Nghiên cứu sự ảnh hưởng của hoạt chất sulforaphane (1-isothiocyanato-4-[methylsulfinyl]- butane), một loại isothiocyanate tự nhiên được tìm thấy trong các loại họ rau cải như bông cải xanh, cải Brussels, súp lơ, bắp cải tác động hoạt hóa con đường tín hiệu eNOS trên tế bào nội mô mạch máu.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 Nghiên cứu Y học SULFORAPHANE, THÀNH PHẦN ISOTHIOCYANATE CHÍNH CĨ TRONG BƠNG CẢI XANH, KÍCH HOẠT SỰ SẢN XUẤT NITRIC OXIDE THƠNG QUA CON ĐƯỜNG TÍN HIỆU SRC, AKT VÀ ENOS TRÊN TẾ BÀO NỘI MƠ MẠCH MÁU Phạm Ngọc Khơi* TĨM TẮT Đặt vấn đề: Bệnh lý xơ vữa động mạch nguyên nhân hàng đầu dẫn đến tử vong nhiều quốc gia phát triển giới Trong bệnh lý xơ vữa động mạch, trương lực mạch máu phụ thuộc vào tế bào nội mô bị suy yếu giãn mạch kiện quan trọng endothelial nitric oxide synthase (eNOS) có chức điều hòa sinh lý mạch máu Bên cạnh đó, việc nghiên cứu hợp chất thiên nhiên có nguồn gốc từ thực vật chứng minh có vai trò ngăn ngừa hiệu mảng xơ vữa động mạch giúp bảo vệ thành mạch Mục tiêu: Nghiên cứu ảnh hưởng hoạt chất sulforaphane (1-isothiocyanato-4-[methylsulfinyl]butane), loại isothiocyanate tự nhiên tìm thấy loại họ rau cải cải xanh, cải Brussels, súp lơ, bắp cải tác động hoạt hóa đường tín hiệu eNOS tế bào nội mơ mạch máu Vật liệu phương pháp: Tác dụng sulforaphane lên phosphoryl hóa biểu eNOS tế bào nội mô ECV304 EA.hy926 nghiên cứu Kết quả: Sulforaphane làm tăng phosphoryl eNOS sản xuất nitric oxide (NO) theo liều lượng thời gian thử thuốc thông qua việc ức chế PP2 (chất ức chế hoạt hóa Src kinase) LY294002 (chất ức chế hoạt hóa Akt) Kết luận: Sulforaphane hoạt hóa eNOS thơng qua đường tín hiệu nội bào Src Akt Các kết cho thấy sulforaphane có hoạt động chống xơ vữa động mạch thông qua hoạt hóa biểu eNOS tế bào nội mơ mạch máu Từ khóa: Akt, eNOS, NO, Src, sulforaphane, xơ vữa động mạch ABSTRACT SULFORAPHANE, A BROCCOLI ISOTHIOCYANATE, STIMULATES NO PRODUCTION VIA SRC, AKT AND ENOS IN HUMAN ENDOTHELIAL CELLS Pham Ngoc Khoi * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Supplement Vol 22 - No 3- 2018: 391- 399 Introduction: Atherosclerosis is currently the leading factor of death in developed countries It is now regarded as the underlying pathology of cardiovascular diseases, such as peripheral vascular disease, stroke and coronary heart disease In atherosclerosis, the impaired endothelium-dependent vascular tone and vasodilatation are key events Endothelial nitric oxide synthase (eNOS) has important regulatory functions in vascular physiology In addition, these important health issues lead researchers to investigate new approaches to prevent and treat atherosclerosis Good candidates are the phytochemical compounds that have been extensively studied in the field Several agents have been proposed to have chemo preventive roles in atherosclerosis Objective: Isothiocyanates are found in cruciferous vegetables such as broccoli, Brussels sprouts, cauliflower, and cabbage Sulforaphane is an isothiocyanate found in cruciferous vegetables and is