PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN MỘT SỐ DÒNG NẤM MEN CÓ KHẢ NĂNG LÊN MEN CỒN VỚI CƠ CHẤT BÃ MÍA Ở CẦN THƠ, HẬU GIANG, BẾN TRE

Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG (do Nghiên cứu sinh thực hiện) PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN MỘT SỐ DỊNG NẤM MEN CĨ KHẢ NĂNG LÊN MEN CỒN VỚI CƠ CHẤT BÃ MÍA Ở CẦN THƠ, HẬU GIANG, BẾN TRE Mã số: TNCS2013-13 Chủ nhiệm đề tài: Ths VÕ VĂN SONG TOÀN Cần Thơ, 3/2014 Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG (do Nghiên cứu sinh thực hiện) PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN MỘT SỐ DỊNG NẤM MEN CĨ KHẢ NĂNG LÊN MEN CỒN VỚI CƠ CHẤT BÃ MÍA Ở CẦN THƠ, HẬU GIANG, BẾN TRE Mã số: TNCS2013-13 Xác nhận trường Đại học Cần Thơ (ký, họ tên, đóng dấu) Cần Thơ, 3/2014 Chủ nhiệm đề tài (ký, họ tên) Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ Danh sách thành viên tham gia nghiên cứu đề tài đơn vị phối hợp stt Họ tên thành viên Ths Võ Văn Song Toàn Bùi Thị Ngọc Hân PGs TS Trần Nhân Dũng Thông tin cá nhân Mã số NCS: 62031004, khóa: 2010 - 2014, chuyên ngành: Vi Sinh Vật MSSV: 3108489 Khóa 36, chuyên ngành Vi Sinh Vật học Viện Trưởng; Cán hướng dẫn Đơn vị Viện NC & PT CNSH Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ MỤC LỤC Trang BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ii TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ ii BÁO CÁO TỔNG KẾT ii ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG ii (do Nghiên cứu sinh thực hiện) ii PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN MỘT SỐ DỊNG NẤM MEN CĨ KHẢ NĂNG LÊN MEN CỒN VỚI CƠ CHẤT BÃ MÍA Ở CẦN THƠ, HẬU GIANG, BẾN TRE ii Mã số: TNCS2013-13 ii Xác nhận trường Đại học Cần Thơ Chủ nhiệm đề tài ii (ký, họ tên, đóng dấu) (ký, họ tên) ii ii ii Cần Thơ, 3/2014 ii Bảng 2: Thành phần hóa học nấm men 10 1.8.1 Địa điểm, thời gian, thiết bị, dụng cụ, hóa chất, nguyên vật liệu 22 i Chủ nhiệm đề tài: Ths Võ Văn Song Toàn Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Ngày sức ép từ khủng hoảng dầu mỏ nhu cầu lượng vấn đề nan giải quốc gia giới Mỹ Brazil thành công việc sản xuất ethanol từ nguồn sinh học bắp mía Điều khích lệ nước khác đầu tư nghiên cứu vào lĩnh vực nhiên liệu sinh học Bên cạnh sản xuất ethanol từ nguồn tinh bột (bắp) đường (mía), ethanol sản xuất từ lignocellulose Lignocellulose loại biomass phổ biến giới Vì sản xuất ethanol từ biomass cụ thể từ nguồn lignocellulose giải pháp thích hợp đặc biệt với quốc gia nông nghiệp Việt Nam Nền nông nghiệp Việt Nam năm tạo lượng lớn phế phẩm nơng nghiệp Trong đó, bã mía loại phụ phẩm có chứa đáng kể hàm lượng cellulose loại lignocellulose khác Theo kết Tổng cục thống kê, năm 2012 nước có khoảng 297,9 nghìn trồng mía với sản lượng nước đạt khoảng 19040,8 nghìn Vì lượng bã mía thải hàng năm lớn, gây nguy ô nhiễm môi trường cao Để tận dụng nguồn bã mía thải năm góp phần giảm thiểu tác động đến mơi trường giải vấn đề lượng, sử dụng bã mía nguồn nguyên liệu đầu vào để sản xuất ethanol hướng đầy tiềm triển vọng vùng Đồng sông Cửu Long Việc nghiên cứu sử dụng phụ phẩm nông nghiệp giàu hợp chất carbonhydrat làm nguyên liệu sản xuất ethanol nhiên liệu có sử dụng trợ giúp vi sinh vật giải pháp đầy hứa hẹn cho việc thay cho nguồn nguyên liệu hóa thạch dần cạn kiệt, giảm thiểu tác động môi trường hướng nghiên cứu dần thu hút quan tâm nhà khoa học nước Trong lên men ethanol sinh học, giai đoan lên men giai đoạn quan trọng Trong nấm men giữ vai trò định q trình lên men Chúng phân bố rộng rãi khắp nơi, đặc biệt diện nhiều đất trồng hoa nhà máy chế biến đường Ngồi ra, chúng xuất trái chín, nhụy hoa, khơng khí nơi sản xuất rượu vang Nấm men lên men ethanol thường phân lập từ trình lên men rượu, bã quả, mật rỉ củ cải đường hay mía đường, Trên bánh Chủ nhiệm đề tài: Ths Võ Văn Song Tồn Viện NC&PT Cơng nghệ Sinh học Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ men sản phẩm hỗn hợp phong phú vi sinh vật, có nấm men Các loài nấm men thường gặp Saccharomyces cerevisiae, Hyphopichia burtonii, Pichia anomada,… số nấm men dại khác Đây nguồn phân lập nấm men cho trình lên men ethanol Do đề tài “Phân lập tuyển chọn nấm men từ men rượu để lên men cồn chất bã mía” tiến hành nhằm để tuyển chọn số dòng nấm men có khả sử dụng chất bã mía để lên men cồn Chủ nhiệm đề tài: Ths Võ Văn Song Tồn Viện NC&PT Cơng nghệ Sinh học Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ 1.2 Giới thiệu bã mía, cellulose, cellulase 1.2.1 Tổng quan bã mía Bã mía lại thức ăn khó tiêu hàm lượng xơ cao hàm lượng lignin (khoảng 20%) lớn nghèo protein trở ngại cho tiêu hóa gia súc nhai lại (Lê Đức Ngoan, 2005) Theo Kamstra et al (1958) tăng lignin với sinh trưởng thực vật làm giảm tỷ lệ tiêu hóa cellulose xuống 30 – 50% lignin bền vững acid mạnh enzyme vi khuẩn Lớp thành tế bào tạo thành chủ yếu từ phức chất lignohemicellulose mà enzyme vi sinh vật cỏ thủy phân vô chậm (Lê Đức Ngoan, 2005) Thực vật trưởng thành số lượng lignin tăng nên mức độ tiêu hóa cellulose giảm (Trần Cừ, 1979) Bảng Thành phần hóa học bã mía (*Nguồn : Lê Đức Ngoan, 2005) 1.2.2 Tổng quan cellulose Cellulose hợp chất bền vững Đó loại polysaccharide cao phân tử, chúng cấu tạo nhiều gốc β-glucose liên kết với nhờ cầu nối β-1,4 glucosid Mỗi phân tử cellulose thường có chứa từ 1400 – 10000 gốc glucose (Nguyễn Lân Dũng, 2007) Cellulose có cấu trúc tính chất đặc biệt Gốc glucose cơng thức cấu tạo cellulose thường tồn dạng ghế bành, không phân bố theo mặt phẳng cố định Chính chúng tạo vững cho cellulose Cellulose bị phá hủy vi sinh vật điều kiện thích hợp (Nguyễn Lân Dũng, 2007) Cellulose thành phần chủ yếu tổ chức tế bào thực vật Trong xác bả thực vật thành phần hữu chiếm tỉ lệ cao cellulose (thay đổi khoảng 50-80% trọng lượng khô) (Nguyễn Lân Dũng, 2007) Chủ nhiệm đề tài: Ths Võ Văn Song Tồn Viện NC&PT Cơng nghệ Sinh học Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ Hình 1: Cấu trúc cellulose (*Nguồn : http://community.h2vn.com/index.php?topic=6652.0, ngày 26/05/2008) 1.2.3 Tổng quan cellulase - Enzyme tham gia phân hủy cellulose phân làm nhóm: + Exocellulase (1,4 β - D- glucan cellobiohydrolase) (EC.3.2.1.91) cắt đầu không khử chuỗi polyme để tạo thành cellobiose, khơng có khả phân hủy polyme dạng kết tinh mà làm thay đổi tính chất hóa lý chúng, giúp cho enzyme endocellulase phân hủy chúng tốt Enzyme có tên khác như: cellobiohydrolase, exocellulase, cellobiosidase avicecellase (Nguyễn Đức Lượng, 2004) + Endoglucanase (1,4 β-D-glucan glucanohydrolase) (EC.3.2.1.4): thủy phân liên kết β-1,4 glucosid vùng vơ định hình cellulose β-D-glucan thành cellodextrin, cellobiose glucose tác đông yếu đến cellulose kết tinh Enzyme có tên khác như: endo 1,4- β-glucanase, C- cellulase Một số nghiên cứu tìm thấy enzyme Clostridium thermocellum, cellulomonas fimi VSV khác (Nguyễn Đức Lượng, 2004) + β-D glucoside glucohydrolase (EC.3.2.1.21) : phân hủy gốc đường đôi cellobiose thành glucose, khơng có khả phân hủy cellulose ngun thủy Các tên gọi khác : β- glucosidase (Nguyễn Đức Lượng, 2004) - Cơ chế tác động cellulase Trong thiên nhiên, thủy phân cellulose có tham gia tất loại enzyme cellulase như: endoglucanase, exoglucanase β-glucosidase Từ nghiên cứu nhiều tác giả đưa kết luận chung enzyme cellulase thay phiên phân hủy cellulose để tạo sản phẩm cuối glucose Có nhiều cách trình bày khác Chủ nhiệm đề tài: Ths Võ Văn Song Tồn Viện NC&PT Cơng nghệ Sinh học Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ nhau, cách trình bày chế tác động cellulase Erikson đưa nhiều người công nhận Hình Cơ chế tác động enzyme cellulase Các lồi vi sinh vật có khả sinh tổng hợp cellulase điều kiện tự nhiên thường bị ảnh hưởng yếu tố ngoại cảnh nên có lồi phát triển mạnh, có lồi phát triển yếu Vì vậy, việc phân hủy cellulose tự nhiên tiến hành không đồng bộ, xảy chậm 1.3 Sự sinh trưởng vi khuẩn điều kiện nuôi cấy tĩnh Chủ nhiệm đề tài: Ths Võ Văn Song Toàn Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ Sự phân cắt vi khuẩn trải qua giai đoạn, giai đoạn chậm, giai đoạn log, giai đoạn quân bình giai đoạn chết * Đường tăng trưởng vi khuẩn Đường tăng trưởng vi khuẩn đường biểu diễn gia tăng mật số vi khuẩn mẻ cấy theo thời gian Hình Đường tăng trưởng tập đoàn vi khuẩn (a) Giai đoạn chậm, (b) giai đoạn log, (c) giai đoạn quân bình, (d) giai đoạn chết (*Nguồn: Nguyễn Hữu Hiệp, 2007) • Giai đoạn chậm Giai đoạn chậm giải thích chuyển vi khuẩn sang môi trường nuôi cấy vi khuẩn thiếu enzyme cần thiết để sử dụng hợp chất môi trường nên chúng cần có thời gian để tổng hợp enzyme thích hợp để sử dụng hợp chất Độ dốc đường biểu diễn tăng trưởng vi khuẩn giai đoạn chậm nhỏ Giai đoạn chậm không xảy ta chuyển vi khuẩn sang mơi trường có thành phần thức ăn giống mơi trường cũ (Nguyễn Hữu Hiệp, 2007) • Giai đoạn log Khi vi khuẩn thích nghi với mơi trường nuôi chúng tăng trưởng phân cắt nhanh chóng Đường biểu diễn có độ dốc lớn Đây giai đoạn tăng trưởng mạnh của tế bào mẻ cấy vi khuẩn Cường độ tăng trưởng giai đoạn tùy thuộc vào điều kiện môi trường nhiệt độ, thành phần cấu tạo môi trường đặc tính di truyền tế bào vi khuẩn (Nguyễn Hữu Hiệp, 2007) Chủ nhiệm đề tài: Ths Võ Văn Song Tồn Viện NC&PT Cơng nghệ Sinh học Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ Phương pháp chuẩn độ Kali dicromat Nguyên tắc: Ethanol oxy hoá thành ethanoic acid cách nung nóng với lượng dư acid hóa dung dịch kali dicromat Nếu vừa đủ hoắc thiếu đicromat dung dịch có màu xanh Cr3+ Nếu thừa đicromat dung dịch có màu xanh lơ 3C2H5OH + 2Cr2O72- + 16H+ → 3CH3COOH + 4Cr3+ + 11H2O KI thêm phản ứng với K2Cr2O7 dư tạo Iod: Cr2O72- + 14H+ + 6I- → 2Cr3+ + 7H2O + 3I2 Iod sản xuất sau chuẩn độ dung dịch natri thiosunfat chuẩn I2 + 2S2O32- → 2I- + S4O62- Chất thị sử dụng chuẩn độ dung dịch tinh bột 1% Phương pháp xác định lượng đường khử (Sadasivam, Manickam, 1996) - Dựng đường chuẩn: Chuẩn bị dãy nồng độ Glucose chuẩn từ 0-1 mM Cho 150μl dung dịch đường vào tuýp 1.5 mL Thêm 150μl thuốc thử đồng Đun cách thủy 100oC 10 phút Để nguội thêm 150μl thuốc thử Arseno-molybdate mL nước cất Ủ 20 phút đo OD bước sóng 520 nm - Chuẩn bị mẫu: Chuẩn bị tương tự với đường chuẩn Thay dung dịch đường glucose dịch mẫu thí nghiệm Có thể pha lỗng mẫu tùy điều kiện Hình1 : Đường chuẩn glucose (mM) Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ Khảo sát hàm lượng vật chất khơ (DM) bã mía Ngun tắc : Sấy khô mẫu 70oC cho lượng nước phần lại chất khơ hồn tồn mẫu Tiến hành : - Mẫu thí nghiệm lăp lại lần - Sấy gram bột bã mía nghiền mịn 70oC 120 phút Lấy mẫu để nguội bình hút ẩm đem cân Tiếp tục sấy mẫu thêm khoảng lấy để nguội bình hút ẩm đem cân lại Nếu trọng lượng lần không chênh lệch Vật chất khơ tính theo cơng thức : X= m1*100/m0 (% m/m) Trong : m1 : khối lượng mẫu sau sấy 70oC (g) m0 : khối lượng mẫu đem phân tích (g) X: phần trăm vật chất khơ có bã mía (% m/m) Khảo sát hàm lượng xơ thơ bã mía (Van Soest, 1979) Nguyên tắc: Acid sulfuric phân giải chất hòa tan acid cacbohydrat thành đường đơn phần protein hòa tan Bazơ phân giải chất béo hòa tan tồn protid Ngồi acid bazơ hòa tan phần chất khống Sau xử lý đem nung nhiệt độ cao trọng lượng khối lượng xơ thô Tiến hành: - Bột bã mía đun hồn lưu với H 2SO4 1,25% (m/v) NaOH 1,25% (m/v) - Tro hóa mẫu bã mía sau phân tích 550oC Hàm lượng xơ thơ tính theo công thức sau: X = M1/M0 *100 (% m/m) Trong đó: X: Phần trăm xơ thơ có mẫu (% m/m) M1: Trọng lượng mẫu sau phân tích (g) M0: Trọng lượng mẫu ban đầu (g) Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ PHỤ LỤC 2: KẾT QUẢ THÍ NGHIỆM TN2: Kết đường kính vòng tròn thủy phân bã mía dòng nấm men Nấm men H1 H2 H8 H4 H14 H3 H11 H17 H18 H15 H6 H7 H12 H9 H5 H16 H10 H13 Đường kính vòng tròn thủy phân (mm) 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 3,33 20,67 22,33 24,67 27,00 28,67 29,33 29,33 30,33 34,67 Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ Thí nghiệm 5: Bảng theo dõi thể tích khí bình lên men (ml) 24 48 NT1 0,00 0,00 NT2 0,00 0,00 NT3 2,33 8,00 72 0,00 0,00 8,33 96 0,00 0,00 9,33 120 0,00 0,00 11,67 144 0,00 0,00 168 0,00 0,00 NT4 5,33 11,17 18,6 20,0 22,6 NT5 2,50 2,50 3,17 11,00 11,67 15,6 22,6 17,6 23,6 15,5 7 13,6 NT6 1,33 7,33 10,0 11,67 12,6 17,33 18,33 NT7 1,17 2,33 NT8 7,33 8,33 NT9 0,67 2,50 NT10 2,00 2,33 NT11 15,67 18,00 NT12 14,83 19,00 NT13 13,67 19,00 NT14 14,00 20,00 6,33 11,67 3,17 3,67 21,00 21,50 20,67 23,00 8,00 14,83 7,00 9,00 28,00 24,67 21,67 26,33 15,33 19,33 9,00 14,67 29,67 27,33 28,67 30,33 17,6 21,5 21,6 24,6 8,67 17,00 31,00 28,33 30,67 37,33 7 14,33 19,67 33,00 29,33 32,00 44,00 Thí nghiệm 5: Các tiêu theo dõi sau lên men Chỉ tiêu NT pH Đường khử (g/l) Độ cồn Ethanol ((g/l) DM giảm (%) CF giảm (%) NT1 4,89 0,08 0,00 0,24 3,48 11,14 NT2 5,68 0,28 0,00 0,48 4,55 11,35 1,75 5,40 12,86 14,08 14,64 16,71 17,19 18,33 18,69 19,60 20,62 21,27 22,45 27,57 NT3 4,58 0,301 2,17 NT4 4,23 0,421 2,00 2,04 5,40 NT5 NT6 NT7 NT8 NT9 NT10 NT11 NT12 NT13 NT14 4,69 4,76 4,64 4,73 4,96 3,75 4,41 4,63 4,71 4,37 0,426 0,448 0,342 0,417 0,371 0,409 0,384 0,433 0,460 0,483 2,00 3,67 2,00 1,93 2,50 2,83 3,00 3,50 3,73 4,33 2,09 2,2 1,67 1,85 2,04 2,15 2,06 2,13 2,19 2,2 6,56 7,91 4,32 4,66 5,46 6,64 6,44 6,45 8,39 9,62 Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ PHỤ LỤC 3: KẾT QUẢ PHÂN TÍCH THỐNG KÊ Bảng: Kết phân tích thống kê đường kính vòng tròn phân giải bã mía Summary Statistics for DKTP NM H1 H10 H11 H12 H13 H14 H15 H16 H17 H18 H2 H3 H4 H5 H6 H7 H8 H9 Count Average Variance 3 3 3 3 3 3 3 3 3 0,0 30,3333 0,0 27,0 34,6667 0,0 20,6667 29,3333 0,0 3,33333 0,0 0,0 0,0 29,3333 22,3333 24,6667 0,0 28,6667 0,0 6,33333 0,0 1,0 1,33333 0,0 1,33333 1,33333 0,0 0,333333 0,0 0,0 0,0 1,33333 0,333333 1,33333 0,0 1,33333 Standard deviation 0,0 2,51661 0,0 1,0 1,1547 0,0 1,1547 1,1547 0,0 0,57735 0,0 0,0 0,0 1,1547 0,57735 1,1547 0,0 1,1547 Coeff, of variation % 8,29652% % 3,7037% 3,33087% % 5,58726% 3,93648% % 17,3205% % % % 3,93648% 2,58515% 4,68122% % 4,02803% Standard error 0,0 1,45297 0,0 0,57735 0,666667 0,0 0,666667 0,666667 0,0 0,333333 0,0 0,0 0,0 0,666667 0,333333 0,666667 0,0 0,666667 Range ANOVA Table for DKTP by NM Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 10372,5 32,0 10404,5 Df 17 36 53 Mean Square 610,149 0,888889 F-Ratio 686,42 Multiple Range Tests for DKTP by NM Method: 95,0 percent LSD NM Count Mean H1 0,0 H2 0,0 H8 0,0 H4 0,0 H14 0,0 H3 0,0 H11 0,0 H17 0,0 H18 3,33333 H15 20,6667 H6 22,3333 H7 24,6667 H12 27,0 H9 28,6667 H5 29,3333 H16 29,3333 H10 30,3333 H13 34,6667 Homogeneous Groups X X X X X X X X X X X X X X XX XX X X P-Value 0,0000 0,0 5,0 0,0 2,0 2,0 0,0 2,0 2,0 0,0 1,0 0,0 0,0 0,0 2,0 1,0 2,0 0,0 2,0 Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ TN4: Kết phân tích thống kê khả lên men ống Durham đường D-Glucose Summary Statistics CHIEU CAO NM H1 Count Average 3,33333 Variance 0,333333 Standard deviation Coeff, of variation Standard error Range 0,57735 17,3205% 0,333333 1,0 H2 30,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 H3 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 H4 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 H5 5,33333 0,333333 0,57735 10,8253% 0,333333 1,0 H6 30,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 H7 10,3333 0,33333 1,52753 14,7825% 0,881917 3,0 H8 1,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 H9 30,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 H10 30,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 H11 6,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 H12 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 H13 28,6667 1,33333 1,1547 4,02803% 0,666667 2,0 H14 30,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 H15 2,33333 0,333333 0,57735 24,7436% 0,333333 1,0 H16 3,33333 0,333333 0,57735 17,3205% 0,333333 1,0 H17 12,0 9,0 3,0 25,0% 1,73205 6,0 H18 1,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 ANOVA Table for CHIEU CAO by NM Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 8687,04 17 511,002 657,00 0,0000 Within groups 28,0 36 0,777778 Total (Corr,) 8715,04 53 Multiple Range Tests for CHIEUCAO by NM Method: 95,0 percent LSD NM H12 Count Mean 0,0 Homogeneous Groups X H4 0,0 X H3 0,0 X H8 1,0 XX H18 1,0 XX H15 2,33333 XX H16 3,33333 X BT1 3,33333 X Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ H5 5,33333 X H11 6,0 X H7 10,3333 X H17 12,0 X H13 28,6667 X H14 30,0 X H6 30,0 X H10 30,0 X H9 30,0 X H2 30,0 X TN4: Kết phân tích thống kê khả lên men rong ống Durham đường D-Mannose: Summary Statistics for CHIEUCAO NM H1 H2 H3 H4 H5 H6 H7 H8 H9 H10 H11 H12 H13 H14 H15 H16 H17 H18 H1 Count 3 3 3 3 3 3 3 3 3 54 Average 2,66667 29,6667 0,0 3,33333 12,6667 30,0 8,0 0,0 25,6667 17,3333 11,0 0,0 30,0 17,6667 6,33333 2,66667 11,3333 6,0 11,9074 Variance Standard deviation Coeff, of variation Standard error Range 0,333333 0,57735 21,6506% 0,333333 1,0 0,333333 0,57735 1,94612% 0,333333 1,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,333333 0,57735 17,3205% 0,333333 1,0 0,333333 0,57735 4,55803% 0,333333 1,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,333333 0,57735 2,24942% 0,333333 1,0 0,333333 0,57735 3,33087% 0,333333 1,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 0,333333 0,57735 3,26802% 0,333333 1,0 0,333333 0,57735 9,11606% 0,333333 1,0 0,333333 0,57735 21,6506% 0,333333 1,0 0,333333 0,57735 5,09427% 0,333333 1,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 111,897 10,5781 88,8366% 1,4395 30,0 ANOVA Table for CHIEUCAO by NM Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 5923,87 6,66667 5930,54 Df Mean Square 17 348,463 36 0,185185 53 Multiple Range Tests for CHIEUCAO by NM Method: 95,0 percent LSD NM H3 H12 H8 BT1 H16 H4 H18 H15 H7 H11 Count Mean 3 3 3 3 3 0,0 0,0 0,0 2,66667 2,66667 3,33333 6,0 6,33333 8,0 11,0 Homogeneous Groups X X X X X X X X X X F-Ratio 1881,70 P-Value 0,0000 Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 H17 H5 H10 H14 H9 H2 H13 H6 3 3 3 3 Trường Đại học Cần Thơ 11,3333 12,6667 17,3333 17,6667 25,6667 29,6667 30,0 30,0 X X X X X X X X TN4: Kết phân tích thống kê khả lên men Durham đường D-Galactose Summary Statistics for CHIEUCAO NM H1 H2 H3 H4 H5 H6 H7 H8 H9 H10 H11 H12 H13 H14 H15 H16 H17 H18 Count 3 3 3 3 3 3 3 3 3 Average 0,0 12,6667 0,0 0,0 1,0 25,0 0,0 0,0 21,3333 28,3333 0,0 0,0 30,0 11,0 0,0 0,0 0,0 0,0 Variance 0,0 0,333333 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,333333 2,33333 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 Standard deviation Coeff, of variation Standard error Range 0,0 % 0,0 0,0 0,57735 4,55803% 0,333333 1,0 0,0 % 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,57735 2,70633% 0,333333 1,0 1,52753 5,39127% 0,881917 3,0 0,0 % 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 ANOVA Table for CHIEUCAO by NM Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 6408,15 17 376,95 2261,70 0,0000 Within groups 6,0 36 0,166667 Total (Corr,) 6414,15 53 Multiple Range Tests for CHIEUCAO by NM Method: 95,0 percent LSD NM Count Mean H3 0,0 Homogeneous Groups X H7 0,0 X H18 0,0 X H15 0,0 X H1 0,0 X Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ H17 0,0 X H8 0,0 X H4 0,0 X H16 0,0 X H11 0,0 X H12 0,0 X H5 1,0 X H14 11,0 X H2 12,6667 X H9 21,3333 X H6 25,0 X H10 28,3333 X H13 30,0 X Bảng: Kết phân tích thống kê thể tích khí bình lên men sau 168 Summary Statistics for THE TICH KHI NT Count Average Median Variance NT1 0,0 0,0 0,0 NT10 19,6667 20,0 0,333333 NT11 33,0 33,0 1,0 NT12 29,3333 29,0 2,33333 NT13 32,0 33,0 3,0 NT14 44,0 43,0 3,0 NT2 0,0 0,0 0,0 NT3 17,6667 18,0 0,333333 NT4 23,6667 24,0 0,333333 NT5 15,6667 16,0 0,333333 NT6 18,3333 18,0 0,333333 NT7 21,6667 22,0 0,333333 NT8 24,6667 25,0 0,333333 NT9 14,3333 14,0 0,333333 ANOVA Table for THE TICH KHI by NT Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 5578,0 24,0 5602,0 Standard deviation 0,0 0,57735 1,0 1,52753 1,73205 1,73205 0,0 0,57735 0,57735 0,57735 0,57735 0,57735 0,57735 0,57735 Df 13 28 41 Coeff, of variation % 2,93568% 3,0303% 5,20747% 5,41266% 3,93648% % 3,26802% 2,43951% 3,68521% 3,14918% 2,66469% 2,34061% 4,02803% Mean Square 429,077 0,857143 Multiple Range Tests for THE TICH KHI by NT Method: 95,0 percent LSD F-Ratio 500,59 Standard error 0,0 0,333333 0,57735 0,881917 1,0 1,0 0,0 0,333333 0,333333 0,333333 0,333333 0,333333 0,333333 0,333333 Range 0,0 1,0 2,0 3,0 3,0 3,0 0,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 P-Value 0,0000 Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ NT Count Mean Homogeneous Groups NT1 0,0 X NT2 0,0 X NT9 14,3333 X NT5 15,6667 X NT3 17,6667 X NT6 18,3333 XX NT10 19,6667 X NT7 21,6667 X NT4 23,6667 X NT8 24,6667 X NT12 29,3333 X NT13 32,0 X NT11 33,0 X NT14 44,0 X Bảng: Kết phân tích thống kê hàm lượng đường đường khử Summary Statistics for DUONG KHU NT Count Average Median Variance NT1 NT10 NT11 NT12 NT13 NT14 NT2 NT3 NT4 NT5 NT6 NT7 NT8 NT9 3 3 3 3 3 3 3 0,085 0,416 0,383667 0,432667 0,459667 0,483 0,301 0,300667 0,420667 0,426 0,449667 0,342 0,417333 0,371 0,084 0,421 0,355 0,409 0,46 0,49 0,302 0,303 0,43 0,425 0,439 0,346 0,466 0,366 0,000021 0,000775 0,00321733 0,00198033 0,0000423333 0,001929 0,000003 0,000186333 0,000354333 0,001057 0,000614333 0,000301 0,00725233 0,000525 Standard deviation 0,00458258 0,0278388 0,0567215 0,0445009 0,00650641 0,0439204 0,00173205 0,0136504 0,0188237 0,0325115 0,0247857 0,0173494 0,0851606 0,0229129 Coeff, of variation 5,39127% 6,69202% 14,7841% 10,2853% 1,41546% 9,09325% 0,575432% 4,54004% 4,47474% 7,63182% 5,51203% 5,07291% 20,4059% 6,17598% Standard error 0,00264575 0,0160728 0,0327482 0,0256926 0,00375648 0,0253574 0,001 0,00788106 0,0108679 0,0187705 0,0143101 0,0100167 0,0491675 0,0132288 ANOVA Table for DUONG KHU by NT Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 0,396207 0,0365167 0,432724 Df 13 28 41 Mean Square 0,0304775 0,00130417 F-Ratio 23,37 Multiple Range Tests for DUONG KHU by NT Method: 95,0 percent LSD NT NT1 NT3 Count Mean Homogeneous Groups 0,085 X 0,300667 X P-Value 0,0000 Range 0,009 0,055 0,102 0,079 0,013 0,087 0,003 0,027 0,034 0,065 0,046 0,034 0,148 0,045 Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 NT2 NT7 NT9 NT11 NT10 NT8 NT4 NT5 NT12 NT6 NT13 NT14 3 3 3 3 3 3 Trường Đại học Cần Thơ 0,301 0,342 0,371 0,383667 0,416 0,417333 0,420667 0,426 0,432667 0,449667 0,459667 0,483 X XX XX XXX XXX XXX XXX XXXX XXX XX XX X Bảng: Kết phân tích thống kê độ cồn Summary Statistics for DO CON NT NT1 NT10 NT11 NT12 NT13 NT14 NT2 NT3 NT4 NT5 NT6 NT7 NT8 NT9 Count Average Median 3 3 3 3 3 3 3 0,0 2,83333 3,0 3,5 3,73333 4,33333 0,0 2,16667 2,0 2,0 3,66667 2,0 1,93333 2,5 0,0 3,0 3,0 3,5 4,0 4,0 0,0 2,0 2,0 2,0 4,0 2,0 2,0 2,5 Variance 0,0 0,0833333 0,25 0,25 0,213333 0,333333 0,0 0,0833333 0,0 0,0 0,333333 0,0 0,0133333 0,0 Standard deviation 0,0 0,288675 0,5 0,5 0,46188 0,57735 0,0 0,288675 0,0 0,0 0,57735 0,0 0,11547 0,0 Coeff, of variation % 10,1885% 16,6667% 14,2857% 12,3718% 13,3235% % 13,3235% 0,0% 0,0% 15,7459% 0,0% 5,97259% 0,0% Standard error 0,0 0,166667 0,288675 0,288675 0,266667 0,333333 0,0 0,166667 0,0 0,0 0,333333 0,0 0,0666667 0,0 ANOVA Table for DO CON by NT Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 63,479 3,12 66,599 Df Mean Square 13 4,883 28 0,111429 41 F-Ratio 43,82 Multiple Range Tests for DO CON by NT Method: 95,0 percent LSD NT NT1 NT2 NT8 NT7 Count Mean Homogeneous Groups 0,0 X 0,0 X 1,93333 X 2,0 XX P-Value 0,0000 Range 0,0 0,5 1,0 1,0 0,8 1,0 0,0 0,5 0,0 0,0 1,0 0,0 0,2 0,0 Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 NT5 NT4 NT3 NT9 NT10 NT11 NT12 NT6 NT13 NT14 3 3 3 3 3 Trường Đại học Cần Thơ 2,0 XX 2,0 XX 2,16667 XX 2,5 XX 2,83333 X 3,0 XX 3,5 XX 3,66667 X 3,73333 X 4,33333 X Bảng: Kết phân tích thống kê hàm lượng ethanol Summary Statistics for ETHANOL NT NT1 NT10 NT11 NT12 NT13 NT14 NT2 NT3 NT4 NT5 NT6 NT7 NT8 NT9 Count Average Median 3 3 3 3 3 3 3 0,24 2,14333 2,06 2,13333 2,19 2,22667 0,48 1,75 2,07 2,075 2,1575 1,67333 1,85333 2,04333 0,25 2,14 2,07 2,14 2,2 2,23 0,48 1,74 2,07 2,085 2,2 1,68 1,85 2,04 Variance 0,0003 0,0000333333 0,0003 0,000133333 0,0003 0,0000333333 0,0009 0,0003 0,0003 0,000566667 0,008425 0,000133333 0,0000333333 0,000633333 Standard deviation 0,0173205 0,0057735 0,0173205 0,011547 0,0173205 0,0057735 0,03 0,0173205 0,0173205 0,0238048 0,0917878 0,011547 0,0057735 0,0251661 Coeff, of variation 7,21688% 0,26937% 0,840801% 0,541266% 0,790891% 0,259289% 6,25% 0,989743% 0,790412% 1,14722% 4,25436% 0,69006% 0,31152% 1,23162% Standard error 0,01 0,00333333 0,01 0,00666667 0,01 0,00333333 0,0173205 0,01 0,01 0,0119024 0,0458939 0,00666667 0,00333333 0,0145297 ANOVA Table for ETHANOL by NT Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 15,5475 0,033175 15,5806 Df Mean Square 13 1,19596 28 0,00118482 41 F-Ratio 1009,40 Multiple Range Tests for ETHANOL by NT Method: 95,0 percent LSD NT Count Mean Homogeneous Groups NT1 0,24 X NT2 0,48 X NT7 1,67333 X NT3 1,75 X NT8 1,85333 X NT9 2,04333 X NT11 2,06 X P-Value 0,0000 Range 0,03 0,01 0,03 0,02 0,03 0,01 0,06 0,03 0,03 0,05 0,19 0,02 0,01 0,05 Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 NT4 NT5 NT12 NT10 NT6 NT13 NT14 3 3 3 Trường Đại học Cần Thơ 2,07 2,075 2,13333 2,14333 2,1575 2,19 2,22667 XX X XX XX X XX X Bảng: Kết phân tích thống kê lượng DM giảm Summary Statistics for DM GIAM NT Count NT1 NT10 NT11 NT12 NT13 NT14 NT2 NT3 NT4 NT5 NT6 NT7 NT8 NT9 3 3 3 3 3 3 3 Average Median Variance 3,48333 6,64333 6,44333 6,44667 8,39 9,62333 4,55333 5,4 5,45 6,32 7,22 4,32 4,65333 5,46667 0,0610333 0,0881333 0,134033 0,0526333 0,0673 0,121433 0,0441333 0,0907 0,0923 0,239267 1,9428 0,0756 0,127433 0,0394333 3,52 6,57 6,34 6,34 8,31 9,68 4,56 5,33 5,45 6,535 7,79 4,26 4,61 5,4 Standard deviation 0,247049 0,296873 0,366106 0,22942 0,259422 0,348473 0,210079 0,301164 0,301614 0,489149 1,39384 0,274955 0,356978 0,198578 Coeff, of variation 7,09232% 4,46873% 5,68193% 3,55873% 3,09204% 3,62112% 4,61375% 5,57712% 5,68126% 7,7397% 19,3053% 6,36469% 7,67145% 3,63253% Standard error 0,142634 0,171399 0,211371 0,132455 0,149778 0,201191 0,121289 0,173877 0,12513 0,244574 0,696922 0,158745 0,206101 0,114649 ANOVA Table for DM GIAM by NT Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 106,379 8,34993 114,729 Df Mean Square 13 8,18303 28 0,298212 41 F-Ratio 27,44 Multiple Range Tests for DM GIAM by NT Method: 95,0 percent LSD NT Count Mean NT1 NT2 NT7 NT8 NT9 NT3 Homogeneous Groups 3,48333 X 4,55333 X 4,63 X 4,73667 X 5,34333 X 5,4 X P-Value 0,0000 Range 0,49 0,58 0,71 0,42 0,5 0,69 0,42 0,59 0,41 1,03 3,0 0,54 0,71 0,38 Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ NT4 5,45 XX NT5 6,32 X NT11 6,44333 XX NT12 6,44667 XX NT10 6,64333 XX NT6 7,22 X NT13 8,39 X NT14 9,62333 X Bảng: Kết phân tích thống kê lượng CF giảm Summary Statistics for CF GIAM NT NT1 NT10 NT11 NT12 NT13 NT14 NT2 NT3 NT4 NT5 NT6 NT7 NT8 NT9 Total Count Average Median 3 3 3 3 3 3 3 42 11,1367 17,1867 16,7133 21,2667 22,4467 27,5667 14,0767 18,3267 18,69 20,6233 19,5967 11,3467 12,86 14,6433 17,6057 11,14 17,27 16,65 21,3 22,53 27,51 14,04 18,34 18,71 20,66 19,65 11,34 12,86 14,63 17,765 Standard deviation 0,10504 0,15308 0,221886 0,202073 0,332916 0,20108 0,12897 0,070946 0,131149 0,0723418 0,147422 0,0802081 0,07 0,0321455 4,50047 Coeff, of variation 0,943188% 0,890688% 1,3276% 0,950185% 1,48314% 0,729433% 0,916199% 0,387119% 0,701706% 0,350776% 0,752283% 0,706887% 0,544323% 0,219523% 25,5625% Standard error 0,0606447 0,0883805 0,128106 0,116667 0,192209 0,116094 0,074461 0,0409607 0,0757188 0,0417665 0,0851143 0,0463081 0,0404145 0,0185592 0,694437 ANOVA Table for CF GIAM by NT Source Sum of Squares Between groups 829,714 Within groups 0,708 Total (Corr,) 830,422 Df Mean Square 13 63,8241 28 0,0252857 41 F-Ratio 2524,12 Multiple Range Tests for CF GIAM by NT Method: 95,0 percent LSD NT NT1 NT7 NT8 NT2 Count Mean 11,1367 11,3467 12,86 14,0767 Homogeneous Groups X X X X P-Value 0,0000 Range 0,21 0,27 0,43 0,4 0,65 0,39 0,25 0,14 0,26 0,13 0,28 0,16 0,14 0,06 16,76 Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 NT9 NT11 NT10 NT3 NT4 NT6 NT5 NT12 NT13 NT14 3 3 3 3 3 14,6433 16,7133 17,1867 18,3267 18,69 19,5967 20,6233 21,2667 22,4467 27,5667 Trường Đại học Cần Thơ X X X X X X X X X X