Nghiên cứu điều chế hệ vi tự nhũ chứa Pantoprazol

Pantoprazol (PTP) là một thuốc ức chế bơm proton được sử dụng phổ biến trong điều trị bệnh viêm loét dạ dày, tá tràng. Do thuộc nhóm II theo hệ thống phân loại sinh dược học và không bền trong môi trường acid nên sinh khả dụng đường uống thấp.

Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 NGHIÊN CỨU ĐIỀU CHẾ HỆ VI TỰ NHŨ CHỨA PANTOPRAZOL Nguyễn Mạnh Huy*, Nguyễn Thị Thanh Tú*, Tạ Quang Vượng*, Nguyễn Thiện Hải* TÓMTẮT Mục tiêu: Pantoprazol (PTP) thuốc ức chế bơm proton sử dụng phổ biến điều trị bệnh viêm loét dày, tá tràng Do thuộc nhóm II theo hệ thống phân loại sinh dược học không bền môi trường acid nên sinh khả dụng đường uống thấp Trong số phương pháp cải thiện tính tan sinh khả dụng, hệ vi tự nhũ (Self Emulsifying Drug Delivery System - SMEDDS) với nhiều ưu điểm trội chọn để nghiên cứu với mục tiêu điều chế công thức SMEDDS chứa PTP bền, ổn định, khả hòa tan cao có triển vọng ứng dụng vào thực tiễn Phương pháp nghiên cứu: Khảo sát độ tan PTP tá dược có khả tạo hệ vi tự nhũ Xây dựng giản đồ pha từ tá dược tiềm chọn lựa phương pháp pha loãng với nước đánh giá cảm quan vi nhũ tương tạo thành Khảo sát khả tải PTP SMEDDS (P-SMEDDS) với tỷ lệ tải - 10% (kl/kl) đánh giá tính chất lý hóa cảm quan, độ bền, zeta, kích thước giọt khả giải phóng hoạt chất (GPHC) mơi trường pH 1,2; pH 4,5 pH 6,8 Chọn cơng thức có khả tải phù hợp bền nhất, điều chế lặp lại Hóa rắn P-SMEDDS tá dược thấm hút (SP-SMEDDS), đánh giá tính chất lý hóa khả GPHC SP-SMEDDS so với viên đối chiếu môi trường pH Hàm lượng PTP thử nghiệm định lượng quang phổ UV-Vis bước sóng 290 nm Kết quả: Xây dựng cơng thức qui trình điều chế P-SMEDDS qui mơ 200 g đạt tiêu đánh giá gồm Capryol 90 – Labrasol : Cremophor RH40 (1 : : 2) – Transcutol HP tương ứng công thức với tỉ lệ pha 20 : 30 : 50 (CT 506) 20 : 45 : 35 (CT 609) CT 506 CT 609 tải 8% PTP, đạt yêu cầu tính chất lý hóa (kích thước giọt trung bình 21,57 38,61 nm, zeta tương ứng - 29,8 - 35,4 mV) đạt độ bền PTP môi trường pH khảo sát Bên cạnh đó, P-SMEDDS cho khả GPHC nhanh so với nguyên liệu PTP chứng tỏ có cải thiện độ tan Florite R dùng để hóa rắn công thức (SP-SMEDDS) với tỉ lệ tương ứng (1 : 2,5) cho kết GPHC độ bền PTP tương tự P-SMEDDS So với viên đối chiếu, SP-SMEDDS cho khả GPHC nhanh môi trường pH 1,2; pH,4,5 tương đương pH 6,8 Quy trình định lượng PTP quang phổ UV-Vis bước sóng 290 nm đạt u cầu qui trình phân tích Kết luận: P-SMEDDS xây dựng bào chế thành công qui mô 200 g Hệ đạt tiêu lý hóa theo yêu cầu SMEDDS, có độ hòa tan cao Đây giải pháp tiềm giúp cải thiện độ tan, độ bền đồng thời nâng cao sinh khả dụng đường uống cho PTP Từ khóa: Hệ vi tự nhũ (SMEDDS), Pantoprazol, độ hòa tan cao, sinh khả dụng ABSTRACT FORMULATION OF SELF-MICROEMULSIFYING DRUG DELIVERY SYSTEM CONTAINING PANTOPRAZOLE Nguyen Manh Huy, Nguyen Thi Thanh Tu, Ta Quang Vuong, Nguyen Thien Hai * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Supplement of Vol 23 - No 2- 2019: 618 – 629 Objectives: Pantoprazole (PTP) is a proton pump inhibitor drug which is commonly used in treatment of stomach or doudenum ulcers and inflammation However, it has low oral bioavailability due to the low water * Khoa Dược, Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: PGS.TS Nguyễn Thiện Hải 618 ĐT: 0905352679 Email: nthai@ump.edu.vn Chuyên Đề Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Nghiên cứu Y học solubility (being a BCS class II agent) and the degradation in acid environment of gastric Amongst methods used for improving the solubility and bioavalability, self-microemulsifying drug delivery systems (SMEDDS) were chosen for this study The aim of the study is to formulate a SMEDDS containing PTP (P-SMEDDS) which is durable, stable and high dissolution and can can be applied in practice Methods: Solubility of PTP in several excipients were investigated Phase diagrams