Nghiên cứu điều chế và hóa rắn hệ vi tự nhũ chứa exemestane

Exemestane là thuốc điều trị ung thư vú phụ thuộc estrogen ở phụ nữ sau mãn kinh, thuộc nhóm IV theo hệ thống phân loại sinh dược học với độ tan thấp và tính thấm qua màng thấp, dẫn đến sinh khả dụng đường uống thấp. Đề tài được thực hiện với mục tiêu điều chế và hóa rắn hệ vi tự nhũ chứa exemestane.

Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 Nghiên cứu Y học NGHIÊN CỨU ĐIỀU CHẾ VÀ HÓA RẮN HỆ VI TỰ NHŨ CHỨA EXEMESTANE Lê Thị Thanh Nga*, Nguyễn Đức Hạnh* TÓM TẮT Mở đầu: Exemestane thuốc điều trị ung thư vú phụ thuộc estrogen phụ nữ sau mãn kinh, thuộc nhóm IV theo hệ thống phân loại sinh dược học với độ tan thấp tính thấm qua màng thấp, dẫn đến sinh khả dụng đường uống thấp Với khả cải thiện độ tan nâng cao sinh khả dụng đường uống, hệ vi tự nhũ (SMEDDS) ứng dụng để tải hoạt chất exemestane Đề t|i thực với mục tiêu điều chế hóa rắn hệ vi tự nhũ chứa exemestane Đối tượng v| phương ph{p nghiên cứu: Sàng lọc t{ dược hệ E-SMEDDS tiến hành dầu (Maisine 35-1, Capryol 90, Labrafac lipophile, Labrafac CC, dầu Gấc, Plurol oleique CC 497), chất diện hoạt (Labrasol, Cremophor RH 40, Cremophor EL, Tween 80) chất đồng diện hoạt (Transcutol P, Lutrol E-400) Công thức hệ vi tự nhũ chứa exemestane (E-SMEDDS) xây dựng thông qua việc khảo sát giản đồ pha dầu, chất diện hoạt, đồng diện hoạt v| đặc điểm vi nhũ tương hình th|nh E-SMEDDS v| vi nhũ tương exemestane hình th|nh đ{nh gi{ độ bền sau pha loãng, ly tâm, thời gian tự nhũ, dãy ph}n bố kích thước tiểu phân (PDI), zeta ảnh hưởng pH môi trường pha lỗng hệ E-SMEDDS Cơng thức hệ vi tự nhũ hóa rắn chứa exemestane (SE-SMEDDS) xây dựng sử dụng phương ph{p hấp phụ giá mang rắn Hệ SE-SMEDDS đ{nh gi{ thông qua kết nghiên cứu hình thái học sử dụng kính hiển vi điện tử quét (SEM) v| x{c định kích thước tiểu phân trung bình vi nhũ tương hình th|nh Độ hòa tan viên nén bao đường Aromasine (Pfizer), viên nang nguyên liệu exemestane, viên nang E-SMEDDS viên nang SESMEDDS khảo sát so sánh Kết quả: Công thức hệ E-SMEDDS chọn gồm exemestane/Capryol 90/Cremophor EL/Transcutol P với tỉ lệ 6,10/46,95/37,56/9,39 (kl/kl/kl/kl) E-SMEDDS nhũ hóa ho|n to|n 1,05 phút; hình th|nh vi nhũ tương exemestane có kích thước tiểu phân trung bình 66,6 nm, PDI 0,320 zeta -11,4 mV; không xảy tượng tách pha hay kết tủa hoạt chất sau pha loãng hay sau thử nghiệm ly tâm; pH mơi mơi trường pha lỗng có ảnh hưởng lên kích thước tiểu phân trung bình vi nhũ tương tạo thành Công thức hệ SE-SMEDDS chọn gồm exemestane/Capryol 90/Cremophor EL/Transcutol P/Florite R/Vivastar® P với tỉ lệ 1,42/10,72/8,58/2,14/73,14/4 (kl/kl/kl/kl/kl/kl) Viên nang E-SMEDDS SE-SMEDDS có khả cải thiện độ hòa tan exemestane so với nguyên liệu exemestane So với viên nén bao đường Aromasine (, viên nang E-SMEDDS phóng thích exemestane nhanh mơi trường dày giả định khơng có enzyme (SGFwe) v| mơi trường SLS 0,5% Viên nang SE-SMEDDS phóng thích exemestane nhanh viên nén bao đường Aromasine môi trường SGFwe v| tương đương môi trường SLS 0,5% Kết luận: Công thức hệ E-SMEDDS SE-SMEDDS nghiên cứu phát triển E-SMEDDS SESMEDDS chứng minh có khả cải thiện độ hòa tan exemestane E-SMEDDS SE-SMEDDS giải pháp tiềm giúp n}ng cao sinh khả dụng đường uống exemestane Từ khóa: exemestane, hệ vi tự nhũ, hệ vi tự nhũ hóa rắn, độ tan, sinh khả dụng * Khoa Dƣợc, Đại học Y Dƣợc Thành phố Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: TS Nguyễn Đức Hạnh ĐT: 0913576748 Chuyên Đề Dƣợc Email: duchanh@ump.edu.vn 315 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 ABSTRACT FORMULATION AND EVALUATION OF LIQUID AND SOLID SELF-MICROEMULSIFYING DRUG DELIVERY SYSTEMS OF EXEMESTANE Le Thi Thanh Nga, Nguyen Duc Hanh * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Supplement Vol 22 - No 1- 2018: 315 - 324 Introduction: Exemestane is used in the treatment of estrogen receptor-positive breast cancer in postmenopausal women Exemestane belongs to group IV according to Biopharmaceutics classification system with low solubility and low membrane permeability resulted in low oral bioavailability The aim of this study was to formulate and evaluate the liquid exemestane loaded self-microemulsifying drug delivery systems (ESMEDDS) and solid exemestane loaded self-microemulsifying drug delivery systems (SE-SMEDDS) Methods: Excipient screening was carried out with six oils (Maisine 35-1, Capryol 90, Labrafac lipophile, Labrafac CC, Gac oil, Plurol oleic acid CC 497), four surfactants (Labrasol, Cremophor RH 40, Cremophor EL, Tween 80) and two cosurfactants (Transcutol P, Lutrol E-400) E-SMEDDS formulation was developed based on several pseudo-ternary phase diagrams of selected oils, surfactant and cosurfactant and characteristics of resultant microemulsions The optimized E-SMEDDS formulation and the resultant microemulsions were characterized by dilution study, self-emulsification performance, droplet size, polydispersity index, zeta potential and effects of pH of dilution media on E-SMEDDS Formulation of the SE-SMEDDS was developed by absorbing E-SMEDDS into solid carriers In vitro dissolution study of Aromasine sugar-coated tablets, exemestane capsules, ESMEDDS capsules and SE-SMEDDS capsules were carried out Results: The optimized E-SMEDDS formulation consisted of exemestane/Capryol 90/ Cremophor EL/Transcutol P (6.10/46.95/37.56/9.39) in % w/w E-SMEDDS formed microemulsions with a mean droplet size of 66.6 nm, a PDI of 0.320 and a zeta potential of -11.4 mV The optimized SE-SMEDDS formulation consisted of exemestane/Capryol 90/Cremophor EL/Transcutol P/Florite R/Vivastar® P (1.42/10.72/8.58/2.14/73.14/4) in % w/w Both E-SMEDDS and SE-SMEDDS could improve the watersolubility of exemestane in comparison with pure exemestane E-SMEDDS capsules released exemestane faster than Aromasine tablets in simulated gastric fluid without enzyme (SGFwe) and SLS 0.5% media SE-SMEDDS capsules released exemestane faster than Aromasine tablets in SGFwe and similar to Aromasine