Bài viết có mục đích: Đánh giá kết quả genotype MTBDRplus assay trong định danh MTBC và tính kháng thuốc của mycobacterium tuberculosis complex với Isoniazid (INH), với Rifampin (RIF) và lao đa kháng thuốc (cùng kháng INH và RIF) (MDR). Nghiên cứu thực hiện trên 326 mẫu đàm của bệnh nhân được chẩn đoán lao phổi, từ 08/2013 đến 06/2014 .
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 19 * Phụ Số * 2015 ỨNG DỤNG DNA STRIP TRONG ĐỊNH DANH VÀ TÍNH KHÁNG THUỐC CỦA MYCOBACTERIUM Nguyễn Ngọc Trương*, Raymond Zanda**, Mai Nguyệt Thu Hồng***, Nguyễn Thúy Hương****, Nguyễn Trường Sơn* TÓM TẮT Tổng quan: Trong nghiên cứu này, Chúng đánh giá Genotype MTBDRplus assay phát nhanh vi khuẩn lao tính kháng thuốc với Isoniazid Rifampin Phương pháp thông thường việc xác định vi khuẩn lao tính kháng thuốc cần vài tuần đến vài tháng Genotype MTBDRplus assay dựa kỹ thuật DNA strip: DNA vi khuẩn lao ly trích tử mẫu đàm xử lý, khuếch đại, lai với đoạn dò đặc hiệu gắn giấy, cho phép định danh Mycobacterium tuberculosis complex (MTBC) tính kháng thuốc MTBC với Isoniazid Rifampin, từ mẫu đàm Mục đích: Đánh giá kết Genotype MTBDRplus assay định danh MTBC tính kháng thuốc MTBC với Isoniazid (INH), với Rifampin (RIF) lao đa kháng thuốc (cù ng ng INH RIF) (MDR) Phương pháp: Nghiên cứu thực 326 mẫu đàm bệnh nhân chẩn đoán lao phổi, từ 08/2013 đến 06/2014 Mẫu đàm đươc xử lý theo phương pháp NALC NaOH (14) Mỗi mẫu thực hiện: (1)Soi kính hiển vi (KHV) phát vi khuẩn kháng acide alcooh (AFB: Acide Fast Bacilli) sử dụng hai phương pháp nhuộm Ziehl-Neelsen huỳnh quang, nuôi cấy theo phương pháp môi trường Lowenstein-Jensen (LJ) Mycobacterium Growth Indicator Tube (MGIT) kháng sinh đồ theo phương pháp mơi trường MGIT phát tính kháng thuốc Isoniazid Rifampin; (2)Thực Genotype MTBDRplus asssay để định danh xác định tính kháng thuốc với Isoniazid Rifampin MTBC Phân tích kết dựa vào độ nhạy, độ đặc hiệu, thời gian trung bình thực phương pháp Kết quả: Phát AFB MTBC: Soi KHV 220/326 (67.5%) mẫu AFB dương tính, ni cấy định danh 226/326 (69.3%) MTBC dương tính Kết Genotype MTBDRplus assay (TUB) 226/326 (69.3%) MTBC dương tính Genotype MTBDRplus assay cho độ nhạy độ đặc hiệu xác định MTBC 99.1%, 98.0% (căn kết nuôi cấy tiêu chuẩn vàng) Phát tính kháng thuốc: thực 224 kháng sinh đồ kết là: 66/224 (29.5%) trường hợp INH kháng, 26/224 (11.6%) trường hợp RIF kháng MDR 24 (10.7%) trường hợp Genotype MTBDRplus assay 224 trường hợp kết là: 67/224 (30.0%) trường hợp INH kháng, 26/224 (11.6%) trường hợp RIF kháng MDR 25 (11.2%) trường hợp Genotype MTBDRplus assay cho độ nhạy độ đặc hiệu xác định tính kháng thuốc MTBC với Isonaizid 98.7%, 98.5%, với Rifampin 99.5%, 96.2% lao đa kháng thuốc 99.2%, 96.7% (căn kết kháng sinh đồ tiêu chuẩn vàng) Thời gian trung bình phương pháp: Thời gian trung bình thực mẫu: nuôi cấy 31 ngày, kháng sinh đồ 11 ngày Genotype MTBDRplus assay Kết luận: Genotype MTBDRplus assay cho kết qủa định danh xác định tính kháng thuốc vi khuẩn lao tương đương với phương pháp nuôi cấy kháng sinh đồ thông thường thời gian ngắn nhiều Độ nhạy độ đặc hiệu xác định MTBC 99.1% 98.0% xác định tính kháng thuốc với Isonaizid 98.7%, 98.5%, với Rifampin 99.5%, 96.2%, lao đa kháng thuốc 99.2%, 96.7% từ mẫu đàm, thời gian giờ, Genotype