Mục tiêu nghiên cứu của bài viết nhằm mô tả đặc điểm các biến thể bình thường của nhiễm sắc thể (NST) số 9 ở người. Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết của tài liệu.
TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ-2017 ĐẶC ĐIỂM CÁC BIẾN THỂ BÌNH THƢ NG CỦA NHIỄM SẮC THỂ SỐ NGƢ I Đoàn Thị Kim Phượng*; Phạm Thế Vương* Hoàng Thị Ngọc Lan*; Trần Đức Ph n* TĨM TẮT Mục tiêu: mơ tả đặc điểm biến thể bình thường nhiễm sắc thể (NST) số người Đối tượng phương pháp: nghiên cứu mô tả 1.442 người đến xét nghiệm NST từ bạch cầu lympho máu ngoại vi Trung tâm Tư vấn Di truyền, Bệnh viện Đại học Y Hà Nội Kết quả: tỷ lệ biến thể quần thể nghiên cứu 3%.Tỷ lệ biến thể NST số nam nữ 46% 53% Tỷ lệ kiểu biến thể 9qh+ 56%, inv(9)(p12q13) 42%, extra band 2% Trong số đối tượng có tính biến thể NST số 9, 58% sảy thai, thai chết lưu; 16% vơ sinh; 13% có thai sinh dị tật; 12% bình thường Kết luận: Tỷ lệ biến thể quần thể nghiên cứu 3%, phân bố nam nữ Có loại biến thể phát nghiên cứu 9qh+, inv(9)(p12q13) extra band 88% trường hợp có biến thể NST số có tiền sử bất thường sinh sản Điều gợi ý mối liên quan biến thể NST số với bất thường thai sản, mở hướng nghiên cứu để chứng minh mối liên hệ * Từ khóa: Biến thể nhiễm sắc thể người; Đảo đoạn nhiễm sắc thể số 9; 9qh+ Characteristics of Normal Variants of Human Chromosome Summary Objectives: To describe types of normal variants in human chromosome Subjects and methods: 1,442 blood samples were cultured and analyzed chromosomes in Centre of Medical Genetic Couseling, Hanoi Medical University Hospital Results: The percentage of chromosome variants in the study population was 3% The variants in males and females were 46% and 53%, respectively The rate of 9qh+ was 56%, inv (9)(p12q13) was 42%, the extra band was 2% Of the nine chromosome variants, 58% with stillbirths, 16% with infertile, 13% with congenital malformations and 12% were normal Conclusion: The rate of chromosome variants in the study population was 3%, with the equal distribution in men and women Three types of variants were found in the study: 9qh+, inv(9) and extra band Up to 88% of the cases of chromosome variants were histories with abnormal reproduction This suggested a link between the chromosome variants with reproductive abnormalities * Keywords: Normal variants of chromosome; Chromosome inversion; 9qh+ ĐẶT VẤN ĐỀ Các biến thể bình thường NST biết đến dạng biến đổi hình thái cấu trúc NST khơng có tác động làm thay đổi kiểu hình [1, 2, 3] Hiện tượng thường quan sát thấy rõ NST số 1; 9; 16 hay NST giới tính Y * Trường Đại học Y Hà Nội Người phản hồi (Corresponding): Đoàn Thị Kim Phượng (phuongdk75@gmail.com) Ngày nhận bài: 27/07/2017; Ngày phản biện đánh giá báo: 30/08/2017 Ngày báo đăng: 05/09/2017 226 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ HÌNH THÁI HỌC-2017 Theo hệ thống danh pháp quốc tế di truyền người (ISCN) quan điểm số tác giả, phần lớn biến thể thay đổi độ lớn, độ bắt màu vùng dị nhiễm sắc, gọi tượng dị hình NST (heteromorphism) Tuy nhiên, số nghiên cứu cho biến thể NST nhóm bất thường sinh sản cao nhiều so với nhóm người có khả sinh sản bình thường [4, Trong NST, biến thể NST số hay gặp với nhiều dạng gồm 9qh+, 9ph+, 9ph-, 9cen+, inversion variant, euchromatic variants (extra band) [6 Các dạng biến thể bị nhầm lẫn với đột biến gây bất thường kiểu hình Nghiên cứu nhằm: Mơ tả đ c điểm biến thể bình thường NST số người ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tƣợng nghiên cứu 1442 người đến xét nghiệm NST từ bạch cầu lympho máu ngoại vi Trung tâm Tư vấn Di truyền, Bệnh viện Đại học