CÁC yếu tố ẢNH HƯỞNG đến hàm LƯỢNG PROGESTERONE NGÀY THỨ 6 SAU ĐỘNG dục ở bò sữa PHỤC vụ cấy TRUYỀN PHÔI

Sự thành thục về tính Khi cơ quan sinh dục của gia súc cái phát triển đến mức độ hoàn thiện,buồng trứng có noãn bào chín, có trứng rụng và trứng có khả năng thụ thai, tửcung cũng phát tr

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM

BÙI MINH TUẤN

CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN HÀM LƯỢNG PROGESTERONE NGÀY THỨ 6 SAU ĐỘNG DỤC

Ở BÒ SỮA PHỤC VỤ CẤY TRUYỀN PHÔI

LUẬN VĂN THẠC SĨ

NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP - 2017

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM



-BÙI MINH TUẤN

CÁC Y U T NH H ẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN HÀM LƯỢNG Ố ẢNH HƯỞNG ĐẾN HÀM LƯỢNG ẢNH HƯỞNG ĐẾN HÀM LƯỢNG ƯỞNG ĐẾN HÀM LƯỢNG NG Đ N HÀM L ẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN HÀM LƯỢNG ƯỢNG NG

PROGESTERONE NGÀY TH 6 SAU Đ NG D C BÒ S A Ứ 6 SAU ĐỘNG DỤC Ở BÒ SỮA ỘNG DỤC Ở BÒ SỮA ỤC Ở BÒ SỮA ỞNG ĐẾN HÀM LƯỢNG ỮA

PH C V C Y TRUY N PHÔI ỤC Ở BÒ SỮA ỤC Ở BÒ SỮA ẤY TRUYỀN PHÔI ỀN PHÔI

Chuyên ngành : Thú y

Mã số : 60.64.01.01 Người hướng dẫn khoa học: TS S Thanh Long ử Thanh Long

HÀ NỘI – 2017

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi Các số liệu,kết quả nêu trong luận văn là trung thực và chưa từng được sử dụng để bảo vệmột học vị nào

Tôi cam đoan rằng, mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn này đã đượccảm ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn đều được chỉ rõ nguồn gốc

Hà nội, ngày 18 tháng 4 năm 2017

Tác giả luận văn

Bùi Minh Tuấn

LỜI CẢM ƠN

Tôi xin chân thành cảm ơn Ban giám đốc Học viện Nông nghiệp Việt Nam,Ban chủ nhiệm khoa Thú y đã tạo điều kiện để tôi có thể học tập và thực hiện nghiêncứu này

Tôi xin chân thành cảm ơn Thầy Cô trong khoa Thú y đã giảng dạy, chia sẻnhững kinh nghiệm quý báu cho tôi Đặc biệt, tôi xin cảm ơn TS Sử Thanh LongTrưởng bộ môn Ngoại-Sản đã hướng dẫn, chỉ bảo tận tình và tạo điều kiện cho tôi

để tôi có thể thực hiện nghiên cứu này đạt được kết quả tốt nhất

Tôi xin chân thành cám ơn toàn thể ban lãnh đạo, cán bộ công nhân viên tạicông ty giống gia súc Hà Nội đã giúp đỡ và tạo điều kiện tốt nhất để tôi có thể thựchiện nghiên cứu này

Tôi xin chân thành cảm ơn!

Hà nội, ngày 18 tháng 4 năm 2017

Tác giả luận văn

Bùi Minh Tuấn

MỤC LỤC

Lời cam đoan i

Lời cảm ơn ii

Mục lục iii

Danh mục viết tắt v

Danh mục bảng vi

Danh mục hình vii

Trích yếu luận văn viii

Thesis abstract xi

Phần 1 Mở đầu 1

1.1 Đặt vấn đề 1

1.2 Mục tiêu của đề tài 2

1.3 Ý nghĩa của đề tài 2

Phần 2 Tổng quan tài liệu 3

2.1 Một số đặc tính sinh lý sinh sản của bò cái 3

2.1.1 Sự thành thục về tính 3

2.2 Công nghệ cấy truyền phôi 7

2.3 Vai trò và ứng dụng của Progesterone 9

2.3.1 Hoạt động của Progesterone trong cơ thể 11

2.3.2 Quá trình hoạt động của Progesterone trên bò 17

2.3.3 Vai trò của Progesterone 17

2.3.4 Ứng dụng của Progesterone trong chăn nuôi thú y 18

2.4 Gây đồng pha để cấy truyền phôi 23

Phần 3 Nội dung và phương pháp nghiên cứu 27

3.1 Đối tượng, địa điểm và thời gian nghiên cứu 27

3.2 Nội dung nghiên cứu 27

3.3 Phương pháp nghiên cứu 28

3.4 Xử lý thống kê 31

Phần 4: Kết quả nghiên cứu 32

4.1 Thông tin về đàn bò được chọn đưa vào thí nghiệm 32

4.2 Kết quả gây động dục trên bò thí nghiệm bằng phương pháp OVSYNCH + CIDR 34

4.4 Ảnh hưởng của yếu tố tuổi tới tỷ lệ động dục 37

4.5 Ảnh hưởng của yếu tố điểm thể trạng (BCS) tới tỷ lệ động dục 38

4.6 Kết quả định lượng Progesterone vào ngày thứ 6 sau động dục 40

4.7 Tỷ lệ bò có nồng độ Progesterone huyết thanh ≥3ng/ml theo lứa đẻ 43

4.8 Tỷ lệ bò có nồng độ Progesterone huyết thanh ≥3ng/ml theo lứa tuổi 44

4.9 Tỷ lệ bò có nồng độ Progesterone huyết thanh ≥3ng/ml theo điểm thể trạng 45

Phần 5: Kết luận và đề nghị 47

5.1 Kết luận 47

5.2 Đề nghị 47

Tài liệu tham khảo 48

DANH MỤC VIẾT TẮT

PMSG : Pregnant Mare Serum Gonadotropin

DANH MỤC BẢNG

Bảng 2.1 Kết quả chẩn đoán bệnh buồng trứng sau hai lần kiểm tra

29 Bảng 4.1 Thông tin về đàn bò sữa Phù Đổng

32 Bảng 4.2 Kết quả gây động dục trên bò thí nghiệm

34 Bảng 4.3 Kết quả theo dõi tỷ lệ bò động dục theo lứa đẻ

36 Bảng 4.4 Kết quả theo dõi bò động dục theo lứa tuổi

37 Bảng 4.5 Kết quả theo dõi bò động dục theo điểm thể trạng

38 Bảng 4.6 Kết quả định lượng Progesterone trong máu bò

40 Bảng 4.7 Tỷ lệ bò đạt nồng độ progesterone ≥ 3ng/ml vào ngày thứ 6 sau động dục

theo lứa đẻ 43 Bảng 4.8 Tỷ lệ bò đạt nồng độ progesterone ≥ 3ng/ml vào ngày thứ 6 sau động dục

theo lứa tuổi 45 Bảng 4.9 Tỷ lệ bò đạt nồng độ progesterone ≥ 3ng/ml vào ngày thứ 6 sau động dục

theo điểm thể trạng 45

DANH MỤC HÌNH

Hình 2.1 Cấu trúc hoá học của progesterone 10

Hình 2.2 Cấu trúc phân tử của progesterone 10

Hình 2.3 Sơ đồ điều hoà sinh dục 12

Hình 3.1 Sử dụng hormone để gây rụng trứng tạo thể vàng cho bò 30

Hình 4.1 Đàn bò sữa xí nghiệp bò Phù Đổng, Hà Nội 33

Hình 4.2 Lấy máu tĩnh mạch đuôi bò để định lượng progesterone 42

TRÍCH YẾU LUẬN VĂN

Tên tác giả: Bùi Minh Tuấn

Tên luận văn: “Các yếu tố ảnh hưởng nồng độ progesterone ngày thứ

6 sau động dục ở bò sữa phục vụ cấy truyền phôi”

2 Nội dung và phương pháp nghiên cứu

2.1 Đối tượng, địa điểm và thời gian nghiên cứu

Đối tượng

Bò lai HF (75% HF)

Địa điểm

Xí nghiệp bò Phù Đổng, Công ty Giống gia súc Hà Nội

Bộ môn Ngoại- Sản, khoa Thú y Học viện Nông nghiệp Việt Nam

Viện nghiên cứu Bảo tồn đa dạng sinh học và bệnh nhiệt đới

Bệnh viện đa khoa MEDLATEC

Thời gian

Tháng 7 năm 2015 đến nay (hiện vẫn đang tiếp tục thực hiện nghiên cứusản xuất bò BBB) thuần

2.2 Nội dung nghiên cứu

Nội dung 1: Chọn bò đủ tiêu chuẩn làm bò mẹ nhận phôi

Nội dung 2: Gây động dục trên bò thí nghiệm bằng phương phápOvsynch+CIDR

Nội dung 3: Ảnh hưởng yếu tố lứa đẻ đến hiệu quả gây động dục bò khidùng phương pháp Ovsynch + CIDR.

Nội dung 4: Ảnh hưởng yếu tố lứa tuổi đến hiệu quả gây động dục bò khidùng phương pháp Ovsynch + CIDR

Nội dung 5: Ảnh hưởng yếu tố điểm thể trạng của bò thí nghiệm đến hiệuquả gây động dục khi dùng phương pháp Ovsynch + CIDR

Nội dung 6: Định lượng progesterone trong máu bò thí nghiệm vào ngàythứ 6 sau động dục

Nội dung 7: Tỷ lệ bò đạt nồng độ progesterone trong máu ≥ 3ng/ml theolứa tuổi

Nội dung 8: Tỷ lệ bò đạt nồng độ progesterone trong máu ≥ 3ng/ml theolứa đẻ

Nội dung 9: Tỷ lệ bò đạt nồng độ progesterone trong máu ≥ 3ng/ml theođiểm thể trạng (BCS)

2.3 Phương pháp nghiên cứu

Phương pháp chọn bò nghiên cứu

Phương pháp khám cơ quan sinh dục

Phương pháp đánh giá điểm thể trạng

Phương pháp gây rụng trứng tạo thể vàng đồng pha

Phương pháp phát hiện bò động dục

Phương pháp định lượng progesterone

3 Kết luận

Trong tổng số 40 bò gây động dục, 32 (80,0%) bò có biểu hiện động dục.Hiệu quả gây động dục ít ảnh hưởng bởi các yếu tố điểm thể trạng, lứatuổi và lứa đẻ

Vào ngày thứ 6 sau động dục, kiểm tra hàm lượng progesterone huyếtthanh thì chỉ có 21/32 bò có nồng độ ≥ 3ng/ml

Ảnh hưởng của các yếu tố lứa đẻ, lứa tuổi và điểm thể trạng đến nồng độprogesterone vào ngày thứ 6 sau khi động dục chưa thể hiện rõ trong nghiên cứu này.

THESIS ABSTRACT

Author: Bui Minh Tuan

TITLE: “Study several factors affecting plasma progesterone concentration at 6 th day after estrus in dairy cattle selected for embryo transfer.”

Major in: Veterinary Medicine Code: 60.64.01.01

Training facility: Vietnam National University of Agriculture

1 Research objectives

Determine effect of several factors to plasma progesterone concentration

at 6th day after estrus in recipient cows, with the aim of improving the successrate of embryo transfer

2 Materials and methods

2.1 Study target, study area and study time

Phudong dairy cattle farm

Biodiversity conservation and Tropical Disease Research Insititute

Medical laboratory and technology company (MEDLATEC),42-44Nghiadung, Badinh, Hanoi

Content 1: Selection of experimental cows which meet the criteria for

recipient cows

Content 2: Synchronize ovulation in the experimental herd by the

Ovsynch +CIDR protocol

Content 3: Effects of parity to the estrus rate of the experimental herd Content 4: Effects of ages to the estrus rate of the experimental herd Content 5: Effects of BCS to the estrus rate of the experimental herd Content 6: Determine plasma progesterone concentration at 6th day afterestrus in the experimental herd

Content 7: The rate of experimental cows which plasma progesterone

concentration achieved 3ng/ml are analysed by ages

Content 8: The rate of experimental cows which plasma progesterone

concentration achieved 3ng/ml are analysed by parity

Content 9: The rate of experimental cows which plasma progesterone

concentration achieved 3ng/ml are analysed by BCS

2.4 Methods

Selection of experimental cows which meet the criteria for the recipient inembryo transfer

Examination the reproductive tract

Body condition score

Synchronise ovulation

Heat detection

Determine plasma progesterone concentration

3 Conclusion

In total of 32/40 cows showed estrus after synchronizing

Estrus synchronization is likely less affected by BCS, ages and parity

At 6th day after estrus, only 21/32 cows meet the threshold level of plasmaprogesterone for recipient (≥3ng/ml)

Effects of several factors (ages, parity, BCS) on plasma progesteroneconcentration have no recognized in this study

PHẦN 1 MỞ ĐẦU

1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ

Việt Nam đã có gần 100 năm nghiên cứu lai tạo bò thịt, bắt đầu từ đàn

bò Sind đỏ (Red Sindhi) được nuôi tại các đồn điền của người Pháp, phát tán

ra các vùng xung quanh hình thành con bò lai Sind Bò có màu sắc đẹp, vócdáng lớn hơn, thích nghi với điều kiện khí hậu nóng ẩm và chịu kham khổ tốt.Năm 1960 – 197 0, kế hoạch Sind hoá đàn bò được khởi xướng Năm 1980,chúng ta chủ động nhập bò Red Sindhi và Sahiwal để tạo bò lai Đến năm

2003, bò lai Zebu chiếm tới 30% tổng đàn bò, cung cấp nguồn gene quý chonhững nghiên cứu lai kinh tế bò địa phương với giống bò thịt chuyên dụng

Từ những năm 1975, tinh các giống bò thịt ôn đới nổi tiếng như Brahman,Droughmaster, Charolais… đã được phối cho đàn bò lai Sind, cho ra đời cácthế hệ F1 thể hiện khả năng sinh trưởng tốt trong điều kiện chăn nuôi còn khókhăn tại Việt Nam

Tuy nhiên, đàn bò lai F1 này vẫn chưa đáp ứng đủ nhu cầu tiêu dùngthịt bò ngày càng tăng của người dân Trong 7 tháng đầu năm 2013, Việt Namnhập khẩu khoảng 120.000 bò Úc, tăng hơn 50% so với cả năm 2012 (Hộichăn nuôi, 2015) Với tốc độ nhập khẩu cao như vậy, bò Úc nhanh chóngđánh bật bò bản địa ra khỏi thị trường Do vậy, việc chọn lựa giống bò thịtchuyên dụng phù hợp để cải tạo đàn bò theo hướng tăng nhanh số lượng vàtăng năng suất sản xuất thịt trên một đầu bò là cần thiết

