Đặt vấn đề: Mặc dù đã có nhiều công trình nghiên cứu về bệnh sốt xuất huyết Dengue (SXHD) nhưng cũng có nhiều điều chưa sáng tỏ, trong đó có vai trò của các cytokin. Mục tiêu: Khảo sát nồng độ cytokine của trẻ SXHD điều trị tại Khoa Nhi, Bệnh viện Đa khoa Tiền Giang.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 Nghiên cứu Y học NỒNG ĐỘ CYTOKIN CỦA TRẺ SỐT XUẤT HUYẾT DENGUE ĐIỀU TRỊ TẠI KHOA NHI, BỆNH VIỆN ĐA KHOA TIỀN GIANG Trần Thanh Hải*, Tạ Văn Trầm** TÓM TẮT Đặt vấn đề: Mặc dù có nhiều cơng trình nghiên cứu bệnh sốt xuất huyết Dengue (SXHD) có nhiều điều chưa sáng tỏ, có vai trò cytokin Mục tiêu: Khảo sát nồng độ cytokine trẻ SXHD điều trị Khoa Nhi, Bệnh viện Đa khoa Tiền Giang Phương pháp: Mô tả cắt ngang Kết quả: Có 234 bệnh nhân đưa vào nghiên cứu kết ghi nhận: Có mối tương quan nồng độ IL-6 IL-4 với sốc sốt xuất huyết Dengue với p; OR; khoảng tin cậy 95% tương ứng 0,03;0,99; 0,980,99 0,03; 0,17; 0,35-0,88 Nồng độ IL-1β, IL-2, IL-4, IL-12, IL-13, TNF-α cao ngày sau giảm dần theo ngày sốt có ý nghĩa thống kê với p 0,02; 0,04; 0,006; 0,021; 0,049; 0,015 Kết luận: Cần có nghiên cứu khác với loại cytokin khác có nhiều thời điểm đo nồng độ cytokin Từ khóa: Sốt xuất huyết Dengue (SXHD), cytokin ABSTRACT CONCENTRATION OF CYTOKINES IN DENGUE HEMORRHAGIC FEVER IN CHILDREN OF TIEN GIANG GENERAL HOSPITAL Tran Thanh Hai, Ta Van Tram * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Supplement of Vol 22 - No 4- 2018: 55 – 60 Background: Although there have been many studies on Dengue hemorrhagic fever (DHF) patients but also many things unclear, including the role of cytokines Objectives: To survey the concentration of cytokines in DHF in children of Tien Giang General Hospital Methods: cross-sectional descriptive Results: 234 patients were studied and the results as: There was a correlation between IL-6 and IL-4 levels with Dengue shock syndrome with p; OR; 95% CI is 0.03, 0.99; 0.98-0.99 and 0.03; 0.17; 0.35-0.88 IL-1, IL-2, IL-5, IL-10, IL-12, IL-13, TNF-α , INF-γ did not correlate with dengue shock in children The IL-1β , IL-2, IL-4, IL-12, IL-13, TNF-α levels were statistically significantly decreased with p, spectively is 0.02; 0.04; 0.006; 0.021; 0.049; 0.015 Conclusions: Other studies with other types of cytokines and more time to measure cytokine levels are needed Keywords: Dengue hemorrhagic fever (DHF), cytokine người nhiễm Dengue dẫn đến khoảng 24.000 ĐẶT VẤN ĐỀ trường hợp tử vong Chẩn đoán lâm sàng Bệnh sốt xuất huyết Dengue (SXHD) điều trị SXHD TCYTTG chuẩn hóa vấn đề y tế quan trọng nước nhiệt đới, hoàn thiện dần phác đồ Tuy nhiên có Việt Nam Theo Tổ chức Y tế Thế nhiều trường hợp SXHD tử vong(6) Theo y giới (TCYTTG), năm, có