mate trong rau, hoa qu t i. ả ươ Gi i h n phát hi n (LOD): ớ ạ ệ 0,5 mgkg. 1.1.2. X lý m u: ử ẫ M u th là rau: ẫ ử L y c lá và cu ng rau c t nh c h t ngô và tr n đ u. ấ ả ố ắ ỏ ỡ ạ ộ ề M u th là qu : ẫ ử ả G t l y ph n v dày kho ng 5 mm, c t thành m u nh nh ọ ấ ầ ỏ ả ắ ẩ ỏ ư v i m u rau. ớ ẫ 1.1.3. Ti n hành ế L y kho ng 10g m u rau ho c qu đã c t nh cho vào túi chi t (l ng m u ấ ả ẫ ặ ả ắ ỏ ế ượ ẫ chi m kho ng 13 túi). ế ả L y 10 ml n c s ch cho vào c c nh a. Dùng k p b hai đ u ng “ ấ ướ ạ ố ự ẹ ẻ ầ ố ch t ho t ấ ạ hoá”, đ h t d ch trong ng vào c c đã ch a 10 ml n c, l c nh , sau đó, đ ổ ế ị ố ố ứ ướ ắ ẹ ổ dung d ch trong c c vào túi m u, tr n đ u h n h p b ng các l c kho ng 3 ị ố ẫ ộ ề ỗ ợ ằ ắ ả phút. L y 1 ng ấ ố dung môi chi t ế , c m ng theo chi u đ ng, dùng k p b đ u trên ầ ố ề ứ ẹ ẻ ầ c a ng, sau đó đ h t dung môi trong ng vào túi ch a m u chi t, đóng ủ ố ổ ế ố ứ ẫ ế mi ng túi và l c nh , đ u trong kho ng 2 phút. ệ ắ ẹ ề ả Nghiêng túi đ h n h p d n xu ng m t góc túi, dùng kéo c t góc kia c a túi ể ỗ ợ ồ ố ộ ắ ủ đ t o m t l nh . M n p ể ạ ộ ỗ ỏ ở ắ ng tách ố , đ d ch chi t t túi m u vào ng đã ổ ị ế ừ ẫ ố đ c b t đ u d i b ng m t đ u côn kín (đ u côn có v ch màu). Ép nh túi ượ ị ầ ướ ằ ộ ầ ầ ạ ẹ đ thu h t ph n dung môi chi t còn trong rau. V n ch t n p ng tách, đ ể ế ầ ế ặ ặ ắ ố ể ố ề ẳ ứ ế ị ố ng theo chi u th ng đ ng cho đ n khi dung d ch trong ng chia thành 2 l p. ớ H ng đ u d i c a ng tách vào đĩa th y tinh, dùng kéo c t ph n d i ướ ầ ướ ủ ố ủ ắ ầ ướ cùng c a đ u côn đ thu ph n dung môi l p d i ch y xu ng h t đĩa petri. ủ ầ ể ầ ớ ướ ả ố ế (Chú ý: Ch l y v a h t ph n dung môi l p d i. Khi ch y g n h t dung môi ỉ ấ ừ ế ầ ớ ướ ả ầ ế v n ch t n p l i cho dòng ch y ch còn nh gi t và b ra ngoài.) ặ ặ ắ ạ ả ỉ ỏmate trong rau, hoa qu t i. ả ươ Gi i h n phát hi n (LOD): ớ ạ ệ 0,5 mgkg. 1.1.2. X lý m u: ử ẫ M u th là rau: ẫ ử L y c lá và cu ng rau c t nh c h t ngô và tr n đ u. ấ ả ố ắ ỏ ỡ ạ ộ ề M u th là qu : ẫ ử ả G t l y ph n v dày kho ng 5 mm, c t thành m u nh nh ọ ấ ầ ỏ ả ắ ẩ ỏ ư v i m u rau. ớ ẫ 1.1.3. Ti n hành ế L y kho ng 10g m u rau ho c qu đã c t nh cho vào túi chi t (l ng m u ấ ả ẫ ặ ả ắ ỏ ế ượ ẫ chi m kho ng 13 túi). ế ả L y 10 ml n c s ch cho vào c c nh a. Dùng k p b hai đ u ng “ ấ ướ ạ ố ự ẹ ẻ ầ ố ch t ho t ấ ạ hoá”, đ h t d ch trong ng vào c c đã ch a 10 ml n c, l c nh , sau đó, đ ổ ế ị ố ố ứ ướ ắ ẹ ổ dung d ch trong c c vào túi m u, tr n đ u h n h p b ng các l c kho ng 3 ị ố ẫ ộ ề ỗ ợ ằ ắ ả phút. L y 1 ng ấ ố dung môi chi t ế , c m ng theo chi u đ ng, dùng k p b đ u trên ầ ố ề ứ ẹ ẻ ầ c a ng, sau đó đ h t dung môi trong ng vào túi ch a m u chi t, đóng ủ ố ổ ế ố ứ ẫ ế mi ng túi và l c nh , đ u trong kho ng 2 phút. ệ ắ ẹ ề ả Nghiêng túi đ h n h p d n xu ng m t góc túi, dùng kéo c t góc kia c a túi ể ỗ ợ ồ ố ộ ắ ủ đ t o m t l nh . M n p ể ạ ộ ỗ ỏ ở ắ ng tách ố , đ d ch chi t t túi m u vào ng đã ổ ị ế ừ ẫ ố đ c b t đ u d i b ng m t đ u côn kín (đ u côn có v ch màu). Ép nh túi ượ ị ầ ướ ằ ộ ầ ầ ạ ẹ đ thu h t ph n dung môi chi t còn trong rau. V n ch t n p ng tách, đ ể ế ầ ế ặ ặ ắ ố ể ố ề ẳ ứ ế ị ố ng theo chi u th ng đ ng cho đ n khi dung d ch trong ng chia thành 2 l p. ớ H ng đ u d i c a ng tách vào đĩa th y tinh, dùng kéo c t ph n d i ướ ầ ướ ủ ố ủ ắ ầ ướ cùng c a đ u côn đ thu ph n dung môi l p d i ch y xu ng h t đĩa petri. ủ ầ ể ầ ớ ướ ả ố ế (Chú ý: Ch l y v a h t ph n dung môi l p d i. Khi ch y g n h t dung môi ỉ ấ ừ ế ầ ớ ướ ả ầ ế v n ch t n p l i cho dòng ch y ch còn nh gi t và b ra ngoài.) ặ ặ ắ ạ ả ỉ ỏmate trong rau, hoa qu t i. ả ươ Gi i h n phát hi n (LOD): ớ ạ ệ 0,5 mgkg. 1.1.2. X lý m u: ử ẫ M u th là rau: ẫ ử L y c lá và cu ng rau c t nh c h t ngô và tr n đ u. ấ ả ố ắ ỏ ỡ ạ ộ ề M u th là qu : ẫ ử ả G t l y ph n v dày kho ng 5 mm, c t thành m u nh nh ọ ấ ầ ỏ ả ắ ẩ ỏ ư v i m u rau. ớ ẫ 1.1.3. Ti n hành ế L y kho ng 10g m u rau ho c qu đã c t nh cho vào túi chi t (l ng m u ấ ả ẫ ặ ả ắ ỏ ế ượ ẫ chi m kho ng 13 túi). ế ả L y 10 ml n c s ch cho vào c c nh a. Dùng k p b hai đ u ng “ ấ ướ ạ ố ự ẹ ẻ ầ ố ch t ho t ấ ạ hoá”, đ h t d ch trong ng vào c c đã ch a 10 ml n c, l c nh , sau đó, đ ổ ế ị ố ố ứ ướ ắ ẹ ổ dung d ch trong c c vào túi m u, tr n đ u h n h p b ng các l c kho ng 3 ị ố ẫ ộ ề ỗ ợ ằ ắ ả phút. L y 1 ng ấ ố dung môi chi t ế , c m ng theo chi u đ ng, dùng k p b đ u trên ầ ố ề ứ ẹ ẻ ầ c a ng, sau đó đ h t dung môi trong ng vào túi ch a m u chi t, đóng ủ ố ổ ế ố ứ ẫ ế mi ng túi và l c nh , đ u trong kho ng 2 phút. ệ ắ ẹ ề ả Nghiêng túi đ h n h p d n xu ng m t góc túi, dùng kéo c t góc kia c a túi ể ỗ ợ ồ ố ộ ắ ủ đ t o m t l nh . M n p ể ạ ộ ỗ ỏ ở ắ ng tách ố , đ d ch chi t t túi m u vào ng đã ổ ị ế ừ ẫ ố đ c b t đ u d i b ng m t đ u côn kín (đ u côn có v ch màu). Ép nh túi ượ ị ầ ướ ằ ộ ầ ầ ạ ẹ đ thu h t ph n dung môi chi t còn trong rau. V n