Khả năng kháng khuẩn của nấm linh chi

MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC HÌNH v DANH MỤC BẢNG vi PHẦN THỨ NHẤT: MỞ ĐẦU .1 1.1 Đặt vấn đề .1 1.2 Mục tiêu 1.2.1 Mục tiêu chung 1.2.2 Mục tiêu cụ thể PHẦN HAI: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu nấm linh chi .3 2.1.1 Giới thiệu chung 2.1.2 Thành phần hóa học nấm linh chi 2.1.3 Tác dụng sức khỏe người 2.2 Vi sinh vật gây bệnh 2.2.1 Escherichia coli 2.2.2 Salmonella enterica 2.2.3 Bacillus cereus .6 2.2.4 Staphylococcus epidermidis 2.2.5 Listeria monocytogenes PHẦN BA: VẬT LIỆU - NỘI DUNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .8 3.1 Vật liệu 3.1.1 Cuống nấm linh chi 3.1.2 Vi sinh vật 3.1.3 Môi trường nuôi cấy vi sinh vật .8 3.2 Nội dung nghiên cứu .8 3.3 Phương pháp nghiên cứu 3.3.1 Phương pháp công nghệ 3.3.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 11 3.3.3 Phương pháp phân tích .12 3.3.4 Phương pháp xử lí số liệu 13 PHẦN BỐN: KẾT QUẢ - THẢO LUẬN 14 4.1 Đánh giáchất lượng cuống nấm linh chi nguyên liệu 14 4.2 Kết xác định điều kiện thích hợp cho trình trích ly polysaccharide cuống nấm linh chi 15 4.2.1 Kết xác định tỉlệ nguyên liệu thích hợp cho q trình trích ly polysaccharide cuống nấm linh chi 15 4.2.2 Kết ảnh hưởng nhiệt độ thời gian đến q trình trích ly polysaccharide cuống nấm linh chi 16 4.3 Kết xác định khả kháng vi sinh vật gây bệnh dịch cuống nấm linh chi 18 PHẦN NĂM: KẾT LUẬN - ĐỀ NGHỊ .21 5.1 Kết luận .21 5.2 Đề nghị 21 TÀI LIỆU THAM KHẢO 22 PHỤ LỤC 25 DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Nấm linh chi Hình 3.1 Cuống nấm linh chi Hình 3.2 Sơ đồ quy trình dự kiến xác định khả kháng vi sinh vật gây bệnh dịch cuống nấm linh chi .9 Hình 4.1 Khả kháng vi sinh vật gây bệnh dịch chiết cuống nấm linh chi 20 DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Thành phần nấm linh chi Bảng 4.1 Một số tiêu chất lượng cuống nấm linh chi nguyên liệu .14 Bảng 4.2 Ảnh hưởng tỉ lệ ngun liệu đến q trình trích ly polysaccharide cuống nấm linh chi 15 Bảng 4.3 Ảnh hưởng nhiệt độ thời gian đến trình trích ly polysaccharide cuống nấm linh chi 17 Bảng 4.4 Đường kính vòng kháng khuẩn (mm) dịch chiết cuống nấm linh chi 18 PHẦN THỨ NHẤT: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Nấm linh chi (Ganoderma lucidum) phân bố chủ yếu vùng nhiệt đới cận nhiệt đới có Việt Nam, trồng chủ yếu khu vực Tây Nguyên mang lại thu nhập đáng kể cho người nuôi trồng Tuy nhiên lĩnh vực chế biến nấm linh chi chưa phát triển phù hợp với tiềm nguyên liệu, đặc biệt phần cuống nấm chưa sử dụng cách hiệu Một số thành phần hóa học nấm linh chi có tác dụng chữa bệnh tốt Các kết nghiên cứu dược lý lâm sàng chứng minh linh chi có tác dụng an thần, giảm đau, bảo vệ gan, giải độc, hạ đường huyết, thải trừ chất phóng xạ, chống xơ vữa động mạch, giúp cho tim chịu trạng thái thiếu máu Polysaccharide linh chi có tác dụng ức chế tế bào ung thư, tăng miễn dịch cho thể (Trần Văn Mão, 2014) Nhiều nghiên cứu chứng minh nấm linh chi có chứa thành phần kháng khuẩn có khả ức chế số loại vi khuẩn Polysaccharide triterpenoid xem hoạt chất quan trọng nấm linh chi có khả ức chế nhân HIV, virus viêm gan siêu vi B, virus Herpes (Skalicka-Wozniak et al., 2012; Wasser, 2010) Hiện giới tồn nhiều vi sinh vật gây bệnh chúng phân bố khắp nơi tự nhiên, đặc biệt thực phẩm, Escherichia coli, Samonella enterica, Baccillus cereus, Staphylococcus epidermidis, Listeria monocytogenes, vi sinh vật dễ gây bệnh cho người thông qua thực phẩm Ngoài chế gây bệnh ăn vào lượng bào tử vi khuẩn (nhiễm khuẩn), thực phẩm bị nhiễm độc tố có nguồn gốc từ vi khuẩn Chúng sinh nội độc tố, ngoại độc tố hai Ngồi ra,có thể sinh bào tử không sinh bào tử, di động khơng di động được, hiếu khí, kị khí kị khí tùy nghi Vi khuẩn phát triển thực phẩm đến số lượng đủ lớn sinh độc tố: gồm có Bacillus cereus, Staphylococcus aureus Clostridium botulinum.Vi khuẩn sinh nội độc tố ruột không gây nhiễm tế bào ruột: gồm có Bacillus cereus, Clostridium perfringens.Vi khuẩn sinh nội độc tố sau bám dính vào tế bào biểu mô không xâm nhập vào tế bào: gồm có chủng E coli gây tiêu chảy xuất huyết (Quản Lê Hà, 2006; Nguyễn Đức Lượng, 2005) Polysaccharide, trierpennoid nấm linh chi có tác dụng ức chế tế bào ung thư chúng có khả kháng vi sinh vật gây bệnh kể Trên thực tế, Khoa Công nghệ sinh học, Học viện nông nghiệp Việt Nam nghiên cứu nuôi trồng thành công loại nấm linh chi Tùy thuộc vào giống mà nấm linh chi có cuống khơng có cuống, lồi khơng có cuống lồi lâu năm, hóa gỗ Trên thị trường sản phẩm từ nấm linh chi đa dạng thường có phần mũ nấm mũ nấm lớp bào tử có chứa hàm lượng hoạt tính cao Phần cuống nấm khơng có lơng khơng có lớp bào tử mũ nấm nên chưa tận dụng triệt để trình chế biến nấm linh chi Nhiều nghiên cứu cho thấy, hoạt chất cuống nấm không mũ nấm có lượng đáng kể Xuất phát từ thực tế để tận dụng tối đa nguồn nguyên liệu sẵn có đề tài: “Xác định khả kháng vi sinh vật gây bệnh dịch cuống nấm linh chi” quan tâm nghiên cứu Các thành phần hoạt chất nấm linh chi đặc biệt triterpenoid polysaccharide nhà khoa học chứng minh lợi ích sức khỏe Hơn người ta chưa tìm thấy tác hại nấm linh chi thể Vì việc bổ sung nước uống có chứa linh chi vào thực đơn hàng ngày cách tốt để tăng cường sức khỏe phòng ngừa bệnh tật hiệu 1.2 Mục tiêu 1.2.1 Mục tiêu chung Xác định khả kháng vi sinh vật gây bệnh dịch cuống nấm linh chi với nồng độ dịch chiết xác định 1.2.2 Mục tiêu cụ thể - Xác định số tiêu chất lượng nguyên liệu; - Xác định điều kiện trích ly để thu dịch có hàm lượng hoạt chất cao; - Xác định nồng độ dịch chiết cuống nấm linh chi để kháng vi sinh vật gây bệnh Escherichia coli, Salmonella enterica, Bacillus cereus, Staphylococcus epidermidis, Listeria monocytogenes PHẦN HAI: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu nấm linh chi Phần 2.1 giới thiệu chung nấm linh chi, thành phần hóa học tác dụng nấm linh chi sức khỏe người 2.1.1 Giới thiệu chung Nấm linh chi, tên khoa học Ganoderma lucidum, thuộc họ nấm lim (Ganodermataceae) Nấm linh chi có tên gọi khác tiên thảo, nấm trường thọ, vạn niên nhung Nấm linh chi loại nấm hóa gỗ, sống năm hay lâu năm Mũ nấm có dạng thận, tròn dạng quạt, dày có đường kính - 10cm, cuống nấm dài đính lệch, hình trụ tròn hay dẹt, có phân nhánh; mặt có mũ có vòng đồng mép lượn sóng Nấm linh chi gồm phần: cuống Hình 2.1 Nấm linh chi tâm, nấm mũ nấm - Cuống dài ngắn tùy theo chủng loại, đính bên, hình trụ, có đường kính 0,5 - 3cm, lớp vỏ cuống màu nâu, nâu đỏ, nâu đen, khơng có lơng, bóng Cuống nấm phân nhánh, đơi có uốn khúc cong queo - Mũ nấm có hình rẻ quạt hay hình bán nguyệt, hình thận, kích thước thay đổi: rộng - 25cm, dài - 30cm, dày 0,5 - 2cm Mặt bóng, màu từ vàng chanh, vàng nghệ đến vàng nâu, vàng cam, đỏ nâu - nâu tím, có đường vân đồng tâm, lượn sóng vân tán xạ Phần có cuống đính gồ lên lõm xuống Mặt màu nâu nhạt, mang ống nhỏ, chứa bào tử, chín bào tử có màu nâu Khi nấm trưởng thành phát tán bào tử (Trần Văn Mão, 2014) 2.1.2 Thành phần hóa học nấm linh chi Thành phần hóa học định đến tính dược liệu nấm linh chi Khơng nhiều lồi nấm khác có hàm lượng nước đến 90%, nấm linh chi tươi khoảng 75% nước Thành phần chủ yếu nấm linh chi thể bảng 2.1 Bảng 2.1 Thành phần nấm linh chi Thành phần Chất xơ Carbonhydrate Tỉ lệ (%) 59 26 - 28 Protein 7-8 Chất béo thô 3-5 Tro 1,8 (Mau et al.,2001; Wasser, 2010) Trong nấm linh chi chứa hàm lượng chất xơ cao (59%).Carbonhydrate nấm linh chi chiếm hàm lượng cao (26 - 28%) Hàm lượng protein nấm linh chi %, thấp nhiều loài nấm khác protein nấm linh chi lại có hầu hết amino acid thiết yếu đặc biệt lysine leusine Hàm lượng chất béo thấp tỉ lệ acid béo khơng no cao tính chất quan trọng tạo nên giá trị cho nấm linh chi (Sanodiya et al., 2009; Wachtel-Galor et al., 2011) Theo Mizuno (1995), chiết xuất nấm linh chi chứa nguyên tố khoáng kali, magie, natri, sắt, kẽm, mangan, canxi, đồng, selenium germanium; canxi, kali, magie thành phần kim loại chính, germanium đứng thứ số ngun tố khống có hàm lượng cao (489µg/g) Germanium có tác dụng tăng cường khả mang oxygen, giảm nguy xuất ung thư, giảm nguy hiểm từ kết trị liệu phóng xạ ngăn chặn bệnh thiếu máu cục Bên cạnh đó, nấm linh chi chứa nhiều phân tử có hoạt tính sinh học terpenoid, steroid, phenol, nucleotide dẫn xuất chúng Hoạt tính sinh học nấm linh chi có chủ yếu polysaccharide, peptidoglycan triterpene mang lại (Boh et al., 2007; Zhou et al., 2007) Về mặt định lượng thí nghiệm Chan et al., (2008) phân tích thành phần 11 mẫu nấm linh chi thương mại (được mua Châu Âu) nhận thấy có khác biệt hàm lượng polysaccharide mẫu giao động khoảng từ 1,1 - 5,8% Nguyên nhân dẫn đến khác biệt giống lồi, ngồi điều kiện mơi trường trình nấm phát triển ảnh hưởng lớn đến thành phần hoạt chất nấm Polysaccharide phân tử carbonhydrate cao phân tử gồm chuỗi dài phân tử monosaccharide liên kết với mối liên kết glycosidic Tùy thuộc vào cấu trúc, đại phân tử có tính chất khác biệt với khối cấu trúc monosaccharide chúng Trong nấm linh chi chứa nhiều polysaccharide có khối lượng phân tử lớn, hợp chất mang hoạt tính sinh học tìm thấy tất phận nấm linh chi (Bao et al., 2001; Wachtel-Galor et al, 2004) Theo kết phân tích, thành phần chủ yếu polysaccharide nấm linh chi đường glucose (Bao et al., 2001; Wang et al., 2002) Nhờ thành phần hóa học quan