Ở Việt Nam, công nghệ cấy truyền phôi đã được thực hiện tại Việnkhoa học Việt Nam từ năm 1978 và ở Viện chăn nuôi từ năm 1989 (NguyễnĐức Thạc và cs., 1991) Đến năm 1990, ca cấy phôi đầu tiên đã thành công

bằng phương pháp cấy truyền phôi tươi in- vivo tại xí nghiệp bò Phù Đổng

(Hoàng Kim Giao và cs., 1995) Tuy nhiên, các tác giả trước đây sử dụngphương pháp gây động dục đồng pha trên bò nhận phôi trước khi cấy truyền,

kết hợp với khám lâm sàng qua trực tràng để đánh giá sự hình thành thể vàng,

do rất nhiều bò nhận phôi có biểu hiện động dục nhưng không xảy ra hiệntượng rụng trứng, dẫn tới không hình thành thể vàng để tiết progesterone(hormone an thai), nên tỷ lệ cấy truyền phôi thành công còn thấp

Do đó, chúng tôi đi tiến hành nghiên cứu “Các yếu tố ảnh hưởng đếnhàm lượng Progesterone ngày thứ 6 sau động dục ở bò sữa phục vụ cấy truyềnphôi” nhằm tăng tỷ lệ cấy truyền phôi thành công

1.2 MỤC TIÊU CỦA ĐỀ TÀI

Xác định được các yếu tố ảnh hưởng đến hàm lượng progesteronengày thứ 6 sau động dục để tăng tỷ lệ mang thai trong công nghệ cấy truyềnphôi bò

Đánh giá hiệu quả gây động dục đồng pha trên đàn bò nhận phôi

1.3 Ý NGHĨA CỦA ĐỀ TÀI

Xây dựng tiêu chuẩn trong chọn lựa bò để nhận phôi, nâng cao hiệuquả cấy truyền phôi

Mở rộng ứng dụng công nghệ phôi trong phát triển và nhân nhanhđàn bò

PHẦN 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1 MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH LÝ SINH SẢN CỦA BÒ CÁI

2.1.1 Sự thành thục về tính

Khi cơ quan sinh dục của gia súc cái phát triển đến mức độ hoàn thiện,buồng trứng có noãn bào chín, có trứng rụng và trứng có khả năng thụ thai, tửcung cũng phát triển theo và đủ điều kiện cho thai phát triển trong tử cung.Những dấu hiệu động dục xuất hiện đối với gia súc ở thời kì này gọi là thànhthục về tính Trong thực tế, thành thục về tính xuất hiện trước khi thành thục vềthể vóc Nó phụ thuộc vào nhiều yếu tố như giống, thể trạng, ngoại cảnh, chế

độ chăm sóc và nuôi dưỡng Trong điều kiện nuôi dưỡng tốt thì sự sinh trưởngđược thúc đẩy và thành thục về tính sẽ đến sớm hơn Bò sữa thành thục về tínhkhi thể trọng đạt từ 30-40% thể trọng lúc trưởng thành, còn bò thịt thì mức độcao hơn 45-50%

Chu kỳ động dục

Sau khi thành thục về tính, hiện tượng rụng trứng xảy ra Mỗi lần rụngtrứng có sự tham gia của nhiều loại hormone, các hormone này làm con vật cóbiểu hiện động dục Các noãn bào trên buồng trứng gọi là nang Graff Khinang Graff vỡ, trứng rụng gọi là sự rụng trứng Trứng rụng có chu kỳ nênđộng dục cũng có chu kỳ, một chu kỳ động dục của bò thông thường là 21ngày (giao động từ 18-24 ngày) Quá trình trứng phát triển đến chín và rụngđều chịu sự điều hoà chặt chẽ của hormone, do đó, nhiều nhà nghiên cứu đãphân chia chu kỳ động dục của bò thành 2 pha chính:

Pha Folliculin: gồm toàn bộ biểu hiện trước khi rụng trứng.

Pha Lutein: Là những biểu hiện sau khi rụng trứng và hình thành thể vàng.

Trong chu kỳ sinh dục, ở các đường sinh dục của gia súc (ống dẫntrứng, tử cung, cổ tử cung và âm đạo) thấy có nhịp điệu tương ứng với các

giai đoạn phát triển của noãn bao Thể vàng, buồng trứng tạo ra và điều khiểnnhịp điệu ấy nhờ tiết hormone estrogen và progesterone.

Estrogen do noãn bao đã thành thục tiết làm tăng thể tích các mao mạchnhỏ nhất trong niêm mạc đường sinh dục, từ đó làm tăng nguồn máu, kíchthích sự phân chia tế bào trong nội mạc tử cung Kết quả là giai đoạn đầu củachu kỳ, niêm mạc đường sinh dục có màu đỏ với mức độ ngày càng tăng, hơiphù và tế bào cơ tử cung lớn lên

Sau khi estrogen kích thích tế bào niêm mạc, cổ tử cung tiết ra chấtnhầy loãng chảy từ âm hộ ra ngoài cùng với niêm dịch âm đạo Estrogen tạokhả năng cho những quá trình phân chia và sinh trưởng tế bào rất nhanh trongbiểu mô âm đạo Estrogen được hấp thu vào máu còn tác động đến toàn bộ cơthể, đặc biệt là thần kinh trung ương, làm thay đổi các hoạt động của gia súccái như kém ăn, ngơ ngác, kêu rống, nhảy lên lưng con khác hoặc để con khácnhảy lên và có tư thế chịu đực

Sau khi tế bào trứng rụng, những biểu hiện động dục do estrogen gây rabiến mất, niêm mạc cổ tử cung và âm đạo ngừng tiết niêm dịch, chất nhầychảy ra giảm Cơ cổ tử cung hồi phục sức căng và dần đóng kín lại như cũ.Niêm mạc âm đạo mất một phần khối lượng do nó sừng hóa tế bào biểu mô

Sau khi hình thành thể vàng, hormone progesterone sinh ra và ảnhhưởng tới đường sinh dục Dưới tác dụng của progesterone niêm mạc tử cung

đã được estrogen chuẩn bị trước, được tổ chức để tiếp nhận và nuôi dưỡnghợp tử Biểu mô, nội mạc tử cung bắt đầu tăng lên và chứa nhiều nguyên liệu

để hình thành chất tiết Các tuyến của nội mạc tử cung cũng bắt đầu lớn lênmạnh trở thành uốn khúc và bắt đầu tiết dịch khi thể vàng đạt được hoạt tínhtối đa Các chất tiết này sẽ được hợp tử hấp thu cho đến khi làm tổ

Ở bò chu kỳ động dục thường kéo dài 21 ngày, thời gian động dụcthường kéo dài 25-36 giờ

Chu kỳ động dục của bò chia thành 4 giai đoạn là trước động dục, độngdục, sau động dục và cân bằng sinh học.

Giai đoạn trước động dục (Pre-oestrus), đây là giai đoạn đầu của chu kỳsinh dục, noãn bao thành thục nổi rõ lên bề mặt của buồng trứng, buồng trứng

to hơn bình thường, các tế bào của vách ống dẫn trứng tăng sinh, số lượng lôngnhung cũng tăng lên Đường sinh dục xung huyết, nhu động sừng tử cung tăngcường, mạch quản trong màng nhầy tử cung cũng tăng lên, các dịch nhầy ở âmđạo nhiều, niêm dịch cổ tử cung tiết ra kích thích cho cổ tử cung hé mở, cáctuyến ở đường sinh dục tăng cường hoạt động Giai đoạn này tính hưng phấnchưa cao, dần dần noãn bao chín tế bào trứng được tách ra, sừng tử cung co bópmạnh, cổ tử cung mở hoàn toàn, bộ phận sinh dục phù thũng, niêm dịch ởđường sinh dục chảy ra nhiều nhất, con vật bắt đầu xuất hiện tính dục Nhữngbiến đổi này tạo điều kiện thuận lợi cho tinh trùng vào đường sinh dục cái đểthụ tinh với tế bào trứng

Giai đoạn này con vật bồn chồn, đi lại, đái rắt, kém ăn, nhảy lên conkhác, âm hộ sưng nhẹ, xung huyết, bóng ướt, niêm dịch chảy ra nhiều, lỏng,trong suốt dễ đứt (kéo dài 1-2 cm)

Giai đoạn động dục (Oestrus): Khi gia súc xuất hiện tính dục, tế bàotrứng đã tách khỏi noãn nang, toàn bộ cơ thể gia súc cái và cơ quan sinh dụcbiểu hiện hàng loạt biến đổi về sinh lý Bên ngoài âm hộ phù thũng, niêm mạcsung huyết, niêm dịch trong suốt từ âm đạo chảy ra nhiều Cuối giai đoạn nàytính hưng phấn của con vật cao độ, gia súc ở trạng thái không yên tĩnh, ănuống giảm rõ rệt, chạy, kêu rống, phá chuồng, đứng ngẩn ngơ, nhảy lên lưngcon khác hay để con khác nhảy lên lưng, đái dắt, thích gần con đực, xuất hiệncác tư thế của phản xạ giao phối, hai chân sau dạng ra, đuôi cong về một bên.Các biểu hiện đó tạo điều kiện thuận lợi cho tế bào trứng được gặp tinh trùng

để thụ tinh và phát triển hợp tử trong tử cung

Giai đoạn này nếu tế bào trứng ra khỏi buồng trứng gặp tinh trùng và

được thụ thai thì chu kỳ sinh dục sẽ dừng lại, gia súc cái ở giai đoạn có thai vàđến một thời gian sau khi sinh đẻ xong chu kỳ tính mới xuất hiện trở lại.Trường hợp tế bào trứng không được thụ thai thì nó sẽ chuyển sang giai đoạnsau của chu kỳ.

Giai đoạn sau động dục (Post-oestrus): Progesterone tác động lên hệthần kinh trung ương và tuyến yên, lên trung khu sinh dục, làm thay đổi tínhhưng phấn, kết thúc giai đoạn động dục Niêm mạc sinh dục như âm đạo, tửcung, ống dẫn trứng cũng ngừng tăng sinh, tử cung cũng không tiết niêm dịch,các tế bào biểu mô dần dần bị sừng hóa, các biểu mô ở tầng nhầy bong ra,biểu mô hóa sừng trong âm đạo long dần ra để trở lại trạng thái bình thường,

Quá trình mang thai

Sự phát triển của thai là hiện tượng sinh lý đặc biệt của cơ thể, nó bắtđầu từ khi trứng được thụ tinh cho đến khi đẻ xong Trong thực tế sự có thaicủa bò được tính ngay từ ngày phối giống cuối cùng cho đến ngày đẻ

Thời gian mang thai phụ thuộc vào nhiều yếu tố như tuổi của mẹ,điều kiện nuôi dưỡng, chế độ khai thác và sử dụng, số lượng thai, đôi khicòn phụ thuộc vào lứa đẻ và tính biệt của thai Thời gian mang thai của bòdao động trong khoảng 278-290 (trung bình 280 ngày) và được chia làm 3thời kì cơ bản gồm thời kì phôi (ngày 1-34), thời kì tiền thai (ngày 35-60),thời kì bào thai (ngày 61-đẻ)

Đối với đàn bò Holstein Friesian tại Trung tâm giống bò sữa Hà LanSao Đỏ, thời gian có chửa là 279,87 ngày Thời gian chửa của bò Sind đỏPhilipin là 280 ngày (252-299), của bò Pakistan là 285 ngày (257-328)

Theo Rubenkop (1975) (dẫn theo thời gian chửa ở bò lang trắng đen(LTĐ), F2 3/4 (LTĐ), F3 7/8 LTĐ tương ứng là: 276,5; 275,5; 276,0 ngày; cácnhóm bò lai 3/4 và 5/8 máu HF của Nông trường Ba Vì tương ứng là 278,3 và280,1 ngày

2.2 CÔNG NGHỆ CẤY TRUYỀN PHÔI

Công nghệ phôi là công nghệ tiên tiến, hiện đại, được ứng dụng vàtriển khai ở một số nước phát triển như Mỹ, Pháp, Anh, Canada, Nhật…Cấy truyền phôi (CTP) là một quá trình đưa phôi tạo ra từ cá thể cái này(cái cho phôi) vào cá thể cái khác (cái nhận phôi) phôi vẫn sống, phát triểnbình thường trên cơ sở trạng thái sinh lý sinh dục của cái nhận phôi phùhợp với trạng thái sinh lý sinh dục của cái cho phôi hoặc phù hợp với tuổiphôi (sự phù hợp này là đồng pha)

Người đầu tiên trên thế giới đã sử dụng công nghệ này là Walter Heap.Ông đã làm thành công trên thỏ vào năm 1890, sau đó thành công cho dê

(1932), cho chuột cống (1933), cho cừu (1934), cho lợn (1951), cho bê(1951) CTP tiếp tục được phát triển và cải tiến Năm 1959 từ một phôi thỏSeidel đã nhân lên thành 4 phôi Năm 1970 thành công trong bảo quản phôiđông lạnh, làm cơ sở cho CTP đông lạnh trên bò (1972) Năm 1983 con bêđầu tiên ra đời bằng CTP tại Mỹ

Trong lĩnh vực Nông nghiệp, công nghệ phôi mang lại hiệu quả cao, rútgiảm khoảng cách di truyền giống, rút ngắn được thời gian nhân đàn giống tốt rasản xuất trên cơ sở khai thác triệt để tiềm năng di truyền của những cá thể có tínhtrạng vượt trội thông qua việc lấy - bảo quản phôi và cấy truyền phôi của chúng.Công nghệ phôi nâng cao cường độ chọn lọc, đẩy mạnh công tác giống trên cơ

sở tăng nhanh tiến độ di truyền hàng năm Ngoài ra, còn hạn chế mức tối thiểu sốlượng gia súc làm giống, từ đó giảm các chi phí khác như chuồng trại, thức ăn,nhân lực, hạn chế dịch bệnh, giảm thải chất thải chăn nuôi từ đó giảm chi phí,thuận lợi trong việc xuất, nhập giống bằng con đường nhập phôi thay nhập giasúc sống Hạn chế một số dịch bệnh và nâng cao khả năng chống chịu bệnh, khảnăng thích nghi cho con vật ở môi trường mới, từ giai đoạn phôi thai

