Bài viết trình bày việc xác định tỷ lệ đột biến gen EGFR và gen KRAS quyết định tính đáp ứng thuốc điều trị đích trên bệnh nhân UTPKTBN giai đoạn muộn, đánh giá hiệu quả điều trị erlotinib bước 1 trên các bệnh nhân UTPKTBN giai đoạn muộn có đột biến gen EGFR.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Nghiên cứu Y học XÁC ĐỊNH ĐỘT BIẾN GEN EGFR VÀ GEN KRAS QUYẾT ĐỊNH TÍNH ĐÁP ỨNG THUỐC TRONG ĐIỀU TRỊ BỆNH UNG THƯ PHỔI KHÔNG TẾ BÀO NHỎ Nguyễn Minh Hà*, Trần Vân Khánh**, Trần Huy Thịnh*** , Tạ Thành Văn*** TÓM TẮT Liệu pháp điều trị đích (LPĐTĐ) chứng minh có hiệu cho bệnh ung thư phổi khơng tế bào nhỏ (UTPKTBN), đặc biệt nhóm bệnh nhân có đột biến gen EGFR khơng có đột biến gen KRAS Mục tiêu: (1)Xác định tỷ lệ đột biến gen EGFR gen KRAS định tính đáp ứng thuốc điều trị đích bệnh nhân UTPKTBN giai đoạn muộn; (2) Đánh giá hiệu điều trị erlotinib bước bệnh nhân UTPKTBN giai đoạn muộn có đột biến gen EGFR Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Xác định tỷ lệ đột biến gen EGFR gen KRAS 181 bệnh nhân UTPKTBN tiến cứu theo dõi hiệu điều trị erlotinib bước 61 bệnh nhân có đột biến gen EGFR Kết quả: Tỷ lệ đột biến gen EGFR gen KRAS 58,6% 15,5%; 2,2% bệnh nhân mang đột biến gen EGFR KRAS Phát đột biến gen EGFR Điều trị erlotinib bước cho tỷ lệ đáp ứng 63,9%, trung vị thời gian sống thêm không bệnh tiến triển 9,4 tháng sống thêm toàn thể 15,5 tháng Kết luận: Cần xét nghiệm đột biến gen EGFR KRAS để lựa chọn bệnh nhân phù hợp cho liệu pháp điều trị đích erlotinib Từ khóa: gen EGFR, gen KRAS, liệu pháp điều trị đích, ung thư phổi khơng tế bào nhỏ ABSTRACT DETECTION OF EGFR AND KRAS MUTATIONS RELATED TO RESPONSIVENESS OF TARGETED THERAPY IN NON-SMALL CELL LUNG CANCER Nguyen Minh Ha, Tran Van Khanh, Tran Huy Thinh, Ta Thanh Van * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Supplement of Vol 20 - No - 2016: 241 - 247 Targeted therapy has been shown to be effective for non-small cell lung cancer (NSCLC), especially in patients with EGFR mutation and no KRAS mutation Purpose: (1) Determine the frequencies of EGFR and KRAS mutations related to the responsiveness of targeted therapy; and (2) Assess the effectiveness of first-line erlotinib in advanced NSCLC patients with EGFR mutations Methods: Determine the frequencies of EGFR and KRAS mutations in 181 patients and prospective longitudinal follow-up the responsiveness of erlotinib in 61 EGFR-mutated patients Results: The occurrence of EGFR and KRAS mutations was respectively 58.6% and 15.5%; 2.2% of patients with concurrent EGFR and KRAS mutations Detection of new EGFR mutations The response rate was 63.9%, the median progressive-free survival was 9.4 months and median overall survival was 15.5 months Conclusions: Testing of EGFR and KRAS mutations is recommended for selecting appropriate patients for *Bộ mơn Hóa Sinh-Sinh học phân tử, Trường ĐH Y khoa Phạm Ngọc Thạch TP.HCM ** Bộ môn Bệnh học phân tử - Trung tâm Nghiên cứu Gen-Protein, Trường ĐH Y Hà Nội *** Bộ mơn Hóa Sinh - Trung tâm Nghiên cứu Gen-Protein, Trường ĐH Y Hà Nội Tác giả liên lạc: TS.BS.Nguyễn Minh Hà ĐT:0989212382 Email: nguyenminhha@pnt.edu.vn Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Trường Đại Học Y Khoa Phạm Ngọc Thạch năm 2016 241 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 erlotinib treatment Key words: EGFR gene, KRAS gene, targeted therapy, non-small cell lung cancer ĐẶT VẤN ĐỀ Phương pháp nghiên cứu Liệu pháp điều trị đích (LPĐTĐ) bệnh ung thư liệu pháp mới, chứng minh có hiệu tốt cho bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ (UTPKTBN), đặc biệt nhóm có đột biến gen EGFR khơng có đột biến gen KRAS Nhiều nghiên cứu chứng minh mối liên quan chặt chẽ tình trạng đột biến gen mức độ đáp ứng thuốc khối u LPĐTĐ(13) Tại Việt Nam, nhu cầu LPĐTĐ cho bệnh nhân UTPKTBN ngày tăng, chưa có nghiên cứu khảo sát đồng thời tỷ lệ đột biến gen EGFR KRAS số lượng lớn bệnh nhân chưa có nghiên cứu hiệu điều trị đích dựa tình trạng đột biến hai gen Từ thực tế đó, đề tài tiến hành với hai mục tiêu: (1) Xác định tỷ lệ đột biến gen EGFR gen KRAS định tính đáp ứng thuốc điều trị đích bệnh nhân UTPKTBN giai đoạn muộn; (2) Đánh giá hiệu điều trị erlotinib bước bệnh nhân UTPKTBN giai đoạn muộn có đột biến gen EGFR Xác định đột biến gen EGFR KRAS Mẫu mô sinh thiết đúc nến lựa chọn vùng tập trung tế bào ung thư Xử lý mẫu xylene tách chiết DNA phenol/chloroform Thực song song hai kỹ thuật giải trình tự gen Scorpion ARMS để xác định đột biến exon 18-21 gen EGFR codon 12-13 exon gen KRAS, Trung Tâm Nghiên Cứu Gen-Protein, Trường ĐH Y Hà Nội Kỹ thuật giải trình tự gen: sử dụng BigDye Kit (Applied Biosystems), đọc máy giải trình tự gen tự động ABI3700, đối chiếu với trình tự tham chiếu gen EGFR KRAS GenBank (EGFR: NG_007726; KRAS: NG_007524), phân tích theo phần mềm Seqscape (Applied Biosystems) Kỹ thuật Scorpion ARMS: sử dụng EGFR PCR kit KRAS PCR kit (Qiagen) phát 29 loại đột biến gen EGFR loại đột biến gen KRAS phản ứng real-time PCR, độ nhạy alen đột biến/100 alen ĐỐITƯỢNGPHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU Đánh giá hiệu điều trị erlotinib bước Xác định tỷ lệ đáp ứng thực thể ORR (theo tiêu chuẩn RECIST v1.1(2)), tỷ lệ đáp ứng toàn trạng (theo số Karnofsky(5)) tháng Ghi nhận thời gian sống thêm bệnh không tiến triển (PFS) thời gian sống thêm toàn thể (OS) bệnh nhân Ghi nhận phân độ tác dụng phụ (nếu có) erlotinib theo tiêu chuẩn Đánh giá độc tính hóa chất Viện Ung thư Quốc gia Hoa Kỳ (CTCAE v3.0)(8) Đối tượng nghiên cứu Gồm nhóm: (1) 181 bệnh nhân xác định đột biến gen EGFR gen KRAS bệnh nhân UTPKTBN giai đoạn IIIB/IV chẩn đốn, có mơ bệnh học ung thư biểu mô tuyến biểu mô vảy biểu mô tế bào lớn; (2) 61 bệnh nhân điều trị erlotinib bước 1, lựa chọn từ 181 bệnh nhân xét nghiệm đột biến gen Các bệnh nhân không mang đột biến gen KRAS, mang đột biến EGFR làm tăng tính đáp ứng thuốc điều trị đích Thiết kế nghiên cứu Mơ tả (xác định đột biến gen) tiến cứu (đánh giá hiệu điều trị) Thời gian nghiên cứu: từ 01/01/2012 đến hết 30/03/2014 242 Xử lý số liệu Quản lý phân tích số liệu phần mềm SPSS 21.0 So sánh khác biệt nhóm test Chi bình phương Phân tích thời gian sống thêm phương pháp KaplanMeier với test Logrank so sánh thời gian sống thêm trung bình nhóm (với p