tablets in SLS 0.5% medium Conclusion: E-SMEDDS and SE-SMEDDS formulations were successfully developed and could be the promising solutions for enhancing not only exemestane solubility but also its oral bioavailability Keywords: exemestane, self-microemulsifying drug delivery systems, solid self-microemulsifying drug delivery systems, solution, bioavailability sinh khả dụng đƣờng uống exemestane ĐẶT VẤN ĐỀ thấp(5) Hệ vi tự nhũ (SMEDDS) v| đƣợc Exemestane (Hình 1) thuốc ức chế chọn lọc nghiên cứu cải thiện khả hấp thu không hồi phục enzyme aromatase hệ thứ hoạt chất tan nƣớc Các ba, đƣợc FDA khuyến cáo sử dụng điều trị SMEDDS dạng lỏng chủ yếu đƣợc ung thƣ vú phụ thuộc estrogen phụ nữ sau phân liều dƣới dạng viên nang mềm viên mãn kinh(2) Theo hệ thống phân loại sinh dƣợc nang cứng, thƣờng gặp số vấn đề khó khăn học (BCS), exemestane hoạt chất thuộc nhóm sản xuất, đặc biệt rò rỉ thuốc khỏi vỏ IV với độ tan thấp (độ tan nƣớc 0,08 mg/ml nang Hệ SMEDDS hóa rắn 37°C) tính thấm qua màng thấp(3) Do đó, phƣơng ph{p tiếp cận gần đ}y để khắc phục 316 Chuyên Đề Dƣợc Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 vấn đề nêu Vì vậy, mục tiêu nghiên cứu nhằm điều chế hóa rắn hệ vi tự nhũ chứa exemestane Nghiên cứu Y học Bƣớc sóng phát hiện: 247 nm Thời gian ph}n tích phút Phƣơng ph{p HPLC định lƣợng exemestane đƣợc thẩm định tính đặc hiệu, tính tƣơng thích hệ thống, tính tuyến tính, độ lặp lại v| độ Chuẩn bị mẫu thử định lượng exemestane c{c t{ dược Hòa tan hồn tồn 25 µl mẫu cần định lƣợng ethanol bình định mức ml, thêm ethanol đến vạch, lắc đều, lọc qua màng lọc nylon kích thƣớc lỗ lọc 0,22 µm Hình 1: Cơng thức hóa học exemestane ĐỐI TƢỢNG-PHƢƠNGPH[P NGHIÊNCỨU Đối tƣợng nghiên cứu Exemestane nguyên liệu (độ tinh khiết 98,90%) exemestane chuẩn (độ tinh khiết 99,8 %) công ty Qilu Antibiotics Pharmaceutical (Trung Quốc) cung cấp Cremophor RH 40, Cremophor EL, Lutrol E-400 mẫu t{ dƣợc công ty BASF (Ludwigshafen, Đức) tặng Maisine 35-1, Capryol 90, Labrafac lipophile, Labrafac CC, Labrasol, Transcutol P công ty Gattefosse (Sant-Priest, Pháp) cung cấp Syloid 244 FP silica đƣợc mua từ công ty W R Grace (Mỹ) Florite R công ty Tomita Pharmaceutical (Tokyo, Nhật bản) cung cấp Dầu Gấc đƣợc mua từ công ty cổ phần nông nghiệp Đông Phƣơng (TP HCM, Việt Nam) Colloidal silicon dioxide công ty Madhu Silica Pvt (Ấn Độ) cung cấp Vivastar® P cơng ty JRS Pharma (Mỹ) tặng Kyron T-314 công ty Corel Pharma Chem (Ahmedabad, Ấn Độ) cung cấp Vỏ nang cứng 00 công ty Capsugel (Indonesia) cung cấp Viên nén bao đƣờng Aromasine 25 mg (số lô 299AB) đƣợc mua từ công ty Pfizer (Italia) Phƣơng ph{p HPLC định lƣợng exemestane Điều kiện HPLC định lượng exemestane: Máy HPLC Azura (Knauer, Đức), đầu dò 2.1L Cột sắc ký Syncronis C18 (250 x 4,6 mm; 5µm) tiền cột C18HQ 105 (4 x 10 mm;5 µm) Hệ pha động: acetonitril – nƣớc (75 – 25; tt/tt) Tốc độ dòng: 1,0 ml/phút Nhiệt độ cột: 30°C Thể tích tiêm mẫu: 20 µl Chun Đề Dƣợc Chuẩn bị mẫu thử định lượng exemestane viên nang nguyên liệu