MTBDRplus assay xét nghiệm thực tạo thuận lợi xác định MTBC chọn phác đồ điều trị * Bệnh viện Chợ rẫy, ** FV Hospital *** Trường Đại học Y Phạm Ngọc Thạch, **** Trường Đại học Bách khoa ĐHQG HCM Tác giả liên lạc: BS Mai Nguyệt Thu Hồng ĐT: 0909753294 408 Emaill: mnth59@yahoo.com Chuyên Đề Nội Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 19 * Phụ Số * 2015 Nghiên cứu Y học thích hợp cho bệnh nhân lao đa kháng thuốc, sớm nhiều so với kết phương pháp thơng thường Từ khóa: DNA strip Mycobacterium, Genotype MTBDRplus assay ABSTRACT APPLICATION OF DNA- STRIP FOR THE IDENTIFICATION AND DETERMINATION OF DRUG-RESISTANCE OF MYCOBACTERIUM Nguyen Ngoc Truong, Raymond Zanda, Mai Nguyet Thu Hong, Nguyen Thuy Huong, Nguyen Truong Son * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 19 - Supplement of No - 2015: 408 - 413 Background: In this prospective study, we assessed the performance of the Genotype MTBDRplus assay for the simultaneous identification of Mycobacterium tuberculosis complex (MTBC) and its ability for rapid detection of resistance to Isoniazid and Rifampin in sputum samples, compared to serveral weeks to months with conventional methods Genotype MTBDRplus assay is based on DNA-Strip technology where MTBC DNA is extracted from the specimen, targeted MTBC DNA amplified via PCR and detected on a membrane strip using reverse hybridization and an enzymatic color reaction The test enables the simultaneous detection of MTBC and its ability to detect resistance to Isoniazid and Rifampin in Sputum samples Objective: Evaluation of the Genotype MTBDRplus assay for identification of MTBC and its ability to detect resistance to Isoniazid (INH), Rifampin (RIF) and Multidrug-resistant (MDR) in Sputum samples Methods: 326 sputum samples were collected from patients with clinical suspicions of MTBC by chest X – ray findings from August 2013 to June 2014 Sputum specimens were processed by the WHO standard decontamination method of NALC NaOH method (12) AFB and MTBC detection was determined by (1) Acid Fast Bacilli (AFB) screening by fluorecence microscopy, two conventional culture methods (gold standard) of Lowenstein-Jensen (LJ) and Mycobacterium Growth Indicator Tube (MGIT) and Drug Sensitivity Testing (DST) using MGIT method to detect INH and RIF resistance (gold standard); (2) The Genotype MTBDRplus assay for the detection of MTBC and its ability to detect resistance to Isoniazid and Rifampin Statistical analysis were performed for the detection rate of MTBC for each method and the sensitivity, specificity and the average time of each method Results: Detection of of AFB and MTBC: Mycobacterium by Microscopy results in 67.5% AFB positive, Combined culture method results 69.3% MTBC positive Genotype MTBDRplus assay 69.3% MTBC positive The Genotype MTBDRplus assay sensitivity and specificity for the detection of MTBC were 99.1%, 98.0% respectively (against the gold standard of conventional culture) Detection of the drug-resistance: MGIT DST was performed on 224 cases that were MTBC positive: Of these positive MTBC cases 29.5% Resistant cases to INH, 11.6% resistant cases to RIF and multidrug-resistant (MDR - resistant to RIF and INH) cases were 10.7% The MTBDRplus assay DST was performed on 224 cases (case (TUB)-positive): 30% Resistant cases to INH, 11.6% resistant cases to RIF and MDR cases were 11.2% thuốc (căn kết kháng sinh đồ tiêu chuẩn vàng) The sensitivity and specificity with Isonaizid were 98.7%, 98.5%, Rifampin were 99.5%, 96.2% and MDR-TB were 99.2%, 96.7%, Genotype MTBDRplus assay to detection of drug resistance (against the gold standard of conventional DST) The average Turn arount Time (TAT): The average TAT for the detection of MTBC by conventional culture methods was 31days The TAT for DST using the conventional cultures and the MTBDRplus methods was 11 days and hours respectively Conclusions: Genotype MTBDRplus assay for Sensitivity and specificity for the identification of MTBC was highly comparible and the determination of drug-resistance of MTBC as comparied to the conventional DST method was much shorter by less than 10days The Genotype MTBDRplus sensitivity and specificity of MTBC Nhiễm 409 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 19 * Phụ Số * 2015 for identified was 99.1%, 98.0% and drug-resistance to Isonaizid was 98.7%, 98.5%, Rifampin was 99.5%, 96.2% and MDR-TB is (99.2%, 96.7%) with a TAT of hours Genotype MTBDRplus assay application for detection of MDR – TB facilitates rapid and accurate testing to select the appropriate treatment regiments in earliy for TB disease as compared toconventional methods Key word: DNA strip Mycobacterium, Genotype MTBDRplus assay MỞ ĐẦU Theo Báo cáo Tổ chức Y tế giới năm 2013, khoảng 1/3 dân số giới bị nhiễm lao, 12 triệu người mắc lao, 8,6 triệu người mắc lao, 1,3 triệu người tử vong lao.Việt nam đứng hàng thứ 12 số 22 quốc gia có tỷ lệ bệnh lao cao giới Hàng năm, Việt nam có khoảng 130.000 người mắc lao mới, 170.000 người mắc bệnh lao, khoảng 3.500 người mắc lao đa kháng thuốc 18.000 người tử vong bệnh lao(4) Trước tình bệnh lao gia tăng báo động việc phát sớm, điều trị kịp thời hiệu quả, nhằm ngăn chặn gia tăng bệnh lao việc làm cấp thiết Kỹ thuật để phát nhanh vi khuẩn lao DNA Strip Kỹ thuật DNA strip: DNA vi khuẩn lao ly trích tử mẫu đàm xử lý, khuếch đại, lai với đoạn dò đặc hiệu gắn giấy, cho phép định danh Mycobacterium tuberculosis complex (MTBC) tính kháng thuốc MTBC với Isoniazid (gen rpoB) Rifampin (gen katG, inhA), trực tiếp từ mẫu đàm thời gian giờ(5) Thực phát vi khuẩn tính kháng thuốc MTBC theo phương pháp thông thường: - Phát vi khuẩn: mẫu đàm xử lý, soi kính hiển vi (KHV); cấy 01 tuýp môi trường MGIT (Mycobacteria Growth Indicator Tube) ủ máy Bactec 960 theo dõi 42 ngày 02 tuýp môi trường Lowenstein Jensen (LJ) ủ tủ ấm 35oC theo dõi 08 tuần(8) Khi máy Bactec báo có vi khuẩn mọc MGIT quan sát thấy khuẩn lạc hình bơng cải thực nhuộm ZiehlNeelsen(ZN) Nếu kết ZN vi khuẩn kháng acid alcool (AFB) dạng thừng (cording), thực GenProbe định danh MTBC(10,8) - Phát tính kháng thuốc: kết ni cấy MTBC, thực theo phương pháp môi trường MGIT (SIRE) gồm: Streptomycin, Isoniazid, Rifampicin Ethambutol máy Bactec 960 từ canh cấy MGIT hay khuẩn lạc LJ(12) Kết kháng đồ máy Bactec 960 báo tính kháng thuốc kháng sinh Trong nghiên cứu trọng kết kháng sinh đồ INH RIF Mẫu thử Thực phát vi khuẩn tính kháng thuốc MTBC Genotype MTBDRplus assay Mẫu thử đàm, thu nhận từ nhũng bệnh nhân chẩn đoán bệnh lao phổi Tổng số mẫu 