đơn liều, viên mg thuốc thử thuốc chứng/người cho giai đoạn - Cách dùng: uống viên thuốc nguyên vẹn với 240 ml nước ấm Trong vòng sau uống thuốc, Người tình nguyện khơng nằm - Xác định trình tự: lựa chọn ngẫu nhiên trình tự dùng thuốc cho người tình nguyện phần mềm Excel Phân nhóm uống thuốc nghiên cứu theo trình tự sau: Người tình nguyện Giai đoạn Giai đoạn Nhóm Thuốc thử Thuốc chứng Nhóm Thuốc chứng Thuốc thử * Lấy mẫu: - Mỗi giai đoạn, người tình nguyện có mặt khu vực lấy mẫu từ đêm hôm trước (khoảng - 10 trước uống thuốc) thời điểm lấy mẫu 24 Sau đó, người tình nguyện trở nơi cư trú quay lại lấy mẫu thời điểm 48 vào sáng hôm sau Người tình nguyện khơng ăn trước uống thuốc, ăn bữa trưa bữa tối vào khoảng 10 sau uống thuốc Khẩu phần ăn tiêu chuẩn hóa thống giai đoạn người tình nguyện Người tình nguyện khơng uống nước vòng trước sau uống thuốc, không kể uống thuốc - Cách lấy máu: ngày lấy mẫu tập trung, luồn kim 20 G Introcan - W vào tĩnh mạch cố định cánh tay cho không ảnh hưởng tới vận động cánh tay người tình nguyện Lấy máu qua kim vào ống nghiệm có chứa chất chống đông EDTA, lắc cách lật ngược ống - lần sau cho máu vào Ly tâm với tốc độ 4.000 vòng/phút 10 phút Tách lớp huyết tương cho vào ống polyethylen có dán nhãn, bảo quản -35°C ± 5°C phân tích - Thể tích mẫu đồ đựng: lần lấy khoảng ml máu, đựng vào ống nghiệm có chứa sẵn khoảng 10 mg EDTA - Thời điểm lấy mẫu giai đoạn: lấy mẫu thời điểm (trong vòng trước uống thuốc) thời điểm 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 14, 16, 24, 48 sau ung 47 Tạp chí y - dợc học quân số chuyên đề dợc-2016 * Phõn tớch mu: - Xử lý mẫu: mẫu huyết tương để rã đông nhiệt độ phòng Lấy ml huyết tương, thêm 100 µl dung dịch chuẩn nội, lắc xốy 15 giây Sau đó, chiết với ml hỗn hợp dung mơi cloroform-diethylether (tỷ lệ thích hợp) Lắc, ly tâm 2.000 g x phút Lấy lớp dung mơi, dòng khí nitơ đến cắn Hòa cắn 500 µl pha động, lọc qua màng lọc 0,45 µm tiêm vào cột sắc ký - Phương pháp phân tích: xác định nồng độ FE huyết tương phương pháp UPLC-MS/MS, chuẩn nội glibenclamid [3] + Điều kiện sắc ký: Cột RP 18e: 50 x mm; 1,8 µm Nhiệt độ cột 400C Pha động: methanol - isopropanol acetonitril - amoni acetat mM, tỷ lệ phù hợp Tốc độ dòng: 0,2 ml/phút Thể tích tiêm mẫu: µl + Điều kiện khối phổ: kiểu phổ khối: MS/MS, nguồn ion hóa ESI (+) - Thẩm định phương pháp: Thẩm định phương pháp theo tiêu chí: + Tính chọn lọc dược chất chuẩn nội + Sự tương quan tuyến tính nồng độ tỷ lệ diện tích píc dược chất/chuẩn nội + Độ độ xác phương pháp thực nồng độ: giới hạn định lượng (LLOQ), nồng độ thấp (LQC), nồng độ trung bình (MQC) nồng độ cao (HQC) Tỷ lệ thu hồi thực nồng độ: LQC, MQC, HQC 48 + Mẫu huyết tương ổn định bảo quản nhiệt độ -35°C ± 5°C thời gian 20 ngày * Phân tích dược động học: Xác định thông số dược động học FE người tình nguyện theo nồng độ thuốc xác định