Nghiên cứu phát hiện hội chứng Klinefelter trong chẩn đoán trước sinh và sau sinh

1 ĐẶT VẤN ĐỀ Những năm gần đây, vô sinh vấn đề sức khỏe sinh sản gây ảnh hưởng tới sống hạnh phúc nhiều cặp vợ chồng mối quan tâm toàn xã hội Các nghiên cứu cho thấy có khoảng 15% cặp vợ chồng vô sinh, tỷ lệ vô sinh nam giới 35-40% tỷ lệ tương đương với vô sinh nữ giới Vô sinh nam giới khơng có tinh trùng (KCTT) tinh trùng (ITT) có nhiều ngun nhân Việc chẩn đốn ngun nhân vô sinh nam giới yêu cầu bắt buộc trước điều trị cần thiết để thực tư vấn di truyền có hiệu Trong bệnh nhân vô sinh nam, bất thường mặt di truyền chiếm 10-15% trường hợp KCTT 5% trường hợp ITT Rối loạn vật chất di truyền mức độ tế bào gây vô sinh nam giới thường hay gặp hội chứng Klinefelter (KF) Hội chứng KF (hay hội chứng 47,XXY) bất thường NST giới hay gặp xảy nam nguyên nhân chủ yếu gây thiểu sinh dục vô sinh nam giới Tỉ lệ mắc 1/500-1000 trẻ sơ sinh nam Lúc sơ sinh thường không phát thường khơng có dị tật trầm trọng, có dị tật nhỏ khơng đặc hiệu tinh hồn lạc chỗ, lỗ đái lệch thấp hay dương vật phát triển Các trẻ trai mang hội chứng KF số IQ thường thấp trung bình thường gặp khó khăn học tập; hầu hết nam giới với hội chứng có vấn đề đáng kể y tế, tâm lý xã hội [1] Hơn nữa, tỷ lệ tử vong bệnh nhân KF tăng đáng kể bệnh tiểu đường, hô hấp, tim mạch bệnh tiêu hóa [62] Tuy nhiên, biểu hội chứng KF thường không đặc hiệu từ nhỏ, nên chẩn đoán vào thời kỳ niên thiếu tuổi trưởng thành có khơng chẩn đoán Các thai mang hội chứng KF sàng lọc siêu âm sàng lọc sản phẩm thai huyết mẹ khơng có dấu hiệu đặc hiệu cho hội chứng KF việc chẩn đốn trước sinh thường khó khăn Hậu nam giới có hội chứng KF thường chẩn đốn muộn lấy vợ vô sinh KCTT Trên thực tế nhiều cặp vợ chồng điều trị vô sinh nhiều năm khơng có kết khơng tìm nguyên, mà thực chất người chồng bị KF Tại Việt Nam, chưa có nhiều nghiên cứu KF chưa có nghiên cứu chẩn đốn hội chứng KF trước sinh Vì vậy, chúng tơi thực đề tài "Nghiên cứu phát hội chứng Klinefelter chẩn đoán trước sinh sau sinh" Với mục tiêu: Mô tả đặc điểm karyotyp dạng đột biến AZFa, b, c NST Y bệnh nhân Klinefelter Nhận xét kết sàng lọc thai mắc hội chứng Klinefelter CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tình hình nghiên cứu vơ sinh vô sinh nam giới 1.1.1 Khái niệm vô sinh vô sinh nam giới Theo WHO, vô sinh (VS) định nghĩa tình trạng cặp vợ chồng tuổi sinh đẻ, mong muốn có khơng thể có thai sau 12 tháng quan hệ tình dục mà không sử dụng biện pháp tránh thai VS gồm loại: VS nguyên phát VS thứ phát VS nguyên phát (VS I) trường hợp cặp vợ chồng chưa có thai lần VS thứ phát (VS II) trường hợp có thai lần, khơng thể có thai Ngun nhân VS vợ chồng phía VS nam giới nguyên nhân VS hoàn toàn người chồng, người vợ bình thường VS nữ giới VS mà nguyên nhân hoàn toàn người vợ, người chồng bình thường VS khơng rõ ngun nhân trường hợp thăm khám lâm sàng làm xét nghiệm vợ chồng mà không phát nguyên nhân Trong VS nam giới, nguyên nhân bất thường số lượng tinh trùng hay gặp, trường hợp VS nam KCTT (Azoospermia) ITT (oligozoospermia) Theo WHO, VS nam giới KCTT tình trạng khơng tìm thấy tinh trùng tinh dịch xuất tinh, thường tinh hồn khơng