THỰC TẬP SINH LÝ ĐỘNG VẬT

I. Sự hấp thu các chất dinh dưỡng ở ruột non Hấp thu là sự vận chuyển các sản phẩm tiêu hoá từ lòng ống tiêu hoá vào máu, tức là đưa vật chất từ môi trường ngoài vào trong cơ thể bổ sung cho phần vật chất đã bị tiêu hao trong quá trình chuyển hoá và phát triển cơ thể. Do đó hấp thu là chức năng mang tính chất quyết định trong việc thực hiện các chức năng chung của bộ máy tiêu hoá. Quá trình hấp thu ở ruột tiến hành rất phức tạp. Các quy luật hoá học (lọc, khuyếch tán, thẩm thấu, hoà tan…) giữ vai trò quan trọng. Tuy nhiên nếu chỉ căn cứ vào hiện tượng lý hoá đơn thuần thì khó giải thích hiện tượng hấp thu. Cấu tạo ruột non: + Bề mặt niêm mạc ruột có rất nhiều nếp nhăn, trên các nếp nhăn có nhiều nhung mao: 2500cm2, tăng bề mặt hấp thu lên 2025 lần. + Trên mặt nhung mao có rất nhiều tế bào biểu mô, mỗi tế bào biểu mô lại có rất nhiều vi nhung mao : 30001cm2, tằng bề mặt hấp thu lên 30 lần + Dưới lớp biểu mô của nhung mao có một mạng lưới mạch quản dày đặc để hấp thu các chất dinh dưỡng vào máu. Trong cơ thể, hấp thu là một quá trình sinh lý phức tạp. Nó chịu sự điều hoà của thần kinh và thể dịch.

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP I KHOA CHĂN NUÔI VÀ NI TRỒNG THUỶ SẢN BỘ MƠN HỐ SINH- SINH LÝ ĐỘNG VẬT THỰC TẬP SINH LÝ ĐỘNG VẬT Hà Nội – 2005 Bài I Sự hấp thu chất dinh dưỡng ruột non Hấp thu vận chuyển sản phẩm tiêu hố từ lòng ống tiêu hoá vào máu, tức đưa vật chất từ mơi trường ngồi vào thể bổ sung cho phần vật chất bị tiêu hao trình chuyển hố phát triển thể Do hấp thu chức mang tính chất định việc thực chức chung máy tiêu hố Q trình hấp thu ruột tiến hành phức tạp Các quy luật hoá học (lọc, khuyếch tán, thẩm thấu, hồ tan…) giữ vai trò quan trọng Tuy nhiên vào tượng lý hố đơn khó giải thích tượng hấp thu Cấu tạo ruột non: + Bề mặt niêm mạc ruột có nhiều nếp nhăn, nếp nhăn có nhiều nhung mao: 2500/cm2, tăng bề mặt hấp thu lên 20-25 lần + Trên mặt nhung mao có nhiều tế bào biểu mô, tế bào biểu mô lại có nhiều vi nhung mao : 3000/1cm2, tằng bề mặt hấp thu lên 30 lần + Dưới lớp biểu mơ nhung mao có mạng lưới mạch quản dày đặc để hấp thu chất dinh dưỡng vào máu Trong thể, hấp thu trình sinh lý phức tạp Nó chịu điều hồ thần kinh thể dịch Mục đích Chứng minh ruột non nơi hấp thu chất dinh dưỡng Số lượng hấp thu phụ thuộc vào: + Từng chất dinh dưỡng: đường, muối, nước, protein, lipit + Nồng độ chất dinh dưỡng: nồng độ muối khác nhau, thời gian hấp thu lượng hấp thu khác + Trạng thái sinh lý vật: no,đói khát Chuẩn bị - Động vật: thỏ - Bộ đồ mổ: Dao, kéo, panh, bàn mổ, khăn mổ, kim chỉ… - Hoá chất: + Nước + Đường Gluco 3% + Muối NaCl ‰ + Dung dịch MgSO4 bão hoà + Thuốc gây tê Novocain Thao tác Cố định thỏ bàn mổ Xác định đường trắng, dùng kéo cong cắt lông, sát trùng vị trí mổ (sát trùng theo đường mổ từ xuống xốy theo đường tròn đồng tâm từ ngồi vị trí mổ) Gây tê cục Novocain cho thỏ vị trí mổ Có hai cách gây tê cục : Tiêm mũi, kéo dài mũi tiêm, từ từ bơm thuốc ; tiêm làm nhiều điểm xung quanh vị trí mổ Lơi đoạn ruột non khoảng 40cm khỏi thành ruột Dùng thắt đoạn ruột thành đoạn riêng (năm nút thắt) Lần lượt bơm chất khác vào đoạn + Đoạn bơm : 10ml H2O + Đoạn bơm: 10ml NaCl 