Đang tải... (xem toàn văn)
Nghiên cứu với mục tiêu nhằm khảo sát phương pháp chiết sao cho thu được hiệu suất cao và thành phần hoạt chất ổn định để đưa vào thị trường. Từ đó khẳng định giá trị y học và kinh tế, tạo điều kiện phát triển và trồng trọt các cây này trên diện rộng.
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 KHẢO SÁT THỰC VẬT VÀ PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN TINH DẦU CỦA CÂY TRONG HỌ LAMIACEAE (Rosemarinus officinalis L.; Mentha piperita L.; Thymus vulgaris L.), ĐÃ DI THỰC VÀ ĐANG ĐƯỢC TRỒNG VỚI QUI MÔ LỚN TẠI BẢO LỘC Huỳnh Thị Ngọc Sương*, Phan Thanh Dũng*, Võ Thị Bạch Huệ* TÓM TẮT Mở đầu: Ba Rosemarinus officinalis L., Mentha piperita L Thymus vulgaris L thuộc họ Lamiaceae di thực từ Pháp vào Việt Nam trồng Bảo Lộc từ lâu mặc thực vật thành phần hóa học chưa khảo sát Mục tiêu: Khảo sát phương pháp chiết cho thu hiệu suất cao thành phần hoạt chất ổn định để đưa vào thị trường Từ khẳng định giá trị y học kinh tế, tạo điều kiện phát triển trồng trọt diện rộng Phương pháp: Các tinh dầu chiết hàng ngày thiết bị chiết Clevenger, từ ghi lại đặc điểm động học q trình chiết Hiệu suất tinh dầu tính theo ml tinh dầu thu 100 g dược liệu Thành phần hóa học tinh dầu xác định máy sắc ký khí ghép khối phổ (GC-MS) So sánh với phổ chuẩn thư viện NIST 5.0 Kết quả: Phân tích thành phần tinh dầu thơng qua GC-MS xác định thành phần tinh dầu R officinalis camphor (22,47%), 1,8-cinéol (19,3), α-pinen (12,53%), T vulgaris thymol (36,58%), γ-terpinen (19,41%), ρ-cymen (14,81%), M piperita dl-menthol (21,89%), isomenthon (12,38%) Kết luận: Kết thu cho thấy hiệu suất chiết tinh dầu nghiên cứu cao, thành phần hóa học tinh dầu đáng quan tâm Từ cho thấy, việc chiết xuất quy mô công nghiệp tinh dầu hồn tồn có khả thi đem lại lợi ích kinh tế định Từ khóa: Tinh dầu, Sắc ký khí ghép với khối phổ (GC-MS), Rosemary, Thyme, Peppermint ABSTRACT SURVEY AND ANALYSIS OF PLANT ESSENTIAL OIL COMPOSITION OF THREE PLANTS IN THEIR LAMIACEAE, ACCLIMATIZED FROM FRANCE AND GROWING AT BAO LOC Huynh Thi Ngoc Suong, Phan Thanh Dung, Vo Thi Bach Hue * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 18 - Supplement of No - 2014: 188 - 192 Background: Three herbs: Rosemary (Rosmarinus officinalis L.), Thyme (Thymus vulgaris L.) and Peppermint (Mentha piperita L.) were acclimatized from France and grew long time ago in Bao Loc, however, their botanical characteristics and chemical compositions have not been studied Objectives: To investigate the extraction method of Essential oil for high yield and stable compositions in order to commercializing Based on that, their medicinal and economical values will be confirmed and their culltivation can be widely promoted Methods: The essential oils extracted daily by hydrodistillation with Clevenger equipment and extraction kinetics were recorded Extraction yield was calculated by volume (ml) of essential oils obtained per 100 g of herb Chemical compositions of essential oils were determined by GC/MS Data were interpreted by comparing to NIST * Khoa Dược, Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh ĐT: 0983 957158 Tác giả liên lạc: TS Phan Thanh Dũng 188 Email: dungpharm@yahoo.com Chuyên Đề Dược Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học 5.0 library Results: it is observed that the essential oil composition of R officinalis are camphor (22.47%), 1,8-cineole (19.3%) and α-pinene (12.53%) Those of T vulgaris are thymol (36.58%), γ-terpinene (19.41%), ρ-cymene (14.81%) Meanwhile, those of M piperita are dl-menthol (21.89%), isomenthone (12.38%) Conclusion: The results showed that essential oil yield of these herbs are rather high and their chemical compositions are interesting Therefore, industrial scale extraction of these essential oils is feasible and have economical benefits Keywords: essential oils, GC-MS, vegetable anatomy, Rosemary, Thyme, Peppermint (màu phèn iốt) tiến hành soi bột thực vật ĐẶT VẤN ĐỀ cách sử dụng dung dịch chloral hydrat R Tinh dầu có tác dụng đáng kể giúp giải tỏa Chiết xuất tinh dầu thiết bị chiết stress, phục hồi thể cảm hứng(1) Nhóm Clevenger, hiệu suất tinh dầu tính theo ml tinh dầu có tác dụng thư giãn (tinh dầu hoa tinh dầu thu 100 g dược liệu hồng, hoa lài) đem lại cảm giác thản, ngủ Phân tích thành phần hóa học tinh dầu ngon, giảm căng thẳng Nhóm tinh dầu tái tạo máy sắc ký khí ghép khối phổ (GC-MS) So sánh (bạc hà, thơng, hương thảo) kích thích lưu thơng với phổ chuẩn thư viện NIST 5.0 máu, giảm mệt mỏi sưng tấy bắp Nhóm tinh dầu có tác dụng giải độc (chanh, khuynh diệp, bạch đậu khấu) giúp giải độc cho da, làm da sáng mượt, tinh thần sảng khoái Đề tài thực với mục tiêu khảo sát phương pháp chiết cho thu hiệu suất cao thành phần hoạt chất ổn định để đưa vào thị trường Từ khẳng định giá trị y học kinh tế, tạo điều kiện phát triển trồng trọt diện rộng NGUYÊNLIỆU - PHƯƠNGPHÁP NGHIÊN CỨU Nguyên liệu- Trang thiết bị Phần mặt đất Hương thảoRosemary (R officinalis), Cỏ xạ hương- Thyme (T vulgaris), Bạc hà âu- Peppemint (M piperita) thu hái Đà Lạt vào tháng tháng 5/2011 công ty Rừng hoa bạch cúc Tinh dầu chiết thiết bị Clevenger, khảo sát thực vật học kính hiển vi quang học Olympus 20, kính hiển vi Nikon SMZ1000, máy chụp hình Canon Ixus 105, khảo sát thành phần hóa học máy sắc ký khí ghép khối phổ (GC-MS) Shimazu GC-MS QP2000 Waters Micromass Autospec premier Phương pháp nghiên cứu Phân tích thực vật cảm quan, phân tích vi học thực vật kỹ thuật nhuộm màu kép Chuyên Đề Dược Học KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Thực vật học Hương thảo (Rosmarinus officinalis L.) Thân dạng bụi, cao đến 1- 1,5 m, có mùi thơm dễ chịu Thân dẹp, màu xanh có nhiều lơng trắng cành; gốc hóa gỗ Lá mọc đối chéo chữ thập, phiến hình thn dài, dài 2,5 cm, rộng - mm, bìa nguyên, cong phía dưới; mặt xanh đậm, bề mặt gồ ghề, mặt xanh có phủ nhiều lơng trắng, dài Lá khơng có cuống Cụm hoa gié mang xim có cành nách Hoa mẫu năm, không đều, dạng 2/3, màu xanh phớt tím Đặc điểm giải phẫu Lơng che chở mật độ dày đặc thân non mặt phiến Lơng đa bào, phân nhánh, thẳng Lơng tiết nhiều, có ba loại: lơng tiết đầu đơn bào, hình bầu dục, chân đa bào (thường