sản xuất tinh trùng ITT tình trạng số lượng tinh trùng 20x10 tinh trùng/ml tinh dịch ITT mức độ nặng (severe oligozoospermia) trường hợp có số tinh trùng 1x106/ml tinh dịch 1.1.2 Tình hình vơ sinh nam giới giới Theo WHO, nguyên nhân VS có khoảng 20% khơng rõ ngun nhân, 80% có nguyên nhân, VS nữ chiếm 40%, VS nam chiếm 40% nguyên nhân vợ chồng 20% Theo WHO (1991), giới có khoảng 12-15% cặp vợ chồng VS tức khoảng 50-80 triệu người Tỷ lệ thay đổi tùy nghiên cứu quốc gia Tại Australia, Kildea (2000) nghiên cứu đối tượng từ 20- 45 tuổi xác định tỷ lệ VS 26,3% [35] Theo Ali (2005) có khoảng 10-15% cặp vợ chồng VS, nguyên nhân nam giới chiếm 50% [12] Nghiên cứu Krausz cho nguyên nhân VS nam chiếm 50%, 40-50% liên quan đến bất thường tinh trùng [36] Như vậy, tùy nghiên cứu nước giới, tỷ lệ VS thay đổi từ 10%- 20%, nguyên nhân VS nam nữ tương đương tỷ lệ có xu hướng ngày tăng 1.1.3 Tình hình vơ sinh vơ sinh nam giới Việt nam Tại Việt Nam, VS vấn đề sức khỏe sinh sản quan tâm Nhiều cơng trình nghiên cứu cho thấy tỷ lệ VS ngày có xu hướng tăng… Điều tra dân số năm 1980 tỷ lệ VS chung 7%-10% đến năm 1982 tỷ lệ 13%, VS nữ chiếm 54%, VS nam chiếm 36%, VS không rõ nguyên nhân 10% Nghiên cứu Nguyễn Khắc Liêu cs Viện bảo vệ bà mẹ trẻ sơ sinh từ 1993-1997 cho thấy VS nữ giới 54,5%, VS nam giới 35,6% (KCTT 7,1%), VS không rõ nguyên nhân 10% [3 ] Theo Phan Văn Quyền, tỷ lệ VS 10-15% [9] Theo Trần Thị Phương Mai (2001) tỷ lệ VS 10% Nguyên nhân VS nữ chiếm 30-40% nam chiếm khoảng 30% Khoảng 20% trường hợp tìm thấy nguyên nhân VS vợ chồng có khoảng 20% cặp vợ chồng khơng tìm thấy nguyên nhân VS [4] Theo Trần Quán Anh, 100 cặp vợ chồng có khoảng 15 cặp vợ chồng khơng thể có con, 50% nguyên nhân nam giới tỷ lệ có chiều hướng tăng mạnh [1] Nhìn chung, theo tác giả, tỷ lệ vô VS Việt Nam ngang giới nguyên nhân VS nam giới gần tương đương nữ giới 1.1.4 Chẩn đốn vơ sinh nam giới xét nghiệm tinh dịch đồ Xét nghiệm tinh dịch đồ xét nghiệm cần thiết chẩn đoán điều trị VS nam giới Hiện nay, nước ta nhiều nước giới sử dụng tiêu chuẩn chẩn đoán điều trị VS WHO năm 1999, có tiêu chuẩn xét nghiệm tinh dịch đồ Tinh dịch đồ coi bình thường nếu: thể tích tinh dịch ≥ 2ml; mật độ tinh trùng ≥ 20 triệu tinh trùng/ml; số lượng tinh trùng di động nhanh > 25%; tỷ lệ tinh trùng sống ≥ 75%; tinh trùng có hình dạng bình thường ≥ 30% số lượng bạch cầu < triệu/ ml tinh dịch Theo WHO (1999) nguyên nhân gây VS nam giới tới 90% bất thường tinh trùng Cho đến nay, phương pháp để chẩn đốn VS nam dựa vào kết tinh dịch đồ theo tiêu chuẩn WHO với số thể tích tinh dịch, mật độ tinh trùng, tỷ lệ di động, tỷ lệ sống, tỷ lệ tinh trùng có hình dạng bình thường bất thường… Cần phải xét nghiệm tinh dịch đồ lần với cặp muộn tinh dịch đồ kết bất thường phải xét nghiệm lại lần thứ hai cách lần thứ nhất ngày xa tháng (WHO-1999) Theo nghiên cứu gần đây, VS nam giới gia tăng lượng tinh trùng nam giới giới giảm nửa so với 50 năm trước [14] Trần Đức Phấn (2001) nghiên cứu 420 mẫu tinh dịch nam thiểu sinh sản có 56% số mẫu có chất lượng mức bình thường, 10,24% KCTT 16,43% ITT [5] Các bệnh nhân VS nam có xét nghiệm tinh dịch đồ KCTT ITT mà không nguyên nhân tắc nghẽn có kết xét nghiệm nội tiết bình thường phải tìm nguyên nhân di truyền 1.1.5 Các nguyên nhân dẫn tới vô sinh nam giới WHO đưa bảng phân loại nguyên nhân gây VS nam giới để giúp tiêu chuẩn hóa việc chẩn đoán nguyên nhân VS nam giúp cho việc đánh giá nghiên cứu VS nam dễ dàng Nhìn phương diện di truyền học chia thành nhóm nguyên nhân gây VS nam nhóm rối loạn vật chất di truyền nhóm không rối loạn di truyền Vô sinh nam giới rối loạn vật chất di truyền  Mức độ NST Bất thường di truyền nói chung bất thường NST nói riêng coi nguyên nhân gây ITT KCTT, xếp vào nhóm KCTT khơng rõ ngun nhân khơng chẩn đốn xác định Theo tài liệu cơng bố giới, bất thường NST thường cao gấp lần bất thường NST giới tính cao gấp 15 lần so với cộng đồng [9] Với tiến di truyền tế bào, nhiều nghiên cứu cho thấy có khoảng 20-30% trường hợp KCTT bất thường di truyền [50] Trong nguyên nhân bất thường NST giới gây VS nam hay gặp hội chứng Klinefelter thể thể khảm (47,XXY/46,XY) biến thể hội chứng Chẩn đoán hội chứng thường thời kỳ niên thiếu trưởng thành: nam giới có tinh hồn teo nhỏ, chắc, dáng người giống nữ, chứng vú to, FSH tăng cao thường VS KCTT Tinh trùng lấy từ tinh hồn người nam 47,XXY làm ICSI (Intracytoplasmic Sperm Injection - bơm tinh trùng vào nguyên sinh chất nỗn) Phơi tạo kỹ thuật ICSI phải chẩn đoán tiền làm tổ trước chuyển vào buồng tử cung Theo nghiên cứu Simpson bệnh nhân KF thường VS KCTTvà ITT [57] Tuy nhiên, theo Fossa (1971) Krause Frosti (2000) nhận xét số bệnh nhân KF thể khảm tinh hồn sinh tinh nên có khả sinh sản suy giảm tinh trùng mức độ nặng [38], [59] Theo hội tiết niệu sản khoa Hoa kỳ (2001), bất thường NST chiếm khoảng 7% VS nam giới Bất thường NST giới tính (hội chứng KF) chiếm khoảng 2/3 bất thường NST quan sát bệnh nhân nam giới VS [13] Theo Laksim R (2004) nghiên cứu 251 nam giới VS, bất thường NST chiếm 11,5%, hội chứng KF biến thể 3,18% Theo Nguyễn Bửu Triều hội chứng KF chiếm 1% cá thể vô sinh, 1320% trường hợp KCTT Theo Nguyễn Đức Nhự (2009) 125 nam vô sinh KCTT ITT, tỉ lệ bất thường NST 20,8% (26/125) hội chứng KF chiếm 18 trường hợp [5] Chẩn đoán VS nam giới KF nhờ xét nghiệm di truyền tế bào (nuôi cấy tế bào bạch cầu lympho máu ngoại vi, phân tích NST lập karyotyp) Tuy nhiên có nhiều trường hợp vô sinh nam KCTT ITT khơng tắc nghẽn mà karyotyp bình thường khơng phát thấy nguyên nhân khác cần làm thêm nghiên cứu bất thường di truyền mức độ phân tử  Đột biến gen Quá trình sinh tinh chịu điều khiển, phối hợp xác khoảng 2000 gen Chỉ khoảng 30 gen có mặt NST Y gen quan trọng thiếu q trình sinh tinh, lại phần lớn nằm NST thường Những đột biến gen gây hậu nghiêm trọng vô sinh không sản xuất tinh trùng ITT suy giảm chất lượng tinh trùng [37] Gen SRY nằm nhánh ngắn NST Y đóng vai trò quan trọng hình thành tuyến sinh dục thời kỳ phơi thai Bên cạnh NST Y chứa vùng có chức điều hòa sinh tinh Khi toàn nhánh ngắn hay phần xa nhánh ngắn NST Y bị thể bị khiếm khuyết gen SRY, biệt hóa tuyến sinh dục thời kỳ phôi thai bị rối loạn Biểu lâm sàng trường hợp giống hội chứng Turner nghĩa suy sinh dục nguyên phát Nhánh dài NST Y vùng đặc biệt quan trọng trình sinh tinh Khi đoạn nhánh dài NST Y kiểu hình nam giới có tinh hồn, nhiên tùy theo đoạn bị ngắn hay dài mà trình sinh tinh bị ảnh hưởng mức độ khác Nếu đoạn có liên quan tới vùng đặc hiệu nam NST Y ảnh hưởng trầm trọng tới hình thành tế bào mầm sinh dục với biểu lâm sàng KCTT ITT nặng * Mất đoạn nhỏ NST Y Năm 1976, lần Tiepolo Zufardi mô tả mối liên quan đoạn NST Y vô sinh nam phát trường hợp KCTT bị đoạn lớn phần xa nhánh dài NST Y [64] Nhuộm băng NST xác định đoạn vị trí Yq11 đưa giả thuyết quan trọng trình sinh tinh điều hòa đoạn AZF (azoospermic factor) NST Y Cùng với phát triển không ngừng kỹ thuật di truyền phân tử, nhiều nghiên cứu xác định đoạn nhỏ vùng AZF nhánh dài NST Y liên quan đến KCTT hay ITT mà trước thường cho không rõ nguyên nhân Ba vùng AZF NST Y AZFa, AZFb AZFc Gần vùng thứ AZFd dược phát nằm AZFb AZFc Vị trí ba vùng AZF NST Y minh họa hình 1.1 Hình 1.1: Mơ hình cấu trúc NST Y vùng AZFa,b,c [22] AZFa nằm vùng nhánh dài gần tâm NST Y Kích thước chừng 792kb [61] chứa hai gen chức USP9Y DBY Mất đoạn AZFa thường có tỷ lệ thấp Khi đoạn AZFa toàn (mất gen USP9Y 10 DBY), sai sót trình sinh tinh thường nặng bệnh nhân ln KCTT Ngược lại, hai gen (ví dụ USP9Y) bệnh cảnh nhẹ tìm thấy lượng nhỏ tinh trùng ống dẫn tinh Như vậy, đoạn gen DBY (gen lại AZFa) dường làm nặng thêm hậu việc gen USP9Y trình sinh tinh [58] Vùng AZFb nằm khoảng 6, kích thước 6,2 Mb (gồm 32 gen đơn vị phiên mã) Các gen xác định có vai trò hình thành tinh hồn q trình sinh tinh trùng [56] Mất đoạn nhỏ vùng AZFb thường hay xảy so với vùng AZFa chiếm tỉ lệ nhỏ người KCTT Mất đoạn nhỏ NST Y chứa vùng AZFb người nam giới KCTT tinh dịch tinh hoàn sinh thiết [66] Vùng AZFc nằm gần vùng dị nhiễm sắc, kích thước 3,5 Mb, chứa gen quan trọng DAZ, CDY1, BPY2, PRY, TTY2… AZFc đoạn chiếm tỷ lệ cao (2-10%) đoạn AZF phát nam giới KCTT ITT nặng Biểu ITT nặng xuất tinh KCTT tách chiết tinh trùng từ tinh hoàn Những người nam với đoạn AZFa, AZFb, AZFbc AZFabc KCTT khơng thể chiết tách tinh trùng từ tinh hoàn [66] Những người nam giới KCTT bị AZFc có hội để tìm thấy tinh trùng kỹ thuật TESE sinh nhờ phương pháp ICSI Tuy nhiên, trai họ bị di truyền NST Y đoạn AZFc từ bố bị khiếm khuyết sinh tinh (ITT KCTT) [47]  Tình hình nghiên cứu đoạn nhỏ NST Y Năm 1976, Tiepolo Zuffadi báo cáo trường hợp nam giới KCTT bị đoạn nhánh dài NST Y [64] 19 Carother A D., Collyer S., De Mey R (1978), “Parental age and birth oder in the aetiology of some sex chromosome aneuploidies”, Ann Hum Genet, 41, pp 277-278 20 Carother A D., Filippi G (1988), "Klinefelter’s syndrome in Sardinia and Scotland Comparerative studies of parental age and other eatiological factors in 47,XXY", Hum Genet, 81, pp 71-75 21 Ceylan C., Ceylan D and Serel T A (2010), Genetics & Molecular Research (2), pp 1229-1233 22 Dada R., Gupta N P., Kucheria K (2002), Asian J Androl 2002 Dec, 4, pp 259-263 23 Denschlag D., Tempfer C., Kunze M., VWolff G., Keck C (2004), "Assisted reproductive techniques in patients with klinerfelter syndrome: acritical review", Fertility and Sterility, Vol 82, No 24 Dunn L K., Godmilow L (1990), "A comparison of loss rates for firsttrimester chorionic villus sampling early amniocentesis and midtrimester amniocentesis in a population of women of advanced age", Am J Hum Genet 47, pp A237 25 Feigin M., Zeitune M., Amiel A., Beyth Y (1990), "Elevated maternalserum alpha-fetoprotein level and sex chromosome aneuploidy", Prenat Diagn 10, pp 414- 416 26 Ferguson- Smith M A., Yates J R (1984), "Maternal age specific rates for chromosome aberrations and factors influencing them: report of a collaborative European study on 52.965 amniocentesis", Prenat Diagn 4, pp 5-44 27 Ferlin A., Moro E et al (1999), "Human male infertility and Y chromosome deletions: role of the AZF- candidate genes DAZ, RBM and DFFRY", Human Reproduction, 14(7), pp 1714-1716 28 Fullerton G., Hamilton M., Maheshwari A (2010), "Should nonmosaic Klinefelter syndrome men be labelled as infertile in 2009?", Hum Reprod., 25(3),pp.588–97 29 Harvey J., Jacobs P A., Hasold T., Pettay D (1990), "The parental origin of 47,XXY males", Birth defect Orig Artic Ser , 26, pp.289-296 30 Heckerling P S., Verp M S (1994), "Preferences of pregnant women for amniocentesis or chorionic villus sampling for prenatal testing: comparision of patients choices and those decision- analytic model", J Clin Epidemiol, 47, pp 1215-1228 31 Henderson K G., Shaw T E., Barrett I J et al (1996), "Distribution of mosaicism in human placenta", Hum Genet, 97, pp 650-654 32 Hook E B., Cross P K., Schreinemachers D M (1983), "Chromosomeal abnormality rates at amniocentesis and in live-born infant", JAMA, 249, pp 2034-2038 33 Jacobs P.A., Hasold T.J., Whittington E., Butler G., Collyer S., Keston M., Lee M (1988), "Klinefelter’s syndrome: an analysis of the origin of the additional sex chromosome using molecular probe", Ann Hum Genet, 52, pp 93-109 34 Kamp C., Huellen K., Fernandes S et al (2001), "High deletion Frequency of the complete AZFa sequence in men with Sertoli-cell-only syndrome", Mol Hum Reprod 7, pp 987-994 35 Kildea S., Bowden F J (2000), "Reproductive health, infertility and sexual transmitted infections in indegenuous women in a remote community in the Northern Territory", Aust N Z J Public Health, 24(4), pp 362-367 36 Krausz C and Mc Elreavey K (1999), "Y chromosome and male infertility", Frontier in Bioscience, 4, E1-8 37 Kun M., Con M and Shalender B (2000), "The role of the chromosome deletions in males infertility, European Journal of Endocrinology", 142, pp 418-430 38 Lanfranco F., Kamischke A., Zitzman M., Nieschlag E (2004), "Klinerfelter’s syndrome", The Lancet, Vol 364 39 Linden M G., Bender B G., Robinson A (1996), "Instrauterine diagnosis of sex chromosome aneuploidy", Obstet Gynecol, 87, pp 468-475 40 Linden M G., Bender B G., Robinson A (1995), "Sex chromosome tetrasomyand pentasomy", Pediatrics 1995, 96, pp 672- 682 41 Lorda- Sanchez I., Binkert F., Maecheler M., Robinson W P., Schinzel A A (1992), "Reduced recombination and paternal age in Klinefelter syndrome", Hum Genet , 89, pp 524-530 42 Lowe X., Eskenzai B., Nelson D et al (2001), "Frequency of XY sperm increases with age in father of boys with Klinefelter syndrome", American Journal of Genetics, 69, pp 1046-1054 43 MacDonald M., Hassold T., Harvey J., Wang L H., Morton N E., Jacobs P (1994), "The origin of 47,XXY and 47,XXX aneuploidy: heterogenerous mechanisms and the role of aberrant recombination", Hum Mol Genet, 3, pp 1365-1371 44 National Institude of Child health and human Development National Registry for Amniocentesis study group (1976), "Midtrimester amniocentesis for prenatal diagnosis for prenatal diagnosis: safety and accuracy", J Am Med Assoc, 236, pp 1471-1476 45 Nicolaisdes K H., Snijders R J M., Gosden C M et al (1992), "Ultrasonically detectable markersof fetal chromosome abnormalities", Lancet, 340, pp 704-707 46 Niesen J., Videbech P (1984), "Diagnosing of chromosome abnormalities in Denmark", Clin Genet 26, pp 422-428 47 Pasalis P C., Sismani C (2002), "Effects of transmission of Y chromosome AZFc deletions", 360, pp 1222-1224 48 Penso C A et al (1990), "Early amniocentesis: report of 407 cases with new-born follow up", Obstet Gynecol, 76, pp 1032 49 Ratcliffe S (1999), "Long term outcome in children of sex chromosome abnormalities", Arch Dis Child 80, pp 192-195 50 Reijo R, Alagappan R K et al (1996), "Severe oligozoospermia resulting from deletions of azoospermia factor gene on Y chromosome", Lancet, 347, pp 1290-1293 51 Robert D O (2004), "The genetics of male reproductive failure: what every clinician needs to know, Sexuality, reproduction & menopause", 2(4), pp 213-220 52 Robinson D O., Jacobs P A (1999), “The origin of the extra Y chromosome in males with a 47,XYY karyotype”, Human Molarcular Genetics, Vol.8, No 12 53 Rooney D E et al (1992), “Prenatal diagnosis and tissue culture, In Human Cytogennetics”, Volume II, 3, pp 55-88 54 Ryall R G., Callen D., Cocciolone R., Duvnjak A., Esca R., Frantzis N., Gjerde E M., Haan E A., Hocking T., Sutherland G., Thomas D W., Webb F (2001), "Karyotypes found in the population declared at increased risk of Down syndrome following maternal serum screening", Prenat Diagn , 21, pp 553- 557 55 Sebire N J., Snijders R J., Brown R., Southhall T., Nicolaides K H (1998), "Detection of sex chromosome abnormalities by nuchal transluscency screening at 10- 14 weeks", Prenat Diagn 1998, 18, pp 581- 584 56 Simoni M., Bakker E., Krausz C (2004), "EAA/EMQN best practice guidelines for molecular diagnosis of Y- chromosomal microdeletions, State of the art 2004, International Journal of Andrology, 27(4), pp 240-249 57 Simpson J L., Graham J M., Samago-Sprouse C et al (2005), "Klinefelter syndrome", In: Cassidy SB, Allanson JE, Management of genetics syndromes, nd Ed Hoboken, N.J.: Wiley & Sons, pp 323-333 58 Silber S (2001), "The Y chromosome in the era of intracytoplasmic sperm injection: a personal review", Fertility and Sterility, pp - 59 Smyth C M., William J B (1998), "Klinefelter syndrome", Arch Intern Med/ Vol 158, June 22 60 Spencer K., Tul N., Nicolaides K H (2000), "Maternal serum free beta-Hcg and PAPP-A in fetal chromosome defect in the first trimester", Prenat Diagn 2000, 20, pp 613- 622 61 Sun C., Skaletsky H and Skaletsky H (1999), “An azoospermic man with a de novo point mutation in the Y-chromosomal gene USP9Y” Nature Genetics, vol.23, no.4, pp 429–432 62 Swerdlow A J., Hermon C., Jacobs P A., Alberman E., Beral V., Darker M., Fordyce A., Youing S (2001), "Mortality and cancer incidence in persons with numerical sex chromosome abnormalities: a cohort study", Ann Hum Genet 65, pp 177-188 63 Szabo J., Gellen J (1990), "Nuchal fluid accumulation in trisomy 21 detected by vaginosonography in first trimester", Lancet, 336, pp 1133 64 Texas Department of State Health Services, Birth Defect Epidemiology and Surveillance (2005), “Birth defect risk factor series: Klinefelter Syndrome”, Revised November, pp 2-10 65 Tiepolo L and Orsetta Z (1976), "Localization of factors controlling spermatogenesis in the nonfluorescent portion of the Human Y chromosome long arm", Hum Genet, 34, pp 119-124 66 Vollrath C., Foote D., Hilton S et al (1992), "The human Ychromosome: A 43-interval map based on naturally occuring deletions", Science, 258, pp 52-59 67 Zoltán P (1990), "Obstetric Genetics", Akademia kiado Budpesd chapter 20, 21, 60 PHỤ LỤC BỆNH ÁN Ngày tháng năm Chồng: Họ tên:…………………………… Tuổi:…… Nghề nghiệp: Địa chỉ: Năm kết hôn:……………… Lý XN:…………… ĐT: t0 cao Tiếp xúc Tiếng ồn Các tia Hóa chất Mức độ, tên tác nhân Bị thương phận sinh dục:…………… Bị bệnh: Thuốc lá: Điếu/ngày:…………………… Thuốc lào: Điếu/ ngày: Bia: Cốc/ lần:…… lần/tuần:…………… Rượu: chén/ lần:… lần/tuần Mấy ngày gần có sốt khơng:………… Mức độ (t0): Lần xuất tinh gần cách ngày:… Số lần giao hợp/ tuần: Có mộng, di tinh? số lần/tháng:………… Số lần ăn đậu phụ/tuần: Di động % Thể tích pH Mật độ a b c d Vận tốc TT m/s % sống Hình thái tinh trùng: BT Đầu Cổ Đuôi B.tương Vô Bạch Nhớt Màu ĐH cầu H.lỏn g N.tiểu Vợ: Họ tên:…………………………… Tuổi:…… Nghề nghiệp: Tiếp xúc phóng xạ, hóa chất: Số lần có thai:…… Số lần đẻ:……… Tình trạng con:……… Sảy: Nạo:……………… Hút:…………… Thai lưu:……………… Khác: Tình hình kinh nguyệt:…………… Bị bệnh: Tiền sử thân, gia đình: Số anh chị em Số có gia đình Số bị vơ sinh XN NST XN khác Bên vợ Bên chồng Khám: MẪU BỆNH ÁN NGHIÊN CỨU Họ tên sản phụ: Tuổi mẹ: Mã số phiếu: < 20 tuổi Từ 20 - 40 tuổi - Tuổi bố: Tuổi thai: < 14w Từ 14 - < 27w > 27w Tiền sử: 4.1 Sinh lần 4.2 Sảy thai, thai chết lưu: Một lần 4.3 Đã có bị Down: Một Hai lần > Ba lần > Hai 4.4 Con bị dị tật khác: 4.5 Bố mẹ mang NST chuyển đoạn: 4.6 Tiền sử chồng gia đình Siêu âm: Khơng có SA Có siêu âm Kết siêu âm thai: + Bình thường + Thiểu ối + NBH + Đa ối + Dày da gáy + Thai chậm phát triển + Dị tật tim + Ngắn xương chi + Khác (dị tật phối hợp phải ghi rõ) Tripble douple test: Khơng có Có Kết sàng lọc định lượng AFP, HCG, uE3 huyết mẹ đơn thuần: + Bình thường: + AFP tăng (> 2,0): ghi rõ + AFP giảm (< 0,7): ghi rõ + HCG tăng (> 1,7): ghi rõ + HCG giảm (< 0,7): ghi rõ + uE3 tăng: ghi rõ + uE3 giảm (< 0,7): ghi rõ Kết sàng lọc định lượng AFP, HCG, uE3 huyết mẹ kết hợp: 9.1 HC Down nguy thấp nguy cao 9.2 HC Down tuổi mẹ nguy thấp nguy cao 9.3 HC Edwards nguy thấp nguy cao 9.4 Dị tật ống TK nguy thấp nguy cao 10 Chọc ối: Có: Không: 11 Kết chọc ối: ghi rõ kết phân tích NST Bình thường: Bất thường: 12 Các dạng bất thường cấu trúc NST: ghi rõ công thức Karyotyp 13 Kết theo dõi sau sinh: + Con khỏe mạnh: + Bất thường (nguyên nhân) - Siêu âm (-), SL (-) - SL (+), không chọc hút dịch ối - Khác BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI HOÀNG BẢO NGỌC NGHI£N CøU PH¸T HIƯN HéI CHøNG KLINEFELTER TRONG CHẩN ĐOáN TRƯớC SINH Và sau SINH CNG LUN VĂN THẠC SỸ Y HỌC HÀ NỘI - 2012 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI HỒNG BẢO NGỌC NGHI£N CøU PH¸T HIệN HộI CHứNG KLINEFELTER TRONG CHẩN ĐOáN TRƯớC SINH Và sau SINH CHUYÊN NGÀNH: Y SINH HỌC - DI TRUYỀN MÃ SỐ : 60.72.62 ĐỀ CƯƠNG LUẬN VĂN THẠC SỸ Y HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS PHAN THỊ HOAN HÀ NỘI - 2012 CÁC CHỮ VIẾT TẮT AFP : Alpha- fetoprotein hCG : Human chorionic gonadotropin ITT : Ít tinh trùng KCTT : Khơng có tinh trùng KF : Klinefelter MI : Giảm phân1 MII : Giảm phân NST : Nhiễm sắc thể PAPP-A : Pregnancy Associated Plasma Protein-A PCR : Polymerase chain reaction- kỹ thuật khuyếch đại chuỗi SCOS : Sertoli cell only syndrome- hội chứng có tế bào Sertoli uE3 : Estriol khơng liên hợp (Unconjugated Estriol) VS : Vô sinh MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tình hình nghiên cứu vơ sinh vơ sinh nam giới .3 1.1.1 Khái niệm vô sinh vô sinh nam giới 1.1.2 Tình hình vơ sinh nam giới giới .4 1.1.3 Tình hình vơ sinh vô sinh nam giới Việt nam .4 1.1.4 Chẩn đốn vơ sinh nam giới xét nghiệm tinh dịch đồ .5 1.1.5 Các nguyên nhân dẫn tới vô sinh nam giới 1.2 Hội chứng Klinefelter 14 1.2.1 Tần suất hội chứng Klinefelter 16 1.2.2 Nguyên nhân 16 1.2.3 Sàng lọc trước sinh hội chứng KF .18 1.2.4 Các phương pháp chẩn đoán trước sinh .23 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .28 2.1 Địa điểm nghiên cứu 28 2.2 Đối tượng nghiên cứu 28 2.3 Phương pháp nghiên cứu 28 2.3.1 Thiết kế nghiên cứu .28 2.3.2 Cỡ mẫu nghiên cứu .28 2.3.4 Nuôi cấy tế bào dịch ối với nhóm chẩn đốn trước sinh 29 2.3.5 Ni cấy tế bào bạch cầu lympho máu ngoại vi phân tích NST với nhóm bệnh nhân vơ sinh nam 31 2.3.6 Chẩn đoán phát đoạn nhỏ NST Y kỹ thuật Multiplex PCR .32 2.2.7 Khía cạnh đạo đức đề tài 36 CHƯƠNG 3: DỰ KIẾN KẾT QUẢ 37 3.1 Đặc điểm bệnh nhân KF nhóm vơ sinh nam 37 3.1.1 Đặc điểm bệnh nhân KF 37 3.1.2 Thời gian điều trị vô sinh .37 3.1.3 Kết xét nghiệm NST .38 3.1.4 Kết kỹ thuật Multiplex PCR phát đoạn AZF NST Y bệnh nhân KF 38 3.2 Đặc điểm thai phụ chẩn đoán trước sinh 39 3.2.1 Phân bố theo tuổi bố, mẹ 39 3.2.2 Tỷ lệ dấu hiệu siêu âm bất thường 39 3.2.3 Sản phẩm thai huyết mẹ hCG, AFP, uE3 39 CHƯƠNG 4: DỰ KIẾN BÀN LUẬN 40 4.1 Bàn đặc điểm nhóm bệnh nhân KF chẩn đốn từ bệnh nhân vô sinh nam 40 4.2 Bàn đặc điểm nhóm bệnh nhân KF chẩn đốn trước sinh 40 DỰ KIẾN KẾT LUẬN 41 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC ... Việt Nam, chưa có nhiều nghiên cứu KF chưa có nghiên cứu chẩn đốn hội chứng KF trước sinh Vì vậy, thực đề tài "Nghiên cứu phát hội chứng Klinefelter chẩn đoán trước sinh sau sinh" Với mục tiêu: Mô... số sản phẩm sinh học thai máu mẹ nên thai chẩn đoán trước sinh KF thường tình cờ phát sàng lọc có nguy cao hội chứng khác hội chứng Down hay trisomy 18 định chọc ối chẩn đoán trước sinh [11] Do... [64] Tỷ lệ hội chứng KF trước sinh cao Theo nghiên cứu Ferguson- Smith (1984), tỷ lệ KF chẩn đoán trước sinh 33/10000 trẻ trai [26] Năm 2000, nghiên cứu Đan mạch cho tỷ lệ hội chứng KF 153/100000