ch t n p ng tách, đ ể ế ầ ế ặ ặ ắ ố ể ố ề ẳ ứ ế ị ố ng theo chi u th ng đ ng cho đ n khi dung d ch trong ng chia thành 2 l p. ớ H ng đ u d i c a ng tách vào đĩa th y tinh, dùng kéo c t ph n d i ướ ầ ướ ủ ố ủ ắ ầ ướ cùng c a đ u côn đ thu ph n dung môi l p d i ch y xu ng h t đĩa petri. ủ ầ ể ầ ớ ướ ả ố ế (Chú ý: Ch l y v a h t ph n dung môi l p d i. Khi ch y g n h t dung môi ỉ ấ ừ ế ầ ớ ướ ả ầ ế v n ch t n p l i cho dòng ch y ch còn nh gi t và b ra ngoài.) ặ ặ ắ ạ ả ỉ ỏ
TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA TPHCM KHOA KỸ THUẬT HÓA HỌC BỘ MÔN CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM BÁO CÁO MƠN: PHÂN TÍCH HĨA LÝ THỰC PHẨM CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH THƯỜNG SỬ DỤNG GIÁM SÁT AN TỒN THỰC PHẨM TRÊN THỊ TRƯỜNG ĐỀ TÀI: NHÓM SVTH: NHÓM Nguyễn Thị Hồng Diệu 1410523 Nguyễn Thái Học 1411380 Huỳnh Lê Bảo Trâm 1414134 Nguyễn Văn Tư 1414560 LỚP: HC14TP GVHD: Cơ Phan Ngọc Hòa TP.HỒ CHÍ MINH, 11/2016 MỤC LỤC DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Kết kit thử nhanh thuốc trừ sâu 10 Hình 1.2 Kết kit phát nhanh acid 10 Hình 1.3 Kết kit kiểm tra hàn the 11 Hình 1.4 Kết kit thử nhanh hypoclorid 12 Hình 1.5 Kết kit thử nhanh phẩm màu 13 Hình 1.6 Kết kit thử nhanh dầu mỡ bị ôi khét 14 Hình 1.7 Kết kit thử nhanh nitrite 14 Hình 1.8 Kết kit thử nhanh tnitrate 15 Hình 1.9 Kết kit thử nhanh salisilic 16 Hình 1.10 Kết kit thử nhanh thực phẩm sử dụng formol bảo quản 17 Hình 1.11 Kết kit thử nhanh thuốc trừ sâu methanol 18 Hình 1.12 Kết kit thử nhanh urea 19 Hình 1.13 Các bước tiến hành kiểm tra Kit thử nhanh ELISA 20 Hình 1.14 Kết kit thử nhanh sulfite 21 Hình 1.15 Kết kit thử nhanh asen 22 Hình 2.1 Sơ đồ lý thuyết phương pháp sắc kí lỏng cao tầng 25 Hình 2.2: Bơm cao áp 25 Hình 2.3 Phương pháp nạp mẫu 26 Hình 2.4 Cột sắc kí 26 Hình 2.5 Tách chất cột sắc kí 26 Hình 2.6 Kết đo 27 Hình 2.7 Mối quan hệ tuyến tính nồng độ melamine với diện tích peak 29 Hình 3.1 Máy sắc ký khí khối phổ GC/MS 31 Hình 3.2 Cấu tạo máy GC/MS 31 Hình 3.3 Sơ đồ cấu tạo đầu dò khối phổ 33 Hình 4.1 Đồ thị biểu diện phụ thuộc Abs với C 39 Hình 4.1 Hệ thống thiết bị phổ hấp phụ nguyên tử 39 Hình 4.2 Sơ đồ hệ thống thiết bị phổ hấp phụ nguyên tử 39 DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Kết phục hồi melamine trung bình l ần phân tích nồng độ khác Melamine 30 Bảng 3.1 Một đơn vị mẫu xác định áp dụng cho loại hàng hố nhãn hiệu kích cỡ đóng gói đơn vị sản xuất 37 Bảng 4.1 Tóm tắt điều kiện tối ưu xác định As(III) phương pháp HVGAAS 43 Bảng 4.2 Khoảng tuyến tính đường chuẩn xác định riêng dạng As 45 Bảng 4.3 Hàm lượng dạng As mẫu tính theo phương pháp đ ường chuẩn (đã tính đến hệ số pha loãng) 45 LỜI CẢM ƠN Sau thời gian nghiên cứu tìm hiểu đề tài “Các phương pháp phân tích thường sử dụng giám sát an tồn thực phẩm thị trường”, hơm đề tài hồn thành Nhóm sinh viên thực xin chân thành cảm ơn: • Ban giám hiệu trường Đại học Bách Khoa T.p Hồ Chí Minh • Ban chủ nhiệm khoa Kỹ thuật hóa học • Các thầy cô môn Công nghệ Thực phẩm Cảm ơn thầy cô cung cấp cho chúng em kiến thức thực cần thiết cho đề tài Đặc biệt cảm ơn Phan Ngọc Hòa trực tiếp hướng dẫn chúng em suốt trình thực đề tài Quá trình thực đề tài nhiều thiếu sót mong nhận góp ý thầy giáo bạn để đề tài hoàn thiện LỜI MỞ ĐẦU Ngày nay, kỷ XXI, Thế kỷ tên lửa, thời kì phát tri ển vơ v ượt b ậc nhanh chóng Khơng nằm ngồi thực đó, đất nước ta th ời kì cơng nghiệp hóa - đại hóa Kinh tế phát tri ển khiến nhu c ầu c ng ười dân ngày cao Không “chỉ tiêu” ăn no, m ặc ấm mà l ại tr thành ăn ngon, mặc đẹp Tuy vậy, việc giữ vệ sinh an toàn thực phẩm ch ưa nhi ều người ý đến Thực rành rành bày trước mắt, thông tin đại chúng đăng tin liên tục, nh ưng người dân Việt Namvẫn nhận thức vơ vệ sinh an toàn thực phẩm Nếu trước đây, vấn đề vệ sinh an toàn thực phẩm dừng lại hành vi vi phạm quy định như: hàn the đồ ăn sẵn, ph ẩm màu công nghi ệp bánh mứt, formal phở, để tẩy ướp thủy hải sản hay chất 3-MCPD nước tương làm nhiều người choáng váng, vứt bỏ thức ăn, gia vị quen sử dụng nhiều năm đây, nhiều vụ việc, kiểu vi phạm xu ất hi ện v ới nhiều hành động tinh vi để tung hàng chất lượng th ị tr ường “cung không đủ cầu” Tuy Nhà nước ta có nhiều sách quan tâm đến việc h ơn nh ưng v ẫn chưa đủ Vì cần có biện pháp cấp thi ết đ ể kh ắc phục tình tr ạng Sản xuất phải chuyên nghiệp, từ khâu tr ồng trọt đến sản xu ất tiêu th ụ Cần có nhiều cán bộ, tổ chức vệ sinh an tồn th ực ph ẩm h ơn, sách nhà n ước chặt chẽ hơn, có chế tài xử lí rõ ràng nghiêm khắc h ơn Nhưng đ ặc bi ệt người tiêu dùng phải biết tự bảo vệ mình, người tiêu dùng c ần có ki ến th ức t ốt vệ sinh an tồn thực phẩm Vì việc thực giám sát chất lượng thực phẩm thị tr ường vô cần thiết cấp bách, phương pháp phân tích chất lượng thực ph ẩm cơng cụ giúp kiểm tra giám sát chất lượng thực ph ẩm đ ể có th ể kiểm soát thực phẩm thị trường Chương 1: KIT THỬ NHANH Ngày nay,các Kit thử nhanh sử dụng phổ biến đ ể giám sát tình hình an tồn thực phẩm trường - Ưu điểm: o Kiểm tra nhanh định tính o Độ nhạy cao o Thực trường - Nhược điểm: Khơng định lượng mà định tính 1.1 Kít thử nhanh thuốc trừ sâu: 1.1.1 Tính tác dụng: - Kiểm tra phát nhanh dư lượng thuốc bảo v ệ th ực v ật nhóm lân hữu carbamate rau, hoa tươi - Giới hạn phát (LOD): 0,5 mg/kg 1.1.2 Xử lý mẫu: - Mẫu thử rau: Lấy cuống rau cắt nhỏ cỡ hạt ngô trộn - Mẫu thử quả: Gọt lấy phần vỏ dày khoảng mm, cắt thành mẩu nh ỏ với mẫu rau 1.1.3 Tiến hành - Lấy khoảng 10g mẫu rau cắt nhỏ cho vào túi chi ết (l ượng m ẫu chiếm khoảng 1/3 túi) - Lấy 10 ml nước cho vào cốc nhựa Dùng kẹp bẻ hai đầu ống “ chất hoạt hoá”, đổ hết dịch ống vào cốc chứa 10 ml nước, l ắc nh ẹ, sau đó, đổ dung dịch cốc vào túi mẫu, trộn hỗn hợp l ắc khoảng phút - Lấy ống dung môi chiết, cầm ống theo chiều đứng, dùng kẹp bẻ đầu ống, sau đổ hết dung mơi ống vào túi chứa mẫu chi ết, đóng miệng túi lắc nhẹ, khoảng phút - Nghiêng túi để hỗn hợp dồn xuống góc túi, dùng kéo c góc c túi để tạo lỗ nhỏ Mở nắp "ống tách", đổ dịch chiết từ túi mẫu vào ống bịt đầu đầu kín (đầu có vạch màu) Ép nh ẹ túi để thu hết phần dung mơi chiết rau Vặn ch ặt nắp ống tách, đ ể ống theo chiều thẳng đứng dung dịch ống chia thành lớp - Hướng đầu ống tách vào đĩa thủy tinh, dùng kéo cắt ph ần d ưới đầu côn để thu phần dung môi lớp chảy xuống hết đĩa petri (Chú ý: Chỉ lấy vừa hết phần dung môi lớp Khi ch ảy gần h ết dung mơi vặn chặt nắp lại cho dòng chảy nhỏ giọt bỏ ngồi.) - - - - Để dung môi đĩa bay tự nhiên khơ hồn tồn Chú ý nên đ ể nơi thống gió Thời gian dung mơi bay hết khoảng 15 – 20 phút Cắt vỏ bao Bộ thuốc thử lấy ống CV1, CV2 giấy thử ngồi Sau dung mơi đĩa thủy tinh bay hoàn toàn, lấy m ột m ẩu bơng cho vào đĩa petri, dùng bơm tiêm có l ắp đầu côn l 0,2 ml "dung dịch pha" cho vào mẩu Dùng kẹp đưa mẩu di khắp đáy đĩa để ch ất chiết thấm vào Chú ý cần lau kỹ khắp đáy đĩa để thu triệt để chất chi ết đ ược Thu mẫu cách cắm đầu côn vào cục bông, kéo nh ẹ pittông c b ơm tiêm để hút dung dịch mẩu vào đầu côn N ếu đĩa d ịch mẫu nên dùng mẩu bơng thấm lại lần để thu tri ệt đ ể Cho toàn b ộ dịch chiết mẫu thu vào ống ký hiệu CV1, đậy nắp, lắc theo chiều dọc ống Để cho phản ứng diễn 30 phút Dùng đầu côn thứ lấy 0,1 ml thuốc thử S cho vào ống CV2, lắc kỹ đ ể cho tan chất ống, sau hút hết dịch cho vào ống CV1, l ắc đ ều, đ ể phút Mở gói giấy thử dùng kẹp lấy mẩu giấy màu xanh cho vào ống CV1 Quan sát để đọc kết sau phút 1.1.4 Đọc kết sau Âm tính: Nếu sau phút giấy thử chuyển sang màu trắng Dương tính: Nếu sau phút giấy thử màu xanh Hình 1.1 Kết kit thử nhanh thuốc trừ sâu Chú ý: Chỉ đọc kết thời gian phút, ngồi thời gian kết có th ể khơng xác - Khi sử dụng khơng để hố chất tiếp xúc với da, n ếu có ph ải r ửa b ằng nước 1.2 Kit kiểm tra, phát nhanh acid giấm ăn 1.2.1 Tính tác dụng: - - Phát nhanh có mặt acid vô dấm ăn - Giới hạn phát hiện: 0,05 % (tính theo HCl) 1.2.2 Tiến hành thí nghiệm - Lấy 01 túi thử có ký hiệu VT 04 Dùng kéo cắt ngang mép túi (phía nhãn) Đổ mẫu dấm cần kiểm tra vào túi đến vạch định mức thứ hai (từ lên) Dùng tay bóp vỡ ống thuốc thử đáy túi, lắc 1.2.3 Đọc kết - - Dương tính: Nếu dung dịch túi chuyển sang màu xanh lơ giống màu chuẩn dương tính in nhãn – Trong mẫu dấm có acid vơ Âm tính: Nếu dung dịch túi có màu tím gi ống màu chuẩn âm tính nhãn Hình 1.2 K ết qu ả kit phát hi ện nhanh acid Chú ý: Tuỳ thuộc vào nồng độ acid vô mà màu phản ứng có màu xanh khác - Nếu dấm pha từ acid acetic (5%) dung dịch ph ản ứng h chuy ển màu tím xanh - Nếu dấm gạo 100% dung dịch có màu tím rõ - Đã thử nghiệm với acid acetic đặc 99% kết phản ứng có màu tím - Khi sử dụng khơng để hố chất tiếp xúc với da, n ếu có ph ải r ửa d ưới vòi nước 1.3 Kít kiểm tra hàn the giò, chả, thịt, tươi s ống… - Hàn the muối axit boric, từ nửa đầu kỷ 20 trở trước, hàn the dùng bảo quản thực phẩm Ngày nay, khoa học chứng minh hàn the ch ất đ ộc người Về mặt an toàn sức khoẻ, người sử dụng th ực ph ẩm có hàn the lâu dài gây ung thư, hàn the khơng đào thải hết ngồi c th ể mà tích luỹ thể khoảng 15%, độc tố hàn the làm thối hố c quan sinh dục… trẻ em ăn phải sữa bảo quản hàn the hàm lượng từ đến 2g/1kg thể trọng bị tử vong vòng đến 10 tuỳ theo khối lượng hấp thụ Hầu hết quốc gia giới, kể Việt Nam không cho phép s dụng hàn the chế biến thực phẩm Tuy nhiên, nhiều sản xuất coi th ường s ức kho ẻ người tiêu dùng tiếp tục sử dụng hàn the chế bi ến giò ch ả, bánh đúc, bánh cuốn, ướp thịt cá… Tình trạng khiến người tiêu dùng lo ngại khơng phân biệt thực phẩm có hàn the thực phẩm đảm bảo vệ sinh an tồn thực phẩm Vì vậy, nhiều sở sản xuất thực phẩm an tồn có nhu c ầu mua gi thử phát nhanh hàn the thực phẩm 1.3.1 Tính tác dụng: - Phát nhanh hàn the mẫu thực phẩm giò chả, bánh đúc, bánh đa, bánh cuốn… Ngưỡng phát hiện: 50ppm 1.3.2 Xử lý mẫu: Lấy khoảng 2g cắt nhỏ cỡ hạt đậu xanh cho vào cốc, nhỏ thêm 20 gi ọt dung dịch đệm Dầm nát mẫu que nhọn, để khoảng -10 phút 1.3.3 Tiến hành: - - - Lấy que thử, nhúng ngập phần giấy thử vào cốc mẫu x lý trên, b ỏ que thử Để que thử ngang mặt phẳng để chờ đọc kết 1.3.4 Đọc kết quả: Dương tính: Nếu giấy thử phía que thử chuyển màu (từ màu vàng tươi sang màu đỏ nâu) khác với vạch màu in phía giấy thử Âm tính: Nếu giấy thử phía que thử khơng chuyển màu Hình 1.3 K ết qu ả kit ki ểm tra hàn the Chú ý: - Chỉ nhúng phần giấy thử vào mẫu Cường độ màu phụ thuộc vào lượng hàn the mẫu Nếu hàm lượng hàn the thấp (50 mg/kg) đọc kết sau kho ảng 30 phút 1.4 Kit thử nhanh hypoclorid thực phẩm 1.4.1 Tính tác dụng: - - Phát nhanh Hypochlorid số loại thực phẩm: Dưa muối, cà muối, măng ngâm… Giới hạn phát hiện: 100mg/kg thực phẩm 1.4.2 Xử lý mẫu Lấy khoảng ml nước ngâm loại thực phẩm 1.4.3 Tiến hành Dùng kéo cắt miệng túi để lấy ampul đựng thuốc Đổ dung dịch mẫu cần thử vào túi đến vạch định mức thứ từ lên Bẻ đầu ampul để thuốc thử chảy dọc theo thành túi vào bên túi chứa dịch chiết mẫu Quan sát chuyển màu ranh giới hai lớp dung dịch 1.4.4 Đọc kết Dương tính: mặt ngăn cách hai lớp dung dịch chuyển sang màu tím Âm tính: lớp hai lớp dung dịch khơng chuy ển màu tím Hình 1.4 K ết qu ả kit th nhanh hypoclorid Chú ý: - Phản ứng xảy nhanh, màu không bền cần phải quan sát đ ọc kết cho thuốc thử vào túi mẫu 10 Khởi động phần mềm MATLAB Nhập ma trận liệu cửa sổ WORKSPACE + Nhập ma trận nồng độ X0 (30x4) 30 dung dịch chuẩn ch ứa dạng Asen + Nhập ma trận tín hiệu phân tích Y0(30x5) (5 mơi trường đo tín hiệu) + Nhập ma trận X0ktra(10x4), Y0ktra(10x5) +Nhập tín hiệu phân tích Y mẫu cần định phân Lưu liệu vừa nhập vào thành file Matlab: PCR.mat Mở M-flie cửa sổ EDITOR( vào Matlab 7.6 ch ọn desktop , chọn editor chọn New M-File) viết câu lệnh sau : load pcr.mat; D=Y0'*Y0; [V S]=svd(D); d=diag(S)/sum(diag(S))*100; f=V(:,1:5); Yj=Y0*f; F=inv(Yj'*Yj)*Yj'*X0; Fj=f*F; Xktra=Yktra*Fj; Saiso=(X0ktra-Xktra)*100/X0ktra; X=Y*Fj; - Lưu lại M-file vừa thực được: PCR.m Gọi hàm M-file vừa viết cửa sổ COMMAND WINDOW : >> PCR Khi chương trình chạy cho kết cần tìm 4.11.1 Xây dựng mơ hình hồi quy đa biến tuyến tính phân tích dạng Asen Đường chuẩn xác định dạng asen riêng rẽ môi trường HCl 6M Sau khảo sát khoảng tuyến tính dạng As ta thu đ ược két qu ả nh sau: 4.11.1.1 Hợp chất Khoảng tuyến tính Phương trình hồi qui đầy đủ (CAs: ppb) 44 Giá trị hệ số tương quan R As(III) 0,2 – 10ppb A = (0,00875 ± 0,00114) + (0,0124 ± 0,00022)CAs(III) R = 0,9989 As(V) – 40ppb A = (0,01066 ± 0,00123) + (0,00311 ± 0,00005)CAs(V) R = 0,9994 DMA 0,5 – 30ppb A = (0,00919 ± 0,00118) + (0,00403 ± 0,00007)CDMA R = 0,9991 MMA 0,5 – 15ppb A = (0,00732 ± 0,00126) + (0,0089 ± 0,00015)CMMA R = 0,9999 Bảng 4.2 Khoảng tuyến tính đường chuẩn xác định riêng dạng As Như vậy, với dạng As vùng nồng độ định có tương quan tuyến tính cao tín hiệu đo nồng độ dạng Do tín hi ệu d ạng mơi trường phản ứng khác có tỉ lệ xác định so với tín hiệu đo mơi tr ường HCl 6M nên cho có tương quan tuyến tính tương tự mơi trường khử khác Có thể kết luận rằng, hệ đo thỏa mãn ều ki ện phương pháp hồi qui đa biến tuyến tính Giới hạn phát hiện(LOD) giới hạn định lượng (LOQ) xác định đồng thời dạng asen Pha mẫu trắng, đo phổ hấp thụ nguyên tử 1M, Đệm xitrat pH = 2, Áp d ụng cơng thức tính LOD, LOQ theo asen mẫu môi trường phản ứng HCl 6M, HCl 2M, HCl phương pháp đa biến theo câu l ệnh 4.11.1.2 LOD = 3*norm(Z)/norm(M) ; LOQ = 10*norm(Z)/norm(M) , với Z ma trận phổ hấp thụ nguyên tử asen mẫu trắng, M ma trân hệ số hồi qui tính theo phương pháp PCR Kết thu sau : Dạng As LOD, ppb LOQ, ppb As(III) 0,11 0,36 As(V) 0,43 1,44 DMA 0,33 1,09 MMA 0,15 1,09 Bảng 4.3 Giá trị LOD LOQ phân tích đồng thời dạng As 4.11.1.3 Kiểm tra tính cộng tính dạng As 45 Để kiểm tra, tiến hành xác định mối quan h ệ gi ữa tín hi ệu đo n ồng độ dạng As có mặt lượng xác định dạng khác dung d ịch so sánh với đường biểu diễn quan hệ hai đại lượng dung dịch khơng có mặt dạng khác Kết cho thấy dạng asen có kh ả c ộng tính cao, sử dụng mơ hình đa biến tuyến tính Đường chuẩn đa biến Chuẩn bị dãy dung dịch chuẩn gồm 40 dung dịch có nồng độ thay đổi đo độ hấp thụ môi trường phản ứng bao gồm: HCl 6M, HCl 2M, HCl 1M, dung dịch đệm xitric-xitrat 1M có pH = 2, 3, điều kiện đo tối ưu xác định v ới dung dịch so sánh mẫu trắng Tín hiệu đo chuyển vào matlab làm đường chuẩn xác định dạng asen 4.11.1.4 Xác định nồng độ dạng As mẫu nước ng ầm theo ph ương pháp HVG-AAS sử dụng mơ hình PCR Kết thu sau: Nồng độ chất, ppb Mẫu As(III) As(V) DMA MMA 5,1±0,1 RSD = 2% 2,1 ± 0,2 RSD = 2%