tế bào); loại lơng tiết to, tròn, đầu có tế bào chứa tinh dầu, chân tế bào ngắn có chân tế bào biểu bì Đặc biệt có lơng che chở phân nhánh với số nhánh có đầu giống đầu lông tiết, chứa chất tiết Bột dược liệu nâu vàng 189 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Hình 3: Tồn (trái), hoa (phải) R officinalis Cỏ xạ hương (Thymus vulgaris L.) Thân dạng bụi nhỏ, chiều cao 20 – 30 cm, có mùi thơm dễ chịu Thân vàng, nhám nhiều lơng, có góc phần non, gần tròn thân già, đường kính thân 1-2 mm Lá mọc đối chéo chữ thập, phiến hình oval, dài - 10 mm, rộng 2- mm, bìa có cưa nhẹ ngun khoảng ½ phía lá, mặt xanh đậm, nhám, mặt xanh nhạt hơn, mặt phủ nhiều lông trắng ngắn ; cuống dài khoảng – mm, cuống ngắn phía cành Cụm hoa hình xim có ngã mọc nách lá, thường tạo thành vòng giả quanh thân Hoa mẫu năm, khơng dạng 2/3, màu trắng hồng tím dần đầu cánh hoa tế bào chứa tinh dầu, chân tế bào ngắn có chân tế bào biểu bì Bột dược liệu màu nâu vàng Bạc hà Âu (M piperita) Thân cỏ đứng, cao 30-60 cm, có thân ngầm, phân nhánh nhiều, có mùi thơm dễ chịu Thân vng, nhẹ, nhẵn, đường kính khoảng – mm, màu tím trắng tím Lá mọc đối chéo chữ thập, phiến hình trứng đầu nhọn, dài 3-6 cm, rộng 1,5-3,5 cm; bìa có cưa nhọn khoảng 2/3 phía Mặt xanh đậm mặt dưới, hai mặt nhám, có lơng nhỏ Cuống dài 0,5-1,5 cm Khơng tìm thấy hoa thời gian nghiên cứu Hình 5: Tồn M piperita Hình 4: Tồn (trái), hoa (phải) T vulgaris Đặc điểm giải phẫu Lông che chở dày đặc thân lá, thường 1- tế bào, khơng phân nhánh Lơng tiết nhiều, có hai loại: lơng tiết đầu đơn bào, hình bầu dục, chân ngắn; loại lơng tiết to, tròn, đầu 190 Đặc điểm giải phẫu Lông che chở từ 2-4 tế bào xếp thành dãy (rất gặp), bề mặt lấm Lơng tiết nhiều, có hai loại: lơng tiết đầu đơn bào, hình bầu dục, chân ngắn; loại lơng tiết to, tròn, đầu 4-8 tế bào chứa tinh dầu, chân tế bào ngắn Chuyên Đề Dược Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 có chân tế bào biểu bì, thường nằm vùng lõm biểu bì Bột dược liệu màu xám xanh Khảo sát tinh dầu Ảnh hưởng q trình làm khơ lên hiệu suất chiết tinh dầu Hiệu suất chiết tăng dần theo thời gian phơi âm can, cao vào ngày thứ trình với hiệu suất tương ứng cho R officinalis, T vulgaris, M piperita 3,01% 1,61%, 2,15% Kết cho thấy hiệu suất chiết R officinalis cao Hiệu suất chiết tinh dầu % 3.50 3.00 2.50 2.00 Nghiên cứu Y học Giai đoạn khoảng 15-90 phút, hiệu suất tinh dầu tăng mạnh Trong đó, q trình chiết tinh dầu M piperita tiến triển nhanh Giai đoạn giai đoạn hiệu suất đạt tối đa, khơng tăng Thành phần hóa học tinh dầu R officinalis: Camphor (22,47%), 1,8- cinéol (19,3), α-pinen (12,53%), camphen (7,29%) Loại tinh dầu chứa chủ yếu camphor, tinh dầu loại Tây Ban Nha (5), Brazil (2), Monaco(3) chứa chủ yếu αPinen, tinh dầu Maroc Tunisie (5) chứa chủ yếu 1,8-cineol T vulgaris: Thymol (36,58%), γ-terpinen (19,41%), ρ-cymen (14,81%), cis-sabinen hydrat (4,42%) So sánh với tinh dầu loại số nơi giới, thymol thành phần quan trọng tinh dầu T vulgaris Tỷ lệ phần trăm thành phần tinh dầu Đà Lạt nằm khoảng quy định Dược điển Châu Âu 7.0 (5), tỷ lệ cao so với tinh