ẢNH HƯỞNG CỦA 2,4 D, BA VÀ NAA ĐẾN QUÁ TRÌNH TẠO CALLUS VÀ TÁI SINH NHÂN NHANH GIỐNG HOA CÚC ĐÀI LOAN IN VITRO

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ẢNH HƯỞNG CỦA 2,4 D, BA VÀ NAA ĐẾN QUÁ TRÌNH TẠO CALLUS VÀ TÁI SINH NHÂN NHANH GIỐNG HOA CÚC ĐÀI LOAN IN VITRO Họ tên sinh viên: NGUYỄN THỊ LAN Ngành: NƠNG HỌC Niên khóa: 2006 - 2010 Tháng 08/2010 ẢNH HƯỞNG CỦA 2,4 D, BA VÀ NAA ĐẾN QUÁ TRÌNH TẠO CALLUS VÀ TÁI SINH NHÂN NHANH GIỐNG HOA CÚC ĐÀI LOAN IN VITRO Tác giả NGUYỄN THỊ LAN Khóa luận đệ trình để đáp ứng yêu cầu cấp Kỹ sư ngành Nông học Giáo viên hướng dẫn: Th.S HỒ TẤN QUỐC K.S DƯƠNG THỊ LAN OANH Tháng năm 2010 i LỜI CẢM ƠN Xin chân thành cảm ơn: Thầy Hồ Tấn Quốc, môn Di truyền - Giống, khoa Nông Học, Đại học Nơng Lâm TP HCM tận tình giảng dạy hướng dẫn em thực đề tài Đồng thời cảm ơn chị Dương Thị Lan Oanh phòng Di truyền Chọn giống trồng, Viện Khoa học Kỹ thuật Nông nghiệp Miền Nam tận tâm hướng dẫn trực tiếp giúp đỡ em tiến hành hoàn thành tốt đề tài Ban giám hiệu Trường Đại học Nông Lâm TP HCM, Ban chủ nhiệm Khoa Nông học, Bộ môn Di truyền - Giống thầy cô giáo truyền đạt kiến thức, tạo điều kiện thuận lợi cho em suốt trình học tập hoàn thành luận văn tốt nghiệp Thầy Phan Thanh Kiếm, môn Di truyền - Giống, khoa Nông học, Đại học Nông Lâm, Thầy Đỗ Khắc Thịnh chị phòng Di truyền Chọn giống trồng, Viện Khoa học Kỹ thuật Nông nghiệp Miền Nam quan tâm giúp đỡ, tạo môi trường thân thiện tốt cho em cho đề tài tốt nghiệp em Những bạn bè, người thân giúp đỡ tơi q trình học tập thực đề tài Cuối cùng, đặc biệt xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến cha mẹ gia đình sinh thành, ni dưỡng, lo lắng, động viên tạo điều kiện cho học tập hoàn thành luận văn TP HCM, tháng 08/2010 Sinh viên thực Nguyễn Thị Lan ii TÓM TẮT Đề tài “Ảnh hưởng 2,4 D, BA NAA đến trình tạo Callus tái sinh nhân nhanh giống hoa cúc Đài Loan in vitro” thực phòng Di truyền Chọn giống trồng, Viện Khoa học Kỹ thuật Nông nghiệp Miền Nam Thời gian thực từ 02/2010 đến 06/2010 Thí nghiệm đơn yếu tố, bố trí theo kiểu hồn tồn ngẫu nhiên, với lần lặp lại Thí nghiệm tiến hành nhằm xác định nồng độ Hypocloride Calcium thời gian khử trùng mẫu cấy, đồng thời tìm mơi trường thích hợp để tạo callus, nhân nhanh chồi rễ cúc Đài Loan Kết đạt được: Công thức khử trùng cúc Đài Loan thích hợp nhất, giảm tối thiểu nhiễm nấm, nhiễm khuẩn để làm tăng tỷ lệ sống sót mẫu: 10 % Hypocloride Calcium + 30 phút Ở nồng độ thời gian này, tỷ lệ mẫu sống đạt 65 %, mẫu chết 17 % mẫu nhiễm 18 % Môi trường MS + 30 g/l đường + g/l agar + - 2,5 mg/l 2,4 D mơi trường thích hợp để tạo callus từ nụ hoa cúc Đài Loan Ở nồng độ này, callus hình thành từ sớm, khối callus tạo nhiều (89 - 91 %), có màu xanh, xốp đường kính callus đạt đến 1,6 - 1,7 cm Mơi trường thích hợp để nhân nhanh chồi cúc Đài Loan môi trường MS + 30 g/l đường + g/l agar + 10 % nước dừa + mg/l BA Khi bổ sung lượng BA (2 mg/l) cụm chồi phát triển to, chiều dài trung bình cụm chồi cm số chồi/cụm đạt 7,5 chồi/cụm Mơi trường thích