were constructed by water dilution method The SMEDDS that formed clear microemulsions were loaded – 10% PTP (P-SMEDDS) and evaluated the appearance, stability, zeta potential, droplet size and dissolution in different pH buffer media (pH 1.2, pH 4.5 and pH 6.8) The most stable P-SMEDDS having high drug loading was reprepared P-SMEDDS was solidified by absorbent (SP-SMEDDS) and evaluated the physico-chemical properties The dissolution of the SP-SMEDDS in the different pH media were evaluated and compared with the reference product UV method at 290 nm was used for determination of PTP in the experiments Results: Two P-SMEDDS formulas (CT506 and CT 609) were successfully prepared in scale of 200 g The former is composed of Capryol 90 - Labrasol: Cremophor RH40 (1 : 1) - Transcutol HP in ratio of 20 : 30 : 50, respectively and the later is Capryol 90 - Labrasol: Cremophor RH40 (1 : 2) - Transcutol HP in ratio of 20 : 45 : 35 Both formulas were loaded 8% PTP and met the SMEDDS physico-chemical properties with average droplet sizes of 21.57 and 38.61 nm, gausian distribution and zeta potentials of – 29.8 and – 35.4 mV, respectively PSMEDDS showed the improvement solubility and stability of PTP in different pH media The Florite R showed good absorption and was used to solidify P-SMEDDS with the ratio of : 2.5 (SP-SMEDDS) The SP-SMEDDS showed the dissolution and stability of PTP the same as P-SMEDDS in different pH media The dissolution profiles of SP-SMEDDS were higher than that of the refenrence product in pH 1.2; pH 4.5 media and equal in pH 6.8 medium The UV method at 290 nm for determination of PTP in the experiments met the requirements of an analytical procedure Conclusion: The P-SMEDDS was successfully formulated on a 200 g scale, met the SMEDDS physicochemical properties, has high dissolution This can be a potential remedy for improvement of solubility, stability and oral bioavailability of PTP Key words: SMEDDS, pantoprazole, high dissolution, bioavalability (Micronization technique), hệ tự vi nhũ (SelfĐẶTVẤNĐỀ Microemulsifying Drug Delivery System Pantoprazol (PTP) thuốc ức chế bơm SMEDDS) cho thấy có nhiều ưu điểm thành proton, sử dụng phổ biến điều trị phần đơn giản, dễ bào chế, nâng cỡ lô, áp dụng bệnh viêm loét dày, tá tràng chứng cho dược chất thuộc nhóm II, nhóm IV tăng tiết acid hiệu điều trị tốt Tuy nhiên, theo BCS sử dụng dạng SMEDDS PTP thuộc nhóm II theo hệ thống phân loại lỏng (đóng nang mềm, nang cứng) dạng sinh dược học (Biopharmaceutical Classification SMEDDS rắn (hóa rắn để đóng nang cứng hay Sysytem – BCS) không bền môi trường dập viên) Đây xu hướng giới acid nên khả giải phóng hoạt chất (GPHC) việc nghiên cứu cải thiện độ tan chất ổn định, sinh khả dụng không cao Việc dược chất hai nhóm Bên cạnh đó, nghiên cứu cải thiện độ tan, cải thiện sinh khả thuốc hệ SMEDDS bao hạt dụng, độ bền PTP nhà bào chế dầu có kích thước nhỏ, nhờ bảo vệ quan tâm Trong số kỹ thuật cải dược chất, giảm ảnh hưởng số enzym, thiện độ tan tạo hệ phân tán nano, hệ phân môi trường pH đường tiêu hóa lên tán rắn, hệ tự nhũ, tạo phức bao với cyclodextrin phân hủy thuốc Nghiên cứu thực dẫn chất, kỹ thuật vi tinh thể hóa nhằm mục tiêu điều chế công thức Chuyên Đề Dược 619 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 SMEDDS chứa PTP bền, ổn định, có khả hòa tan cao để khắc phục nhược điểm có triển vọng ứng dụng vào thực tiễn 10 phút, lọc qua màng lọc 0,45 µm, pha ĐỐITƯỢNG-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU Xác định nồng độ PTP phương pháp đo độ Nguyên vật liệu - trang thiết bị hấp thu bước sóng 290 nm Từ kết thu Nguyên vật liệu Pantoprazol (Ấn độ), capryol 90, lauroglycol 90, transcutol HP, labrasol, labrafac WL1349, labrafac PG, labrafil M1944CS, labrafil 2125CS, maisine 35-1, plurol oleic CC497, syloid FP 244, peceol (Gattefosse - Pháp), cremophor RH40 (BASF - Đức), tween 20, tween 80 (Singapore), florite R (Nhật) Các tá dược dung mơi, hóa chất cần thiết khác cho thí nghiệm đạt tiêu chuẩn dược dụng hay phân tích được, độ tan PTP tá dược xác Trang thiết bị Bể đun cách thủy có phận lắc (Grant Anh), bể siêu âm (Elma T840 - Đức), máy đo nano (Zetasizer Nano ZSP - Anh), máy ly tâm (EPPENDORF MINISPIN - Đức), máy quang phổ UV-Vis (Axiom SP 8001 - Đức), máy thử độ hòa tan (ERWEKA - Đức), Vortex (LABNET VX100 - Mỹ), tủ đông (Toshiba - Nhật Bản), tủ lạnh (Panasonic - Nhật Bản), tủ ủ ấm (Memmert - Đức), Máy chụp SEM (JSM 7401F, Nhật Bản) tiềm dùng để thiết lập công thức (CT) Phương pháp nghiên cứu đánh giá cảm quan (Bảng 1)(3) Chọn hệ tá Xây dựng cơng thức quy trình điều chế SMEDDS chứa PTP (P-SMEDDS) Khảo sát độ tan PTP số tá dược tiềm dược tạo hỗn hợp suốt mờ Độ tan PTP pha dầu, chất diện hoạt chất đồng diện hoạt có khả tạo hệ vi tự nhũ khảo sát phương pháp bão hòa Lấy lượng thừa PTP cho vào eppendorf Dịch thu đem ly tâm 10.000 vòng/ phút lỗng methanol đến nồng độ thích hợp định; từ chọn lựa tá dược có tiềm để điều chế hệ SMEDDS(10) Xây dựng giản đồ pha Giản đồ pha thiết lập để xác định vùng có khả điều chế SMEDDS Giản đồ pha xây dựng theo phương pháp pha loãng Dựa độ tan PTP pha dầu, chất diện hoạt, chất đồng diện hoạt, tá dược SMEDDS nền, tỉ lệ pha dầu dao động từ 15% đến 30%, chất diện hoạt từ 30% đến 50%, chất đồng diện hoạt từ 35% đến 55% Cân thành phần pha dầu, chất diện hoạt, chất đồng diện hoạt theo CT cho vào eppendorf ml Vortex hỗn hợp đến đạt đồng để yên nhiệt độ phòng 24 Sau đó, pha lỗng hệ 100 lần với nước cất vùng hình thành vi nhũ tương giản đồ pha; Các hệ khảo sát khả tải PTP thử nghiệm Bảng 1: Phân loại khả tự nhũ hệ SMEDDS(3) Nhó m I loại ml có chứa sẵn ml loại tá dược Hỗn II hợp thu đem vortex phút, siêu âm III 10 phút, để yên nhiệt độ phòng vòng 24 để đạt độ ổn định trước tiến hành thử nghiệm 620 IV V Tính chất nhũ tương hình thành* (*) Hệ SMEDDS đạt mức I II Hình thành nhũ tương nhanh vòng phút, nhũ tương suốt ánh xanh Hình thành nhũ tương nhanh vòng phút, nhũ tương suốt ánh xanh Hình thành nhũ tương chậm vòng phút tạo thành chất lỏng trắng sữa Hình thành nhũ tương chậm phút xuất vài giọt dầu Khó hình thành nhũ tương, xuất giọt dầu Chuyên Đề Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Khảo sát khả tải hệ SMEDDS thiết lập Đối với hệ tá dược chọn, SMEDDS tiềm khảo sát tỷ lệ tải PTP với mức 5%, 8% 10% (kl/kl) Cân xác 1g hỗn hợp CT tá dược SMEDDS cho vào eppendorf ml voxtex đến đồng Cân xác lượng PTP theo tỉ lệ chọn cho tiếp vào, voxtex phút siêu âm 20 phút, ly tâm tốc độ 10.000 vòng/ phút 10 phút Các CT kết tủa bị loại bỏ Hỗn hợp CT đạt yêu cầu để nhiệt độ phòng 24 giờ, sau pha lỗng 100 lần nước cất quan sát CT sau 2, 4, đánh giá cảm quan để xác định CT đạt yêu cầu Tỷ lệ tải phù hợp chọn cho thử nghiệm Phương pháp điều chế SMEDDS chứa PTP (PSMEDDS) Công thức hệ vi tự nhũ với tỷ lệ tải PTP thích hợp chuẩn bị sau: Cân xác g hệ tá dược theo tỷ lệ có sẵn cho vào eppendorf ml Cân xác 80 mg PTP cho vào hệ, vortex đến đồng nhất, siêu âm để n nhiệt độ phòng 24 giờ, sau ly tâm với tốc độ 10.000 vòng/phút 10 phút để kiểm tra xem PTP có bị tủa lại hay không Các P-SMEDDS sau chuẩn bị xong để yên 48 trước tiến hành đánh giá Khảo sát đánh giá tính chất P-SMEDDS Xác định độ bền nhiệt động P-SMEDDS Nghiên cứu Y học Chu kỳ đông - rã đông : với chu kỳ, thời gian chu kỳ 12 (6 để đông rã đông) Hệ đạt yêu cầu không xảy kết tủa, kết bơng hay tách lớp Chu kỳ nóng - lạnh : với chu kỳ, thời gian chu kỳ 12 (6 để nhiệt độ 4oC để nhiệt độ phòng) Hệ đạt yêu cầu không xảy kết tủa, kết hay tách lớp Bảo quản điều kiện khác nhau: bảo quản hệ vi nhũ tương oC, nhiệt độ phòng 10 ngày Hệ đạt yêu cầu không xảy kết tủa, kết hay tượng tách lớp Xác định ảnh hưởng pH lên độ bền vững P-SMEDDS Thời gian hệ đạt độ bền: Pha loãng P-SMEDDS 100 lần môi trường pH 1,2 ; 4,5 6,8 để yên vòng 24 nhiệt độ phòng, ghi nhận thời gian mà PTP bị tủa