trọng nên nấm linh chi loại thảo dược sử dụng Đông y từ lâu đời Các tác dụng sức khỏe nấm linh chi trình bày phần 2.1.3 Tác dụng sức khỏe người Nấm linh chi có nhiều tác dụng việc hỗ trợ sức khỏe người: - Tác dụng nấm linh chi với hệ miễn dịch: Nhiều kết nghiên cứu cho thấy khả kích thích hệ miễn dịch nấm linh chi Theo Roy (2006) linh chi dùng thuốc bổ, đặc biệt chất điều biến miễn dịch Linh chi dùng để tăng cường chức miễn dịch đề phòng nhiễm trùng hội phác đồ điều trị cho bệnh nhân nhiễn HIV Nhờ khả điều biến miễn dịch ức chế sản sinh histamine, linh chi dùng tác nhân chống viêm điều trị hen suyễn dị ứng Linh chi dược dùng điều trị viêm khớp, viêm phế quản dị ứng,…(Nguyễn Hữu Đống,2000; Wasser, 2010) - Tác dụng chữa trị ung thư: Triterpeniod nấm linh chi có tác dụng chống ung thư in vivo hiệu ứng ức chế dòng tế bào ung thư, bao gồm ung thư vú, ung thư tụy, ung thư phổi, ung thư ruột kết, ung thư da ung thư tuyến tiền liệt (Boh, 2013; Wachtel-Galor et al.,2011) Một số nghiên cứu lâm sàng chứng minh vai trò linh chi điều trị ung thư tuyến tiền liệt cách sử dụng hỗn hợp thảo dược chứa linh chi làm giảm rõ rệt lượng kháng nguyên đặc hiệu tuyến tiền liệt (Gao et al., 2003) - Hỗ trợ chức tim mạch hệ tuần hồn: Nấm linh chi có tác dụng tích cực đến chức hệ tuần hoàn tim mạch: giảm cholesterol thừa máu, chống tình trạng mỡ máu cao, làm giãn mạch tăng cường lưu thông máu, chống xơ vữa động mạch, tăng tần số biên độ co tim có tác dụng định điều trị bệnh tim, điều hòa huyết áp, giảm lượng đường máu, chống kết tụ tiểu cầu, (Wasser, 2010) - Chống oxy hóa: Polysaccharide triterpenoid nấm linh chi thể khả chống oxy hóa in vitro Các hoạt chất linh chi giúp thể tiêu diệt gốc tự do, chống oxy hóa, từ ngăn ngừa ung thư bệnh mãn tính khác(WhachtelGalor et al., 2011; Wasser, 2010) - Tăng khả cung cấp oxy cho tim, não: Vì germanium linh chi tăng cường khả cung cấp oxy cho tế bào, linh chi dùng để giải tỏa căng thẳng, chữa đau đầu, chóng mặt, buồn nơn, ngủ, giảm tình trạng thiếu oxy động mạch vành bị tắc nghẽn; giúp thể chịu tình trạng huyết áp thấp(Wasser, 2010) 2.2 Vi sinh vật gây bệnh Vi sinh vật phân bố khắp nơi tự nhiên, xâm nhập vào thể người chúng gây nên bệnh khác như: sốt thương hàn, viêm ruột non, nhiễm trùng thể… Dưới giới thiệu số vi sinh vật gây bệnh thông qua thực phẩm 2.2.1 Escherichia coli Escherichia coli thuộc họ Enterobacteriaceae, có kích thước 1,2 - 1,5 x 2,0- 6,0 µm, lồi trực khuẩn, Gram âm, hiếu khí kị khí tùy nghi, phát triển tốt mơi trường ni cấy thơng thường, nhiệt độ thích hợp 37 oC, pH thích hợp từ 7,0 - 7,2 Nhạy cảm với trùng Pasteur Escherichia coli vi khuẩn gây bệnh quan trọng, đứng đầu vi khuẩn gây ỉa chảy, viêm đường tiết niệu, viêm đường mật; đứng hàng đầu nguyên gây nhiễm khuẩn huyết E coli gây nhiều bệnh khác viêm phổi, viêm màng não, nhiễm khuẩn vết thương (Nguyễn Thị Thanh Thuỷ, 2017) 2.2.2 Salmonella enterica Thuộc họ Enterobacteriaceae; trực khuẩn Gram âm, yếm khí tùy tiện, kích thước 0,7 - 1,5 x 2,0 - 5,0µm; có khả tự dưỡng lên men đường glucose, thường không sử dụng đường lactose đường saccharose pH thích hợp từ 6,0- 9,0; phát triển tốt pH = 7,2 Đây loại vi khuẩn sống ống ruột người, động vật gây nên tượng ngộ độc thực phẩm điều kiện không đảm bảo vệ sinh an toàn thực phẩm Salmonellosis nhiễm trùng thực phẩm gây nên vi khuẩn Salmonella Các triệu chứng bao gồm đột ngột đau bụng, tiêu chảy, sốt, buồn nôn ói mửa Tình trạng thể bị nước nghiêm trọng, nhóm người có nhiều rủi ro người già, trẻ nhỏ người có hệ miễn dịch yếu Triệu chứng thường xảy vòng từ đến 72 tiếng kéo dài từ đến ngày Bệnh gây từ Salmonella người bệnh thương hàn số bệnh khác nhiễm trùng đường tiêu hóa nhiễm trùng số tổ chức khác (não, phổi ) (Nguyễn Thị Thanh Thuỷ, 2017) 2.2.3 Bacillus cereus Bacillus cereuslà lồi trực khuẩn hiếu khí, bào tử dạng hình ovan, có khả sinh nha bào, thuộc họ Bacillaceae, kích thước 3-5 x 1-1,2µm Bacillus cereus, Bacillus thuringiensis có khả chuyển động nhờ có vành lơng rung pH thích hợp để sinh trưởng tốt từ 7,0 - 7,2 Các dòng Bacillus cereus khơng thể nhân độ pH 4,8 Chúng phát triển khoảng 10 đến 50 oC, phát triển mạnh khoảng từ 30 đến 40oC Tuy nhiên chủng chịu lạnh nhân nhiệt độ từ đến 6oC thời gian nhân thường dài đáng kể Bacillus cereus sản sinh hai loại độc tố Độc tố gây tiêu chảy (diarrhoed toxin) độc tố gây nơn mửa (emetic toxin) Ngồi vi khuẩn có enzyme hemolyzin protein gây độc mạnh gây chết người Độc tố trung hòa cholesterol huyết lại góp phần cho phát triển vi khuẩn Lượng gây ngộ độc tiêu chảy xảy số lượng tế bào tối thiểu từ 10 5/g, gây nôn mửa số lượng tế bào tối thiểu từ 106/g cộng thêm lượng lớn độc tố ruột phải hình thành để chống chịu với pH dày enzyme proteolytic tá tràng Những nhân tố làm giảm nhiều độ hoạt động độc tố đường ruột so với mức độ ban đầu (Nguyễn Thị Thanh Thuỷ, 2017) 2.2.4 Staphylococcus epidermidis Cầu khuẩn Staphylococcus epidermidis thuộc họMicrococceae, Gram dương, loại vi khuẩn da phổ biến Nó ưa sống nơi nhiều mồ hôi, nách, màng mũi, với vi sinh vật khác, chúng tạo chất từ mồ hôi, mang lại mùi thể liên quan đến mồ hôi Những vi khuẩn nàygiống nhóm Staphylococcus khác chúng xếp với chùm nho Kích thước - 2µm, chúng phát triển tốt pH từ 7,0 - 7,2 Tụ cầu gây bệnh hình thành độc tố Tụ cầu gây ngộ độc thức ăn chủ yếu độc tố ruột Nếu tồn vi khuẩn sống mà khơng có độc tố ruột khơng thể Dulger B., Gonuz A (2004) Antimicrobial activity of certain plants used in Turkish traditional medicine Asian Journal of Plant Science 3: 104-107 Gao Y H., Zhou S F., Jiang W Q., Huang M., Sai X H (2003) Effects of Ganopoly (a Ganoderma lucidum polysaccharide extract) on immune functions in advancedstage cancer patients Immunol Invest 32:201 - 15 Matsunaga Y., Wahyudiono, Machmudah S., Askin R., Quitain A T., Sasaki M., Goto M (2013) Hydrothermal extraction and micronization of polysaccharides from ganoderma lucidum in a one step process Bioresources (01), 461-471 Mau J L., Lin H C., Chen C C (2001) Non-volatile components of several medicinal mushrooms Food Res Int 34:521 - Nahata A., Dixit V K (2012) Ganoderma lucidum is an inhibitor of testosteroneinduced prostatic hyperplasia in rats Andrologia 44 Suppl 1: 160-174 Ping C.X., YanC., Bing L.S., Guo C.Y., Yun L.J., Ping L.L (2009) Free radical scavenging of Ganoderma lucidum polysaccharide and its effect on antioxidant enzymes and immunity activities in cervical carcinoma rats Carbohydrate Polymes 77: 389-393 Wachtel-Galor S., Yuen J., Buswell J A.,Benzie I F F (2011) Herbal Medicine: Biomolecular and Clinical Aspects, Boca Raton: CRC Press Sanodiya B S., Thakur G S., Baghel R K., Prasad G B., Bisen P S (2009) Ganoderma lucidum: A potent pharmacological macrofungus Curr Pharm Biotechnol 10(8):717- 42 Sattler C., Labbe N., Harper D., Elder T., Rials T (2008) Effects of hot water extraction on physical and chemical characteristics of oriented strand board (OSB) wood flakes Clean Soil Air Water, 36, pp 674- 681 Wasser S P (2010) Medicinal mushroom science: history, current status, future trends, and unsolved problems Int J Med Mushrooms 12:1-16 Yang B K., Kim D H., Jeong S C., Das S., Choi Y S., Shin J S., Song S C., Song C H (2002) Hypoglycemic effect of a Lentinus edodes exo-polymer produced from a submerged mycelial culture Bioscience Biotechnology and Biochemistry 66(5): 937942 Yu Y., Lou X., Wu H.(2008) Some recent advances in hydrolysis of biomass in hot compressed water and its comparisons with other hydrolysis methods Energy and Fuels, 22, pp 46-60 Tài liệu internet Nghiên cứu số chế phẩm dược liệu có nguồn gốc từ linh chi Việt Nam Truy cập thứ 7, ngày 16 - - 2018 từ http://luanvan.net.vn/luan-van/de-tai-nghien-cuu-motso-che-pham-duoc-lieu-co-nguon-goc-tu-nam-linh-chi-tai-viet-nam-52767/ Khảo sát thành phần hóa học khả kháng số chủng vi sinh vật đường ruột xuân hoa Truy cập thứ 3, ngày 18 - - 2018 từhttp://luanvan.net.vn/luanvan/khoa-luan-khao-sat-thanh-phan-hoa-hoc-va-kha-nang-khang-mot-so-chung-visinh-vat-duong-ruot-cua-cay-xuan-hoa-38059/ Quản Lê Hà, 20006; Nguyễn Đức Lượng, Phạm Minh Tâm, 2005 Độc tố vi khuẩn gây bệnh truyền qua thực phẩm Truy cập thứ 4, ngày 12 - 12 - 2018 từhttps://vi.wikipedia.org/wiki/%C4%90%E1%BB%99c_t%E1%BB%91_vi_khu %E1%BA%A9n_g%C3%A2y_b%E1%BB%87nh_truy%E1%BB%81n_qua_th %E1%BB%B1c_ph%E1%BA%A9m Nguyễn Thị Lâm Đoàn, Lưu Thị Thùy Dương, 26-12-2017 Tuyển chọn vi khuẩn lactic có số hoạt tính sinh học để ứng dụng xử lí phế phụ phẩm nơng nghiệp làm thức ăn chăn nuôi cho gia xúc nhai lại Truy cập từ http://doc.edu.vn/tai-lieu/khoaluan-tim-hieu-ve-vi-khuan-salmonella-11369/ PHỤ LỤC One-way ANOVA: Xác định thời gian nhiệt độ thích hợp cho trích ly Source DF SS MS F P CT 24 190428.3 7934.5 763.03 0.000 Error 50 519.9 10.4 Total 74 190948.2 S = 3.225 R-Sq = 99.73% R-Sq(adj) = 99.60% Level CT1 CT10 CT11 CT12 CT13 CT14 CT15 CT16 CT17 CT18 CT19 CT2 CT20 CT21 CT22 CT23 CT24 CT25 CT3 CT4 CT5 CT6 CT7 CT8 CT9 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev N Mean StDev -+ -+ -+ -+ -3 226.36 4.24 *) 412.42 5.98 *) 242.10 2.12 *) 249.97 1.29 (*) 255.03 1.29 (*) 313.21 2.58 (* 401.18 4.69 (*) 245.19 0.84 (*) 251.94 0.84 *) 257.00 0.84 *) 338.22 2.12 (* 228.33 5.06 (* 316.30 7.27 *) 241.26 1.76 *) 247.72 1.46 (* 250.82 1.29 (*) 253.63 0.84 (* 250.25 1.69 (*) 234.23 2.53 (*) 238.17 1.76 (* 324.17 3.19 (*) 237.61 0.84 (* 244.63 2.58 (*) 248.29 1.95 (* 310.12 6.59 (*) -+ -+ -+ -+ -250 300 350 400 Pooled StDev = 3.22 Hsu's MCB (Multiple Comparisons with the Best) Family error rate = 0.05 Critical value = 2.78 Intervals for level mean minus smallest of other level means Level Lower Center Upper + -+ -+ -+ CT1 -9.30 -1.97 5.36 (-*) CT10 0.00 186.06 193.39 ( *) CT11 0.00 15.74 23.07 ( *) CT12 0.00 23.61 30.94 ( -*) CT13 0.00 28.67 36.00 ( *) CT14 0.00 86.85 94.18 ( -*-) CT15 0.00 174.82 182.15 ( *) CT16 0.00 18.83 26.16 ( *) CT17 0.00 25.58 32.91 ( -*) CT18 CT19 CT2 CT20 CT21 CT22 CT23 CT24 CT25 CT3 CT4 CT5 CT6 CT7 CT8 CT9 0.00 0.00 -5.36 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 30.64 37.96 ( *) 111.86 119.19 ( *) 1.97 9.30 (*-) 89.94 97.27 ( *) 14.90 22.22 (-*-) 21.36 28.69 ( -*) 24.45 31.78 ( -*) 27.26 34.59 ( *) 23.89 31.22 ( -*) 7.87 15.20 (*-) 11.80 19.13 (-*) 97.81 105.14 ( -*-) 11.24 18.57 (-*) 18.27 25.60 ( *) 21.92 29.25 ( -*) 83.75 91.08 ( -*) + -+ -+ -+ 60 120 180 Grouping Information Using Tukey Method CT N Mean Grouping CT10 412.42 A CT15 401.18 B CT19 338.22 C CT5 324.17 D CT20 316.30 DE CT14 313.21 E CT9 310.12 E CT18 257.00 F CT13 255.03 FG CT24 253.63 FGH CT17 251.94 FGHI CT23 250.82 FGHIJ CT25 250.25 FGHIJ CT12 249.97 FGHIJ CT8 248.29 FGHIJK CT22 247.72 FGHIJKL CT16 245.19 GHIJKL CT7 244.63 HIJKL CT11 242.10 IJKLM CT21 241.26 JKLM CT4 238.17 KLMN CT6 237.61 LMN CT3 234.23 MNO CT2 228.33 NO CT1 226.36 O Means that not share a letter are significantly different Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of CT Individual confidence level = 99.97% CT = CT1 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT10 175.88 186.06 196.24 (*) CT11 5.56 15.74 25.92 (*) CT12 13.42 23.61 33.79 (*) CT13 CT14 CT15 CT16 CT17 CT18 CT19 CT2 CT20 CT21 CT22 CT23 CT24 CT25 CT3 CT4 CT5 CT6 CT7 CT8 CT9 18.48 28.67 38.85 (*) 76.66 86.85 97.03 (*) 164.63 174.82 185.00 (*-) 8.65 18.83 29.01 (*) 15.39 25.58 35.76 (*) 20.45 30.64 40.82 (*) 101.68 111.86 122.04 (*) -8.22 1.97 12.15 (*) 79.75 89.94 100.12 (*) 4.71 14.90 25.08 (*-) 11.18 21.36 31.54 (*) 14.27 24.45 34.64 (*) 17.08 27.26 37.45 (*) 13.71 23.89 34.07 (*) -2.31 7.87 18.05 (*) 1.62 11.80 21.99 (*) 87.62 97.81 107.99 (*) 1.06 11.24 21.43 (*) 8.08 18.27 28.45 (*) 11.74 21.92 32.11 (*) 73.57 83.75 93.94 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT10 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT11 -180.50 -170.32 -160.14 (*) CT12 -172.63 -162.45 -152.27 (*) CT13 -167.58 -157.39 -147.21 (*) CT14 -109.40 -99.21 -89.03 (*) CT15 -21.43 -11.24 -1.06 (*) CT16 -177.41 -167.23 -157.04 (*) CT17 -170.67 -160.48 -150.30 (*) CT18 -165.61 -155.42 -145.24 (*) CT19 -84.38 -74.20 -64.02 (*) CT2 -194.28 -184.09 -173.91 (*) CT20 -106.31 -96.12 -85.94 (*) CT21 -181.35 -171.16 -160.98 (*) CT22 -174.88 -164.70 -154.52 (*) CT23 -171.79 -161.61 -151.42 (*) CT24 -168.98 -158.80 -148.61 (*) CT25 -172.35 -162.17 -151.99 (*) CT3 -188.37 -178.19 -168.01 (*) CT4 -184.44 -174.26 -164.07 (*) CT5 -98.44 -88.25 -78.07 (*) CT6 -185.00 -174.82 -164.63 (-*) CT7 -177.97 -167.79 -157.61 (*) CT8 -174.32 -164.14 -153.95 (*) CT9 -112.49 -102.30 -92.12 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT11 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT12 -2.31 7.87 18.05 (*) CT13 2.74 12.93 23.11 (*) CT14 60.92 71.11 81.29 (*) CT15 148.89 159.08 169.26 (*) CT16 -7.09 3.09 13.28 (*) CT17 -0.35 9.84 20.02 (*) CT18 4.71 14.90 25.08 (*-) CT19 85.94 96.12 106.31 (*) CT2 -23.96 -13.77 -3.59 (*) CT20 64.02 74.20 84.38 (*) CT21 -11.03 -0.84 9.34 (*) CT22 -4.56 5.62 15.81 (*) CT23 -1.47 8.71 18.90 (*) CT24 1.34 11.52 21.71 (*) CT25 -2.03 8.15 18.33 (*) CT3 -18.05 -7.87 2.31 (*) CT4 -14.12 -3.93 6.25 (*) CT5 71.88 82.07 92.25 (*) CT6 -14.68 -4.50 5.69 (*) CT7 -7.65 2.53 12.71 (*) CT8 -4.00 6.18 16.37 (*) CT9 57.83 68.02 78.20 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT12 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT13 -5.12 5.06 15.24 (-*) CT14 53.05 63.24 73.42 (*) CT15 141.02 151.21 161.39 (*) CT16 -14.96 -4.78 5.41 (*) CT17 -8.22 1.97 12.15 (*) CT18 -3.16 7.03 17.21 (*) CT19 78.07 88.25 98.44 (*) CT2 -31.83 -21.64 -11.46 (*) CT20 56.15 66.33 76.51 (*) CT21 -18.90 -8.71 1.47 (*) CT22 -12.43 -2.25 7.94 (*) CT23 -9.34 0.84 11.03 (*) CT24 -6.53 3.65 13.84 (*) CT25 -9.90 0.28 10.46 (*) CT3 -25.92 -15.74 -5.56 (*) CT4 -21.99 -11.80 -1.62 (*) CT5 64.02 74.20 84.38 (*) CT6 -22.55 -12.37 -2.18 (*) CT7 -15.52 -5.34 4.84 (*) CT8 -11.87 -1.69 8.50 (*) CT9 49.96 60.15 70.33 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT13 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT14 47.99 58.18 68.36 (*) CT15 135.97 146.15 156.33 (*) CT16 -20.02 -9.84 0.35 (*) CT17 -13.28 -3.09 7.09 (*) CT18 -8.22 1.97 12.15 (*) CT19 73.01 83.19 93.38 (*) CT2 -36.88 -26.70 -16.52 (*) CT20 51.09 61.27 71.45 (*) CT21 -23.96 -13.77 -3.59 (*) CT22 -17.49 -7.31 2.88 (*) CT23 -14.40 -4.22 5.97 (*) CT24 -11.59 -1.41 8.78 (*) CT25 -14.96 -4.78 5.41 (*) CT3 -30.98 -20.80 -10.61 (*) CT4 -27.05 -16.86 -6.68 (*) CT5 58.96 69.14 79.32 (*) CT6 -27.61 -17.43 -7.24 (*) CT7 -20.58 -10.40 -0.22 (*) CT8 -16.93 -6.75 3.44 (*) CT9 44.90 55.09 65.27 (-*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT14 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT15 77.79 87.97 98.15 (*) CT16 -78.20 -68.02 -57.83 (*) CT17 -71.45 -61.27 -51.09 (*) CT18 -66.40 -56.21 -46.03 (*) CT19 14.83 25.01 35.20 (-*) CT2 -95.06 -84.88 -74.70 (-*) CT20 -7.09 3.09 13.28 (*) CT21 -82.13 -71.95 -61.77 (*) CT22 -75.67 -65.49 -55.30 (*) CT23 -72.58 -62.39 -52.21 (*) CT24 -69.77 -59.58 -49.40 (*) CT25 -73.14 -62.96 -52.77 (*) CT3 -89.16 -78.98 -68.79 (*) CT4 -85.23 -75.04 -64.86 (*-) CT5 0.78 10.96 21.15 (*) CT6 -85.79 -75.60 -65.42 (*) CT7 -78.76 -68.58 -58.39 (*) CT8 -75.11 -64.92 -54.74 (-*) CT9 -13.28 -3.09 7.09 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT15 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT16 -166.17 -155.99 -145.80 (*) CT17 -159.43 -149.24 -139.06 (*) CT18 -154.37 -144.18 -134.00 (*) CT19 -73.14 -62.96 -52.77 (*) CT2 -183.03 -172.85 -162.67 (*) CT20 -95.06 -84.88 -74.70 (-*) CT21 -170.11 -159.92 -149.74 (*) CT22 -163.64 -153.46 -143.27 (*) CT23 -160.55 -150.37 -140.18 (*) CT24 -157.74 -147.55 -137.37 (*) CT25 -161.11 -150.93 -140.74 (*) CT3 -177.13 -166.95 -156.76 (*) CT4 -173.20 -163.01 -152.83 (*) CT5 -87.19 -77.01 -66.83 (*) CT6 -173.76 -163.58 -153.39 (*) CT7 -166.73 -156.55 -146.36 (*) CT8 -163.08 -152.89 -142.71 (*) CT9 -101.25 -91.06 -80.88 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT16 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT17 -3.44 6.75 16.93 (*) CT18 1.62 11.80 21.99 (*) CT19 82.85 93.03 103.21 (*) CT2 -27.05 -16.86 -6.68 (*) CT20 60.92 71.11 81.29 (*) CT21 -14.12 -3.93 6.25 (*) CT22 -7.65 2.53 12.71 (*) CT23 -4.56 5.62 15.81 (*) CT24 -1.75 8.43 18.62 (*) CT25 -5.12 5.06 15.24 (-*) CT3 -21.15 -10.96 -0.78 (*) CT4 -17.21 -7.03 3.16 (*) CT5 68.79 78.98 89.16 (*) CT6 -17.77 -7.59 2.60 (*) CT7 -10.75 -0.56 9.62 (*) CT8 -7.09 3.09 13.28 (*) CT9 54.74 64.92 75.11 (*-) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT17 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT18 -5.12 5.06 15.24 (-*) CT19 76.10 86.28 96.47 (*) CT2 -33.79 -23.61 -13.42 (*) CT20 54.18 64.36 74.55 (*) CT21 -20.86 -10.68 -0.50 (*) CT22 -14.40 -4.22 5.97 (*) CT23 -11.31 -1.12 9.06 (*) CT24 -8.50 1.69 11.87 (*) CT25 -11.87 -1.69 8.50 (*) CT3 -27.89 -17.71 -7.52 (*) CT4 -23.96 -13.77 -3.59 (*) CT5 62.05 72.23 82.42 (*) CT6 -24.52 -14.33 -4.15 (*) CT7 -17.49 -7.31 2.88 (*) CT8 -13.84 -3.65 6.53 (*) CT9 47.99 58.18 68.36 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT18 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT19 71.04 81.23 91.41 (*) CT2 -38.85 -28.67 -18.48 (*) CT20 49.12 59.30 69.49 (*) CT21 -25.92 -15.74 -5.56 (*) CT22 -19.46 -9.27 0.91 (*) CT23 -16.37 -6.18 4.00 (*) CT24 -13.56 -3.37 6.81 (*) CT25 -16.93 -6.75 3.44 (*) CT3 -32.95 -22.77 -12.58 (*) CT4 -29.01 -18.83 -8.65 (*) CT5 56.99 67.17 77.36 (*) CT6 -29.58 -19.39 -9.21 (*) CT7 -22.55 -12.37 -2.18 (*) CT8 -18.90 -8.71 1.47 (*) CT9 42.94 53.12 63.30 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT19 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT2 -120.08 -109.89 -99.71 (*) CT20 -32.11 -21.92 -11.74 (*) CT21 -107.15 -96.96 -86.78 (*) CT22 -100.68 -90.50 -80.32 (*) CT23 -97.59 -87.41 -77.22 (*) CT24 -94.78 -84.60 -74.41 (*) CT25 -98.15 -87.97 -77.79 (*) CT3 -114.17 -103.99 -93.81 (*) CT4 -110.24 -100.06 -89.87 (*) CT5 -24.24 -14.05 -3.87 (*) CT6 -110.80 -100.62 -90.43 (*) CT7 -103.78 -93.59 -83.41 (*) CT8 -100.12 -89.94 -79.75 (*) CT9 -38.29 -28.11 -17.92 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT2 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT20 77.79 87.97 98.15 (*) CT21 2.74 12.93 23.11 (*) CT22 9.21 19.39 29.58 (*) CT23 12.30 22.48 32.67 (*) CT24 15.11 25.30 35.48 (*) CT25 11.74 21.92 32.11 (*) CT3 -4.28 5.90 16.09 (*) CT4 -0.35 9.84 20.02 (*) CT5 85.66 95.84 106.02 (*) CT6 -0.91 9.27 19.46 (*) CT7 6.12 16.30 26.49 (*) CT8 9.77 19.96 30.14 (*) CT9 71.60 81.79 91.97 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT20 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT21 -85.23 -75.04 -64.86 (*-) CT22 -78.76 -68.58 -58.39 (*) CT23 -75.67 -65.49 -55.30 (*) CT24 -72.86 -62.68 -52.49 (*) CT25 -76.23 -66.05 -55.86 (*) CT3 -92.25 -82.07 -71.88 (*) CT4 -88.32 -78.13 -67.95 (*) CT5 -2.31 7.87 18.05 (*) CT6 CT7 CT8 CT9 -88.88 -81.85 -78.20 -16.37 -78.70 -68.51 (*) -71.67 -61.49 (*) -68.02 -57.83 (*) -6.18 4.00 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT21 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT22 -3.72 6.46 16.65 (*) CT23 -0.63 9.56 19.74 (*) CT24 2.18 12.37 22.55 (*) CT25 -1.19 8.99 19.18 (*) CT3 -17.21 -7.03 3.16 (*) CT4 -13.28 -3.09 7.09 (*) CT5 72.73 82.91 93.10 (*) CT6 -13.84 -3.65 6.53 (*) CT7 -6.81 3.37 13.56 (*) CT8 -3.16 7.03 17.21 (*) CT9 58.67 68.86 79.04 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT22 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT23 -7.09 3.09 13.28 (*) CT24 -4.28 5.90 16.09 (*) CT25 -7.65 2.53 12.71 (*) CT3 -23.67 -13.49 -3.31 (*) CT4 -19.74 -9.56 0.63 (*) CT5 66.26 76.45 86.63 (*) CT6 -20.30 -10.12 0.07 (*) CT7 -13.28 -3.09 7.09 (*) CT8 -9.62 0.56 10.75 (*) CT9 52.21 62.39 72.58 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT23 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT24 -7.37 2.81 12.99 (*) CT25 -10.75 -0.56 9.62 (*) CT3 -26.77 -16.58 -6.40 (*) CT4 -22.83 -12.65 -2.46 (*) CT5 63.17 73.36 83.54 (*) CT6 -23.39 -13.21 -3.03 (*) CT7 -16.37 -6.18 4.00 (*) CT8 -12.71 -2.53 7.65 (*) CT9 49.12 59.30 69.49 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT24 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT25 -13.56 -3.37 6.81 (*) CT3 -29.58 -19.39 -9.21 (*) CT4 -25.64 -15.46 -5.27 (*) CT5 60.36 70.55 80.73 (*) CT6 -26.20 -16.02 -5.84 (*) CT7 -19.18 -8.99 1.19 (*) CT8 -15.52 -5.34 4.84 (*) CT9 46.31 56.49 66.68 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT25 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT3 -26.20 -16.02 -5.84 (*) CT4 -22.27 -12.09 -1.90 (*) CT5 63.73 73.92 84.10 (*) CT6 -22.83 -12.65 -2.46 (*) CT7 -15.81 -5.62 4.56 (*) CT8 -12.15 -1.97 8.22 (*) CT9 49.68 59.87 70.05 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT3 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT4 -6.25 3.93 14.12 (*) CT5 79.75 89.94 100.12 (*) CT6 -6.81 3.37 13.56 (*) CT7 0.22 10.40 20.58 (*) CT8 3.87 14.05 24.24 (*) CT9 65.70 75.89 86.07 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT4 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT5 75.82 86.00 96.19 (*) CT6 -10.75 -0.56 9.62 (*) CT7 -3.72 6.46 16.65 (*) CT8 -0.07 10.12 20.30 (*) CT9 61.77 71.95 82.13 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT5 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT6 -96.75 -86.57 -76.38 (*) CT7 -89.72 -79.54 -69.36 (*) CT8 -86.07 -75.89 -65.70 (*) CT9 -24.24 -14.05 -3.87 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT6 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT7 -3.16 7.03 17.21 (*) CT8 0.50 10.68 20.86 (*) CT9 62.33 72.51 82.70 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 CT = CT7 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT8 -6.53 3.65 13.84 (*) CT9 55.30 65.49 75.67 (*) -+ -+ -+ -+ -100 CT = CT8 subtracted from: 100 200 CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT9 51.65 61.83 72.02 (*) -+ -+ -+ -+ -100 100 200 2.Xác địnhkhảnăngkhángkhuẩncủadịchchiếtcuốngnấmlinh chi E.coli Source DF SS MS F P CT 170.6107 42.6527 864.58 0.000 Error 10 0.4933 0.0493 Total 14 171.1040 S = 0.2221 R-Sq = 99.71% R-Sq(adj) = 99.60% Level CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev N Mean StDev -+ -+ -+ -+ -3 9.1000 0.3606 (*-) 8.4000 0.2000 (-*) 6.2667 0.1155 (*) 3.3333 0.2517 (*) 0.0000 0.0000 (*) -+ -+ -+ -+ -0.0 2.5 5.0 7.5 Pooled StDev = 0.2221 Hsu's MCB (Multiple Comparisons with the Best) Family error rate = 0.05 Critical value = 2.47 Intervals for level mean minus smallest of other level means Level Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ -CT1 0.0000 9.1000 9.5472 ( -*) CT2 0.0000 8.4000 8.8472 ( -*) CT3 0.0000 6.2667 6.7138 ( -*) CT4 0.0000 3.3333 3.7805 ( -*) CT5 -3.7805 -3.3333 0.0000 (* -) -+ -+ -+ -+ 3.5 0.0 3.5 7.0 Grouping Information Using Tukey Method CT N CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 Mean Grouping 9.1000 A 8.4000 B 6.2667 C 3.3333 D 0.0000 E Means that not share a letter are significantly different Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of CT Individual confidence level = 99.18% CT = CT1 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT2 -1.2963 -0.7000 -0.1037 (-*) CT3 -3.4296 -2.8333 -2.2370 (*-) CT4 -6.3630 -5.7667 -5.1704 (*-) CT5 -9.6963 -9.1000 -8.5037 (*) -+ -+ -+ -+ -5.0 0.0 5.0 10.0 CT = CT2 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT3 -2.7296 -2.1333 -1.5370 (*) CT4 -5.6630 -5.0667 -4.4704 (*) CT5 -8.9963 -8.4000 -7.8037 (*) -+ -+ -+ -+ -5.0 0.0 5.0 10.0 CT = CT3 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT4 -3.5296 -2.9333 -2.3370 (*) CT5 -6.8630 -6.2667 -5.6704 (*-) -+ -+ -+ -+ -5.0 0.0 5.0 10.0 CT = CT4 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT5 -3.9296 -3.3333 -2.7370 (*-) -+ -+ -+ -+ -5.0 0.0 5.0 10.0 Bacillus cereus Source DF SS MS F P CT 187.769 46.942 265.71 0.000 Error 10 1.767 0.177 Total 14 189.536 S = 0.4203 R-Sq = 99.07% R-Sq(adj) = 98.70% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev Level N Mean StDev + -+ -+ -+ CT1 9.633 0.603 (-*-) CT2 7.567 0.603 (-*-) CT3 3.233 0.252 (-*-) CT4 2.267 0.306 (-*) CT5 0.000 0.000 (-*-) + -+ -+ -+ 0.0 3.0 6.0 9.0 Pooled StDev = 0.420 Hsu's MCB (Multiple Comparisons with the Best) Family error rate = 0.05 Critical value = 2.47 Intervals for level mean minus smallest of other level means Level Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ CT1 0.000 9.633 10.480 ( -*-) CT2 0.000 7.567 8.413 ( -*-) CT3 0.000 3.233 4.080 ( * ) CT4 0.000 2.267 3.113 ( -* ) CT5 -3.113 -2.267 0.000 ( * -) -+ -+ -+ -+ 0.0 3.5 7.0 10.5 Grouping Information Using Tukey Method CT N Mean Grouping CT1 9.633 A CT2 7.567 B CT3 3.233 C CT4 2.267 C CT5 0.000 D Means that not share a letter are significantly different Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of CT Individual confidence level = 99.18% CT = CT1 subtracted from: CT Lower Center Upper + -+ -+ -+ CT2 -3.195 -2.067 -0.938 (-*-) CT3 -7.528 -6.400 -5.272 (-*-) CT4 -8.495 -7.367 -6.238 (-* ) CT5 -10.762 -9.633 -8.505 ( *-) + -+ -+ -+ -10.0 -5.0 0.0 5.0 CT = CT2 subtracted from: CT CT3 CT4 CT5 Lower -5.462 -6.428 -8.695 Center Upper + -+ -+ -+ -4.333 -3.205 (-* ) -5.300 -4.172 (-* ) -7.567 -6.438 (-*-) + -+ -+ -+ -10.0 -5.0 0.0 5.0 CT = CT3 subtracted from: CT Lower Center Upper + -+ -+ -+ CT4 -2.095 -0.967 0.162 (-*-) CT5 -4.362 -3.233 -2.105 ( *-) + -+ -+ -+ -10.0 -5.0 0.0 5.0 CT = CT4 subtracted from: CT Lower Center Upper + -+ -+ -+ CT5 -3.395 -2.267 -1.138 (-* ) + -+ -+ -+ -10.0 -5.0 0.0 5.0 One-way anova: Staphylococus epidermidis Source DF SS MS F P CT 147.8840 36.9710 853.18 0.000 Error 10 0.4333 0.0433 Total 14 148.3173 S = 0.2082 R-Sq = 99.71% R-Sq(adj) = 99.59% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev Level N Mean StDev -+ -+ -+ -+ -CT1 8.2333 0.2517 (*) CT2 4.4333 0.1528 (*) CT3 1.6000 0.3606 (*) CT4 0.0000 0.0000 (*) CT5 0.0000 0.0000 (*) -+ -+ -+ -+ -0.0 2.5 5.0 7.5 Pooled StDev = 0.2082 Hsu's MCB (Multiple Comparisons with the Best) Family error rate = 0.05 Critical value = 2.47 Intervals for level mean minus smallest of other level means Level Lower Center Upper + -+ -+ -+ CT1 0.0000 8.2333 8.6524 ( *-) CT2 0.0000 4.4333 4.8524 ( -*) CT3 0.0000 1.6000 2.0191 ( -*-) CT4 -0.4191 0.0000 0.4191 (-*-) CT5 -0.4191 0.0000 0.4191 (-*-) + -+ -+ -+ 0.0 2.5 5.0 7.5 Grouping Information Using Tukey Method CT N Mean Grouping CT1 8.2333 A CT2 4.4333 B CT3 1.6000 C CT5 0.0000 D CT4 0.0000 D Means that not share a letter are significantly different Tukey 95% Simultaneous Confidence Intervals All Pairwise Comparisons among Levels of CT Individual confidence level = 99.18% CT = CT1 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ -CT2 -4.3589 -3.8000 -3.2411 (*-) CT3 -7.1922 -6.6333 -6.0745 (-*-) CT4 -8.7922 -8.2333 -7.6745 (*-) CT5 -8.7922 -8.2333 -7.6745 (*-) -+ -+ -+ -+ 7.0 -3.5 0.0 3.5 CT = CT2 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ -CT3 -3.3922 -2.8333 -2.2745 (-*-) CT4 -4.9922 -4.4333 -3.8745 (*-) CT5 -4.9922 -4.4333 -3.8745 (*-) -+ -+ -+ -+ 7.0 -3.5 0.0 3.5 CT = CT3 subtracted from: CT Lower Center Upper -+ -+ -+ -+ -CT4 -2.1589 -1.6000 -1.0411 (*-) CT5 -2.1589 -1.6000 -1.0411 (*-) -+ -+ -+ -+ 7.0 -3.5 0.0 3.5 CT = CT4 subtracted from: CT5 -0.5589 0.0000 0.5589 (-*-) -+ -+ -+ -+ 7.0 -3.5 0.0 3.5 ... học nấm linh chi Thành phần hóa học định đến tính dược liệu nấm linh chi Khơng nhiều lồi nấm khác có hàm lượng nước đến 90%, nấm linh chi tươi khoảng 75% nước Thành phần chủ yếu nấm linh chi thể... Nấm linh chi có nhiều tác dụng việc hỗ trợ sức khỏe người: - Tác dụng nấm linh chi với hệ miễn dịch: Nhiều kết nghiên cứu cho thấy khả kích thích hệ miễn dịch nấm linh chi Theo Roy (2006) linh chi. .. gây bệnh dịch chi t cuống nấm linh chi A B 2 C 4 D E 2 Hình 4.1 Khả kháng vi sinh vật gây bệnh dịch chi t cuống nấm linh chi Chú thích: Hàm lượng polysaccharide dịch cuống nấm linh chi (1): 412,42;