Nghiên cứu sự ô nhiễm Escherichia coli và Salmonella trên thịt lợn tươi, một số đặc tính sinh học của vi khuẩn và đề xuất biện pháp khống chế tại thành phố Lào Cai (Luận văn thạc sĩ)

Nghiên cứu sự ô nhiễm Escherichia coli và Salmonella trên thịt lợn tươi, một số đặc tính sinh học của vi khuẩn và đề xuất biện pháp khống chế tại thành phố Lào Cai (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu sự ô nhiễm Escherichia coli và Salmonella trên thịt lợn tươi, một số đặc tính sinh học của vi khuẩn và đề xuất biện pháp khống chế tại thành phố Lào Cai (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu sự ô nhiễm Escherichia coli và Salmonella trên thịt lợn tươi, một số đặc tính sinh học của vi khuẩn và đề xuất biện pháp khống chế tại thành phố Lào Cai (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu sự ô nhiễm Escherichia coli và Salmonella trên thịt lợn tươi, một số đặc tính sinh học của vi khuẩn và đề xuất biện pháp khống chế tại thành phố Lào Cai (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu sự ô nhiễm Escherichia coli và Salmonella trên thịt lợn tươi, một số đặc tính sinh học của vi khuẩn và đề xuất biện pháp khống chế tại thành phố Lào Cai (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu sự ô nhiễm Escherichia coli và Salmonella trên thịt lợn tươi, một số đặc tính sinh học của vi khuẩn và đề xuất biện pháp khống chế tại thành phố Lào Cai (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu sự ô nhiễm Escherichia coli và Salmonella trên thịt lợn tươi, một số đặc tính sinh học của vi khuẩn và đề xuất biện pháp khống chế tại thành phố Lào Cai (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu sự ô nhiễm Escherichia coli và Salmonella trên thịt lợn tươi, một số đặc tính sinh học của vi khuẩn và đề xuất biện pháp khống chế tại thành phố Lào Cai (Luận văn thạc sĩ)

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN VĂN GIANG NGHIÊN CỨU SỰ Ô NHIỄM ESCHERICHIA COLI, SALMONELLA TRÊN THỊT LỢN TƯƠI, MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VI KHUẨN VÀ ĐỀ XUẤT BIỆN PHÁP KHỐNG CHẾ TẠI THÀNH PHỐ LÀO CAI LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y THÁI NGUYÊN - 2018 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN VĂN GIANG NGHIÊN CỨU SỰ Ô NHIỄM ESCHERICHIA COLI, SALMONELLA TRÊN THỊT LỢN TƯƠI, MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VI KHUẨN VÀ ĐỀ XUẤT BIỆN PHÁP KHỐNG CHẾ TẠI THÀNH PHỐ LÀO CAI Chuyên ngành: Thú Y Mã ngành: 8.64.01.01 LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Quang Tính THÁI NGUYÊN - 2018 i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận văn cảm ơn thơng tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Thái Nguyên, ngày tháng năm 2018 Tác giả Nguyễn Văn Giang ii LỜI CẢM ƠN Trong thời gian nghiên cứu, thực đề tài, nhận quan tâm, bảo, hướng dẫn, giúp đỡ tận tình thầy cô giáo, đồng nghiệp, bạn bè động viên khích lệ gia đình Nhân dịp tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới người hướng dẫn khoa học: PGS TS Nguyễn Quang Tính trực tiếp hướng dẫn, bảo tận tình trình nghiên cứu, thực đề tài Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu nhà trường, Phòng Đào tạo, Ban chủ nhiệm khoa thầy cô giáo Khoa Chăn nuôi Thú y - Trường Đại học Nông Lâm - Đại học Thái Nguyên tạo điều kiện giúp đỡ suốt q trình học tập Tơi xin trân trọng cảm ơn cán thuộc Bộ môn công nghệ vi sinh - Viện Khoa học sống - Trường Đại học Nông Lâm, Chi cục Kiểm dịch động vật vùng Lào Cai giúp đỡ tơi q trình thực đề tài Tôi xin trân trọng cảm ơn chủ quầy bán thịt lợn, Ban Quản lý chợ Cốc Lếu, chợ Nguyễn Du chợ Kim Tân thuộc thành phố Lào Cai tạo điều kiện cho lấy mẫu thực đề tài Cuối xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc ủng hộ, động viên, giúp đỡ gia đình, bạn bè đồng nghiệp suốt thời gian học tập, nghiên cứu hoàn thành luận văn tốt nghiệp Tác giả Nguyễn Văn Giang iii MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài……………………………………………………… Mục tiêu……………………………………………………………………… Ý nghĩa……………………………………………………………………… Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Ngộ độc thực phẩm (NĐTP)……………………………………………… 1.1.1 Khái niệm………………………………………………………………… 1.1.2 Nguyên nhân gây ngộ độc thực phẩm 1.1.3 Ngộ độc thực phẩm vi sinh vật……………………………………… 1.2 Các nguyên nhân nhiễm khuẩn vào thịt…………………………………… 1.2.1 Nhiễm khuẩn từ thể động vật………………………………………… 1.2.2 Nhiễm khuẩn từ ô nhiễm nguồn nước…………………………………… 1.2.3 Nhiễm khuẩn từ đất, khơng khí………………………………………… 1.2.4 Nhiễm khuẩn trình giết mổ, chế biến bảo quản…………… 1.2.5 Nhiễm khuẩn số nguyên nhân khác…………………………… 1.3 Thịt tươi dạng hư hỏng thịt…………………………………… 1.3.1 Thịt tươi………………………………………………………………… 1.3.2 Các dạng hư hỏng thịt……………………………………………… 1.4 Ý nghĩa ô nhiễm thịt tiêu tổng số vi khuẩn hiếu khí…………… 10 1.5 Đặc điểm sinh học vi khuẩn E coli…………………………………… 11 1.6 Đặc điểm sinh học vi khuẩn Salmonella……………………………… 13 1.7 Tình hình nghiên cứu nước giới………………………… 16 1.7.1 Tình hình nghiên cứu nước………………………………………… 16 1.7.2 Tinh hình nghiên cứu giới 18 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 2.1 Đối tượng nghiên cứu 21 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 21 iv 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu……………………………………………………… 21 2.2 Vật liệu nghiên cứu 21 2.2.1 Vật liệu nghiên cứu 21 2.2.2 Thiết bị dụng cụ thí nghiệm 22 2.3 Nội dung nghiên cứu 22 2.3.1 Khảo sát tình hình giết mổ tiêu thụ thịt lợn 03 chợ thành phố Lào Cai (chợ Cốc Lếu, chợ Nguyễn Du, chợ Kim Tân) 2.3.2 Nghiên cứu tiêu tổng số vi khuẩn hiếu khí nhiễm thịt lợn 2.3.3 Nghiên cứu ô nhiễm vi khuẩn E coli thịt lợn số chợ thành phố Lào Cai 2.3.4 Nghiên cứu ô nhiễm vi khuẩn Salmonella thịt lợn khu chợ TP Lào Cai…………………………………………………………… 22 22 22 23 2.3.5 Đề xuất số biện pháp khống chế 23 2.4 Phương pháp nghiên cứu 23 2.4.1 Phương pháp điều tra 23 2.4.2 Phương pháp lấy mẫu…………………………………………………… 24 2.4.3 Phương pháp xác định tiêu tổng số vi khuẩn hiếu khí có thịt lợn 24 2.4.4 Phương pháp phát E.coli 25 2.4.4.1 Phương pháp xác định tiêu vi khuẩn E coli thịt lợn 25 2.4.4.2 Phương pháp xác định tiêu vi khuẩn E coli phân lập được……… 27 2.4.4.3 Phương pháp xác định gene quy định sản sinh độc tố đường ruột chủng vi khuẩn E coli………………………………………………………… 2.4.4.4 Phương pháp xác định tính mẫn cảm với số loại kháng sinh vi khuẩn E coli Salmonella phân lập được…………………………………… 28 30 2.4.5 Phương pháp phát Salmonella……………………………………… 31 2.4.5.1 Phương pháp xác định tiêu Salmonella thịt lợn……………… 31 2.4.5.2 Phương pháp xác định gene độc tố đường ruột Enterotoxin chủng Salmonella phân lập 34 v 2.4.5.3 Phương pháp giám định số đặc tính sinh vật, hóa học vi khuẩn Salmonella 36 2.4.5.4 Phương pháp thử độc lực chuột bạch 36 2.5 Phương pháp xử lý số liệu 37 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 38 3.1 Khảo sát tình hình giết mổ tiêu thụ thịt lợn khu chợ nghiên cứu địa bàn TP Lào Cai 38 3.2 Nghiên cứu tiêu tổng số vi khuẩn hiếu khí nhiễm thịt lợn……… 39 3.3 Nghiên cứu ô nhiễm vi khuẩn E coli thịt lợn số khu chợ thuộc TP Lào Cai 3.3.1 Xác định tiêu vi khuẩn E coli nhiễm thịt lợn số khu chợ thuộc TP Lào Cai 3.3.2 Xác định tỷ lệ nhiễm vi khuẩn E coli thịt lợn theo thời gian sau giết mổ 41 41 43 3.3.3 Xác định tỷ lệ nhiễm vi khuẩn E coli thịt lợn theo tháng lấy mẫu 45 3.3.4 So sánh mức độ nhiễm E coli thịt với TCVN 7046: 2009 47 3.3.5 Giám định đặc tính sinh vật, hóa học vi khuẩn E coli phân lập 49 3.3.6 Xác định độc lực chủng vi khuẩn E coli phân lập 50 3.3.7 Xác định tính mẫn cảm với số loại kháng sinh chủng E coli phân lập 3.3.8 Kết xác định gene gây ngộ độc thực phẩm PCR vi khuẩn E coli phân lập 3.4 Nghiên cứu ô nhiễm vi khuẩn Salmonella thịt lợn khu chợ thuộc TP Lào Cai 52 55 57 3.4.1 Xác định tỷ lệ nhiễm vi khuẩn Salmonella thịt lợn tươi 57 3.4.2 Xác định tỷ lệ nhiễm vi khuẩn Salmonella thịt lợn theo thời gian sau giết mổ 3.4.3 Xác định tỷ lệ nhiễm vi khuẩn Salmonella thịt lợn theo tháng lấy mẫu 58 61 3.4.4 So sánh mức độ nhiễm Salmonella thịt với tiêu vệ sinh an toàn 63 vi thực phẩm theo Tiêu chuẩn Việt Nam 7046:2009……………………………… 3.4.5 Giám định số đặc tính sinh vật, hóa học vi khuẩn Salmonella phân lập 64 3.4.6 Xác định độc lực chủng vi khuẩn Salmonella phân lập được…… 65 3.4.7 Xác định tính mẫn cảm với số loại kháng sinh chủng Salmonella phân lập 3.4.8 Xác định gene quy định sản sinh độc tố đường ruột chủng vi khuẩn Salmonella phân lập 3.6 Đề xuất biện pháp hạn chế nhiễm khuẩn thịt lợn tươi TP Lào Cai……………………………………… KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 