Đây là một bài báo cáo chủ đề sắc kí lớp mỏng của bộ môn dược liệu 1. Toàn bộ bài báo cáo đã được hoàn chỉnh và công chiếu trên lớp học. Theo kết quả nhận xét của giảng viên bộ môn bài báo cáo này hoàn toàn đạt yêu cầu và được điểm 910.
TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA DƯỢC- ĐIỀU DƯỠNG BÁO CÁO DƯỢC LIỆU NHÓM – LỚP ĐH DƯỢC 11C GVHD: THS ĐỖ VĂN MÃI NHÓM WE ARE A FAMILY Nguyễn Anh Tuấn Ngô Thị Cẩm Thi Lê Đặng Quế Trân Nguyễn Kim Thoa Lê Hoàng Quế Trân Lưu Trí Thơng Đồn Thị Ngọc Trân Huỳnh Ngọc Thư Lê Thị Thu Trang Nguyễn Anh Thư Nguyễn Huỳnh Linh Trang Nguyễn Thị Thư Nguyễn Thị Trang Trần Thị Anh Thư Trần Thị Kiều Trang Huỳnh Hữu Thước Hà Ngọc Diễm Trinh Huỳnh Nguyễn Thanh Thuý Lê Phú Trọng Dương Cẩm Tiên Bùi Cơng Trứ Nguyễn Trọng Tính Bùi Trần Ngọc Trúc Trần Quốc Toãn Trần Nhựt Trường Trần Anh Tuấn Lê Huỳnh Gia Tuệ Lê Thị Kim Tuyến Nguyễn Lê Oanh Tuyền Nguyễn Phước Thanh Vy Nguyễn Thị Tường Vy Phù Thanh Thuý Vy Trần Nguyễn Thanh Vy Nguyễn Nhân Ý Nguyễn quang huy Bùi vũ lam phương Ngô tuyết Trong chương 9: coumarin dược liệu chứa coumarin học có phương pháp định tính coumarin dược liệu? Đáp án: Định tính hóa học: định tính nhóm OH phenol, thử nghiệm vi thăng hoa, thử nghiệm dựa đóng mở vòng lacton,… Sắc ký: sắc ký lớp mỏng Quang phổ Sắc ký lớp mỏng (Thin layer chromatography) NỘI DUNG: KIẾN THỨC TỔNG QUÁT VỀ SKLM A B C D E CÁC BƯỚC CHUẨN BỊ TRƯỚC KHI SKLM TIẾN HÀNH SKLM CÁC ỨNG DỤNG VÀ CÔNG DỤNG CỦA SKLM CÁC HIỆN TƯỢNG NGOẠI Ý THƯỜNG GẶP TRONG SKLM VÀ CÁCH KHẮC PHỤC A: TỔNG QUÁT VỀ SKLM: I Phương pháp Sắc ký Lịch sử phát hiện Năm 1906, nhà thực vật dược người Nga Mikhail Tswett (1872-1919) phát minh sắc ký dùng sắc ký cột với chất nhồi calci carbonat để tách các sắc tố thực vật clorophyl xanthophyll Chính ơng đặt tên cho kỹ thuật chromatography = chroma (màu) + graphein (viết) Mikhail Tswett (1872-1919) A: TỔNG QUÁT VỀ SKLM: I Phương pháp sắc ký: 2.Khái niệm phương pháp sắc ký: Sắc ký phương pháp phân tách lý - hóa đó các chất tách khỏi hỗn hợp dựa “phân bố” liên tục của chúng giữa pha: • Một pha khơng chuyển động (pha tĩnh) • Một pha chuyển động (pha đợng) dịch chuyển qua pha tĩnh theo phương xác định A: TỔNG QUÁT VỀ SKLM: I Phương pháp sắc ký 2.Các yếu tố quan trọng hệ thống sắc ký: Cơ chế phân tách những yếu tố quan trọng Pha tĩnh Các chế phân tách: phân bố, hấp thụ, rây phân tử, trao đổi ion, điện di, ái lực,… Pha động Cơ chế phân bố hấp thụ chế sử dụng chủ yếu hiện A: TỔNG QUÁT VỀ SKLM: Pha tĩnh:Thông dụng sắc ký hấp phụ hiện Silica gel Silica gel Nhôm oxyd Chất lỏng sử dụng làm pha tĩnh có thể chất phân cực (phân bố pha thuận) hay không phân cực (phân bố pha đảo) Nhúng mỏng vào mợt lọ có chứa dung dịch thuốc thử Ưu điểm: dung dịch thuốc thử có thể phủ lên mặt bản Nhược điểm: các chất mẫu nằm bản, gặp lượng lớn thuốc thử, chúng hòa tan vào thuốc thử, có thể biến khỏi bản Bước 4: Đánh giá Quan sát các vết xuất hiện, tính giá trị Rf Rr quy định chuyên luận riêng Click to edit Master text styles Second level Third level Fourth level Fifth level tiến hành định tính, phát hiện tạp chất định lượng Ðại lượng đặc trưng cho mức độ di chuyển của chất phân tích hệ số di chuyển Rf tính tỷ lệ giữa khoảng dịch chuyển của chất phân tích khoảng dịch chuyển của pha động: Rf = a b a: khoảng cách từ điểm xuất phát đến tâm của vết mẫu thử, tính cm b: khoảng cách từ điểm xuất phát đến mức dung môi đo đường của vết, tính cm Rf: Chỉ có giá trị từ đến l Việc sắc ký lớp mỏng tiến hành điều kiện chuẩn hoá cho kết quả có độ tin cậy cao Hiện người ta thường tiến hành sắc ký với giúp đỡ của hệ thống sắc ký lớp mỏng hiệu cao (Planar chromatography – HPLC) Click to edit Master text styles Second level Third level Fourth level Fifth level D ỨNG DỤNG & CÔNG DỤNG SẮC KÝ LỚP MỎNG Phân tích định tính Trực tiếp mỏng Phân tích định lượng Tách chiết chất phân tích vết sắc kí bằng dung mơ thích hợp Phân tích hợp chất hữu Ứng dụng phân tích định tính Thường dựa vào trị số Rf của mẫu thử mẫu chuẩn chạy sắc kí điều kiện Đảm bảo số vùng Rf sắc đồ để dễ nhận biết Ứng dụng phân tích định lượng Định lượng trực tiếp mỏng: đo diện tích hay cường độ màu của vết sắc kí Hiện dùng kỹ thuật: Densimeter: chiếu chùm tia vào vết sắc ký đo cường độ hấp thụ huỳnh quang Xử lý ảnh vói camera kỹ thuật số: quét bản mỏng với hệ thống phân tích hình ảnh, camera kĩ thuật số có độ phân giải cao để thu nhận hình ảnh của vết sắc ký Xử lý dữ liệu ảnh máy tính Tách chiết chất phân tích vết sắc kí bằng dung mơ thích hợp: sau làm dịch chiết, định lượng chất phân tích kỹ thuật thích hợp (phổ hấp thụ, huỳnh quang…) Phương pháp hiện dung có nhiều trở ngại, tốn thời gian Phân tích hợp chất hữu • • • • Tách cô lập hợp chất: phenol, rượu, gluco, axit, amin, aminoaxit, chất kháng sinh, protein, peptit, vitamin, thuốc nhuộm… Phân tích dược phẩm, y học Các mẫu thuộc linh vực hóa sinh: độc tố nấm, thực vật, tách mẫu thực vật, thuốc trừ sâu… Giám sát phản ứng hữu Ngoài ra, mợt số ứng dụng khác: Tách các hạt chất từ hỗn hợp Kiểm nghiệm dược liệu Theo dõi phản ứng, tối ưu hóa phản ứng Theo dõi quá trình sắc ký cột E CÁC HIỆN TƯỢNG NGOẠI Ý THƯỜNG GẶP VÀ CÁCH KHẮC PHỤC Nguyên nhân: Mẫu nhiều tạp phân cực Cách khắc phục: Loại tạp kỹ trước chấm lên bản Vết di chuyển khơng hồn tồn E CÁC HIỆN TƯỢNG NGOẠI Ý THƯỜNG GẶP VÀ CÁCH KHẮC PHỤC Nguyên nhân: Vết chấm hình tròn quá lớn Cách khắc phục: Chấm nhỏ với nồng độ cao chấm vạch Vết hình móng ngựa E CÁC HIỆN TƯỢNG NGOẠI Ý THƯỜNG GẶP VÀ CÁCH KHẮC PHỤC Nguyên nhân: Chấm các vết quá gần Cách khắc phục: Chấm khoảng cách vết theo đúng qui định Các vết lân cận trùng E CÁC HIỆN TƯỢNG NGOẠI Ý THƯỜNG GẶP VÀ CÁCH KHẮC PHỤC Nguyên nhân: Chấm vết không trùng Cách khắc phục: Chấm kỹ lại bản mỏng khác Vết hình lửa nhiều đầu Thanks you for attention