326, thời gian thực từ 08/2013 đến 06/2014 Thực mù từ mẫu đàm xử lý: DNA vi khuẩn lao ly trích, khuếch đại, lai với đoạn dò đặc hiệu gắn giấy, đọc kết so giấy với bảng chuẩn(5) Xử lý mẫu - Ly trích DNA: 0,5 ml cặn lắng, ủ cách thủy 90oC 20 phút, Ultrasonic 15 phút, Ly tâm 13000 vòng/phút phút VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU Mẫu đàm đươc xử lý phương pháp NALC-NaOH (N-Acetyl-L-Cysteine & Sodium Hydroxide)(8) Thực phát vi khuẩn tính kháng thuốc MTBC: 410 - Khuếch đại (PCR): 45μl mix (35 μl PNM, 05 μl 10x buffer PCR, 02 μl MgCl2,03 μl H2O, 0.2 μl HotStar Taq DNA polymarase) 05 μl DNA Chuyên Đề Nội Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 19 * Phụ Số * 2015 - Lai phát hiện: biến tính DNA, lai dung dịch đệm Twincubator 45 oC, phát đọc kết so giấy với bảng chuẩn Phát MTBC Genotype MTBDRplus assay (TUB) xuất vạch tương ứng tính kháng thuốc với INH RIF MTBC xác định giấy khơng xuất đoạn dò hoang dại hay xuất đoạn dò đột biến Phân tích so sánh kết dưa vào độ nhạy, độ đặc hiệu thời gian trung bình phương pháp(11) KẾT QUẢ Trong nghiên cứu 326 mẫu đàm thực soi KHV, nuôi cấy kháng sinh đồ Genotype MTBDRplus assay cho kết sau: Phát vi khuẩn - Soi KHV: 220/326(67.5%) mẫu AFB dương tính 106/326 mẫu AFB âm tính - Ni cấy định danh: 226/326 (69,3%) MTBC dương tính ,79 MTBC âm tính 21 NonTuberculous Mycobateria (NTM) - Kết Genotype MTBDRplus assay định danh (TUB): 226/326 (69,3%) MTBC dương tính, 100/326 MTBC âm tính Bảng 1: Kết soi KHV, nuôi cấy Genotype MTBDRplus assay: Soi KHV (n=326) Nuôi cấy (n=326) Genotype MTBDRplus assay (n=326) Kết (+) 220(67.5%) 226(69.3%) Kết (-) 106 100 (79+21) 226(69.3%) 100 Nghiên cứu Y học Phát tính kháng thuốc vi khuẩn - Kháng sinh đồ phương pháp môi trường MGIT: thực 224 kết với INH 158/224 nhạy, 66/224 kháng, với RIF 198/224 nhạy, 26/224 kháng MDR 24 trường hợp - Genotype MTBDRplus assay: thực 224 mẫu với INH 157/224 nhạy, 67/224 kháng ;với RIF 198/224 nhạy, 26/224 kháng MDR 25 trường hợp Thời gian trung bình thực phương pháp Thời gian trung bình thực mẫu ni cấy 31 ngày, kháng sinh đồ 11 ngày Genotype MTBDRplus assay - Phương pháp thông thường: Nuôi cấy(31)+ Kháng sinh đồ(11) → Kết 42 ngày - Genotype MTBDRplus assay: ly trích, khuếch đại, lai → Kết 06 BÀN LUẬN Từ kết 326 mẫu đàm phân tích kết sau: Trong kết 326 trường hợp soi KHV, ni cấy kháng sinh đồ Genotype MTBDRplus có: - 217 trương hợp ba phương pháp dương tính 97 trường hợp ba phương pháp âm tính - 07 trường hợp ni cấy (+) ,MTBDRplus assay (+), soi KHV (-) trường hợp 01 trường hợp nuôi cấy (+), Genotype MTBDRplus assay (-), soi KHV(-) trường hợp AFB mẫu thử ít(10,9,8,12) (+): dương tính, (-): âm tính Bảng 2: Kết phát vi khuẩn soi KHV, nuôi cấy Genotype MTBDRplus assay: Soi KHV(+) (n=220) Soi KHV(-) (n=106) Tổng cộng (n=326) Nuôi cấy (+) (n=226) MTBDRplus assay(+) MTBDRplus assay(-) 217 224 - 01 trường hợp nuôi cấy (-) ,Genotype MTBDRplus assay (+), soi KHV(+) trường Nhiễm Nuôi cấy (-) (n=100) MTBDRplus assay(+) MTBDRplus assay(-) 1 97 98 hợp bệnh nhân điều trị nên vi khuẩn chết(2,6,8,5) 411 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 19 * Phụ Số * 2015 Nghiên cứu Y học - 01 trường hợp nuôi cấy (-), Genotype MTBDRplus assay (-), soi KHV(+) trường hợp AFB NTM(2,8,12,5 ) Bảng 