Y Hà Nội - Phân tích theo tiêu chuẩn quốc tế NSCI kính hiển vi quang học độ phóng đại 1000 lần - Các dạng biến thể NST số phân tích đánh giá gồm: 9qh+, 9ph+, 9ph, 9cen+, inversion variant, euchromatic variants Phân tích liệu phần mềm xác suất thống kê SPSS 22.0 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU T lệ biến thể NST số nhóm nghiên cứu Biểu đồ 1: Phân bố theo giới biến thể NST số Trong số 1442 karyotype phân tích, 50 karyotype có biến thể NST số (3%) Đặc điểm ph n bố theo gi i biến thể NST số Phƣơng pháp nghiên cứu Phương pháp: nghiên cứu mơ tả * Quy trình nghiên cứu: - Lấy ml máu tĩnh mạch cho vào ống tráng heparin - Nuôi cấy tế bào bạch cầu lympho máu ngoại vi theo phương pháp Hungerford D.A (1965) [7] - Thu hoạch tế bào thứ 72 - Nhuộm tiêu phương pháp nhuộm băng G theo phương pháp Seabright M (1971) [8] Biểu đồ 2: Phân bố theo giới biến thể NST số Các biến thể NST số gặp hai giới có tỷ lệ tương đương, nam 46%, nữ 53% 227 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ-2017 Đặc điểm ph n bố d ng biến thể NST số Biểu đồ 3: Phân bố dạng đa hình NST số Trong 50 đối tượng có biến thể NST số Chúng gặp 28 trường hợp 9qh+ (56%), 21 trường hợp inv(9) (p12q13) (42%) trường hợp euchromatic variant (2%) Chưa gặp trường hợp 9ph-, 9ph+, cen+ Đặc điểm biến thể NST số theo nhóm tiền s Bảng 1: Phân bố biến thể NST số theo nhóm tiền sử Kiểu dị hình Tiền s Tổng Vô sinh Sảy thai, thai chết lưu Mang thai và/hoặc sinh dị tật Sinh sản bình thường 9qh+ 18 28 inv(9) 11 21 Extra band 0 Tổng 29 50 Trong 50 trường hợp có biến thể NST số dạng khác nhau, nhóm sảy thai thai chết lưu chiếm tần số cao (29 trường hợp), trường hợp vô sinh, trường hợp mang thai và/hoặc sinh dị tật trường hợp sinh sản bình thường có biến thể NST số Ở nhóm tiền sử, phân bố kiểu dị hình NST số khác trường hợp extra band đến xét nghiệm lý vô sinh M t số h nh ảnh biến thể NST số nghiên cứu Hình 1: Một số hình ảnh biến thể NST số nghiên cứu 228 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ HÌNH THÁI HỌC-2017 BÀN LUẬN Biến thể bình thường NST gọi tính đa hình NST, biến đổi kích thước, hình dạng NST quan sát kỹ thuật nhuộm băng Tính đa hình biểu qua biến đổi chất dị nhiễm sắc NST Chất dị nhiễm sắc dạng cuộn chặt ADN Vì cuộn chặt nên enzym polymerase khơng thể tiếp cận, chúng khơng chép, khơng thực chức mã hóa di truyền nên cho khơng gây bất thường kiểu hình Tỷ lệ biến thể quần thể nghiên cứu 3%, phù hợp với số nghiên cứu công bố trước [6, 8, Nghiên cứu cho thấy tỷ lệ gặp biến thể NST số hai giới nam nữ tương đương nhau, phù hợp với logic NST số NST thường nên tỷ lệ biến thể không khác biệt giới Trong nghiên cứu, gặp chủ yếu dạng 9qh+ inv(9)(p12q13) Chỉ có trường hợp extra band vùng dị nhiễm sắc Trường hợp gặp phụ nữ có kiểu hình bình thường, vơ sinh loại trừ hết nguyên nhân vô sinh khác, chồng có kết tinh dịch đồ bình thường, làm IVF lần thất bại trứng xấu, bị hỏng, khơng tạo phơi Có thể vị trí band phụ nằm khu vực dị hình, can thiệp vào phân bào giảm nhiễm dẫn đến tạo trứng bất thường Dundar M CS báo cáo trường hợp extra band sảy thai liên tiếp [9 Extra band nhiễm sắc thể số gặp, tỷ lệ 0,23% quần thể nên quan sát thấy trường hợp [10 Với biến thể thêm band phụ nhánh dài NST số 9, phân tích dễ bỏ sót độ phân dải band G khơng tốt Vì vậy, phân tích NST đối tượng có bất thường sinh sản, cụm NST có band dài nên ưu tiên quan sát Chúng không quan sát thấy dạng biến thể 9ph+, 9ph-, 9cen+ Điều phụ thuộc vào đặc trưng người Việt Nam, cần nghiên cứu với cỡ mẫu lớn để xác định thêm dạng biến thể 9ph+, 9ph-, 9cen+ Phân loại theo nhóm tiền sử chúng tơi gặp chủ yếu nhóm sảy thai thai chết lưu 58% Có thể chất dị nhiễm sắc vùng khơng chứa gen chứa gen không hoạt động nên gây biến đổi khơng q nặng phơi, phơi tồn thời gian gây sảy thai, thai chết lưu Có trường hợp vơ sinh, trường hợp nam giới gồm trường hợp vô tinh, trường hợp hội chứng OAT (tinh dịch bất thường tự phát) trường hợp tinh trùng bất thường hình thái hồn tồn Có trường hợp mang thai sinh dị tật, nhiên dạng dị tật lại không giống Thậm chí, gia đình có lần mang thai dị tật lần không giống nên chưa thể khẳng định tác động tính biến thể NST số tới mang thai, sinh dị tật trường hợp có tính đa hình sinh sản bình thường NST số Vì vậy, biến thể NST số có gây bất thường sinh sản hay khơng câu hỏi mở Tuy nhiên số liệu nghiên cứu 229 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ-2017 cho thấy 50 trường hợp có biến thể NST số 9, có tới 44 trường hợp (88%) có tiền sử bất thường sinh sản, chiếm Chúng tơi đề nghị chẩn đốn trước sinh xét nghiệm NST bố m trường hợp biến thể NST số Thêm nữa, cần quan sát quần thể lớn có so sánh nhóm chứng nhóm bất thường sinh sản để kết luận xác KẾT LUẬN - Tỷ lệ biến thể quần thể nghiên cứu 3% - Tỷ lệ biến thể NST số nam nữ tương đương - Tỷ lệ kiểu biến thể 9qh+ 56%, inv(9) (p12q13) 42%, extra band 2% - Đối tượng có tính biến thể NST số 9, 58% sảy thai thai chết lưu, 16% vơ sinh, 13% có thai sinh dị tật, 12% bình thường Như vậy, có tới 88% trường hợp có biến thể NST số có tiền sử bất thường sinh sản Điều gợi ý mối liên quan biến thể NST số với bất thường thai sản, mở hướng nghiên cứu để chứng minh mối liên hệ M K Bhasin Human population cytogenetics: A review Int J Hum Genet 2005, (2), pp.83-152 Boronova, J Bernasovska, G Kacanova et al Heterochromatin variants in Slovak women with reproductive failure.Int J Hum Genet 2015, 15 (1), pp.1-5 Y Hong, Y.W Zhou, J Tao et al Do polymorphic variants of chromosome affect the outcome of in vitro fertilization and embryo transfer treatment Human Peproduction 2011, 26 (4), pp.933-940 Hemlata Purandare, Frenandes, Desmukh et al Heterochromatic variations and pregnancy losses in human Int J Hum Genet 2011, 11 (3), pp.167-175 H Akbas, H Isi, D Oral et al Chromosome heteromorphism are more frequent in couples with recurrent abortions Genetics and molecular research 2012 7.Hungerford D A Luekocytes cultured from small inocula of whole blood and the preparation of metaphase chromosome by treatment with hypotonic KCl, Stain Technol 1965, 40, pp.333 Seabright M A rapid banding technique for human chromosomes The Lancet 1971, p.971 TÀI LIỆU THAM KHẢO Dundar M Can the classical euchromatic variants of 9q12/qh+ cause recurrent abortions? Genet Count 2008, 19 (3), pp.281-286 Herman E Wyandt, Vijay S Tonk Introdution, human chromosome variation: Heteromorphism and polymorphism 2011, pp.3-4 10 Cho E H et al Extra G-positive band at chromosome 9q13 as a recurrent heteromorphism in a Korean population Fetal Pediatr Pathol 2011, 30 (4), pp.257-259 230 ... nhiên, số nghiên cứu cho biến thể NST nhóm bất thường sinh sản cao nhiều so với nhóm người có khả sinh sản bình thường [4, Trong NST, biến thể NST số hay gặp với nhiều dạng gồm 9qh+, 9ph+, 9ph-, 9cen+,... biến thể NST số nhóm nghiên cứu Biểu đồ 1: Phân bố theo giới biến thể NST số Trong số 1442 karyotype phân tích, 50 karyotype có biến thể NST số (3%) Đặc điểm ph n bố theo gi i biến thể NST số Phƣơng... euchromatic variants (extra band) [6 Các dạng biến thể bị nhầm lẫn với đột biến gây bất thường kiểu hình Nghiên cứu nhằm: Mô tả đ c điểm biến thể bình thường NST số người ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN