Đánh giá kết quả kỹ thuật tiêm tinh trùng vào bào tương noãn tại bệnh viện đại học y hà nội

1 ĐẶT VẤN ĐỀ Cùng với phát triển mạnh mẽ khoa học kỹ thuật, nhiều phương pháp hỗ trợ sinh sản (HTSS) đời, mang lại niềm vui, niềm hạnh phúc cho cặp vợ chồng cần tới can thiệp y học Năm 1978, em bé thụ tinh ống nghiệm (TTTON) Louise Brown đời đánh dấu bước đầu cho phát triển IVF (in vitro fertilization) người Tuy nhiên, kỹ thuật chủ yếu áp dụng cho trường hợp vơ sinh ngun nhân vòi tử cung hay trường hợp tinh trùng bất thường vừa nhẹ, trường hợp vơ tinh hay bất thường tinh trùng nặng chưa giải Đến năm 1992, Palermo G.D với thành công kỹ thuật tiêm tinh trùng vào bào tương noãn (ICSI – intracytoplasmic sperm injection), nhà khoa học tạo phôi với tinh trùng trứng, giúp giải vấn đề vô sinh kháng thể kháng tinh trùng, thụ tinh khơng với tinh trùng tươi có bất thường nhẹ trung bình mà với tinh trùng đơng lạnh, tinh trùng có bất thường số lượng, khả di động hay hình thái bất thường nặng [1],[2] Trên giới, vài năm sau ICSI triển khai khắp nơi giúp tạo hai triệu trẻ em, trở thành kỹ thuật điều trị phổ biến lĩnh vực HTSS, coi cách mạng điều trị vô sinh nam [1] Tại Việt Nam, bệnh viện (BV) Phụ sản Từ Dũ thực kỹ thuật ICSI năm 1999 Bệnh viện Phụ sản Trung ương (BVPSTƯ) áp dụng thành công kỹ thuật năm 2001 [3] Trong tương lai kỹ thuật triển khai rộng rãi nước Để đánh giá kết việc áp dụng kỹ thuật điều trị trung tâm HTSS công nghệ mô ghép (CNMG) thuộc BV Đại học Y Hà Nội, thực đề tài: “Đánh giá kết kỹ thuật tiêm tinh trùng vào bào tương noãn Bệnh viện Đại học Y Hà Nội” với hai mục tiêu sau: Xác định tỷ lệ thụ tinh, tạo phơi, tỷ lệ có thai mức sinh hóa kỹ thuật ICSI Khảo sát số yếu tố ảnh hưởng đến kết có thai kỹ thuật ICSI Chương TỔNG QUAN 1.1 SINH LÝ THỤ TINH 1.1.1 Định nghĩa thụ tinh Sự thụ tinh kết hợp giao tử đực (tinh trùng) với giao tử (noãn) để hình thành tế bào trứng thụ tinh, hay gọi hợp tử Muốn thụ tinh xảy ra, tinh trùng phải lọt vào bào tương noãn [4], [5] TTTON lấy noãn người phụ nữ qua chọc hút kết hợp với tinh trùng chuẩn bị ống nghiệm, sau phơi hình thành chuyển trở lại buồng tử cung người mẹ Q trình phát triển phơi thai diễn bình thường tử cung người mẹ [6] 1.1.2 Quá trình sinh tinh Sinh tinh trình trải qua nhiều giai đoạn phức tạp, xảy tinh hồn Bắt đầu từ tinh ngun bào có NST 46 XY, tinh nguyên bào tiến hành nguyên phân tạo tinh bào I có NST 46 XY Tinh bào bước vào giảm phân lần thứ cho tinh bào có NST 23, X 23, Y dạng kép Sau tinh bào tiếp tục giảm phân lần tạo thành tiền tinh trùng qua q trình biệt hóa phức tạp tạo tinh trùng Từ tinh bào cho tinh trùng [7] Tinh trùng có cấu tạo bình thường dài khoảng 60µm gồm ba đoạn đầu, cổ đi: - Đầu: hình bầu dục, dẹt, dài khoảng - µm, rộng 2µm Nhân lớn chiếm gần hết đầu tinh trùng Đoạn 2/3 trước nhân chụp túi cực đầu có hình mũ, lòng túi chứa nhiều enzym có tác dụng tiêu hủy chướng ngại vật bao quanh nỗn chín để tinh trùng tiến vào bào tương noãn thụ tinh - Cổ: đoạn ngắn hẹp, gắn thẳng trục với đầu - Đuôi: di khong 55àm, chia lm on: on trung gian: dài khoảng – µm Giữa đoạn trung gian đoạn chính, màng tế bào dày lên tạo thnh vũng Zensen on chớnh: di nht, khong 45àm, gồm dây trục nằm trung tâm, vây quanh bao sợi xơ bọc màng tế bào • Đoạn cuối: dài khoảng – µm, tạo dây trục bọc