especially high in broccoli *Bộ môn Mô Phôi - Di truyền, Đại học Y khoa Phạm Ngọc Thạch, TP.HCM Tác giả liên lạc: TS Phạm Ngọc Khôi, ĐT: 0909097802, Email: pnkhoi@pnt.edu.vn Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Trường Đại Học Y Khoa Phạm Ngọc Thạch năm 2018 391 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 and broccoli sprouts via regulating eNOS in endothelial cells Materials and methods: Herein, the effect of sulforaphane on eNOS phosphorylation in human endothelial ECV304 and EA.hy926 cells were investigated Results: Sulforaphane increased the phosphorylation of eNOS and nitric oxide (NO) production in a doseand time-dependent manner in endothelial cells These sulforaphane-induced eNOS phosphorylation effects were partially suppressed by PP2 (Src kinase inhibitor) and LY294002 (Akt inhibitor) Conclusion: The aim of this study is to test whether sulforaphane, a potent inducer of antioxidant enzymes present in cruciferous vegetables, has enhanced the phosphorylation of Src and Akt activities The above results suggest that sulforaphane may have anti-atherosclerotic activities via regulating eNOS in endothelial cells Keyword: Akt, atherosclerosis, eNOS, NO, Src, sulforaphane buộc nhà nghiên cứu phải điều MỞ ĐẦU tra cách tiếp cận để ngăn ngừa Hiện nay, bệnh lý xơ vữa động mạch điều trị bệnh xơ vữa động mạch Ứng cử viên tốt (atherosclerosis) yếu tố hàng đầu gây tử vong hợp chất thiên nhiên có nguồn gốc từ nước phát triển(2), xem bệnh lý thực vật nghiên cứu rộng rãi lĩnh bệnh tim mạch, chẳng hạn vực này(9,21) Một số hoạt chất sinh học bệnh lý mạch máu ngoại biên, đột quỵ hay bệnh chứng minh có vai trò ngăn ngừa hiệu lý mạch vành Xơ vữa động mạch bệnh mảng xơ vữa động mạch Trong nghiên cứu tích tụ chất béo thành động mạch khiến động dịch tễ học gần cho thấy loại trái tươi mạch bị xơ cứng nhỏ hẹp bình thường, rau có vai trò bảo vệ hệ tim mạch tốt bệnh xảy vùng ví dụ isothiocyanate Isothiocyanates thể ngun nhân gây đột quỵ (rối tìm thấy loại họ rau cải cải loạn tuần hoàn não), đau tim thiểu xanh, cải Brussels, súp lơ, bắp cải Sulforaphane tuần hoàn cẳng chân(14) Xơ vữa động mạch là thành phần isothiocyanate tìm loại bệnh có hệ thống gây tổn thương thấy loại rau họ cải đặc biệt cao động mạch lớn trung bình thể Xơ vữa bơng cải xanh súp lơ xanh Các phát động mạch thường gây hai biến chứng chủ yếu gần cho thấy sulforaphane co thắt mạch huyết khối động mạch, làm giảm nguy nhiều loại ung động mạch tim động mạch não(12) Bệnh lý thư(3), giúp điều trị bệnh béo phì tiểu xơ vữa động mạch phức tạp, có liên quan đến đường(15), chống oxy hóa, giảm tăng huyết áp nhiều yếu tố cấu trúc nên thành động mạch, tiểu viêm tuần hoàn mạch máu(20) cầu, bạch cầu chí tế bào tham gia Bên cạnh đó, nghiên cứu gần phản ứng viêm, chẳng hạn bạch cầu mặt bệnh học phân tử xơ vữa động mạch mono đại thực bào(1) Trong đó, tế bào nội mơ chứng minh có liên quan trực tiếp đến biểu giữ vai trò quan trọng nằm giao diện eNOS, tiền chất việc sản xuất hợp máu thành mạch, đóng vai trò chất NO (nitric oxide)(5,6,19) NO