lại, hệ bị đục thay đổi màu sắc theo thời gian Lựa chọn CT đạt yêu cầu cho thử nghiệm Khảo sát hàm lượng PTP theo thời gian sau pha loãng P-SMEDDS pH khác nhau: Các CT sau pha lỗng hệ đệm có pH khác rút mẫu đem định lượng phương pháp UV-Vis để xác định hàm lượng PTP vi nhũ tương sau khoảng thời gian 5, 15, 30, 45, 60, 75, 90, 105 120 phút Kết coi đạt sau 120 phút hàm lượng PTP vi nhũ tương đạt từ 80% trở lên(7) Đo phân bố kích thước hạt vi nhũ tương tạo thành zeta Các mẫu P-SMEDDS đạt yêu cầu độ bền Pha loãng P-SMEDDS 100 lần với nước cất, tiến hành thử nghiệm sau: nhiệt động, độ bền môi trường pH Ly tâm: Vi nhũ tương hình thành từ pha đo phân bố kích thước hạt zeta Các loãng 100 lần nước cất P-SMEDDS mẫu pha loãng với nước cất đem đo đem ly tâm với tốc độ 10.000 vòng/phút phân bố kích thước hạt zeta thiết bị thời gian 10 phút Hệ đạt yêu cầu Zetasizer Nano ZSP Chọn lựa hệ có kích thước, khơng xảy kết tủa, kết hay tượng phân bố kích thước hạt zeta đạt yêu cầu tách lớp SMEDDS Chuyên Đề Dược 621 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Xây dựng thẩm định quy trình định lượng PTP hệ vi tự nhũ phương pháp quang phổ UV-Vis Khảo sát đỉnh hấp thu cực đại, tính đặc hiệu, tính tuyến tính, độ đúng, độ xác Nghiên cứu hóa rắn hệ SMEDDS chứa PTP (SP-SMEDDS) nhiệt độ 37 ± 0,5 oC(8) Lấy ml mẫu thời điểm 5, 15, 30, 45, 60, 75, 90, 105 120 phút có bù dịch mơi trường tương ứng Mẫu lọc qua lọc 0,45µm định lượng quang phổ UV-Vis bước sóng 290 nm, pha lỗng cần Mỗi thí nghiệm lặp lại lần KẾTQUẢ Khảo sát lựa chọn chất mang rắn hấp phụ PSMEDDS Xây dựng cơng thức quy trình điều chế SMEDDS chứa pantoprazol Khảo sát khả hấp phụ tối đa PSMEDDS giá mang rắn lựa chọn Florite R Syloid 244 FP(6) Cân 0,2 g loại giá mang cho vào cối sứ, thêm từ từ P-SMEDDS vào trộn thấy hỗn hợp ẩm không khả hấp phụ thêm P-SMEDDS Tính khối lượng P-SMEDDS thêm vào Chọn giá mang rắn có khả hấp phụ P-SMEDDS cao Khảo sát độ tan pantoprazol (PTP) số tá dược tiềm Kết khảo sát độ tan PTP tá dược khảo sát trình bày hình cho thấy với pha dầu, độ tan PTP giảm dần theo thứ tự Capryol 90 > Peceol > Maisine CC > Labrafac lipophile WL1349 > Plurol oleique CC 497 > Labrafac lipophile PG Capryol 90 Peceol lựa chọn để xây dựng giản đồ pha Với nhóm chất diện hoạt đồng diện hoạt, độ tan PTP giảm dần theo thứ tự: Transcutol HP > Lauroglycol 90 > Labrasol > Tween 80 > Labrafil M2125 CS > Cremophor RH 40 > Tween 20 > Labrafil M 1994CS Transcutol HP lựa chọn làm chất đồng diện hoạt, chất diện hoạt lựa chọn cho khảo sát Lauroglycol 90 Labrasol Cremophor RH40 có khả hòa tan PTP thấp để tăng khả diện hoạt nên lựa chọn phối hợp chất diện hoạt khác để khảo sát CT(4,5) Xác định tỷ lệ chất mang rắn Cân 0,2 g giá mang rắn chọn cho vào cối sứ, thêm từ từ P-SMEDDS vào trộn thấy hỗn hợp khơ tơi Tính tỉ lệ P-SMEDDS thêm vào Khảo sát tính chất hệ SP-SMEDDS Các đặc điểm hình thái bên ngồi bột PTP, giá mang rắn chọn SP-SMEDDS khảo sát qua sử dụng kính hiển vi điện tử qt (SEM) Hình ảnh chụp nhiều vị trí với độ phóng đại 300, 1000 5000 lần(9) Xác định số Hausner Carr’s Index SP-SMEDDS tạo thành(2) Khảo sát độ hòa tan SP-SMEDDS ba mơi trường pH 1,2; pH 4,5 pH 6,8 cách đóng thủ công SP-SMEDDS vào nang cứng số Kết độ hòa tan viên nang chứa SPSMEDDS so sánh với viên nang chứa nguyên liệu PTP, viên nang chứa P-SMEDDS đóng thủ cơng với hàm lượng 40 mg viên đối chiếu (viên nang PTP STADA 40 mg) Thử nghiệm đo độ hòa tan sử dụng thiết bị giỏ quay với tốc độ 100 vòng/phút Mơi trường hòa tan 900 ml đệm pH 1,2; pH 4,5 pH 6,8 622 Xây dựng giản đồ pha Kết xây dựng giản đồ pha trình bày bảng hình cho thấy CT5 CT6 tạo vi nhũ tương đạt yêu cầu Với CT5, hệ tạo vi nhũ tương vùng mà pha dầu chiếm tỉ lệ nhỏ 20% với tỉ lệ chất diện hoạt chất đồng diện hoạt Hệ không tạo vi nhũ tương CT có tỉ lệ dầu lớn 20% CT6, hệ tạo vi nhũ tương tỉ lệ vùng khảo sát Các CT suốt mờ nghiên cứu khả tải hoạt chất hệ thử nghiệm Chuyên Đề Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Nghiên cứu Y học Hình 1: Kết độ tan pantoprazol tá dược khảo sát Bảng 2: Kết cảm quan hệ SMEDDS chọn để khảo sát CT Pha dầu Chất diện hoạt Chất đồng diện hoạt CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 CT6 CT7 CT8 CT9 CT10 CT11 CT12 Capryol 90 Capryol 90 Capryol 90 Capryol 90 Capryol 90 Capryol 90 Peceol Peceol Peceol Peceol Peceol Peceol Lauroglycol 90 Lauroglycol 90 : Cremophor RH40 (1:1) Lauroglycol 90 : Cremophor RH40 (1:2) Labrasol Labrasol : Cremophor RH40 (1:1) Labrasol : Cremophor RH40 (1:2) Lauroglycol 90 Lauroglycol 90 : Cremophor RH40 (1:1) Lauroglycol 90 : Cremophor RH40 (1:2) Labrasol Labrasol : Cremophor RH40 (1:1) Labrasol : Cremophor RH40 (1:2) Transcutol HP Transcutol HP Transcutol HP Transcutol HP Transcutol HP Transcutol HP Transcutol HP Transcutol HP Transcutol HP Transcutol HP Transcutol HP Transcutol HP Điểm đánh giá cảm quan IV, V III, IV, V III, IV, V III, IV I, II, III I, II IV, V III, IV,V III, IV,V IV,V III, IV,V III, IV,V Đục Trong Hình 2: Giản đồ pha tạo thành từ CT5 CT6 pha loãng 100 lần nước cất CT6 (605, 608, 615 620)) Tỷ lệ 8% chọn Khảo sát khả tải hoạt chất khảo sát tiếp thuận tiện cho Kết thể bảng cho thấy phân liều dùng chế phẩm sau phòng hệ tải tốt PTP tỷ lệ 8% Với tỷ lệ 10%, ngừa kết tủa trở lại tỷ lệ tải cao(1) có CT đạt (2 cho CT5 (505, 509) cho Chuyên Đề Dược 623 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Nghiên cứu Y học Bảng 3: Kết đánh giá khả tải PTP hệ SMEDDS khảo sát từ CT5 CT6 CT 501 502 503 504 505 506 507 508 509 510 601 602 603 604 605 Tỷ lệ tải PTP(%) 10 T T Đ T T Đ T T Đ T T Đ T T T T T Đ T T Đ T T T T T T T T Đ T T Đ T T Đ T T Đ T T Đ T T T Thành phần CT (%) D DH ĐDH 15 30 55 15 35 50 15 40 45 15 45 40 15 50 35 20 30 50 20 35 45 20 40 40 20 45 35 20 50 30 15 30 55 15 35 50 15 40 45 15 45 40 15 50 35 CT 606 607 608 609 610 611 612 613 614 615 616 617 618 619 620 Tỷ lệ tải PTP (%) 10 T T Đ T T Đ T T T T T Đ T T Đ T T Đ T T Đ T T Đ T T Đ T T T T T Đ T T Đ T T Đ T T Đ T T T Thành phần CT (%) D DH ĐDH 20 30 50 20 35 45 20 40 40 20 45 35 20 50 30 25 30 45 25 35 40 25 40 35 25 45 30 25 50 25 30 30 40 30 35 35 30 40 30 30 45 25 30 50 20 T: Trong suốt; Đ: Đục; PD: Pha dầu; DH: Chất diện hoạt, ĐDH: Chất đồng diện hoạt Phương pháp điều chế P-SMEDDS Cân tá dược theo thành phần công thức Cân dược chất Vortex phút tạo hệ đồng Vortex phút, siêu âm 10 phút Phối hợp dược chất vào tá dược Hệ tự nhũ đồng Hình 3: Sơ đồ qui trình điều chế SMEDDS chứa pantoprazol (P-SMEDDS) hợp đạt yêu cầu cao CT5, chứng tỏ tỷ lệ chất Qui trình điều chế P-SMEDDS chi hòa tan diện hoạt cao độ bền nhiệt động tốt đơn giản, lặp lại, khơng đòi hỏi thiết bị phức tạp dễ nâng cỡ lô (đã nâng lô 200 g) cho sản phẩm ổn định suốt trình nghiên cứu (Hình 3) Khảo sát đánh giá tính chất hệ P-SMEDDS Độ bền nhiệt động P-SMEDDS Kết độ bền nhiệt động PSMEDDS bảng cho thấy CT tạo vi nhũ tương đạt độ bền nhiệt động tương đối tốt, ngoại trừ số CT không đạt thử nghiệm đông - rã đông Kết thử nghiệm độ bền nhiệt động cho thấy CT6 có tỷ lệ phối 624 Ảnh hưởng pH lên độ bền vững PSMEDDS Kết từ bảng cho thấy tất PSMEDDS chuyển sang màu vàng nhạt sau phút môi trường pH 1,2; pH 4,5 sau 10 12 môi trường pH 6,8 Ở pH 1,2 có 4/15 CT khảo sát pH 4,5 có 10/15 CT khảo sát không xuất kết tủa tách pha sau 24 Ở pH 6,8 hầu hết CT khảo sát không xuất kết tủa tách pha sau 24 giờ, ngoại trừ CT 507 Trong 15 CT khảo sát, CT 506 CT 609 không xuất kết tủa bị Chuyên Đề Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 tách lớp sau 24 môi trường pH Như vậy, CT 506 CT 609 lựa chọn cho thử nghiệm xác định kích thước giọt zeta Kết khảo sát nồng độ PTP vi nhũ tương hình thành từ P-SMEDDS theo thời gian pH khác thể hình cho thấy PTP khơng bền môi trường acid, hàm lượng giảm nhiều pH 1,2 pH 4,5 môi trường pH 6,8 không giảm Cả môi trường, 30 phút đầu hàm lượng PTP không giảm, sau Nghiên cứu Y học giảm mạnh, nhiều pH 1,2 (còn 30% sau giờ), pH 4,5 (còn 47% sau giờ), riêng pH 6,8 hàm lượng không đổi Như vậy, PTP bị phân hủy nhanh pH môi trường thấp (acid) Đây lý sản phẩm chứa PTP thường bao tan ruột Với PTP SMEDDS, môi trường pH, khả GPHC hệ SMEDDS nhanh, đạt 85% sau phút hàm lượng PTP không giảm sau Kết PTP SMEDDS bao pha dầu, ngăn tác động môi trường acid Bảng 4: Kết độ bền nhiệt động P-SMEDDS CT 501 502 503 504 505 506 507 508 509 510 601 602 603 604 605 LT Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đ-RĐ Không đạt Không đạt Không đạt Không đạt Không đạt Đạt Đạt Đạt Không đạt Không đạt Không đạt Không đạt Đạt Không đạt Không đạt N-L Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt 4C Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt t phòng Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt CT 606 607 608 609 610 611 612 613 614 615 616 617 618 619 620 LT Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đ-RĐ Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Không đạt Không đạt Đạt Đạt Đạt Không đạt Không đạt Đạt Đạt Đạt N-L Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt 4C Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt t phòng Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt LT: Ly tâm; Đ-RĐ: Thử nghiệm Đông – rã đông; N-L: Chu kỳ Nóng lạnh Bảng 5: Kết khảo sát độ bền vi nhũ tương tạo từ P-SMEDDS môi trường pH CT 506 507 508 603 606 607 608 609 610 pH 1,2 V5, K V5, T V5, K V5, T V5, T V5, T V5, K V5, K V5, T pH 4,5 V5, K V5, T V5, T V5, T V5, K V5, T V5, T V5, K V5, K pH 6,8 V10, K V5, T* V10, K V10, K V10, K V10, K V10, K V10, K V10, K CT 611 612 613 614 615 618 619 620 pH 1,2 V5, T V5, T V5, T V5, T V5, T V5, T V5, T V5, T pH 4,5 V5, K V5, T V5, T V5, K V5, T V5, K V5, K V5, K pH 6,8 V10, K V10, K V10, K V10, K V10, K V10, K V10, K V10, K V5: Đổi sang màu vàng sau phút; V10: Đổi sang màu vàng sau 10-12 T: Có tủa sau 24 giờ; T*: Có tủa sau 10-12 giờ; K: Không xuất tủa tách lớp sau 24 Chuyên Đề Dược 625 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 (%) PTP phóng thích) Nghiên cứu Y học Thời gian (phút) Hình 4: Kết (%) PTP phóng thích theo thời gian mơi trường pH 1,2; pH4,5 pH 6,8 từ P-SMEDDS nhỏ CT 609 CT 609 zeta Kết đo kích thước giọt zeta vi lớn CT 506 nhũ tương Kết đo kích thước giọt zeta CT 506 CT 609 từ hình cho thấy CT tạo vi nhũ tương với kích thước nằm khoảng 10 nm đến 100 nm Dải phân bố kích thước hẹp (chỉ số PDI thấp) cho có đồng mặt kích thước Thế zeta CT cao cho thấy vi nhũ tương tạo từ CT bền, tránh tượng tách lớp, kết tủa CT 506 có kích thước giọt trung bình Như vậy, CT 506 CT 609 tạo hệ vi nhũ tương đạt độ bền nhiệt động; giữ hàm lượng PTP đạt mức 85% sau 120 phút môi trường pH khác tương ứng với thay đổi pH đường tiêu hóa, đồng thời kích thước giọt nằm trong vùng vi nhũ tương đồng nên lựa chọn để nghiên cứu hóa rắn hệ P-SMEDDS Hình 5: Kết kích thước giọt zeta của CT 506 CT 609 Nồng độ độ hấp thu PTP bước sóng 290 Xây dựng thẩm định quy trình định lượng nm có tương quan tuyến tính khoảng PTP hệ vi tự nhũ phương pháp nồng độ - 50 µg/ml methanol (R2 = 0,997, quang phổ UV-Vis phương trình hồi qui y = 0,0357x), độ xác Kết khảo sát cho thấy PTP cho đỉnh hấp với RSD = 0,95% < 2% độ với tỷ lệ hồi thu cực đại bước sóng λmax = 290 nm Khơng có phục 99,58 – 101,7 nằm khoảng 98 – 102% đỉnh hấp thu tá dược bước sóng 626 Chuyên Đề Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Qui trình đạt yêu cầu quy trình phân tích áp dụng định lượng PTP hệ vi tự nhũ Nghiên cứu hóa rắn hệ SMEDDS chứa PTP (SP-SMEDDS) Nghiên cứu Y học Kết từ bảng cho thấy Florite R hấp phụ tốt Syloid FP 244 CT khảo sát Bột hấp thu khô tơi, màu trắng ngà (CT 506) đến vàng nhạt (CT 609) Tỷ lệ Florite R PSMEDDS lựa chọn cho hấp phụ 1: 2,5 khảo sát đánh giá tính chất bột SP-SMEDDS Khảo sát lựa chọn chất mang rắn tỷ lệ chất mang rắn hấp phụ P-SMEDDS Bảng 6: Kết khảo sát lựa chọn chất mang rắn tỷ lệ chất mang rắn hấp phụ P-SMEDDS Khả hấp phụ Syloid FP 244 Florite R Thành phần Syloid FP 244 Florite R Chất mang rắn (g) 0,21 0,23 P-SMEDDS 506 (g) 0,82 1,02 P-SMEDDS 609 (g) 0,77 0,97 Kết khảo sát tính chất SP-SMEDDS Kết chụp kính hiển vi điện tử quét (SEM) số đánh giá tính trơn chảy Kết chụp SEM (Hình 6) cho thấy nguyên liệu PTP ban đầu có dạng que, sau phối hợp với tá dược hóa rắn hoàn toàn tạo Tỷ lệ khảo sát Florite R P-SMEDDS Florite R Tỷ lệ Tính chất 0,21 0,52 1: 2,48 Bột trắng ngà đến vàng nhạt, khơ tơi 0,54 1: 2,57 SMEDDS rắn Với độ phóng đại 5000 lần, hình ảnh Florite R ngun liệu có nhiều khoang trống, sau P-SMEDDS hấp phụ lấp đầy khoang trống tạo hỗn hợp rắn đồng I.a II.a III.a IV.a I.b II.b III.b IV.b II.c III.c IV.c Hình 6: Hình chụp kính hiển vi điện tử quét (SEM) mẫu khảo sát (I: Nguyên liệu PTP; II: Florite R; III: SP-SMEDDS 506; IV: SP-SMEDDS 609; a: x 300 lần, b: x 1000 lần, c: x 5000 lần) Tỷ số Haussner số Carr CT 506 dược hấp phụ Florite R mịn, cần 1,33 25,0 CT 609 1,31 23,5 phối hợp thêm với tá dược trơn chảy thấy tính trơn chảy chưa tốt tá ứng dụng đóng nang dập viên Chuyên Đề Dược 627 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Kết thử nghiệm độ GPHC SP-SMEDDS Kết GPHC từ hình cho thấy PTP khơng bền môi trường acid, hàm lượng giảm nhiều môi trường pH 1,2 pH 4,5 môi trường pH 6,8 không giảm Kết phù hợp với thử nghiệm độ pH 1,2 pH 4,5 bền PTP môi trường pH thử nghiệm đánh giá độ bền Với viên đối chiếu, sau khảo sát viên không GPHC pH 1,2 pH 4,5 khoảng 40% pH 6,8 xấp xỉ 100% sau 45 phút pH 6,8 Hình 7: Kết thử nghiệm độ hòa tan hệ SP-SMEDDS đồng diện hoạt Transcutol HP BÀNLUẬN chất diện hoạt hỗn hợp Labrasol – PTP thuốc ức chế bơm proton, sử Cremophore RH 40 (1:1 1:2) ứng với CT dụng phổ biến điều trị bệnh viêm loét CT tải đến - 10% PTP, tỷ lệ dày, tá tràng chứng tăng tiết acid tải cao SMEDDS Mặt khác hiệu điều trị tốt PTP không bền thành phần tá dược mơi trường acid thuộc nhóm II BCS ứng dụng nhiều để điều chế SMEDDS nên có độ tan nước kém, khả Để thuận tiện cho việc phân liều sau GPHC ổn định, sinh khả dụng không cao này, tránh kết tủa tỷ lệ tải Các sản phẩm PTP dạng bao tan cao (10%), tỷ lệ tải 8% chọn Kết ruột với quy trình bào chế đòi hỏi nhiều đánh giá độ bền động học, độ bền công đoạn đặc biệt bao tan ruột mơi trường pH P-SMEDDS, kích thước phải đảm bảo tính đồng nhất, GPHC giọt, zeta với tỷ lệ tải 8% cho thấy sau xuống ruột khơng bị rò rỉ CT 506 CT 609 đạt yêu cầu đề với môi trường acid dày SMEDDS cho thấy nhiều ưu điểm kích thước giọt trung có nhiều ưu điểm ngồi việc cải thiện độ bình 21,57 38,61 nm, zeta tan, nâng cao sinh khả dụng bảo vệ tương ứng - 29,8 - 35,4 mV giá trị dược chất qua việc tạo màng bao lipid làm cao hệ SMEDDS cho thấy Pgiảm tiếp xúc với yếu tố bất lợi SMEDDS bền, bị kết tụ Mặt khác CT đường tiêu hóa pH, men tiêu hóa 506 CT 609 GPHC nhanh bền Trong nghiên cứu này, việc xây dựng giản nguyên liệu PTP ba môi trường đồ pha với tỉ lệ pha dầu dao động từ 15% pH 1,2; pH 4,5; pH 6,8 khảo sát đến 30%, chất diện hoạt từ 30% đến 50%, đặc biệt môi trường pH 1,2 tương tự chất đồng diện hoạt từ 35% đến 55% nhằm môi trường acid dày Điều cho thấy làm giảm kích ứng chất diện hoạt lên SMEDDS bảo vệ PTP mơi hệ tiêu hóa, đồng thời giữ tỷ lệ pha trường acid đến khơng dầu khơng q cao nhằm giúp hình thành vi cần đến bao tan ruột Để tiện lợi cho nhũ tương nhanh chóng dễ dàng việc ứng dụng vào dạng thuốc rắn phân môi trường nước Kết thành phần liều viên nén, viên nang, P-SMEDDS SMEDDS với pha dầu Capryol 90, chất 628 Chuyên Đề Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 nghiên cứu hóa rắn với tá dược thấm hút mạnh Florite R Syloid FP 244 Kết cho thấy Florite R thấm hút tốt chọn với tỷ lệ sử dụng với P-SMEDDS cho CT 506 CT 609 (1 : 2,5) Với tỷ lệ này, SP-MEDDS hình thành chất tơi xốp, nhiên tính trơn chảy (chỉ số Carr tỷ số Haussner (bảng 6)) Vấn đề khắc phục thêm tá dược độn trơn bóng để đóng nang hay dập viên Kết GPHC độ bền PTP SPSMEDDS môi trường pH cho thấy tương tự P-SMEDDS chứng tỏ q trình hóa rắn khơng ảnh hưởng đến tích chất PSMEDDS Kết GPHC từ hình cho thấy viên đối chiếu (viên nang pantoprazol 40 mg – STADA) chứa pellet PTP dạng bao tan ruột nên pH 1,2, viên không GPHC Trong pH 4,5, lượng PTP đạt khoảng 40% sau 120 phút màng bao tan ruột tan phần pH này, hoạt chất khuếch tán ngồi Tại pH 6,8 viên đối chiếu có % GPHC thấp viên P-SMEDDS viên SPSMEDDS sau phút; tương đương sau 15 phút đạt xấp xỉ 100% sau 45 phút đồng thời hàm lượng hoạt chất không thay đổi sau 120 phút Với P-SMEDDS SP-SMEDDS, kết cho thấy ba môi trường (%) GPHC cao viên đối chiếu phút đầu tương đương sau 15 phút Lượng PTP phóng thích từ hệ cao 90% đồng thời hàm lượng hoạt chất không giảm 120 phút môi trường Như vậy, P-SMEDDS SPSMEDDS sơ giúp PTP đạt độ bền, ổn định môi trường pH đồng thời giúp GPHC nhanh (trên 90% sau phút) trì 120 phút Do đó, hệ có tiềm cải thiện sinh khả dụng đường uống PTP Chuyên Đề Dược Nghiên cứu Y học KẾTLUẬN Công thức P-SMEDDS xây dựng bào chế thành công qui mô 200 g Hệ đạt tiêu lý hóa theo yêu cầu SMEDDS giải pháp tiềm giúp cải thiện độ hòa tan đồng thời nâng cao sinh khả dụng đường uống cho PTP TÀILIỆUTHAMKHẢO Bộ Y tế (2009), Dược thư Quốc gia Việt Nam, Nhà xuất Y học, Hà Nội, tr.722-725 Hoang SW (2017), Developing Solid Oral Dosage Forms (Second Edition): Pharmaceutical Theory and Practice, Academic Press, United States, pp.723-747 Jaiswal P and Aggarwal G (2013), “Bioavailability Enhancement of Poorly Soluble Drugs By Smedds: a Review” Journal of Drug Delivery and Therapeutics, 3(1), pp.98-109 Khan B, Bakhsh S, Khan H, Mahmood T and Rasul A (2012), “Basics of self micro emulsifying drug delivery system”, Journal of Pharmacy and Alternative Medicine, 1, pp.13–20 Nasr A, Gardouh A, Ghonaim H, Abdelghany E, Ghorab M (2016), “Effect of oils, surfactants and cosurfactants on phase behavior and physicochemical properties of selfnanoemulsifying drug delivery system (SNEDDS) for irbesartan and olmesartan”, International Journal of Applied Pharmaceutics, 8(1), pp.13-24 Patel P, Patel H, Panchal S and Mehta T (2013), “Self microemulsifying drug delivery system of tacrolimus: Formulation, in vitro evaluation and stability studies”, International Journal of Pharmaceutical Investigation, 3(2), pp.95-104 Paul S, Bose A, Konar I, Mukherjee P, Bengal W (2017), “Comparative in-vitro characterization of different commercially available brands of pantoprazole sodium tablets”, World Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, 6(11), pp.778-783 The International Pharmacopoeia – Seven Edition (2017), Dissolution testing of tablets and capsules Trivedi K, Patel PV, Pujara Z (2013), “Development and characterization of liquid and solid self-emulsifying drug delivery system of fexofenadine”, Journal of Pharmaceutical Investigation, 43(5), pp.385-394 10 Wu L, et al (2015), “A Self-microemulsifying Drug Delivery System (SMEDDS) for a Novel Medicative Compound Against Depression: a Preparation and Bioavailability Study in Rats”, American Association of Pharmaceutical Sciences, 16(5), pp.1051–1058 Ngày nhận báo: 18/10/2018 Ngày phản biện nhận xét báo: 01/11/2018 Ngày báo đăng: 15/03/2019 629 ... trình đạt yêu cầu quy trình phân tích áp dụng định lượng PTP hệ vi tự nhũ Nghiên cứu hóa rắn hệ SMEDDS chứa PTP (SP-SMEDDS) Nghiên cứu Y học Kết từ bảng cho thấy Florite R hấp phụ tốt Syloid FP... pháp điều chế SMEDDS chứa PTP (PSMEDDS) Công thức hệ vi tự nhũ với tỷ lệ tải PTP thích hợp chuẩn bị sau: Cân xác g hệ tá dược theo tỷ lệ có sẵn cho vào eppendorf ml Cân xác 80 mg PTP cho vào hệ, ... trình định lượng PTP hệ vi tự nhũ phương pháp quang phổ UV-Vis Khảo sát đỉnh hấp thu cực đại, tính đặc hiệu, tính tuyến tính, độ đúng, độ xác Nghiên cứu hóa rắn hệ SMEDDS chứa PTP (SP-SMEDDS)