khoảng 20 triệu văn, có 03 yếu tố liên quan đến độ nặng tử * Trường Cao đẳng Y tế Tiền Giang, Tác giả liên lạc: PGS.TS Tạ Văn Trầm, Chuyên Đề Nhi Khoa **Bệnh viện Đa khoa Tiền Giang ĐT: 0913 771 779, Email: tavantram@gmail.com 55 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 vong SXHD đáp ứng miễn dịch (hiện tượng ADE: antibody dependent enhancement), đặc điểm di truyền người bệnh đặc tính vi rút(10) Hiểu biết yếu tố liên quan góp phần quan trọng việc xử trí cải thiện điều trị, tiên lượng SXHD Một chế miễn dịch bệnh sinh khác cho nhiễm virus Dengue đề cập thời gian sau nhà nghiên cứu tìm cách chứng minh nhiễm virus Dengue gây đáp ứng miễn dịch Điều không làm suy yếu đáp ứng miễn dịch thải trừ virus mà tạo mức cytokin Nhiều nghiên cứu đáp ứng miễn dịch ký chủ đóng vai trò phát triển SXHD sốc SXHD, bao gồm đáp ứng miễn dịch qua trung gian tế bào, sản phẩm cytokin tế bào khác nhau, hoạt hóa lympho T dẫn đến hoạt hóa bổ thể sản xuất nhiều cytokin khác với hoạt hóa lympho T mức dẫn đến đáp ứng cytokin bệnh lý có liên quan đến bệnh nặng Nồng độ cytokin thụ thể hòa tan chúng bệnh nhân SXHD cao bệnh nhân sốt Dengue gợi ý vai trò số cytokin độ nặng bệnh Nhiều nghiên cứu ghi nhận vai trò cytokin q trình gia tăng tính thấm thành mạch xuất huyết(4) Từ nghiên cứu cho thấy dấu sinh học, đặc biệt cytokin cần nghiên cứu vấn đề mới, quan trọng lĩnh vực chẩn đoán, xử trí tiên lượng bệnh có khả gây tử vong ĐỐITƯỢNG-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU Thiết kế nghiên cứu Mô tả cắt ngang Dân số nghiên cứu Tất trẻ em chẩn đoán SXHD nhập Khoa Nhi, Bệnh viện Đa khoa Tiền Giang theo tiêu chuẩn Tổ chức Y tế Thế giới Hướng dẫn chẩn đoán điều trị SXHD Bộ Y tế; có RT-PCR NS1 ELISA dương tính; đồng ý gia đình Tiêu chí loại trừ Trẻ bị SXHD có kèm theo bệnh lý khác suy gan, suy thận, hội chứng thận hư, suy tim, tim bẩm sinh khơng đồng ý gia đình Cỡ mẫu Được xác định theo công thức ước lượng tỉ lệ Trong đó: Z: khoảng tin cậy = 97%; d: sai số chuẩn = 0,05; Z 1-α/2= 1,96; p: tần suất lý thuyết Theo nghiên cứu M Juffrie(4) từ mẫu huyết tương lúc nhập viện bệnh nhân SXHD, nồng độ IL-8 tăng cao 16,9% trường hợp (với nồng độ dao động 20-482 pg/ml trung bình 30 pg/ml), p=0,169 n = 1,962 x 0,169.0,831/0,0025 = 216 người Các bước thực Mỗi bệnh nhân có mẫu máu tĩnh mạch rút vào ngày nhập viện để xét nghiệm RTPCR NS1 ELISA để xác nhận tất trường hợp nhiễm bệnh SXHD Các trường hợp sau đo nồng độ cytokin Phát cytokin multiplex micro-bead immunoassay: xét nghiệm phát 10 loại cytokin: IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12, IL-13, IFNγ TNF-α Các xét nghiệm thực Đơn vị Nghiên cứu lâm sàng Đại học Oxford (OUCRU – Bệnh viện Bệnh Nhiệt đới TP