exemestane, viên nang E-SMEDDS, viên nang SE-SMEDDS, viên nén bao đường Aromasine 25 mg Cân 20 viên, tính khối lƣợng trung bình bột/dịch thuốc nang, nghiền thành bột mịn trộn thành dịch đồng Cân xác khoảng 0,2 g bột/dịch cho v|o bình định mức 25 ml, thêm dung mơi ethanol đến vạch, lắc Cho 0,8 ml dung dịch v|o bình định mức 10 ml, thêm dung mơi ethanol đến vạch, lắc đều, lọc qua màng lọc nylon kích thƣớc lỗ lọc 0,22 µm Chuẩn bị mẫu thử định lượng exemestane từ thử nghiệm độ hòa tan Lọc mẫu thu đƣợc thử nghiệm độ hòa tan qua màng lọc nylon kích thƣớc lỗ lọc 0,22 µm Xây dựng cơng thức E-SMEDDS Khảo s{t độ tan exemestane t{ dược Độ tan exemestane loại dầu (Maisine 35-1, Capryol 90, Labrafac lipophile, Labrafac CC, dầu Gấc, Plurol oleique CC 497), chất diện hoạt (Labrasol, Cremophor RH 40, Cremophor EL, Tween 80) chất đồng diện hoạt (Transcutol P, Lutrol E-400) đƣợc x{c định phƣơng pháp q bão hòa Lựa chọn dầu có khả hòa tan exemestane cao Khảo sát lựa chọn chất diện hoạt 317 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 Phối hợp dầu đƣợc chọn với chất diện hoạt (Labrasol, Cremophor RH 40, Cremophor EL, Tween 80) theo tỉ lệ 3:7 (kl/kl) Pha loãng 100 lần với nƣớc cất, lắc v| so s{nh độ Lựa chọn chất diện hoạt tạo nhũ tƣơng suốt bền Khảo sát lựa chọn chất đồng diện hoạt Thiết lập giản đồ pha gồm: nƣớc, dầu đƣợc chọn, hỗn hợp chất diện hoạt đƣợc chọn/ chất đồng diện hoạt khảo sát (Transcutol P, Lutrol E-400) tỷ lệ chất diện hoạt/đồng diện hoạt (3:1, kl/kl) theo phƣơng ph{p chuẩn độ nƣớc(1) Lựa chọn chất đồng diện hoạt tạo đƣợc vùng vi nhũ tƣơng rộng Khảo sát lựa chọn công thức t{ dược SMEDDS (bl-SMEDDS) Thiết lập giản đồ pha gồm: nƣớc, dầu đƣợc chọn, hỗn hợp chất diện hoạt đƣợc chọn/ chất đồng diện hoạt đƣợc chọn (4:1, 3:1, 2:1, 1:1, kl/kl) theo phƣơng ph{p chuẩn độ nƣớc (water titration) Lựa chọn công thức bl-SMEDDS từ giản đồ pha có vùng vi nhũ tƣơng rộng Tải exemestane vào bl-SMEDDS Tải exemestane vào bl-SMEDDS với hàm lƣợng exemestane khác (45, 55, 65, 70 mg/g), tạo thành E-SMEDDS Pha lỗng E-SMEDDS 100 lần c{c mơi trƣờng khác (nƣớc cất, đệm pH 1,2; đệm pH 4,5; đệm pH 6,8) Quan s{t độ v| đ{nh gi{ độ bền vi nhũ tƣơng thời điểm sau pha loãng sau pha lỗng Chọn cơng thức E-SMEDDS tối ƣu Đ{nh gi{ tính chất E-SMEDDS Khảo sát thời gian tự nhũ E-SMEDDS ml E-SMEDDS đƣợc cho v|o 250 ml nƣớc cất 37°C khuấy máy khuấy từ với tốc độ 100 vòng/phút Ghi nhận thời gian cần thiết để hệ E-SMEDDS đƣợc nhũ hóa ho|n to|n Phân bố kích thước tiểu phân zeta E-SMEDDS đƣợc pha loãng 100 lần với nƣớc cất C{c vi nhũ tƣơng hình th|nh đƣợc x{c định kích thƣớc tiểu phân trung bình, PDI zeta 318 phƣơng ph{p tán xạ ánh sáng máy SZ-100 (Horiba, Nhật) Ảnh hưởng p mơi trường pha lỗng hệ E-SMEDDS Hệ bl-SMEDDS E-SMEDDS đƣợc pha loãng 100 lần với c{c môi trƣờng khác (nƣớc cất; đệm pH 1,2; đệm pH 4,5 v| đệm pH 6,8) Đ{nh gi{ độ bền đo kích thƣớc tiểu phân vi nhũ tƣơng hình th|nh thời điểm sau pha loãng 2, 4, 6, sau pha loãng Nghiên cứu độ ổn định nhiệt động lực học Thử