hợp cho rễ cúc Đài Loan môi trường MS + 30 g/l đường + g/l agar + 10 % nước dừa + mg/l NAA Ở giai đoạn 15 NSC, nghiệm thức có bổ sung mg/l NAA cho số rễ/cây cao 8,5 rễ/cây chiều dài rễ đạt 2,2 cm Các nghiệm thức rễ hoàn toàn 100 %, rễ phân nhánh có nhiều lơng hút Với đặc điểm rễ vậy, dễ dàng hấp thu nước chất dinh dưỡng đất, tạo điều kiện thuận lợi cho sinh trưởng phát triển đem đồng ruộng iii MỤC LỤC Nội dung Trang Trang tựa i Lời cảm ơn ii Tóm tắt iii Mục lục iv Danh sách từ viết tắt viii Danh sách bảng .ix Danh sách biểu đồ x Danh sách hình xi Chương MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu đề tài 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Lịch sử trồng trọt tình hình sản xuất hoa cúc 2.1.1 Lịch sử trồng trọt 2.1.2 Tình hình trồng hoa cúc giới 2.1.3 Tình hình sản xuất hoa cúc Việt Nam 2.2 Các giống hoa cúc phổ biến sản xuất 2.2.1 Những giống địa phương 2.2.2 Những giống cúc nhập nội 2.3 Đặc điểm sinh học 12 2.3.1 Nguồn gốc vị trí phân loại 12 2.3.2 Đặc điểm thực vật học 13 2.3.2.1 Thân 13 2.3.2.2 Lá 13 2.3.2.3 Rễ 13 iv 2.3.2.4 Hoa Quả .13 2.3.3 Đặc điểm sinh trưởng phát triển .14 2.3.3.1 Khí hậu .14 2.3.3.2 Đất đai .14 2.3.3.3 Phân bón 15 2.3.3.4 Nước tưới 15 2.3.3.5 Sâu bệnh hại .15 2.4 Kỹ thuật nhân giống hoa cúc 15 2.4.1 Nuôi cấy tế bào 15 2.4.2 Giâm cành 15 2.4.3 Tách mầm giá 16 2.5 Tổng quan nuôi cấy mô thực vật .16 2.5.1 Khái niệm 16 2.5.2 Lịch sử phát triển công nghệ nuôi cấy in vitro 16 2.5.2.1 Thế giới 16 2.5.2.2 Việt Nam 18 2.5.3 Các phương pháp nuôi cấy mô, tế bào thực vật 19 2.5.3.1 Nuôi cấy đỉnh sinh trưởng 19 2.5.3.2 Nuôi cấy mô sẹo .19 2.5.3.3 Nuôi cấy tế bào đơn 19 2.5.3.4 Nuôi cấy protoplast - lai protoplast 19 2.5.3.5 Nuôi cấy hạt phấn .19 2.5.4 Các nhân tố môi trường nuôi cấy invitro 20 2.5.4.1 Sự lựa chọn mẫu cấy 20 2.5.4.2 Môi trường nuôi cấy 20 2.5.4.3 Các chất điều tiết sinh trưởng 20 2.5.4.4 Nguồn cacbon chất khác 21 2.5.4.5 Ánh sáng 21 2.5.4.6 Nhiệt độ 21 2.5.4.7 Nhân nhanh chồi .22 2.5.4.8 Sự hình thành rễ 22 v 2.5.5 Những vấn đề tồn nhân giống trồng .22 2.5.5.1 Tính bất định mặt di truyền 22 2.5.5.2 Mẫu đưa vào cấy mô .23 2.5.5.3 Việc sản sinh chất gây độc từ mẫu cấy 23 2.5.5.4 Hiện tượng thuỷ tinh thể 23 2.6.6 Vai trò chất điều tiết sinh trưởng nuôi cấy in vitro .24 2.5.6.1 Auxin 24 2.5.6.2 Cytokinin 25 2.5.6.3 Các nhóm chất khác 25 2.6 Kết nghiên cứu nuôi cấy mô hoa Cúc .26 Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM 3.1 Thời gian địa điểm tiến hành thí nghiệm 27 3.2 Vật liệu thí nghiệm 27 3.2.1 Giống cúc Đài Loan 27 3.2.2 Trang thiết bị dụng cụ .27 3.2.2.1 Phòng pha chế mơi trường 27 3.2.2.2 Phòng cấy 28 3.2.2.3 Phòng ni 28 3.2.2.4 Dụng cụ thí nghiệm 28 3.2.2.5 Mơi trường dùng thí nghiệm .28 3.3 Phương pháp thí nghiệm .29 3.3.1 Bố trí thí nghiệm 29 3.3.2 Điều kiện nuôi cấy .29 3.4 Các thí nghiệm 29 3.4.1 Thí nghiệm 1: Tìm nồng độ Hypocloride Calcium thời gian khử trùng thích hợp cho khả vào mẫu cúc Đài Loan 29 3.4.2 Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng 2,4 D đến khả tạo callus nuôi cấy từ nụ hoa cúc Đài Loan .30 3.4.3 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng BA đến khả nhân nhanh chồi cúc Đài Loan 31 3.4.4 Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng NAA đến hình thành rễ vi cúc Đài Loan 32 3.5 Phương pháp xử lý số liệu 32 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Thí nghiệm 1: Tìm nồng độ Hypocloride Calcium thời gian khử trùng thích hợp cho khả vào mẫu cúc Đài Loan 33 4.2 Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng 2,4 D đến khả tạo callus nuôi cấy từ nụ hoa cúc Đài Loan .34 4.3 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng BA đến khả nhân nhanh chồi cúc Đài Loan 37 4.4 Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng NAA đến hình thành rễ cúc Đài Loan 40 4.4.1 Ảnh hưởng NAA đến tiêu số rễ/cây cúc Đài Loan .40 4.4.2 Ảnh hưởng NAA đến tiêu chiều dài rễ cúc Đài Loan 41 4.4.3 Ảnh hưởng NAA đến tiêu tỷ lệ rễ cúc Đài Loan 42 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận 44 5.2 Đề nghị 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO 46 PHỤ LỤC 48 Phụ lục 1: Một số hình ảnh thí nghiệm 48 Phụ lục 2: Biểu đồ biểu diễn tiêu theo dõi nghiệm thức thí nghiệm 50 Phụ lục 3: Kết xử lý thống kê trắc nghiệm phân hạng 54 vii DANH SÁCH CÁC TỪ VIẾT TẮT Viết tắt Viết đầy đủ ADN Acid desoxyribonucleic BA Benzyl adenine C Nồng độ CV Độ lệch tiêu chuẩn tương đối (Coefficient of Variance) 2,4 D 2,4 - Dichlorophenoxyacetic acid Đ/C Đối chứng Ftính Giá trị tính hàm phân bố xác suất F ứng với mức ý nghĩa IAA - Indolylacetic acid IBA - Indolebutyric acid MS Murashige and Skoog, 1962 MTN Môi trường NAA - Naphthalene acetic acid NN Nông nghiệp NPK Đạm, phân kali NSC Ngày sau cấy NT Nghiệm thức PTNT Phát triển nông thôn T Thời gian TP.HCM Thành phố Hồ Chí Minh viii DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng Trang Bảng 2.1 Tình hình xuất hoa sang Nhật Bản tháng 07/2008 Bảng 2.2 Tình hình sản xuất hoa cúc số tỉnh nước Bảng 3.1 Bảng bố trí thí nghiệm khử trùng mẫu cúc Đài Loan Hypocloride Calcium 30 Bảng 4.1 Tỷ lệ nhiễm, sống, chết (%) mẫu cúc Đài Loan 10 NSC .33 Bảng 4.2 Ảnh hưởng 2,4 D đến khả tạo Callus nuôi cấy từ nụ hoa cúc Đài Loan 20 NSC 35 Bảng 4.3 Ảnh hưởng BA đến trình nhân nhanh chồi cúc Đài Loan 30 NSC 38 Bảng 4.4 Ảnh hưởng NAA đến tiêu số rễ/cây cúc Đài Loan 5, 10 15 NSC .40 Bảng 4.5 Ảnh hưởng NAA đến tiêu chiều dài rễ cúc Đài Loan 5, 10 15 NSC .41 Bảng 4.6 Ảnh hưởng NAA đến tiêu tỷ lệ rễ cúc Đài Loan 5, 10 15 NSC .42 ix Mơi trường thích hợp cho rễ cúc Đài Loan: MS + 30 g/l đường + g/l agar + 10 % nước dừa + mg/l NAA 5.2 Đề nghị Sử dụng môi trường MS + - 2,5 mg/l 2,4 D cho việc tạo callus từ nụ hoa, môi trường MS + mg/l BA cho q trình nhân nhanh chồi mơi trường MS + mg/l NAA cho tạo rễ cúc Đài Loan Tiếp tục tiến hành thí nghiệm: tạo callus, nhân nhanh chồi tạo rễ cúc Đài Loan với môi trường B5 So sánh kết thu với kết thí nghiệm mơi trường MS, từ tìm môi trường phù hợp để nhân giống cúc Đài Loan Kết hợp nồng độ BA NAA phù hợp vào mơi trường MS, tìm mơi trường thích hợp cho khả nhân nhanh chồi hoa cúc Đài Loan Tiến hành thí nghiệm nhiều giống cúc khác quy mô lớn để so sánh khác biệt khả rễ, nhân chồi tạo callus giống Sử dụng kỹ thuật nuôi cấy in vitro nhân giống hoa cúc tạo nguồn vật liệu cho trình xử lý gây đột biến, phục vụ cho công tác chọn tạo giống hoa cúc 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Trần Thị Mỹ Dung, 2009 Khảo sát ảnh hưởng môi trường SH, B5 1/2 MS đến tạo chồi hoa chuông (Sinningia speciosa) in vitro Luận văn tốt nghiệp kỹ sư, khoa Nông học, trường Đại học Nông Lâm TP.HCM., 79 trang Đặng Văn Đông Đinh Thế Lộc, 2003 Công nghệ trồng hoa cho thu nhập cao - hoa cúc, Nhà xuất Lao động - Xã hội, 82 trang Nguyễn Thị Phương Ngọc Huyền, 2008 Khảo sát ảnh hưởng số dịch chiết hữu đến trình phát triển lan Oncidium sp Luận văn tốt nghiệp kỹ sư, khoa Nông học, trường Đại học Nông Lâm TP.HCM, 88 trang Nguyễn Văn Kết, 2007 Điều tra nghiên cứu bảo tồn nguồn gen giống hoa cúc hoa lan cắt cành sản xuất Đà Lạt Trường Đại học Đà Lạt, 66 trang Nguyễn Xuân Linh Nguyễn Thị Kim Lý, 2005 Ứng dụng công nghệ sản xuất hoa Nhà xuất lao động Nguyễn Đức Lượng Lê Thị Thủy Tiên, 2006 Công nghệ tế bào Nhà xuất Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh, 376 trang Trần Văn Mỹ, 2003 Hướng dẫn sử dụng phần mềm MSTATC phương pháp thí nghiệm nông nghiệp Khoa Nông Học trường Đại học Nông Lâm TP.HCM 63 trang Nguyễn Đức Thành, 2000 Nuôi cấy tế bào thực vật - nghiên cứu ứng dụng Nhà xuất Nông Nghiệp, 199 trang Lê Thị Kim Thoa, 2009 Theo dõi ảnh hưởng BA NAA hai môi trường 1/2 MS B5 đến sinh trưởng phát triển lan Ren (Renanthera sp.) in vitro Luận văn tốt nghiệp kỹ sư, khoa Nông học, trường Đại học Nông Lâm TP.HCM, 92 trang 10 Bùi Hà Anh Thư, 2009 Nghiên cứu môi trường nhân giống invitro Lan Hồ Điệp Phalaenopsis từ hạt Luận văn tốt nghiệp kỹ sư, khoa Nông Học, trường Đại học Nông Lâm TP.HCM, 84 trang 11 Đào Thanh Vân Đặng Thị Tố Nga, 2007 Cây Hoa Nhà xuất Nông Nghiệp, 108 trang 12 Viện Khoa Học Công Nghệ Việt Nam, 2007 Công nghệ sinh học thực vật công tác nhân giống chọn tạo giống hoa Nhà xuất Nơng Nghiệp 46 Tài liệu Internet 13 Hồng An, 2010 Đà Lạt ký kết hợp đồng sản xuất hoa cúc cắt cành xuất Cập nhật ngày 22/6/2010 14 Abum ảnh Cập nhật ngày 11/2/2008 15 Nguyễn Minh Châu, 2007 Kết nghiên cứu chuyển giao công nghệ Viện ăn Miền Nam 2006 - 2007 16 Hoa cúc 17 Hoa Đà Lạt Cập nhật ngày 17/8/2009 18 Nhất Hùng, 2010 Xuất hoa cúc sang Nhật Bản Cập nhật ngày 21/6/2010 19 Nguyễn Thị Việt Mỹ, 2010 Nghiên cứu ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng đến khả tạo chồi, rễ hoa cúc vàng giai đoạn nhân nhanh Luận văn tốt nghiệp, khoa CNSH – MT, trường cao đẳng Đức Trí Cập nhật ngày 9/6/2010 20 Nhân nhanh hoa cúc kỹ thuật nuôi cấy in vitro Cập nhật ngày 21/1/2005 21 Nguoithanglong’sblog Hoa Cúc Xanh Cập nhật ngày 10/8/2008 22 Saigonphoto.Net Tưới hoa cho kịp tết Cập nhật ngày 3/2/2010 23 Sànsiêuthịcâyxanh.vn Hoa quanh năm trưng tết Cập nhật ngày 2008 24 Xuất hoa cúc sang thị trường Nhật Bản tăng mạnh Cập nhât ngày 9/9/2008 25 Yume Hoa cúc đơn côi Cập nhật ngày 21/7/2009 47 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Một số hình ảnh thí nghiệm Hình Hình Hình - Mẫu cúc Đài Loan nhân chồi 30 NSC Hình Mẫu cúc Đài Loan rễ 15 NSC 48 Hình Hình Hình Hình Hình - - - Mẫu cúc Đài Loan bị nhiễm Hình Hình Hình - Callus cúc Đài Loan phát sinh hệ rễ 49 Phụ lục 2: Biểu đồ biểu diễn tiêu theo dõi nghiệm thức thí nghiệm 2.1 Thí nghiệm 1: Tìm nồng độ chất Hypocloride Calcium thời gian khử trùng Tỷ lệ mẫu nhiễm (%) thích hợp cho khả vào mẫu hoa cúc Đài Loan 120 100 80 100 84 61 60 33 40 20 18 13 11 % + % + % + % + 10 % + 10 % + 12 % + 12% + 30 phút 40 phút 30 phút 40 phút 30 phút 40 phút 30 phút 40 phút Nồng độ Hypocloride Calcium thời gian khử trùng Biểu đồ Tỷ lệ nhiễm nghiệm thức 10 NSC 2.2 Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng 2,4 D đến khả tạo callus nuôi cấy từ nụ hoa cúc Đài Loan 100 91,3a 89,3ab 90 Callus hình thành (%) 80 86,6b 73,0c 70 60 50 40,0d 40 32,6e 30 20 10 6,3f 0 0,5 1,5 2,5 Nồng độ 2,4 D (mg/l) Biểu đồ Số Callus hình thành nghiệm thức 20 NSC 50 Đường kính callus (cm) 1.8 1,7a 1,7a 2,5 1.6 1,6a 1,3b 1.4 1.2 0.8 0,8c 0,8c 0,5 0,5d 0.6 0.4 0.2 0 1,5 Nồng độ 2,4 D (mg/l) Biểu đồ Đường kính Callus hình thành nghiệm thức 20 NSC 2.3 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng BA đến khả nhân nhanh chồi hoa cúc Đài Loan 6,6c Số chồi/cụm 7,0b 7,5a 6,2d 5,9d 2,5 5,1e 1,4f 0 0,5 1,5 Nồng độ BA (mg/l) Biểu đồ Số chồi/cụm nghiệm thức 30 NSC 51 Chiều cao chồi (cm) 5,4a 3,5b 2,4c 2,0d 1,5e 1,3f 1,2f 0 0,5 1,5 2,5 Nồng độ BA (mg/l) Biểu đồ Chiều cao chồi nghiệm thức 30 NSC 2.4 Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng NAA đến hình thành rễ hoa cúc Đài Số rễ/cây Loan 8,0b 8,5a 7,9b 7,1c 7,0c 3,9d 1,5 2,5 Nồng độ NAA (mg/l) Biểu đồ Số rễ/cây nghiệm thức 15 NSC 52 Chiều dài rễ (cm) 4.5 3.5 2.5 1.5 0.5 4,6a 3,7b 2,7c 2,2d 2,2d 1,4e 1,5 2,5 Nồng độ NAA (mg/l) Biểu đồ Chiều dài rễ nghiệm thức 15 NSC Tỷ lệ rễ (%) 120 100 100a 100a 100a 100a 1,5 2,5 100a 83,3b 80 60 40 20 0 Nồng độ NAA (mg/l) Biểu đồ Tỷ lệ rễ nghiệm thức 15 NSC 53 Phụ lục 3: Kết xử lý thống kê trắc nghiệm phân hạng 3.1 Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng 2,4 D đến khả tạo callus nuôi cấy từ nụ hoa cúc Đài Loan a Kết xử lý thống kê phân hạng hình thành callus từ nụ hoa cúc Đài Loan A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 20248.476 3374.746 920.385 0.0000 Within 14 51.333 3.667 Total 20 20299.810 Coefficient of Variation = 3.20% LSD value = 4.654 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean = 6.333 F Mean = 91.33 A Mean = 32.67 E Mean = 89.33 AB Mean = 40.00 D Mean = 86.67 B Mean = 73.00 C Mean = 73.00 C Mean = 91.33 A Mean = 40.00 D Mean = 89.33 AB Mean = 32.67 E Mean = 86.67 B Mean = 6.333 F b Kết xử lý thống kê trắc nghiệm phân hạng kích thước callus từ nụ hoa cúc Đài Loan A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 4.304 0.717 201.682 0.0000 Within 14 0.050 0.004 Total 20 4.354 Coefficient of Variation = 4.80% LSD value = 0.1537 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean = 0.5500 D Mean = 1.757 A Mean = 0.8633 C Mean = 1.750 A Mean = 0.8633 C Mean = 1.620 A Mean = 1.300 B Mean = 1.300 B Mean = 1.757 A Mean = 0.8633 C Mean = 1.750 A Mean = 0.8633 C Mean = 1.620 A Mean = 0.5500 D 54 3.2 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng BA đến khả nhân nhanh chồi cúc Đài Loan a Kết thống kê phân hạng số chồi/cụm cúc Đài Loan A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 74.013 12.336 602.434 0.0000 Within 14 0.287 0.020 Total 20 74.300 Coefficient of Variation = 2.51% LSD value = 0.3437 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean = 1.467 F Mean = 7.533 A Mean = 5.100 E Mean = 7.067 B Mean = 6.633 C Mean = 6.633 C Mean = 7.067 B Mean = 6.200 D Mean = 7.533 A Mean = 5.900 D Mean = 6.200 D Mean = 5.100 E Mean = 5.900 D Mean = 1.467 F b Kết thống kê phân hạng chiều cao chồi cúc Đài Loan A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 41.343 6.890 1607.780 0.0000 Within 14 0.060 0.004 Total 20 41.403 Coefficient of Variation = 2.70% LSD value = 0.1537 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean = 5.400 A Mean = 5.400 A Mean = 3.533 B Mean = 3.533 B Mean = 1.567 E Mean = 2.033 C Mean = 1.833 D Mean = 1.833 D Mean = 2.033 C Mean = 1.567 E Mean = 1.367 F Mean = 1.367 F Mean = 1.267 F Mean = 1.267 F 55 3.3 Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng NAA đến hình thành rễ hoa cúc Đài Loan a Kết thống kê phân hạng số rễ/cây cúc Đài Loan Giai đoạn NSC A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 46.678 9.336 166.376 0.0000 Within 12 0.673 0.056 Total 17 47.351 Coefficient of Variation = 21.98% LSD value = 0.5902 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean = 2.333 B Mean = 4.133 A Mean = 4.133 A Mean = 2.333 B Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Giai đoạn 10 NSC A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 22.532 4.506 253.481 0.0000 Within 12 0.213 0.018 Total 17 22.745 Coefficient of Variation = 2.68% LSD value = 0.3346 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean = 3.433 E Mean = 6.967 A Mean = 4.900 C Mean = 5.600 B Mean = 5.600 B Mean = 4.900 C Mean = 6.967 A Mean = 4.900 C Mean = 4.900 C Mean = 4.100 D Mean = 4.100 D Mean = 3.433 E 56 Giai đoạn 15 NSC A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 40.605 8.121 974.521 0.0000 Within 12 0.100 0.008 Total 17 40.705 Coefficient of Variation = 1.28% LSD value = 0.2231 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean = 3.967 D Mean = 8.567 A Mean = 7.067 C Mean = 8.033 B Mean = 8.033 B Mean = 7.933 B Mean = 8.567 A Mean = 7.133 C Mean = 7.133 C Mean = 7.067 C Mean = 7.933 B Mean = 3.967 D b Kết thống kê phân hạng chiều dài rễ cúc Đài Loan Giai đoạn NSC A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 20.378 4.076 917.000 0.0000 Within 12 0.053 0.004 Total 17 20.431 Coefficient of Variation = 9.84% LSD value = 0.1577 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean = 2.833 A Mean = 2.833 A Mean = 1.233 B Mean = 1.233 B Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Giai đoạn 10 NSC A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 18.018 3.604 648.660 0.0000 Within 12 0.067 0.006 Total 17 18.085 Coefficient of Variation = 5.66% LSD value = 0.1932 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean = 3.467 A Mean = 3.467 A Mean = 1.367 B Mean = 1.367 B Mean = 1.033 C Mean = 1.033 C Mean = 0.9000 C Mean = 0.9000 C Mean = 0.6000 D Mean = 0.6000 D Mean = 0.5333 D Mean = 0.5333 D 57 Giai đoạn 15 NSC A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 19.512 3.902 351.210 0.0000 Within 12 0.133 0.011 Total 17 19.645 Coefficient of Variation = 3.70% LSD value = 0.2616 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean = 4.633 A Mean = 4.633 A Mean = 3.700 B Mean = 3.700 B Mean = 2.767 C Mean = 2.767 C Mean = 2.267 D Mean = 2.267 D Mean = 2.267 D Mean = 2.267 D Mean = 1.467 E Mean = 1.467 E c Kết thống kê phân hạng số rễ cúc Đài Loan Giai đoạn NSC A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 13266.667 2653.333 238.800 0.0000 Within 12 133.333 11.111 Total 17 13400.000 LSD value = 8.313 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean = 26.67 B Mean = 73.33 A Mean = 73.33 A Mean = 26.67 B Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Mean = 0.0000 C Giai đoạn 10 NSC A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 5629.167 1125.833 162.120 0.0000 Within 12 83.333 6.944 Total 17 5712.500 Coefficient of Variation = 3.13% LSD value = 6.572 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean = 73.33 C Mean = 100.0 A Mean = 90.00 B Mean = 100.0 A Mean = 100.0 A Mean = 91.67 B Mean = 100.0 A Mean = 90.00 B Mean = 91.67 B Mean = 73.33 C Mean = 50.00 D Mean = 50.00 D 58 Giai đoạn 15 NSC A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E Degrees of Sum of Mean Freedom Squares Square F-value Prob Between 694.444 138.889 25.000 0.0000 Within 12 66.667 5.556 Total 17 761.111 Coefficient of Variation = 2.42% Least Significant Difference Test LSD value = 5.879 at alpha = 0.010 Original Order Ranked Order Mean = 83.33 B Mean = 100.0 A Mean = 100.0 A Mean = 100.0 A Mean = 100.0 A Mean = 100.0 A Mean = 100.0 A Mean = 100.0 A Mean = 100.0 A Mean = 100.0 A Mean = 100.0 A Mean = 83.33 B 59 ... hợp thành Năm 1902, Haberlandt người đưa giả thuyết Schleiden Schwann vào thực nghiệm Năm 1922, Kotte, học trò Haberlandt Robbins, người Mỹ lặp lại thực nghiệm Haberlandt với đỉnh sinh trưởng... giống hoa đẹp, tươi chất lượng cao giá thành thấp Hà Lan nước lớn giới xuất hoa, cảnh nói chung xuất cúc nói riêng Diện tích trồng cúc Hà Lan chiếm 30 % tổng diện tích trồng hoa tươi Năng suất... bình từ 10 - 15 %/ha Hàng năm, Hà Lan sản xuất hàng trăm triệu cành hoa cắt hoa chậu phục vụ cho thị trường tiêu thụ rộng lớn gồm 80 nước giới Năm 1998, Hà Lan sản xuất 866 triệu cành năm 1999,