Trường hợp cấy truyền phôi bò đầu tiên được báo cáo vào năm 1949(Umbaugh., 1949), và cá thể bê đầu tiên ra đời bằng phương pháp cấy truyềnphôi vào năm 1951 (Willett và cs., 1951) Vào những năm 1970, việc ứng dụngphương pháp cấy truyền phôi vào chăn nuôi bò công nghiệp được khởi xướngkhi các giống bò kiêm dụng Châu Âu trở nên phổ biến tại Bắc Mỹ, Úc và NewZealand Từ đó tới nay, công nghệ phôi đã đem lại một bước nhảy vọt trong côngtác chọn giống, nhân giống bò Công nghệ cấy truyền phôi bò dựa trên quá trìnhphát triển của phôi thai bò Sau khi trứng được thụ tinh ở 1/3 phía trên của ốngdẫn trứng, trứng di chuyển về gốc sừng tử cung và làm tổ Bào thai bò phát triển qua

3 thời kỳ Thời kỳ đầu bắt đầu từ khi thụ tinh đến khi hình thành túi phôi, kéo dàitrung bình 7 - 10 ngày Đây là giai đoạn hợp tử, hợp tử nằm tự do trong khoang tửcung Người ta có thể thu được hợp tử khi chúng chưa làm tổ và cấy truyền vào tử

cung của bò khác cùng thời điểm sinh lý của chu kỳ động dục (đồng pha) Côngnghệ trên gọi tắt là cấy truyền hợp tử Phôi được tạo từ tinh trùng của bò đực tốt vàtrứng lấy từ bò cái tốt được chọn lọc về năng suất, chất lượng sản phẩm và nhữngđặc tính di truyền quý theo mong muốn, gọi là con cho Bò cái được cấy phôi (connhận) là những bò có khả năng sinh sản và sức khỏe tốt.

Ở Việt Nam, công nghệ cấy truyền phôi đã được thực hiện tại Việnkhoa học Việt Nam từ năm 1978 và ở Viện chăn nuôi từ năm 1989 (NguyễnĐức Thạc và cs., 1991) Đến năm 1990, ca cấy phôi đầu tiên đã thành công

bằng phương pháp cấy truyền phôi tươi in- vivo tại xí nghiệp bò Phù Đổng

(Hoàng Kim Giao và cs., 1995) Tuy nhiên, các tác giả trước đây sử dụngphương pháp gây động dục đồng pha trên bò nhận phôi trước khi cấytruyền, kết hợp với khám lâm sàng qua trực tràng để đánh giá sự hình thànhthể vàng, do rất nhiều bò nhận phôi có biểu hiện động dục nhưng không xảy

ra hiện tượng rụng trứng, dẫn tới không hình thành thể vàng để tiết progesterone(hormone an thai), nên tỷ lệ cấy truyền phôi thành công còn thấp

2.3 VAI TRÒ VÀ ỨNG DỤNG CỦA PROGESTERONE

Progesterone là một hormone steroid nội sinh, thời kỳ mang thai vàphát triển phôi thai của bò và nhiều loài động vật khác Thuộc nhóm cáchormone steroid, gọi là progestogen Progesterone cũng là một chất chuyểnhóa trung gian chủ yếu trong quá trình sản xuất steroid nội sinh khác, bao gồmcác hormone giới tính và các steroid tự nhiên, và đóng một vai trò quan trọngtrong hoạt động của não như một neurosteroid

Progesterone được phát hiện độc lập bởi 4 nhóm nghiên cứu, WillardMyron Allen đồng phát hiện ra progesterone cùng với giáo sư giải phẫu họcGeorge Washington Corner tại Đại học y khoa Rochester năm 1933 WillardMyron Allen đầu tiên đã xác định được điểm nóng chảy, khối lượng phân tử vàmột phần cấu trúc phân tử Ông cũng đặt tên cho nó là progesterone bắt nguồn

từ progestational steroidal ketone

Giống như các loại steroid khác, progesterone chứa 4 vònghydrocarbon liền nhau Progesterone chứa xe-tôn (ketone) và các nhóm chứcnăng o-xi hóa cùng 2 nhánh methyl Giống như tất cả các horrmone steroidkhác, nó có tính chất kỵ nước.

Hình 2.1 Cấu trúc hoá học của progesterone

Hình 2.2 Cấu trúc phân tử của progesterone

2.3.1 Hoạt động của progesterone trong cơ thể

Sự điều hòa sinh dục của tuyến nội tiết

Hoạt động sinh dục chịu sự điều tiết của hệ thần kinh thể dịch, hệ thầnkinh thông qua các thụ quan nhạy cảm là nơi tiếp nhận tất cả các xung độngcủa ngoại cảnh vào cơ thể, đầu tiên là đại não và vỏ não mà trực tiếp làhypothalamus tiết ra các chất kích thích (yếu tố giải phóng) GH-RF kích thíchthùy trước tuyến yên tiết FSH, LH, và các hormone đó theo máu tác động tớibuồng trứng làm cho nang trứng phát triển tới mức chín và tiết ra oestrogen

Trong quá trình sinh lý bình thường, gia súc đến tuổi trưởng thành,buồng trứng đã có nang trứng phát triển ở các giai đoạn khác nhau, trong cơthể con vật đã có sẵn một lượng nhất định về oestrogen, chính oestrogen tácđộng lên trung khu vỏ não và ảnh hưởng tới hypothalamus tạo điều kiện cho

sự xuất hiện và lan truyền các xung động thần kinh gây tiết GnRH chu kỳ(hormone giải phóng FRH và LRH)

FRH kích thích thùy trước tuyến yên tiết FSH kích tố này kích thích sựphát triển noãn nang của buồng trứng, noãn nang phát triển trứng chín, lượngoestrogen tiết ra nhiều hơn Oestrogen tác động vào các bộ phận sinh dục thứcấp đồng thời tác động lên trung tâm hypothalamus, vỏ não gây nên hiệntượng động dục LRH kích thích thùy trước tuyến yên tiết LH, LH tác độngvào buồng trứng, làm trứng chín Kết hợp với FSH làm noãn bào vỡ ra và gâynên hiện tượng thải trứng, hình thành thể vàng và LRH kích thích thùy trướctuyến yên phân tiết LTH, LTH tác động vào buồng trứng duy trì sự tồn tại củathể vàng kích thích thể vàng phân tiết progesterone Progesterone tác động lêntuyến yên ức chế phân tiết FSH, LH, quá trình động dục chấm dứt

Hình 2.3 Sơ đồ điều hoà sinh dục

Progesterone tác động vào tử cung làm cho tử cung dày lên tạo cơ sở tốt choviệc làm tổ của hợp tử-phôi lúc ban đầu (tạo sữa tử cung), nên con vật cóchửa, thể vàng tồn tại suốt thời gian mang thai, có nghĩa là lượng progesteroneđược duy trì với nồng độ cao trong máu Nếu không có chửa, thể vàng tồn lưuđến ngày thứ 15-17 của chu kỳ Sau đó, thể vàng teo dần cũng có nghĩa hàmlượng progesterone cũng giảm dần, giảm đến mức độ nhất định nó lại cùngmột số nhân tố khác kích thích vỏ đại não-hypothalamus-tuyến yên, lúc nàytuyến yên ngừng tiết LTH, tăng cường tiết FSH, LH chu kỳ sinh dục mớihình thành

Tiết progesterone là chức năng chủ yếu của thể vàng, tuy nhiên cóquan điểm cho rằng sự tạo thành thể vàng và tiết progesterone là doprolactin (PRL) giữ vai trò chính

Một số công trình nghiên cứu hiện nay, chứng minh rằng việc kiểmsoát sự chế tiết progesterone ngoài thời kỳ mang thai được đảm nhiệm bởi những

Hypothala mus

Feedback(+) Feedback(+)

Feedback(-)

luteotrophin có nguồn gốc từ tuyến yên (LH, PRL) và một số chất có vai trò phângiải lutein đã được xác định rõ là PGF2 Ngoài ra ở một số loài, estradiol cũng làmột yếu tố luteotrophin (Cù Xuân Dần và Lê Khắc Thận, 1985).

Quá trình kích thích tiết progesterone

Cùng với quan điểm trên, nhiều tác giả cho rằng PRL kích thích và duytrì sự có mặt của các thể tiếp nhận LH trên tế bào lutein Sự có mặt của LHthông qua các thể nhận này có vai trò ức chế sự dị hoá của progesterone thành20 dihydro progesterone (Nguyễn Tấn Anh và Nguyễn Duy Hoan, 1998)

Ở phần lớn các loài động vật, LH được tiết ra bởi thùy trước củatuyến yên và cần thiết cho việc duy trì sự chế tiết bình thường củaprogesterone tại thể vàng

Khi mới bắt đầu phân tiết, nồng độ progesterone trong máu tăng dần cótác dụng kích thích trung khu sinh dục vùng dưới đồi hypothalamus tăng tiếtcác yếu tố giải phóng LRF LRF kích thích tuyến yên tiết FSH và LH thôngqua hệ thống “thông tin thứ hai” là inositol triphosphat (InsP3 hay IP3) vàDiacylglycerol hay diglycerid (DAG hay DG) (Cù Xuân Dần và Lê KhắcThận, 1985)

InsP3 và DAG là hệ thống thông tin thứ hai đối với các hormone giảiphóng (GnRH), là các thông tin nội bào được hình thành từ phosphatydininositol 4-5 diphosphat (PIP2) sau khi đã thủy phân phospholipaza C (PLC),một loại phospholipid màng tế bào có bản chất là enzyme

Cơ chế tác dụng

Khi có mặt của hormone GnRH, nó gắn với thể nhận trên bề mặt tế bàotạo thành phức hợp hormone - Thể nhận (H-R), cụ thể: GnRH - Thể nhận

Tín hiệu từ phức hợp này thông qua protein kích hoạt trung gian thứ ba

có tên là protein G đến và hoạt hóa phospholipaza C

Protein G được tạo thành bởi sự kết hợp giữa protein và

guanylnucleotid, có khối lượng phân tử 42.000 Dalton và có khả năng kếthợp với guanosine triphosphate (GTP) và guanosine diphosphate (GDP)(Nguyễn Xuân Tịnh và cs, 1996)

Phospholipaza C thuỷ phân tạo ra InsP3 và DAG Đây chính là thôngtin thứ hai trong cơ chế tác dụng của hormone protein

DAG hoạt hoá proteinkinaza C làm tăng ái lực của proteinkinaza C vớiion Ca2+ Mặt khác proteinkinaza C được hoạt hoá sẽ phosphryl hóa nhữngprotein đặc hiệu trong tế bào làm thay đổi hoạt động xúc tác của nhữngprotein này Một trong những hoạt động của các protein này là tham gia vậnchuyển FSH và LH ra ngoài tế bào (Nguyễn Xuân Tịnh và cs, 1996)

Còn InsP3 kết hợp với thể nhận ở màng lưới nội nguyên sinh chất kíchthích sự giải phóng ion Ca2+ vào bào tương Nồng độ Ca2+ trong bào tươngtăng sẽ hoạt hóa proteinkinaza C

Sau khi gắn vào thể nhận đặc hiệu của nó ở màng tế bào, LH kích thích

sự hoạt hóa của men adenyl cyclaza, kích thích sự tổng hợp AMP vòng

Một trong những “thông tin thứ hai” là cAMP, có vai trò hết sức quan trọngtrong cơ chế tác động của LH (thuộc nhóm hormone protein) Sự tăng nồng độ của

nó ở trong bào tương sẽ làm thay đổi nhiều quá trình hoạt động của enzyme trong

tế bào đồng thời làm thay đổi sự thẩm thấu của màng tế bào, gây co giãn cơ

Theo Nguyễn Xuân Tịnh và cs (1996) hệ thống adenylat cyclaza (AC)

là cơ chế dẫn truyền thần kinh phổ biến đối với hormone protein (trong đó cóLH) và các chất dẫn truyền thần kinh của tế bào Hệ thống này bao gồmprotein adenylat cyclaza có bản chất là một protein màng Khi hệ thống nàyđược kích hoạt sẽ kích thích sự tạo thành cAMP, còn khi bị ức chế, quá trìnhnày sẽ ngừng lại Hệ thống này được Sutherland tìm ra năm 1950 khi nghiêncứu tác dụng của adrenalin tới sự phân hủy glycogen thành glucoza ở tế bào gan.cAMP sau khi được tạo thành sẽ hoạt hoá một loại proteinkinaza trong tế bào(còn gọi là proteinkinaza A), giải phóng ra các tiểu đơn vị điều hoà Về bản chất,

proteinkinaza là một enzyme có khả năng phosphoryl hoá một số axit amin trongmột số protein Về cấu tạo, proteinkinaza A gồm hai thành phần:

Tiểu đơn vị điều hoà (regulatory subunit) có khả năng kết hợp với cAMP.Tiểu đơn vị xúc tác (catalytic subunit) có vai trò của một enzyme

Bình thường hai tiểu đơn vị điều hoà và xúc tác kết hợp với nhau tạothành phức hợp không hoạt động gọi là proteinkinaza A Khi có mặt củacAMP, nó kết hợp với tiểu đơn vị điều hoà của proteinkinaza A, phức hợp nàyphân ly thành tiểu đơn vị điều hoà gắn với cAMP không hoạt động và giảiphóng tiểu đơn vị xúc tác ở trạng thái tự do Tiểu đơn vị xúc tác ở trạng thái tự

do mới có hoạt động enzyme, enzyme này sẽ hoạt hoá một loạt protein trong

tế bào nhận thông qua quá trình phosphoryl hoá Sự tạo ra một thông tin nộibào như cAMP cho phép thể nhận ở màng không những truyền thông tin cótrong hormone thành tín hiệu nội bào mà còn cho phép khuếch đại một cách lớnmạnh tín hiệu ban đầu: một phân tử thông tin, khi kết hợp với thể nhận, sẽ hoạthoá nhiều phân tử adenylat cyclaza (AC), mỗi phân tử AC lại xúc tác để tạothành nhiều phân tử cAMP từ ATP, sau đó mỗi phân tử cAMP lại hoạt hoá mộtphân tử proteinkinaza Mỗi phân tử proteinkinaza lại phosphoryl hoá nhiều phân

tử protein của tế bào, từ đó làm thay đổi hoạt động của nhiều phân tử protein đặchiệu của tế bào đích Nếu mỗi phân tử protein đặc hiệu là một enzyme thìenzyme này sẽ có thể tạo thành nhiều sản phẩm mới từ một cơ chất

Cơ chế tác dụng này cho phép giải thích vai trò của LH trong việc kíchthích sự tổng hợp và tiết progesterone từ thể vàng buồng trứng

Hoạt động của LH đòi hỏi tính toàn vẹn của quá trình tổng hợp protein,phải có sự tích tụ nhanh chóng trong ty thể (dưới tác động của LH) nhữngprotein mới vừa được tổng hợp trong bào tương

Ngoài sự tác động nhanh chóng này đến quá trình sản sinh steroid, LHcòn có một tác động kích thích chậm đến sự tổng hợp những enzyme tạosteroid ở ty thể, thể hiện rõ ở những tổ chức tế bào trong nhiều ngày

Quá trình phân giải progesterone

Vai trò phân giải lutein đã được xác định rõ là PGF2

PGF2 được tiết ra bởi buồng trứng, vỏ thượng thận, rốn nhau thainhưng chủ yếu là ở thân sừng tử cung, có vai trò quan trọng trong điều hoàchu kỳ động dục của gia súc cái nhờ chức năng điều khiển hoạt động của thểvàng ở những gia súc không có chửa

Có hai giả thuyết hiện đang cùng tồn tại về vai trò của PGF 2

Giả thuyết thứ nhất cho rằng PGF2 tác động gián tiếp tới thể vàng, theogiả thuyết này, PGF2 tác động gây co mạch máu ngoại biên làm giảm lượngmáu đến nuôi thể vàng, thể vàng sẽ bị thoái hoá trong vòng 24 giờ do khôngđược cung cấp chất dinh dưỡng (Hoàng Kim Giao và cs, 1997)

Theo Sato và cs (1992), nồng độ PGF2 được tiết ra từ tử cung đượcchuyển theo cơ chế ngược dòng từ tĩnh mạch tử cung đến động mạch buồngtrứng và sau đó đến thể vàng, nơi thể hiện tác động trực tiếp của nó

Giả thuyết thứ hai cho rằng PGF2 tác động trực tiếp lên tế bào lutein vàtác động theo hai hướng:

Hướng thứ nhất (ức chế tiết progesterone): Khi nồng độ progesterone

trong máu cao, PGF2 tác động tới hệ thống AC ức chế sự tổng hợp cAMP, sựgiảm tổng hợp cAMP sẽ giảm thấp số lượng thể tiếp nhận LH trên màng tếbào, kết quả làm ngừng quá trình tổng hợp progesterone

Hướng thứ hai (kích thích tiết progesterone): Do ảnh hưởng của PGF2

hàm lượng Inositol 1, 4, 5-triphosphat (InsP3 hay IP3) tăng, kích thích giảiphóng ion Ca2+ bị phong tỏa trong lưới nội sinh chất vào bào tương từ đó kíchthích các phần tử có nhiệm vụ vận chuyển progesterone ra ngoài màng tế bào

Sự tăng nồng độ của LH sẽ kích thích quá trình lutein, kích thích phântiết progesterone (Hoàng Kim Giao và cs, 1997)

2.3.2 Quá trình hoạt động của progesterone trên bò

Quá trình tiết của progesterone trong chu kỳ động dục của bò đượcXukhoep (1985) cho rằng trong thời gian động dục, hàm lượng progesteronetrong huyết tương là 0,160,02 ng/ml, vào ngày thứ 2-3 của chu kỳ (tức là lúcrụng trứng và sau khi rụng trứng), hàm lượng progesterone trong máu giảm ởmức thấp nhất, gần như bằng không Từ ngày thứ 4 đến ngày thứ 6progesterone bắt đầu tăng (0,28 µg/100ml), đến ngày thứ 12-14 đạt mức độ tối

đa (0,45 µg/100ml), sau đó giảm dần, đến ngày thứ 18 lại không thấy xuất

hiện (Nakao và cs, 1983a).

Nghiên cứu của Homeida (2002) trên bò sữa cho biết hàm lượngprogesterone biến động trong các ngày của chu kỳ, vào ngày động dục là 0,17 ng/

ml, ngày thứ 6 là 1,1 ng/ml, ngày thứ 9 là 1,7 ng/ml, ngày thứ 12 là 2,36 ng/ml,ngày thứ 15 là 2,55 ng/ml, ngày thứ 18 là 1,26 ng/ml và ngày thứ 21 là 0,22 ng/ml

Sau khi phối giống có chửa, nồng độ progesterone trong máu bắt đầutăng Các kết quả nghiên cứu của Sato và cs (1992) cho thấy, sau khi phốigiống có chửa, nồng độ progesterone trong máu bò bắt đầu tăng đạt 2 ng/mltrong khoảng thời gian từ ngày thứ 20 đến ngày thứ 24 Từ ngày thứ 25 trở đi,nồng độ progesterone tăng cao và thường duy trì ở mức 6-8 ng/ml Nếu không

có chửa nồng độ progesterone trong máu không tăng và chỉ duy trì ở mứcthấp, đạt 0,5 ng/ml hoặc thấp hơn trong khoảng thời gian từ ngày thứ 20 đếnngày thứ 24

2.3.3 Vai trò của progesterone

Với các kết quả nghiên cứu hiện nay về progesterone, chúng ta có thểthấy rõ vai trò của hormone này thể hiện theo hai hướng

Hướng thứ nhất (tác động tới cơ quan sinh dục)

Đối với buồng trứng: Với liều lượng thấp (mới bắt đầu phân tiết) nókích thích sự phát triển của thể vàng, liều lượng cao sẽ gây thoái hoá nangtrứng và ức chế sự rụng trứng

Ngoài ra, progesterone còn được xem là nhân tố quan trọng trong quátrình rụng trứng Dưới ảnh hưởng của LH nồng độ cao trước thời kỳ rụngtrứng, sự tạo thành progesterone có tác dụng làm tăng hoạt tính của enzymephá vỡ thành bao noãn và cùng với estrogen phát triển tập tính sinh dục ở con

cái (Homeida, 2002).

Đối với tử cung, progesterone có tác dụng giảm tính mẫn cảm co bópcủa nội mạc tử cung thông qua cơ chế ức chế các men oxy hoá nhưglucuronidaza, photphataza và anhydraza, vì vậy nó được coi là loại hormone

an thai

Theo Hammond và cs., (1975), dưới tác dụng của progesterone, biểu

mô nội mạc tử cung tăng lên, chứa nhiều nguyên liệu để hình thành chất tiết,các tuyến tử cung của nội mạc tử cung bắt đầu lớn lên, trở thành uốn khúc vàtăng tiết dịch, dịch tiết này là nguồn dinh dưỡng chủ yếu nuôi phôi cho đếnkhi làm tổ

Đối với tuyến vú, progesterone kích thích sự hình thành các tiểu thùy

và các túi (bao) tuyến của bầu vú, chuẩn bị cho tiết sữa

Hướng thứ hai (tác động ngược trở lại hypothalamus và tuyến yên): kích

thích hoặc ức chế tiết các hormone sinh dục (cơ chế điều hòa feedback)

ngược-2.3.4 Ứng dụng của progesterone trong chăn nuôi thú y

Khắc phục hiện tượng rối loạn sinh sẳn bằng progesterone

Nguyên lý của phương pháp này là khi tiêm progesterone sẽ làm teonhỏ thể vàng, kích thích tuyến yên tiết FSH, làm phát triển noãn bao Sau khiprogesterone hết tác dụng, tuyến yên sẽ tiết nhiều Gonadotropin với số lượnglớn, kết hợp với việc tiêm thêm chế phẩm Gonadotropin bổ sung sẽ làm chonoãn bao chín và rụng trứng, con vật sẽ động dục và thụ thai Phương phápnày rất hiệu quả khi điều trị thể vàng tồn lưu, u nang buồng trứng, buồng

trứng không hoạt động.

Perez Garcia (1994) đã tiêm ba lần progesterone cho 40 bò cái hướngthịt vào các ngày 1, 4 và 7 mỗi lần 100mg, ngày thứ 9 tiêm PMSG1500đvc/con Kết quả sau khi tiêm 4 ngày có 90% số bò động dục (36 con), tỷ

lệ thụ thai sau 2 kỳ phối giống là 80%

Sử dụng progesterone gây động dục ở bò có nhiều phác đồ điều trị và liềulượng khác nhau, có thể dùng riêng biệt hoặc kết hợp với PMSG và HCG TheoHoàng Kim Giao và cs., (1997) đã sử dụng phác đồ sau đạt hiệu quả cao

Tiêm cho bò progesterone vào các ngày 1, 3 và 5 với liều tương ứng25mg, 50mg, 75mg Ngày thứ 7 tiêm 1500-1800 đvc HTNC, ngày 9-10 bòđộng dục và phối giống

Tiêm progesterone vào ngày 1, 4 và 7 với liều tương ứng là 30mg,60mg, 90mg progesterone, ngày thứ 9 tiêm HTNC liều 1500-1800 đvc, ngàythứ 11 hoặc 12 bò động dục và phối giống, progesterone có thể sử dụng ởdạng bột trộn vào thức ăn, dạng nước để tiêm

Tăng Xuân Lưu và cs., (2001) nghiên cứu và cho kết quả về khả sinhsản trên đàn bò lai hướng sữa tại Ba Vì đã sử dụng progesterone kết hợp vớihuyết thanh ngựa chửa, tỷ lệ động dục là 70,05% và phối giống có chửa là61,22% đối với bò thiểu năng buồng trứng Ứng dụng vòng CIDR có tỉ lệ bòđộng dục là 82,14% ở bò cái sinh sản và 75,5% ở bò cái tơ

Theo Hoàng Kim Giao và Nguyễn Thanh Dương (1997) Đặt vòngPRID trong vòng 12 ngày khi rút có tiêm hoặc không tiêm thêm 250-600UIPMSG có tỷ lệ thụ thai là 55-65% tương ứng với động dục tự nhiên và thụtinh nhân tạo ở chu kỳ đầu là 60-65%

Theo Lưu Công Khánh và cs (2004) gây động dục đồng pha cho bòbằng phương pháp kết hợp giữa CIDR và PGF2α đạt được tỷ lệ động dục ở bòlai Sind là 85,71% và ở bò lai HF là 87,30%

Cũng theo báo cáo kết quả cải tiến phương pháp gây động dục đồngpha của Tăng Xuân Lưu và cs., (2008-2010) cho kết quả tỷ lệ động dục ở bò

tơ là 91,67%, ở bò lai HF sinh sản là 89,65%

Đối với bò có buồng trứng kém hoạt động, sử dụng vòng PRID đặt âmđạo và sử dụng PGF2α liều 25 mg kết hợp với GnRH liều 200 mg/con đạt kếtquả điều trị đạt khá cao Với bò có thể vàng tồn lưu tỷ lệ động dục sau điều trịđạt 88,9%, tỷ lệ thụ thai ở lần phối đầu đạt 65% Với bò có u nang tỷ lệ độngdục sau điều trị đạt 100%, tỷ lệ thụ thai ở lần phối đầu đạt 62,5%

Chẩn đoán bệnh sinh sản

Theo Trần Tiến Dũng và cs., (2002) đối với gia súc cái nếu buồngtrứng hoạt động bình thường thì quá trình phân tiết progesterone theo quy luậtsinh học của loài Với bò, trong chu kỳ động dục bình thường, hàm lượngprogesterone tương đối thấp vào ngày động dục (<0,21 ng/ml), bắt đầu tăngnhanh từ ngày thứ 6, đến ngày thứ 15 đạt cao nhất (bình quân 2,43 ng/ml), sau đógiảm dần và thấp nhất vào ngày động dục ở chu kỳ tiếp theo Căn cứ vào quy luậtphân tiết của progesterone mà người ta có thể biết được trạng thái hoạt động củabuồng trứng như thế nào thông qua việc định lượng progesterone

Có nhiều phương pháp xác định nồng độ progesterone trong sữa vàmáu, trong đó kỹ thuật định lượng miễn dịch enzyme (ELISA) được sử dụng

để định lượng hàm lượng progesterone (ELISA-progesterone) là kỹ thuật có

độ chính xác cao, có thể nhanh chóng xác định được nồng độ progesteronetrong sữa và trong máu, giúp đánh giá đúng tình trạng hoạt động của buồngtrứng gia súc

Khi xác định được hàm lượng progesterone sẽ chẩn đoán được nguyênnhân gây rối loạn sinh sản trên buồng trứng bò, với những bò có u buồngtrứng, nếu hàm lượng progesterone trong máu lớn hơn 1,4 ng/ml được xácđịnh là u thể vàng, nếu hàm lượng progesterone trong máu nhỏ hơn 0,6 ng/mlđược xác định là u nang buồng trứng

Đối với bò có hàm lượng progesterone nhỏ hơn 0,2 ng/ml được xác định

là buồng trứng kém hoạt động (Phan Văn Kiểm và cs., 2000)

Đối với gia súc có thể vàng tồn lưu hoặc bị u nang thể vàng, nồng độprogesterone trong máu luôn luôn cao, nó ức chế sự hình thành và phân tiếtcác hormone sinh dục khác

Đối với gia súc cái chậm sinh, chậm động dục trở lại sau khi đẻ trongtrường hợp dinh dưỡng kém, đặc biệt là thiếu protein thì buồng trứng kém pháttriển (thiểu năng buồng trứng) thì hàm lượng progesterone trong máu luôn ở mứcthấp dưới 0,5 ng/ml

Đối với gia súc cái bị u nang nang trứng, hàm lượng estrogen luôn caotrong máu, hàm lượng progesterone thấp ở mức ngày 0 của chu kỳ động dục,trường hợp này làm cho bò động dục kéo dài (thậm chí loạn chu kỳ sinh dục),phối giống nhiều lần không đậu thai

Định lượng progesterone để chẩn đoán có thai sớm

Nếu gia súc phối giống không có chửa thì thể vàng buồng trứng chỉ tồntại trong một khoảng thời gian nhất định (lợn 14-16 ngày, bò 13-14 ngày), sau

đó thoái hoá để chuẩn bị cho chu kỳ động dục mới Khi thể vàng thoái hoá,nồng độ progesterone trong máu giảm thấp

Nếu phối giống có chửa, thể vàng sẽ tồn tại trong một thời gian dài đểtiết progesterone duy trì thai

Căn cứ vào nồng độ progesterone trong máu có thể xác định sự mangthai, xác định ngày của chu kỳ động dục và giúp chẩn đoán nguyên nhân cáctrường hợp bị rối loạn sinh sản đối với bò (Nakao và cs., 1982a) Nghiên cứutrên bò cho thấy từ ngày 19 đến ngày 24 sau khi phối giống có thể kiểm tranồng độ progesterone trong máu để chẩn đoán có thai sớm Trong khoảngthời gian nếu nồng độ progesterone trong máu bò đạt trên 2 ng/ml huyếtthanh thì bò được xác định là có thai, nếu bò không chửa, nồng độ