3: Kết nuôi cấy Genotype MTBDRplus assay (TUB) Nuôi cấy (+) MTBDRplus assy TUB(+) (n=226) MTBDRplus assy TUB(-) (n=100) Tổng cộng (n=236) Độ nhạy: 99,1% Giá trị tiên đốn dương tính (PPV): 99,1% Độ đặc hiệu: 980% Nuôi cấy (-) 224 226 98 100 Độ nhạy độ đặc hiệu (99,1%; 98,0%) Genotype MTBDRplus assay để phát MTBC (căn kết nuôi cấy tiêu chuẩn vàng) Giá trị tiên đoán dương tính (NPV): 98,0% Bảng 4: Kết 224 trường hợp kháng sinh đồ Genotype MTBDRplus assay: Kháng sinh đồ (n=224) INH Genotype- MTBDRplus assay (n=224) INH RIF S(n=157) R(n=67) S(n=198) R(n=26) Độ nhạy độ đặc hiệu với Isonaizid (98.7%, 98,5%), với Rifampin (99.5%, 96.2%), lao đa kháng thuốc (99,2%, 96,7% ) Genotype MTBDRplus assay để phát tính kháng thuốc (căn kết kháng sinh đồ tiêu chuẩn vàng) Nhìn chung kết phát tính kháng thuốc thử nghiệm kháng sinh đồ Genotype MTBDRplus assay không khác biệt nhiều.Trong 224 mẫu thử so sánh kết kháng sinh đồ Genotype MTBDRplus assay: 02 trường hợp INH kết kháng sinh đồ nhạy Genotype MTBDRplus assay kháng 01 trương hợp RIF kháng sinh đồ nhạy mà Genotype MTBDRplus assay lại kháng trường hợp gen trạng thái lặn kết kháng sinh đồ thể kiểu hình Genotype MTBDRplus assay phát gen(6,9) Kết nghiên cứu phù hợp với kết nghiên cứu khác Kết tham khảo nghiên cứu bắc Ấn độ: thực 120 mẫu đàm với hai phương pháp kháng sinh đồ thông thường Genotype MTBDRplus assay (Correlation with conventional DST and GenoType® MTBDRplus assay)(7) 412 S (n=158) 156 RIF R (n=66) 65 S (n=198) R (n=26) 197 1 25 Bảng 5: Kết nghiên cứu nghiên cứu Ấn độ Nghiên cứu INH RIF MDR Độ nhạy (%): 98.7 99.5 99.2 Độ đặc hiệu(%): 98.5 96.2 96.7 PPV (%): 99.4 99.5 99.2 NPV (%): 97.0 96.2 96,7 INH 96.3 98.4 98.1 96.7 Ấn Độ RIF MDR 95.8 97.7 98.5 99.1 97.8 97.7 97.2 99.1 Phương pháp soi KHV độ nhạy độ đặc hiệu khơng cao, Phương pháp chì phát AFB không phân biệt MTBC hay NTM, vi khuẩn sống hay chết có kháng thuốc hay không kháng thuốc Nuôi cấy cho kết nhạy xác, thời gian trung bình 31 ngày Kháng sinh đồ cho kết chuẩn thể tính kháng thuốc vi khuẩn thực nhiều loại kháng sinh phải phụ thuộc thời gian ni cấy Thời gian trung bình kháng sinh đồ 11ngày Genotype MTBDRplus assay dể thực hiện, an toàn sinh học, giá thành thấp so với phương pháp thông thường, cho kết định danh tính kháng thuốc với INH, với RIF MTBC, từ mẫu đàm 06 Chuyên Đề Nội Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 19 * Phụ Số * 2015 KẾT LUẬN Genotype MDRTBplus assay, kỹ thuật DNA strip, dễ thực hiện, cho kết nhanh đáng tin cậy vòng giờ, cho kết định danh tính kháng thuốc MTBC với INH, với RIF MTBC, từ mẫu đàm Genotype MTBDRplus assay cho độ nhạy độ đặc hiệu xác định MTBC (99.1% 98.0%) (căn kết nuôi cấy tiêu chuẩn vàng) xác định tính kháng thuốc MTBC với Rifampin (99.5%, 96.2%), với Isonaizid (98.7%, 98,5%), lao đa kháng thuốc (99,2%, 96,7%) (căn kết kháng sinh đồ tiêu chuẩn vàng) Có thể kết luận Genotype MDRTBplus assay thực tạo thuận lợi phát MTBC chọn phác đồ điều trị thích hợp cho bệnh nhân lao đa kháng thuốc, sớm nhiều so với phương pháp thông thường 10 TÀI LIỆU THAM KHẢO Bang D., Andersen A B., and Thomsen V O (2006) Rapid genotypic detection of rifampicin and isoniniazid-resistant Mycobacterium tuberculosis directly in clinical speccimens J Clin Microbiol.44:2605-2608 Brossier