màng tế bào [8] 1.1.3 Quá trình hình thành, phát triển nỗn Ở nữ, buồng trứng trước tuổi dậy có khoảng 400000 nang nỗn ngun thủy Tuy vậy, tính đời sống hoạt động tình dục có khoảng 400 - 500 nang nỗn trưởng thành tiến tới chín, số lại thối hóa Sinh nỗn q trình phức tạp, xảy buồng trứng Nang noãn coi đơn vị sinh lý sinh sản nữ, nỗn hình thành phát triển nang noãn Nang trứng nguyên thủy phát triển thành nang trứng nguyên phát, thứ phát, giai đoạn sau nang trứng chín (De Graff) Nỗn chứa nang chín có đường kính từ 100 - 150 µm Nó phóng từ nang Graff với nhiều tế bào hạt bao quanh [8],[9] Quá trình giảm phân sinh nỗn người dài, có giai đoạn nghỉ Giai đoạn nghỉ thứ noãn sơ cấp bước vào pha diplotene kỳ trước giảm phân I Lúc này, NST bao quanh màng nhân, hình thành nên cấu trúc gọi túi nhân (germinal vesicle – GV) Khi sinh, buồng trứng bé gái hồn tồn nỗn GV Đến tuổi dậy với xuất đỉnh LH (luteinizing hormone), q trình phát triển nỗn khởi động trở lại, tiếp tục trải qua lần giảm phân thứ bước vào lần giảm phân thứ hai, dừng lại kỳ giảm phân II tạo thành noãn MII (metaphase II) hay noãn trưởng thành chuẩn bị phóng nỗn Cho đến thụ tinh, q trình giảm phân hồn thành, nỗn chín tạo [9] 1.1.4 Quá trình thụ tinh Muốn thụ tinh được, tinh trùng phải trải qua phản ứng lực hóa, phản ứng cực đầu để vượt qua lớp tế bào nang vượt qua màng suốt Những hàng rào loại bỏ sử dụng kỹ thuật ICSI Sau xâm nhập vào bào tương nỗn, thụ tinh tiếp tục q trình phức tạp bao gồm: tương tác trứng tinh trùng (tinh trùng kích hoạt trứng MII nhờ yếu tố bào tương tinh trùng), loạt kiện xảy bao gồm biến đổi hình thái hóa học cần thiết để phơi phát triển bình thường (sự hoạt hóa trứng, phản ứng hạt vỏ dẫn tới phản ứng trơ màng suốt tránh tượng đa thụ tinh, kết thúc giảm phân giải phóng cực cầu 2, hình thành hai tiền nhân đực cái, hòa hợp tiền nhân khởi động phân chia tế bào) [10] 1.2 ĐỊNH NGHĨA VÀ CHỈ ĐỊNH KỸ THUẬT ICSI 1.2.1 Định nghĩa Kỹ thuật TTTON cổ điển có lịch sử phát triển lâu dài, ban đầu định cho trường hợp vô sinh nữ, sau định cho trường hợp thiểu tinh trùng cho kết khơng khả quan Đã có nhiều kỹ thuật vi thao tác đời kỹ thuật SUZI (subzonal sperm insemination) - kỹ thuật tiêm tinh trùng vào khoảng quanh noãn, kỹ thuật PZD (partial zona dissection) - kỹ thuật dùng kim cực nhỏ để đục thủng màng suốt để hỗ trợ trường hợp thiểu tinh trùng, kỹ thuật Zona drilling - kỹ thuật dùng dung dịch acid tyrode tẩy thủng lỗ nhỏ màng suốt để hỗ trợ trường hợp thiểu tinh trùng đời, nhiên tỷ lệ thành công thấp [11] ICSI kỹ thuật thực thông qua hệ thống kính hiển vi đảo ngược gắn vi thao tác, tinh trùng bị bắt kim vi tiêm tiêm thẳng vào bào tương noãn Kỹ thuật mở cánh cửa điều trị vô sinh nam Với ICSI, người chồng có dù bị bất thường tinh trùng nặng, kể trường hợp khơng có tinh trùng tinh dịch, phải sử dụng tinh trùng trích xuất [12] 1.2.2 Chỉ định kỹ thuật 1.2.2.1 Chỉ định tuyệt đối - Bất thường tinh trùng nặng: tinh trùng yếu, ít, dị dạng với số lượng tinh trùng < 5.106 và/hoặc < 5.105 tinh trùng di động/ml - Tinh trùng lấy thủ thuật: PESA (percutaneous epididymal sperm aspiration – chọc hút tinh trùng từ mào tinh qua da), MESA (microsurgical epididymal sperm aspiration – vi phẫu chọc hút tinh trùng từ mào tinh), TESE (testicular sperm extraction – sinh thiết tinh hoàn lấy tinh trùng), TESA - (testicular sperm aspiration – chọc hút tinh trùng từ tinh hoàn) Trưởng thành trứng non ống nghiệm Tinh trùng trữ lạnh Thực kỹ thuật chẩn đoán di truyền tiền làm tổ Thất bại nhiều lần với IVF (≥ lần) 1.2.2.2 Chỉ định tương đối - Vô sinh không rõ nguyên nhân Tinh trùng bất thường vừa nhẹ Tắc vòi tử cung Lạc nội mạc tử cung Khi phải thực đông phôi toàn Hội chứng buồng chứng đa nang [13] Tuy nhiên, nhiều trung tâm HTSS, định ICSI áp dụng thường quy cho tất chu kỳ TTTON để đảm bảo tỷ lệ thất bại thụ tinh không xảy tận dụng ưu điểm kỹ thuật 1.3 QUY TRÌNH THỰC HIỆN KỸ THUẬT Quy trình thực kỹ thuật ICSI gồm nhiều bước nhiều cơng đoạn, chia thành bước sau: 1.3.1 Khám định bệnh nhân làm ICSI Chỉ định kỹ thuật ICSI dựa vào kết thăm khám lâm sàng, xét nghiệm xét nghiệm đánh giá khả sinh sản vợ chồng 1.3.2 Kích thích buồng trứng theo dõi phát triển nang nỗn Kích thích buồng trứng nhằm thu nhiều nang nỗn trưởng thành chu kỳ TTTON Có nhiều phác đồ kích thích buồng trứng khác Trong q trình kích thích buồng trứng, nang nỗn theo dõi siêu âm đầu dò âm đạo định lượng nồng độ estradiol để đánh giá chất lượng nang noãn 1.3.3 Chọc hút noãn lấy tinh dịch 1.3.3.1 Chọc hút noãn Chọc hút noãn thực sau tiêm hCG 34 - 36 giờ, hướng dẫn siêu âm đường âm đạo Dịch nang sau thu nhận chuyển qua labo IVF Quá trình tìm nỗn thực kính hiển vi soi nổi, độ phóng đại 10x - 20x Nỗn rửa sạch, cho vào môi trường nuôi cấy GIVF (Vitrolife – Thụy Điển) 6% CO2 nhiệt độ 37ºC thời gian từ - [9],[11] 1.3.3.2 Các nguồn tinh trùng sử dụng ICSI - Xuất tinh tự nhiên: thủ dâm dùng bao cao su chun dụng khơng có độc tố với tinh trùng - Từ mẫu trữ lạnh tinh trùng - Các thủ thuật lấy tinh trùng: PESA, TESE, MESA, TESA [ 14] 1.3.4 Chuẩn bị noãn chuẩn bị tinh trùng 1.3.4.1 Chuẩn bị noãn Phân loại noãn thực kính hiển vi sau ủ noãn tách tế bào hạt xung quanh Dựa vào trưởng thành nhân, noãn phân chia thành loại chính: - GV: Nhân dạng túi hình cầu chứa hạt nhân to - MI: Khơng có diện túi nhân chưa xuất thể cực thứ - MII: Sự diện thể cực thứ khoang quanh noãn [15] Phức hợp noãn tế bào hạt loại bỏ lớp tế bào quanh noãn cách sử dụng hyaluronidase kết hợp với phương pháp học Lớp tế bào hạt tách rời tiếp xúc với hyaluronidase, đó, tế bào vành tia (corona radiata) tách khỏi nỗn pipette có kích thước khác với kích cỡ nhỏ khoảng 130µm Tách nỗn với mục đích loại tối đa lớp tế bào quanh noãn để thao tác tiêm tinh trùng dễ dàng hơn, đồng thời, giúp xác định rõ thể cực Noãn sau tách tiếp tục ủ lại tủ nuôi cấy giúp trứng trưởng thành bào tương hồi phục nhiệt độ [9] A: Noãn GV với túi nhân B: Noãn MI C: Noãn MII với thể cực vị trí 14 Hình 1.1 Phân loại noãn theo trưởng thành nhân [16] 1.3.4.2 Chuẩn bị tinh trùng Bước có mục đích loại tinh tương, tế bào chết tinh dịch cải thiện chất lượng tinh trùng Có hai phương pháp hay dùng phương pháp bơi lên phương pháp thang nồng độ - Phương pháp bơi lên áp dụng với mẫu tinh dịch bình th ường Môi trường đặt bên tinh dịch ly giải, tinh trùng có kh ả khỏi lớp tinh dịch phía bơi lên bề mặt thống c môi tr ường nhờ khả tự di chuyển nhờ - Phương pháp thang nồng độ: hóa chất dùng để lọc tinh trùng nồng độ khác có chức lọc, loại bỏ tinh trùng chết, dị d ạng, di động thành phần khác tinh dịch Phần tinh d ịch l ọc rửa lần với môi trường ni cấy để loại bớt hóa chất bước lọc [17] 1.3.5 Thực kỹ thuật ICSI Kỹ thuật ICSI cần trang thiết bị cần thiết kính hiển vi đảo ngược, loại có cấu tạo đặc biệt giúp có khoảng khơng gian rộng rãi cho việc thao tác có độ phóng đại lớn, từ 40x đến 400x Ngoài ra, thiết bị quan khác hệ thống vi thao tác, giúp chuyển đổi thao tác tay người thực với biên độ dao động lớn thành 10 dao động có biên độ nhỏ Đi kèm hệ thống vi tiêm, dùng để tạo áp lực với noãn tinh trùng, gồm kim cố định nỗn có đầu tù kim tiêm tinh trùng có mặt vát, đầu nhọn đầu tù Kỹ thuật ICSI gồm bước sau: Bước 1: Chuẩn bị hệ thống vi thao tác: - Bật bệ sưởi ấm, đưa cần chỉnh hệ thống vi thao tác v ị trí trung gian, chỉnh kim - Chuẩn bị đĩa ICSI, bao gồm giọt PVP (polyvinylpyrrolidone) - có tác dụng giảm độ di động tinh trùng - gi ọt môi tr ường có hệ đệm HEPES để chứa nỗn Bước 2: Chọn lựa, bất động tinh trùng: - Thông thường, người tiêm tinh trùng lựa tinh trùng “bình thường” hình dạng khả di dộng độ phóng đại 300-400x - Sau lựa chọn tinh trùng, việc bất động thông qua dùng kim tiêm chà vào đuôi tinh trùng hay hút tinh trùng vào nhi ều l ần, mục đích để tạo tác động học làm màng bào t ương bị t ổn thương, cho phép tinh trùng giải phóng bào t ương có tác d ụng hoạt hóa nỗn Vì vậy, dù sử dụng tinh trùng không di động, việc bất động phải thực TÀI LIỆU THAM KHẢO Palermo G D., Neri Q V., Schlegel P N et al (2014) Intracytoplasmic sperm injection (ICSI) in extreme cases of male infertility PLoS One, (12), e113671 Lu Y H., Gao H J., Li B J et al (2012) Different sperm sources and parameters can influence intracytoplasmic sperm injection outcomes before embryo implantation, J Zhejiang Univ Sci B, 13 (1), 1-10 Phạm Việt Thanh (2009) Tình hình muộn hệ thống HTSS Việt Nam Hội nghị muộn tồn quốc lần thứ nhất, Hồ Chí Minh ngày 17-18/07/2009, Bệnh viện Từ Dũ bệnh viện Phụ sản Trung ương, 1-3 Phạm Văn Lình Cao Ngọc Thành (2007) Sản Phụ Khoa, Nhà xuất Y học, Hà Nội Đỗ Kính (1999) Phơi thai học người, Nhà xuất Y học, Hà Nội Lưu Thị Hồng Lê Thị Thanh Vân (2003) Các phương pháp hỗ trợ sinh sản, chẩn đoán điều trị vô sinh, Nhà xuất Y học, Hà Nội, 173-187 Phạm Thị Hoa Hồng (1998) Sự thụ tinh, làm tổ phát triển trứng, Bài giảng sản phụ khoa, 5, nhà xuất Y học, 10-12 Trịnh Bình (2007) Mơ - Phơi phần Mơ học, Nhà xuất Y học, Hà Nội Hồ Mạnh Tường, Đặng Quang Vinh Vương Thị Ngọc Lan (2011) Thụ tinh ống nghiệm, Nhà xuất Giáo dục Việt Nam, Hà Nội 10 Sadler T.W (2012) Langman's medical embryology, 12, Wolters Kluwer Health, New York 11 Gardner D.K et al (2009) Textbook of Assisted Reproductive Technology, Informa Healthcare, London 12 Palermo G D., Joris H., Devroey P et al (1992) Pregnancies after intracytoplasmic injection of single spermatozoon into an oocyte The Lancet, 340 (8810), 17-18 13 Đặng Quang Vinh (2004) Tiêm tinh trùng vào bào tương trứng, Sức khỏe sinh sản, Nhà xuất Y học, Hà Nội, 6-7 14 Nguyễn Thị Mỹ Dung (2011) Đánh giá kết PESA - ICSI bệnh viện Phụ Sản Trung Ương năm 2006-2010, Luận văn thạc sỹ Y học, Trường Đại học Y Hà Nội 15 Hội phụ sản phụ khoa sinh đẻ có kế hoạch Việt Nam Chi hội Y sinh học sinh sản Việt Nam (2012) Đồng thuận đánh giá phân loại nỗn, phơi hỗ trợ sinh sản 16 Magli M C., Gayle M Jones, Kersti Lundin et al (2012) Atlas of Human Embryology: from OoCytes to Preimplantation Embryos, Hum.Reprod, 27(1), i6-i52 17 Cù Chiến Thắng (2014) Nghiên cứu mối liên quan chất lượng tinh dịch tỷ lệ có thai kỹ thuật bơm tinh trùng vào buồng tử cung môn Mô Phôi, trường Đại học Y Hà Nội, Khóa luận tốt nghiệp Bác sỹ Y khoa Trường Đại học Y Hà Nội 18 Palermo G D et al (2008) Techniques aspect, Textbook of assisted reproductive techniques, 3, Informa Healthcare, London, 174-175 19 Choi H W, Park Y S, Lee S H et al (2016) Effects of maternal age on embryo quality and pregnancy outcomes using testicular sperm with intracytoplasmic sperm injection, Clin Exp Reprod Med, 43 (4), 221-227 20 Gerris J., Vandekerckhove F and De Sutter D (2016) Outcome of one hundred consecutive ICSI attempts using patient operated home sonography for monitoring follicular growth, Facts Views Vis Obgyn, (3), 141-146 21 Đỗ Thị Dung (2015) Đánh giá kết thụ tinh ống nghiệm yếu tố liên quan bệnh viện Phụ sản Trung ương năm 2013, Khóa luận tốt nghiệp bác sỹ Y khoa, Trường Đại học Y Hà Nội 22 Carvalho B R., Barbosa M W., Bonesi H et al (2017) Embryo stage of development is not decisive for reproductive outcomes in frozenthawed embryo transfer cycles, JBRA Assist Reprod, 21 (1), 23-26 23 Hồ Sỹ Hùng (2014) Nghiên cứu hiệu phương pháp tiêm tinh trùng vào bào tương noãn tinh trùng lấy từ mào tinh điều trị vô sinh, Luận án Tiến sĩ Y học, Trường Đại học Y Hà Nội 24 Malizia B A., Hacker M R and Penzias A S (2009) Cumulative livebirth rates after in vitro fertilization, N Engl J Med, 360 (3), 236-243 25 te Velde E R and Pearson P L (2002) The variability of female reproductive ageing, Hum Reprod Update, (2), 141-154 26 van Rooij I A., Broekmans F J., Scheffer G J et al (2005) Serum antimullerian hormone levels best reflect the reproductive decline with age in normal women with proven fertility: a longitudinal study, Fertil Steril, 83 (4), 979-987 27 Nikolaou D and Templeton A (2003) Early ovarian ageing: a hypothesis Detection and clinical relevance, Hum Reprod, 18 (6), 1137-1139 28 Vivien M (1997) The result of assissted reproductive technology, Infertility handbook: A clinical guide, Cambridge University Press, 235-248 29 Aboulghar M., Mansour R., Al-Inany H et al (2007) Paternal age and outcome of intracytoplasmic sperm injection, Reprod Biomed Online, 14 (5), 588-592 30 Begueria R., Garcia D., Obradors A et al (2014) Paternal age and assisted reproductive outcomes in ICSI donor oocytes: is there an effect of older fathers?, Hum Reprod, 29 (10), 2114-2122 31 Wu Y., Kang X., Zheng H et al (2016) Effect of Paternal Age on Reproductive Outcomes of Intracytoplasmic Sperm Injection, PLoS One, 11 (2), e0149867 32 Mai Quang Trung (2010) Đánh giá kết kỹ thuật tiêm tinh trùng vào bào tương noãn Bệnh viện Phụ sản Trung ương từ 01/01/2017 đến 31/12/2008, Luận văn thạc sỹ Y học, Trường Đại học Y Hà Nội 33 Hồ Mạnh Tường, Vương Thị Ngọc Lan, Phạm Việt Thanh CS (2001) Tiêm tinh trùng vào bào tương noãn (ICSI): yếu tố liên quan đến tỷ lệ thành công, Báo cáo hội nghị phụ sản toàn quốc / 2001, Thời Y dược học, 114-118 34 Nguyễn Đức Hinh, Lê Trọng Tuấn Nguyễn Khang Sơn (2013) Đánh giá kết bước đầu phương pháp thụ tinh nhân tạo phòng khám muộn bệnh viện Đại học Y Hà Nội, Y học thực hành, 896, 16-18 35 Nguyễn Xuân Huy (2004) Nghiên cứu kết thụ tinh ống nghiệm Bệnh viện Phụ sản Trung ương năm 2003, Luận văn tốt nghiệp Bác sỹ chuyên khoa 2, Trường Đại học Y Hà Nội 36 Vương Thị Ngọc Lan, Giang Quỳnh Như Hồ Mạnh Tường (2012) Tương quan nồng độ anti-mullerian hormone đáp ứng buồng trứng thụ tinh ống nghiệm, Tạp chí Y học TPHCM, 16 (1), 201-210 37 Phan Yến Anh (2008) Đánh giá kết phương pháp thụ tinh ống nghiệm (IVF) bệnh viện Phụ sản Hà Nội từ tháng 6/2006 đến tháng 6/2008, Luận văn thạc sỹ Y học, Trường Đại học Y Hà Nội 38 La Marca A Ferraretti A P., Fauser, B C et al (2011) ESHRE consensus on the definition of "poor response" to ovarian stimulation for in vitro fertilitation: the Bologna criteria, Hum Reprod, 26, 1616-1624 39 Vương Thị Ngọc Lan (2016) Giá trị xét nghiệm AMH, FSH AFC dự đoán đáp ứng buồng trứng thụ tinh ống nghiệm, Luận án Tiến sỹ Y học, Trường Đại học Y dược Thành phố Hồ Chí Minh 40 La Marca A Arce J C., Klein B M et al (2013), Reply of the authors, Fertil Steril, 98, 1407-1415 41 Van Steirteghem A C., Nagy Z., Joris H et al (1993) High fertilization and implantation rates after intracytoplasmic sperm injection, Hum Reprod, (7), 1061-1066 42 Yeung W S., Li R H., Cheung T M et al (2009) Frozen-thawed embryo transfer cycles, Hong Kong Med J, 15 (6), 420-426 43 Friedler S., Raziel A., Strasbuger D et al (2002) Factors influencing the outcome of ICSI in patients with obstructive and non-obstructive azoospermia: a comparative study, Hum Reprod, 17 (12), 3114-3121 44 Arafa M., AlMalki A., AlBadr M et al (2016) ICSI outcome in patients with high DNA fragmentation: Testicular versus ejaculated spermatozoa The journal of urology, 195 (4), e172 45 Hoàng Thị Thanh Thủy (2008) Đánh giá kỹ thuật Thụ tinh ống nghiệm trung tâm hỗ trợ sinh sản bệnh viện Phụ sản Trung ương tháng đầu năm 2007 (Từ tháng 1-1- 2017 đến 30-6-2007), Khóa luận tốt nghiệp Bác sỹ Y khoa, Trường Đại học Y Hà Nội 46 Mitchell P R., Shehua S., Paolo F L et al (2010) Fertilization rate is an independent predictor of implantation rate, Fertility and Sterility, 94 (4), 1328-1333 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI NGUYỄN THỊ HƯƠNG ĐÁNH GIÁ KẾT QUẢ KỸ THUẬT TIÊM TINH TRÙNG VÀO BÀO TƯƠNG NỖN TẠI BỆNH VIỆN ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP BÁC SỸ Y KHOA KHÓA 2011 – 2017 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Đào Thị Thúy Phượng HÀ NỘI – 2017 LỜI CẢM ƠN Trong trình học tập, nghiên cứu hồn thành khóa luận này, nhận nhiều giúp đỡ thầy cơ, bạn bè gia đình Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS Đào Thị Thúy Phượng, giảng viên môn Mô Phôi – Trường Đại học Y Hà Nội, cô người định hướng cho nghiên cứu, người thầy tận tình dìu dắt, hướng dẫn cho nhiều kiến thức chuyên ngành, kỹ thực hành Sự động viên, giúp đỡ dìu dắt cho tơi thêm nghị lực để vượt lên mình, vượt lên trở ngại khó khăn, người tạo điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành khóa luận Tơi xin trân trọng cảm ơn thầy cô môn Mô – Phôi đóng góp ý kiến q báu cho tơi q trình nghiên cứu hồn chỉnh khóa luận tốt nghiệp Tôi xin chân thành cảm ơn thầy cô, anh chị môn Mô – Phôi, trường Đại học Y Hà Nội giúp đỡ tạo điều kiện tốt suốt q trình tơi thực hành, lấy số liệu nghiên cứu hoàn thành khóa luận Cuối cùng, tơi xin dành tất yêu thương tới thành viên gia đình tôi, đặc biệt mẹ tin tưởng, cổ vũ động viên vượt qua thử thách, tới người bạn Hồng Ngọc Thành giúp đỡ tơi nhiều suốt thời gian qua, tới người anh chị, bạn bè thân thiết giúp đỡ, động viên, chia sẻ khó khăn với tơi ngày tháng học tập, nghiên cứu hồn thành khóa luận Hà Nội, ngày 28 tháng 05 năm 2017 Nguyễn Thị Hương LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài “Đánh giá kết kỹ thuật tiêm tinh trùng vào bào tương noãn Bệnh viện Đại học Y Hà Nội” đề tài tự thân trực tiếp thực hướng dẫn TS Đào Thị Thúy Phượng Cơng trình khơng trùng lặp với bắt kỳ nghiên cứu khác công bố Việt Nam Các số liệu thông tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm trước pháp luật cam kết Hà Nội, ngày 24 tháng 05 năm 2017 Sinh viên Nguyễn Thị Hương CÁC TỪ VIẾT TẮT BV BVPST Ư CNMG CS GV hCG HTSS ICSI IVF LH MESA MII NST PESA PVP TESA TESE TTTON Bệnh viện Bệnh viện Phụ sản Trung ương Công nghệ mô ghép Cộng Germinal vesicle Túi nhân Human chorionic gonadotropin Hormon rau thai Hỗ trợ sinh sản Intracytoplasmic sperm injection Tiêm tinh trùng vào bào tương noãn In vitro fertilization Thụ tinh ống nghiệm Luteinizing hormone Hormon hồng thể hóa Microsurgical epididymal sperm Vi phẫu chọc hút tinh trùng aspiration từ mào tinh Metaphase II Kỳ II Nhiễm sắc thể Percutaneous epididymal sperm Chọc hút tinh trùng từ mào aspiration tinh qua da Polyvinylpyrrolidone Testicular sperm aspiration Chọc hút tinh trùng từ tinh hoàn Testicular sperm extraction Sinh thiết tinh hoàn lấy tinh trùng Thụ tinh ống nghiệm MỤC LỤC DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ DANH MỤC CÁC HÌNH PHỤ LỤC STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 HỌ VÀ TÊN Đinh Thị V Lê Thị Thanh H Đỗ Thị S Nguyễn Thị S Nhữ Thị Diệu T Nguyễn Thị Phương T Đỗ Thị Hải Y Phan Thị T Nguyễn Thị N Lê Thị T Phạm Lan H Nguyễn Thị H Nguyễn Hải Y Hoàng Thị H Đặng Thị H Nguyễn Thị T Lê Huệ M Lê Thị K Hoàng Ngọc H Phạm Thị H Lương Thị H Nguyễn Thị H Nguyễn Thị N Vũ Như N Đoàn Thị H Phạm Thị H Hoàng Thị T Đoàn Thị Lan C Nguyễn Thị D Đinh Thị L Phạm Thị D Nguyễn Thị C MÃ BN 15053 15054 15055 15056 15057 15058 15059 15060 15062 15063 15064 16065 15066 15067 15070 15071 15072 15073 15074 15075 15076 15077 15078 15079 15080 15081 15082 15084 15085 15086 16003 16004 NĂM SINH 1989 1983 1985 1988 1985 1981 1985 1985 1985 1984 1980 1974 1992 1984 1968 1987 1982 1987 1991 1985 1988 1987 1987 1995 1984 1987 1982 1978 1987 1986 1983 1992 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 Nguyễn Thị T Cao Thị Ngọc T Màn Thị S Dương Vũ Thị Thanh H Đỗ Thị Vân A Nguyễn Thị B Nguyễn Hải Y Bùi Thị H Nguyễn Thị T Vũ Thị Thúy H Trần Thị Lan H Nguyễn Thị T Hồng Thị Minh N Nguyễn Thị Thanh N Phan Thị Ngọc T Phạm Thị Khánh L Vũ Thị H Phí Huyền N Lê Đậu Ngọc H Trần Thị S Lại Thị H Nguyễn Thùy D Trần Linh C Hồng Thùy L Tơ Hoàng L Nguyễn Thu H Nguyễn Thị Hồng V Cao Thị Thanh T Vi Thị C Nguyễn Thị Bích P Hà Thanh H Lê Thị H Trần Thị T Hoàng Thị M Nguyễn Khánh L Hoàng Thị L Nguyễn Thu H Ngô Thị Thanh H 16007 16008 16010 16013 16016 16017 16018 16019 16020 16021 16022 16023 16025 16126 16027 16028 16029 16130 16031 16032 16035 16042 16043 16044 16045 16046 16047 16048 16049 16050 16052 16053 16054 16055 16056 16057 16058 16059 1989 1986 1983 1979 1983 1986 1990 1982 1985 1991 1977 1990 1976 1989 1988 1991 1990 1990 1981 1990 1985 1988 1976 1987 1988 1984 1987 1985 1987 1990 1981 1986 1992 1981 1989 1979 1986 1984 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 Nguyễn Thị H Trần Thị M Nguyễn Thị Ngọc H Nguyễn Thị Phương T Trinh Mai H Lê Thị C Đặng Thị Thu H Bùi Thị L Đào Thị S Bùi Thảo N Lê Thị H Nguyễn Thị Phương T Nông Thị T Lê Thị Trúc Q Nguyễn Thị L Lê Anh T Nguyễn Thị N Phạm Thị L Đỗ Thu G Triệu Thị D Hoàng Thị H Đặng Thị Thu T Nguyễn Thị H Trần Thị Hải H Nguyễn Thị M Nguyễn Thị P Nguyễn Thị Bích T Hồng Thị D Mai Thị H Nguyễn Thị L Nguyễn Thị T Lê Thị T Mai Thị Thanh H Hà Thùy T Nguyễn Thị L Đặng Thị Thúy H Nguyễn Thị T Phạm Thị Quỳnh V 16060 16061 16062 16064 16065 16066 16067 16068 16069 16070 16071 16072 16073 16076 16078 16079 16080 16081 16082 16083 16084 16085 16086 16087 16088 16089 16090 16091 16092 16093 16094 16095 10696 16099 16100 16101 16102 16103 1989 1992 1988 1985 1981 1987 1976 1986 1990 1984 1991 1990 1985 1986 1988 1979 1977 1985 1976 1987 1990 1977 1982 1991 1992 1989 1980 1991 1990 1982 1984 1988 1978 1988 1980 1977 1987 1979 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 Vũ Thị H Văn Thị Ngân H Hoàng Thị Minh T Đinh Thùy D Trịnh Thị D Trần Thị H Hoàng Thị T Bùi Thị H Nguyễn Thị Thúy H Hoàng Thị T Nguyễn Thị H Lê Thị N Nguyễn Thanh N Đinh Thị N Vũ Thị Y Nguyễn Thị C Đinh Thị M Đào Thị Kim A Lê Thị H Đỗ Thị X Đỗ Thị Đ Ngọ Thị L Dương Thị L Đỗ Ngọc A Trần Thị H Vi Thị N Hoàng Thị N Hoàng Thị V Nguyễn Thị Hương L Đỗ Thị Thu L Phạm Thị O Nguyễn Thị Thanh H Lê Thị Lan A Vũ Thị Thanh L Vũ Thị Kim L Nguyễn Thị H Nguyễn Thị H Thân Thị D 16104 16105 16106 16107 16108 16109 16110 16111 16113 16114 16115 16116 16117 16118 16119 16120 16121 16122 16123 16124 16125 16126 11627 16128 16129 16131 16132 16133 16135 16136 16137 16138 16139 16140 16141 16142 16143 16144 1990 1989 1984 1987 1982 1985 1987 1995 1987 1988 1976 1981 1981 1985 1988 1988 1982 1983 1992 1983 1993 1991 1991 1991 1994 1990 1988 1983 1991 1977 1980 1983 1992 1991 1979 1975 1990 1983 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 Nguyễn Thị Thu H Phùng Thị H Nguyễn Thị H Nguyễn Thị T Bùi Thị D Nguyễn Thị H Đào Thị Thu H Dương Ngọc C Phương Thị T Phạm Thị T Lê Hồng G Đoàn Ánh T Bùi Diệu H Nguyễn Thị H Nguyễn Ngọc A Phạm Thị Q Vũ Thị Q Bùi Thị H Tô Thị P Lê Thùy T Nguyễn Thị Kim P Nguyễn Thị Thu H Xác nhận giáo viên hướng dẫn 16145 16146 16147 16148 16149 16150 16151 16153 16154 16155 16156 16157 16158 16159 16160 16161 16162 16164 16165 16166 16168 16170 1980 1984 1986 1991 1987 1975 1981 1985 1986 1988 1987 1983 1976 1992 1982 1983 1990 1981 1981 1990 1976 1979 Xác nhận Trung Tâm HTSS CNMG BV Đại học Y Hà Nội ...2 BV Đại học Y Hà Nội, thực đề tài: Đánh giá kết kỹ thuật tiêm tinh trùng vào bào tương noãn Bệnh viện Đại học Y Hà Nội với hai mục tiêu sau: Xác định tỷ lệ thụ tinh, tạo phôi, tỷ... tạp, x y tinh hoàn Bắt đầu từ tinh nguyên bào có NST 46 XY, tinh nguyên bào tiến hành nguyên phân tạo tinh bào I có NST 46 XY Tinh bào bước vào giảm phân lần thứ cho tinh bào có NST 23, X 23, Y dạng... chọn: - Tất bệnh nhân thực kỹ thuật tiêm tinh trùng vào bào tương noãn BV Đại học Y Hà Nội từ ng y 01/10/2015 đến 30/09/2016 - Có đ y đủ thơng tin kết chọc hút trứng, tình trạng th ụ tinh, s ố