bài báo cáo thực hành sinh lý động vật

BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆP THỰC PHẨM TP.HCM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ KỸ THUẬT MÔI TRƯỜNG BÀI BÁO CÁO THỰC HÀNH SINH LÝ ĐỘNG VẬT GVHD: ĐÀO THỊ MỸ LINH Bài 1: MỞ ĐẦU Trả lời câu hỏi: Động vật sử dụng môn thực hành sinh lý động vật ếch Phân biệt thí nghiệm in vitro, in situ in vivo: - Thí nghiệm in vitro: thực chế phẩm tạo từ quan tách rời khỏi thể trì điều kiện thích hợp Thí nghiệm in vitro diễn thời gian ngắn ( thí nghiệm cấp diễn) - Thí nghiệm in situ: thực chế phẩm tạo từ quan không tách rời khỏi thể trì điều kiện sinh lý thích hợp Thí nghiệm in situ diễn thời gian ngắn ( thí nghiệm cấp diễn) - Thí nghiệm in vivo: tiến hành thể bình thường, khoẻ mạnh Thí nghiệm in vivo diễn thời gian dài ( thí nghiệm trường diễn) Người đối tượng nghiên cứu: Vì : - Nếu thí nghiệm thất bại gây hậu nghiêm trọng người tiến hành thí nghiêm phải gánh trách nhiệm nặng nề - Đạo đức nghề nghiệp - Tâm lý xã hội - Luât pháp khơng cho phép Do người làm đối tượng nghiên cứu, thí nghiêm xác hiến Nếu đứng phương diện khoa học thể người đối tượng lý tưởng để nghiên cứu, nguyên nhân: - Khi nghiên cứu bệnh hay vấn đề liên quan đến người trực tiếp làm thí nghiệm đối tượng quan tâm hiệu hơn, không cần phải qua nhiều trung gian khảo sát ( thực động vật) trước đưa vào ứng dụng đại trà - Hiện có nhiều bệnh người mà người chưa có cách điều trị triệt để nghiên cứu cách trị bệnh trực tiếp thể người đem lại kết nhanh Gây mê nhằm mục đích làm giảm đau gây bất động cho động vật thực phẩu thuật Phân biệt gây tê cục bộ, tiền mê gây mê: - Gây tê làm giảm cảm giác đau cảm giác vị trí tiêm chất gây tê, có tác dụng phạm vi hẹp hay vùng Gây tê cục tê vùng rộng lớn ví dụ động vật cắt da để lộ xương sọ hay rạch da tìm mạch máu - Tiền mê thực trước gây mê sâu, tiêm cho đối tượng lượng thuốc thích hợp để tạo trạng thái say gây tiết trươc đưa lên bàn mổ để gây mê - Gây mê tác động não làm cảm giác toàn than + Gây mê đường hô hấp: sử dụng chất gây mê bốc (ether) + Tiêm trực tiếp vào hay mạch máu Các bước tiến hành chọc tuỷ ếch: - Cầm ếch lòng bàn tay, dùng ngón tay trỏ ấn đầu ếch cong xuống - Dùng kim chọc tuỷ chọc thẳng qua da vào lỗ xương chẫm ếch Qua mũi nhọn kim phía miệng ếch cho đầu kim lọt vào phia xoang não, lay nhẹ đầu kim để huỷ xoang não - Đưa mũi nhọn phía cột sống Ếch tuỷ ếch huỷ tuỷ Đặc điểm ếch tuỷ: ếch không chết bị tê liệt hệ nằm bất động ( bị phá vỡ hệ thần kinh vận động) Vẽ vị trí chọc tuỷ ếch: Điểm chọc tuỷ đỉnh tam giác với hai đỉnh hai điểm phía sau hai mắt Hình ảnh minh hoạ điểm chọc tuỷ ếch Phân biệt ếch đực ếch cái: điểm chọc tuỷ - Ếch đực