F., Veziris N., Truffot-Pernot C., et al (2006) Performance of the Genotype MTBDR line probe assay for detection of resistance to Rifampin and Isoniazid in strains of Mycobacterium tuberculoasis with low and high-level resistance J Clin Microbiol Oct, 44(10):3659-64 Caws M., Phan Minh Duy, Dau Quang Thọ, Nguyen Thi Ngọc Lan, Đai Viet Hoa, and Farrar J (2006) Mutation Prevalent among Rifampin and Isoniazid-Resistant Mycobacterium tuberculosis Isolates from a Hospital in Vietnam, J Clin Microbio, July, p.2333 - 2337 Chương trình chống lao quốc gia (2014) Báo cáo tổng kết Chương trình chống lao quốc gia phương hướng hoạt động, Hà Nội 4/3/2014 Hain Lifescience GmbH Germany, Mycobacterium tuberculosis, GenoType® MTBDRplus assay nghiajpn@yahoo.comHeep M., Brandstatter B., Rieger U., Lehn N.,Richter E., Russch-Gerdes Nhiễm 11 12 Nghiên cứu Y học S., and Niemann S (2001) Frequency of rpoB mutations inside and outside the cluster I region in rifampin-resistant clinical Mycobaterium tuberculosis isolate J Clin Microbiol 39:107-110 Hillemann D, Rusch-Gerdes S, and Richter E (2007) Evaluation of the Genotype MTBDRplus Assay for Rifampin and Isoniazid Susceptibility Testing of Mycobacterium tuberculosis Strains and Clinical Specimens Forschungszentrun Borstel, Germay Indian Council of Medical Research, New Delhi (Extramural ICMR Project Sanction No 5/8/5/4/2007-ECD-I), Correlation with conventional DST and GenoType® MTBDRplus assay http://www.ijmm.org/text.asp?2013/31/3/230/115625 Kent PT, Kubica GP (1985) Puublic Health Mycobacteriology AGuide For Level III Laboratory, Divsion of Laboratory Training and Consultation, Laboratory Program Office, 1985 Neonakis IK, Gitti Z, Baritaki S, et al (2009) Evaluation of Genotype Mycobacteria Direct Assay in Comparion with Gen-Probe Mycobacterium tuberculosis Amplified direct test and Genotype MTBDRplus for Direct Detection of Mycobacterium tuberculosis complex in clinical samples J Clin Microbiol, Aug 2009, p.2601-2603 Peterson EM, Rita Lu Floyd C et al (1989) Direct Identification of Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium avium and Mycobacterium interacelulare from Amplified Primary Cultures in Bactec media using DNA probes J Clin Microbio p.1543-1547 Sensitivity and Specificity http://en.wikipedia.org/wiki/ Sensitivity_and_specificity Traore H., van Deun A, Shamputa IC, et al (2006) Direct detection of Mycobacterium tuberculosis complex DNA and rifampicin rsistance in clinical specimens from tuberculosis patients by line probe assay J Clin Mcrobiol 44:4384-4388 Ngày nhận báo: 10/10/2014 Ngày phản biện nhận xét báo: 15/10/2014 Ngày báo đăng: 10/01/2015 413 ... 96.2%), lao đa kháng thuốc (99,2%, 96,7% ) Genotype MTBDRplus assay để phát tính kháng thuốc (căn kết kháng sinh đồ tiêu chuẩn vàng) Nhìn chung kết phát tính kháng thuốc thử nghiệm kháng sinh đồ... hay khuẩn lạc LJ(12) Kết kháng đồ máy Bactec 960 báo tính kháng thuốc kháng sinh Trong nghiên cứu trọng kết kháng sinh đồ INH RIF Mẫu thử Thực phát vi khuẩn tính kháng thuốc MTBC Genotype MTBDRplus... lao DNA Strip Kỹ thuật DNA strip: DNA vi khuẩn lao ly trích tử mẫu đàm xử lý, khuếch đại, lai với đoạn dò đặc hiệu gắn giấy, cho phép định danh Mycobacterium tuberculosis complex (MTBC) tính kháng