KHẢO SÁT SỰ THAY ĐỔI CÁC TẾ BÀO BIỂU MÔ ÂM ĐẠO TRONG CHU KỲ ĐỘNG DỤC CỦA CHÓ CÁI VÀ CÁC TRƯỜNG HỢP BỆNH LÝ

i XÁC NHẬN CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN  Họ và tên sinh viên thực tập: NGUYỄN NGỌC ÁNH Tên luận văn: “Khảo sát sự thay đổi các tế bào biểu mô âm đạo trong chu kỳ động dục của chó cá

BỘ GIÁO DỤC và ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HỒ CHÍ MINH

KHOA CHĂN NUÔI - THÚ Y

********

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP

KHẢO SÁT SỰ THAY ĐỔI CÁC TẾ BÀO BIỂU MÔ

ÂM ĐẠO TRONG CHU KỲ ĐỘNG DỤC CỦA CHÓ

BỘ GIÁO DỤC và ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HỒ CHÍ MINH

KHOA CHĂN NUÔI THÚ - Y

*************

NGUYỄN NGỌC ÁNH

KHẢO SÁT SỰ THAY ĐỔI CÁC TẾ BÀO BIỂU MÔ

ÂM ĐẠO TRONG CHU KỲ ĐỘNG DỤC CỦA CHÓ

i

XÁC NHẬN CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN



Họ và tên sinh viên thực tập: NGUYỄN NGỌC ÁNH

Tên luận văn: “Khảo sát sự thay đổi các tế bào biểu mô âm đạo trong chu kỳ động

dục của chó cái và các trường hợp bệnh lý”

Đã hoàn thành luận văn theo đúng yêu cầu của giáo viên hướng dẫn và các ý kiến

nhận xét đóng góp của hội đồng chấm thi tốt nghiệp khoa,

ngày………

 Xin chân thành tỏ lòng biết ơn vô hạn đến

 Tiến sĩ Đỗ Hiếu Liêm và thạc sĩ thú y Phạm Ngọc Kim Thanh, những người đã tận tình hướng dẫn, giúp đỡ và đóng góp ý kiến quý báu tạo điều kiện cho tôi trong suốt thời gian học tập và thực tập tốt nghiệp

 Xin chân thành cám ơn:

 Ban giám hiệu trường đại học Nông Lâm TP HCM

 Ban chủ nhiệm khoa chăn nuôi thú y

 Bộ môn sinh lý sinh hóa và cùng toàn thể quý cô giảng dạy khoa chăn nuôi thú y trường đại học nông lâm đã hết lòng truyền đạt kiến thức và kinh nghiệm cho tôi trong suốt quá trình học tập tại trường

 Xin cám ơn bác sĩ Hưng, bác sĩ Yến cùng những bạn bè ở phòng mạch

đã tận tình giúp đỡ và tạo điều kiện thuận lợi tại phòng mạch cho tôi trong suốt thời gian thực tập tốt nghiệp

 Xin cảm ơn bạn Luân, bạn Huyền và những bạn đã trực tiếp hay gián tiếp giúp đỡ tôi hoàn thành khóa thực tập này

iii

MỤC LỤC



XÁC NHẬN CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN i 

LỜI CẢM TẠ ii 

MỤC LỤC iii 

DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT vi 

DANH SÁCH CÁC BẢNG viii 

DANH DÁCH BIỂU ĐỒ VÀ SƠ ĐỒ ix 

TÓM TẮT LUẬN VĂN x 

Chương 1 MỞ ĐẦU 1 

1.1 Đặt vấn đề 1 

1.2 Mục đích và yêu cầu 2 

1.2.1 Mục đích 2 

1.2.2 Yêu cầu 2 

Chương 2 TỔNG QUAN 3 

2.1 Cơ quan sinh sản chó cái 3 

2.1.1 Cấu tạo 3 

2.1.1.1 Buồng trứng 3 

2.1.1.2 Ống dẫn trứng 4 

2.1.1.3 Tử cung 4 

2.1.1.4 Âm đạo 4 

2.1.1.5 Tiền đình 5 

2.1.1.6 Âm hộ hay âm môn 5 

2.2 Sinh lý sinh sản chó cái 5 

2.2.1 Tuổi thành thục 5 

2.2.2 Chu kỳ động dục 5 

2.2.2.1 Giai đoạn trước động dục 6 

iv

2.2.2.2 Giai đoạn động dục 7 

2.2.2.3 Giai đoạn sau động dục 7 

2.2.2.4 Giai đoạn nghỉ ngơi 8 

2.2.3 Một số yếu tố ảnh hưởng đến chu kỳ động dục của chó cái 8 

2.2.4 Xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo chó cái 9 

2.2.4.1 Các loại tế bào biểu mô âm đạo 10 

2.2.4.2 Tỷ lệ các loại tế bào biểu mô qua các giai đoạn trong chu kì động dục 11 

2.3 Các ứng dụng xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo 15 

2.4 Kỹ thuật siêu âm 19 

2.4.1 Nguyên lý 19 

2.4.2 Ứng dụng siêu âm để chẩn đoán bệnh lý 20 

2.5 Một số công trình nghiên cứu liên quan 21 

Chương 3 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP KHẢO SÁT 23 

3.1 Thời gian và địa điểm khảo sát 23 

3.1.1 Thời gian thực hiện 23 

3.1.2 Địa điểm thu thập mẫu và phân tích 23 

3.2 Vật liệu 23 

3.2.1 Dụng cụ 23 

3.2.2 Hóa chất 23 

3.3 Thú khảo sát 23 

3.4 Nội dung nghiên cứu và phương pháp tiến hành 25 

3.4.1 Nội dung 1 25 

3.4.1.1 Mục tiêu 25 

3.4.1.2 Đối tượng và bố trí khảo sát 25 

3.4.1.3 Chỉ tiêu khảo sát nội dung 1 26 

3.4.2 Nội dung 2 26 

3.4.2.1 Mục tiêu 26 

3.4.2.2 Đối tượng và bố trí khảo sát 26 

v

3.4.2.3 Chỉ tiêu khảo sát nội dung 2 27 

3.5 Phương pháp nghiên cứu 27 

3.5.1 Xác định giống chó 27 

3.5.2 Xác định tuổi chó 27 

3.5.3 Xác định các giai đoạn trong chu kỳ động dục dựa vào vết phết âm đạo 28 

3.5.4 Phương pháp thu thập và phân tích mẫu vết phết âm đạo 29 

3.6 Xử lý số liệu bằng phương pháp thống kê 30 

Chương 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 31 

4.1 Tỷ lệ các loại tế bào biểu mô âm đạo qua từng giai đoạn trong chu kỳ động dục 31 

4.1.1 Giai đoạn trước động dục 31 

4.1.2 Giai đoạn động dục 35 

4.1.3 Giai đoạn sau động dục 39 

4.1.4 Giai đoạn nghỉ ngơi 43 

4.2 Chẩn đoán bệnh trên đường sinh dục chó cái 46 

4.2.1 Tần suất các biểu hiện lâm sàng 46 

4.2.2 Kết quả siêu âm trong chẩn đoán viêm đường sinh dục 48 

4.2.3 Nhận định kết quả điều trị 54 

Chương 5 KẾT LUẬN TỒN TẠI VÀ ĐỀ NGHỊ 56 

5.1 KẾT LUẬN 56 

5.2 TỒN TẠI 57 

5.3 ĐỀ NGHỊ 57 

TÀI LIỆU THAM KHẢO 58 

PHỤ LỤC PHÂN TÍCH THỐNG KÊ xiii 

vi

DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT



CG : Tế bào cận gốc

TG : Tế bào trung gian

TG – BM : Tế bào trung gian bề mặt

BM : Tế bào bề mặt

TCC : Transitional cell tumor – ung thư tế bào chuyển tiếp tử cung TVT : Transismissible venereartumor – bướu truyền lây do giao phối SCC : Squamous cell carcinoma - ung thư tế bào vảy

vii

DANH SÁCH CÁC HÌNH



Hình 2.1 Cấu tạo cơ quan sinh dục chó cái 3 

Hình 2.2 Các giai đoạn trong chu kỳ động dục của chó cái 6 

Hình 2.3 Lớp biểu mô âm đạo của chó cái 10 

Hình 2.4 Các loại tế bào biểu mô âm đạo 11 

Hình 2.5 Vết phết âm đạo ở giai đoạn trước động dục 12 

Hình 2.6 Vết phết âm đạo ở giai đoạn động dục 13 

Hình 2.7 Vết phết âm đạo ở giai đoạn sau động dục 14 

Hình 2.8 Vết phết âm đạo ở giai đoạn nghỉ ngơi 15 

Hình 2.9 Vết phết âm đạo của chó cái bị viêm đường sinh dục 17 

Hình 2.10 Vết phết âm đạo của chó ta bị bướu 18 

Hình 3.1 Cách thu thập, phết phiến kính và nhuộm vết phết 29 

Hình 4.1 Âm hộ chó cái giai đoạn trước động dục 31 

Hình 4.2 Các loại tế bào trong vết phết âm đạo ở giai đoạn trước động dục 33 

Hình 4.3 Tỷ lệ tế bào biểu mô giai đoạn động dục 36 

Hình 4.4 Vết phết âm đạo giai đoạn sau động dục 40 

Hình 4.5 Vết phết âm đạo ở giai đoạn nghỉ ngơi 43 

Hình 4.6 Âm hộ chó cái bị bướu 50 

Hình 4.7 Vết phết âm đạo của chó nhật bị bướu 51 

Hình 4.8 Vết phết âm đạo chó Nhật bị viêm tử cung 52 

Hình 4.9 Hai sừng tử cung sưng to, tích đầy dịch mủ trên chó Nhật bị viêm tử cung 53 

Hình 4.10 Hình ảnh siêu âm tử cung chó Nhật bị viêm 53 

viii

DANH SÁCH CÁC BẢNG



Bảng 3.1 Bảng theo dõi chó cái bình thường 24 

Bảng 3.2 Bảng theo dõi chó cái bệnh lý 24 

Bảng 3.3 Kết quả phân tích tế bào âm đạo 24 

Bảng 3.4 Số chó cái bình thường khảo sát ngẫu nhiên tại phòng khám 26 

Bảng 3.5 Số chó cái có biểu hiện bệnh lý ở đường sinh dục 27 

Bảng 3.6 Xác định các giai đoạn của chu kỳ sinh dục dựa vào tỷ lệ các loại tế bào trong vết phết âm đạo 28 

Bảng 3.7 Xác định các giai đoạn của chu kỳ sinh dục 28 

Bảng 4.1 Số chó khảo sát qua từng giai đoạn 31 

Bảng 4.2 Tỷ lệ các loại tế bào biểu mô âm đạo ở giai đoạn trước động dục 32 

Bảng 4.3 Tỷ lệ tế bào biểu mô âm đạo ở giai đoạn trước động dục 34 

Bảng 4.4 Tỷ lệ các loại tế bào biểu mô âm đạo ở giai đoạn động dục 36 

Bảng 4.5 Tỷ lệ tế bào biểu mô âm đạo ở giai đoạn động dục 39 

Bảng 4.6 Tỷ lệ các loại tế bào biểu mô âm đạo ở giai đoạn sau động dục 40 

Bảng 4.7 Tỷ lệ các loại tế bào biểu mô ở giai đoạn sau động dục 42 

Bảng 4.8 Tỷ lệ tế bào biểu mô âm đạo ở giai đoạn nghỉ ngơi 44 

Bảng 4.9 Tỷ lệ tế bào biểu mô âm đạo ở giai đoạn nghỉ ngơi của các tác giả 46 

Bảng 4.10 Tần suất biểu hiện các triệu chứng lâm sàng 47 

Bảng 4.11 Kết quả khám lâm sàng so với xét nghiệm vết phết âm đạo 47 

Bảng 4.12 Kết quả siêu âm so với xét nghiệm vết phết âm đạo 48 

Bảng 4.13 Tỷ lệ chó bị viêm đường sinh dục theo nhóm tuổi và lứa đẻ 49 

Bảng 4.14 Tỷ lệ chó bệnh lý trên đường sinh dục 50 

động dục 41 

Biểu đồ 4.4 Tỷ lệ từng loại tế bào biểu mô giữa các nhóm tuổi chó ở giai đoạn nghỉ