có hai chấm đen hàm dưới, hai bên hầu Bàn chân trước nháp hơn, ngón chân trước có mấu thịt hố sừng (chai sinh dục) Da màu xám, khơng nhẵn bóng - Khơng có chai sinh dục, bụng lớn mềm ếch đực, da mềm mịn so với ếch đực 10 Nếu chọc tuỷ ếch hai chân sau ếch duỗi thẳng điểm chọc không bị chảy máu 11 Tác dụng dung dịch sinh lý: Để kéo dài tồn tại, hoạt động, bảo đảm đặc tính sinh lý mơ, quan tách rời quan còm liên hệ với thể động vật phẩu thuật Đặc tính dung dịch sinh lý phải giống với dịch sinh lý thể 12 Cách cố định ếch bàn mổ: - Sau gây bất động, đặt ngửa ếch bàn mổ - Dùng đinh ghim cắm qua bàn chân để cố định (có thể ghim thêm vào hàm) Bài số 2: PHƯƠNG PHÁP NHUỘM TIÊU BẢN MÁU XÁC ĐỊNH HỒNG CẦU VÀ PHÂN BIỆT CÁC LOẠI BẠCH CẦU KHỎA SÁT ĐỘ BỀN HỒNG CẦU I Thực hành: Kiểm tra nhóm máu: a Cơ sở lý thuyết: Theo ơng Landsteiner màng hồng cầu có kháng nguyên nhóm máu mà ơng gọi ngưng kết ngun Có loại: ngưng kết nguyên A B Bản chất ngưng kết nguyên polisaccarid chúng có mặt hồng cầu từ giai đoạn sớm bào thai Đồng thời huyết tương α có ngưng kết tố Có loại ngueng kết tố anti A (còn gọi )ản anti B β (còn gọi ) Bản chất cửa ngưng kết nhóm máu globulin α Khi có mặt ngưng kết tố anti A ( ), hồng cầu mang ngưng kết nguyên β A sé dính với thành đám Tương tự ngưng kết tố anti B( ) làm ngưng kết hồng cầu mang kết nguyên B Trong trường hợp hồng cầu bị ngưng kết xảy biến cố nguy hiểm: hồng cầu tan gây trúng độc, bị chết Tùy theo màng hồng cầu có ngưng kết nguyên A hay ngưng kết nguyên B hay có ngưng kết nguyên A B, người ta phân loại có nhóm máu người là: nhóm A, nhóm B, nhóm AB, nhóm O Tên nhóm máu Ngưng kết nguyên hồng cầu A A B B α anti A ( ) AB A B Khơng có anti A anti B O Khơng có A B Ngưng kết tố huyết tương β anti B ( ) anti A anti B Ngoài có hệ thống nhóm máu Rh Những người có Rh màng hồng cấu gọi người Rh+; người mà hồng cầu khơng có Rh gọi người Rh- Ở châu Âu tỷ lệ người Rh- tỷ lệ 15% Ở người Việt Nam tỷ lệ Rh+ chiếm đa số, có khoảng phần vạn Rh- Sự khác hệ thống nhốm máu ABO hệ thống Rh hệ thống ABO kháng thể ( ngưng kết tố) sinh cách tự nhiên, kháng thể hệ thống Rh sinh theo kiểu miễn dịch Chính ngưng kết tố anti Rh khơng có sẵn máu xuất huyết tương Rh nhận nhiều liên tiết hồng cầu Rh+, tai biến xảy hai trường hợp:  Tai biến truyền máu: người Rh- nhận máu người Rh+ Lần đầu khơng Nhưng thể người nhận có q trình sản xuất kháng thể anti Rh Nếu người tiết tục nhận máu người Rh+ xảy ngưng kết hồng cầu người cho  Tai biến sản khoa: mẹ Rh-, cha Rh+, có thai có hồng cầu bào thai Rh+ Trong thời gian có hồng cầu Rh+ giàng kháng nguyên thể mẹ kích thích thể sản xuất kháng thể anti Rh Những lần có thai sau, thai Rh+ tai biến cho thai kháng thể anti Rh từ mẹ sang qua đường thaido kháng thể ngưng kết hồng cầu cho thai: 3% thứ 2, 10% cho thứ 3… b Cách thực hiện:  Nhỏ từ trái sang phải loại anti A, anti B, anti AB, anti Rh- phiến đá màu trắng  Dùng tẩm cồn bơi lên đầu ngón tay định lấy máu  Dùng kim đâm vào đầu ngón tay lấy máu nhỏ vào vị trí anti Sau dùng tăm trộn máu với anti quan sát c Kết quả: Lài Nhóm A+ máu Giả thích Vì nhóm máu A+ nên có ngưng kết nguyên A nên bị đông tụ anti A Luyến My Nguyên Nhanh A+ O+ B+ A+ Vì nhóm máu A+ nên có ngưng kết nguyên A nên bị đông tụ anti A Vì nhóm máu O+ nên có ngưng kết nguyên A B nên bị đông tụ anti A anti B Vì nhóm máu B+ nên có ngưng kết nguyên B nên bị đông tụ anti B Vì nhóm máu A+ nên có ngưng kết ngun A nên bị đông tụ anti A Phương pháp nhuộm tiêu hồng cầu xác định hồng cầu phân biệt cacs loại bạch cầu: a Cơ sở lý thuyết: Trong ta dùng phương pháp nhuộm đơn với thuốc nhuộm Giemsa - Hồng cầu: người trưởng thành, hồng cầu có kích thước 7-8 thỏ 10-12 , khơng có nhân, hình đĩa tròn, lõm mặt, ngun sinh chất màu hồng, hồng, khơng có hạt nguyên sinh chất Tuy nhiên, số động vật, hồng cầu lại có nhân - Bạch cầu: tế bào có nhân, có khả di động, hình dạng biến đổi tùy thuộc loại bạch cầ Người ta chia bạc cầu (BC) thành loại: BC khơng hạt BC có hạt theo bắt màu hạt nguyên sinh chất chúng  Bạch cầu không hạt: BC không hạt nguyên sinh chất tế bào Chúng bao gồm Lymphocyte Monocyte • Bạch cầu Lymphocyte: có loại Lymphocyte B T Điển hình dòng TB tròn, nhân tròn, nguyên sinh chất hẹp, ưu kiềm, chung quanh có vòng sáng + Limphocyte B: to, có kích thước 6-10, nhân tròn bắt màu tím xanh, nhiễm sắc thơ, vòng sáng quanh nhân, ngun sinh chất bắt màu xanh da trời, có viền xanh thẫm ngoại vi + Lymphocyte T:nhỏ, có kích thước 5-9 Nhân hình cầu, nhiễm sắc thơ, bắt màu tím sẫm, chiếm ưu 9/10 thể tích tế bào  Nguyên sinh chât ưu bazơ mạnh, vật nhuộm, chúng bắt màu xanh • Bạch cầu Monocyte: tế bào lớn, có kích thước lớn 20-25 Dòng tế bào hình cầu, ngun sinh chất bắt màu xanh, khơng hạt, nhân hình bầu dục hạt đậu bắt màu đen, nguyên sinh chất băt màu xanh  Bạch cầu có hạt: BC mà nguyên sinh chất có hạt, dựa bắt màu hạt ta chia làm loại khác • Bạch cầu trung tính ( Neutrophil): kích thước 10-15, nhân thắt eo, chia doạn, ngun sinh chất có hạt tròn khoảng 0,2-0,4 có màu hồng xanh tím Các hạt có chứa este acid hyanuronic thành phần quan trọng glycogene gan • Bạch cầu ưu acid (Eosinophil): kích thước 10-15, nhân thắt eo, chia đoạn Nguyên sinh chất có hạt bắt màu da cam, hạt to, tròn khoảng Bản chất hạt acid chứa nhiều histon, số tác giả cho có chứa histamine acetylin cao, pH acid (pH ~ 2) • Bạch cầu ưu bazơ (Basophil): kích hước 10-15, nhân thắt eo, chia đoạn Nguyên sinh chất có màu xanh methylen xanh toluidin, nhuộm chúng bất màu xanh thẫm, hạt to khoảng 1-2 phân bố không nguyên sinh chất - Số lượng công thức bạch cầu:  Số lượng BC người trưởng thành bình thường: • Nam: 7000-9000 TB/mm3 máu • Nữ : 6000-8000 TB/ mm3 máu  Ở trẻ em phụ nữ có thai tì sỗ luộng bạch cầu cao Số lượng BC tăng bệnh nhiễm khuẩn cấp tính, đặt biệt tăng cao bệnh huyết áp cấp mãn tính Số lượng bach cầu giảm trường hợp nhiễm độc, nhiễm xạ, bệnh suy tủy  Ông thức BC tỷ số phần trăm loại BC so với tổng số BC náu Công thức BC người thường : • BC trung tính: 60-66% • BC ưa acid: 9-10% • BC ưa kiềm: 0.5-1% • BC đơn nhân: 2-2,5% • BC Lymphocyte: 20-25% b Cách tiến hành: - Cách tiến hành:  Làm tiêu bản: • Nhỏ giọt máu chống đơng lên lame • Lấy lame kính khác chạm vào giột máu góc 450, để giọi máu lan theo cạnh lame kéo từ đầu bên sang bên giữ nguyên góc 450, dàn giọt máu thành lớp mỏng lame • Để tiêu máu khô tự nhiên hơ nhẹ ngọc lửa lửa đèn cồn • Sử dụng cồn 960 nhỏ bao tiêu mausau để đứng tiêu giascho cồn chảy hết để tiêu khơ tự nhiên  Nhuộm tiêu bản: • Tiêu máu cố định cồn ngâm dung dịch Giemsa 20 phút (có thể nhỏ dung dịch Giemsa phủ mẫu máu tiêu cố định ta khơng dùng cốc ngâm lame) • Đem tiêu rửa nước cất (không để nước chảy thẳng vào mẫu có chứa tiêu máu) • Để khô tự nhiên ( sấy khô nhẹ tủ ấm) • Quan sát tiêu vật kính X100, sử dụng dầu soi kính để tăng độ sáng c Kết quả: − − cắt đôi xương theo chiều dọc ta hai chân riêng biệt − − − cắt màng mỏng hai − − dùng nhựa tách dây thần kinh − − cắt bỏ phần xương đùi , chừa lại 2cm xương đùi gắn với đầu gối − − cắt đứt chân gót Achille bốc ngược bắp chân lên cắt bỏ xương chày khớp đầu gối chút ta chế phẩm thần kinh − − Câu 5: không dùng vật kim loại đụng vào sợi dây thần kinh ếch? − tế bào thần kinh có điện nghỉ phân bố ion Na+ màng ion K+ màng nồng độ tương đương ,nhưng màng tế bào màng thấm có chọn lọc cho phép K+ dịch bào dễ dàng chênh lệch gradien nồng độ K+ có kích thước nhỏ so với Na+ (nên K+ Na+ không vào được) Mặc dù vậy, K+ cách "thoải mái", dù thuận chiều gradien nồng độ, có lực hút tĩnh điện anion prơtêin, SO42- có kích thước lớn bị giữ lại màng Kết K+ lượng nhỏ khơng thể xa khỏi màng có kích thích ĐTN chuyển thành điện hoạt động để truyền xung thần kinh ta để kim loại chạn vào dây thần kinh gây phân cực tạo xung làm co chi tế bào chết sau chạm vào lâu dù có kích thích khơng phản ứng − • • • • câu 6:làm sau để biết chế phẩm thần kinh tốt ? chế phẩm thần kinh tươi dây thần kinh không bị đứt tổn thương, chạm vào kim loại kích điện nhiều lần có tượng co giật phần giữ lại phải nguyên vẹn − câu 7:chế phẩm thần kinh gồm thành phần gì? − chế phẩm thần kinh gồm: dây thần kinh, ,1/2 xương đoạn đốt sống − − Bài 6: TẾ BÀO SINH DỤC ĐỘNG VẬT HỮU NHŨ CƠ SỞ LÝ THUYẾT 1.1 Hệ sinh dục đực: 1.1.1 Cấu tạo - Tinh hoàn: có cấu trúc dạng cặp bọc túi Bên tinh hồn có nhiều ngăn, ngăn tổ chức mơ biệt hóa sinh sản tinh trùng - Mào tinh: nối với tinh hoàn, đường dẫn tinh trùng - Ống dẫn tinh: nối với ống mào tinh - Túi tinh: nơi chứa tinh trùng tiết dịch trộn với tinh trùng tạo tinh dịch, nơi tập kết tạm thời tinh trùng trước - Tuyến tiền liệt: sản xuất tinh dịch - Niệu đạo: nằm dương vật, tinh trùng phóng ngồi qua niệu đạo - Dương vật: xuất tinh xuất nước tiểu 1.1.2 Sinh lý tinh trùng − Cấu tạo tinh trùng gồm phần: đầu, thân đuôi - Phần đầu: chứa thể đỉnh acrosome, nới giải phóng enzyme giúp cho tinh trùng xâm nhập trứng - Phần thân: chứa ty thể, có liên quan đến hoạt động chuyển hóa chất lượng - Phần đi: có vai trò vận động, khơng tham gia vào trình thụ tinh − Số lượng tinh trùng: chiếm trung bình 5% thể tích tinh dịch Ở người có 3ml tinh dịch cho lần xuất tinh số lượng trung bình từ 60-120 triệu tế bào − Tinh trùng vận động cách tự quẫy đuôi − Sự sinh tinh xảy gần suốt đời sống cá thể đực nhiên số lượng chất lượng tế bào thay đổi − Cơ chế sinh tinh: Tinh nguyên bàoTinh bào4 tinh trùng (n) CÁCH TIẾN HÀNH Quy trình phân tích tinh dịch − Ly giải tủ ấm (37oC) − phút đầu: − − − − Từ 30-60 phút sau: Đánh giá ly giải, tính chất tổng quát tinh dịch − − Đo thể tích, pH tinh dịch − − Đánh giá tổng quát kính hiển vi, độ di đông tinh trùng, đánh giá mật độ tinh trùng − Đánh giá tỉ lệ sống chết − − Đánh giá mật độ tinh trùng − − Tính tổng số tinh trùng − − Tạo tiêu nhuộm − − Cố định, nhuộm tiêu − − Sau giờ: Đánh giá hình dạng 2.1 Khảo sát đại thể 2.1.1 Tính chất tổng qt − Tinh dịch bình thường, có tính đồng nhất, có màu xám trắng đục Tinh dịch ngả màu vàng, có lẫn nước tiểu, nhiễm trùng hay sử dụng số vitamin hay thuốc Tinh dịch có màu đỏ nâu hồng lẫn hồng cầu Tinh dịch loãng, trắng thường tiểu tinh vơ tinh Tinh dịch có nhiều cặn nhiễm đường tiết niệu 2.1.2 Sự ly giải − Là hóa lỏng tinh dịch nhiệt độ thường, tinh dịch trở nên đồng − Lắc nhẹ quan sát, tinh dịch hóa lỏng nhiệt độ thường, không thấy bất thường − − Mẫu tinh trùng Hình 6.1: 2.1.3 Độ nhớt − Tiến hành: Hút nhẹ tinh dịch vào pipette nhựa dùng lần quan sát độ dài giọt: • Bình thường: giọt tinh dịch nhỏ thành giọt rời rạc • Bất thường: tinh dịch dính chặt vào nhaudạng sợi dài 2cm 2.1.4 Thể tích tinh dịch − Cách đo: • Cân mẫu lọ sau thu nhận Bằng hiệu khối lượng lọ tinh trùng với khối lượng lọ • Đo pipette hay ống nghiệm có chia vạch Hạn chế sử dụng xác 2.1.5 pH • Trộn mẫu • Nhỏ giọt lên giấy quỳ • Để ổn định ( Khối lượng tinh trùng: 4.49 – 4.05 = 0.44 g • Tiêu soi tươi: − − Hình 6.4 Mẫu tinh trùng tươi kính hiển vi • Tinh trùng bình thường bất thuờng: − − Hình 6.5 Tinh trùng bất thường Hình 6.6 Tinh trùng bình thường • Nhuộm màu hỗn hợp Eosin-Nigrosin: - Trộn giọt tinh trùng với hai giọt Eosin 1% - Sau 30s thêm giọt Nigrosin 10% trộn - Đặt giọt lên phiến kính trải lớp mỏng, để khơ mẫu, kiểm tra kính x40 −  Tinh trùng sống có màu trắng, tinh trùng chết màu đỏ − Hình 6.7: Nhuộm màu Eosin- Nigrosin • Phương pháp tính nồng độ tinh trùng buồng đếm hồng cầu: − dịch - Nồng độ tinh trùng (C) số tinh trùng diện xác suất ml tinh Pha loãng 20 lần tinh dịch ống trộn bạch cầu cho mẫu lên buồng đếm hồng cầu quan sát tính lượng tinh trùng lớn − − Hình 6.8 Ống trộn bạch cầu − - Dùng công thức tính nồng độ tinh trùng ml tinh dịch để tính: C=106.N Trả lời câu hỏi 4.1 Sơ lược cấu tạo hệ sinh dục đực cái? 4.1.1 Hệ sinh dục đực: 4.1.1.1 - Cấu tạo Tinh hoàn: có cấu trúc dạng cặp bọc túi Bên tinh hồn có nhiều ngăn, ngăn tổ chức mơ biệt hóa sinh sản tinh trùng Mào tinh: nối với tinh hoàn, đường dẫn tinh trùng Ống dẫn tinh: nối với ống mào tinh Túi tinh: nơi chứa tinh trùng tiết dịch trộn với tinh trùng tạo tinh dịch, nơi tập kết tạm thời tinh trùng trước Tuyến tiền liệt: sản xuất tinh dịch Niệu đạo: nằm dương vật, tinh trùng phóng ngồi qua niệu đạo Dương vật: xuất tinh xuất nước tiểu 4.1.1.2 Sinh lý tinh trùng − Cấu tạo tinh trùng gồm phần: đầu, thân đuôi - Phần đầu: chứa thể đỉnh acrosome, nới giải phóng enzyme giúp cho tinh trùng xâm nhập trứng - Phần thân: chứa ty thể, có liên quan đến hoạt động chuyển hóa chất lượng - Phần đi: có vai trò vận động, khơng tham gia vào q trình thụ tinh − Số lượng tinh trùng: chiếm trung bình 5% thể tích tinh dịch Ở người có 3ml tinh dịch cho lần xuất tinh số lượng trung bình từ 60-120 triệu tế bào − Tinh trùng vận động cách tự quẫy đuôi − Sự sinh tinh xảy gần suốt đời sống cá thể đực nhiên số lượng chất lượng tế bào thay đổi − Cơ chế sinh tinh: Tinh nguyên bàoTinh bào4 tinh trùng (n) 4.1.2 Hệ sinh dục 4.1.2.1 Cấu tạo − Buồng trứng: nơi chứa nang trứng − Vòng tử cung: nơi trứng gặp tinh trùng thụ tinh − Tử cung: quan để thai làm tổ hợp phát triển − Âm đạo: quan giao hợp − Một số quan phụ khác 4.1.2.2 Sinh lý buồng trứng − Buồng trứng cấu tạo dạng cặp gồm phần vỏ tủy Phần vỏ chứa tế bào trứng phát triển, phần tủy có nhiều mạch máu mạch huyết, số tế bào phụ trợ khác − Các trứng non nằm màng liên kết − Ở người, sơ sinh có 3.104 – 3.105 nang trứng nguyên thủy trưởng thành 400 – 500 nang 4.2 Cấu tạo tinh trùng − Cấu tạo tinh trùng gồm phần: đầu, thân đuôi - Phần đầu: chứa thể đỉnh acrosome, nới giải phóng enzyme giúp cho tinh trùng xâm nhập trứng - Phần thân: chứa ty thể, có liên quan đến hoạt động chuyển hóa chất lượng - Phần đi: có vai trò vận động, khơng tham gia vào q trình thụ tinh 4.3 Sự di chuyển tinh trùng nhờ vào đuôi 4.4 Điều kiện trình thụ tinh xảy ra? − Tinh trùng phòng vào âm đạo theo ống dẫn trứng Lúc trứng di chuyển khoảng 1/3 chiều dài ống dẫn trứng Tinh trùng gặp trứng, thụ tinh diễn tạo hợp tử (2n) 4.5 Tại dựa vào tế bào cumullus đánh giá chất lượng trứng? − Theo diện độ dày, mỏng tế bào hạt cumullus bao quanh trứng (tế bào cumullus tế bào hình thành sau trứng rụng vào ống dẫn) Các tế bào cumullus có nhiệm vụ cung cấp chất dinh dưỡng cho trứng chưa thụ tinh Trứng tốt trứng có tế bào cumullus bao kín xung quanh 4.6 Cách thu nhận đánh giá chất lượng tinh dịch • Lấy tinh: ngày, tháng, năm, lấy tinh; phương pháp lấy tinh: nhiệt độ khơng khí, q trình vận chuyển, bảo quản • Đánh giá đại thể: lượng xuất tinh, màu sắc, mùi, độ keo dính,… • Đánh giá vi thể: nồng độ, hình dạng, tỉ lệ sống, mật độ • Những đánh giá khác: tình trạng Acrosome, áp suất thẩm thấu, độ nhớt tỷ trọng,… 4.7 Phương pháp tính nồng độ tinh trùng buồng đếm hồng cầu (đã trả lời trên) 4.8 Xác định tỉ lệ tinh trùng sống phương pháp nhuộm màu tinh trùng − Tinh trùng sống đầu tinh trùng khơng bắt màu, tinh trùng chết bắt màu hồng • Phương pháp nhuộm bàng Eosin 1% - Trộn giọt tinh trùng với giọt Eosin 1% - Lấy giọt mẫu trải lớp mỏng để khô - Quan sát tiêu ghi số lượng • Phương pháp nhuộm màu Eosin – Nigrosin 1% - Trộn giọt tinh trùng với hai giọt Eosin 1% - Sau 30s thêm giọt Nigrosin 10% trộn - Lấy giọt mẫu lên phiến kính, trải ra, để khơ - Quan sát tiêu ghi sô lượng 4.9 Xây dựng công thức tính mật độ tinh trùng • h = 1/10 mm • d = 1/20 mm  S = 1/20*1/20 = 1/400 mm2 • V = S*V = 1/10*1/400 = 1/4000 mm3 • Trong 8/4000 mm3  A tinh trùng − mm3  N = (A*4000)/80 tinh trùng • Số tế bào 1cm3: N = (A*4000*1000)/80 • Số tế bào ml dung dịch ban đầu: N*20 (độ pha loãng) − − − − − − − − − − − − − −  Mật độ C = N*20 = (20*A*4000*1000)/80 = A*106 tt/ml − − ... dịch sinh lý: Để kéo dài tồn tại, hoạt động, bảo đảm đặc tính sinh lý mô, quan tách rời quan còm liên hệ với thể động vật phẩu thuật Đặc tính dung dịch sinh lý phải giống với dịch sinh lý thể.. .Bài 1: MỞ ĐẦU Trả lời câu hỏi: Động vật sử dụng mơn thực hành sinh lý động vật ếch Phân biệt thí nghiệm in vitro, in situ in vivo: - Thí nghiệm in vitro: thực chế phẩm tạo từ... có hạt ngun sinh chất Tuy nhiên, số động vật, hồng cầu lại có nhân - Bạch cầu: tế bào có nhân, có khả di động, hình dạng biến đổi tùy thuộc loại bạch cầ Người ta chia bạc cầu (BC) thành loại: