Nghiên cứu phân biệt một số dược liệu mang tên rau đắng

Theo báo cáo của tổ chức y tế thế giới WHO, trên thế giới có khoảng 80% dân số ở các nước đang phát triển có nhu cầu chăm sóc sức khỏe ban đầu bằng y học cổ truyền, 85% thuốc y học cổ tr

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ

TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

LÊ THỊ HUYỀN TRANG

NGHIÊN CỨU PHÂN BIỆT MỘT SỐ DƯỢC LIỆU MANG TÊN RAU ĐẮNG

LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ

TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

LÊ THỊ HUYỀN TRANG

NGHIÊN CỨU PHÂN BIỆT MỘT SỐ DƯỢC LIỆU MANG TÊN RAU ĐẮNG

LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC

CHUYÊN NGÀNH DƯỢC LIỆU – DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN

MÃ SỐ: 60.73.10

Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Viết Thân

LỜI CẢM ƠN

Trước tiên, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành và sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Viết Thân, người thầy đã tận tình dìu dắt, hướng dẫn và truyền đạt kinh nghiệm nghiên cứu cho tôi trong quá trình thực hiện luận văn

Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo sau đại học, các thầy cô giáo bộ môn Dược liệu – Dược cổ truyền và các thầy cô giáo trường Đại học Dược Hà Nội đã giảng dạy và giúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập, nghiên cứu tại trường

Tôi cũng xin cảm ơn các anh chị, bạn bè và đồng nghiệp đã tạo điều kiện giúp đỡ tôi cho tôi trong quá trình thực hiện đề tài

Và cuối cùng, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè, những người luôn động viên, giúp đỡ tôi trong cuộc sống, công việc và học tập

Hà N ội, tháng 09 năm 2012

Lê Thị Huyền Trang

2.3 Phương pháp nghiên cứu

Vi phẫu Rau đắng biển

Vi phẫu Rau xương cá

3.2.1 Định tính các nhóm chất bằng phản ứng hóa học

3.2.2 Định tính bằng sắc ký lớp mỏng

Dịch chiết toàn phần

Phân đoạn chloroform

Dịch còn lại (phân đoạn A)

DĐVN Dược điển Việt Nam

Rau đắng đất Rau đắng đất [Glinus oppositifolius (L.) DC]

Rau đắng biển Rau đắng biển [Bacopa monnieri (L.) Wettst]

Rau xương cá Rau đắng nước [Myosoton aquaticum (L.) Moench]

DANH MỤC CÁC HÌNH

1 Hình 1.1 Công thức cấu tạo của aviculin (1), avicularin

R=L-aribinofuranose (2), procyanidin glucoside (3), julanin (4), , acid gentisic 5-O-(6 '-O-alloyl)-β-D-glucopyranoside (5), acid

rosmarinic (6)

5

2 Hình 1.2 Công thức cấu tạo của Sperulin B (1),

spergulin A (2), Spergulacin (3), spergulacin

B (4)

10

3 Hình 1.3 Công thức cấu tạo của Bacosid A3(1),

Bacosaponin C (2), Bacoside II (3), Bacosapoin C (4), Bacoside I (5), Acid Betulinic (6), Bacosin (7)

14 Hình 3.10 Vi phẫu thân rễ Rau đắng đất 42

15 Hình 3.11 Vi phẫu thân Rau đắng biển 44

16 Hình 3.12 Vi phẫu lá Rau đắng biển 44

17 Hình 3.13 Vi phẫu rễ Rau đắng biển 44

18 Hình 3.14 Vi phẫu thân Rau xương cá 46

19 Hình 3.15 Vi phẫu lá Rau xương cá 46

20 Hình 3.16 Vi phẫu rễ Rau xương cá 46

21 Hình 3.17 Một số đặc điểm bột Rau đắng 48

22 Hình 3.18 Một số đặc điểm bột Rau đắng đất 49

23 Hình 3.19 Một sô đặc điểm bột Rau đắng biển 50

24 Hình 3.20 Một sô đặc điểm bột Rau xương cá 51

25 Hình 3.21 Hình ảnh sắc ký đồ dịch chiết toàn phần của

Rau đắng, Rau đắng đất, Rau đắng biển, Rau xương cá

64

26 Hình 3.22 Hình ảnh sắc ký đồ dịch chiết phân đoạn

chloroform của Rau đắng, Rau đắng đất, Rau đắng biển, Rau xương cá

67

27 Hình 3.23 Hình ảnh sắc ký đồ dịch còn lại của Rau

đắng, Rau đắng đất, Rau đắng biển, Rau xương cá

67

DANH MỤC CÁC BẢNG

1 Bảng 3.1 So sánh một số đặc điểm thực vật của Rau

đắng, Rau đắng đất, Rau đắng biển, Rau xương cá

36

2 Bảng 3.2 So sánh một số đặc điểm vi phấu thân Rau

đắng, Rau đắng biển, Rau xương cá

47

3 Bảng 3.3 So sánh một số đặc điểm bột Rau đắng, Rau

đắng biển, Rau xương cá

52

4 Bảng 3.4 Kết quả định tính trong lá, thân và cành Rau

đắng, Đắng đất, Đắng biển, Xương cá

61

5 Bảng 3.5 Kết quả định tính các nhóm chất của Rau

đắng, Rau đắng đất, Rau đắng biển, Rau xương cá

62

ĐẶT VẤN ĐỀ

Chăm sóc sức khỏe để sống khỏe có ích luôn là mục tiêu của con người Hiện nay, thế giới đang quan tâm đến những sản phẩm chăm sóc sức khỏe có nguồn gốc tự nhiên vì tính hiệu quả và an toàn của nó

Theo báo cáo của tổ chức y tế thế giới WHO, trên thế giới có khoảng 80% dân số ở các nước đang phát triển có nhu cầu chăm sóc sức khỏe ban đầu bằng y học cổ truyền, 85% thuốc y học cổ truyền đòi hỏi phải sử dụng dược liệu hoặc chất chiết suất từ dược liệu và tỷ lệ này đang tăng lên nhanh chóng ở các nước phát triển [46]

Việt Nam là nước nằm trong vành đai khí hậu nhiệt đới gió mùa nóng ẩm,

có hệ thực vật phong phú, đa dạng Theo thống kê mới đây, Việt Nam có gần

11000 loài thực vật bậc cao, khoảng 3800 loài thực vật bậc cao và bậc thấp được dùng làm thuốc [17] Cả nước có khoảng 290 cơ sở sản xuất dược phẩm, 1300 loại dược phẩm được sản xuất từ nguyên liệu thực vật hoặc chiết xuất từ thực vật, chiếm 23 % số loại dược phẩm Nhu cầu sử dụng dược liệu cho khối công nghiệp dược là 20.000 tấn/năm, cho xuất khẩu là 10.000 tấn/năm [13] Tuy nhiên, vấn đề quản lý dược liệu hiện nay đang là một vấn đề phức tạp, cần được quan tâm, tình trạng khai thác bừa bãi không hợp lý, đặc biệt là sự nhầm lẫn, giả mạo dược liệu đang diễn ra khá phổ biến, gây ảnh hưởng lớn đến chất lượng dược liệu

Rau đắng là một loại dược liệu quen thuộc với người dân Việt Nam, được sử

dụng rất phổ biến để làm thuốc, rau ăn, Rau đắng đã đi vào trong thơ ca “Còn

th ương Rau đắng mọc sau hè ” Có nhiều loài mang tên Rau đắng, ở mỗi địa

phương lại có những dược liệu mang tên Rau đắng khác nhau, trong đó có nhiều loài có giá trị sử dụng cao, đã và đang được thế giới quan tâm như Rau đắng

(Polygonum aviculare L.), Rau đắng đất [Glinus oppositifolius (L.) DC], Rau

đắng biển [Bacopa monnieri (L.) Wettst.], Rau đắng nước thường gọi là Rau

xương cá [Myosoton aquaticum (L.) Moench]

Rau đắng lợi tiểu, chống oxy hóa, bảo vệ tế bào…thường được dùng trong các bài thuốc chữa kiết lỵ, táo bón, đái buốt, đái rắt… Rau đắng đất kích thích tiêu hóa, lợi tiểu, nhuận gan… được dùng làm thuốc hạ sốt, chữa bệnh về gan… Rau đắng biển kích thích thần kinh, trợ tim, thanh nhiệt, giải độc… được dùng làm thuốc chữa suy nhược thần kinh, viêm gan, ho… Rau xương cá lợi sữa, thanh nhiệt giải độc được dùng để chữa mụn nhọt, kiết lỵ, trĩ… Các loại dược liệu này có cùng tên, khi còn tươi thì có thể nhận biết bằng mắt thường, nhưng khi đã khô chế biến, sản xuất thành các chế phẩm thì rất khó phân biệt Với mục tiêu nhằm góp phần vào việc phân biệt các dược liệu mang tên Rau đắng đang được sử dụng trên thị trường ở dạng dược liệu hay chế phẩm, đồng thời mong muốn đưa ra một số tiêu chuẩn có thể dùng làm cơ sở cho việc xây dựng những chuyên luận kiểm nghiệm dược liệu sau này, chúng tôi tiên hành thực hiện đề

tài: Nghiên cứu phân biệt một số dược liệu mang tên Rau đắng với mục tiêu

sau:

Phân biệt các loài Rau đắng về thực vật, hóa học

Để thực hiện mục tiêu đề tài, chúng tôi tiến hành các nội dung sau:

- Nghiên cứu về giải phẫu thực vật của cây Rau đắng, Rau đắng đất, Rau đắng biển, Rau đắng nước (Rau xương cá): Mô tả đặc điểm hình thái, đặc điểm

vi phẫu lá, thân, rễ; đặc điểm bột Rau đắng, Rau đắng đất, Rau đắng biển, Rau xương cá

- Nghiên cứu về thành phần hóa học của cây Rau đắng, Rau đắng đất, Rau đắng biển, Rau đắng nước: Định tính các nhóm chất bằng phản ứng hóa học, sắc

ký lớp mỏng đối với dịch chiết toàn phần, dịch chiết phân đoạn chloroform, dịch còn lại, của các mẫu nghiên cứu

CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN

Có nhiều loài mang tên Rau Đắng, ở mỗi địa phương lại có những dược liệu mang tên Rau đắng khác nhau Với mục đích là nghiên cứu phân biệt một số dược liệu mang tên Rau đắng thường dùng góp phần giúp cho việc sử dụng dược liệu được đúng, an toàn Trong phạm vi đề tài này, chúng tôi tiến hành nghiên cứu phân biệt 4 loài:

- Rau đắng: Polygonum aviculare L., họ Rau răm (Polygonaceae)

- Rau đắng đất: Glinus oppositifolius (L.) DC, họ Cỏ bụng cu

Tên khoa học: Polygonum aviculare L

Syn Polygonum aviculare subsp buxiforme (Small) Costea & Tardif

Tên khác: Cây càng tôm, Biển súc, Mụ khuyết, Biển biện, Xương cá

Tên nước ngoài: Crab-grass, hog weed, bird knotgrass (Anh); renouée des oiseaux (Pháp)

Họ: Rau răm (Polygonaceae)

1.1 Mô tả

Cây thảo nhỏ, sống lâu năm, cao khoảng 10 cm Thân và cành nhẵn, mọc tỏa tròn, gần sát đất, thân mảnh có khía dọc màu tím Lá mọc so le, hình mác hẹp, gốc và đầu tròn, mép nguyên, hai mặt nhẵn, mặt dưới nhạt, chỉ gân giữa rõ, bẹ chìa, cuống lá ngắn Hoa màu hồng tím, mọc tụ họp 3-4 cái ở kẽ lá; bao hoa gồm

5 phiến bằng nhau, nhị đính ở gốc bao hoa Quả 3 cạnh, bao bọc bởi hoa tồn tại, chứa một hạt màu nâu Mùa hoa quả: Tháng 3-5 [8,10, 12, 15, 17, 65].

1.2 Phân bố, thu hái

Rau đắng phân bố phổ biến ở vùng nhiệt đới hoặc cận nhiệt đới châu Á, bao gồm Trung Quốc, Lào, Ấn Độ, Thái Lan, Mianma, Malaysia Ở Việt Nam Rau đắng phân bố ở khắp mọi nơi, từ vùng đồng bằng đến trung du và miền núi thấp Cây ưa ẩm, hơi chịu bóng, thường mọc thành đám ở ruộng trồng hoa màu, bãi sông, nương rẫy, vườn và ven đường đi Cây con mọc từ hạt, xuất hiện vào cuối mùa xuân, ra hoa quả vào mùa hè, cuối thu thì tàn lụi Vòng đời khoảng 4-6 tháng Rau đắng thường bị coi là cỏ dại ảnh hưởng đến cây trồng [12, 17].

Hai Jian Cong và cộng sự đã phân lập từ các bộ phận khác nhau của

Polygonum aviculare L được procyanidin glucoside, catechin (4α→8)-catechin 3-O-acetate-3′-O-β-D-glucopyranoside (1), năm flavonoids và

3-O-acetate-một lignan [33]

HU Hao-bin và cộng sự đã xác định được các hợp chất phenolic trong

polygonum aviculare L là acid rosmarinic, acid galic, acid gentisic 5-O-(6

CH2OH

OH OH

HO

OH O 2

O

O OCOCH3

OCOCH3OH

HO

OH

HO

O OH

OH

OH HO

OH

OH OH

3

O HO

HO

OH HO

OH

OH O

5

O O

HO OH

OH OH

6

Hình 1.1 Công th ức cấu tạo của aviculin (1), avicularin R=L-aribinofuranose (2),

procyanidin glucoside (3), julanin (4) , acid gentisic 5-O-(6 '-O-alloyl)- β-D-glucopyranoside

O O

OH OH Me HO

1

1.5 Tác dụng dược lý

Cao n ước và cao cồn Rau đắng làm tăng khả năng đông máu: Cao nước

hoặc cao cồn của lá tiêm tĩnh mạch gây hạ huyết áp ở mèo, thỏ, và chó Rau đắng gây co bóp tử cung cô lập và tử cung tại chỗ của động vật thí nghiệm, tác dụng tương tự như nấm cựa gà Rau đắng có tác dụng lợi tiểu, làm săn, hạ sốt, sát khuẩn và trị giun [12, 17]

Ch ống oxy hóa: Trong Rau đắng có hàm lượng cao các hợp chất phenolic:

Tổng số mg phenolic trong 1 g lá, hoa Rau đắng là: 31,25±1,56 và 25,41±1,07 [60] Các hợp chất phenolic này có tác dụng chống oxy hóa bảo vệ tế bào [26] Nghiên cứu tác dụng của Rau đắng trên các thông số tinh trùng của chuột sau khi phơi nhiễm với EMF thấy: EMF làm giảm khả năng di chuyển của tinh trùng chuột, sau khi chuột phơi nhiễm với EMF được điều trị bằng Rau đắng thì thấy chất lượng tinh trùng được cải thiện, khả năng di chuyển của tinh trùng tăng lên Đó có thể là do hàm lượng cao các chất chống oxy hóa phenolic có trong Rau đắng [41]

Ch ống ung thư:

Nghiên cứu tác dụng của dịch chiết Rau đắng trên dòng tế bào ung thư người (MCF-7) - lấy từ ngân hàng tế bào quốc gia Iran Kết quả cho thấy, Rau đắng ở nồng độ 300 ng/µl gây chết dòng tế bào MCF-7 50%, còn ở nồng độ 400ng/µl gây chết tế bào là 97% [32]

B ền mao mạch: Các hợp chất flavone trong Rau đắng làm bền mao mạch, có

tác dụng kiểu cortisone lên mô lợi, được dùng để hỗ trợ điều trị viêm lợi [31]

Kháng khu ẩn: Rau đắng có tác dụng kháng khuẩn đối với cả khuẩn Gram

âm, Gram dương, và nấm : Salmonella paratyphi, Bacillus subtilis, Salmonella typhi… Rau đắng có tác dụng ức chế Staphylococcus aureus Dịch chiết xuất từ

gốc có tác dụng hơn dịch chiết xuất từ lá Trong số bốn dung môi được sử dụng

để chiết xuất, dịch chiết từ chloroform có tác dụng cao nhất đối với các sinh vật

thử nghiệm, tiếp theo là các dịch chiết từ nước, ethanol và acetone [35]

Rau đắng tươi giã nát, thêm nước gạn uống, bã đắp, chữa rắn cắn [12, 17] Trong y học cổ truyền Trung Quốc, Rau đắng là thuốc hạ sốt và lợi tiểu, điều trị sốt rét nhiệt đới, phù, thuốc bổ trong suy nhược thần kinh, thuốc cầm máu, chống viêm và trừ giun Để làm thuốc bổ, dùng liều một lần 10g chữa sốt rét nhiệt đới và trị giun liều 5-25g [17]

Trong y học cổ truyển Ấn Độ, Rau đắng được coi có tác dụng bổ, hạ sốt, hạ đường huyết, sát khuẩn, lợi tiểu, cầm máu, trị giun, thấp khớp, sốt, loét bên trong và ngoài Nước sắc của cây trị lỵ, tiêu chảy, viêm phế quản, trĩ, chảy máu

và kinh nguyệt nhiều Cao được dùng làm thuốc cầm máu Hạt có mùi thơm và

có tác dụng gây nôn và tẩy mạnh [17]

Các hợp chất flavone trong Rau đắng có tác dụng làm bền thành mạch, có tác dụng kiểu

Ở Liên Xô trước đây, chế phẩm từ Rau đắng là thuốc gây co hồi tử cung cho phụ nữ sau khi đẻ [17]

1.8 Bài thuốc có Rau đắng

Ch ữa viêm bàng quang cấp tính:

Rau đắng 12g, Tỳ giải, Bồ công anh mỗi vị 20g, Sài hồ, Hoàng cầm, Hoạt thạch, Cù mạch, mỗi vị 12g; Mộc thông 6g Nếu tiểu tiện ra máu thêm Sinh địa, Chi tử sao đen, Rễ cỏ tranh, mỗi vị 12g Sắc uống ngày một thang [17]

Ch ữa tiểu tiện ít và khó:

Rau đắng, Mộc thông, Xa tiền tử, Cù mạch, Sơn chi tử, Hoạt thạch, mỗi vị 12g, Đại hoàng 8g, Cam thảo chích 6g Sắc uống ngày một thang [17]

Ch ữa tiểu tiện khó khăn, đái rắt, đái buốt:

a) Rễ rau đắng, Hạt vông vang, Nhân trần, Mộc thông, Hạt Mã đề, Cỏ lá tre, mỗi vị 8g; Cỏ bấc 2g Sắc uống ngày một thang [17]

b) Rau đắng 12g, Hoạt thạch 10g, Mã đề 8g, Mộc thông 5g Sắc uống ngày một thang [17]

Ch ữa sưng tấy, đau nhức:

Rau đắng khô băm nhỏ, ngâm rượu, dùng xoa bóp hàng ngày Hoặc cây tươi (15-20) giã nát, thêm nước, gạn uống [17]

Ch ữa rắn cắn, trẻ đau bụng giun:

Rau đắng, Cỏ nọc rắn, mỗi vị 40-60g Sắc uống [17]

Ch ữa tiêu chảy, viêm ruột cấp tính, lỵ do thấp nhiệt:

Rau đắng 15g, Hạt mã đề 10g, Long nha thảo 15 g Sắc uống [12]

2 Rau đắng đất

Tên khoa học: Glinus oppositifolius (L.) DC

Syn Mollugo oppositifolia L., M spergula L

Tên khác : Rau đắng lá vòng

Họ Cỏ bụng cu (Molluginaceae)

2.1 Mô tả

Cây thảo, sống lâu năm Thân và cành mảnh, mọc tỏa sát mặt đất, dài và nhẵn Lá mọc vòng 2-5 to nhỏ không đều, hình mác thuôn, gốc và đầu nhọn; lá kèm rất nhỏ, sớm rụng Hoa mọc tụ 2-5 cái ở kẽ lá, màu lục nhạt, có cuống dài; đài 5 răng hơi không bằng nhau, những lá phía ngoài ngắn, những lá bên trong rộng hơn, không có cánh hoa; nhị 5, chỉ nhị đều; bầu thuôn; thắt lại ở hai đầu, 3

ô Quả nang, mở ở cạnh bên theo chiều dọc, hạt hình thận Mùa hoa quả: Tháng 4-7 [10, 15, 17, 65]

2.2 Phân bố, sinh thái

Chi Glinus L gồm một số loài đều là thân cỏ, phân bố ở vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới Ở Việt nam, có ba loài Rau đắng đất phân bố ở vùng nhiệt đới châu Á, từ Ấn Độ tới Malaysia, Campuchia, Việt Nam và đảo Hải Nam Trung Quốc Ở Việt Nam, Rau đắng đất phân bố dọc theo các tỉnh ven biển, từ Nam Định đến vùng đồng bằng sông Cửu Long Cây ưa sáng, thường mọc trên mặt đất pha cát ở các ruộng hoang, các hố nông cạn nước về mùa khô, đôi khi thấy

cả ở quanh làng, ven đường đi Do khả năng phân nhánh khỏe, nên cây thường mọc thành từng đám dày đặc, lấn át các loại cỏ khác Cây ra hoa quả nhiều hàng năm, tái sinh tự nhiên chủ yếu từ hạt [17]

16-O-(β-Deepark Kumai và cộng sự đã phân lập được một saponin triterpenoid từ Rau đắng đất có tác dụng ức chế enzym glucosidase là glinoside C [16-O-(β-D-glucopyranosyl)-3β,12β,16β,21α,22-pentahydroxy hopane] [29]

Consolacion Y Ragasa và cộng sự đã phân lập được một titerpen mới trong Rau đắng đất là oppositifolone, ngoài ra còn phân lập được spinasterol, squalene, lutein [28]

O

OH H

OH H

O

OH HO HO Me

O

O H

H H

OH H

O

O HO

HO O OH OH HO

Me

1

2.5 Tác dụng dược lý

Trên h ệ tiêu hóa: Rau đắng đất có tác dụng kích thích tiêu hóa, nhuận tràng [17]

Ch ống oxy hóa: Hợp chất polyphenolic, flavonoid trong Rau đắng đất có tác

dụng chống oxy hóa Nghiên cứu khả năng dọn gốc tự do DPPH 2-picrylhydrazyl) của dịch chiết methanol Rau đắng đất cho thấy IC50 là 1000µg/ml Trong khi đó ascorbic acid, IC50 = 14.45 µg/ml [45]

(1,1-diphenyl-H ạ đường huyết: Thí nghiệm trên chuột cho thấy, dịch chiết methanol và dịch

chiết nước Rau đắng đất với liều 200mg , 400mg/kg thể trọng có tác dụng làm giảm đường huyết ở chuột bình thường được cho uống glucose (p<0,05), và chuột bị tăng đường huyết (p<0,05) so với metformin [45]

Dịch chiết methanol và dịch chiết nước Rau đắng đất với liều 200 mg/kg, 400mg/kg thể trọng có tác dụng làm giảm cholesterol, triglycerid ở chuột đái tháo đường và chuột bình thường [22]

Kháng khu ẩn: Dịch chiết Methanol Rau đắng đất ở nồng độ 2000-2500 µg/ml

có tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm (chất đối chiếu là norfloxacin) [54]

Tr ị giun: Dịch chiết Methanol Rau đắng đất có tác dụng trị giun đất: Thời làm

giun tê liệt đến chết là 4,5 – 12,4 phút (Albedazol thời gian giun bị tê liệt đến chết là: 4,14 – 10,52 phút) [54]

Trên h ệ miễn dịch: Hai pectin polysaccharid của Rau đắng đất là GOA1 và

GOA2 có thể có khả năng hút các tế bào miễn dịch T và NK nên làm giảm sự sưng, nóng, đỏ, đau ở người viêm khớp [39]

B ảo vệ gan: Dịch chiết ethanol (80%) phần trên mặt đất của Glinus oppositifolius có tác dụng bảo vệ gan của chuột khỏi tổn thương gây ra bởi

paracetamol G oppositifolius với liều 200 mg /kg và 400 mg /kg đã làm giảm

SGOT, SGPT, ALP, cholesterol và bilirubin ở chuột bị tổn thương gan bởi paracetamol [50]

Rau đắng đất được sử dụng trong các trường hợp liên quan đến hệ thống miễn dịch như: Đau khớp, viêm, sốt rét…[55]

Rau đắng đất giúp lành vết thương, dùng ngoài chống các bệnh ngoài da như ghẻ ngứa [55]

2.8 Bài thuốc có Rau đắng đất

Thu ốc thanh can, giải độc:

Rau đắng đất 6g, Nhân trần hoặc Bồ bồ 5g, Dành dành 5g, Cỏ xước 6g, Rau

má 6g, Ké đầu ngựa 6g, Dây khổ qua 6g, Cỏ mực 8g, Muồng trâu 6g, Rễ cỏ tranh 6g, Sài đất 6g, Cam thảo 3g Sắc nước uống hoặc tán bột, luyện thành viên uống [17]

Cao thu ốc trị các bệnh vàng da, khó tiêu, mụn nhọt, mày đay:

Dây cứt quạ 1 thúng, Rau đắng đất 1 thúng, nấu nhừ, lược bỏ nước, nấu thành cao Thêm đường hoặc mật nấu cho đặc Ngày uống 3 lần, mỗi lần 1 muỗng café [8, 17]

3 Rau đắng biển

Tên khoa học: Bacopa monnieri (L.) Wettst

Tên đồng nghĩa: Herpestis monnieri (L.) Rothm

Tên khác: Rau sam trắng, Rau sam đắng

Tên nước ngoài: Thyme – leaved gratiola (Anh)

Họ: Hoa mõm chó (Scrophulariaceae)

3.1 Mô tả

Cây thảo, sống lâu năm, cao 10-20cm Thân nhẵn, phần gốc mọc bò, bén rễ

ở những mấu, phần trên mọc đứng Lá mọc đối, không cuống, hình trái xoan, mọng nước, hình thuôn, đầu tù, hai mặt nhẵn, chỉ gân giữa rõ Hoa màu trắng, mọc đơn độc ở kẽ lá trên một cuống dài, lá bắc con hình sợi Đài 5 răng không bằng nhau, 3 cái hình trái xoan, 2 cái hình chỉ Tràng dài gấp hai lần đài, 5 cánh gần bằng nhau, chỉ nhị 4, chỉ nhị nhẵn Quả nang, hình trứng đầu nhẵn, có đài tồn tại, hạt nhỏ, có cạnh Mùa hoa quả: Tháng 4-9 [11, 12, 15, 17]

3.2 Phân bố, sinh thái

Bacopa Aubl là chi tương đối lớn, có khoảng 70 loài, phân bố rải rác khắp các vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới; tập trung nhiều ở khu vực Trung và Nam

Mỹ Ở Việt Nam chỉ có 2 loài Loài Rau đắng biển được coi là cây liên nhiệt đới, đồng thời cũng thấy ở vùng cận nhiệt đới Ở châu Á, Rau đắng biển phân bố rộng rãi từ vùng Nam Trung Quốc, Việt Nam, Lào, đến các nước khác ở Đông Nam châu Á [12, 17]

Ở Việt Nam, Rau đắng biển phân bố ở khắp các vùng đồng bằng và trung du miền Bắc và miền Nam Cây ưa sáng, thường mọc trên đất ẩm, pha cát lẫn với các loại cỏ thấp ở bờ ruộng, bãi sông, bờ kênh mương… Cây ra quả hàng năm, tái sinh tự nhiên chủ yếu từ hạt Cây còn có khả năng mọc chồi khỏe từ kẽ lá, kể

cả phần còn sót lại sau khi cắt Do đó, Rau đắng biển cũng bị coi là cỏ dại ảnh hưởng tới cây trồng [12, 17]

3.3 Bộ phận dùng

Phần trên mặt đất, thu hái quanh năm Sau khi thu hái có thể dùng tươi hoặc phơi, sấy khô [12, 17]

3.4 Thành phần hóa học

Rau đắng biển chứa một triterpen là bacosin Chất này có tác dụng gây tê

Ngoài ra, cây còn chứa nhiều saponin triterpenic như bacosaponin A ( arabinopyranosyl-20-O-α-L-arabinopyranosyl-jujubogenin) bacosaponin B (3-

3-O-α-L-O-[α-L-arabinofuranosyl (1 - > 2) α-L-arabinopyranosyl] pseuojujubogenin,

bacosaponin C (3-O- [β-D-glucopyranosyl >3) [α-L-arabinofuranosyl]

(1->2)] α-L-arabinopyranosyl pseudojujubogenin [17, 19, 60]

Ngoài ra còn phân lập được từ Rau đắng biển một số saponin triterpen khác

là bacosid A 1 (3-O-[α-L-arabinofuranosyl (1->3) α-L-arabinopyranosyl]

jujubogenin), bacoside A 3 (3-β-[O-β-D-glucopyranosyl arabinofuranosyl (1->2)]-O-β-D-glucopyranosyl], bacopasaponin D 3-O-[α-l-

(1->3)-O-[α-L-arabinofuranosyl (1->2)β-d-glucopyranosyl] pseudojujubogenin, bacopaside I

3-O-α-L-arabinofuranosyl-(1→2)-[6-O-sulphonyl-β-Dα-L-arabinopyranosyl pseudojujubogenin, bacopaside II 3-O-α-L-arabinofuranosyl-(1→2)-[β-D-glucopyranosyl (1→3)]-β-D-glucopyranosyl pseudojujubogenin [17, 19, 60]

-glucopyranosyl-(1→3)]-Shashi B và cộng sự đã phân lập được từ Rau đắng biển Bacopasaponin E

3-O-[β-D-glucopyranosyl(1→3){α-L-arabinofuranosyl(1→2)}α-L

-arabinopyranosyl]-20-O-(α-L-arabinopyranosyl) jujubogenin, Bacopasaponin F

3-O-[β-D-glucopyranosyl(1→3){α-L-arabinofuranosyl(1→2)}β-D

-glucopyranosyl]-20-O-α-L-arabinopyranosyl) jujubogenin [52]

Theo Proliac A và cộng sự (1991) lá chứa 2-glycosylflavonoid là glycuronyl – 7 apigenin và glucuronyl – 7 luteolinn (CA 115: 89.186d) [17, 19, 60]

O O RO

2 α-L-arabinofuranosyl(1->2)-[β-D- glucopyranosyl-(1->3)]-α-L-arabinopyranosyl

R

3 glucopyranosyl-(1->3)]-β-D-glucopyranosyl

4 glucopyranosyl-(1->3)]-α-L-arabinopyranosyl

α-L-arabinofuranosyl(1->2)-[β-D-5 D-glucopyranosyl-(1->3)]-α-L-

3.5 Tác dụng dược lý

Tác d ụng trên huyết áp: Alcaloid Brahmin chiết từ Rau đắng biển với liều 0,5

mg/kg ở mèo có tác dụng làm hạ huyết áp Tuy nhiên, liều nhỏ hơn lại gây tăng huyết áp nhẹ do co mạch và kích thích cơ tim [12, 17]

Tác d ụng trên hô hấp: Liều nhỏ, Brahmin có tác dụng kích thích hô hấp [17]

Betulinic acid trong Rau đắng biển có tác dụng ổn định các tế bào Mast trong ống nghiệm, làm giảm tổng hợp prostanglandin Rau đắng biển ức chế dòng calci đi vào tế bào [37] nên có tác dụng làm giãn động mạch phổi, khí quản, phế quản tốt cho người bị hen phế quản, viêm cuống phổi [19, 20, 44]

Tác d ụng trên cơ trơn: Ở nồng độ rất loãng 1/200000 đến 1/50000, Brahmin làm

tăng co bóp ruột và tử cung cô lập [17]

Tác d ụng trên hệ thần kinh: Brahmin kích thích thần kinh trung ương, gây hưng

phấn các cơ quan, đặc biệt là kích thích tủy sống giống strychnin Khác với strychnin chỉ gián tiếp kích thích lên tim, Brahmin có tác dụng kích thích trực tiếp lên tim [17]

Rau đắng biển có khả năng kích thích gamma aminobutyric acid (GABA)

GABA là acid amin không thiết yếu và là chất ức chế dẫn truyền thần kinh phổ biến nhất trong hệ thần kinh trung ương GABA có lượng lớn ở vùng dưới đồi, đóng vai trò cơ bản trong chức năng dưới đồi – tuyến yên và trong chuyển hóa thần kinh nội tiết Rau đắng bển làm tăng khả năng tổng hợp GABA giúp cơ thể thư giãn, giảm đau, giảm các cơn co giật, cơn co thắt, ngăn ngừa tình trạng

lo âu và giúp cho giấc ngủ sâu [38]

Cùng có tác dụng lên thụ thể GABA nên Rau đắng biển làm tăng hiệu quả tác dụng của các barbiturat, vì vậy sử dụng barbiturat với liều thấp, sử dụng barbiturat được an toàn hơn

Nghiên cứu trên ruồi giấm cho thấy Rau đắng biển ức chế sự suy giảm dopamin, bảo vệ thần kinh của ruồi giấm khi tiếp xúc với rotenon [47]

Tác d ụng trên bệnh nhân Alzheimer: Rau đắng biển ức chế enzyme

Cholinesterase Điều này có thể dẫn đến giảm sự phân hủy choline, một chất dẫn truyền thần kinh quan trọng bị giảm trong bệnh nhân Alzheimer [53]

Rau đắng biển từ lâu đã được sử dụng rộng rãi trong y học cổ truyền Ấn Độ như là một thuốc bổ thần kinh và cải thiện trí nhớ [60]

Rau đắng biển có tác dụng chống oxy hóa [42], bảo vệ các tế bào thần kinh khỏi sự tấn công của beta-amyloid [43]

Tác d ụng chống ung thư: Cao khô chiết cồn của toàn cây Rau đắng biển có tác dụng ức chế sự phát triển của tế bào ung thư Walker carcinosarcoma 256 khi tiêm bắp cho chuột cống trắng [17]

Nghiên cứu tác dụng chống ung thư của dịch chiết methanol và các phân đoạn petrolium ether, chloroform, ethyl acetat, n-butanol Bacoma monnieri thấy: Dịch chiết phân đoạn n-BuOH có khả năng chống ung thư cao nhất Các Saponin triterpene dammarane phân lập từ n-BuOH là bacosaposide E (1), bacopaside VII (3) có tác dụng chống ung thư tiềm năng 1 và 3 có khả năng gây độc tất cả các dòng tế bào ung thư thử nghiệm MDA-MB-231, SHG-44, HCT-8, A 549 và PC-3M 1 và 3 có tác dụng ức chế đáng kể dòng tế bào ung thư vú MDA-MB-231 trong ống nghiệm ở nồng độ 50 mmol /L Hai chất còn lại của phân đoạn n-BuOH là bacopaside II (2) và bacopasaponin C (4) có hiệu lực kém hơn rất nhiều so với 1 và 3 [40]

B ảo vệ tim và não khi tiếp xúc với khói thuốc lá: Xúc tác của enzyme Creatine

kinase (CK) và isoenzyme (CK-MM, MB, BB) tạo ra adenosine triphosphate (ATP), nguồn năng lượng cần thiết cho tất cả tế bào của cơ thể đặc biệt là tim và não Nghiên cứu ảnh hưởng của khói thuốc lá trong vòng 12 tuần với tim và não trên chuột bạch tạng và tác dụng của Bacopa monnieri thấy: Chuột tiếp xúc với

khói thuốc lá có sự gia tăng đáng kể hoạt động của CK, isoemzyem trong huyết thanh đồng thời giảm trong tim và não Bacoside ngăn ngừa những thay đổi này gây ra bởi hút thuốc lá Hút thuốc gián tiếp tạo ra gốc tự do, peroxyd hóa lipid làm tăng tính thấm màng tế bào gây tổn thương tế bào tim và não Bacoside A

có khả năng dọn các gốc tự do, ngăn chặn peroxyd hóa lipid, bảo vệ sự toàn vẹn

về cấu trúc và chức năng của màng tế bào ngăn chặn sự rò rỉ của CK từ các mô tương ứng [20, 40]

Độc tính: Brahmin có độc tính cao Ếch bị chết trong vòng 10 phút với một liều

5 mg/kg thể trọng, còn chuột cống trắng và chuột lang chết trong vòng 24h khi dùng liều 25 mg/kg Cao khô chiết cồn 50% rồi cô chân không có LD50 là 50 mg/kg khi tiêm qua màng bụng cho chuột nhắt trắng [17]

da như da sưng dày lên như da voi, lở, nhọt độc, ghẻ Ngày uống 6-12g dạng thuốc sắc Dùng ngoài không kể liều lượng [12, 15, 17, 55]

Ngọn lá Rau đắng biển dùng như rau sống hoặc nấu chín ăn [18, 55]

Gần đây các nhà khoa học đã làm sáng tỏ phần nào về loài rau này Rau đắng biển giúp gia tăng tuần hoàn não, tăng cường dẫn truyền xung động ở hệ thần kinh, chống oxy hóa tế bào não, giúp cho sự tỉnh táo và nhận thức Đã có nhiều công trình nghiên cứu khoa học cho thấy Rau đắng biển có tác dụng giảm đau, chống viêm, ức chế tế bào ung thư, dùng tốt cho người bị hội chứng ruột

3.8 Bài thuốc có Rau đắng biển

Ch ữa động kinh, suy nhược thần kinh, mất tiếng, khản tiếng (Bài thuốc Brahmin ghita ở Ấn Độ):

Dùng 4 lít dịch chiết Rau đắng biển tươi, 4 lít Bơ, các vị Thủy xương bồ,

Mộc hương và Rễ cỏ bươm bướm [Canscora decussate (Roxb.) Roem Et

Schult., họ Long đởm (Gentianaceae)] mỗi vị 120g đã tán thành bột mịn Đánh

kỹ rồi đun nhỏ lửa cho đến khi bốc hết hơi thành bột nhão Liều dùng 5-10g, ngày 2 lần uống với sữa, sau ăn Có thể chế thành siro rồi uống [17]

Ch ữa khản tiếng do lao phổi (tài liệu Ấn Độ)

Rau đắng biển, Thủy xương bồ, Rễ cang mai, Quả chiêu liêu, Tất bát [Piper longum L., họ Hồ tiêu (Piperaceae)] Các vị phơi khô tán bột với lượng bằng nhau Ngày uống 2-3 lần, mỗi lần 10g với mật ong [17]

Ch ữa rắn cắn:

Rau đắng biển 30g, Dây mơ lông 30g, Lá mướp đắng 30g, Đọt cây sậy 20g, Rau cần tươi 20g, Rau má 20g Giã nát, vắt lấy nước uống, bã đắp [17]

4 Rau xương cá

Tên khoa học: Myosoton aquaticum (L.) Moench

Syn Stellaria aquatica (L.) Scop

Tên khác: Rau hến, Phồn lâu

Tên nước ngoài: Stellaire aquatique, céraiste d’eau (Pháp)

Họ: Cẩm chướng (Caryophyllaceae)

4.1 Mô tả

Cây thảo, sống dai Thân mọc bò, sau đứng thẳng, mảnh, nhẵn ở phần dưới

và có lông ở phần trên, bén rễ ở các đốt Lá mọc đối, gốc hình tim, đầu nhọn, gân 3, gân giữa thường rất rõ; những lá ở dưới thường có cuống, lá trên không cuống Hoa mọc ở ngọn thân hoặc kẽ lá thành chùm thưa; hoa nhỏ màu trắng;

đài 5 răng có lông ở mặt lưng; tràng 5 cánh, dài bằng đài, xẻ sâu thành 2 thùy hẹp; nhị 10, chỉ nhị phình ở gốc; bầu hình cầu, 1 ô Quả nang, hình cầu Hạt hình thận Mùa hoa quả từ tháng 3 đến tháng 5 [10, 15, 17]

4.2 Phân bố, sinh thái

Rau xương cá phân bố chủ yếu ở khu vực có khí hậu mát thuộc vùng cận nhiệt đới châu Á, bao gồm Ấn Độ, Trung Quốc, Việt Nam, Lào và vùng núi cao Thái Lan Ở Việt Nam, cây phân bố nhiều và tập trung ở các tỉnh miền núi phía Bắc, ở độ cao từ 600 đến 1600m, như Cao Bằng, Lạng Sơn, Thái Nguyên, Yên Bái, Lào Cai, Lai Châu, Sơn La, Hòa Bình, Nghệ An (Kỳ Sơn)…

Rau xương cá là cây ưa ẩm, chịu bóng và có thể hơi ưa sáng, thường mọc thành từng đám dày ở các ruộng ngô, nương rẫy, ven rừng và ven đường đi Cây mọc từ hạt vào khoảng tháng 3-4, sinh trưởng nhanh trong vụ xuân – hè, sau khi

có quả, cây bắt đầu vàng úa và tàn lụi Hạt của cây Rau xương cá tồn tại được khoảng 6-7 tháng trên mặt đất, chịu được nhiệt độ thấp vào mùa đông và sẽ nẩy mầm vào mùa xuân sang năm

Rau xương cá được coi là loài cỏ dại đối với cây trồng Tuy nhiên ở những nơi trống, cây lại có tác dụng phủ đất, tránh xói mòn [17]

4.5 Tác dụng dược lý

Ch ống ung thư: Protein bất hoạt ribosome loại 1 trong Rau xương cá có tác

dụng ức chế tổng hợp protein trong hông cầu lưới của thỏ Dịch chiết methanol Rau xương cá (200µg/ml) có tác dụng chống tế bào ung thư SMU-601(human gastric carcinoma—human cancer) 98%, Calu-6 (human pulmonary carcinoma—human-cancer cell line) 81% [27]

Ch ống oxy hóa: Rau xương cá có chứa các hợp chất phenolics (50 mg/kg)

Nghiên cứu khả năng dọn gốc tự do DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) của dịch chiết methanol Rau xương cá thấy IC50 là 2751mg/kg [27]

Tác d ụng kháng khuẩn: Nghiên cứu tác dụng của Rau xương cá trên 13 vi khuẩn, 2 virus thấy Rau xương cá có tác dụng tốt đặc biệt là trên Aeromonas salmonicida và Edwardsiella ictaluri [56]

Ch ữa mụn nhọt: Rau xương cá tươi (60g) giã nát thêm rượu vừa đủ, sắc

nước uống, đồng thời dùng cây tươi giã nát đắp ngoài [17]

Ch ữa kiết lỵ: Rau xương cá tươi (30g) sắc nước, thêm ít đường kính uống

Ch ữa trĩ: Rau xương cá tươi (90-120g) sắc thành nước đặc, thêm ít muối,

dùng nước sắc rửa và xông [17]

Ở Trung Quốc, Rau xương cá được dùng làm thuốc chữa viêm phổi, cao huyết áp, kinh nguyệt không đều, liều dùng: 15-30g dưới dạng thuốc sắc [17] Rau xương cá (15g), nấu với đậu phụ thành thức ăn – chữa cao huyết áp Rau xương cá non xào ăn trong thời gian dài có thể chữa tóc bạc sớm [17]

4.8 Bài thuốc có Rau xương cá

Ch ữa viêm nội mạc tử cung, viêm cổ tử cung, viêm phần phụ :

Rau xương cá 60g, Đào nhân 6g, Mẫu đơn bì 9g Sắc uống làm 2 lần trong ngày [17]

Ch ữa hạch bạch huyết cổ sưng đau:

Rau xương cá 30g, Côn bố 30g, đường kính vừa đủ Sắc nước uống [17]

CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG

PHÁP NGHIÊN CỨU.

2.1 NGUYÊN LIỆU

Thân, lá, hoa, rễ của các loài Rau đắng:

Nhóm 1: Là thân, lá, hoa, rễ của cây Rau đắng thu hái tại Gia Lâm HN Thời gian thu mẫu: Tháng 7 năm 2011

Nhóm 2: Là thân, lá, hoa, rễ của cây Rau đắng đất thu hái tại Đà Nẵng Thời gian thu mẫu: Tháng 7năm 2011

Nhóm 3: Là thân, lá, hoa, rễ của cây Rau đắng biển thu hái tại Gia Lâm HN Thời gian thu mẫu: Tháng 7 năm 2011

Nhóm 4: Là thân, lá, hoa, rễ của cây Rau xương cá thu hái tại Gia Lâm HN Thời gian thu mẫu: Tháng 7 năm 2011

2.2 PHƯƠNG TIỆN NGHIÊN CỨU

2.2.1 Thiết bị nghiên cứu

- Cân kỹ thuật Precisa

- Máy ảnh kỹ thuật số Canon

- Cốc có mỏ, ống đong, pipet, bình nón, đũa thủy tinh…

2.2.2 Hóa chất

Hóa chất sử dụng trong nghiên cứu bao gồm: javen, xanh methylen, đỏ son phèn, acid acetic, cloramin B, methanol, ethanol, glycerin, chloroform, amoniac, acid sulfuric, acid chlohydric, toluen, acid formic, ethylacetat, n-hexan, petrolium ether, natri hydroxyd, thuốc thử định tính đạt tiêu chuẩn tinh khiết phân tích theo DĐVN IV [7]

2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.3.1 Nghiên cứu về thực vật

Thu mẫu và bảo quản: [4,5]

Dược liệu tươi được phơi sấy khô, cho vào các túi PE đóng kín, để nơi thoáng mát, khô ráo

Một phần dược liệu tươi được cắt thành từng đoạn bảo quản trong hỗn hợp cồn - nước - glycerin [1-1-1]

Quan sát đặc điểm hình thái:

Giám định tên khoa học:

Mô tả hình thái: Quan sát, chụp ảnh cây tại thực địa, làm vi phẫu các bộ phận của cây

Quy trình làm tiêu b ản vi phẫu thực vật:

Dược liệu tươi hay khô đã ngâm mềm cắt ngang bằng dụng cụ cắt vi phẫu hoặc dao lam, chọn các lát cắt mỏng

Ngâm nước Javen hay dung dịch cloramin (20-30 phút) Rửa bằng nước

Ngâm acid acetic (15-30 phút) Rửa bằng nước cất 3 lần

Nhuộm vi phẫu bằng xanh methylen (1-2 phút) Rửa bằng nước

Nhuộm đỏ son phèn (2-10 phút) Rửa bằng nước

Nhỏ một giọt glycerin trên phiến kính, đặt vi phẫu vào, đậy lá kính soi trên kính hiển vi Quan sát, chụp ảnh [3]

Đặc điểm vi học: Quan sát cấu tạo giải phẫu thân, lá, và bột dược liệu bằng kính hiển vi

- Toàn bộ cây Rau đắng, Rau đắng đất, Rau đắng biển, Rau xương cá sau khi rửa sạch, sấy khô, tán thành bột mịn Rây lấy phần bột mịn

2.3.2 Nghiên cứu về hóa học

Dược liệu đem nghiên cứu về hóa học là phần trên mặt đất của Rau đắng, Rau đắng đất, Rau đắng biển, Rau xương cá được nghiền thành bột

2.3.2.1 Định tính sơ bộ: [1,2,3]

• Định tính glycosid tim

Dịch chiết bột các dược liệu trong cồn loãng, loại tạp bằng chì acetat 30% Lắc dịch lọc với hỗn hợp: chloroform-ethanol (4: 1) Chia đều dịch chiết vào 4 ống nghiệm nhỏ Đặt các ống nghiệm lên giá và bốc hơi trên nồi cách thủy đến khô Cắn thu được đem tiến hành làm các phản ứng định tính

+ Ph ản ứng Liebermann- Burchardt (phản ứng của khung steroid):

Cho vào ống nghiệm có chứa cắn glycosid tim 1ml anhydride acetic, lắc đều cho tan hết cắn Nghiêng ống 45° Cho từ từ theo thành ống 0,5ml acid H2SO4

đặc, tránh xáo trộn chất lỏng trong ống Nếu ở mặt tiếp xúc giữa hai lớp chất lỏng xuất hiện một vòng màu tím đỏ; lớp chất lỏng phía dưới có màu hồng, lớp trên có màu xanh lá Phản ứng dương tính

+ Ph ản ứng Baljet (phản ứng của vòng lacton 5 cạnh):

Pha thuốc thử Baljet: Cho vào ống nghiệm to 1 phần dung dịch acid picric 1% và 9 phần dung dịch NaOH 10% Lắc đều

Cho vào ống nghiệm có chứa cắn glycosid tim 0,5 ml ethanol 90% Lắc đều cho tan hết cắn Nhỏ từng giọt thuốc thử Baljet mới pha cho đến khi xuất hiện màu đỏ cam thì phản ứng dương tính

+ Ph ản ứng Legal (phản ứng của vòng lacton 5 cạnh):

Cho vào ống nghiệm có chứa cắn glycosid tim 0,5ml ethanol 90% Lắc đều cho tan hết cắn Nhỏ 1 giọt TT natrinitroprussiat 0,5% và 2 giọt dung dịch NaOH 10% Lắc đều nếu thấy xuất hiện màu đỏ cam thì phản ứng dương tính

+ Ph ản ứng Keller – Kiliani (phản ứng của phần đường):

Cho vào ống nghiệm chứa cắn glycosid tim 0,5ml ethanol 90% Lắc đều cho tan hết cắn Thêm vài giọt dung dịch sắt III chlorid 5% pha trong acid acetic Lắc đều Nghiêng ống 45° Cho từ từ theo thành ống 0,5ml acid sulphuric đặc, tránh xáo trộn chất lỏng trong ống nghiệm Nếu ở mặt tiếp xúc giữa hai lớp chất lỏng sẽ xuất hiện một vòng màu tím đỏ; lắc nhẹ, lớp chất lỏng phía trên có màu xanh lá thì phản ứng dương tính

• Định tính Saponin

Dựa vào tính tạo bọt của Saponin

Dịch chiết các bột dược liệu trong EtOH 90%, pha loãng với nước cất, lắc trong ống nghiệm Căn cứ vào hiện tượng tạo bọt sơ bộ đánh giá sự có mặt của saponin trong dược liệu

• Định tính Anthranoid

+ Ph ản ứng Borntraeger: Phản ứng của anthranoid với kiềm.

Dịch chiết bột các dược liệu trong nước, chiết với chloroform Dịch chiết chloroform thêm dd amoniac 10% Căn cứ vào màu của phản ứng, nếu lớp nước

có màu đỏ sim thì phản ứng dương tính

+ Vi th ăng hoa:

Dựa vào đặc tính dễ thăng hoa của anthranoid

Đun trực tiếp trên bếp điện nắp chai đựng bột dược liệu, trên có phiến kính

để miếng bông có tẩm nước lạnh Sau 5-10 phút lấy ra để nguội soi dưới kính hiển vi Nếu soi dưới kính hiển vi thấy các tinh thể hình kim màu vàng đẹp thì

• Định tính Flavonoid

Dịch chiết bột các dược liệu trong EtOH 90% tiến hành các phản ứng: Phản ứng với dd kiềm loãng, phản ứng cyanidin, phản ứng với FeCl3 5%, phản ứng diazoni sơ bộ kết luận dược liệu có chứa flavonoid hay không

+ Phản ứng với dd kiềm loãng:

Cho 1ml dịch chiết vào ống nghiệm, thêm vài giọt dd NaOH 10% nếu thấy xuất hiện tủa đục màu vàng thì phản ứng dương tính

+ Phản ứng Cyanidin:

Cho 1ml dịch chiết vào ống nghiệm, thêm một ít bột Mg kim loại và 3 - 5 giọt HCl đặc Lắc đều, đun cách thủy vài phút nếu xuất hiện màu hồng thì phản ứng dương tính

+ Phản ứng với dd FeCl 3 5%:

Cho 1ml dịch chiết vào ống nghiệm, thêm vào ống nghiệm vài giọt FeCl3

5% nếu xuất hiện tủa xanh đen thì phản ứng dương tính

+ Phản ứng Diazo hóa:

Cho 1ml dịch chiết vào ống nghiệm, kiềm hóa bằng NaOH 10% Thêm vài giọt thuốc thử diazoni, lắc đều, đun cách thủy vài phút nếu xuất hiện màu hồng hay đỏ cam thì phản ứng dương tính

• Định tính Coumarin

Dịch chiết các bột dược liệu trong EtOH 90%, tiến hành làm các phản ứng:

+ Phản ứng mở - đóng vòng lacton:

Cho vào 2 ống nghiệm mỗi ống 1ml dịch chiết

Ống 1: Thêm 0,5ml dd NaOH 10%, ống 2 để yên

Đun sôi cả 2 ống nghiệm, để nguội Quan sát thấy ống 1 có tủa đục màu vàng, ống 2 không thay đổi

Tiếp tục thêm vào mỗi ống 1ml nước cất, lắc đều Ống 1 sẽ trở nên trong suốt, ống 2 có tủa đục

Acid hóa ống 1 bằng vài giọt dd HCl đặc, ống 1 sẽ trở lại đục như ống 2 Nếu phản ứng xảy ra như đã mô tả ở trên thì phản ứng dương tính

• Định tính acid hữu cơ

Dựa vào hiện tượng sủi bọt khi H+ phản ứng với Na2CO3.

Chiết các bột dược liệu trong nước, cho vào ống nghiệm nhỏ khoảng 2 ml dịch lọc, thêm 1 ít tinh thể Na2CO3, căn cứ vào hiện tượng sủi bọt sơ bộ kết luận