67 69 71 72 Kết luận 72 Đề nghị……………………………………………………………………… 73 TÀI LIỆU THAM KHẢO 74 vii DANH MỤC TỪ VÀ CỤM TỪ VIẾT TẮT VK: Vi khuẩn VKHK: Vi khuẩn hiếu khí E coli: Escherichia coli S aureus: Staphylococcus aureus B cereus: Bacillus cereus C perfringens: Clostridium perfringens C botulinum: Clostridium botulinum pp: Page CFU Colony forming unit VSATTP: Vệ sinh an toàn thực phẩm Cs: Cộng FAO: Food and Agricultural Organization NĐTP: Ngộ độc thực phẩm Nxb: Nhà xuất VSTY: Vệ sinh thú y TP: Thành phố QCKT: Quy chuẩn kỹ thuật viii DANH MỤC BẢNG BIỂU Tên bảng Trang Bảng 1.1 Tình hình ngộ độc thực phẩm Việt Nam……………………… Bảng 1.2 Đánh giá kết cảm quan thịt…………………………………… Bảng 2.1 Các tiêu vi sinh vật thịt tươi theo TCVN 7046: 2009…… 27 Bảng 2.2 Bảng đánh giá mức độ mẫn cảm vi khuẩn với số loại kháng sinh (NCCLS - 2002)………………………………………………… 31 Bảng 3.1 Tình hình giết mổ tiêu thụ thịt lợn khu chợ thuộc thành 38 phố Lào Cai: chợ Cốc Lếu, chợ Nguyễn Du, chợ Kim Tân………………… Bảng 3.2 Kết xác định tiêu tổng số hiếu khí nhiễm thịt lợn…… 40 Bảng 3.3 Kết xác định tỷ lệ, mức độ nhiễm vi khuẩn E.coli thịt lợn 42 Bảng 3.4 Kết xác định tỷ lệ nhiễm vi kkhuẩn E coli thịt lợn theo thời gian sau giết mổ ………………………………………………… Bảng 3.5 Kết xác định tỷ lệ nhiễm vi khuẩn E.coli thịt theo tháng Bảng 3.6 So sánh mức độ nhiễm E coli thịt lợn với tiêu vệ sinh an toàn thực phẩm theo TCVN 7046: 2009…………………………………… Bảng 3.7 Kết giám định số đặc tính sinh vật, hóa học vi khuẩn E coli phân lập được………………………………………………………… Bảng 3.8 Kết xác định độc lực chủng E coli phân lập được… Bảng 3.9 Kết xác định tính mẫn cảm với số loại kháng sinh chủng vi khuẩn E coli phân lập được……………………………………… Bảng 3.10 Kết xác định gene quy định sản sinh độc tố đường ruột chủng vi khuẩn E coli phân lập được……………………………………… Bảng 3.11 Kết xác định tỷ lệ nhiễm vi khuẩn Salmonella thịt lợn… Bảng 1.12 Kết xác định tỷ lệ nhiễm vi khuẩn Salmonella thịt lợn theo thời gian sau giết mổ …………………………………………… Bảng 1.13 Kết tỷ lệ nhiễm vi khuẩn Salmonella theo tháng lấy mẫu… Bảng 1.14 So sánh mức độ nhiễm Salmonella thịt lợn với tiêu vệ sinh an toàn thực phẩm theo TCVN 7046: 2009…………………………… 44 45 48 49 51 52 56 57 59 61 63 ...ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN VĂN GIANG NGHIÊN CỨU SỰ Ô NHIỄM ESCHERICHIA COLI, SALMONELLA TRÊN THỊT LỢN TƯƠI, MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VI KHUẨN VÀ ĐỀ XUẤT BIỆN PHÁP KHỐNG... Nghiên cứu tiêu tổng số vi khuẩn hiếu khí nhiễm thịt lợn 2.3.3 Nghiên cứu ô nhiễm vi khuẩn E coli thịt lợn số chợ thành phố Lào Cai 2.3.4 Nghiên cứu ô nhiễm vi khuẩn Salmonella thịt. .. tính sinh học vi khuẩn đề xuất biện pháp khống chế thành phố Lào Cai Mục tiêu - Khảo sát tình hình giết mổ, tiêu thụ thịt lợn số chợ TP Lào Cai - Xác định tỷ lệ nhiễm, số đặc tính sinh vật học