thời điểm, bao gồm: - Nồng độ thuốc tối đa huyết tương (Cmax): xác định trực tiếp giá trị đo - Thời gian đạt nồng độ thuốc tối đa (Tmax): xác định trực tiếp giá trị đo - Hằng số tốc độ thải trừ (Kel): xác định từ độ dốc đường tuyến tính biểu diễn giá trị nồng độ thuốc pha thải trừ (số liệu chuyển logarit) theo thời gian, tính giá trị nồng độ - Thời gian bán thải (t1/2): tính theo mơ hình dược động học tuyến tính, khơng ngăn theo cơng thức: t1/ = 0,693 Kel - Diện tích đường cong (AUC): AUC0-t: xác định phương pháp hình thang, tính từ thời điểm đến thời điểm t (điểm cuối xác định nồng độ thuốc huyết tương cá thể) theo công thức: [AUC ]t0 = ∑ (Ci + Ci+1 ) × (ti+1 − ti ) n −1 i =0 Trong đó, Ci nồng độ thuốc thời điểm lấy mu ti TạP CHí Y - DƯợc học quân số chuyên đề dợc-2016 AUC0-: ngoi suy t giỏ tr AUC0-t, ước tính đến vơ theo mơ hình dược động học tuyến tính, khơng ngăn theo cơng thức: AUC0−∞ = AUC0−t C + n Kel Trong đó, Cn nồng độ thuốc thời điểm lấy mẫu cuối định lượng * Phân tích thống kê: Phân tích thống kê đánh giá tương đương sinh học theo hướng dẫn Dược điển Việt Nam IV: - So sánh giá trị Cmax AUC: phân tích ANOVA, xác định khoảng tin cậy 90% cho tỷ lệ thuốc thử so với thuốc chứng, tính số liệu chuyển logarit; sử dụng phần mềm WinNonlin 5.2 - So sánh giá trị Tmax: theo phương pháp phân tích phi tham số Wilcoxon (Wilcoxon signed-rank test), dựa việc xác định tổng giá trị xếp hạng dương âm xác định mức ý nghĩa p phương pháp theo giá trị z theo cách sau: Z= R − N ( N + 1) / N ( N + 1) / 2)( N + 1) / 12 Trong đó, R tổng xếp hạng (dương âm); N số cặp giá trị tmax thuốc thử thuốc chứng có sai khác Từ giá trị Z, tra bảng “Cumulative normal distribution” để xác định giá trị Area, giá trị p = - Area - Tiêu chuẩn chấp nhận: + Khoảng tin cậy 90% thuốc thử so với thuốc chứng nằm giới hạn 70,00 - 143,00% giá trị Cmax trung bình, giới hạn 80,00 - 125,00% giá trị AUC trung bình + Giá trị Tmax thuốc thử thuốc chứng khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (giá trị tổng xếp hạng dương âm (sum of possitive/negative rank) lớn giá trị tra bảng theo số n giá trị p > 0,05 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN Thẩm định phương pháp định lượng FE huyết tương Do hàm lượng FE nhỏ, nồng độ FE máu uống thuốc thấp (từ 10 ng/ml), nên nghiên cứu xây dựng thẩm định phương pháp UPLC/MS-MS để định lượng FE huyết tương người Lựa chọn điều kiện sắc ký khối phổ cho tách tốt FE, khơng lẫn píc tạp, phù hợp với việc phân tích mẫu Thẩm định tiêu phương pháp theo quy định FDA hướng dẫn ASEAN Bảng 1: Kết thẩm định phương pháp định lượng FE huyết tương Chỉ tiêu thẩm định Giá trị LLOQ Khoảng tuyến tính Kết 0,2 ng/ml 0,2 - 20 ng/ml Nồng độ LQC 0,6 ng/ml Nồng độ MQC 8,0 ng/ml Nồng độ HQC 16 ng/ml 49 Tạp chí y - dợc học quân số chuyên đề dợc-2016 ỳng - xác ngày Độ - độ xác khác ngày LLOQ: 98,4% CV% = 13,5% LQC: 101,3% CV% = 5,2% MQC: 95,6% CV% = 3,1% HQC: 102,6% CV% = 5,0% LLOQ: 101,3% CV% = 12,0% LQC: 100,7% CV% = 7,0% MQC: 100,8% CV% = 7,2% HQC: 101,2% CV% = 6,4% Tỷ lệ thu hồi chuẩn nội 92,9% Tỷ lệ thu hồi FE LQC: 84,3%; MQC: 84,5%; HQC: 86,8% Độ ổn định dung dịch chuẩn nội làm việc thời gian ngắn giờ/nhiệt độ phòng Chỉ tiêu thẩm định Kết Độ ổn định huyết tương thời gian ngắn giờ/nhiệt độ phòng Độ ổn định huyết tương dài ngày 28 ngày/-35 ± C Độ ổn định huyết tương đơng - rã vòng Độ ổn định autosampler 22 giờ/20 C ° ° Với giá trị giới hạn định lượng nhỏ (0,2 ng/ml) xấp xỉ 1/20 giá trị Cmax, khoảng tuyến rộng từ 0,2 - 20 ng/ml, độ cao, độ lặp lại với giá trị CV% nhỏ thời gian phân tích ngắn (2,0 phút cho mẫu) Phương pháp xây dựng đáp ứng yêu cầu phương pháp phân tích thuốc dịch sinh học áp dụng để định lượng FE huyết tương người tình nguyện nghiên cứu sinh khả dụng đánh giá tương đương sinh học chế phẩm chứa FE [3] Đánh giá tương đương sinh học viên FE SR felutam CR Tiến hành phân tích sau kết thúc lấy mẫu giai đoạn người tình nguyện Phân tích mẫu huyết tương người tình nguyện điều kiện, ngày Tổng số có 384 mẫu giai đoạn 12 người tình nguyện phân tích thời gian ngày Thời gian tính từ thời điểm lấy mẫu tới kết thúc phân tích 16 ngày, đảm bảo tất mẫu phân tích khoảng thời gian độ ổn định mẫu sinh học thẩm định (20 ngy) 50 TạP CHí Y - DƯợc học quân số chuyên đề dợc-2016 Hỡnh 1: ng cong trung bình nồng độ FE theo thời gian 12 người tình nguyện Bảng 2: Tóm tắt số liệu so sánh sinh khả dụng Giá trị trung bình* thuốc thử Giá trị trung bình* thuốc chứng Tỷ lệ giá trị trung bình* thuốc thử/chứng (%) Khoảng tin cậy 90% Cmax 0,689 0,622 110,8 88,29 - 138,97% AUC0-t 6,152 6,116 100,6 88,36 - 109,22% AUC0-∞ 9,085 9,087 100,0 83,93 - 119,09% Thông số ((*): Giá trị trung bình hình học) Kết so sánh Tmax thuốc thử thuốc chứng theo phương pháp thống kê không tham số (Wilcoxon Signed Rank test) tỷ số giá trị Tmax thuốc thử so với thuốc đối chứng sau Bảng 3: So sánh giá trị Tmax theo phương pháp thống kê phi tham số Tmax (giờ) Mã người tình nguyện T R Tỷ số T/R F01 4,0 5,0 F02 4,0 F03 Chênh lệch Xếp hạng (+) (-) (+) (-) 0,80 - -1,0 3,5 5,0 0,80 - -1,0 3,5 4,0 5,0 0,80 - -1,0 3,5 F04 6,0 5,0 1,20 1,0 - F05 5,0 5,0 1,00 - - F06 12,0 10,0 1,20 2,0 - F07 5,0 5,0 1,00 3,5 8,0 - 51 Tạp chí y - dợc học quân số chuyên ®Ị d−ỵc-2016 F08 4,0 6,0 0,67 - -2,0 8,0 F09 4,0 5,0 0,80 - -1,0 3,5 F10 6,0 7,0 0,86 - -1,0 3,5 F11 5,0 5,0 1,00 - - F12 7,0 5,0 1,40 2,0 - Trung bình 5,5 5,7 0,96 SD 2,3 1,5 0,22 Tổng số 8,0 19,5 25,5 Giá trị tra bảng ứng với số cặp sai khác n = 5, mức tin cậy 95% Tổng thứ hạng dương âm lớn giá trị tra bảng Z = R − N ( N + 1) / = 0,36 N ( N + / )( N + ) / 12 Area = 0,64 (tra bảng: Cumulative Normal Distribution) p-value = - 0,64 = 0,36 > 0,05 Bảng 4: Các thông số dược động học trung bình (n = 12) Thơng số Cmax ± SD (ng/ml) AUC0-t ± SD (ng.giờ/ml) AUC0-∞ ± SD (ng.giờ/ml) Tmax ± SD (giờ) FE SR mg 3,691 ± 1,177 12,691 ± 3,619 14,063 ± 3,867 1,4 ± 0,50 Felutam CR 3,376 ± 0,900 11,029 ± 3,573 12,211 ± 3,822 1,3 ± 0,50 Chế phẩm Từ kết phân tích thống kê dựa tiêu chuẩn chấp nhận, thấy: - Giá trị Cmax, AUC0-t, AUC0-∞ thuốc thử thuốc chứng tương đương theo hướng dẫn Dược điển Việt Nam IV - Giá trị Tmax thuốc thử thuốc chứng khác khơng có ý nghĩa thống kê với mức tin cậy > 95% - Viên bào chế nghiên cứu tương đương sinh học với viên đối chiếu felutam CR (cùng chế bơm thẩm thấu sản xuất nhượng quyền Việt Nam) KẾT LUẬN Nghiên cứu đánh giá tương đương sinh học xác định thông số dược động học viên FE mg giải phóng kéo dài người tình nguyện Kết cho thấy: giá trị Cmax, AUC0-t, AUC0-∞ 52 thuốc thử thuốc chứng tương đương nhau, giá trị Tmax khác khơng có ý nghĩa thống kê Viên FE mg giải phóng kéo dài theo chế bơm thẩm thấu kéo đẩy bào chế tương đương sinh học với viên felutam CR lưu hành thị trường T¹P CHí Y - DƯợc học quân số chuyên đề d−ỵc-2016 TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ Y tế Dược thư Quốc gia Việt Nam Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Hà Nội Xuất lần thứ hai 2015, tr.650-652 Bộ Y tế Dược điển Việt Nam IV Nhà xuất Y học Hà Nội 2009, tr.PL-221 Tạ Mạnh Hùng, Phạm Thanh Huyền, Đoàn Cao Sơn, Vũ Thị Thanh Huyền, Nguyễn Thanh Hải Định lượng FE huyết tương người phương pháp sắc ký lỏng siêu hiệu ghép nối với detector khối phổ (UPLC-MS/MS) Tạp chí Dược học 2014, số 453, tr.39-44 Jana U, Mohanty AK, Pal SL, Manna PK, Mohanta GP FEe loaded PLGA nanoparticles: preparation, physicochemicl characterization and in vivo toxicity study Nano Convergence 2014, (31), pp.1-10 Patel DS, Shanker N, Shah SK, Thakkar VK, Mehta NN, Srivstava AK, Singh S, Patel CG Bioequivalence study of two oral extended release formulations of felodipine 10 mg tablets in healthy human volunteers under fed condition Pharma Science Monitor (An International Journal of Pharmaceutical Sciences 2011, (2): S9-S20 Prasoon P, Ramya Devi D, Vedha Hari BN Push-pull osmotic tablets - An overview with its commercial significance Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences 2014, (3), pp.12-25 53 ... chế giải phóng kéo dài theo chế thẩm thấu nghiên cứu phát triển Trong đó, bơm thẩm thấu kéo đẩy (push-pull osmotic pump - PPOP) có nhiều ưu điểm dễ trì tốc độ giải phóng dược chất theo động học. .. thống kê Viên FE mg giải phóng kéo dài theo chế bơm thẩm thấu kéo đẩy bào chế tương đương sinh học với viên felutam CR lưu hành thị trng TạP CHí Y - DƯợc học quân số chuyên đề dợc-2016 TI LIU THAM... > 95% - Viên bào chế nghiên cứu tương đương sinh học với viên đối chiếu felutam CR (cùng chế bơm thẩm thấu sản xuất nhượng quyền Việt Nam) KẾT LUẬN Nghiên cứu đánh giá tương đương sinh học xác