có ảnh hưởng rõ việc kiểm sốt trương lực mạch máu cân rệt lên mở rộng mạch máu để giúp nội môi, đặc biệt việc xác định biểu tăng dòng chảy máu, đưa oxy chất gen tạo nên mảng xơ vữa động dinh dưỡng vào tế bào cơ, điều khiển lưu lượng mạch gen chống lại mảng xơ vữa máu đến phần thể Chính nhờ tác động mạch(16) động NO mà việc hình thành mảng bám Đối với bệnh lý ảnh hưởng đến sức thành động mạch chất béo khỏe nghiêm trọng bệnh xơ vữa động mạch cholesterol xấu giảm thiểu, từ ngăn 392 Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Trường Đại Học Y Khoa Phạm Ngọc Thạch năm 2018 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 chặn nguy mắc bệnh tim mạch thể người NO thúc đẩy giãn nở lành mạnh tĩnh mạch động mạch nên máu di chuyển khắp thể Thêm vào đó, ngăn cản tế bào hồng cầu dính lại với nhau, ngăn chặn hình thành tắc nghẽn cục máu đơng Cơ thể cách tự nhiên tạo NO nội mạc lót thành mạch máu Tuy nhiên, giai đoạn đầu bệnh động mạch, phần nội mạc lót bị hư hỏng, chúng không sản xuất NO, làm cho mạch máu dễ bị viêm nhiễm yếu tố tiêu cực khác(8,10) MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Thử nghiệm MTT Dùng để đánh giá khả gây độc tế bào tác nhân nghiên cứu Phương pháp dựa hoạt động enzyme dehydrogenase ty thể tế bào sống Tế bào nuôi đĩa 96 giếng Sau ủ 24 giờ, tế bào xử lý với thuốc nồng độ khác 48 Sau đó, dung dịch MTT 0,5 mg/ml isopropanol:HCl (1:1) thêm vào Số lượng tinh thể formazan tạo thành đánh giá phương pháp đo mật độ quang OD bước sóng 570 nm, phản ánh số lượng tế bào Vì thế, mục đích nghiên cứu để khảo sát tác động chống xơ vữa động mạch sulforaphane hai dòng tế bào nội mô mạch máu nhằm xác định chế trình chống xơ vữa động mạch sulforaphane tạo sản xuất hợp chất NO thơng qua đường tín hiệu nội bào Src/Akt/eNOS VẬTLIỆU-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU Hóa chất Sulforaphane Nghiên cứu Y học (1-isothiocyanato-4- [methylsulfinyl]-butane) hóa chất cần thiết sử dụng nghiên cứu cung cấp từ hãng Sigma-Aldrich (Missouri, Hoa Kỳ) Kháng thể dùng thử nghiệm biểu protein cung cấp từ hãng Cell Signaling Technology (Beverly, MA, Hoa Kỳ) sống dịch nuôi cấy(17) Đo sản xuất nitric oxide (NO) Sự sản xuất NO tế bào đo cách sử dụng probe 5,6-diaminofluorescein diacetate (DAF-2DA, Molecular Probes, Eugene, OR, Hoa Kỳ) theo nghiên cứu mơ tả trước (7,11) Western blot Kháng thể eNOS, phospho-eNOS, Akt, phospho-Akt, phospho-Src β-actin (chứng nội tại) (Cell Signaling Technology, Beverly, MA) sử dụng nghiên cứu với tỷ lệ pha loãng 1:1000 phát dựa vào kit ECL (Amersham, Franklin Lakes, NJ, Hoa Kỳ) Xử lý thống kê Số liệu hiển thị thống kê dạng trung bình ±SD thí nghiệm lặp lại Nuôi cấy tế bào nội mô mạch máu ba lần riêng biệt cho thí nghiệm Sự khác Hai dòng tế bào nội mô mạch máu người biệt tập hợp liệu xác định kiểm ECV304 EA.hy926 cung cấp từ định Student's t-test Sự khác biệt mô American Type Culture Collection (ATCC) tả với P < 0.05 (Manassas, VA, Hoa Kỳ) nuôi cấy môi trường Dulbecco’s modified Eagle’s medium (DMEM) có bổ sung thêm 10% huyết thai bò (fetal bovine serum, FBS) 1% penicillin-streptomycin nhiệt độ 37oC tủ cấy với 5% CO2 KẾT QUẢ Sự ảnh hưởng sulforaphane lên khả sống tế bào nội mô ECV304 Tế bào nội mô ECV304 ủ với hoạt chất sulforaphane (0-100 μM) (hình 1A) vòng Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Trường Đại Học Y Khoa Phạm Ngọc Thạch năm 2018 393 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 24 để khảo sát hoạt tính gây độc tế bào Sau tế bào khoảng 30% so với đối chứng âm Vì thế, ủ, thử nghiệm MTT thực Kết nghiên cứu sử dụng nồng cho thấy sulforaphane (0-50 μM) không ảnh độ tối đa cho phép thử nghiệm 50 μM hưởng đến tăng trưởng hay gây độc cho tế sulforaphane Thí nghiệm lặp lại lần với bào nội mơ (hình 1B) Tuy nhiên nồng độ 100 ±SD μM cho thấy sulforaphane ức chế tăng trưởng A B Hình 1: Sự ảnh hưởng sulforaphane lên khả sống tế bào nội mô ECV304 Sulforaphane kích thích sản xuất NO dòng tế bào nội mơ ECV304 EA.hy926 quang (hình 2A 2B) Để kiểm tra đường Khi tế bào nội mô ECV304 EA.hy926 chất ức chế eNOS L-NAME (100 μM) xử lý với sulforaphane (0-50 μM) cho thấy tăng cho thấy khả ức chế sản xuất NO, điều sản xuất hợp chất NO xử lý số liệu chứng tỏ vai trò eNOS điều hòa thơng qua máy đọc kết cường độ huỳnh sản xuất NO (hình 2C) A tín hiệu sản xuất NO, chúng tơi sử dụng B C Hình 2: Sulforaphane kích thích sản xuất NO dòng tế bào nội mơ ECV304 EA.hy926 394 Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Trường Đại Học Y Khoa Phạm Ngọc Thạch năm 2018 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 Như vậy, đường truyền tin ban đầu là: sulforaphane → eNOS → NO → chống xơ vữa động mạch Thí nghiệm lặp lại lần với ± SD Sulforaphane hoạt hóa biểu eNOS dòng tế bào nội mô ECV304 EA.hy926 Khi tế bào nội mô ECV304 EA.hy926 xử lý với thay đổi sulforaphane theo liều lượng (0-50 μM, 120 phút) (hình 3A 3C) A B C D Nghiên cứu Y học theo thời gian (0-120 phút, 50 μM) (hình 3B 3D) cho thấy hoạt hóa phospho-eNOS để giúp khẳng định giả thiết ban đầu đường truyền tin: sulforaphane → eNOS → NO → chống xơ vữa động mạch Kết cho thấy hàm lượng 50 μM xử lý sulforaphane 120 phút cho kết hoạt hóa phospho-eNOS tối ưu hai dòng tế bào nội mô mạch máu sử dụng nghiên cứu Hình 3: Sulforaphane hoạt hóa biểu eNOS dòng tế bào nội mơ ECV304 EA.hy926 EA.hy926 xử lý với thay đổi Sulforaphane hoạt hóa biểu Akt sulforaphane theo liều lượng (0-50 μM, 120 phút) dòng tế bào nội mơ ECV304 (hình 4A 4C) theo thời gian (0-120 phút, 50 EA.hy926 μM) (hình 4B 4D) cho thấy hoạt hóa Tiếp tục tìm hiểu đường truyền tin tế phospho-Akt bào nghiên cứu này, tế bào nội mô ECV304 A B C D E F Hình 4: Sulforaphane hoạt hóa biểu Akt dòng tế bào nội mô ECV304 EA.hy926 Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Trường Đại Học Y Khoa Phạm Ngọc Thạch năm 2018 395 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 Để kiểm tra đường tín hiệu eNOS, xử lý với thay đổi sulforaphane theo liều sử dụng chất ức chế Akt lượng (0-50 μM, 120 phút) (hình 5A 5C) LY294002 (10 μM) cho thấy khả ức theo thời gian (0-120 phút, 50 μM) (hình 5B chế phospho-eNOS