dầu Tây Ban Nha thấp so với Serbie Montenegro(4) M piperita: dl-menthol (21,89%), isomenthon (12,38%), neo-menthyl acetat (10,07%) Tỷ lệ menthol tinh dầu Đà Lạt thấp tinh dầu quy định dược điển châu Âu(5), Thổ Nhĩ Kỳ(Error! Reference source not found.), cao nhiều so với Ấn Độ KẾT LUẬN 1.50 1.00 R officinalis T vulgaris M piperita 0.50 10 Thời gian làm khô (ngày) Nghiên cứu động học trình chiết tinh dầu Quá trình chiết tinh dầu chia làm giai đoạn Giai đoạn khoảng 10-15 phút, hiệu suất tương ứng với trình gia nhiệt Chuyên Đề Dược Học Kết cho thấy nghiên cứu có đặc điểm đặc trưng họ Lamiaceae Hiệu suất chiết tinh dầu (ml/100mg) đạt cao vào ngày thứ trình phơi âm can cụ thể 3,01 ; 1,61 2,15 cho R officinalis, T vulgaris, M piperita, với thời gian chiết tinh dầu khoảng 50 phút kể từ lúc có giọt chất lỏng ngưng tụ lại dụng cụ Clevenger R officinalis, T vulgaris khoảng 35 phút M piperita Phân tích thành phần tinh dầu thơng qua GC-MS xác định thành phần tinh dầu R officinalis camphor (22,47%), 1,8- cinéol (19,3), α-pinen (12,53%), 191 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 T vulgaris thymol (36,58%), γ-terpinen (19,41%), ρ-cymen (14,81%), M piperita dl-menthol (21,89%), isomenthon (12,38%) Kết thu cho thấy hiệu suất chiết tinh dầu nghiên cứu cao, thành phần hóa học tinh dầu đáng quan tâm Từ cho thấy, việc chiết xuất quy mô công nghiệp tinh dầu hồn tồn có khả thi đem lại lợi ích kinh tế định TÀI LIỆU THAM KHẢO 192 Bruneton J (1999), Pharmacognosy, Phytochemistry, Medicinal Plants, 2e ed, TEC & DOC, Paris, 249-250, 484-512, 536-537, 539-540, 545-547 Cristina C et al (2005), Physico-chemical Evaluation of Rosmarinus officinalis L Essential Oils, Brazilian archives of biology and technology, 48(6): 1035-1039 Derwich E, Benziane Z & Chabir R (2011), Aromatic and medicinal plants of morocco: chemical composition of essential oils of Rosmarinus officinalis and Juniperus phoenicea, JJABPT, 2(1): 145-153 Dimitrijevic SI et al (2007), A study of the synergistic antilisterial effects of a sub-lethal dose of lactic acid and essential oils from Thymus vulgaris L., Rosmarinus officinalis L and Origanum vulgare L., Food Chemistry, 104, 774–782 Dược điển Châu Âu, 7e ed (2011): No 01/2008:1560 ; 01/2008:1846 ; 04/2009:0865 ; 01/2008:1347 ; 01/2008:0405 ; 01/2008:0406 ; 2098 Ngày nhận báo: 10.12.2012 Ngày phản biện nhận xét báo: 21.12.2013 Ngày báo đăng: 10.03.2014 Chuyên Đề Dược Học ... hiệu suất tinh dầu tính theo ml tinh dầu có tác dụng thư giãn (tinh dầu hoa tinh dầu thu 100 g dược liệu hồng, hoa lài) đem lại cảm giác thản, ngủ Phân tích thành phần hóa học tinh dầu ngon,... Phương pháp nghiên cứu Phân tích thực vật cảm quan, phân tích vi học thực vật kỹ thuật nhuộm màu kép Chuyên Đề Dược Học KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Thực vật học Hương thảo (Rosmarinus officinalis L.) Thân... M piperita Phân tích thành phần tinh dầu thơng qua GC-MS xác định thành phần tinh dầu R officinalis camphor (22,47%), 1,8- cinéol (19 ,3) , α-pinen (12, 53% ), 191 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí