Báo cáo các phương pháp sắc ký ứng dụng trong nghiên cứu Dược liệu

ĐẠI HỌC Y DƢỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA DƢỢC BÁO CÁO MÔN PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ ỨNG DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU DƢỢC LIỆU Lớp cao học khóa 2016 - 2018 BỘ PHẬN PHÁT HIỆN TRONG SẮC KÝ KHÍ TRÌ KIM NGỌC Chuyên ngành: Dƣợc liệu – Dƣợc học cổ truyền Mã số:60720406 Khóa 2016-2018 TP HCM, 05/2018 ĐẠI HỌC Y DƢỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA DƢỢC BÁO CÁO MÔN PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ ỨNG DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU DƢỢC LIỆU Lớp cao học khóa 2016 - 2018 BỘ PHẬN PHÁT HIỆN TRONG SẮC KÝ KHÍ Chuyên ngành: Dƣợc liệu – Dƣợc học cổ truyền Mã số:60720406 Khóa 2016-2018 Thầy hƣớng dẫn: PGS.Ts Trần Hùng Học viên : Trì Kim Ngọc TP HCM, 05/2018 MỤC LỤC MỤC LỤC I ĐẶT VẤN ĐỀ II TỔNG QUAN SẮC KÝ KHÍ 2.1 Giới thiệu 2.2 Nguyên tắc hoạt động 2.3 Ứng dụng 2.4 Ưu điểm 2.4 Cải tiến kỹ thuật sắc ký khí III CÁC LOẠI BỘ PHẬN PHÁT HIỆN (DETECTOR) TRONG SẮC KÝ KHÍ 3.1 Detector ion hóa lửa (Flame Ionization Detector-FID) 3.1.1 Giới thiệu vai trò, cấu tạo 3.1.2 Yếu tố ảnh hưởng 3.2 Detector độ dẫn nhiệt (Thermal Conductivity Detector -TCD) 10 3.2.1 Giới thiệu vai trò, cấu tạo 10 3.2.2 Yếu tố ảnh hưởng 11 3.3 Detector Nitơ-phospho (Nitrogen-Phosphorus Detector-NPD) 11 3.3.1 Giới thiệu vai trò, cấu tạo 11 3.3.2 Yếu tố ảnh hưởng 12 3.4 Detector bẫy electron (Electron Capture Detector-ECD) 12 3.4.1 Giới thiệu vai trò, cấu tạo 12 3.4.2 Yếu tố ảnh hưởng 13 3.5 Detector quang hóa lửa (Flame Photometric Detector - FPD) 13 3.5.1 Giới thiệu vai trò, cấu tạo 13 3.5.2 Yếu tố ảnh hưởng 14 3.6 Detector phổ khối MS 15 3.6.1 Giới thiệu vai trò, cấu tạo 15 3.6.2 Nguyên tắc 15 3.6.3 Khối phổ ghép nhiều lần 16 IV KẾT LUẬN 17 TÀI LIỆU THAM KHẢO 18 I ĐẶT VẤN ĐỀ Các phương pháp tách sắc ký kỹ thuật phân tích sử dụng thường xuyên để phân tích thành phần Sắc ký khí kỹ thuật độc đáo linh hoạt Trong giai đoạn ban đầu phát triển áp dụng cho việc phân tích loại khí từ thành phần dễ bay Sắc ký khí kỹ thuật phân tích sử dụng để xác định sản phẩm (trong điều kiện kiểm soát tốt) phải ghép trực tiếp với phận phát để xác định tính hiệu Nguyên tắc sắc ký khí mối tương quan hợp chất pha tĩnh lớn hợp chất bị giữ lại cột lâu Vì vậy, trái tim sắc ký khí cột kiểm sốt luồng khí mang qua cột [9] Bên cạnh đó, phận phát (Detector) đóng vai trị quan trọng khơng hệ thống sắc ký nói chung sắc ký khí nói riêng Theo thời gian tiến không ngừng khoa học kỹ thuật, phận phát sắc ký khí ngày đa dạng, hoạt động theo chế khác Thêm vào đó, độ nhạy tính xác phận phát ngày cao Một số phận phát sử dụng sắc ký khí như: detector ion hóa lửa (FID), detector dẫn nhiệt (TCD), detector bẫy electron (ECD), detector ion hóa quang (PID), detector quang hóa lửa (FPD), detector ion hóa nhiệt (thermionic detector), detector phát xạ nguyên tử (AED), detector huỳnh quang hóa học tạo ozon hay fluor, phổ hồng ngoại (IR), phổ khối (MS) Bài báo trình bày sơ lược số phận phát sử dung sắc ký khí 4 II TỔNG QUAN SẮC KÝ KHÍ 2.1 Giới thiệu Archer J.P Martin Anthony T James giới thiệu phép sắc ký khí - lỏng năm 1950 họp Hội Sinh hóa tổ chức London Việc tạo tảng cho phát triển sắc ký khí Trong thực tế, Martin hình dung sắc ký khí gần mười năm trước làm việc với R L M Synge sắc ký phân vùng Martin Synge, người trao giải Nobel hóa học vào năm 1941, gợi ý việc tách hợp chất dễ bay đạt cách sử dụng làm pha động thay chất lỏng Sắc ký khí nhanh chóng chấp nhận chung giới thiệu vào thời điểm cần có biện pháp kiểm sốt phân tích cải tiến ngành cơng nghiệp hóa dầu cần có kỹ thuật để khắc phục hạn chế phương pháp cũ phịng thí nghiệm Ngày nay, sắc ký khí kỹ thuật hồn chỉnh sử dụng rộng rãi tồn giới để phân tích gần tất loại hợp chất hữu cơ, chí trạng thái ban đầu khơng linh động chúng chuyển đổi thành dẫn xuất dễ bay [2] Phân tách sắc ký khí lựa chọn mang lại nhiều lợi ích từ việc giảm thời gian phân tích Giảm bớt thời gian phân tích đạt cách thay đổi thông số cột như: chiều dài ngắn hơn, đường kính bên cột nhỏ hơn, màng pha tĩnh mỏng Hoặc thông số vận hành như: tốc độ chương trình nhiệt độ nhanh hơn, phân tích đẳng nhiệt Khí mang khác nhau, tốc độ dịng khí vận chuyển cao kết hợp hai cách áp dụng Gas Chromatography (GC) sử dụng 50 năm trước để giúp xác định thành phần thực phẩm, khám phá dinh dưỡng , nâng cao chất lượng thực phẩm giới thiệu loại thực phẩm Hơn nữa, GC cách tiếp cận đầy đủ để đo lường nhiều chất gây ô nhiễm hữu xảy nồng độ vi lượng thực phẩm môi trường mẫu phức tạp GC công cụ giúp đỡ người nhận phải thận trọng với nơng nghiệp hóa chất công nghiệp để tránh tổn hại sức khỏe môi trường [9] 2.2 Nguyên tắc hoạt động Cơ sở phân tách di chuyển chậm thành phần riêng lẻ chúng di chuyển qua cột khí mang, thường heli nitơ Các cột bao gồm ống thép thủy tinh chứa đầy vật liệu trơ thủy tinh hạt gốm (hình 1) Trong sắc kí khí - lỏng (GLC), chúng phủ với chất lỏng dễ bay hơi, để diện tích bề mặt chất lỏng tiếp xúc với khí lớn Đối với số trường hợp, giá mang chất rắn mà khơng có chất lỏng phủ lên; gọi sắc ký khí - rắn (GSC), điều sử dụng rộng GLC Mẫu bơm vào dịng khí mang Vì di chuyển qua cột với khí mang, phân tử chất có mẫu phân bố khí chất lỏng Từng phân tử liên tục di chuyển khí chất lỏng trạng thái cân động Một phân tử nằm pha khí dọc theo cột, cịn hịa tan chất lỏng giữ lại Một chất dễ bay hơi, phân tử chuyển động khí mang với thời gian ngắn hơn, xuất từ cột sớm 5 Bằng cách này, chất bị tách cột xuất thời gian khác cuối Thời gian thực từ tiêm mẫu đến chất xuất gọi thời gian lưu (Rt), đặc trưng cho chất điều kiện định Nó phụ thuộc vào biến động chất, nhiệt độ cột, chiều dài đường kính Nhiều chất có thời gian lưu giữ dài bất tiện nhiệt độ phòng, điều khắc phục cách nung nóng cột Khi tách thành phần cột riêng lẻ, cần số phương pháp phát Hai loại phậ phát thường sử dụng là: dẫn nhiệt ion hóa lửa [9] Hình 2.1 Sơ đồ cấu tạo hệ thống sắc ký khí 2.3 Ứng dụng Sắc ký khí (GC) sử dụng rộng rãi ứng dụng liên quan đến phân tích thực phẩm Các ứng dụng điển hình liên quan đến phân tích định lượng và/hoặc định tính thực phẩm thành phần, sản phẩm tự nhiên, phụ gia thực phẩm, hương vị thành phần hương liệu, loạt sản phẩm chuyển hóa chất gây nhiễm, chẳng hạn thuốc trừ sâu, thuốc xông hơi, chất gây ô nhiễm môi trường, độc tố tự nhiên, thuốc thú y vật liệu đóng gói [5] Và thức ăn đặc biệt ứng dụng liên quan đến GC, chẳng hạn carbohydrate vàaxit amin Lipid lipophilic kèm hợp chất, hương vị hương thơm GC sử dụng để tách phân tích trực tiếp mẫu khí, dung dịch lỏng chất rắn dễ bay Nếu mẫu phân tích khơng bay hơi, kỹ thuật sử dụng dẫn xuất nhiệt phân GC Sắc ký khí (GC) kỹ thuật phân tích khơng thể thiếu việc áp dụng phép xác định axit béo hạt giống có dầu, sinh tổng hợp người trao đổi chất Cũng đặc tính phức tạp hỗn hợp đồng phân hình học kết hợp với tách sắc ký quang phổ nhận dạng Các nhà nhân giống trồng sử dụng GC phương pháp xác nhanh chóng để nghiên cứu biến thể dẫn xuất axit béo loại có dầu hạt Cải dầu, hạt Lanh, Rum [8] Hình 2.2 So sánh GC HPLC ứng dụng thực phẩm khoảng thời gian (11 năm) tài liệu khoa học PubMed [8] 2.4 Ƣu điểm Phân tích GC phương pháp định tính định lượng tối ưu hỗn hợp phức tạp presupposes: (1) độ phân giải tốt, thể đỉnh nhọn đối xứng; (2) độ lặp lại cao độ lặp lại thời gian lưu; (3) độ xác độ xác cao định lượng dựa diện tích pic phép đo, tức không phân biệt thành phần thông qua biến động, phân cực tập trung; (4) hạn chế phân hủy mẫu nhiệt xúc tác [9] 2.4 Cải tiến kỹ thuật sắc ký khí Phương pháp sắc ký khí phát triển cho sản phẩm khơng có sẵn phương pháp thức Phương pháp thay cho sản phẩm có (NonPharmacopoeial) làm giảm chi phí thời gian để có độ xác độ chắn tốt Một số bước xem xét để phát triển phương pháp GC chọn cột (kích thước: đường kính cột, độ dài độ dày), lựa chọn khí mang (nitơ, helium), lập trình nhiệt độ (nhiệt độ ban đầu, ban đầu giữ, tốc độ dốc, nhiệt độ cuối giữ cuối cùng), nhiệt độ vòi phun nhiệt độ đầu dò 7 Các bước liên quan đến cải tiến phương pháp: - Hiểu đặc tính lý hóa mẫu - Lựa chọn điều kiện sắc ký - Cải tiến phương pháp phân tích - Chuẩn bị mẫu - Tối ưu hóa phương pháp - Phương pháp kiểm chứng [9] III CÁC LOẠI BỘ PHẬN PHÁT HIỆN (DETECTOR) TRONG SẮC KÝ KHÍ Một loạt đầu dị thương mại có sẵn để sử dụng với GC, loại có hạn chế lợi riêng Đầu dị thường sử dụng GC đầu dò ion hóa lửa (FID) Nhiệt độ đầu dị lưu lượng tương đối khí mang, khí hydro khơng khí vào đầu dị chìa khóa thơng số hoạt động Một loạt tiêu chuẩn định nghĩa để đánh giá thông số detector trôi, nhiễu, độ nhạy, phạm vi tuyến tính, phạm vi động,… phản ứng detector với tốc độ dòng chảy phụ thuộc vào nồng độ khối lượng Detector phụ thuộc nồng độ (ví dụ: detector độ dẫn nhiệt (TCD), detector ion hóa quang(PID)) tốc độ dịng chảy khơng ảnh hưởng đến chiều cao đỉnh nhiên chiều rộng đỉnh tăng lên Ngược lại, detector phát dòng chảy khối lượng (ví dụ, ion hóa lửa (FID), detector quang hóa lửa (FPD), detector nitơ photpho) tỷ lệ thuận với thời gian lưu [9] Trước đầu dò ion hóa lửa sử dụng kể từ giới thiệu vào năm 1958, đầu dị ion hóa lửa (FID) phát triển thành công cụ sử dụng phổ biến hóa học phân tích [4] Ngày với phát triển khoa học kỹ thuật, có thêm nhiều loại đầu dị ứng dụng sắc ký khí với cấu tạo chế cải tiến không ngừng theo thời gian như: Một số phận phát sử dụng sắc ký khí như: detector dẫn nhiệt (TCD), detector bẫy electron (ECD), detector ion hóa quang (PID), detector quang hóa lửa (FPD), detector ion hóa nhiệt (thermionic detector), detector phát xạ nguyên tử (AED), detector huỳnh quang hóa học tạo ozon hay fluor, phổ hồng ngoại (IR), phổ khối (MS) 3.1 Detector ion hóa lửa (Flame Ionization Detector-FID) 3.1.1 Giới thiệu vai trò, cấu tạo Cho đến nay, FID máy dò phổ biến sử dụng sắc ký khí (GC) phạm vi ứng dụng rộng độ nhạy cao xác định theo phát số ion gam cacbon theo thứ tự 0,015 C/gC Cũng FID có Giới hạn phát tối thiểu thấp (MDL - định nghĩa tín hiệu đo tỷ lệ tín hiệu nhiễu đường (S/ N) hai), thông thường theo thứ tự gram carbon giây (gC/s) FID thường sử dụng để định lượngcác hợp chất hữu dễ bay mẫu khí độ nhạy chọn lọc cao chúng đối vớihydrocacbon FID sử dụng thiết bị độc lập cho tổng phân tích hydrocacbon (THA) detector cho GC FID thường làm thép không gỉ kết nối máy dị để thích hợp nguồn cung cấp khí đốt Đầu dị thường nối với ba nguồn khí riêng biệt với điều khiển lưu lượng khối tương ứng chúng Khí sử dụng để đốt cháy hydro khí (oxy) khí hydro, nitơ (ít thường xuyên hơn) khí hydro thường sử dụng làm khí mang Khí vận chuyển mẫu qua cột cung cấp phân tích cho lửa tạo thành "trái tim" thiết bị FID thường đặt lò riêng biệt để đảm bảo khơng có chất tan ngưng tụ ống cột kết nối [4] Đầu dị ion hóa lửa truyền mẫu khí mang từ cột thơng qua lửa khí hydro Ngọn lửa khí hydro tạo vài ion, hợp chất hữu bị đốt cháy có gia tăng ion sinh Điện áp phân cực thu hút ion tới thu gần lửa Các ion tạo tỷ lệ thuận với lượng mẫu đốt cháy Điều làm cho dòng điện cảm nhận máy đo điện, chuyển thành dạng số gửi đến thiết bị đầu [1] Hình 3.3 Sơ đồ cấu tạo đầu dị ion hóa lửa (FID) 3.1.2 Yếu tố ảnh hưởng Ảnh hưởng thông số khác 9 Do ảnh hưởng việc thay đổi thông số khác đặc tính detector ion hóa lửa khơng phải lúc hiểu rõ, nên cần phải nghiên cứu cách có hệ thống Sự ổn định dịng chảy dịng khí mang luồng hydro phải xem xét mức phát nồng độ tối thiểu Trong hầu hết trường hợp thường lệ phân tích ion hóa hydro bị bỏ qua Khơng khí đốt tốc độ dịng chảy có ảnh hưởng nhẹ đến độ nhạy đầu dò Hiệu ứng biểu diễn hình.3.4 Sự tăng độ nhạy xảy với tốc độ dịng khí cao Do đó, điều khiển lưu lượng khơng khí đơn giản phải đủ tốt để không ảnh hưởng đến tín hiệu phân tích Tốc độ dịng khí khoảng 501 / h phù hợp với dịng khí hydro 2,5I / h Carbon dioxid khơng khí khơng chịu trách nhiệm độ dẫn khơng tế bào Một yếu tố khác ảnh hưởng đến độ nhạy máy dò tỷ lệ hydro/nitơ Một gia tăng nhỏ độ nhạy thu đầu mối nitơ Tỷ lệ I: đến I: I.5 cho kết tăng độ nhạy 25% so sánh với hydro Một hiệu ứng thuận lợi bổ sung ion hóa hidro giảm nhẹ bổ sung nitơ Hình 3.4 Ảnh hƣởng tốc độ dịng chảy đến độ nhạy đầu dò [6] Các điều kiện sau ngăn đầu dị hoạt động • Nhiệt độ đặt 150 °C • Lưu lượng khơng khí hydro đặt chế độ Tắt đặt 0.0 • Lỗi đánh lửa 10 Tắt đầu dị Nếu đầu dị khí bị tắt lỗi khí nén đánh lửa dị ngưng hoạt động Điều ngưng tất thứ ngoại trừ nhiệt độ đầu dị lưu lượng khí Có hai loại FID có sẵn FID tối ưu hóa mao dẫn sử dụng với cột mao quản theadaptable FID phù hợp với cột thiết kế điều chỉnh để phù hợp với cột mao dẫn [1] 3.2 Detector độ dẫn nhiệt (Thermal Conductivity Detector -TCD) 3.2.1 Giới thiệu vai trò, cấu tạo TCD so sánh độ dẫn nhiệt hai dịng khí - sóng mang khí tinh khiết (cịn gọi khí tham chiếu) khí mang với thành phần mẫu (cũng gọi nước thải cột) Đầu dò chứa dây tóc đun nóng điện để nóng so với thân máy dị Nhiệt độ filament giữ liên tục dòng khí tham chiếu nước thải thay qua Khi mẫu thêm vào, phải giữ cho nhiệt độ khơng thay đổi Hai dịng khí chuyển qua dây tóc năm lần giây khác biệt cơng suất đo ghi lại Khí heli (hoặc hydro) sử dụng làm chất mang, mẫu gây nhiệt độ dẫn giảm Nếu nitơ sử dụng, độ dẫn nhiệt thường tăng lên hầu hết thứ có tính dẫn điện cao so với nitơ Vì TCD khơng phá hủy mẫu q trình phát hiện, điều đầu dị nối vào hàng loạt với đầu dị ion hóa lửa đầu dị khác [1] 11 Hình 3.5 Sơ đồ cấu tạo đầu dò độ dẫn nhiệt (TCD) 3.2.2 Yếu tố ảnh hưởng Khí mang, khí tham chiếu khí bù đắp Khí tham khảo bù đắp phải giống khí mang loại khí phải xác định hai bảng điều khiển đầu vào đầu dị Khi sử dụng cột đóng gói, chúng tơi đề nghị dịng khí bù đắp nhỏ (2 đến mL / phút) để có hình dạng đỉnh tốt [1] Phân cực âm Các thành phần mẫu có độ dẫn nhiệt cao so với khí mang tạo đỉnh âm Ví dụ, heli hydro tạo thành đỉnh âm với nitơ khí mê-tan khí mang [1] Hydro phân tích Hydro nguyên tố có độ dẫn nhiệt lớn helium, hỗn hợp lượng nhỏ hydro ( B) vài trăm đến hàng ngàn volts trước vào máy phân tích - Việc tách ion diễn máy phân tích đặt từ trường, áp suất khoảng 10-8 mbar Từ trường mạnh áp dụng vuông góc với hướng chuyển động ion Các ion chuyển động nhanh sau theo quỹ đạo hình trịn, với gia tốc Lorentz, bán kính xác định tỷ số khối lượng/điện tích ion sức mạnh từ trường Các ion với tỷ lệ khối lượng/điện tích khác bị buộc thơng qua lối thoát-khe biến thể điện áp tăng tốc (A> B) cách thay đổi lực từ trường - Sau ion qua khe thoát, chúng va chạm vào điện cực thu Các kết khuếch đại ghi nhận hàm lực từ trường điện áp tăng tốc [7] 16 Hình 3.8 Các phận thiết yếu máy đo phổ khối phân tích Hình 3.9 Sơ đồ buồng ion hóa 3.6.3 Khối phổ ghép nhiều lần Khối phổ - Khối phổ (MS /MS) phương pháp có hai giai đoạn phân tích khối lượng, kết hợp với trình phân ly phản ứng hóa học gây để thay đổi khối lượng điện tích ion Về có hai cách tiếp cận khác MS / MS: không gian cách ghép nối hai phần cụ thể vật lý khác (ví dụ: ba tứ cực, QqQ); thời gian cách thực chuỗi kiện thiết bị lưu trữ ion (ví dụ: bẫy ion) 17 Các chế độ quét MS / MS chọn để giám sát phản ứng, giám sát phản ứng nhiều lần MS / MS phương pháp thường liên quan đến việc kích hoạt ion chọn, thường va chạm với khí trơ, đủ để tạo phân mảnh (va chạm gây phân ly, CID) Quét ion tiền thân liên quan đến việc lựa chọn ion quan tâm, kích hoạt phân tích khối lượng ion sản phẩm Quét ion sản phẩm đại diện cho trình đối diện so với quét ion tiền thân Nó hữu ích cho việc sàng lọc nhanh chóng nghiên cứu trao đổi chất Khối lượng sản phẩm chất phân tích chọn ion phân mảnh khác đẩy khỏi tế bào Ion sản phẩm có thể, lần nữa, phải chịu CID, tạo nhiều ion sản phẩm phân tích khối lượng (MS / MS / MS) Q trình lặp lại nhiều lần Tuy nhiên, đề cập, phân tử nhỏ chất độc thực phẩm có MS / MS MS / MS / MS sử dụng chủ yếu thực tế [3] IV KẾT LUẬN Đầu dị cảm nhận thuộc tính lý hóa chất phân tích cung cấp phản ứng khuếch đại chuyển đổi thành tín hiệu điện tử để tạo sắc ký đồ Hầu hết đầu dò sử dụng GC phát minh cho kỹ thuật này, ngoại trừ máy dò độ dẫn nhiệt (TCD) khối quang phổ kế Tổng cộng, khoảng 60 đầu dò sử dụng GC Đầu dò đáp ứng nâng cao số loại phân tích định gọi "đầu dị chọn lọc" Bảng 4.1 Các loại đầu dò dùng sắc ký khí [9] Trong 10 năm trở lại có gia tăng sử dụng GC kết hợp với khối phổ (MS) Khối phổ trở thành đầu dò chuẩn cho phép giới hạn phát thấp khơng u cầu tách tất thành phần có mẫu Khối phổ loại đầu dị phát cung cấp nhiều thơng tin với microgram mẫu Định danh định tính hợp chất chưa biết phân tích định lượng mẫu sử dụng GC-MS Khi GC kết hợp với khối phổ, hợp chất tách khỏi cột GC ion hóa cách sử dụng electron (EI, ion hóa electron) phản ứng hóa học (CI, ion hóa hóa học) Các ion tập trung tăng tốc vào máy phân tích khối lượng: thường máy phân tích khối tứ cực Mảnh vỡ với khối lượng di chuyển tạo tín 18 hiệu di động, hợp chất tạo ion phạm vi khối lượng máy phân tích khối lượng phát Giới hạn phát từ 1-10 ng chí giá trị thấp (ví dụ: 10 pg) đạt lựa chọn chế độ quét thích hợp [2] TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Agilent Technologies (2000), Agilent 6890 Series Gas Chromatograph, Hewlett-Packard Co.,vol [2] Alejandra Garcia Piantanida, Andrew R Barron, (2014), Principles of Gas Chromatography, OpenStax-CNX [3] Jana Hajšlová, Tomáš ýajka (2007), Gas chromatography–mass spectrometry (GC– MS), Food Toxicants Analysis, pp 454-460 [4] Jihyung Kim (2013), Development and experimental analysis of microflame ionzation detector for portable gas chromatographs, the requirements for the degree of Doctor of Philosophy in Mechanical Engineering in the Graduate College of the University of Illinois at Urbana-champaign [5] Lehotay, Steven J., and Jana Hajslova (2002), Application of gas chromatography in food analysis, TRAC Trends in Analytical Chemistry, pp 686-697 [6] Ongkiehong, L (1960), The hydrogen flame ionization detector Eindhoven, Technische Hogeschool Eindhoven, pp 33-34 [7] Peter M van Galen and Martin C Feiters (2016), Mass Spectrometry part of the Instrumental Analysis in (Bio)Molecular Chemistry, Institute for Molecules and Materials [8] Seppanen-Laakso, T., I Laakso, and R Hiltunen (2002), Analysis of fatty acids by gas chromatography, and its relevance to research on health and nutrition, Analytica Chimica Acta 465 (1), pp 39-62 [9] Wedad Q AL-Bukhaiti, Anwar Noman, Aseela Saeed Qasim, Ammar AL-Farga, (2017), Gas Chromatography: Principles, Advantages and Applications in Food Analysis, International Journal of Agriculture Innovations and Research Volume 6, Issue 1, pp 123-128  ... HỒ CHÍ MINH KHOA DƢỢC BÁO CÁO MÔN PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ ỨNG DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU DƢỢC LIỆU Lớp cao học khóa 2016 - 2018 BỘ PHẬN PHÁT HIỆN TRONG SẮC KÝ KHÍ Chuyên ngành: Dƣợc liệu – Dƣợc học cổ truyền... dò 7 Các bước liên quan đến cải tiến phương pháp: - Hiểu đặc tính lý hóa mẫu - Lựa chọn điều kiện sắc ký - Cải tiến phương pháp phân tích - Chuẩn bị mẫu - Tối ưu hóa phương pháp - Phương pháp. .. hủy mẫu nhiệt xúc tác [9] 2.4 Cải tiến kỹ thuật sắc ký khí Phương pháp sắc ký khí phát triển cho sản phẩm khơng có sẵn phương pháp thức Phương pháp thay cho sản phẩm có (NonPharmacopoeial) làm