ĐỀ TÀI PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN MỘT SỐ DÒNG NẤM MEN CÓ KHẢ NĂNG LÊN MEN CỒN VỚI CƠ CHẤT BÃ MÍA Ở CẦN THƠ, HẬU GIANG, BẾN TRE

Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG (do Nghiên cứu sinh thực hiện) PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN MỘT SỐ DỊNG NẤM MEN CĨ KHẢ NĂNG LÊN MEN CỒN VỚI CƠ CHẤT BÃ MÍA Ở CẦN THƠ, HẬU GIANG, BẾN TRE Mã số: TNCS2013-13 Chủ nhiệm đề tài: Ths VÕ VĂN SONG TOÀN Cần Thơ, 3/2014 Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP TRƯỜNG (do Nghiên cứu sinh thực hiện) PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN MỘT SỐ DỊNG NẤM MEN CĨ KHẢ NĂNG LÊN MEN CỒN VỚI CƠ CHẤT BÃ MÍA Ở CẦN THƠ, HẬU GIANG, BẾN TRE Mã số: TNCS2013-13 Xác nhận trường Đại học Cần Thơ (ký, họ tên, đóng dấu) Cần Thơ, 3/2014 Chủ nhiệm đề tài (ký, họ tên) Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ Danh sách thành viên tham gia nghiên cứu đề tài đơn vị phối hợp stt Họ tên thành viên Ths Võ Văn Song Toàn Bùi Thị Ngọc Hân PGs TS Trần Nhân Dũng Thông tin cá nhân Mã số NCS: 62031004, khóa: 2010 - 2014, chuyên ngành: Vi Sinh Vật MSSV: 3108489 Khóa 36, chuyên ngành Vi Sinh Vật học Viện Trưởng; Cán hướng dẫn Đơn vị Viện NC & PT CNSH Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ MỤC LỤC Trang DANH SÁCH THÀNH VIÊN THAM GIA NGHIÊN CỨU MỤC LỤC i DANH SÁCH BẢNG iv DANH SÁCH HÌNH v DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT vi TÓM LƯỢC vii THÔNG TIN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU .viii INFORMATION ON RESEARCH RESULTS ix PHẦN MỞ ĐẦU .1 1.1 Đặt vấn đề .1 1.2 Giới thiệu bã mía, cellulose, cellulase .3 1.2.1 Tổng quan bã mía 1.2.2 Tổng quan cellulose 1.2.3 Tổng quan cellulase .4 1.3 Sự sinh trưởng vi khuẩn điều kiện nuôi cấy tĩnh 1.4 Giới thiệu chung men rượu .8 1.4.1 Giới thiệu chung nấm men 1.4.2 Hình dạng kích thước nấm men 1.4.3 Cấu tạo nấm men .10 1.4.4 Sự sinh trưởng phát triển nấm men .11 1.4.5 Vai trò ứng dụng nấm men 12 1.5 Sự lên men ethanlol .13 1.6 Các yếu tố ảnh hưởng đến trình lên men ethanol nấm men 17 1.7 Ethanol sinh học 19 1.7.1 Tình hình nghiên cứu ethanol sinh học nước 19 1.7.2 Tình hình nghiên cứu ethanol sinh học nước 20 i Chủ nhiệm đề tài: Ths Võ Văn Song Tồn Viện NC&PT Cơng nghệ Sinh học Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ 1.8 Phương tiện phương pháp nghiên cứu 23 1.8.1 Địa điểm, thời gian, thiết bị, dụng cụ, hóa chất, nguyên vật liệu 23 1.8.2 Thành phần môi trường nuôi cấy vi sinh vật 24 1.8.3 Phương pháp nghiên cứu 25 1.8.3.1 Thí nghiệm 1: Phân lập dòng nâm men từ men rượu .25 1.8.3.2 Thí nghiệm 2: Khảo hoạt tính exoglucanase nấm men 26 1.8.3.3 Thí nghiệm 3: Khảo hoạt tính endoglucanase nấm men 26 1.8.3.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát khả lên men số loại đường .27 1.8.3.5 Thí nghiệm 5: Khảo sát khả phối hợp lên men dòng nấm men tuyển chọn với dòng vi khuẩn 27 1.8.4 Phương pháp xử lý số liệu 29 PHẦN 2: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 30 CHƯƠNG Kết phân lập dòng nấm men 30 CHƯƠNG Kết hoạt tính exoglucanase endoglucanase nấm men 32 CHƯƠNG Kết lên men 33 3.1 Kết lên men ống Durham 33 3.2 Kết phối hợp lên men có phối hợp nấm men với vi khuẩn .37 3.2.1 Thể tích cột khí 37 3.2.2 Đo pH trước sau lên men .38 3.2.3 Hàm lượng đường khử dịch lên men sau168 .39 3.2.4 Định tính độ cồn cồn kế 40 3.2.5 Chuẩn độ cồn dung dịch sau chưng cất 42 3.2.6 Kết phân tích DM 43 