sản xuất NO (hình 4E 5D) cho thấy hoạt hóa phospho-Src Để 4F) Như vậy, đường truyền tin đến lúc kiểm tra đường tín hiệu Akt eNOS, là: sulforaphane → Akt → eNOS → NO lại tiếp tục sử dụng chất ức chế Src → chống xơ vữa động mạch Thí nghiệm PP2 (10 μM) cho thấy khả ức chế lặp lại lần với ±SD phospho-Akt phospho-eNOS sản xuất NO Sulforaphane hoạt hóa biểu Src dòng tế bào nội mơ ECV304 EA.hy926 (hình 5E 5F) Như vậy, đường truyền tin Tương tự cách tiến hành nghiên cứu chống xơ vữa động mạch Thí nghiệm lặp cuối nghiên cứu kết luận là: sulforaphane → Src → Akt → eNOS → NO → lại lần với ±SD hình 4, tế bào nội mơ ECV304 EA.hy926 A B C D E F Hình 5: Sulforaphane hoạt hóa biểu Src dòng tế bào nội mơ ECV304 EA.hy926 396 Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Trường Đại Học Y Khoa Phạm Ngọc Thạch năm 2018 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 Nghiên cứu Y học Hình 6: Sulforaphane kích thích sản xuất NO giúp chống xơ vữa động mạch thơng qua đường tín hiệu hoạt hóa Src/Akt/eNOS BÀN LUẬN Xơ vữa động mạch bệnh lý thường xuất sớm, tiến triển lặng lẽ phát lộ dấu hiệu động mạch vành hay động mạch não Có nhiều yếu tố gây bệnh tăng huyết áp, đái tháo đường, tăng mỡ máu, bệnh van tim, tim, thiếu máu não cục tạm thời, đột quỵ não(4) Đặc biệt tăng huyết áp đái tháo đường gây đột quỵ kiểu nhồi máu não dạng lỗ khuyết (các ổ tế bào não bị hủy hoại thiếu máu ni dưỡng) thối hóa hyalin mạch máu nhỏ Nghiện thuốc lá, thuốc lào làm tăng nguy xơ vữa động mạch đột quỵ não Xơ vữa động mạch thường gây hai biến chứng chủ yếu co thắt chế cầm máu tế bào trơn (đặc biệt trơn mạch máu), neuron hệ thống dày ruột Do vậy, NO tham gia hầu hết trình sống tỉnh thức, tiêu hóa, chức sinh dục, cảm giác đau, cảm giác hài lòng, gợi kí ức giấc ngủ Quan trọng cả, cách thức hoạt động định đến trình lão hóa Nó gần đóng vai trò quan trọng trường hợp chết bệnh tim mạch, đột quỵ, tiểu đường ung thư Các triển vọng khả kiểm sốt khả NO mang lại kì vọng cho khả nâng cao chất lượng sống người tương lai(13,16,18,22) Sulforaphane phân tử mạch huyết khối động mạch, động nhóm isothiocyanate hợp chất sulfur hữu mạch tim động mạch não Tùy theo vị trí Nó thể đặc tính chống ung thư kháng đoạn động mạch bị xơ vữa mà có khuẩn mơ hình thực nghiệm Nồng độ biểu lâm sàng khác cao sulforaphane xác định NO phân tử tín hiệu phát thập kỷ 1980 hệ thống sinh học thể người Nó đóng vai trò quan trọng mầm cải xanh Trong nghiên cứu tăng hàm lượng thời gian xử lý sulforaphane lên dòng tế bào nội mơ cho Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Trường Đại Học Y Khoa Phạm Ngọc Thạch năm 2018 397 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 thấy gia tăng sản xuất hợp chất NO thông qua TÀI LIỆU THAM KHẢO hoạt hóa phân tử eNOS, đặc biệt nồng độ 50 μM thời gian 120 phút cho kết tối ưu Ngồi thơng qua việc sử dụng chất ức chế đặc hiệu PP2, LY, L-NAME nghiên cứu chứng minh đường tín hiệu tế bào mà sulforaphane hoạt hóa tế bào nội mô Src → Akt → eNOS → NO Từ điểm mạnh nghiên cứu chứng minh triển vọng phát triển sản phẩm chứa