TÓM TẮT BÁO CÁO ĐÁNH GIÁ RỦI RO CỦA SỰ KIỆN NGÔ MON 88017 ĐỐI VỚI SỨC KHỎE CON NGƯỜI VÀ VẬT NUÔI

© Bản quyền thuộc Tập đồn Monsanto, năm 2014 Tài liệu bảo vệ theo luật điều khoản luật quyền quốc gia quốc tế Các tổ chức, quan nhà nước cá nhân có thẩm quyền theo quy định pháp luật hành có quyền sử dụng tài liệu Ngồi ra, hình thức sử dụng, chép, lưu hành đăng tải thông tin tài liệu tài liệu kèm theo đồng ý trước Tập đồn Monsanto chi nhánh Tập đoàn bị nghiêm cấm MỤC LỤC I THÔNG TIN CHUNG 1 Tổ chức đăng ký cấp Giấy xác nhận Tên kiện chuyển gen đăng ký cấp Giấy xác nhận II THÔNG TIN VỀ CÂY CHỦ NHẬN GEN Tên chủ nhận gen 2 Thông tin lịch sử canh tác, phát triển giống khả gây tác động bất lợi đến sức khỏe người vật nuôi Thông tin an toàn nhận gen, vấn đề độc tính tính gây dị ứng Thông tin lịch sử sử dụng chủ làm thực phẩm, thức ăn chăn ni III THƠNG TIN VỀ SINH VẬT CHO GEN Tên sinh vật cho gen Thông tin lịch sử tự nhiên liên quan đến an toàn thực phẩm thức ăn chăn nuôi Thông tin chất chống dinh dưỡng, độc tố chất gây dị ứng tự nhiên Thông tin lịch sử sử dụng chuỗi thực phẩm, thức ăn chăn nuôi IV THƠNG TIN LIÊN QUAN ĐẾN Q TRÌNH CHUYỂN GEN – SỰ KIỆN NGƠ MON 88017 A Thơng tin đoạn gen chèn vào Thông tin chung Q trình chuyển gen tạo kiện ngơ MON 88017 B Thông tin kiện ngô MON 88017 14 Thành phần dinh dưỡng tính an tồn kiện ngơ MON 88017 14 Thơng tin đoạn gen chèn vào tạo kiện ngô MON 88017 14 Mơ tả đặc điểm kiểu hình tính trạng 14 Hiện trạng cấp phép kiện ngơ MON 88017 tồn cầu 14 V ĐÁNH GIÁ NGUY CƠ ẢNH HƯỞNG CỦA SỰ KIỆN NGÔ MON 88017 ĐỐI VỚI SỨC KHỎE CON NGƯỜI VÀ VẬT NUÔI 15 So sánh khác biệt thành phần hợp chất hàm lượng dinh dưỡng kiện ngô MON 88017 thực vật nhận gen 15 Đánh giá khả chuyển hóa thành phần dinh dưỡng, đặc biệt chất sử dụng làm thực phẩm/thức ăn chăn nuôi 16 i Đánh giá khả gây độc, gây dị ứng chất sử dụng làm thực phẩm thức ăn chăn nuôi 17 Đánh giá khả hình thành hợp chất mới, khả gây bệnh tác động bất lợi khác đến sức khỏe người vật nuôi 18 VI ĐỀ XUẤT CÁC BIỆN PHÁP QUẢN LÝ RỦI RO TIỀM ẨN CỦA SỰ KIỆN NGÔ MON 88017 ĐỐI VỚI SỨC KHỎE CON NGƯỜI VÀ VẬT NUÔI 20 VII KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 22 Kết luận 22 Đề nghị 24 ii TÓM TẮT BÁO CÁO ĐÁNH GIÁ RỦI RO CỦA SỰ KIỆN NGÔ MON 88017 ĐỐI VỚI SỨC KHỎE CON NGƯỜI VÀ VẬT NI (Theo Phụ lục 03 Thơng tư số 02/2014/TT-BNNPTNT ngày 24/01/2014 Bộ trưởng Bộ Nông nghiệp & Phát triển nơng thơn) I THƠNG TIN CHUNG Tổ chức đăng ký cấp Giấy xác nhận - Tên tổ chức đăng ký: Công ty TNHH Dekalb Việt Nam - Người đại diện tổ chức: Nguyễn Đình Mạnh Chiến, Tổng Giám đốc - Đầu mối liên lạc tổ chức: Nguyễn Thúy Hà, Giám đốc Pháp chế - Địa chỉ: Phòng 1303, Tòa nhà Centec, 72-74 Nguyễn Thị Minh Khai, Phường 6, Quận 3, Tp Hồ Chí Minh, Việt Nam - Điện thoại: +84 3823 3474/+84 972 330 816 - Email: ha.thuy.nguyen@monsanto.com Fax: +84 3823 3473 Tên kiện chuyển gen đăng ký cấp Giấy xác nhận - Tên thông thường: Cây Ngô - Tên khoa học: Zea mays L - Tên thương mại: YieldGard VT Rootworm/RR2 - Sự kiện chuyển gen: Sự kiện MON 88017, ngô chống chịu thuốc trừ cỏ kháng sâu hại rễ ngơ - Tính trạng liên quan đến gen chuyển: Chống chịu thuốc trừ cỏ Glyphosate kháng sâu hại rễ ngô - Mã nhận diện (nếu có): MON-88Ø17-3 - Tên tổ chức tạo giống: Tập đồn Monsanto, Hoa Kỳ II THƠNG TIN VỀ CÂY CHỦ NHẬN GEN Tên chủ nhận gen Tên thông thường: Cây Ngô Tên khoa học: Zea mays L Vị trí phân loại: Cây ngơ (Zea mays L) thuộc chi ngô Zea, phân họ ngô (Maydeae), họ phụ hòa thảo (Panicoideae), họ hòa thảo (Gramineae) Thơng tin lịch sử canh tác, phát triển giống khả gây tác động bất lợi đến sức khỏe người vật ni Bằng chứng hóa thạch kết nghiên cứu khảo cổ học, tế bào học di truyền học cho thấy ngơ có nguồn gốc phát sinh từ Trung Mỹ (Jones cộng sự, 1995) Q trình hóa ngơ diễn vào khoảng 7.000 -10.000 năm trước công nguyên miền trung Mexico tổ tiên loại cỏ teosinte hoang dại gần giống với ngô ngày tìm thấy khu vực sơng Balsas, Mexico (Goodman Galinat, 1988) Từ nguồn gốc Trung Mỹ, ngô di nhập đến phần lại giới, cụ thể đến châu Âu châu Mỹ vào cuối kỷ 15, đầu kỷ 16 phát Trung Quốc vào khoảng năm 1575 Trong giả định nguồn gốc di truyền ngô chưa chứng minh, nhà khoa học cho ngơ hoang dại teosinte đóng vai trò quan trọng q trình tiến hóa ngơ Ngô gieo trồng rộng khắp giới với sản lượng hàng năm cao lương thực Hoa Kỳ nước sản xuất gần nửa sản lượng ngô giới Các nước sản xuất ngơ hàng đầu khác có Trung Quốc, Brazil, Mexico, Argentina, Ấn Độ, Pháp, Indonesia, Nam Phi Italia Chỉ tính riêng năm 2008, tổng diện tích trồng ngơ toàn cầu 160 triệu ha, đạt sản lượng 822,7 triệu (FAOSTAT, 2009) Ngô trồng rộng rãi hầu hết bang Hoa Kỳ với sản lượng 307,14 triệu vào năm 2009 đạt giá trị kim ngạch 48,6 tỷ USD (USDA-FAS, 2010; USDA-NASS, 2010) Giống ngô lai “Copper Cross” canh tác diện tích nhỏ khu vực vành đai ngơ (Corn Belt) Hoa Kỳ vào năm 1924 (Crabb, 1947) Tuy nhiên, giai đoạn 1934-1936, điều kiện thời tiết khô hạn, người trồng ngô bắt đầu nhận thức tính ưu việt giống lai so với giống (Wych, 1988) suất sức sống nhờ ưu lai từ chấp nhận ứng dụng rộng rãi giống ngơ lai Cho đến nay, chưa có tài liệu công bố ảnh hưởng bất lợi ngô sức khỏe người động vật Ngơ khơng mang tính độc, khơng tạo chất mang tính độc yếu tố chống dinh dưỡng gây hại cho người (Watson, 1982; White Pollak, 1995) Ngô thực phẩm gây dị ứng người (Pastorello cộng sự, 2000; OECD, 2002; Pasini cộng sự, 2002) Các thơng tin liên quan đến tính trạng gây tác động bất lợi đến sức khỏe người vật ni trình bày chi tiết mục V, Báo cáo đánh giá rủi ro Thông tin an toàn nhận gen, vấn đề độc tính tính gây dị ứng Chưa có tài liệu công bố ảnh hưởng bất lợi ngô sức khỏe người động vật Ngơ khơng mang tính độc, khơng tạo chất mang tính độc yếu tố chống dinh dưỡng gây hại cho người (Watson, 1982; White Pollak, 1995) Ngô thực phẩm gây dị ứng người Một số trường hợp báo cáo dị ứng sử dụng ngô làm thức ăn (Pastorello cộng sự, 2000; OECD, 2002; Pasini cộng sự, 2002) kết nghiên cứu cho thấy bệnh nhân mẫn cảm với phấn hoa với loại hạt ngũ cốc khác, không riêng với ngô (Jones cộng sự, 1995) Điều cho thấy nguy gây độc gây dị ứng cho người sử dụng ngô làm thực phẩm thức ăn chăn nuôi không xảy thấp (Pastorello cộng sự, 2000; Pasini cộng sự, 2002) Tổ chức Hợp tác Phát triển kinh tế OECD (2002) công bố chất chống dinh dưỡng (anti-nutrients) có ngơ, bao gồm 2,4-dihydroxy-7-methoxy-2H-1,4benzoxazin-3(4H)-one (DIMBOA), axit phytic, raffinose, trypsin chất ức chế chymotrypsin Trong số này, axit phytic chất chống dinh dưỡng quan trọng động vật, đặc biệt động vật khơng thuộc nhóm nhai lại nhờ chức sinh học giảm thiểu hàm lượng phốt mô ngô xuống 15% Trong chế độ thức ăn chăn nuôi lợn gia cầm, enzyme phytase bổ sung để tăng hiệu chuyển hóa phốt Đối với thành phần DIMBOA, OECD khơng đề nghị phân tích hàm lượng tìm thấy khác giống ngô lai Raffinose phân tử carbonhydrate trọng lượng phân tử thấp hạt ngô gây sinh khí đầy Trypsin chất ức chế chymotrypsin tồn với hàm lượng thấp ngô khơng có tác động đáng kể đến sức khỏe người (White Pollak, 1995) Thông tin lịch sử sử dụng chủ làm thực phẩm, thức ăn chăn nuôi Từ năm 2700 trước công nguyên, ngô trồng làm thực phẩm Mexico (Salvador, 1997) Thổ dân Châu Mỹ hóa tăng cường sử dụng ngô sau nhận tiềm trồng làm thực phẩm, thức ăn chăn nuôi chất đốt Người Châu Âu di cư đến Mỹ nhanh chóng chấp nhận ngơ trồng (Kastner, 1980) Vào cuối kỷ 19, khoảng 90% người dân Mỹ sử dụng ngơ làm nguồn thực phẩm (Hardeman, 1981) Ở Việt Nam, ngô đưa vào canh tác khoảng 300 năm trước (Ngơ Hữu Tình cộng sự, 1997) Cây ngô lương thực quan trọng thứ sau lúa trồng rộng rãi nước, điển hình tỉnh Sơn La, Đăklăk, Đồng Nai, Bà Rịa-Vũng Tàu, Thanh Hóa, Nghệ An, An Giang Đồng Tháp Hạt ngơ có chứa 82% nội nhũ, 12% phôi, 5% tầng cám, 1% chân hạt 2,2% phần cám sợi thô (Earle cộng sự, 1946; Perry, 1988) Các sản phẩm thực phẩm từ ngô phong phú sử dụng rộng rãi ngành công nghiệp thực phẩm chế biến, sản xuất ethanol, chưng cất đồ uống Bắp ngô bao tử sử dụng làm rau xanh Ngơ nguồn ngun liệu sản xuất thức ăn chăn ni có giá trị dinh dưỡng cao, giá rẻ (OECD, 2002) Do có thành phần chất bột cao, chất xơ thấp nên ngô coi nguồn lượng có giá trị làm thức ăn chăn ni bò, lợn, gia cầm Ngơ nghiền trộn với thành phần thức ăn chăn nuôi giàu đạm, vitamin, chất khoáng bổ sung để cân tỷ lệ dinh dưỡng theo yêu cầu loại thức ăn chăn nuôi (Leath Hill, 1987) Hạt ngô chiếm hầu hết lượng chuyển hóa loại ngũ cốc sử dụng thức ăn chăn nuôi (Ensminger cộng sự, 1990) Tồn thân ngơ (cả thân bắp) thu hoạch, băm nhỏ lưu kho dùng dần làm thức ăn chăn nuôi gia súc cho bò sữa (Newcomb, 1995) Ngồi sử dụng làm thực phẩm thức ăn chăn ni, ngơ nguyên liệu nhà máy sản xuất rượu, cồn dược phẩm Theo kết tổng hợp, ngô sử dụng để sản xuất khoảng 670 mặt hàng khác ngành công nghiệp lương thực, thực phẩm, dược cơng nghiệp nhẹ III THƠNG TIN VỀ SINH VẬT CHO GEN Tên sinh vật cho gen Sinh vật cho protein CP4 EPSPS a Tên thông thường: Chủng vi khuẩn Agrobacterium sp CP4 b Tên khoa học: Chủng vi khuẩn Agrobacterium sp CP4 c Vị trí phân loại: Vi khuẩn Agrobacterium sp CP4 thuộc chi Agrobacterium, họ Rhizobiacea, Rhizobiales, lớp Alphaproteobacteria, ngành Proteobacteria, giới Bacteria Sinh vật cho protein Cry3Bb1 a Tên thông thường: Vi khuẩn Bacillus thuringiensis b Tên khoa học: Vi khuẩn Bacillus thuringiensis c Vị trí phân loại: Vi khuẩn Bacillus thuringiensis thuộc chi Bacillus, họ Bacillaceae, Bacillales, lớp Bacilli, ngành Firmicutes, giới Bacteria Thông tin lịch sử tự nhiên liên quan đến an toàn thực phẩm thức ăn chăn nuôi Protein CP4 EPSPS sinh từ chủng vi khuẩn Agrobacterium sp CP4 có tính chống chịu cao với ức chế glyphosate có hiệu xúc tác cao so với hầu hết protein EPSPS chống chịu glyphosate khác (Barry cộng sự, 1992; Padgette cộng sự, 1996a) Protein CP4 EPSPS đại diện cho số nhiều protein EPSPS có tự nhiên CP4 EPSPS enzyme EPSPS thực vật có chức tương tự trừ khả chống chịu glyphosate Enzyme EPSPS tham gia vào đường chuyển hóa shikimate nhằm sinh tổng hợp axit amin thơm thực vật vi sinh vật (Levin Sprinson, 1964; Steinrücken Amrhein, 1980) Do vậy, enzyme hoạt động tìm thấy rộng rãi thực phẩm thức ăn chăn ni có nguồn gốc từ thực vật vi sinh vật Protein CP4 EPSPS đánh giá an toàn trong sản phẩm trồng Roundup Ready Monsanto đăng ký với Bộ Thực phẩm Dược phẩm Hoa Kỳ (FDA) (phần sinh vật cho gen) từ năm 1996 Cục Bảo vệ Môi trường Hoa Kỳ (EPA) ban hành quy chế miễn trừ giới hạn dư lượng tối đa CP4 EPSPS vật liệu di truyền chúng loại trồng (US EPA, 1996) Sinh vật cho gen mã hóa protein Cry3Bb1, vi khuẩn Bacillus thuringiensis thương mại hóa phổ biến Hoa Kỳ từ năm 1958 để sản xuất sản phẩm thuốc trừ sâu vi sinh Độc tố cực thấp thuốc trừ sâu B.t động vật có vú cơng bố nhiều nghiên cứu tính an tồn, khơng có trường hợp có phản ứng dị ứng với protein Cry sản phẩm thuốc B.t suốt 50 năm sử dụng Phun B.t dạng bào tử có lịch sử sử dụng an toàn lâu dài biện pháp quản lý sâu hại nông nghiệp, đặc biệt trang trại sản xuất sản phẩm hữu (Cannon, 1993; WHO, 1999; U.S EPA, 1988) Thuốc trừ sâu vi sinh B.t có chứa protein Cry3 sử dụng 30 năm, đối tượng kiểm tra tính độc kỹ càng, kết cho thấy khơng có ảnh hưởng bất lợi tới sức khoẻ người động vật (Baum cộng sự, 1999; Betz cộng sự, 2000; McClintock cộng sự, 1995; Mendelsohn cộng sự, 2003; U.S EPA, 2001b; 2005) Tại Hoa Kỳ, Bộ Thực phẩm Dược phẩm (FDA) ban hành quy chế miễn trừ giới hạn dư lượng tối đa cho chế phẩm thuốc trừ sâu B.t đầu tiên1 vào năm 1960 sau thực chương trình đánh giá độc tính khả lây nhiễm EPA xây dựng quy chế miễn trừ đánh giá dư lượng tối đa riêng cho protein Cry (như Cry1Ab, Cry1Ac, Cry2Ab2, Cry3Bb1) biểu trồng công nghệ sinh học (U.S EPA, 1996; U.S EPA, 1997; U.S EPA, 2001a) Kết luận chắn không gây hại kết miễn trừ giới hạn dư lượng tối đa hàng loạt hỗn hợp B.t protein Cry thực phẩm thức ăn chăn nuôi dựa kết khơng tìm ảnh hưởng bất lợi động vật có vú hàng loạt nghiên cứu độc lý Kết luận khẳng định lịch sử 50 năm sử dụng an tồn nơng nghiệp (McClintock cộng sự, 1995) Khơng có ảnh hưởng bất lợi biết đến xảy cho người suốt thời gian sử dụng lâu dài (U.S EPA, 1998) Thông tin chất chống dinh dưỡng, độc tố chất gây dị ứng tự nhiên Các sinh vật cho gen, chủng vi khuẩn Agrobacterium sp CP4 cho gen cp4 epsps vi khuẩn Bacillus thuringiensis cho gen cry3Bb1 nhân tố gây bệnh, có Cry1Ab Cry 1Ac thành phần thuốc trừ sâu vi sinh Dipel® protein chimeric Cry1Ac/Cry1F thành phần thuốc trừ sâu vi sinh Lepinox® (Ecogen Inc.) Gen cry3Bb1 từ B thuringiensis kumamotoensis cp4 epsps từ chủng Agrobacterium CP4 Gắn plasmid vector PV-ZMIR39 vào E coli chuyển sang chủng Agrobacterium tumefaciens ABI Biến nạp phôi chưa trưởng thành mô ngô lai A x HiII Agrobacterium tumefaciens ABI mang plasmid PV-ZMIR39 Chọn lọc kiện biến nạp cách nuôi tế bào mang gen cp4 epsps cry3Bb1 mơi trường có chứa glyphosate Tạo ngơ biến nạp Đánh giá biến nạp khả kháng sâu chống chịu thuốc trừ cỏ glyphosate Lai chéo giống ngô khác đánh giá đặc tính nơng học hiệu quy mô đồng ruộng Lựa chọn MON 88017 để sử dụng cho thương mại hóa Khảo nghiệm đồng ruộng nghiên cứu phòng thí nghiệm để minh chứng tính an tồn với sức khỏe người an tồn mơi trường Các thử nghiệm đánh giá giá trị thương mại MON 88017 Hình Quy trình phát triển chọn lọc tạo kiện MON 88017 10 Bảng Tổng hợp nguyên tố di truyền vector PV-ZMIR39 Nguyên tố di truyền LB (Bờ Trái) Các nguyên tố di truyền cấu trúc biểu cp4 epsps Vị trí (bp) Nguồn cho Chức Nguồn tham khảo 12067-12090 Plasmid Ti Octopine pTi15955 Trình tự chèn 12091-12364 Trình tự chèn P-ract1 12365-12 13 - 946 ract1 intron 947 - 1407 Trình tự chèn CTP2 1408-1423 1424 -1651 cp4 epsps 1652-3019 Trình tự chèn NOS 3’ 3020-3031 3032-3287 Agrobacteriu m Tổng hợp Gen actin gạo Gen actin gạo Tổng hợp Arabidopsis thaliana Chủng vi khuẩn Agrobacteriu m sp CP4 Tổng hợp Agrobacteriu m tumefaciens Trình tự chèn 3288-3320 Tổng hợp Cần thiết cho trình vận chuyển T-DNA từ plasmid cotopine Ti, pTi15955 Polylinker Polylinker Promoter Intron Polylinker Trình tự peptide vận chuyển tới lục lạp Trình tự mã hóa cho protein CP4 EPSPS tự nhiên Polylinker Vùng khơng dịch mã đầu 3’ trình tự mã hóa nopaline synthase (NOS), kết thúc trình phiên mã điều khiển q trình polyadenyl hóa Polylinker (Barker cộng sự, 1983) (Barker cộng sự, 1983) (McElroy cộng sự, 1990) (McElroy cộng sự, 1991) (Klee cộng sự, 1987) (Padgette cộng sự, 1996) (Bevan cộng sự, 1983) 11 Bảng (tiếp) Tổng hợp nguyên tố di truyền vector PV-ZMIR39 Nguyên tố di truyền P-e35S Trình tự chèn Đầu dẫn wt CAB Trình tự chèn ract1 intron Trình tự chèn cry3Bb1 Trình tự chèn tahsp17 3’ Trình tự chèn RB (Bờ Phải) Các nguyên tố di truyền cấu trúc biểu cry3Bb1 Vị trí (bp) Nguồn tham khảo Nguồn cho Chức 3321-3933 Vi rút gây Promoter với vùng tăng (Odell cộng sự, khảm súp lơ cường nhân đôi 1985) (Kay cộng sự, 1987) 3934-3957 Tổng hợp Polylinker 3958-4028 Lúa mì Đầu dẫn không dịch mã (Lamppa cộng sự, 1985) đầu 5’ protein liên kết với chlorophyll a/b từ lúa mì 4029-4056 Tổng hợp Polylinker 4057-4517 gene actin từ Intron (McElroy cộng lúa gạo sự, 1991) 4518-4533 Tổng hợp Polylinker 4534-6495 Bacillus Trình tự mã hóa cho (Romano, 2002) thuringiensis biến thể tổng hợp subsp protein Cry3Bb1 kumamotoensis 6496-6510 Tổng hợp Polylinker 6511-6744 Protein sốc Vùng khơng dịch mã (McElwain nhiệt từ lúa mì đầu 3’ trình tự mã Spiker, 1989) hóa protein sốc nhiệt 17.3 lúa mì có vai trò kết thúc phiên mã điều khiển q trình polyadenyl hóa Polylinker (Depicker cộng 6745-6840 Từ E coli có nguồn gốc sự, 1982) tổng hợp 6841-6865 Plasmid Ti Trình tự Bờ Phải cần (Depicker cộng Nopaline, thiết cho trình vận sự, 1982) pTiT37 chuyển T-DNA từ plasmid Ti nopaline, pTiT37 12 Bảng (tiếp) Tổng hợp nguyên tố di truyền vector PV-ZMIR39 Các nguyên tố di truyền cho biểu plasmid E coli Nguyên tố di Vị trí (bp) Nguồn tham khảo truyền Nguồn cho Chức Trình tự chèn 6866-7350 Tổng hợp Polylinker (Depicker cộng sự, 1982) (Sutcliffe, 1979) (Fling cộng sự, 1985) aad 7351-8139 Gen nhảy Tn7 Promoter vi khuẩn (Fling cộng sự, trình tự mã hóa cho 1985) enzyme biến đổi Mã ký hiệu aminoglycosidengân hàng gen 3’(9)-OX03043 nucleotidyltransferase từ gen nhảy Tn7 Trình tự chèn 8140-8681 Tổng hợp Polylinker (Fling cộng sự, 1985) (Sutcliffe, 1979) ori-322 8682-9310 Plasmid Gốc tái từ (Sutcliffe, 1979) pBR322 từ E pBR322 trì coli plasmid E coli Trình tự chèn 9311-9727 Plasmid pBR322 Tham gia vào plasmid (Sutcliffe, 1979) từ E coli (Giza Huang, ROP 9728-9919 E coli Trình tự mã hóa cho 1989) chất ức chế protein mồi để trì số plasmid E coli Trình tự chèn 9920-11182 Plasmid Plasmid DNA (Sutcliffe, 1979) pBR322 từ E coli Trình tự chèn 11183-11430 E coli Plasmid DNA (Stalker cộng sự, 1981) ori-V 11431-11824 Agrobacteriu, Gốc tái plasmid (Stalker cộng sự, plasmid RK2 Agrobacterium 1981) Plasmid DNA (Stalker cộng sự, Trình tự chèn 11825-11910 E coli & Tổng hợp 1981) Trình tự chèn 11911-12066 Agrobacterium Trình tự DNA (Barker cộng sự, 1983) 13 B Thông tin kiện ngô MON 88017 Thành phần dinh dưỡng tính an tồn kiện ngơ MON 88017 Từ quan điểm đánh giá an toàn, qua phân tích thành phần hợp chất có hạt thân ngơ qua phân tích hàm lượng dinh dưỡng hạt ngô khẳng định kiện MON 88017, ngồi đặc tính chuyển vào, khơng làm thay đổi thành phần hợp chất có hạt, thân giá trị dinh dưỡng hạt kiện so với đối chứng (xem mục V.1, Báo cáo đánh giá rủi ro) Trên sở nguyên tắc tương đương Tổ chức Y tế Thế giới (WHO), Tổ chức Hợp tác Phát triển kinh tế (OECD), Tổ chức Nông nghiệp lương thực Liên hợp quốc (FAO), kết phân tích thành phần hợp chất hỗ trợ kết luận kiện MON 88017 an toàn bổ dưỡng giống ngô truyền thống Thông tin đoạn gen chèn vào tạo kiện ngô MON 88017 Phân tích lai Southern phân tích đặc điểm phân tử MON 88017 cho kết luận sau: 1) kiện ngô MON 88017 chứa đoạn DNA chèn vào; 2) đoạn gen chèn vào bảo toàn nguyên vẹn nguyên tố di truyền thiết kế; 3) đoạn gen chèn vào không bao gồm khung backbone plasmid dự kiến khơng có protein khác tổng hợp từ đoạn gen chèn vào; 4) kiện ngô MON 88017 mang vị trí hệ gen ổn định di truyền đoạn gen chèn vào khẳng định qua hệ, đảm bảo di truyền ổn định đặc tính chuyển vào kiện MON 88017 Giải trình tự đoạn chèn vùng DNA chặn liền kề khẳng định xếp nguyên tố đoạn chèn vào giống plasmid PV-ZMIR39 Thêm vào đó, giải trình tự DNA khẳng định nguyên tố di truyền đoạn chèn vào ngun vẹn trình tự đoạn chèn vào giống với trình tự plasmid PV-ZMIR39 Mơ tả đặc điểm kiểu hình tính trạng Ngơ MON 88017 có đặc điểm hình thái tương tự ngơ truyền thống ngoại trừ đặc tính chống chịu glyphosate biểu protein CP4 EPSPS đặc tính kháng sâu hại rễ nhờ biểu protein Cry3Bb1 Hiện trạng cấp phép kiện ngơ MON 88017 tồn cầu Được chọn tạo thành cơng năm 2005, tính đến năm 2013, kiện MON 88017 17 quốc gia phê chuẩn sử dụng làm thực phẩm, thức ăn chăn nuôi bao gồm Hoa Kỳ, Australia/New Zealand, Argentina, Brazil, Canada, Trung Quốc, Columbia, Liên minh Châu Âu, Honduras, Nhật Bản, Hàn Quốc, Mexico, Philippines, Liên Bang Nga, Singapore, Nam Phi, Đài Loan 14 V ĐÁNH GIÁ NGUY CƠ ẢNH HƯỞNG CỦA SỰ KIỆN NGÔ MON 88017 ĐỐI VỚI SỨC KHỎE CON NGƯỜI VÀ VẬT NUÔI So sánh khác biệt thành phần hợp chất hàm lượng dinh dưỡng kiện ngô MON 88017 thực vật nhận gen Phân tích thành phần hợp chất việc quan trọng trình đánh giá an tồn Mục đích phân tích để đánh giá xem kiện ngơ MON 88017 ngồi đặc tính chủ đích đưa vào – có thay đổi thành phần so với ngô truyền thống hay khơng Thành phần hợp chất phân tích bao gồm: • Proximates: protein, chất béo, tro, độ ẩm thân hạt; • Chất xơ: chất xơ tẩy rửa axit (ADF), chất xơ tẩy rửa trung tính (NDF) thân hạt; • Chất khống: phospho, canxi, kali, magie, sắt, đồng, mangan kẽm hạt; • Thành phần axit amin: thành phần axit amin so với tổng lượng protein hạt; • Các axít béo: Tỷ lệ axit béo hạt; • Vitamin E, axit phytic chất ức chế trypsin hạt; • Chất trao đổi thứ cấp: axit ferulic, axit p-coumaric raffinose Tổng cộng tiến hành phân tích 77 thành phần khác bao gồm thân 68 hạt Có 15 chất phân tích với 50% mẫu quan sát có giá trị nằm giới hạn định lượng (LOQ) nên loại bỏ khỏi phân tích thống kê Do đó, có 62 thành phần phân tích thống kê bao gồm thân 53 hạt để đánh giá tính tương đương thành phần với MON 88017 Phân tích thống kê liệu thành phần hợp chất tiến hành sử dụng phương pháp phân tích phương sai mơ hình hỗn hợp phép phân tích tiến hành dựa số liệu điểm khảo nghiệm riêng rẽ số liệu gộp điểm điểm khảo nghiệm Sự sai khác có ý nghĩa thống kê xác định mức sai khác 5% (p0,05) MON 88017 đối chứng truyền thống không chuyển gen 232 tổng số 248 so sánh Khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê thành phần tìm thấy thân kiện ngơ MON 88017 đối chứng Trong hạt, khác biệt có ý nghĩa thống kê tìm thấy thành phần 16:0 axit palmitic, 18:1 axit oleic, 18:3 axit linolenic, 20:0 axit arachidic, đồng, methionine, độ ẩm, niacin, serine (riêng rẽ phép phân tích so sánh); 18:2 axit linoleic (trong ba phép phân tích so sánh); vitamin B1 (trong bốn phép phân tích so sánh) Tuy nhiên tất giá trị có sai khác so với đối chứng nằm khoảng giá trị biến động công bố tài liệu tham khảo hạt ngơ nói chung nằm khoảng dung sai 99% Do khác biệt khơng có ý nghĩa sinh học Dựa vào liệu kết luận kiện MON 88017 có thành phần tương tự với giống ngơ có mặt thị trường Trên sở nguyên tắc tương đương Tổ chức Y tế Thế giới (WHO), Tổ chức Hợp tác Phát triển kinh tế (OECD), Tổ chức Nông nghiệp lương thực Liên hợp quốc (FAO), liệu hỗ trợ kết luận kiện ngơ MON 88017 an tồn tương tự ngô truyền thống Đánh giá khả chuyển hóa thành phần dinh dưỡng, đặc biệt chất sử dụng làm thực phẩm/thức ăn chăn ni Kết phân tích thành phần 77 hợp chất hàm lượng dinh dưỡng có hạt thân kiện ngô MON 88017 khẳng định tương đương thành phần hợp chất dinh dưỡng so với ngô truyền thống không chuyển gen (xem mục V.1 Báo cáo đánh giá rủi ro) Protein CP4 EPSPS Cry3Bb1 sản phẩm giải mã cấu trúc biểu gen cp4 epsps có nguồn gốc từ chủng vi khuẩn Agrobacterium sp CP4 gen cry3Bb1 có nguồn gốc từ vi khuẩn Bacillus thuringiensis Các vi sinh vật cho gen có lịch sử sử dụng an tồn, khơng phải chất độc, chất gây dị ứng hay gây ảnh hưởng bất lợi đến sức khỏe người vật nuôi Chủng vi khuẩn Agrobacterium sp CP4 đánh giá an toàn trong sản phẩm trồng Roundup Ready Monsanto đăng ký với Bộ Thực phẩm Dược phẩm Hoa Kỳ (FDA) (phần sinh vật cho gen) Cục Bảo vệ Môi 16 trường Hoa Kỳ (EPA) ban hành quy chế miễn trừ giới hạn dư lượng tối đa CP4 EPSPS vật liệu di truyền chúng loại trồng cơng nghệ sinh học (US EPA, 1996) Đánh giá tồn diện tính an tồn protein Cry khác biểu trồng công nghệ sinh học công bố (Betz cộng sự, 2000) Vì kết luận q trình trao đổi chất, chuyển hóa ngơ MON 88017 tương tự ngơ truyền thống có giá trị dinh dưỡng tương tự ngô truyền thống Đánh giá khả gây độc, gây dị ứng chất sử dụng làm thực phẩm thức ăn chăn nuôi Trong trình phát triển sản phẩm MON 88017, protein CP4 EPSPS Cry3Bb1 đánh giá chi tiết nguy gây độc, gây dị ứng dựa theo hướng dẫn đánh giá CODEX Theo Codex (Codex, 2009), protein chất gây độc nếu: 1) Protein có lịch sử sử dụng an tồn; 2) Protein khơng có tương đồng cấu trúc so với chất độc với protein có hoạt động sinh học ảnh hưởng bất lợi đến sức khoẻ người động vật; 3) Protein khơng gây độc cấp tính động vật có vú Tương tự theo Codex định nghĩa khả không tiềm ẩn nguy gây dị ứng protein bao gồm: 1) Protein phân lập từ nguồn khơng gây dị ứng; 2) Protein không chiếm tỷ lệ lớn tổng lượng protein; 3) Protein khơng có tương đồng trình tự axit amin với chất gây dị ứng công bố; 4) Protein dễ dàng bị phân giải dịch dày mô Protein CP4 EPSPS Cry3Bb1 sinh ngơ MON 88017 khẳng định có nguồn gốc từ lồi vi sinh vật cho có nguồn gốc tự nhiên lịch sử sử dụng an tồn Phân tích tin sinh học so sánh với sở liệu TOX_2013 (cơ sở liệu chất độc) AD_2013 (cơ sở liệu chất gây dị ứng, gliadin glutenin) cho thấy protein CP4 EPSPS Cry3Bb1 khơng có tương đồng trình tự axit amin với chất độc, gây dị ứng, gliadin glutenin có ảnh hưởng bất lợi sức khỏe người vật nuôi Các protein CP4 EPSPS Cry3Bb1 khơng gây độc cấp tính thử nghiệm chuột Hơn protein chiếm tỷ lệ nhỏ thành phần protein hạt ngô MON 88017 (protein CP4 EPSPS chiếm ~0,0046% protein Cry3Bb1 chiếm 17 0,01199%) protein CP4 EPSPS Cry3Bb1 bị phân giải nhanh vòng 15 giây dịch dày mô Thông tin số liệu cung cấp thành phần hợp chất, khả gây dị ứng, ngộ độc hỗ trợ việc kết luận thực phẩm thức ăn chăn nuôi có nguồn gốc từ kiện ngơ MON 88017 an tồn có giá trị dinh dưỡng tương tự ngơ truyền thống Đánh giá khả hình thành hợp chất mới, khả gây bệnh tác động bất lợi khác đến sức khỏe người vật ni Kết phân tích thành phần 77 hợp chất hàm lượng dinh dưỡng có hạt thân kiện ngô MON 88017 khẳng định tương đương thành phần hợp chất dinh dưỡng so với ngô truyền thống không chuyển gen (tham khảo mục V.1 Báo cáo đánh giá rủi ro) Protein CP4 EPSPS Cry3Bb1 sản phẩm giải mã cấu trúc biểu gen cp4 epsps có nguồn gốc từ chủng vi khuẩn Agrobacterium sp CP4 gen cry3Bb1 có nguồn gốc từ vi khuẩn Bacillus thuringiensis Các lồi vi sinh vật cho gen tìm thấy phổ biến đất, vùng rễ trồng không gây bệnh không gây dị ứng cho người động vật Phân tích tin sinh học thành phần hợp chất cho thấy khơng có tương đồng trình tự axit amin protein CP4 EPSPS Cry3Bb1 kiện MON 88017 với khoảng 8.881 chất gây độc (trong TOX_2013), 1.630 chất gây dị ứng, gliadin glutenin (trong AD_2013) công bố sở liệu sở để kết luận kiện MON 88017 không nguy gây độc, gây dị ứng sử dụng làm thực phẩm thức ăn chăn nuôi so sánh với ngô truyền thống khơng chuyển gen Phân tích lai Southern sử dụng để phân tích đặc điểm phân tử MON 88017 cho kết quả: 1) kiện ngô MON 88017 chứa đoạn DNA chèn vào; 2) đoạn gen chèn vào bảo toàn nguyên vẹn nguyên tố di truyền thiết kế; 3) đoạn gen chèn vào không bao gồm khung backbone plasmid dự kiến khơng có protein khác tổng hợp từ đoạn gen chèn vào; 4) kiện ngô MON 88017 mang vị trí hệ gen ổn định di truyền đoạn gen chèn vào khẳng định qua hệ, đảm bảo di truyền ổn định đặc tính chuyển vào kiện MON 88017 18 Giải trình tự đoạn chèn vùng DNA chặn liền kề khẳng định xếp nguyên tố đoạn chèn vào giống plasmid PV-ZMIR39 Thêm vào đó, giải trình tự DNA khẳng định nguyên tố di truyền đoạn chèn vào nguyên vẹn trình tự đoạn chèn vào giống với trình tự plasmid PV-ZMIR39 Kết đánh giá mức độ gây độc cấp tính CP4 EPSPS Cry3Bb1 kiện MON 88017 thử nghiệm chuột phân tích cho thấy protein khơng độc cấp tính tác động bất lợi khác chuột thử nghiệm Hơn nữa, protein CP4 EPSPS Cry3Bb1 kiện MON 88017 bị phân hủy nhanh dịch dày vòng 15 giây chiếm tỷ lệ nhỏ tổng hàm lượng protein hạt ngô MON 88017 (Protein CP4 EPSPS chiếm ~0,0046% protein Cry3Bb1 chiếm 0,01199%) Như vậy, thông tin số liệu cung cấp thành phần hợp chất, khả gây dị ứng, ngộ độc nêu hỗ trợ việc kết luận thực phẩm thức ăn chăn nuôi có nguồn gốc từ kiện ngơ MON 88017 an tồn tương tự ngơ truyền thống 19 VI ĐỀ XUẤT CÁC BIỆN PHÁP QUẢN LÝ RỦI RO TIỀM ẨN CỦA SỰ KIỆN NGÔ MON 88017 ĐỐI VỚI SỨC KHỎE CON NGƯỜI VÀ VẬT NI Sự kiện ngơ MON 88017 với thay đổi di truyền cách có chủ đích làm tăng khả chống chịu thuốc trừ cỏ gốc glyphosate kháng sâu hại rễ so với ngô truyền thống không làm thay đổi thành phần hợp chất giá trị dinh dưỡng kiện ngô biến đổi gen so với ngô truyền thống Mặt khác, đánh giá khả chuyển hóa thành phần dinh dưỡng, khả gây độc, khả gây dị ứng khả hình thành hợp chất mới, khả gây bệnh tác động bất lợi khác đến sức khỏe người vật ni khẳng định mức độ an tồn kiện ngô biến đổi gen so với ngô truyền thống Vì vậy, sau cấp Giấy xác nhận đủ điều kiện sử dụng làm thực phẩm thức ăn chăn nuôi, việc quản lý rủi ro kiện ngô thực tương tự quản lý ngơ truyền thống thương mại hóa thị trường Việt Nam Tuân thủ quy định hành nhà nước quản lý thương mại sản phẩm biến đổi gen, đảm bảo mức độ an toàn sản phẩm sức khỏe người vật nuôi, công ty TNHH Dekalb Việt Nam đề xuất chương trình quản lý rủi ro kiện ngô biến đổi gen MON 88017 sau đưa vào thị trường Việt Nam, cụ thể sau: Quản lý tuân thủ Công ty đảm bảo tuân thủ quy định nhà nước quản lý thương mại sản phẩm biến đổi gen: - Tuân thủ quy định thông tư luật hành: + Thông tư số 02/2014/TT-BNNPTNT ngày 24/01/2014 Bộ Nông nghiệp PTNT; + Nghị định số 69/2010/NĐ-CP ngày 21/6/2010 an toàn sinh học sinh vật biến đổi gen, mẫu vật di truyền sản phẩm sinh vật biến đổi gen; Nghị định số 108/2011/NĐ-CP ngày 30/11 sửa đổi số điều Nghị định 69/2010/NĐ-CP; + Nghị định 38/2012/NĐ-CP ngày 25/4/2012 Chính phủ quy định chi tiết thi hành số điều Luật an toàn thực phẩm; + Luật an toàn thực phẩm; + Quy định sản xuất, kinh doanh sản phẩm Việt Nam 20 Giám sát an toàn thực phẩm, xử lý cố, biện pháp khắc phục Thường xuyên theo dõi thông tin giới nước tính an tồn sản phẩm sức khỏe người vật nuôi Nếu có chứng khoa học liên quan đến an tồn sức khỏe người vật ni kiện ngô biến đổi gen này, công ty kịp thời xử lý sau: - Lập tức báo cáo Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn; Phối hợp, tuân thủ yêu cầu đơn vị chức liên quan xử lý vấn đề theo quy định Chính phủ Việt Nam; Lập tức kết hợp với đơn vị chức công ty nhập truy xuất, phong tỏa thu hồi sản phẩm có mặt thị trường; Thơng cáo báo chí phương tiện thông tin đại chúng Báo cáo: - Báo cáo định kỳ: Định kỳ hàng năm báo cáo văn gửi tới Bộ Nông nghiệp Phát triển nơng thơn cập nhật tình hình tin tức an tồn thực phẩm thức ăn chăn ni sản phẩm + Cập nhật kết tin sinh học sở liệu chất độc chất gây dị ứng, + Cập nhật thông tin khoa học liên quan đến an toàn thực phẩm thức ăn chăn nuôi sản phẩm ngô MON 88017 - Báo cáo khẩn cấp: Lập tức báo cáo Bộ Nông nghiệp Phát triển nơng thơn có chứng khoa học liên quan đến an toàn sức khỏe người vật nuôi kiện ngô biến đổi gen 21 VII KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận Sự kiện ngô MON 88017 chống chịu thuốc trừ cỏ glyphosate kháng sâu đục rễ ngô công ty Monsanto Hoa Kỳ phát triển Thông tin liệu cung cấp hồ sơ đăng ký chứng minh thực phẩm thức ăn chăn ni có nguồn gốc từ kiện ngơ MON 88017 an tồn có đầy đủ dinh dưỡng thực phẩm thức ăn chăn ni có nguồn gốc từ ngơ truyền thống trồng có lịch sử sử dụng phổ biến an toàn làm thực phẩm thức ăn chăn nuôi Kết luận dựa tiêu chí sau: Tính an tồn sinh vật cho gen, chủng vi khuẩn Agrobacterium sp CP4 cho protein CP4 EPSPS vi khuẩn Bacillus thuringiensis cho protein Cry3Bb1 tồn phổ biến đất vùng rễ trồng Protein CP4 EPSPS đại diện cho nhóm enzyme EPSPS tham gia vào đường chuyển hóa shikimate nhằm sinh tổng hợp axit amin thơm thực vật vi sinh vật Bacillus thuringiensis sử dụng thập kỷ nông nghiệp làm thuốc trừ sâu vi sinh an toàn hiệu Tới khơng có báo cáo ảnh hưởng bất lợi protein sức khỏe người động vật Mô tả chi tiết đặc điểm phân tử đoạn DNA chèn vào cho thấy a) kiện ngô MON 88017 chứa đoạn DNA chèn vào; b) đoạn gen chèn vào bảo toàn nguyên vẹn nguyên tố di truyền thiết kế; c) đoạn gen chèn vào không bao gồm khung backbone plasmid dự kiến protein khác tổng hợp từ đoạn gen chèn vào; d) kiện ngô MON 88017 mang vị trí hệ gen ổn định di truyền đoạn gen chèn vào khẳng định qua hệ, đảm bảo di truyền ổn định đặc tính chuyển vào kiện MON 88017 Protein CP4 EPSPS Cry3Bb1 tự nhiên có lịch sử sử dụng an tồn Dữ liệu phân tích tin sinh cho thấy Protein CP4 EPSPS Cry3Bb1 chất độc hay chất gây dị ứng, dễ dàng phân giải dịch dày mơ (trong vòng 15 giây), khơng có khả gây độc cấp tính gây ảnh hưởng bất lợi tới chuột • Trình tự axit amin protein CP4 EPSPS Cry3Bb1 không tương đồng với chất gây độc, chất gây dị ứng, glutenin hay gladine công bố cho 22 phép kết luận không tiềm ẩn nguy gây ngộ độc gây dị ứng cho người vật nuôi sử dụng làm thực phẩm thức ăn chăn ni; • Protein CP4 EPSPS Cry3Bb1 kiện MON 88017 bị phân hủy nhanh chóng vòng 15 giây dịch dày mơ khơng gây ảnh hưởng độc cấp tính động vật; • Hàm lượng protein CP4 EPSPS Cry3Bb1 chiếm tỷ lệ nhỏ so tổng hàm lượng protein hạt (protein CP4 EPSPS chiếm ~0,0046% protein Cry3Bb1 chiếm 0,01199%) Kết phân tích thành phần hợp chất hạt thân MON 88017 cho thấy có tương đồng với ngơ truyền thống, chất phân tích nằm khoảng biến động tự nhiên với khoảng dung sai 99% giống thương mại tham khảo danh sách công bố tài liệu tham khảo Sự kiện MON 88017 biểu protein chuyển nạp giúp chống chịu thuốc trừ cỏ glyphosate kháng sâu hại rễ khơng làm thay đổi chuyển hóa thành phần chất hay tăng cường khả hình thành hợp chất có khả gây bệnh hay tác động bất lợi khác đến sức khỏe người vật ni; Tính đến năm 2013, kiện MON 88017 17 quốc gia phê chuẩn sử dụng làm thực phẩm, thức ăn chăn nuôi trồng trọt Tất liệu chứng minh thuyết phục cho kết luận thực phẩm thức ăn chăn nuôi có nguồn gốc từ MON 88017 an tồn ngô truyền thống 23 Đề nghị Trên sở kết luận từ đánh giá an toàn thực phẩm, thức ăn chăn nuôi kiện MON 88017 khẳng định mức độ an toàn giá trị dinh dưỡng kiện ngô tương tự ngô truyền thống Cơng ty TNHH Dekalb Việt Nam kính đề nghị Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn thẩm định cấp Giấy xác nhận đủ điều kiện sử dụng làm thực phẩm thức ăn chăn nuôi kiện ngô chuyển gen MON 88017 chống chịu thuốc trừ cỏ glyphosate kháng sâu hại rễ ngô Công ty TNHH Dekalb Việt Nam cam kết tuân thủ nghiêm ngặt quy định hành Việt Nam an tồn thực phẩm thức ăn chăn ni thực vật biến đổi gen, kịp thời báo cáo Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn phối hợp xử lý phát sinh vấn đề liên quan đến an tồn sức khỏe người vật ni Tp Hồ Chí Minh, ngày 30 tháng năm 2015 24