3.2.7 Kết phân tích CF .44 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 46 3.1 Kết luận 46 3.2 Kiến nghị 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO .47 ii Chủ nhiệm đề tài: Ths Võ Văn Song Toàn Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ PHỤ LỤC PHỤ LỤC 1: PHƯƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM PHỤ LỤC 2: KẾT QUẢ THÍ NGHIỆM PHỤ LỤC 3: PHỤ LỤC THỐNG KÊ iii Chủ nhiệm đề tài: Ths Võ Văn Song Tồn Viện NC&PT Cơng nghệ Sinh học Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng 1: Thành phần hóa học bã mía .3 Bảng Thành phần hóa học nấm men 10 Bảng Thành phần môi trường Potato Glucose Agar (PGA) 24 Bảng Thành phần môi trường Potato Glucose (PG) .24 Bảng Thành phần môi trường cải tiến ni vi khuẩn cỏ bò .24 Bảng Thành phần môi trường cải tiến nuôi sinh khối vi khuẩn cỏ bò .25 Bảng Bảng phân bố NT 28 Bảng Đặc điểm dòng nấm men phân lập 31 Bảng Chiều cao cột khí CO2 (mm) ống Durham 34 iv Chủ nhiệm đề tài: Ths Võ Văn Song Tồn Viện NC&PT Cơng nghệ Sinh học Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ DANH SÁCH HÌNH Trang Hình Cấu trúc cellulose .4 Hình Cơ chế tác động enzyme cellulase .5 Hình Đường tăng trưởng tập đồn vi khuẩn .6 Hình Tế bào nấm men .9 Hình Các dạng tế bào nấm men khác quan sát kính hiển vi điện tử 10 Hình Cơ chế lên men glucose nấm men tạo ethanol CO2 16 Hình Đường kính vòng halo chất bã mía dòng nấm men 32 Hình Thể tích khí bình lên men sau 168 38 Hình Hàm lượng đường khử dịch lên men sau 168 39 Hình 10 Độ cồn tạo sau 168 lên men 40 Hình 11 Hàm lượng ethanol tạo sau 168 lên men (g/l) 42 Hình 12 Hàm lượng DM giảm sau 168 lên men 43 Hình 13 Hàm lượng CF giảm sau 168 lên men 44 v Chủ nhiệm đề tài: Ths Võ Văn Song Toàn Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT CF Crude fibre, xơ thô CMC Carboxymethyl cellulose DM Dry matter, khối lượng vật chất khô DC Đối chứng g Gram ml Mililiter mm Milimeter NM Nấm men nm Nanometer NT Nghiệm thức OD Optical density TN Thí nghiệm µl Microliter vi Chủ nhiệm đề tài: Ths Võ Văn Song Tồn Viện NC&PT Cơng nghệ Sinh học Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ TÓM LƯỢC - Đề tài “Phân lập tuyển chọn nấm men từ men rượu để lên men cồn chất bã mía” thực nhằm mục đích tuyển chọn dòng nấm men có khả lên men cồn chất bã mía Kết phân lập 18 dòng nấm men từ viên men khác tỷnh (thành phố) Bến Tre, Cần Thơ, Hậu Giang Các dòng nấm men khảo sát hoạt tính exoglucanase endoglucanase: có 10 dòng (H5, H6, H7, H9, H10, H12, H13, H15, H16, H18) có hoạt tính exoglucanase, hoạt tính endoglucanase chưa thể 18 dòng nấm men phân lập Kết lên men ống Durham 18 dòng nấm men cho thấy bốn dòng nấm men H6, H9, H10, H13 có khả lên men số loại đường D-Glucose, D-Mannose D-Galactose 30 cm, 30 cm, 30 cm, 30 cm (D-Glucose), 30 cm, 25,67 cm, 17, 33 cm, 17,67 cm (D-Mannose) 25 cm, 21,33 cm, 28,33 cm, 30 cm (D-Galactose) Bốn dòng nấm men chọn để đánh giá khả sử dụng bã mía cho q trình lên men cồn, thông qua số tiêu thể tích khí, độ cồn, hàm lượng ethanol, đường khử, hàm lượng DM CF giảm Kết cho thấy dòng nấm men H13 phối hợp với tổ hợp vi khuẩn BM13, BM21 BM49 (lần lượt tương đồng với Achromobacter xylosoxidans BL6, Bacillus subtilis S20 Bacillus subtilis FS32 mức 91, 94 94%) có khả lên men chất bã mía tốt với lượng khí CO, sinh ra, nồng độ cồn, hàm lượng ethanol, đường khử, lượng DM CF giảm 44 ml, 4,33, 2,23 g/ls, 0,483 g/l, 9,62% 27,57% Từ khóa:, Achromobacter xylosoxidans, Bacillus subtilis, bã mía, ethanol, nấm men H13 vii Chủ nhiệm đề tài: Ths Võ Văn Song Tồn Viện NC&PT Cơng nghệ Sinh học Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ PHỤ LỤC 1: CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH Phương pháp pha lỗng Ngun tắc: dịch tế bào sử dụng phòng thí nghiệm có nồng độ cao thường nhiều 106 tế bào/ml Nên cần thiết phải pha loãng Phương pháp chuẩn thực bước pha loãng để giảm nồng độ tế bào từ 10 đến 105 lần đạt vài nghìn tế bào/ml (Nguyễn Đức Lượng 2002) Mẫu pha loãng nước cất hay nước muối sinh lý Khi pha loãng mẫu cần trộn mẫu máy vortex cho Các bước tiến hành: Dùng micropipet hút 100µl mẫu cho vào týp eppendoft chứa 900 µl nước muối sinh lý vơ trùng Sau lắc kỹ độ pha loãng 10 -1 mẫu lắc máy vortex Sau tiếp tục hút 100µl dung dịch độ pha loãng 10 -1 cho vào týp eppendoft thứ có chứa 900µl nước muối sinh lý vơ trùng ta có mẫu độ pha lỗng 10-2 Tiếp tục pha loãng đến nồng độ 10-3 10-4 10-5,… Khi pha loãng dùng ống hút riêng cho nồng độ pha loãng (Nguyễn Thành Đạt, 2000) Phương pháp đếm mật số vi sinh vật buồng đếm hồng cầu Tế bào nấm men xác định phương pháp đếm trực tiếp buồng đếm hồng cầu Burk-Turk Pha loãng dịch huyền phù nấm men nồng độ thích hợp Sau đếm số tế bào buồng đếm, tính số tế bào tổng số/ml theo cơng thức: N=[a/0.016]x103xn (tb/ml) Trong đó: N: số lượng tế bào 1ml a: tổng số tế bào lớn 0.016: thể tích lớn (µl) n: độ pha loãng 103: số chuyển mm3 thành ml ( 1000 mm3=1ml) Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ Phương pháp chuẩn độ Kali dicromat Nguyên tắc: Ethanol oxy hố thành ethanoic acid cách nung nóng với lượng dư acid hóa dung dịch kali dicromat Nếu vừa đủ hoắc thiếu đicromat dung dịch có màu xanh Cr3+ Nếu thừa đicromat dung dịch có màu xanh lơ 3C2H5OH + 2Cr2O72- + 16H+  3CH3COOH + 4Cr3+ + 11H2O KI thêm phản ứng với K2Cr2O7 dư tạo Iod: Cr2O72- + 14H+ + 6I-  2Cr3+ + 7H2O + 3I2 Iod sản xuất sau chuẩn độ dung dịch natri thiosunfat chuẩn I2 + 2S2O32-  2I- + S4O62- Chất thị sử dụng chuẩn độ dung dịch tinh bột 1% Phương pháp xác định lượng đường khử (Sadasivam, Manickam, 1996) - Dựng đường chuẩn: Chuẩn bị dãy nồng độ Glucose chuẩn từ 0-1 mM Cho 150μl dung dịch đường vào tuýp 1.5 mL Thêm 150μl thuốc thử đồng Đun cách thủy 100oC 10 phút Để nguội thêm 150μl thuốc thử Arseno-molybdate mL nước cất Ủ 20 phút đo OD bước sóng 520 nm - Chuẩn bị mẫu: Chuẩn bị tương tự với đường chuẩn Thay dung dịch đường glucose dịch mẫu thí nghiệm Có thể pha lỗng mẫu tùy điều kiện Hình1 : Đường chuẩn glucose (mM) Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ Khảo sát hàm lượng vật chất khô (DM) bã mía Ngun tắc : Sấy khơ mẫu 70oC cho lượng nước phần lại chất khơ hồn tồn mẫu Tiến hành : - Mẫu thí nghiệm lăp lại lần - Sấy gram bột bã mía nghiền mịn 70oC 120 phút Lấy mẫu để nguội bình hút ẩm đem cân Tiếp tục sấy mẫu thêm khoảng lấy để nguội bình hút ẩm đem cân lại Nếu trọng lượng lần không chênh lệch Vật chất khơ tính theo cơng thức : X= m1*100/m0 (% m/m) Trong : m1 : khối lượng mẫu sau sấy 70oC (g) m0 : khối lượng mẫu đem phân tích (g) X: phần trăm vật chất khơ có bã mía (% m/m) Khảo sát hàm lượng xơ thô bã mía (Van Soest, 1979) Nguyên tắc: Acid sulfuric phân giải chất hòa tan acid cacbohydrat thành đường đơn phần protein hòa tan Bazơ phân giải chất béo hòa tan tồn protid Ngồi acid bazơ hòa tan phần chất khoáng Sau xử lý đem nung nhiệt độ cao trọng lượng khối lượng xơ thơ Tiến hành: - Bột bã mía đun hoàn lưu với H 2SO4 1,25% (m/v) NaOH 1,25% (m/v) - Tro hóa mẫu bã mía sau phân tích 550oC Hàm lượng xơ thơ tính theo cơng thức sau: X = M1/M0 *100 (% m/m) Trong đó: X: Phần trăm xơ thơ có mẫu (% m/m) M1: Trọng lượng mẫu sau phân tích (g) Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ M0: Trọng lượng mẫu ban đầu (g) PHỤ LỤC 2: KẾT QUẢ THÍ NGHIỆM TN2: Kết đường kính vòng tròn thủy phân bã mía dòng nấm men Nấm men H1 H2 H8 H4 H14 H3 H11 H17 H18 H15 H6 H7 H12 H9 H5 H16 H10 H13 Đường kính vòng tròn thủy phân (mm) 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 3,33 20,67 22,33 24,67 27,00 28,67 29,33 29,33 30,33 34,67 Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ Thí nghiệm 5: Bảng theo dõi thể tích khí bình lên men (ml) 24 48 NT1 0,00 0,00 NT2 0,00 0,00 NT3 2,33 8,00 72 0,00 0,00 8,33 96 0,00 0,00 9,33 120 0,00 0,00 11,67 144 0,00 0,00 168 0,00 0,00 NT4 5,33 11,17 18,6 20,0 22,6 NT5 2,50 2,50 3,17 11,00 11,67 15,6 22,6 17,6 23,6 15,5 7 13,6 NT6 1,33 7,33 10,0 11,67 12,6 17,33 18,33 NT7 1,17 2,33 NT8 7,33 8,33 NT9 0,67 2,50 NT10 2,00 2,33 NT11 15,67 18,00 NT12 14,83 19,00 NT13 13,67 19,00 NT14 14,00 20,00 6,33 11,67 3,17 3,67 21,00 21,50 20,67 23,00 8,00 14,83 7,00 9,00 28,00 24,67 21,67 26,33 15,33 19,33 9,00 14,67 29,67 27,33 28,67 30,33 17,6 21,5 21,6 24,6 8,67 17,00 31,00 28,33 30,67 37,33 7 14,33 19,67 33,00 29,33 32,00 44,00 Thí nghiệm 5: Các tiêu theo dõi sau lên men Chỉ tiêu pH Đường khử (g/l) Độ cồn Ethanol ((g/l) DM giảm (%) CF giảm (%) NT1 4,89 0,08 0,00 0,24 3,48 11,14 NT2 5,68 0,28 0,00 0,48 4,55 11,35 NT3 4,58 0,301 2,17 1,75 5,40 12,86 NT4 4,23 0,421 2,00 2,04 5,40 14,08 NT5 NT6 NT7 NT8 NT9 NT10 NT11 NT12 NT13 NT14 4,69 4,76 4,64 4,73 4,96 3,75 4,41 4,63 4,71 4,37 0,426 0,448 0,342 0,417 0,371 0,409 0,384 0,433 0,460 0,483 2,00 3,67 2,00 1,93 2,50 2,83 3,00 3,50 3,73 4,33 2,09 2,2 1,67 1,85 2,04 2,15 2,06 2,13 2,19 2,2 6,56 7,91 4,32 4,66 5,46 6,64 6,44 6,45 8,39 9,62 14,64 16,71 17,19 18,33 18,69 19,60 20,62 21,27 22,45 27,57 NT Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ PHỤ LỤC 3: KẾT QUẢ PHÂN TÍCH THỐNG KÊ Bảng: Kết phân tích thống kê đường kính vòng tròn phân giải bã mía Summary Statistics for DKTP NM H1 H10 H11 H12 H13 H14 H15 H16 H17 H18 H2 H3 H4 H5 H6 H7 H8 H9 Count Average Variance 3 3 3 3 3 3 3 3 3 0,0 30,3333 0,0 27,0 34,6667 0,0 20,6667 29,3333 0,0 3,33333 0,0 0,0 0,0 29,3333 22,3333 24,6667 0,0 28,6667 0,0 6,33333 0,0 1,0 1,33333 0,0 1,33333 1,33333 0,0 0,333333 0,0 0,0 0,0 1,33333 0,333333 1,33333 0,0 1,33333 Standard deviation 0,0 2,51661 0,0 1,0 1,1547 0,0 1,1547 1,1547 0,0 0,57735 0,0 0,0 0,0 1,1547 0,57735 1,1547 0,0 1,1547 Coeff, of variation % 8,29652% % 3,7037% 3,33087% % 5,58726% 3,93648% % 17,3205% % % % 3,93648% 2,58515% 4,68122% % 4,02803% Standard error 0,0 1,45297 0,0 0,57735 0,666667 0,0 0,666667 0,666667 0,0 0,333333 0,0 0,0 0,0 0,666667 0,333333 0,666667 0,0 0,666667 Range ANOVA Table for DKTP by NM Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 10372,5 32,0 10404,5 Df 17 36 53 Mean Square 610,149 0,888889 F-Ratio 686,42 Multiple Range Tests for DKTP by NM Method: 95,0 percent LSD NM Count Mean H1 0,0 H2 0,0 H8 0,0 H4 0,0 H14 0,0 H3 0,0 H11 0,0 H17 0,0 H18 3,33333 H15 20,6667 H6 22,3333 H7 24,6667 H12 27,0 H9 28,6667 H5 29,3333 H16 29,3333 H10 30,3333 H13 34,6667 Homogeneous Groups X X X X X X X X X X X X X X XX XX X X P-Value 0,0000 0,0 5,0 0,0 2,0 2,0 0,0 2,0 2,0 0,0 1,0 0,0 0,0 0,0 2,0 1,0 2,0 0,0 2,0 Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ TN4: Kết phân tích thống kê khả lên men ống Durham đường D-Glucose Summary Statistics CHIEU CAO NM H1 Count Average 3,33333 Variance 0,333333 Standard deviation Coeff, of variation Standard error Range 0,57735 17,3205% 0,333333 1,0 H2 30,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 H3 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 H4 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 H5 5,33333 0,333333 0,57735 10,8253% 0,333333 1,0 H6 30,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 H7 10,3333 0,33333 1,52753 14,7825% 0,881917 3,0 H8 1,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 H9 30,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 H10 30,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 H11 6,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 H12 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 H13 28,6667 1,33333 1,1547 4,02803% 0,666667 2,0 H14 30,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 H15 2,33333 0,333333 0,57735 24,7436% 0,333333 1,0 H16 3,33333 0,333333 0,57735 17,3205% 0,333333 1,0 H17 12,0 9,0 3,0 25,0% 1,73205 6,0 H18 1,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 ANOVA Table for CHIEU CAO by NM Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 8687,04 17 511,002 657,00 0,0000 Within groups 28,0 36 0,777778 Total (Corr,) 8715,04 53 Multiple Range Tests for CHIEUCAO by NM Method: 95,0 percent LSD NM H12 Count Mean 0,0 Homogeneous Groups X H4 0,0 X H3 0,0 X H8 1,0 XX H18 1,0 XX H15 2,33333 XX H16 3,33333 X BT1 3,33333 X H5 5,33333 X Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ H11 6,0 X H7 10,3333 X H17 12,0 X H13 28,6667 X H14 30,0 X H6 30,0 X H10 30,0 X H9 30,0 X H2 30,0 X TN4: Kết phân tích thống kê khả lên men rong ống Durham đường D-Mannose: Summary Statistics for CHIEUCAO NM H1 H2 H3 H4 H5 H6 H7 H8 H9 H10 H11 H12 H13 H14 H15 H16 H17 H18 H1 Count 3 3 3 3 3 3 3 3 3 54 Average 2,66667 29,6667 0,0 3,33333 12,6667 30,0 8,0 0,0 25,6667 17,3333 11,0 0,0 30,0 17,6667 6,33333 2,66667 11,3333 6,0 11,9074 Variance Standard deviation Coeff, of variation Standard error Range 0,333333 0,57735 21,6506% 0,333333 1,0 0,333333 0,57735 1,94612% 0,333333 1,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,333333 0,57735 17,3205% 0,333333 1,0 0,333333 0,57735 4,55803% 0,333333 1,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,333333 0,57735 2,24942% 0,333333 1,0 0,333333 0,57735 3,33087% 0,333333 1,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 0,333333 0,57735 3,26802% 0,333333 1,0 0,333333 0,57735 9,11606% 0,333333 1,0 0,333333 0,57735 21,6506% 0,333333 1,0 0,333333 0,57735 5,09427% 0,333333 1,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 111,897 10,5781 88,8366% 1,4395 30,0 ANOVA Table for CHIEUCAO by NM Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 5923,87 6,66667 5930,54 Df Mean Square 17 348,463 36 0,185185 53 Multiple Range Tests for CHIEUCAO by NM Method: 95,0 percent LSD NM H3 H12 H8 BT1 H16 H4 H18 H15 H7 H11 H17 H5 H10 H14 Count Mean 3 3 3 3 3 3 3 0,0 0,0 0,0 2,66667 2,66667 3,33333 6,0 6,33333 8,0 11,0 11,3333 12,6667 17,3333 17,6667 Homogeneous Groups X X X X X X X X X X X X X X F-Ratio 1881,70 P-Value 0,0000 Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 H9 H2 H13 H6 3 3 Trường Đại học Cần Thơ 25,6667 29,6667 30,0 30,0 X X X X TN4: Kết phân tích thống kê khả lên men Durham đường D-Galactose Summary Statistics for CHIEUCAO NM H1 H2 H3 H4 H5 H6 H7 H8 H9 H10 H11 H12 H13 H14 H15 H16 H17 H18 Count 3 3 3 3 3 3 3 3 3 Average 0,0 12,6667 0,0 0,0 1,0 25,0 0,0 0,0 21,3333 28,3333 0,0 0,0 30,0 11,0 0,0 0,0 0,0 0,0 Variance 0,0 0,333333 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,333333 2,33333 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 Standard deviation Coeff, of variation Standard error Range 0,0 % 0,0 0,0 0,57735 4,55803% 0,333333 1,0 0,0 % 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,57735 2,70633% 0,333333 1,0 1,52753 5,39127% 0,881917 3,0 0,0 % 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 0,0 0,0% 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 0,0 % 0,0 0,0 ANOVA Table for CHIEUCAO by NM Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 6408,15 17 376,95 2261,70 0,0000 Within groups 6,0 36 0,166667 Total (Corr,) 6414,15 53 Multiple Range Tests for CHIEUCAO by NM Method: 95,0 percent LSD NM Count Mean H3 0,0 Homogeneous Groups X H7 0,0 X H18 0,0 X H15 0,0 X H1 0,0 X H17 0,0 X H8 0,0 X H4 0,0 X H16 0,0 X Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ H11 0,0 X H12 0,0 X H5 1,0 X H14 11,0 X H2 12,6667 X H9 21,3333 X H6 25,0 X H10 28,3333 X H13 30,0 X Bảng: Kết phân tích thống kê thể tích khí bình lên men sau 168 Summary Statistics for THE TICH KHI NT Count Average Median Variance NT1 0,0 0,0 0,0 NT10 19,6667 20,0 0,333333 NT11 33,0 33,0 1,0 NT12 29,3333 29,0 2,33333 NT13 32,0 33,0 3,0 NT14 44,0 43,0 3,0 NT2 0,0 0,0 0,0 NT3 17,6667 18,0 0,333333 NT4 23,6667 24,0 0,333333 NT5 15,6667 16,0 0,333333 NT6 18,3333 18,0 0,333333 NT7 21,6667 22,0 0,333333 NT8 24,6667 25,0 0,333333 NT9 14,3333 14,0 0,333333 ANOVA Table for THE TICH KHI by NT Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 5578,0 24,0 5602,0 Standard deviation 0,0 0,57735 1,0 1,52753 1,73205 1,73205 0,0 0,57735 0,57735 0,57735 0,57735 0,57735 0,57735 0,57735 Df 13 28 41 Coeff, of variation % 2,93568% 3,0303% 5,20747% 5,41266% 3,93648% % 3,26802% 2,43951% 3,68521% 3,14918% 2,66469% 2,34061% 4,02803% Mean Square 429,077 0,857143 F-Ratio 500,59 Multiple Range Tests for THE TICH KHI by NT Method: 95,0 NT Count Mean Homogeneous Groups NT1 NT2 NT9 NT5 NT3 NT6 NT10 NT7 NT4 NT8 NT12 NT13 NT11 NT14 3 3 3 3 3 3 3 0,0 X 0,0 X 14,3333 X 15,6667 X 17,6667 X 18,3333 XX 19,6667 X 21,6667 X 23,6667 X 24,6667 X 29,3333 X 32,0 X 33,0 X 44,0 X Standard error 0,0 0,333333 0,57735 0,881917 1,0 1,0 0,0 0,333333 0,333333 0,333333 0,333333 0,333333 0,333333 0,333333 Range 0,0 1,0 2,0 3,0 3,0 3,0 0,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 P-Value 0,0000 percent LSD Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ Bảng: Kết phân tích thống kê hàm lượng đường đường khử Summary Statistics for DUONG KHU NT Count Average Median Variance NT1 NT10 NT11 NT12 NT13 NT14 NT2 NT3 NT4 NT5 NT6 NT7 NT8 NT9 3 3 3 3 3 3 3 0,085 0,416 0,383667 0,432667 0,459667 0,483 0,301 0,300667 0,420667 0,426 0,449667 0,342 0,417333 0,371 0,084 0,421 0,355 0,409 0,46 0,49 0,302 0,303 0,43 0,425 0,439 0,346 0,466 0,366 0,000021 0,000775 0,00321733 0,00198033 0,0000423333 0,001929 0,000003 0,000186333 0,000354333 0,001057 0,000614333 0,000301 0,00725233 0,000525 Standard deviation 0,00458258 0,0278388 0,0567215 0,0445009 0,00650641 0,0439204 0,00173205 0,0136504 0,0188237 0,0325115 0,0247857 0,0173494 0,0851606 0,0229129 Coeff, of variation 5,39127% 6,69202% 14,7841% 10,2853% 1,41546% 9,09325% 0,575432% 4,54004% 4,47474% 7,63182% 5,51203% 5,07291% 20,4059% 6,17598% Standard error 0,00264575 0,0160728 0,0327482 0,0256926 0,00375648 0,0253574 0,001 0,00788106 0,0108679 0,0187705 0,0143101 0,0100167 0,0491675 0,0132288 ANOVA Table for DUONG KHU by NT Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 0,396207 0,0365167 0,432724 Df 13 28 41 Mean Square 0,0304775 0,00130417 F-Ratio 23,37 Multiple Range Tests for DUONG KHU by NT Method: 95,0 percent LSD NT Count Mean Homogeneous Groups NT1 0,085 X NT3 0,300667 X NT2 0,301 X NT7 0,342 XX NT9 0,371 XX NT11 0,383667 XXX NT10 0,416 XXX NT8 0,417333 XXX NT4 0,420667 XXX NT5 0,426 XXXX NT12 0,432667 XXX NT6 0,449667 XX P-Value 0,0000 Range 0,009 0,055 0,102 0,079 0,013 0,087 0,003 0,027 0,034 0,065 0,046 0,034 0,148 0,045 Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 NT13 NT14 3 Trường Đại học Cần Thơ 0,459667 0,483 XX X Bảng: Kết phân tích thống kê độ cồn Summary Statistics for DO CON NT NT1 NT10 NT11 NT12 NT13 NT14 NT2 NT3 NT4 NT5 NT6 NT7 NT8 NT9 Count Average Median 3 3 3 3 3 3 3 0,0 2,83333 3,0 3,5 3,73333 4,33333 0,0 2,16667 2,0 2,0 3,66667 2,0 1,93333 2,5 0,0 3,0 3,0 3,5 4,0 4,0 0,0 2,0 2,0 2,0 4,0 2,0 2,0 2,5 Standard deviation 0,0 0,288675 0,5 0,5 0,46188 0,57735 0,0 0,288675 0,0 0,0 0,57735 0,0 0,11547 0,0 Variance 0,0 0,0833333 0,25 0,25 0,213333 0,333333 0,0 0,0833333 0,0 0,0 0,333333 0,0 0,0133333 0,0 Coeff, of variation % 10,1885% 16,6667% 14,2857% 12,3718% 13,3235% % 13,3235% 0,0% 0,0% 15,7459% 0,0% 5,97259% 0,0% Standard error 0,0 0,166667 0,288675 0,288675 0,266667 0,333333 0,0 0,166667 0,0 0,0 0,333333 0,0 0,0666667 0,0 ANOVA Table for DO CON by NT Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 63,479 3,12 66,599 Df Mean Square 13 4,883 28 0,111429 41 F-Ratio 43,82 Multiple Range Tests for DO CON by NT Method: 95,0 percent LSD NT NT1 NT2 NT8 NT7 NT5 NT4 NT3 NT9 NT10 NT11 NT12 NT6 NT13 NT14 Count 3 3 3 3 3 3 3 Mean 0,0 0,0 1,93333 2,0 2,0 2,0 2,16667 2,5 2,83333 3,0 3,5 3,66667 3,73333 4,33333 Homogeneous Groups X X X XX XX XX XX XX X XX XX X X X P-Value 0,0000 Range 0,0 0,5 1,0 1,0 0,8 1,0 0,0 0,5 0,0 0,0 1,0 0,0 0,2 0,0 Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ Bảng: Kết phân tích thống kê hàm lượng ethanol Summary Statistics for ETHANOL NT NT1 NT10 NT11 NT12 NT13 NT14 NT2 NT3 NT4 NT5 NT6 NT7 NT8 NT9 Count Average Median 3 3 3 3 3 3 3 0,24 2,14333 2,06 2,13333 2,19 2,22667 0,48 1,75 2,07 2,075 2,1575 1,67333 1,85333 2,04333 0,25 2,14 2,07 2,14 2,2 2,23 0,48 1,74 2,07 2,085 2,2 1,68 1,85 2,04 Variance 0,0003 0,0000333333 0,0003 0,000133333 0,0003 0,0000333333 0,0009 0,0003 0,0003 0,000566667 0,008425 0,000133333 0,0000333333 0,000633333 Standard deviation 0,0173205 0,0057735 0,0173205 0,011547 0,0173205 0,0057735 0,03 0,0173205 0,0173205 0,0238048 0,0917878 0,011547 0,0057735 0,0251661 Coeff, of variation 7,21688% 0,26937% 0,840801% 0,541266% 0,790891% 0,259289% 6,25% 0,989743% 0,790412% 1,14722% 4,25436% 0,69006% 0,31152% 1,23162% Standard error 0,01 0,00333333 0,01 0,00666667 0,01 0,00333333 0,0173205 0,01 0,01 0,0119024 0,0458939 0,00666667 0,00333333 0,0145297 ANOVA Table for ETHANOL by NT Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 15,5475 0,033175 15,5806 Df Mean Square 13 1,19596 28 0,00118482 41 F-Ratio 1009,40 Multiple Range Tests for ETHANOL by NT Method: 95,0 percent LSD NT Count Mean Homogeneous Groups NT1 0,24 X NT2 0,48 X NT7 1,67333 X NT3 1,75 X NT8 1,85333 X NT9 2,04333 X NT11 2,06 X NT4 2,07 XX NT5 2,075 X NT12 2,13333 XX NT10 2,14333 XX NT6 2,1575 X NT13 2,19 XX NT14 2,22667 X P-Value 0,0000 Range 0,03 0,01 0,03 0,02 0,03 0,01 0,06 0,03 0,03 0,05 0,19 0,02 0,01 0,05 Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ Bảng: Kết phân tích thống kê lượng DM giảm Summary Statistics for DM GIAM NT Count NT1 NT10 NT11 NT12 NT13 NT14 NT2 NT3 NT4 NT5 NT6 NT7 NT8 NT9 3 3 3 3 3 3 3 Average Median Variance 3,48333 6,64333 6,44333 6,44667 8,39 9,62333 4,55333 5,4 5,45 6,32 7,22 4,32 4,65333 5,46667 0,0610333 0,0881333 0,134033 0,0526333 0,0673 0,121433 0,0441333 0,0907 0,0923 0,239267 1,9428 0,0756 0,127433 0,0394333 3,52 6,57 6,34 6,34 8,31 9,68 4,56 5,33 5,45 6,535 7,79 4,26 4,61 5,4 Standard deviation 0,247049 0,296873 0,366106 0,22942 0,259422 0,348473 0,210079 0,301164 0,301614 0,489149 1,39384 0,274955 0,356978 0,198578 Coeff, of variation 7,09232% 4,46873% 5,68193% 3,55873% 3,09204% 3,62112% 4,61375% 5,57712% 5,68126% 7,7397% 19,3053% 6,36469% 7,67145% 3,63253% Standard error 0,142634 0,171399 0,211371 0,132455 0,149778 0,201191 0,121289 0,173877 0,12513 0,244574 0,696922 0,158745 0,206101 0,114649 ANOVA Table for DM GIAM by NT Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 106,379 8,34993 114,729 Df Mean Square 13 8,18303 28 0,298212 41 F-Ratio 27,44 Multiple Range Tests for DM GIAM by NT Method: 95,0 percent LSD NT Count Mean Homogeneous Groups 3,48333 X 4,55333 X NT1 NT2 NT7 NT8 NT9 NT3 5,4 X NT4 5,45 XX NT5 6,32 X NT11 6,44333 XX NT12 6,44667 XX NT10 6,64333 XX NT6 7,22 X NT13 8,39 X NT14 9,62333 X 4,63 X 4,73667 X 5,34333 X P-Value 0,0000 Range 0,49 0,58 0,71 0,42 0,5 0,69 0,42 0,59 0,41 1,03 3,0 0,54 0,71 0,38 Báo cáo nghiệm thu đề tài cấp Trường TNCS2013-13 Trường Đại học Cần Thơ Bảng: Kết phân tích thống kê lượng CF giảm Summary Statistics for CF GIAM NT NT1 NT10 NT11 NT12 NT13 NT14 NT2 NT3 NT4 NT5 NT6 NT7 NT8 NT9 Total Count Average Median 3 3 3 3 3 3 3 42 11,1367 17,1867 16,7133 21,2667 22,4467 27,5667 14,0767 18,3267 18,69 20,6233 19,5967 11,3467 12,86 14,6433 17,6057 11,14 17,27 16,65 21,3 22,53 27,51 14,04 18,34 18,71 20,66 19,65 11,34 12,86 14,63 17,765 Standard deviation 0,10504 0,15308 0,221886 0,202073 0,332916 0,20108 0,12897 0,070946 0,131149 0,0723418 0,147422 0,0802081 0,07 0,0321455 4,50047 Coeff, of variation 0,943188% 0,890688% 1,3276% 0,950185% 1,48314% 0,729433% 0,916199% 0,387119% 0,701706% 0,350776% 0,752283% 0,706887% 0,544323% 0,219523% 25,5625% Standard error 0,0606447 0,0883805 0,128106 0,116667 0,192209 0,116094 0,074461 0,0409607 0,0757188 0,0417665 0,0851143 0,0463081 0,0404145 0,0185592 0,694437 ANOVA Table for CF GIAM by NT Source Sum of Squares Between groups 829,714 Within groups 0,708 Total (Corr,) 830,422 Df Mean Square 13 63,8241 28 0,0252857 41 F-Ratio 2524,12 Multiple Range Tests for CF GIAM by NT Method: 95,0 percent LSD NT Count Mean NT1 11,1367 NT7 11,3467 NT8 12,86 NT2 14,0767 NT9 14,6433 NT11 16,7133 NT10 17,1867 NT3 18,3267 NT4 18,69 NT6 19,5967 NT5 20,6233 NT12 21,2667 NT13 22,4467 NT14 27,5667 Homogeneous Groups X X X X X X X X X X X X X X P-Value 0,0000 Range 0,21 0,27 0,43 0,4 0,65 0,39 0,25 0,14 0,26 0,13 0,28 0,16 0,14 0,06 16,76