7‰ + Đoạn bơm: 10ml đường Glucose 3% + Đoạn bơm: 5ml dung dịch Mg bão hoà Nhét hết đoạn ruột vào ổ bụng ruột có nhu động nhiệt độ bình thường thể thỏ, sau 2h bỏ quan sát II Áp lực âm xoang màng ngực Phổi bao bọc hai lá: thành tạng, khoảng trống hai gọi xoang màng ngực áp lực xoang gọi áp lực xoang màng ngực Nhưng áp lực xoang màng ngực thấp so với áp suất khí gọi áp lực âm Nó hình thành áp suất khí quyển, áp suất tác dụng lên thành ngực qua vách phổi Nguyên nhân trực tiếp gây áp lực âm xoang màng ngực sức co đàn hồi phổi áp lực yếu tố đảm bảo hơ hấp bình thường phổi Mục đích Chứng minh áp lực xoang màng ngực nhỏ áp lực ngồi khí Hiểu ý nghĩa áp lực âm xoang màng ngực hô hấp Chuẩn bị - Động vật: thỏ - Bộ đồ mổ: Dao, kéo, panh, bàn mổ, khăn mổ, kim chỉ… - áp lực kế - ống thông lồng ngực Thao tác - Nối ống thông lồng ngực vào áp lực kế - Cố định thỏ bàn mổ Dùng dao cắt lớp da gian sườn (để lại lớp gian sườn trong) vị trí xương sườn Lấy ống thông cắm vào vết cắt, sau vít chặt kim loại vào sát da, thao tác phải thật nhanh để không khí bên ngồi khơng lọt vào xoang màng ngực - Quan sát áp lực xoang màng ngực: Nhìn vào áp kế thỏ hơ hấp mức nước áp lực kế dao động lên xuống nhánh áp lực kế phía thỏ ta thấy: thỏ hít vào mực nước áp lực kế tằng lên, thỏ thở mức nước áp lực kế lại giảm xuống Hiện tượng chứng tỏ áp lực xoang màng ngực nhỏ áp lực ngồi khơng khí III Đo dung tích sống phổi Khơng khí vào gồm có: + Khí lưu thơng: Là lượng khí hít vào bình thường bình thường Ngựa lần hít vào thở bình thường khoảng 5-6 lít khơng khí khơng khí + Khí dự trữ: lượng khí cố hít thêm vào sau hít bình thường Như ngựa sau hít vào bình thường 5-6 lít ngựa hít thêm 12lít khơng khí + Dung tích sống phổi biểu thị khối khơng khí thở thở tối đa sau hít vào tối đa Mục đích Kiểm tra đánh giá tiêu hơ hấp phổi động vật Chuẩn bị - Phế dung kế - Cồn, bông, nước Thao tác - Điều chỉnh phế dung khế vị trí số Dùng bơng tẩm cồn sát trùng đầu ống cao su - Xác định dung tích sống: Hít vào thật sâu, xong thở (cũng thật sâu) cách thổi qua ống cao su vào phế dung kế Đọc kết số ghi trục phế dung kế IV Tác dụng thần kinh giao cảm phó giao cảm lên tim Dựa vào nhiều đặc điểm cấu tạo, chức người ta chia thần kinh thực vật làm hai phần: hệ thần kinh giao cảm phó giao cảm Hệ thần kinh giao cảm có tác dụng làm tin đập nhanh, mạnh Hệ thần kinh phó giao cảm có tác dụng làm tim đập yếu, chậm Mục đích Quan sát ảnh hưởng thần kinh giao cảm phó giao cảm lên tim Chuẩn bị - Thỏ - Bộ đồ mổ: dao kéo, bơng, móc thuỷ tinh, cờ - Hoá chất: cồn Thao tác - Cố định thỏ bàn mổ Dùng kéo cong cắt lơng, sát trùng vị trí mổ (sát trùng theo đường mổ từ xuống xốy theo đường tròn đồng tâm từ ngồi vị trí mổ) - Rạch đường dài cổ vị trí khí quản Tách da kéo sang hai bên, tách lớp để lộ khí quản - Bộc lộ dây thần kinh giao cảm phó giao cảm Dây thần kinh phó giao cảm to dây thần kinh giao cảm chạy song song với động mạch Buộc dây thần kinh dao cảm phó giao cảm sợi - Cắm cờ vào xoang bao tim thỏ - Dùng kích điện, kích thích vào dây thần kinh giao cảm phó giao cảm - Quan sát biến động cờ (nhịp đập tim) BÀI I Tác dụng hormon thai lên buồng trứng Vào tuần đầu, máu động vật mang thai có chứa nhiều hormon Prolan, hormon chuyển vào nước tiểu,vì nước tiểu có hormon Mục đích Chứng minh động vật mang thai thai tiết hormon Prolan A-FSH hocmon kích thích nang trứng Prolan B – LH, hocmon kích thích hồng thể, cách tiêm nước tiểu cho động vật thí nghiệm gây ảnh hưởng đến buồng trứng làm bao nỗn chín gây động dục Chuẩn bị - Động vật: Thỏ > 2kg - Dụng cụ: Xilanh, kim tiêm,bơng cồn - Hóa chất: Huyết ngựa chửa nước tiểu phụ nữ có thai Thao tác - Tiêm vào tĩnh mạch tai thỏ khoảng 5ml nước tiểu động vật có thai Sau 24h tiêm lần Phải tiêm làm lần tiêm lần hàm lượng nước tiểu vào thể thỏ nhiều, dẫn đến ngộ độc nước tiểu - Sau 48h tiêm, mổ đường trắng hai hàng vú cuối tìm buồng trứng - Quan sát buồng trứng thấy lấm hạt nhỏ màu đỏ lên bao nỗn chín II Ảnh hưởng thiếu O2 thừa CO2 lên hô hấp thỏ Mục đích Quan sát ảnh hưởng việc thiếu O2 thừa CO2lên hô hấp Chuẩn bị - Động vật thí nghiệm: thỏ - Dụng cụ: ống thơng khí quản có đầu ống thuỷ tinh hình chữ T; trống Maray; bình thơng khí; bình vơi sode; bình đá vơi; trục quay; bút ghi - Hố chất: axit Clohidric Thao tác - Buộc thỏ nằm ngửa lên bàn mổ - Đặt ống thống khí thuỷ tinh với ống cao su vào mũi thỏ kẹp lại (để hở chút cho khơng khí qua) - Nối nhánh ống thuỷ tinh vào hệ thống ống cao su bình thơng khí, trống Maray bút ghi - Điều chỉnh bút ghi để ghi đồ thị hơ hấp bình thường + Quan sát ảnh hưởng thừa CO2 đến hơ hấp thỏ: Nối bình đá vơi (CaCO3) vào hệ thống bình thơng khí Cho vài giọt axit HCl vào bình đá vơi để tạo phản ứng: CaCO3 + 2HCl = CaCl2 + H2CO3 (CO2 + O2) Thỏ hít CO2 vào nen vận động hơ hấp trở nên sâu, mạnh, khó khăn Lấy bình đá vơi thỏ hơ hấp bình thường + Quan sát thiếu O2 Nối bình đá Sode với bình thơng khí Như thỏ thở lượng O bình Thỏ thở CO bình đá Sode hấp thu hết, nên ko có CO dư, lúc sau có tượng thiếu O2, quan sát tiếu O2 hô hấp thỏ III Tiêm truyền tĩnh mạch Mục đích Biết cách lấy máu xét nghiệm tiêu sinh lý Biết cách tiêmt truyền tĩnh mạch gia súc bị ốm Chuẩn bi - Động vật: Thỏ - Dụng cụ: Bông cồn, xilanh, kim tiêm - Hoá chất: đường Glucose Thao tác BÀI I Phản xạ tuỷ sống phân tích cung phản xạ Hệ thần kinh trung ương bao gồm não tuỷ sống Nó thống điều hoà hoạt động tất quan hệ thống thể, bảo đảm tác dụng qua lại thể với ngoại cảnh Phản xạ đáp ứng thể kích thích bên bên ngồi vào thụ quan, thực có tham gia hệ thần kinh trung ương Muốn thực phản xạ phải có cung phản xạ Cung phản xạ gồm có cấu tạo giải phẫu định: Thụ quan, nơron hướng tâm, trung tâm thần kinh, nơron ly tâm, quan đáp ứng Một khâu cung phản xạ bị tổn thương phản xạ Mục đích Quan sát phản xạ tuỷ sống (phản xạ không điều kiện) Chuẩn bị - Động vật: ếch - Dụng cụ: giá, đồ mổ ếch, dùi , bơng, giấy lọc, xơng - Hố chất: axit H2SO4 5%, nước, Novocain 3% Thao tác Cắt bỏ não ếch, luồn mũi kéo qua hàm ếch, lưỡi hai mắt Cắt bỏ hàm ếch ếch não (hay ếch tuỷ sống) Treo ếch giá dùng xông chọc qua hàm ếch, cố dịnh xông lên giá thí nghiệm Đợi cho ếch hết dãy giụa bắt đầu thí nghiệm a Quan sát phản xạ Nhúng chân ếch vào dung dịch H2SO4 5% Quan sát đáp ứng rửa chân Dùng mẩu giấy lọc nhúng vào dung dịch H 2SO4 5% dán lên vị trí bụng, ngực, đùi Quan sát đáp ứng rửa b Phân tích cung phản xạ Lấy kéo cắt da vòng quanh gối, lột bỏ da chân Nhúng chân da vào dung dịch H 2SO4 5% Quan sát đáp ứng rửa Dùng dao rạch lớp đùi bên kia, tìm dây thần kinh, dùng tẩm Novocain 3% đặt dây thần kinh sau vài phút nhúng chân ếch vào dung dịch H 2SO4 5% Quan sát đáp ứng rửa Dùng dùi chọc sâu vào tuỷ sống ếch Nhúng chân ếch vào dung dịch H 2SO4 5% Quan sát đáp ứng rửa II Ghi đồ thị hoạt động tim ếch Tim quan chủ yếu thực chức tuần hoàn máu, tim động vật có vú chia làm ngăn (2 tâm nhĩ, hai tâm thất), tim ếch có ngăn (2 tâm nhĩ tâm thất) Sự co giãn tim bao gồm: co giãn tâm nhĩ tâm thất, tim co gọi tâm thu, tim giãn gọi tâm trương Tim hoạt động co giãn có chu kỳ Mỗi chu kỳ có kỳ: Tâm nhĩ co, tâm nhĩ giãn, tâm thất co, tâm thất giãn, tim nghỉ 1.Mục đích Ghi đồ thị hoạt động tim ếch, phân tích chu kỳ hoạt động tim ếch Chuẩn bị - Động vật: ếch - Dụng cụ: đồ mổ ếch, bàn mổ, cặp tim, bút ghi, giá mắc bút ghi, trụ quay có giấy khói, dung dịch Ringer (0,6 - 0,65 g NaCl/100ml) Thao tác Phá tuỷ ếch: dùng dùi chọc tuỷ ếch, ếch hết cử động Buộc ếch nằm ngửa bàn mổ Cắt lồng ngực bộc lộ tim Cắt màng bao tim để lộ tim Quan sát thứ tự co bóp phận tim, tần số co bóp, màu sắc phần co giãn Đưa bàn mổ lên giá, dùng cặp tim cặp vào mỏm tim Điều chỉnh phận ghi, cho bút ghi vào sát trụ quay, cho trụ quay chạy Tim co giãn, kéo bút ghi lên xuống Ta ghi đồ thị tim trụ quay Ghi : Thỉnh thoảng nhỏ vài giọt dung dịch Ringie vào tim III Phân tích tính tự động tim Tim có tính tự động thể chỗ cắt đứt dây thần kinh chi phối tim hay tách tim khỏi thể tiếp tục co bóp Q trình tính chất sinh lý kể tính tự động tim phụ thuộc đáng kể vào nhiệt độ yếu tố khác 10 Cơ tiêu co tác dụng kích thích dòng điện sinh học (dòng điện động) phát sinh tiêu 1, thần kinh sinh hưng phấn truyền đến làm co III Ghi đồ thị co đơn giản Mục đích Chứng minh: kích thích đơn lẻ lên sợi thần kinh, co lần giãn kích thích liên tục nhiều lần, co giãn ghi đường ghi có kiểu cưa Khi kích thích liên tiếp với tần số cao, ta ghi dường ghi co cứng dạng đường thẳng Chuẩn bị - Sử dụng tiêu - thần kinh - Quả cân, móc cơ, bút ghi trụ quay Thao tác - Kẹp tiêu thần kinh lên giá Móc nối với hệ thống bút ghi, điều chỉnh trụ quay hoạt động - Tiến hành thí nghiệm: + Kích thích đơn lẻ lên sợi dây thần kinh: sau vài giây lại kích thích + Kích thích liên tục với tần số vừa phải + Kích thích liên tục với tần số mau 18 BÀI I Đếm hồng cầu Chức chủ yếu hồng cầu vận chuyển O CO2 thể Số lượng hồng cầu khác tuỳ vào loài động vật Mục đích Xác định số lượng hồng cầu có 1mm3 máu Chuẩn bị - Kính hiển vi, vật kính 10 - Buồng đếm huyết cầu Có hai loại buồng đếm thường dùng buồng đếm Niubaoơ buồng đếm Goriaep Nó có hình chữ nhật dày Đặt kính hiển vi thấy có cấu tạo sau: *Buồng đếm Niubaoơ: + Được chia làm ô vuông lớn; ô vuông lớn chia làm 16 vng trung bình; vng trung bình chia thành 16 ô vuông + Một ô vng có cạnh 1/20mm; diện tích vng là: 1/20x1/2= 1/400 mm2 + Trong ô vuông lớn góc có chia vng trung bình dùng để đếm bạch cầu, vng có chia trung bình để đếm 19 hồng cầu *Buồng đếm Goriaep: + Có nhiều vng trung bình, vng trung bình chia thành nhiều ô vuông Sự xếp ô xen kẽ + Kích thước vng giống buồng đếm Niubaoơ + Diện tích 1/400mm2 - ống trộn hồng cầu: ống thuỷ tinh có chỗ phồng thành bầu Trong bầu có viên nhựa màu đỏ đen Trên ống có khắc vạch 0,5; 1;101 - Dung dịch đếm hồng cầu : + Na2SO4 5g Tạo pH + NaCl 1g +HgCl 0,5g (diệt khuẩn) + Vài giọt Fuxin đỏ: chất thị màu + 200ml nước cất - Lá kính - Bơng Thao tác 20 giữ hình dạng hồng cầu - Bước (Lấy máu): Lấy máu rìa tai vật vào buổi sáng lúc vật chưa ăn không vận động Trước lấy máu phải dùng kéo cắt lơng rìa tai (đối với động vật có nhiều lơng tai) cho Dùng bơng tẩm cồn sát trùng chỗ lấy máu kim chích máu Chờ cồn khơ, lấy kim chích vào tĩnh mạch rìa tai Lau bỏ giọt máu để giọt máu sau chảy cho tròn Đặt ống trộn hồng cầu lên giọt máu với độ nghiêng 30 Hút máu đến vạch 0,5 (khơng lẫn bọt khí) Dùng bơng lau đầu ngồi ống trộn - Bước (Pha loãng): cho ống trộn vào lọ dung dịch pha loãng hồng cầu hút dung dịch lên đến vạch 101 Như ta độ pha loãng 200 lần Nếu hút máu đến vạch hút dung dịch đếm hồng cầu đến vạch 101 ta pha loãng 100 lần - Bước (Trộn máu): Dùng ngón tay bịt kín đầu ống trộn lắc nhẹ khoảng 20 lần để trộn máu dung dịch bầu ống trộn - Bước (Cho máu vào buồng đếm): Trước tiên miết kính lên mặt buồng đếm cho nghiêng buồng đếm mà kính khơng bị rơi Lắc trộn máu ống trộn bỏ vài giọt đầu nhỏ giọt vào rìa kính buồng đếm, theo mao dẫn dung dịch máu chảy khắp mặt buồng đếm - Bước (Đếm): Đặt buồng đếm lên kính hiển vi, điều chỉnh ánh snág vừa phải Tìm buồng đếm (các ô kẽ) quan sát cấu tạo chung, điều chỉnh kính để nhìn rõ đếm Đếm số hồng cầu nằm trung bình khu vực bng đếm (4 góc giữa) Trong trung bình đếm 16 theo thứ tự hình chữ chi Trong đếm tất hồng càu nằm gọn ô đến hồng cầu nằm cạnh cạnh phải hồng cầu nằm cạnh trái cạnh Đếm tất 80 - Bước (Tính): Tính số hồng cầu mm3 máu theo công thức: N= Trong đó: N: Số hồng cầu/ 1mm3 máu A: Số hồng cầu đếm 80 ô 1/4000 mm3: Thể tích vng = 1/400 (diện tích con) x 1/10 (khoảng cách từ bề mặt bng đếm lên kính) 200: Độ pha lỗng máu II Xác định hàm lượng Hemoglobin máu 21 Hemoglobin nằm hồng cầu; Nó loại Protein phức tạp, gồm có Globin Hem Chức chủ yếu hemoglobin vận chuyển O CO2 Hàm lượng Hemoglobin tỏngmáu phụ thuộc vào loài, tuổi, trạng thái sinh lý động vật xác định hàm lượn Hemoglobin phương pháp so màu huyết sắc kế Sali Nguyên tắc phương pháp hemoglobin máu dung dịch axit Clohidric chuyển thành Hematin nồng độ xác định Ngày người ta hay dùng quang điện tỷ sắc kế (photoelectrocolorimet) để xác định hàm lượng Hemoglobin có máu Phương pháp nhanh xác Mục đích Xác định hàm lượng Hemoglobin có máu Chuẩn bị - Động vật lấy máu, kim chích máu, bơng - Huyết sắc kế Sali gồm có: + Bộ phận giá + ống chứa dung dịch so màu chuẩn + ống để có khắc độ + ống hút máu có vạch + Đũa thuỷ tinh + Pipet hút axit + Pipet hút nước cất - Hoá chất: Axit HCl 0,1N, nước cất, cồn Thao tác - Dùng pipet hút dung dịch axit HCl 0,1N cho vào ống đến vạch - Chích máu tĩnh mạch rìa tai dùng ống hút máu máu, hút đến vạch 0,02 (khơng lẫn bọt khí) Lấy bơng lau máu bám xung quanh đầu ống hút - Cho ống hút máu vào ống đựng axit HCl (đầu ống hút chạm đáy ống giữa), thổi nhẹ cho máu nằm sát đáy ống Từ từ đưa Pipet lên, hts axit bên (phần suốt) để tráng ống hút máu (3 lần) Lắc nhẹ cho axit máu trộn vào Để yên phút cho Hemoglobin tác dụng với axit tạo thành Hematin clohidric màu nâu sẫm (chú ý tránh tượng ngưng kết máu) 22 - Cho vài giọt nước cất vào dùng đũa thuỷ tinh khuấy dung dịch Xoay ống giữa, tránh phía có vạch để dễ so màu Đưa huyết sắc kế lên ngang tầm mắt phía ánh sáng vừa pahỉ dể nhìn Nếu đạm màu ống chuẩn cho thêm nước cất vào, khuấy nhìn Tiếp tục nhìn màu dung dịch màu ống chuẩn (chú ý không cho nước cất vào nhiều lúc, làm cho màu nước cất nhạt màu ống chuẩn) - Đọc kết quả: Xoay ống phía có vạch chữ số xem mặt nước lõm ứng đến vạch Ví dụ 12,4 kết xác định hàm lượn Hemoglobin 12,4g% ( nghĩa 100ml máu có 12,4 g Hemoglobin) 23 BÀI I Đếm bạch cầu Bạch cầu thực chức bảo vệ thể Số lượng bạch cầu thay đổi tuỳ theo loài động vật, tuổi, dinh dưỡng, trạng thái sinh lý thể Mục đích Xác định số lượng bạch cầu 1mm3 máu Chuẩn bị -Tương tự phương pháp đếm hồng cầu dùng ống hút bạch cầu: ống hút nhỏ có viên nhựa màu xanh hay trắng, ống có vạch ghi 0,5; 1; 11 - Dung dịch pha loãng bạch cầu: + Dung dịch axit axetic 3% : 5ml + Xanh metylen + H2O : 2-3 giọt : 1ml Thao tác - Lấy máu: Giống phương pháp đếm hồng cầu, hút máu tới vạch 0,5 - Pha loãng: Hút dung dịch pha loãng tới vạch 11, độ pha loãng 20 lần (nếu hút máu đến vạch độ pha lỗng 10 lần) - Cho máu vào buồng đếm giống phương pháp đếm hồng cầu - Cách đếm: Đưa buồng đếm lên kính hiển vi Tìm đếm + Buồng đếm Niubaoơ: đếm số bạch cầu vng lớn góc ( mỗ chia làm 16 trung bình) Cạnh ô vuông lớn 1mm Cách đếm phương pháp đếm hồng cầu N* = A * x10 x 20  A * 50 Trong đó: N*: Số bạch cầu/ 1mm3 máu A*: Số bạch cầu đếm vng lớn 24 1/10: Thể tích vng lớn 20: Độ pha lỗng + Buồng đếm Goriaep: đếm số bạch cầu cụm ô ( ô góc ô giữa), cụm có trung bình Cách tính buồng Goriaep: N* = A * x 250 x 20  A * x 250 5x4 A*: Số bạch cầu đếm cụm 1/250 mm3: Thể tích trung bình III Phản ứng sa lắng hồng cầu Lấy máu Xitrat cho vaod ống gnhiệm, sau thời gian máu chia làm phần Hồng cầu có tỷ trọng lớn nên lắng xuống bên phần huyết tương Tốc độ lắng hồng cầu khác tuỳ thuộc vào loài động vậth\j phục thuộc vào nhiều yếu tố Chuẩn bị - Tỷ trọng máu - Các yếu tố ảnh hưởng đến tốc độ lắng hồng cầu Thao tác - Dùng ống hút, hút dung dịch muối Xitrat Natri lên đến vạch P thổi mặt kính đồng hồ ( tráng Parafin) Lấy kim trích máu, dùng ống hút, hút máu đến vạch “K” thổi m,áu mặt kính đồng hồ có dugn dịch Xitrat Natri Thổi trộn máu với Xitra Natri Thổi trộn máu với Xitrat natri để máu không bị đơng Sau hút máu đến vạch “K” lần thổi lên mặt kính đồng hồ Máu mặt kính đồng hồ có tỷ lệ: phần dung dịch Xitrat Natri phần máu Lấy ống hút, hút máu đĩa đến vạch “K” cắm vào giá Panchencop thẳng đứng Sau 15, 30, 45, 60 phút đọc kết Tốc độ lắng hồng cầu dược biểu thị chiều cao mm cột huyết tương - Hút 1ml dung dịch Xitrat Natri 5% cho vào Eritrosediomet: đậy Eritrrosediomet nút cao su, lắc máu cẩn thận để avò giá Cứ 15 phút lần xem mức độ lắng hồng cầu IV Đo huyết cách gián tiếp 25 Sử dụng biện pháp đo huyết áp gián tiếp người động vật có ý nghĩa to lớn lâm sàng y học thú y Phương pháp thường dùng phương pháp Riva_Roch Korotkop Hiện có loại máy đo huyết áp: + Loại huyết áp kế thuỷ ngân + Loại huyết áp kế điện tử + Loại huyết áp kế học Mục đích Kiểm tra sức khoẻ chẩn đoán số bệnh gia súc Chuẩn bị Huyết áp kế, ống nghe Thao tác - Buộc túi huyết áp kế vào vị trí đo (ở người cánh tay trái); buộc vừa phải khơng chặt đặt ống nghe phía túi sát vào da bên động mạch - Bơm cho túi căng lên, mức thuỷ ngân huyết áp kế lên đến mức 250-300 mmHg Lúc tai không nghe tiếng mạch đập Từ từ xả ra, mức thuỷ ngân tụt dần; xả túi nghe tiếng mạch đập đầu tiên: ghi lại kết mức thuỷ ngân huyết áp kế Ví dụ mức 120 huyết áp tối đa 120mmHg (huyết áp tối đa ứng với kỳ tâm thu) - Tiếp tục xả ra, tiếng mạch đập nghe rõ, đến lúc nghe tiếng mạch đập cuối đóng khố lại: ghi kết Ví dụ mức 80 huyết áp tối thiểu, ứng với kỳ tâm trương (80mmHg) - Nếu huyết áp tối đa cao bình thường chứng huyết áp cao, thấp bình thường chứng huyết áp thấp Sự chênh lệhc huyết áp tối đa huyết áp tối thiểu phải phạm vi định, vượt phạm vi ko bình thường 26 Chú ý: Đối với động vật: bò, ngựa đo huyết áp động mạch khấu Đối với chó, lợn đo động mạch đùi V Đo thân nhiệt Mục đích Biết phương pháp đo nhiệt độ cho gia súc để kiểm tra nhiệt độ,chẩn đoán bệnh Chuẩn bị Nhiệt kế Thao tác - Vẩy nhiệt kế cho mức thuỷ ngân tụt xuống mức thấp nhấ - Cặp nhiệt kế: Người nách Gia súc hậu môn - Để thời gian 5-10 phút Đọc kết vạch nhiệt kế 27 28 BÀI Các phương pháp mổ đường tiêu hoá I Mổ dày lớn theo phương pháp Basov Mục đích Lấy dịch vị thức ăn để nghiên cứu cách đưa ống xông vào dày cách luồn ống thông vào khoang dày, đầu ống thông mở ngồi Qua ống thơng nghiên cứu hoạt động học tiết dịch dày Chuẩn bị - Động vật: Thực động vật sống chó, lợn - Dụng cụ: Bàn mổ, đồ mổ, dao, kéo, panh, kim chỉ, ống thông dày lớn, xilanh, thuốc gây tê (novocain 2%) 3.Thao tác - Để cho chó nhịn đói ngày, cố định chó nằm ngửa bàn mổ, tiêm -10ml Novocain 2% vào hai bên đường trắng - Cạo lông xung quanh vị trí dịnh mổ (từ xương ức đến rốn) - Dùng dao rạch theo đường trắng dài 8-10cm, cách xương ức 3-4cm - Lấy dày ra, tìm đoạn mạch quản phân bố, dùng khâu hai đường tròn đồng tâm, mũi đối diện nhau, lớp phải nằm lớp cơ, không khâu vào niêm mạc (chỉ bị axit phân huỷ, làm đứt chỉ) - Dùng dao cắt đứt đường đường trong, đưa ống thông dày lớn vào - Cố định ống thông cách thắt đường trước, thắt đừng sau cho mép niêm mạc lộn vào phía dày - Cho dày vào xoang bụng, cắt lỗ thủng da bụng, đưa ống thơng ngồi thành bụng, đậy nút ống thông - Khâu vết mổ: khâu lớp, lớp phúc mạc, lớp lớp da Chăm sóc sau mổ - Sau mổ ngày đầu cho ăn sữa - Ngày thứ 2-3 cho ăn cháo lỗng, sau đặc dần - Sau tuần lấy thức ăn dịch để nghiên cứu II Mổ dày nhỏ theo phương pháp Paplove Mục đích Lấy dịch vị thuân khiết để nghiên cứu cách tách phàn nhỏ dày khỏi phần lại để nguyên mạch máu thần kinh, để dịch vị dày nhỏ không lẫn thức ăn nước bọt hoạt động tiết điều hồ chugn với phần lại cảu dày Chuẩn bị 29 - Động vật: Thựcc động vật sống chó, lợn - Dụng cụ: Bàn mổ, đồ mổ, dao, kéo, panh, kim chỉ, ống thông dày nhỏ, xilanh, thuốc gây tê (novocain 2%), kẹp dày Thao tác - Để cho chó nhịn đói ngày, cố định chó nằm ngửa bàn mổ, tiêm -10ml Novocain 2% vào hai bên đường trắng - Cạo lông xung quanh vị trí dịnh mổ (từ xương ức đến rốn) - Dùng dao rạch theo đường trắng dài 8-10cm, cách xương ức 3-4cm - Kẹp dày hai kẹp đối diện nhau, chia dày làm phần - Cắt dày từ phía hạ vị, vị trí cắt 1/3, cắt phần niêm mạc đứt 2/3 lại 1/3 lại cắt riệng niêm mạc.Sau khâu niêm mạc với niêm mạc, với tạo thành hai dày - dày nhỏ khâu hai vòng đồng tâm, cắt thủng vòng trong, đưa ống thông dày nhỏ vào làm phương pháp Basov Cho dày vào xoang bụng, đưa ống thông khâu phương pháp khâu phần mổ dày lớn cảu Basov Chăm sóc sau mổ Tương tự chăm sóc sau mổ Basov III Phương pháp mổ ruột Thyri – Vella 1.Mục đích Lấy dịch ruột non để nghiên cứu cách tách đoạn ruột non giữ lại màng treo ruột để đoạn ruột ni dưỡng bình thường nối hai đầu lại ống tiêu hố vào với Nghiên cứu nhu động ruột 2.Chuẩn bị - Động vật: Thực động vật sống chó, lợn - Dụng cụ: Bàn mổ, đồ mổ, dao, kéo, panh, kim chỉ, xilanh, thuốc gây tê (novocain 2%) Thao tác - Để cho chó nhịn đói ngày, cố định chó nằm ngửa bàn mổ, tiêm -10ml Novocain 2% vào hai bên đường trắng - Cạo lơng xung quanh vị trí dịnh mổ - Dùng dao rạch đường dọc theo đường trắng dài 8-10cm, cách xương ức 5-7cm, lôi đoạn ruột non Cắt đoạn ruột non dài 25-30cm (buộc mạch máu chi phối vị trí định cắt), hai đầu khâu lại, hai đầu lại làm sau: 30 + Mỗi đầu khâu vòng cách 0,5cm, cách vết cắt 0,5cm Thắt vòng ngồi trước, vòng sau cho vết cắt lộn vào Nối A B sau: +Nối tiếp: Nhược điểm: thức ăn lưu thơng qua đoạn thường bị tắc tiếp diện nhỏ + Nối ghép: Bịt kín A’ B’ sau chồng đoạn A’gối lên B’ cho chiều dài dài lần chiều rộng, khâu đường lại Sau cắt thủng đường A’ 1đường B’ Khâu mép hai bên vào nhau, tao cửa lớn Ưu điểm: bị tắc ruột Chăm sóc sau mổ: Tương tự phương pháp Basov IV Phương pháp mổ cầu nối ruột 1.Mục đích Lấy thức ăn dịch ruột để nghiên cứu 2.Chuẩn bị - Động vật: Thực động vật sống chó, lợn - Dụng cụ: Bàn mổ, đồ mổ, dao, kéo, panh, kim chỉ, xilanh, thuốc gây tê (novocain 2%), cầu nối ruột Thao tác Trước mổ, thao tác giống phương pháp mổ Thyry- Vella - Để cho chó nhịn đói ngày, cố định chó nằm ngửa bàn mổ, tiêm -10ml Novocain 2% vào hai bên đường trắng - Cạo lơng xung quanh vị trí dịnh mổ - Dùng dao rạch đường dọc theo đường trắng dài 8-10cm, cách xương ức 5-7cm, lôi đoạn ruột non Cắt đoạn ruột non dài 25-30cm (buộc mạch máu chi phối vị trí định cắt), khâu bịt hai đầu, hai đầu lại làm sau: Mỗi đầu khâu vòng cách 0,5cm, cách vết cắt 0,5cm Thắt vòng ngồi trước, vòng sau cho vết cắt lộn vào Trên hai đoạn ruột, khâu hai đưởng đồng tâm,mũi đối diện phương pháp Basov Sau đó, cắt thủng giữa, đưa ống thông ruột vào, thắt tương tự phương pháp Basvo - Đưa hai ống thông ngồi thành bụng, lắp cầu nối Chăm sóc sau mổ tương tự phương pháp Basov 31 32 ... vào khoang dày, đầu ống thơng mở ngồi Qua ống thơng nghiên cứu hoạt động học tiết dịch dày Chuẩn bị - Động vật: Thực động vật sống chó, lợn - Dụng cụ: Bàn mổ, đồ mổ, dao, kéo, panh, kim chỉ,... kinh, để dịch vị dày nhỏ không lẫn thức ăn nước bọt hoạt động tiết điều hoà chugn với phần lại cảu dày Chuẩn bị 29 - Động vật: Thựcc động vật sống chó, lợn - Dụng cụ: Bàn mổ, đồ mổ, dao, kéo, panh,... ruột ni dưỡng bình thường nối hai đầu lại ống tiêu hố vào với Nghiên cứu nhu động ruột 2.Chuẩn bị - Động vật: Thực động vật sống chó, lợn - Dụng cụ: Bàn mổ, đồ mổ, dao, kéo, panh, kim chỉ, xilanh,