hoạt chất sulforaphane cải xanh dùng công nghệ dược phẩm thực phẩm chức lớn, việc phòng chống xơ vữa động mạch, nguyên nhân hàng đầu dẫn đến tử vong nhiều quốc gia phát triển giới KẾT LUẬN Trong nghiên cứu này, lần đầu tiên, vai trò sulforaphane việc kích hoạt biểu eNOS chứng minh mà hiệu làm gia tăng sản xuất NO giúp bảo vệ thành mạch bệnh lý xơ vữa động mạch 10 thực nhiều dòng tế bào nội mơ mạch máu người Nghiên cứu 11 kết luận đường truyền tin sulforaphane ức chế xơ vữa động mạch là: sulforaphane → Src → Akt → eNOS → NO → 12 chống xơ vữa động mạch (hình 6) Do đó, bơng cải xanh giàu sulforaphane hứa hẹn đem đến 13 tiềm điều trị xơ vữa động mạch tương lai Lời cảm ơn: Chúng biết ơn GS.TS Young Do Jung (Bộ mơn Hóa Sinh, Khoa Y, Đại học Quốc gia Chonnam, Gwangju, Hàn Quốc) cố vấn khoa học, giúp đỡ trang thiết bị thực nghiên cứu Nghiên cứu tài trợ từ Chương trình nghiên cứu khoa học Bộ Giáo dục, Khoa học Công nghệ Hàn Quốc (2010-0009910) từ Trung tâm Nghiên cứu Y học (2011-0030731) Tổ chức Khoa học Công nghệ Hàn Quốc 14 15 Chatterjee A, Black SM, Catravas JD (2008) Endothelial nitric oxide (NO) and its pathophysiologic regulation Vascul Pharmacol., 49: 134 - 140 Chi Z, Melendez AJ (2007) Role of cell adhesion molecules and immune-cell migration in the initiation, onset and development of atherosclerosis Cell Adh Migr., 1: 171 - 175 Clarke JD, Dashwood RH, Ho E (2008) Multi-targeted prevention of cancer by sulforaphane Cancer Lett., 269: 291 - 304 Feingold KR, Grunfeld C (2016) Effect of inflammation on HDL structure and function Curr Opin Lipidol., 27: 521 530 Fleming I (2010) Molecular mechanisms underlying the activation of eNOS Pflugers Arch., 459: 793 - 806 Fleming I, Busse R (2003) Molecular mechanisms involved in the regulation of the endothelial nitric oxide synthase Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol., 284: R1 - 12 Formoso G, Chen H, Kim JA, Montagnani M, Consoli A, Quon MJ (2006) Dehydroepiandrosterone mimics acute actions of insulin to stimulate production of both nitric oxide and endothelin via distinct phosphatidylinositol 3-kinase- and mitogen-activated protein kinase-dependent pathways in vascular endothelium Mol Endocrinol., 20: 1153 - 1163 Forstermann U, Sessa WC (2012) Nitric oxide synthases: regulation and function Eur Heart J., 33: 829 - 837, 837a 837d He XW, Yu D, Li WL, Zheng Z, Lv CL, Li C, Liu P, Xu CQ, Hu XF, Jin XP (2016) Anti-atherosclerotic potential of baicalin mediated by promoting cholesterol efflux from macrophages via the PPARγ-LXRα-ABCA1/ABCG1 pathway Biomed Pharmacother., 83: 257 - 264 Lee E (2016) Effects of nitric oxide on carotid intima media thickness: a pilot study Altern Ther Health Med., 2: 32 - 34 Leikert JF, Rathel TR, Muller C, Vollmar AM, Dirsch VM (2001) Reliable in vitro measurement of nitric oxide released from endothelial cells using low concentrations of the fluorescent probe 4,5-diaminofluorescein FEBS Lett., 506: 131 - 134 Munnur RK, Nerlekar N, Wong DT (2016) Imaging of coronary atherosclerosis in various susceptible groups Cardiovasc Diagn Ther., 6: 382 - 395 Napoli C, de Nigris F, Williams-Ignarro S, Pignalosa O, Sica V, Ignarro LJ (2006) Nitric oxide and atherosclerosis: an update Nitric Oxide, 15: 265 - 279 Otsuka F, Yasuda S, Noguchi T, Ishibashi-Ueda H (2016) Pathology of coronary atherosclerosis and thrombosis Cardiovasc Diagn Ther 6: 396 - 408 Riboldi BP, Hansen F, Moreira JD, Souza DG, de Assis AM, Brum LM, Perry ML, Souza DO (2013) Chronic sulforaphane oral treatment accentuates blood glucose impairment and may affect GLUT3 expression in the cerebral cortex and hypothalamus of rats fed with a highly palatable diet Food Funct., 4: 1271 - 1276 398 Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Trường Đại Học Y Khoa Phạm Ngọc Thạch năm 2018 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số * 2018 16 17 18 19 20 Sessa WC (2005) Regulation of endothelial derived nitric oxide in health and disease Mem Inst Oswaldo Cruz., 100: 15 - 18 Stockert JC, Blázquez-Castro A, Cañete M, Horobin RW, Villanueva A (2012) MTT assay for cell viability: intracellular localization of the formazan product is in lipid droplets Acta Histochem., 114: 785 - 796 Su Y, Liu XM, Sun YM, Jin HB, Fu R, Wang YY, Wu Y, Luan Y (2008) The relationship between endothelial dysfunction and oxidative stress in diabetes and prediabetes Int J Clin Pract., 62: 877 - 882 Victorio JA, Fontes MT, Rossoni LV, Davel AP (2016) Different anti-contractile function and nitric oxide production of thoracic and abdominal perivascular adipose tissues Front Physiol 7: 295, eCollection 2016 Wu L, Noyan Ashraf MH, Facci M, Wang R, Paterson PG, Ferrie A, Juurlink BH (2004) Dietary approach to attenuate oxidative stress, hypertension, and 21 22 Nghiên cứu Y học inflammation in the cardiovascular system Proc Natl Acad Sci USA, 101: 7094 - 7099 Yao ZH, Qin ZF, Dai Y, Yao XS (2016) Phytochemistry and pharmacology of Allii Macrostemonis Bulbus, a traditional Chinese medicine Chin J Nat Med., 14: 481 498 Zeiher AM, Fisslthaler B, Schray-Utz B, Busse R (1995) Nitric oxide modulates the expression of monocyte chemoattractant protein in cultured human endothelial cells Circ Res., 76: 980 - 986 Ngày nhận báo: 15/01/2018 Ngày phản biện báo: 02/02/2018 Ngày báo đăng: 20/04/2018 Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Trường Đại Học Y Khoa Phạm Ngọc Thạch năm 2018 399 ... vữa động mạch sulforaphane hai dòng tế bào nội mơ mạch máu nhằm xác định chế trình chống xơ vữa động mạch sulforaphane tạo sản xuất hợp chất NO thông qua đường tín hiệu nội bào Src /Akt/ eNOS VẬTLIỆU-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU... bào( 1) Trong đó, tế bào nội mơ chứng minh có liên quan trực tiếp đến biểu giữ vai trò quan trọng nằm giao diện eNOS, tiền chất việc sản xuất hợp máu thành mạch, đóng vai trò chất NO (nitric oxide) (5,6,19)... kích thích sản xuất NO giúp chống xơ vữa động mạch thơng qua đường tín hiệu hoạt hóa Src /Akt/ eNOS BÀN LUẬN Xơ vữa động mạch bệnh lý thường xuất sớm, tiến triển lặng lẽ phát lộ dấu hiệu động mạch