1. Trang chủ
  2. » Luận Văn - Báo Cáo

NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)

72 654 3
Tài liệu đã được kiểm tra trùng lặp

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Định dạng
Số trang 72
Dung lượng 1,28 MB

Nội dung

Xã hội con ngƣời ngày càng phát triển hiện đại, cùng với nó là nhu cầu năng lƣợng và nhiên liệu cho phát triển kinh tế - xã hội ngày càng tăng. Nguồn nguyên liệu chính đƣợc con ngƣời sử dụng là xăng dầu có nguồn gốc hóa thạch. Xăng dầu đƣợc sử dụng để chạy các động cơ diessel trong các nhà máy, để vận hành động cơ. Xăng dầu có tác động cực kì lớn đối với sự phát triển nền kinh tế của mỗi quốc gia. Sản lƣợng xăng dầu tiêu thụ trên thế giới tăng tỉ lệ thuận với tốc độ tăng trƣởng kinh tế, các nƣớc tiêu thụ xăng dầu lớn nhất hiện nay là Mỹ và Trung Quốc. Theo ƣớc tính trữ lƣợng dầu mỏ trên thế giới là có giới hạn. Với xu hƣớng khai thác và sử dụng nhƣ hiện nay, chắc chắn trong một thời gian không lâu nguồn nguyên liệu hóa thạch này sẽ cạn kiệt. Do vai trò cực kì quan trọng của dầu mỏ nên trƣớc khi nguồn nguyên liệu này cạn kiệt, con ngƣời phải nhanh chóng tìm ra nguồn nguyên liệu thay thế. Có nhiều nguyên liệu đã đƣợc đề xuất nhƣ khai thác năng lƣợng mặt trời, năng lƣợng gió, thủy triều, sử dụng nguyên liệu hydrô … Và khoảng 30 năm trở lại đây, có một hƣớng rất mới là sử dụng dầu diessel sinh học (biodiesel) để thay thế cho dầu diesel bình thƣờng. Diessel sinh học là dầu đƣợc chiết xuất hoàn toàn từ thực vật nhƣ hạt cải dầu (Mỹ), hạt hƣớng dƣơng (Ý và Miền nam nƣớc Pháp), đậu nành (Mỹ và Braxil), hạt cây bông (Hy Lạp), dầu cọ (Malaysia) và từ hạt cây dầu mè (Nicaragoa và Nam Mỹ). So với các cây khác, cây dầu mè có ƣu điểm chống chịu với điều kiện bất lợi của môi trƣờng tốt hơn. Ngoài lấy hạt để ép dầu, trồng cây còn giúp cải tạo đất và môi trƣờng nhất là ở những vùng đất hoang, khô cằn. Cây dầu mè là cây có tiềm năng kinh tế rất lớn lại thích hợp với điều kiện khí hậu nhiệt đới của Việt Nam. Nếu nhận đƣợc sự quan tâm đúng mức của bộ Nông nghiệp, cây hoàn toàn có thể trở thành một cây giúp nông dân làm giàu ngay trên những vùng đất bỏ hoang mà nhiều cây trồng khác không phát triển đƣợc

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC  KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP NI CẤY MƠ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.) Nghành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Niên khóa: 2003 – 2007 Sinh viên thực hiện: NGUYỄN VĂN HẠNH Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 08/2007 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC ************** NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.) Luận văn kỹ sƣ Chuyên ngành: Công Nghệ Sinh Học GVHD: Sinh viên thực hiện: PGS.TS TRẦN VĂN MINH NGUYỄN VĂN HẠNH Khóa: 2003-2007 LỜI CẢM ƠN Em xin chân thành cảm ơn:  Cha mẹ suốt đời tận tụy để có đƣợc ngày hơm  Ban Giám hiệu Trƣờng Đại học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh, Ban chủ nhiệm Bộ Mơn Cơng Nghệ Sinh Học, tất quý thầy cô truyền đạt kiến thức cho em suốt trình học tập trƣờng  Thầy Trần Văn Minh tận tình hƣớng dẫn, ân cần bảo giúp đỡ em suốt thời gian thực đề tài  Cô Bùi Thị Tƣờng Thu, Thạc sĩ Trần Văn Định, Kỹ sƣ Khƣu Hoàng Minh, anh chị nhân viên bạn sinh viên thực tập Phịng Thí Nghiệm Trọng Điểm Phía Nam Cơng Nghệ Tế Bào Thực Vật thuộc Viện Sinh Học Nhiệt Đới thành phố Hồ Chí Minh tận tình hƣớng dẫn giúp đỡ em hồn thành khố luận  Xin gửi lời cảm ơn đến tập thể lớp Công Nghệ Sinh Học 29 gắn bó, động viên, giúp đỡ tơi suốt năm qua Sinh viên thực Nguyễn Văn Hạnh iii TÓM TẮT NGUYỄN VĂN HẠNH, Đại học Nơng Lâm TP.Hồ Chí Minh Tháng 8/2007 “NI CẤY MƠ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)” Giảng viên hƣớng dẫn: PGS.TS TRẦN VĂN MINH Đề tài đƣợc thực Phịng thí nghiệm trọng điểm phía Nam Cơng Nghệ Tế Bào Thực Vật, Viện Sinh Học Nhiệt Đới TP.HCM Thời gian thực tháng đến tháng năm 2007 Hạt dầu mè có chứa lƣợng lớn chất béo (37%) nguồn nguyên liệu để sản xuất dầu diesel sinh học (biodiesel) Đây nguồn ngun liệu an tồn cho mơi trƣờng, hiệu kinh tế có khả tái sinh đƣợc Nguồn lƣợng hứa hẹn thay cho thủy điện, dầu diesel, dầu hỏa, khí hóa lỏng, than, củi … Dầu sử dụng để sản xuất chất tẩy rửa, chất nhuộm dầu thơm Lá, vỏ rễ chứa chất có đặc tính dƣợc liệu Cây phát triển tốt vùng đất khơ cằn khơng địi hỏi nhiều chăm sóc ngƣời Do đó, dầu mè thích hợp trở thành cơng nghiệp mang lại hiệu kính tế cao cho ngƣời dân Và để đáp ứng cho nhu cầu giống, thực đề tài “Nuôi cấy mô dầu mè (Jatropha curcas L.)” Từ kết thực nghiệm, đạt đƣợc số kết sau:  Mẫu hạt dầu mè đƣợc vô trùng tốt với Natri hypochlorit 15% thời gian 60 phút, mẫu chồi dầu mè đƣợc vô trùng tốt Natri hypochlorit 10% thời gian 45 phút  Mơi trƣờng khống thích hợp để nuôi cấy mô dầu mè in vitro mơi trƣờng MS  Mơi trƣờng thích hợp để nhân chồi dầu mè môi trƣờng MS bổ sung BA (0,1 mg/l) IBA (0,01 mg/l)  Môi trƣờng thích hợp cho rễ mơi trƣờng MS bổ sung IBA nồng độ 0,3 mg/l iv SUMMARY NGUYEN VAN HANH, Nong Lam University, HCMC August, 2007 “TISSUE CULTURE OF PHYSIC NUT (Jatropha curcas L.)” Guided teacher: A.Professor Dr TRAN VAN MINH This thesis was completed at Southern Key Laboratory for Plant Cell Technology, Institute of Tropical Biology from Frebruary to August 2007 Seeds of Jatropha contain a large amount of fat (37%), are a source to produce biodiesel This is an environmentally safe, cost effective and renewable source of non-conventional energy as a promising substitute to hydel power, diesel, kerosene, LPG, coal, firewood etc Jatropha oil can be used to produce washing agent, dye and perfume Leave, bark and root contain medicinal substance Jatropha can grow in arid and semi-arid condition and does not require so much human care So jatropha is suitable to become an economic industrial plant To produce breed of jatropha we’ve done this thesis “Tissue culture of physic nut (Jatropha curcas L.)” Some results of this thesis:  Seeds are steriled with Natri hypochlorit 15% for 60 axillary nodes with Natri hypochlorit 10% for 45  Salt basal culture medium is MS  Suitable medium for bud proliferation is MS supplemented with BA (0,1 mg/l) and IBA (0,01 mg/l)  Medium for rooting is MS complemented IBA (0,3 mg/l) v MỤC LỤC Phần Trang LỜI CẢM ƠN iii TÓM TẮT iv SUMMARY v MỤC LỤC vi DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT ix DANH SÁCH CÁC HÌNH ix DANH SÁCH CÁC BẢNG xi Chƣơng MỞ ĐẦU 1.1 Đăt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Nhân giống trồng in vitro 2.1.1 Khái niệm nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.1.2 Cơ sở khoa học chung nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.1.3 Lợi ích nhân giống nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.1.4 Các giai đoạn nhân giống in vitro 2.1.4.1 Giai đoạn 1: Khử trùng mô nuôi cấy 2.1.4.2 Giai đoạn 2: Tái sinh mẫu nuôi cấy 2.1.4.3 Giai đoạn 3: Nhân nhanh 2.1.4.4 Giai đoạn 4: Tạo hoàn chỉnh 2.1.4.5 Giai đoạn 5: Đƣa đất 2.1.5 Các yếu tố ảnh hƣởng đến q trình ni cấy mơ 2.1.5.1 Mô nuôi cấy 2.1.5.2 Vô trùng nuôi cấy 2.1.5.3 Điều kiện nuôi cấy vi 2.1.5.4 Môi trƣờng nuôi cấy 12 2.1.5.5 Vai trị chất kích thích sinh trƣởng nuôi cấy 12 2.1.5.6 Ảnh hƣởng pH Agar 14 2.2 Giới thiệu dầu mè (Jatropha curcas L.) 16 2.2.1 Vị trí phân loại 16 2.2.2 Đặc điểm sinh học 17 2.2.2.1 Mô tả 17 2.2.2.2 Sinh thái 18 2.2.3 Công dụng 19 2.2.3.1 Nhựa mủ 19 2.2.3.2 Lá, vỏ rễ 19 2.2.3.3 Hạt dầu 19 2.2.3.4 Dầu mè nguyên liệu sinh học 20 2.2.4 Nhân giống 22 2.2.4.1 Phƣơng pháp nhân giống cổ truyền 22 2.2.4.2 Phƣơng pháp nhân giống đại 23 Chƣơng VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 3.1 Thời gian địa điểm thí nghiệm 25 3.2 Vật liệu 25 3.2.1 Đối tƣợng thí nghiệm 25 3.2.2 Trang thiết bị dụng cụ 25 3.2.3 Môi trƣờng nuôi cấy 25 3.2.4 Điều kiện nuôi cấy in vitro 27 3.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 27 3.3.1 Phƣơng pháp khử trùng mẫu 27 3.3.2 Bố trí thí nghiệm 28 3.3.2.1 Thí nghiệm 1: Ảnh hƣởng nồng độ chất khử trùng thời gian khử mẫu đến tỉ lệ sống mẫu dầu mè 28 vii 3.3.2.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát mơi trƣờng khống thích hợp để nuôi cấy mô dầu mè in vitro 29 3.3.2.3 Thí nghiệm 3: Ảnh hƣởng BA đến khả tạo chồi dầu mè 30 3.3.2.4 Thí nghiệm 4: Ảnh hƣởng BA IBA đến khả tạo chồi dầu mè điều kiện in vitro 31 3.3.2.5 3.3.3 Thí nghiệm 5: Ni cấy tạo rễ dầu mè in vitro 32 Phƣơng pháp xử lý số liệu 33 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 34 4.1 Thí nghiệm 1: Vơ trùng mô cấy ban đầu từ thực sinh 34 4.1.1 Vô trùng mẫu hạt 35 4.1.2 Vô trùng mẫu chồi 36 4.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát mơi trƣờng khống cho dầu mè in vitro 39 4.3 Thí nghiệm 3: Ảnh hƣởng BA đến hình thành chồi dầu mè 41 4.4 Thí nghiệm 4: Ảnh hƣởng BA IBA đến hình thành chồi dầu mè 43 4.5 Thí nghiệm 5: Nuôi cấy tạo rễ dầu mè in vitro 45 Chƣơng KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 47 5.1 Kết luận 47 5.2 Đề nghị 47 Chƣơng TÀI LIỆU THAM KHẢO 48 PHẦN PHỤ LỤC a viii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT BA : Benzyl adenine Ki : Kinetin 2,4-D : Dichlorophenory acetic acid HgCl2 : Thủy ngân chlorite IAA : -indole acetic acid IBA : -indole butyric acid NAA : -naphtalen acetic acid Cw : Nƣớc dừa (Coconut water) Suc : Đƣờng sucrose CRD : Completely randomized design Ctv : Cộng tác viên CV : Hệ số biến động LSD : Sai số nhỏ MS : Murashige – Skoog, 1962 WPM : Lloy – Mc Cown, 1980 ix DANH SÁCH CÁC HÌNH Hình 2.1: Cây dầu mè (Jatropha curcas L.) 16 Hình 2.2: Lá hoa dầu mè 18 Hình 2.3: Hoa, hạt dầu mè 18 Hình 2.4: Các sản xuất dầu thực vật 22 Hình 4.2: Chồi dầu mè nảy từ hạt vô trùng 38 Hình 4.1: Mẫu thực sinh dầu mè đƣợc vô trùng phát sinh chồi 38 Hình 4.3: Sự phát triển dầu mè mơi trƣờng khống 40 Hình 4.4: Ảnh hƣởng BA đến tạo chồi dầu mè 42 Hình 4.5: Ảnh hƣởng BA IBA đến tạo chồi dầu mè 44 Hình 4.6: Ni cấy tạo rễ dầu mè in vitro 44 Hình 4.7: Cây dầu mè in vitro 46 x 47 Chƣơng KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Từ kết thực nghiệm, chúng tơi có số kết luận sau:  Mẫu dầu mè thực sinh đƣợc vô trùng tốt điều kiện Natri hypochlorit 10% khoảng thời gian 45 phút  Mơi trƣờng khống thích hợp để ni cấy mơ dầu mè in vitro môi trƣờng MS  Môi trƣờng thích hợp để nhân chồi dầu mè mơi trƣờng MS bổ sung BA (0,1 mg/l) IBA (0,01 mg/l)  Mơi trƣờng thích hợp cho rễ môi trƣờng MS bổ sung IBA nồng độ 0,3 mg/l 5.2 Đề nghị  Cần nghiên cứu thêm môi trƣờng để nuôi cấy dầu mè từ sau rễ đủ lớn để đƣa vƣờn ƣơm, theo dõi sinh trƣởng giai đoạn vƣờn ƣơm đến đạt tiêu chuẩn đem trồng  Xây dụng hồn chỉnh qui trình nhân giống in vitro vƣờn ƣơm dầu mè 48 Chƣơng TÀI LIỆU THAM KHẢO Bùi Bá Bổng, 1995 Nhân giống nuôi cấy mô Sở khoa học công nghệ môi trƣờng An Giang Trần Thị Dung, 2003, Bài giảng nuôi cấy mô tế bào thực vật, Trƣờng Đại học Nông Lâm TP.HCM Dƣơng Công Kiên, 2002 Nuôi cấy mô thực vật Nhà xuất Đại Học quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh Nguyễn Đức Lƣợng, 2002 Công nghệ tế bào Nhà xuất Đại Học Quốc Gia TP Hồ Chí Minh Trần Văn Minh, 2004 Công nghệ sinh học – Giáo trình cao học – nghiên cứu sinh Trƣờng đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh, 933 trang Khƣu Hồng Minh, 2006 Ni cấy mơ Trai Nam Bộ (Fagraea cochinchinensis A.Chev.) Luận văn kĩ sƣ Công Nghệ Sinh Học, Trƣờng Đại học Nông Lâm Tp HCM Nguyễn Văn Uyển, 1996 Những phương pháp công nghệ sinh học thực vật Nhà xuất Nông nghiệp, tập 1, Bùi Trang Việt, 2000 Sinh lý thực vật đại cương Đại học quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh, 333 trang NIIR Board of Consultants and Engineers 2006 The Complete Book on Jatropha (Bio-Diesel) with Ashwagandha, Stevia, Brahmi & Jatamansi Herbs (Cultivation, Processing & Uses) – Asia Pacific Business Press Inc 10 Heller, J (1996) Physic nut Jatropha curcas L Promoting the conservation and use of underutilized and neglected crops Institute of Plant Genetics and Crop Plant Research, Gatersleben, International Plant Genetic Resources Institute, Rome 11 M Sujatha & N Mukta, 1995 Morphogenesis and plant regeneration from tissue cultures of Jatropha curca Plant Cell, Tissue and Organ Culture 44: 135 – 141, 1996 12 M Sujatha, H.P.S Makkar and K Becker, 2005 Shoot bud proliferation from axillary nodes and leaf sections of non-toxic Jatropha curcas L Plant Growth Regulation (2005) 47: 83 – 90 49 13 Nannapat Thepsamran, Chockpisit Thepsithar and Aree Thongpukdee In vitro multiple shoot induction of physic nut (Jatropha curcas) Nakhon Pathom 73000, Thailand 14 Timir baran Jha, Priyanka Mukherjee and Mukul Manjari Datta, 2007 Somatic embryogenesis in Jatropha curcas Linn., an important biofuel plant Springer Japan 1:135 -140, 2007 INTERNET http://www.cyberlipid.org/glycer/glyc0051.htm http://www.dongnai.gov.vn/thong_tin_KTXH/Khoa_hoc_cong_nghe/mlnew s.2006-10-25.0403019214/view?searchterm=curcas http://vnexpress.net/Vietnam/Khoa-hoc/2006/07/3B9EBF6B/?q=1 http://www.agbiotech.com.vn/vn/2print.php?key=728 PHỤ LỤC Thí nghiệm - 1: Vô trùng mẫu hạt dầu mè One-Way Analysis of Variance -Data: TN12._GT Level codes: TN12.NT Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 1145915 11 0104174 9.771 0000 Within groups 0202576 19 0010662 -Total (corrected) 1348491 30 missing value(s) have been excluded Table of means for TN12._GT by TN12.NT -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean -1 0500000 0118000 0230889 0158204 0841796 1833333 0057877 0188520 1554258 2112409 3 1666667 0075922 0188520 1387591 1945742 2083333 0389930 0188520 1804258 2362409 1000000 0234500 0230889 0658204 1341796 1083333 0136290 0188520 0804258 1362409 2083333 0101583 0188520 1804258 2362409 2678571 0255744 0188520 2399496 2957647 1000000 0235640 0230889 0658204 1341796 10 1954545 0098225 0230889 1612749 2296342 11 2037037 0189627 0188520 1757962 2316113 12 2500000 0067400 0230889 2158204 2841796 -Total 31 1751804 0058646 0058646 1664987 1838620 Multiple range analysis for TN12._GT by TN12.NT -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -1 0500000 X 1000000 X 1000000 X 1083333 X 3 1666667 X 1833333 X 10 1954545 XX 11 2037037 XX 2083333 XX 2083333 XX 12 2500000 XX 2678571 X -contrast difference limits - -0.13333 0.06240 * - -0.11667 0.06240 * - -0.15833 0.06240 * - -0.05000 0.06836 - -0.05833 0.06240 - -0.15833 0.06240 * - -0.21786 0.06240 * - -0.05000 0.06836 - 10 -0.14545 0.06836 * - 11 -0.15370 0.06240 * - 12 -0.20000 0.06836 * - 0.01667 0.05582 - -0.02500 0.05582 - 0.08333 0.06240 * - 0.07500 0.05582 * - -0.02500 0.05582 - -0.08452 0.05582 * - 0.08333 0.06240 * - 10 -0.01212 0.06240 - 11 -0.02037 0.05582 - 12 -0.06667 0.06240 * - -0.04167 0.05582 - 0.06667 0.06240 * - 0.05833 0.05582 * - -0.04167 0.05582 - -0.10119 0.05582 * - 0.06667 0.06240 * - 10 -0.02879 0.06240 - 11 -0.03704 0.05582 - 12 -0.08333 0.06240 * - 0.10833 0.06240 * - 0.10000 0.05582 * - 0.00000 0.05582 - -0.05952 0.05582 * - 0.10833 0.06240 * - 10 0.01288 0.06240 - 11 0.00463 0.05582 - 12 -0.04167 0.06240 * denotes a statistically significant difference Thí nghiệm – 2: Vô trùng mẫu chồi dầu mè One-Way Analysis of Variance -Data: TN11._GT Level codes: TN11.NT Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 0119997 11 0010909 4.751 0007 Within groups 0055110 24 0000229 -Total (corrected) 0175108 35 missing value(s) have been excluded Table of means for TN11._GT by TN11.NT -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean -1 0000000 0000000 0087488 -.0127711 0127711 0128205 0015005 0087488 0000495 0255916 3 0629630 0088441 0087488 0501919 0757340 0489766 0193466 0087488 0362055 0617477 0133333 0064959 0087488 0005623 0261044 0208333 0074545 0087488 0080623 0336044 0490741 0068402 0087488 0363030 0618451 0452279 0064439 0087488 0324569 0579990 0151515 0027933 0087488 0023805 0279226 10 0423077 0066542 0087488 0295366 0550788 11 0313390 0039580 0087488 0185680 0441101 12 0376984 0144886 0087488 0249274 0504695 -Total 36 0316438 0025256 0025256 0279571 0353305 Multiple range analysis for TN11._GT by TN11.NT -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -1 0000000 X 0128205 XX 0133333 XX 0151515 XX 0208333 XXX 11 0313390 XXX 12 0376984 XXXX 10 0423077 XXX 0452279 XXX 0489766 XX 0490741 XX 3 0629630 X contrast - - - - - - - - - 10 - 11 - 12 - - - - - - - - 10 - 11 - 12 - - - - - - - 10 - 11 - 12 - - - - - - 10 - 11 - 12 - - - - - 10 - 11 - 12 - - - - 10 - 11 - 12 - - - 10 - 11 - 12 - difference -0.01282 -0.06296 -0.04898 -0.01333 -0.02083 -0.04907 -0.04523 -0.01515 -0.04231 -0.03134 -0.03770 -0.05014 -0.03616 -0.00051 -0.00801 -0.03625 -0.03241 -0.00233 -0.02949 -0.01852 -0.02488 0.01399 0.04963 0.04213 0.01389 0.01774 0.04781 0.02066 0.03162 0.02526 0.03564 0.02814 -0.00010 0.00375 0.03383 0.00667 0.01764 0.01128 -0.00750 -0.03574 -0.03189 -0.00182 -0.02897 -0.01801 -0.02437 -0.02824 -0.02439 0.00568 -0.02147 -0.01051 -0.01687 0.00385 0.03392 0.00677 0.01774 0.01138 0.03008 limits 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 0.02554 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * - 10 0.00292 0.02554 - 11 0.01389 0.02554 - 12 0.00753 0.02554 - 10 -0.02716 0.02554 * - 11 -0.01619 0.02554 - 12 -0.02255 0.02554 10 - 11 0.01097 0.02554 10 - 12 0.00461 0.02554 11 - 12 -0.00636 0.02554 -* denotes a statistically significant difference Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng BA đến tạo chồi dầu mè – Số chồi One-Way Analysis of Variance -Data: TN3CHOI._GT Level codes: TN3CHOI.NT Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 16.028922 5.3429739 158.549 0000 Within groups 1.010975 30 0336992 -Total (corrected) 17.039897 33 missing value(s) have been excluded Table of means for TN3CHOI._GT by TN3CHOI.NT -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean -1 1.0000000 0671296 0820965 8814163 1.1185837 2.1666667 1666667 0749435 2.0584150 2.2749183 2.3750000 0301137 0649030 2.2812513 2.4687487 15 8666667 0132254 0473984 7982023 9351310 -Total 34 1.4705882 0314826 0314826 1.4251135 1.5160630 Multiple range analysis for TN3CHOI._GT by TN3CHOI.NT -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -4 15 8666667 X 1.0000000 X 2.1666667 X 2.3750000 X -contrast difference limits - -1.16667 0.22707 * - -1.37500 0.21378 * - 0.13333 0.19365 - -0.20833 0.20252 * - 1.30000 0.18114 * - 1.50833 0.16417 * -* denotes a statistically significant difference – Chiều cao chồi One-Way Analysis of Variance -Data: TN3CAO1._GT Level codes: TN3CAO1.NT Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 47.418907 15.806302 1008.869 0000 Within groups 673696 43 015667 -Total (corrected) 48.092603 46 missing value(s) have been excluded Table of means for TN3CAO1._GT by TN3CAO1.NT -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean -1 1.8571429 0474769 0473095 1.7896631 1.9246226 13 3.4615385 0362717 0347157 3.4120219 3.5110550 13 3.5384615 0322259 0347157 3.4889450 3.5879781 14 1.3333333 0341119 0334529 1.2856180 1.3810487 -Total 47 2.6099291 0182578 0182578 2.5838871 2.6359710 Multiple range analysis for TN3CAO1._GT by TN3CAO1.NT -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -4 14 1.3333333 X 1.8571429 X 13 3.4615385 X 13 3.5384615 X -contrast difference limits - -1.60440 0.11837 * - -1.68132 0.11837 * - 0.52381 0.11688 * - -0.07692 0.09903 - 2.12821 0.09725 * - 2.20513 0.09725 * -* denotes a statistically significant difference Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng BA IBA đến tạo chồi dầu mè – Số chồi One-Way Analysis of Variance -Data: TN4CHOI._GT Level codes: TN4CHOI.NT Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 20.301868 6.7672894 246.960 0000 Within groups 2.000376 73 0274024 -Total (corrected) 22.302245 76 missing value(s) have been excluded Table of means for TN4CHOI._GT by TN4CHOI.NT -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean -1 22 2.1363636 0310786 0352926 2.0866160 2.1861113 21 2.2857143 0488223 0361231 2.2347959 2.3366327 19 1.8947368 0332663 0379767 1.8412056 1.9482681 15 8666667 0288300 0427414 8064192 9269141 -Total 77 1.8701299 0188647 0188647 1.8435386 1.8967211 Multiple range analysis for TN4CHOI._GT by TN4CHOI.NT -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -4 15 8666667 X 19 1.8947368 X 22 2.1363636 X 21 2.2857143 X -contrast difference limits - -0.14935 0.10067 * - 0.24163 0.10335 * - 1.26970 0.11050 * - 0.39098 0.10448 * - 1.41905 0.11156 * - 1.02807 0.11398 * -* denotes a statistically significant difference – Chiều cao chồi One-Way Analysis of Variance -Data: TN4CCHOI._GT Level codes: TN4CCHOI.NT Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 134.35998 44.786659 927.509 0000 Within groups 6.47047 134 048287 -Total (corrected) 140.83044 137 missing value(s) have been excluded Table of means for TN4CCHOI._GT by TN4CCHOI.NT -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean -1 41 4.7125000 0198652 0343181 4.6644942 4.7605058 45 3.3222222 0334361 0327574 3.2763997 3.3680447 37 3.4130022 0473763 0361256 3.3624681 3.4635363 15 1.3000000 0543358 0567374 1.2206331 1.3793669 -Total 138 3.5398086 0187058 0187058 3.5136421 3.5659751 Multiple range analysis for TN4CCHOI._GT by TN4CCHOI.NT -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -4 15 1.3000000 X 45 3.3222222 X 37 3.4130022 X 41 4.7125000 X -contrast difference limits - 1.39028 0.09385 * - 1.29950 0.09857 * - 3.41250 0.13118 * - -0.09078 0.09647 - 2.02222 0.12961 * - 2.11300 0.13306 * -* denotes a statistically significant difference – Số One-Way Analysis of Variance -Data: TN4LA._GT Level codes: TN4LA.T Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 113.23593 37.745310 213.449 0000 Within groups 12.90900 73 176836 -Total (corrected) 126.14493 76 missing value(s) have been excluded Table of means for TN4LA._GT by TN4LA.T -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean -1 22 4.4090909 0403457 0896548 4.2827153 4.5354665 21 3.8095238 0722893 0917646 3.6801742 3.9388734 19 3.0000000 1637446 0964735 2.8640129 3.1359871 15 1.0000000 0614260 1085774 8469515 1.1530485 -Total 77 3.2337662 0479225 0479225 3.1662156 3.3013168 Multiple range analysis for TN4LA._GT by TN4LA.T -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -4 15 1.0000000 X 19 3.0000000 X 21 3.8095238 X 22 4.4090909 X -contrast difference limits - 0.59957 0.25574 * - 1.40909 0.26254 * - 3.40909 0.28069 * - 0.80952 0.26542 * - 2.80952 0.28339 * - 2.00000 0.28954 * -* denotes a statistically significant difference Thí nghiệm 5: Tạo rễ in vitro dầu mè – Số rễ One-Way Analysis of Variance -Data: TN5RE._GT Level codes: TN5RE.NT Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 223.72059 74.573529 541.958 0000 Within groups 4.12801 30 137600 -Total (corrected) 227.84860 33 missing value(s) have been excluded Table of means for TN5RE._GT by TN5RE.NT -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean -1 2.8750000 1023560 1311489 2.6855628 3.0644372 5.5000000 2126994 1311489 5.3105628 5.6894372 6.3750000 1341517 1311489 6.1855628 6.5644372 10 0000000 0000000 1173032 -.1694378 1694378 -Total 34 3.4705882 0636166 0636166 3.3786977 3.5624788 Multiple range analysis for TN5RE._GT by TN5RE.NT -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -4 10 0000000 X 2.8750000 X 5.5000000 X 6.3750000 X -contrast difference limits - -2.62500 0.37887 * - -3.50000 0.37887 * - 2.87500 0.35943 * - -0.87500 0.37887 * - 5.50000 0.35943 * - 6.37500 0.35943 * -* denotes a statistically significant difference – Chiều dài rễ One-Way Analysis of Variance -Data: TN5DRE._GT Level codes: TN5DRE.NT Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 1976.2044 658.73480 96.248 0000 Within groups 848.6706 124 6.84412 -Total (corrected) 2824.8750 127 missing value(s) have been excluded Table of means for TN5DRE._GT by TN5DRE.NT -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean -1 24 14.458333 4339704 5340146 13.710780 15.205887 43 15.069767 3711575 3989555 14.511280 15.628255 51 11.627451 4409978 3663310 11.114633 12.140269 10 000000 0000000 8272918 -1.158105 1.158105 -Total 128 12.406250 2312351 2312351 12.082550 12.729950 Multiple range analysis for TN5DRE._GT by TN5DRE.NT -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -4 10 000000 X 51 11.627451 X 24 14.458333 X 43 15.069767 X -contrast difference limits - -0.61143 1.31966 - 2.83088 1.28204 * - 14.4583 1.94938 * - 3.44232 1.07228 * - 15.0698 1.81830 * - 11.6275 1.79119 * -* denotes a statistically significant difference ... 2.1: Cây dầu mè (Jatropha curcas L.) 16 Hình 2.2: Lá hoa dầu mè 18 Hình 2.3: Hoa, hạt dầu mè 18 Hình 2.4: Các sản xuất dầu thực vật 22 Hình 4.2: Chồi dầu mè nảy... Các sản xuất dầu thực vật Cây đỗ tƣơng Cây dầu cọ Cây hƣớng dƣơng Cây cải dầu 22 Cây dầu mè so với mẻ, chƣa đƣợc biết nhiều đến Nhƣng tính phƣơng diện sản xuất dầu sinh học dầu mè cho hiệu kinh... để nuôi cấy in vitro dầu mè o Khảo sát ảnh hƣởng BA đến q trình ni cấy tạo chồi dầu mè in vitro o Khảo sát ảnh hƣởng BA IBA tạo chồi dầu mè in vitro o Khảo sát trình tái sinh cụm chồi dầu mè

Ngày đăng: 03/09/2013, 10:00

HÌNH ẢNH LIÊN QUAN

Sơ đồ xử lý mẫu thực sinh: - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Sơ đồ x ử lý mẫu thực sinh: (Trang 20)
Hình 2.1: Cây dầu mè (Jatropha curcas L.) - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Hình 2.1 Cây dầu mè (Jatropha curcas L.) (Trang 27)
Hình 2.1: Cây dầu mè (Jatropha curcas L.) - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Hình 2.1 Cây dầu mè (Jatropha curcas L.) (Trang 27)
Hình 2.2: Lá và hoa cây dầu mè - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Hình 2.2 Lá và hoa cây dầu mè (Trang 29)
Hình 2.3: Hoa, quả và hạt cây dầu mè 2.2.2.2.   Sinh thái  - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Hình 2.3 Hoa, quả và hạt cây dầu mè 2.2.2.2. Sinh thái (Trang 29)
Hình 2.4: Các cây sản xuất dầu thực vật - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Hình 2.4 Các cây sản xuất dầu thực vật (Trang 32)
Bảng 2.1: Năng suất dầu của cây dầu mè - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Bảng 2.1 Năng suất dầu của cây dầu mè (Trang 32)
Hình 2.4: Các cây sản xuất dầu thực vật - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Hình 2.4 Các cây sản xuất dầu thực vật (Trang 32)
Bảng 2.1: Năng suất dầu của cây dầu mè - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Bảng 2.1 Năng suất dầu của cây dầu mè (Trang 32)
Bảng 3.1: Ảnh hƣởng của nồng độ NaOCl và thời gian xử lý vô trùng mẫu - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Bảng 3.1 Ảnh hƣởng của nồng độ NaOCl và thời gian xử lý vô trùng mẫu (Trang 40)
Bảng 3.1: Ảnh hưởng của nồng độ NaOCl và thời gian xử lý vô trùng mẫu - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Bảng 3.1 Ảnh hưởng của nồng độ NaOCl và thời gian xử lý vô trùng mẫu (Trang 40)
Bảng 3.3: Ảnh hƣởng của nồng độ BA đến khả năng tạo cụm chồi in vitro  cây dầu mè  - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Bảng 3.3 Ảnh hƣởng của nồng độ BA đến khả năng tạo cụm chồi in vitro cây dầu mè (Trang 42)
Bảng 3.3: Ảnh hưởng của nồng độ BA đến khả năng tạo cụm chồi in - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Bảng 3.3 Ảnh hưởng của nồng độ BA đến khả năng tạo cụm chồi in (Trang 42)
Bảng 3.4: Ảnh hƣởng của BA và IBA đến sự tạo chồi của cây dầu mè - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Bảng 3.4 Ảnh hƣởng của BA và IBA đến sự tạo chồi của cây dầu mè (Trang 43)
Bảng 4.1: Ảnh hƣởng của nồng độ NaOCl và thời gian khử mẫu đến tỉ lệ mẫu hạt vô trùng  - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Bảng 4.1 Ảnh hƣởng của nồng độ NaOCl và thời gian khử mẫu đến tỉ lệ mẫu hạt vô trùng (Trang 46)
Theo kết quả trong bảng 4.2 cho thấy ở cả 3 nồng độ Natri hypochlorit 10 %, 15 % và 20 % tỉ lệ mẫu hạt vô trùng tăng tỉ lệ thuận với thời gian khử mẫu - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
heo kết quả trong bảng 4.2 cho thấy ở cả 3 nồng độ Natri hypochlorit 10 %, 15 % và 20 % tỉ lệ mẫu hạt vô trùng tăng tỉ lệ thuận với thời gian khử mẫu (Trang 46)
Bảng 4.1: Ảnh hưởng của nồng độ NaOCl và thời gian khử mẫu đến tỉ lệ mẫu  hạt vô trùng - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Bảng 4.1 Ảnh hưởng của nồng độ NaOCl và thời gian khử mẫu đến tỉ lệ mẫu hạt vô trùng (Trang 46)
Bảng 4.2: Ảnh hƣởng của nồng độ NaOCl và thời gian khử mẫu đến tỉ lệ mẫu chồi vô trùng  - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Bảng 4.2 Ảnh hƣởng của nồng độ NaOCl và thời gian khử mẫu đến tỉ lệ mẫu chồi vô trùng (Trang 47)
4.1.2. Vô trùng mẫu chồi - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
4.1.2. Vô trùng mẫu chồi (Trang 47)
Bảng 4.2: Ảnh hưởng của nồng độ NaOCl và thời gian khử mẫu đến tỉ lệ mẫu  chồi vô trùng - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Bảng 4.2 Ảnh hưởng của nồng độ NaOCl và thời gian khử mẫu đến tỉ lệ mẫu chồi vô trùng (Trang 47)
Hình 4.2: Chồi cây dầu mè nẩy từ các hạt vô trùng - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Hình 4.2 Chồi cây dầu mè nẩy từ các hạt vô trùng (Trang 49)
Hình 4.1: Mẫu thực sinh cây dầu mè đƣợc vô trùng phát sinh chồi - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Hình 4.1 Mẫu thực sinh cây dầu mè đƣợc vô trùng phát sinh chồi (Trang 49)
Hình 4.1: Mẫu thực sinh cây dầu mè đƣợc vô trùng phát sinh chồi - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Hình 4.1 Mẫu thực sinh cây dầu mè đƣợc vô trùng phát sinh chồi (Trang 49)
Bảng 4.3: Khảo sát môi trƣờng khoáng cơ bản cho cây dầu mè - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Bảng 4.3 Khảo sát môi trƣờng khoáng cơ bản cho cây dầu mè (Trang 50)
Bảng 4.3: Khảo sát môi trường khoáng cơ bản cho cây dầu mè - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Bảng 4.3 Khảo sát môi trường khoáng cơ bản cho cây dầu mè (Trang 50)
Hình 4.3: Sự phát triển của cây dầu mè trên các môi trƣờng khoáng cơ bản - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Hình 4.3 Sự phát triển của cây dầu mè trên các môi trƣờng khoáng cơ bản (Trang 51)
Hình 4.3: Sự phát triển của cây dầu mè trên các môi trường khoáng cơ bản - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Hình 4.3 Sự phát triển của cây dầu mè trên các môi trường khoáng cơ bản (Trang 51)
4.3. Thí nghiệm 3: Ảnh hƣởng của BA đến sự hình thành chồi của cây dầu mè - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
4.3. Thí nghiệm 3: Ảnh hƣởng của BA đến sự hình thành chồi của cây dầu mè (Trang 52)
Bảng 4.4: Ảnh hưởng của BA đến sự tạo chồi của cây dầu mè - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Bảng 4.4 Ảnh hưởng của BA đến sự tạo chồi của cây dầu mè (Trang 52)
Hình 4.4: Ảnh hƣởng của BA đến sự tạo chồi của cây dầu mè - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Hình 4.4 Ảnh hƣởng của BA đến sự tạo chồi của cây dầu mè (Trang 53)
Hình 4.4: Ảnh hưởng của BA đến sự tạo chồi của cây dầu mè - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Hình 4.4 Ảnh hưởng của BA đến sự tạo chồi của cây dầu mè (Trang 53)
4.4. Thí nghiệm 4: Ảnh hƣởng của BA và IBA đến sự hình thành chồi của cây dầu mè  - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
4.4. Thí nghiệm 4: Ảnh hƣởng của BA và IBA đến sự hình thành chồi của cây dầu mè (Trang 54)
Hình 4.5: Ảnh hƣởng của BA và IBA đến sụ tạo chồi của cây dầu mè - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Hình 4.5 Ảnh hƣởng của BA và IBA đến sụ tạo chồi của cây dầu mè (Trang 55)
Hình 4.5: Ảnh hưởng của BA và IBA đến sụ tạo chồi của cây dầu mè - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Hình 4.5 Ảnh hưởng của BA và IBA đến sụ tạo chồi của cây dầu mè (Trang 55)
Bảng 4.6: Tác động của IBA đến việc tạo rễ cây dầu mè invitro - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Bảng 4.6 Tác động của IBA đến việc tạo rễ cây dầu mè invitro (Trang 56)
Bảng 4.6: Tác động của IBA đến việc tạo rễ cây dầu mè in vitro - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Bảng 4.6 Tác động của IBA đến việc tạo rễ cây dầu mè in vitro (Trang 56)
Hình 4.6: Nuôi cấy tạo rễ cây dầu mè invitro - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Hình 4.6 Nuôi cấy tạo rễ cây dầu mè invitro (Trang 57)
Hình 4.7: cây dầu mè invitro - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Hình 4.7 cây dầu mè invitro (Trang 57)
Hình 4.6: Nuôi cấy tạo rễ cây dầu mè in vitro - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Hình 4.6 Nuôi cấy tạo rễ cây dầu mè in vitro (Trang 57)
Hình 4.7: cây dầu mè in vitro - NUÔI CẤY MÔ CÂY DẦU MÈ (Jatropha curcas L.)
Hình 4.7 cây dầu mè in vitro (Trang 57)

TỪ KHÓA LIÊN QUAN

TRÍCH ĐOẠN

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN

w