Hồ Chí Minh) Các triệu chứng lâm sàng theo dõi ghi nhận ngày xuất viện Phân tích liệu Phần mềm SPSS 18.0 Tiêu chí chọn bệnh KẾT QUẢ Bệnh nhân điều trị Khoa Nhi Bệnh viện Đa khoa Tiền Giang chẩn đốn mắc SXHD Có 234 bệnh nhi xác nhận huyết học nhiễm vi rút Dengue (DENV) 56 Chuyên Đề Nhi Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 đo nồng độ cytokin, bao gồm IL-1β, IL-2, IL4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12, IL-13, TNF- α INF-γ Các kết ghi nhận sau: Bảng Đặc điểm dịch tễ bệnh lý Đặc điểm SXHD không sốc Độ nặng bệnh SXHD có sốc Ngày sốt bệnh Ngày ngày nhi nhập viện Ngày DENV-1 Phân bố bệnh nhi DENV-2 theo týp DENV DENV-3 Tổng cộng n 219 15 111 123 143 35 56 234 % 93,59 6,41 47,43 52,57 61,11 14,96 23,93 100 Trong 234 bệnh nhi đo nồng độ cytokin vào ngày nhập viện, ghi nhận kết sau: Nghiên cứu Y học nghiệm máu vào ngày ngày 2, sau nồng độ giảm dần bệnh nhi xét nghiệm vào ngày 3, khác biệt có ý nghĩa thống kê với p0,05 Ngược lại trung vị nồng độ IL-2, IL-12, IL-13 nhóm SXHD có sốc thấp nhóm SXHD khơng sốc; khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê với p>0,05 Các cytokin lại nhóm khảo sát khơng ghi nhận có khác biệt nồng độ gữa nhóm có sốc SXHD nhóm khơng sốc SXHD Bảng Kết phân tích hồi quy đơn biến mối liên quan nồng độ cytokin với tình trạng sốc SXHD Yếu tố IL-1β IL-2 IL-4 IL-5 IL-6 IL-10 IL-12 IL-13 TNF- α INF-γ OR 1,007 0,99 0,95 0,99 0,99 0,99 1,04 0,98 0,99 1,08 Giá trị p 0,95 0,58 0,66 0,60 0,03 0,3 0,67 0,49 0,50 0,78 Khoảng tin cậy 0,81 – 1,26 0,96 – 1,02 0,75 – 1,20 0,97 – 1,01 0,98 – 0,99 0,99 – 1,00 0,84 – 1,30 0,95 – 1,02 0,99 – 1,00 0,61 – 1,90 Tiếp tục phân tích hồi quy đơn biến mối liên quan nồng độ cytokin với tình trạng sốc SXHD, ghi nhận có khác biệt có ý nghĩa thống kê nồng độ IL-6 nhóm SXHD có sốc SXD khơng sốc Bảng Kết phân tích hồi quy đa biến mối liên quan nồng độ cytokin với tình trạng sốc SXHD Biến IL-1β IL-2 IL-4 IL-5 IL-6 IL-10 IL-12 IL-13 TNF- α INF-γ OR (Khoảng tin cậy) 1,93 (0,77 – 4,85) 1,05 (0,88 – 1,25) 0,17 (0,35 – 0,88) 0,99 (0,95 – 1,02) 0,99 (0,98 – 0,99) 0,99 (0,98 – 1,00) 1,87 (0,72 – 4,82) 0,95 (0,78 – 1,15) 0,99 (0,99 – 1,00) 1,70 (0,41 – 7,00) Giá trị p 0,16 0,57 0,03 0,56 0,03 0,19 0,19 0,61 0,58 0,45 BÀNLUẬN Nồng độ cytokin trẻ SXHD Kết nồng độ cytokin từ 234 bệnh nhi cho 58 thấy: IL-6, IL-10 TNF-α nhóm cytokin có nồng độ cao huyết bệnh nhi (đặc biệt IL-10 đạt giá trị cao 826,80 pg/ml) Ngược lại IL-1β, IL-4 INF-γ nhóm cytokin có nồng độ tương đối thấp Kết tương đồng với tác giả Priyadarshini, nghiên cứu 372 trường hợp thử nghiệm MAC-ELISA RT-PCR nhằm chẩn đoán xác định nhiễm vi rút Dengue ghi nhận: nồng độ IFN-γ cao sốt Dengue IL-6 IL-8 cao trường hợp SXHD (p