nghiệm ly tâm: pha loãng E-SMEDDS 100 lần với nƣớc cất ly tâm tốc độ 10.000 rpm 15 phút kiểm tra tách lớp(4) Thử nghiệm đông – rã đông: thực chu kỳ đông – rã đông nhiệt độ -20°C +40°C Thời gian giữ nhiệt độ khơng 48 Sau chu kì, mẫu E-SMEDDS đƣợc pha loãng 100 lần với nƣớc cất ly tâm tốc độ 10.000 vòng/phút 15 phút để kiểm tra tách lớp(4) Xây dựng công thức hệ SE-SMEDDS Khảo sát lựa chọn giá mang rắn hấp phụ hệ ESMEDDS Khảo sát khả hấp phụ tối đa E-SMEDDS giá mang rắn Florite R, Syloid 244 FP Colloidal silicon dioxide (CSD) Phối hợp từ từ E-SMEDDS với giá mang rắn tạo thành hỗn hợp ẩm khơng khả hấp phụ thêm E-SMEDDS nữa, tính tỉ lệ hấp phụ tối đa E-SMEDDS Chọn giá mang rắn có khả hấp phụ E-SMEDDS cao Lựa chọn tỉ lệ giá mang rắn/E-SMEDDS thấp mà bột SE-SMEDDS khô tơi Khảo sát lựa chọn t{ dược rã sử dụng cho viên nang SE-SMEDDS Phối hợp t{ dƣợc siêu rã (Vivastar® P, croscarmelose Kyron T-314) với giá mang lựa chọn hấp phụ E-SMEDDS theo tỉ lệ 0%, 2%, 4%, 8% Cân khối lƣợng bột tƣơng đƣơng 25 mg exemestane v| đóng v|o nang số Chuyên Đề Dƣợc Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 00 Thử độ rã viên nang với 250 ml nƣớc cất 37°C, tốc độ 100 vòng/phút, chọn t{ dƣợc siêu rã để viên nang có thời gian rã ngắn tỉ lệ dùng nhỏ Đ{nh gi{ tính chất SE-SMEDDS Phân bố kích thước tiểu phân SE-SMEDDS đƣợc pha lỗng 100 lần với mơi trƣờng kh{c (nƣớc cất; đệm pH 1,2; đệm pH 4,5 v| đệm pH 6,8), để yên để chất rắn không tan nƣớc lắng xuống, gạn lấy phần đ{nh gi{ kích thƣớc giọt vi nhũ tƣơng hình th|nh phƣơng ph{p t{n xạ ánh sáng máy SZ-100 (Horiba, Nhật) Phân tích hình thái học C{c đặc điểm hình thái bên ngồi bột exemestane, giá mang rắn đƣợc chọn SE-SMEDDS đƣợc nghiên cứu sử dụng kính hiển vi điện tử quét (SEM, JSM-IT 100, Nhật) Khảo s{t độ hòa tan Nghiên cứu phóng thích exemestane in vitro đƣợc thực viên nang nguyên liệu exemestane, viên nang E-SMEDDS, viên nang SE-SMEDDS v| viên nén bao đƣờng Nghiên cứu Y học Aromasine 25 mg, sử dụng máy thử độ hòa tan Erweka DT 700 (Đức) 37oC ± 0,5oC, tốc độ giỏ quay 100 vòng/phút, mơi trƣờng thử độ hòa tan: 900 ml dung dịch dịch SLS 0,5 % SGFwe pH 1,2 ± 0,05 Sau khoảng thời gian: 0, 5, 10, 20, 30, 45, 60, 90, 120, 180 phút, ml môi trƣờng đƣợc lấy ra, đồng thời ml mơi trƣờng đƣợc hồn trả Nồng độ exemestane mẫu đƣợc x{c định phƣơng ph{p HPLC KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Thẩm định phƣơng ph{p HPLC định lƣợng exemestane Phƣơng ph{p HPLC định lƣợng exemestane t{ dƣợc, E-SMEDDS, SESMEDDS mẫu thử nghiệm độ hòa tan đạt yêu cầu tính tƣơng thích hệ thống, tính đặc hiệu, tính tuyến tính khoảng nồng độ 0,252 – 403,192 µg/ml với phƣơng trình tƣơng quan tuyến tính y = 68,317x với R2 = 0,9999; đạt độ lặp lại với RSD = 0,61% v| độ với độ phục hồi từ 98,01% - 101,71% Xây dựng công thức E-SMEDDS Độ tan exemestane t{ dược Hình 2: Độ tan exemestane t{ dược Độ tan exemestane loại dầu (Maisine 35-1, Capryol 90, Labrafac lipophile, Labrafac CC, dầu Gấc, Plurol oleique CC 497), chất diện hoạt (Labrasol, Cremophor RH 40, Chuyên Đề Dƣợc Cremophor EL, Tween 80) chất đồng diện hoạt (Transcutol P, Lutrol E-400) đƣợc trình bày Hình 319 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 Exemestane tan tốt c{c t{ dƣợc khảo s{t, cao nhiều lần nƣớc (0,08 mg/ml 37°C) Trong loại dầu khảo sát, exemestane tan tốt Capryol 90 Do đó, Capryol 90 đƣợc chọn làm pha dầu cho hệ E-SMEDDS Khảo sát lựa chọn chất diện hoạt Chất diện hoạt đƣợc chọn dựa khả nhũ hóa pha dầu Trong chất diện hoạt khảo sát, Labrasol có khả nhũ hóa dầu Capryol 90 nhất, tạo nhũ tƣơng thơ, Labrasol khơng đƣợc chọn Ba chất diện hoạt lại (Cremophor RH 40, Cremophor EL, Tween 80) đƣợc lựa chọn để tiếp tục khảo sát Khảo sát lựa chọn chất đồng diện hoạt Hình cho thấy giản đồ pha sử dụng Lutrol E-400 làm chất đồng diện hoạt có vùng vi nhũ tƣơng hẹp v| vùng tạo gel rộng so với giản đồ pha sử dụng Transcutol P làm chất đồng diện hoạt Do đó, transcutol P đƣợc chọn làm chất đồng diện hoạt cho cơng thức ESMEDDS Hình 3: Giản đồ pha nước, Capryol 90, chất diện hoạt (Cremophor EL, Cremophor RH 40, Tween 80)/chất đồng diện hoạt Lutrol E-400 Transcutol P với tỷ lệ S/CoS 3:1 Vùng chấm bi vùng tạo vi nhũ tương Vùng tô màu xám vùng tạo gel 320 Chuyên Đề Dƣợc Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 Nghiên cứu Y học Khảo sát lựa chọn công thức hệ SMEDDS (a) (b) (c) Hình 4: Giản đồ pha nước, Capryol 90, hỗn hợp chất diện hoạt/đồng diện hoạt: (a) Cremophor EL/Transcutol P tỉ lệ 4:1, (b) Cremophor EL/Transcutol P tỉ lệ 3:1, (c) Cremophor RH 40/Transcutol P tỉ lệ 4:1 Vùng chấm bi vùng tạo vi nhũ tương Vùng tô m|u x{m l| vùng tạo gel Capryol 90 có khả hòa tan exemestane cao có vai trò hòa tan exmestane cơng thức SMEDDS Do đó, cần chọn cơng thức có tỉ lệ Capryol 90 cao Từ giản đồ pha khảo sát, có giản đồ pha cho đƣợc cơng thức với tỉ lệ Capryol 90 cao (50% kl/kl) tạo vùng vi nhũ tƣơng rộng (Hình 4) Vì vậy, ba cơng thức đƣợc chọn để tiếp tục khảo sát CT1 (Capryol 90: Cremophor EL: Transcutol P tỉ lệ 50:40:10), CT2 (Capryol 90:Cremophor EL:Transcutol P tỉ lệ 50:37,5:12,5) CT3 (Capryol 90:Cremophor RH 40:Transcutol P tỉ lệ 50:40:10) Khả tải exemestane vào hệ SMEDDS Sau tải exemestane với tỉ lệ 65 mg/g Chuyên Đề Dƣợc vào hệ bl-SMEDDS đƣợc chọn (CT1, CT2 CT3) cơng thức CT3 cho hệ E-SMEDDS đục exemestane không tan hết Công thức CT1 CT2 cho hệ E-SMEDDS chất suốt v| đồng Ở tỉ lệ pha loãng 100 lần nƣớc cất, công thức CT1 v| CT2 cho nhũ tƣơng bền vững, khơng có tƣợng tách pha, kết tủa hoạt chất thời điểm sau pha loãng Tuy nhiên, vi nhũ tƣơng hình thành từ cơng thức CT1 cơng thức CT2 Vì vậy, chọn cơng thức CT1 cho hệ SMEDDS với tỷ lệ tải exemestane 65 mg/g Nhƣ vậy, công thức E-SMEDDS tối ƣu đƣợc chọn gồm exemestane/Capryol 90 /Cremophor EL/Transcutol P với tỉ lệ 6,10/46,95/37,56/9,39 (kl/kl/kl/kl) 321 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 Đ{nh gi{ tính chất E-SMEDDS Thời gian tự nhũ Hệ E-SMEDDS có khả tự nhũ, hình th|nh vi nhũ tƣơng suốt bền vững với thời gian tự nhũ trung bình l| 1,05 ± 0,09 phút (n=3) Phân bố kích thước tiểu phân zeta Dãy phân bố kích thƣớc tiểu ph}n vi nhũ tƣơng hình th|nh từ hệ E-SMEDDS sau pha lỗng 100 lần mơi trƣờng nƣớc cất đƣợc trình b|y Hình Vi nhũ tƣơng exemestane hình thành từ E-SMEDDS có kích thƣớc tiểu phân trung bình 66,6 nm, PDI 0,320 zeta -11,4 m/V Hình 5: Dãy phân bố kích thước tiểu phân vi nhũ tương hình th|nh từ E-SMEDDS Ảnh hưởng p hệ E-SMEDDS mơi trường pha lỗng Hình cho thấy hệ E-SMEDDS cho vi nhũ tƣơng có kích thƣớc ổn định môi trƣờng nƣớc cất pH 6,8 sau pha lỗng Khi pH mơi trƣờng pha lỗng thấp kích thƣớc tiểu phân trung bình lớn Điều đƣợc lý giải hấp phụ c{c ion tích điện dƣơng mơi trƣờng acid lên bề mặt tiểu ph}n tích điện âm vi nhũ tƣơng v| l|m tăng dần kích thƣớc vi nhũ tƣơng hình th|nh mơi trƣờng acid Nghiên cứu độ ổn định nhiệt động lực học cho thấy công thức E-SMEDDS bền sau thử nghiệm ly tâm thử nghiệm đơng – rã đơng 322 Hình 6: Ảnh hưởng pH mơi trường pha lỗng lên kích thước tiểu phân trung bình vi nhũ tương hình thành từ E-SMEDDS theo thời gian pha lỗng Chun Đề Dƣợc Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 Nghiên cứu Y học Xây dựng công thức hệ SE-SMEDDS trƣờng khác hệ SE-SMEDDS lớn Khảo sát lựa chọn giá mang hấp phụ hệ E-SMEDDS hệ E-SMEDDS (Hình 7) Vậy, việc hóa rắn hệ Khả hấp phụ E-SMEDDS giá kích thƣớc hạt vi nhũ tƣơng hình th|nh sau mang rắn đƣợc xếp giảm dần theo thứ tự pha lỗng c{c mơi trƣờng nƣớc cất; Florite R (4,744 g/g), CSD (2,71 g/g) Syloid 244 đệm pH 1,2; đệm pH 4,5 v| đệm pH 6,8 E-SMEDDS sử dụng gi{ mang Florite R l|m tăng FP (2,604 g/g) Vì vậy, Florite R đƣợc chọn làm gi{ mang để hóa rắn hệ E-SMEDDS Tỉ lệ Florite R/E-SMEDDS đƣợc chọn 1/3,2 (g/g) tỉ lệ cho bột SE-SMEDDS khô, tơi với tỉ lệ dùng ESMEDDS cao (n=3) Khảo sát lựa chọn t{ dược rã sử dụng cho viên nang SE-SMEDDS Khi không sử dụng t{ dƣợc rã, viên nang SESMEDDS có thời gian rã khoảng phút (n=3) Phối hợp thêm t{ dƣợc rã vào công thức viên nang SE-SMEDDS, thời gian rã viên đƣợc cải thiện Trong t{ dƣợc rã sử dụng, Vivastar® P tạo đƣợc viên có thời gian rã thấp Với tỉ lệ sử dụng 8%, Vivastar® P cho viên Hình 7: Kích thước tiểu phân trung bình vi nhũ tương hình th|nh từ E-SMEDDS SE-SMEDDS sau pha lỗng 100 lần c{c mơi trường khác (n=2) Phân tích hình thái học nang có thời gian rã phút Vì vậy, chọn tá Hình cho thấy exemestane có kích thƣớc dƣợc rã Vivastar® P với tỉ lệ sử dụng 4% (kl/kl) trung bình nhỏ 10 µm Florite R gồm hạt Nhƣ vậy, cơng thức SE-SMEDDS tối ƣu đƣợc hình cầu với bề mặt thơ nhám có nhiều lỗ nhỏ, chọn là: exemestane/Capryol 90 /Cremophor sâu, cho phép hấp phụ tốt chất lỏng SE- EL/Transcutol P/Florite R/Vivastar® P với tỉ lệ SMEDDS gồm hạt có bề mặt khơng 1,42/10,72/8,58/ 2,14/73,14/4 (kl/kl/kl/kl/kl/kl) lỗ s}u v| thơ nh{m so với Florite R Điều Đ{nh gi{ tính chất hệ SE-SMEDDS đƣợc giải thích E-SMEDDS đƣợc hấp phụ vào phía hạt Florite R qua Phân bố kích thước tiểu phân Kích thƣớc tiểu phân vi nhũ tƣơng hình lỗ nhỏ thành sau pha lỗng 100 lần mơi A B C Hình 8: Hình ảnh SEM (a) bột nguyên liệu exemestane; (b) Florite R (c) SE-SMEDDS Chuyên Đề Dƣợc 323 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 Khảo s{t độ hòa tan Kết khảo s{t độ hòa tan viên nang nguyên liệu exemestane, viên nang ESMEDDS, viên nang SE-SMEDDS viên nén bao đƣờng Aromasine môi trƣờng SLS 0,5 % SGFwe đƣợc trình bày Hình Hình 10 Hình 9: Độ hòa tan viên nang nguyên liệu exemestane, viên nang E-SMEDDS, viên nang SE-SMEDDS v| viên nén bao đường Aromasine mơi trường SLS 0,5% (n=6) Hình 10: Độ hòa tan viên nang nguyên liệu exemestane, viên nang E-SMEDDS, viên nang SE-SMEDDS v| viên nén bao đường Aromasine môi trường SGFwe (n=6) minh khả cải thiện độ hòa tan exemestane đƣợc tiếp tục nghiên cứu ứng dụng nâng cao sinh khả dụng hoạt chất exemestane BÀN LUẬN Viên nang E-SMEDDS SE-SMEDDS có khả cải thiện độ hòa tan exemestane so với viên nang nguyên liệu exemestane So với viên nén bao đƣờng Aromasine, viên nang ESMEDDS phóng thích exemestane nhanh mơi trƣờng SLS 0,5% v| mơi trƣờng SGFwe, viên nang SE-SMEDDS phóng thích exemestane nhanh môi trƣờng SGFwe v| tƣơng đƣơng môi trƣờng SLS 0,5% KẾT LUẬN Đề t|i x{c định độ tan exemestane dầu, chất diện hoạt, chất đồng diện hoạt khảo s{t v| thiết lập giản đồ pha với tỉ lệ t{ dƣợc khác Các kết đƣợc dùng tham khảo cho nghiên cứu sau Công thức E-SMEDDS SE-SMEDDS đƣợc xây dựng th|nh cơng Đ}y l| nghiên cứu thực hóa rắn hệ SMEDDS chứa exemestane với tỷ lệ tải exemestane 65 mg/g Hệ E-SMEDDS SE-SMEDDS đƣợc chứng 324 TÀI LIỆU THAM KHẢO Chintalapudi R, Murthy TE, Lakshmi KR, Manohar GG (2015) Formulation, optimization, and evaluation of selfemulsifying drug delivery systems of nevirapine Int J Pharm Investig, 5(4):205-13 Deeks ED, Scott LJ (2009) Exemestane: A Review of its Use in Postmenopausal Women with Breast Cancer Drugs, 69(7):889918 Li Z, Liu K, Sun P, Mei L, Hao T, Tian Y, Tang Z, Li L, Chen D (2013) Poly(D, L-lactide-co-glycolide)/montmorillonite nanoparticles for improved oral delivery of exemestane J Microencapsul, 30(5):432-40 Padia N, Shukla A, Shelat P (2015) Development and characterization of fenofibrate self-microemulsifying drug delivery system (SMEDDS) for bioavailability enhancement Bull Pharm Res, 5(2): 59-69 Yavuz B, Bilensoy E, Sumnu M (2007) Bioavailability file: exemestane FABAD J Pharm Sci, 32:79-89 Ngày nhận báo: 18/10/2017 Ngày phản biện nhận xét báo: 01/11/2017 Ng|y b|i b{o đăng: 15/03/2018 Chuyên Đề Dƣợc ... Vì vậy, mục tiêu nghiên cứu nhằm điều chế hóa rắn hệ vi tự nhũ chứa exemestane Nghiên cứu Y học Bƣớc sóng phát hiện: 247 nm Thời gian ph}n tích phút Phƣơng ph{p HPLC định lƣợng exemestane đƣợc... dụng đƣờng uống exemestane ĐẶT VẤN ĐỀ thấp(5) Hệ vi tự nhũ (SMEDDS) v| đƣợc Exemestane (Hình 1) thuốc ức chế chọn lọc nghiên cứu cải thiện khả hấp thu không hồi phục enzyme aromatase hệ thứ hoạt... giá mang hấp phụ hệ E-SMEDDS hệ E-SMEDDS (Hình 7) Vậy, vi c hóa rắn hệ Khả hấp phụ E-SMEDDS giá kích thƣớc hạt vi nhũ tƣơng hình th|nh sau mang rắn đƣợc xếp giảm dần theo thứ tự pha loãng c{c