ngơi 44 

x

TÓM TẮT LUẬN VĂN

Đề tài “khảo sát sự thay đổi các tế bào biểu mô âm đạo trong chu kỳ động dục của chó cái và các trường hợp bệnh lý” được thực hiện từ tháng 2 đến tháng 6 tại phòng mạch thú y tư nhân số 6 - Trần Hưng Đạo - Hiệp Phú - quận 9, gồm hai nội dung và có kết quả như sau:

Trong 37 chó cái có chu kỳ động dục bình thường chúng ta thấy:

Ở giai đoạn trước động dục tỷ lệ tế bào cận gốc chiếm thấp nhất là 5 %, tế bào trung gian là 33 %, tỷ lệ tế bào trung gian bề mặt chiếm 30%, tế bào bề mặt là 32%

Vào giai đoạn động dục tỷ lệ tế bào cận gốc không hiện diện trong vết phết,

tế bào trung gian giảm mạnh chỉ còn 6 % Trong khi đó, tỷ lệ tế bào bề mặt chiếm

ưu thế với 74 %, tế bào trung gian bề mặt là 20 %

Đến giai đoạn sau động dục, tỷ lệ tế bào cận gốc tăng lên khoảng 10 %, tế bào trung gian lên cao chiếm 38 % Còn tỷ lệ tế bào bề mặt giảm nhanh chỉ còn khoảng 29 %, trung gian bề mặt thì dao động ít khoảng 23 %

Vào giai đoạn nghỉ ngơi, tỷ lệ tế bào cận gốc chiếm tỷ lệ cao khoảng 42 %, sau đó là tế bào trung gian 39 %, tỷ lệ tế bào trung gian bề mặt là 10 % và thấp nhất

Bướu đường sinh dục: Trong vết phết có sự hiện diện của các tế bào biểu mô bất thường về hình dạng, kích thước, nhân và tế bào chất có nhiều không bào

Xét nghiệm âm đạo có thể hỗ trợ cho khám lâm sàng và siêu âm trong việc phát hiện các trường hợp bệnh lý trên đường sinh dục của chó cái

1

Chương 1

MỞ ĐẦU

1.1 Đặt vấn đề

Trong những năm gần đây, cùng với sự phát triển của xã hội, sự tăng trưởng

về sở thích và nhu cầu nuôi thú cưng ở Việt Nam ngày càng tăng Trong các loại thú cưng, chó là loài động vật được ưa chuộng nhất Chó không chỉ được nuôi nhằm mục đích giữ nhà mà còn để làm bạn, giải trí, làm thú cảnh Vì vậy, nuôi chó đang trở thành một ngành nghề chăn nuôi mới Các nhà chăn nuôi đã tiến hành nhân giống chó cả về số lượng lẫn chủng loại để đáp ứng nhu cầu của người nuôi Tuy nhiên, trong công tác phối giống, người nuôi gặp không ít khó khăn như: xác định thời điểm rụng trứng, thời điểm phối giống, xác định mang thai hay phát hiện các tình trạng bệnh lý đường sinh dục ở giai đoạn tiền lâm sàng

Hiện nay, ở nước ta, các kỹ thuật hiện đại như: Siêu âm, x-quang đã được sử dụng trong công tác chẩn đoán thai và bệnh lý trên chó Tuy nhiên, các kỹ thuật này chưa xác định được thời điểm rụng trứng, thời điểm phối giống hoặc các tình trạng bệnh lý ở giai đoạn tiền lâm sàng trên đường sinh dục Ngoài các kỹ thuật trên, kỹ thuật xét nghiệm tế bào âm đạo là xét nghiệm nhân y được nghiên cứu để khảo sát tình trạng sinh lý sinh sản trên chó cái Sự biến đổi tỷ lệ các loại tế bào biểu mô âm đạo tương ứng với nồng độ estrogen huyết thanh qua từng giai đoạn trong chu kỳ động dục Mặt khác, từ sự xuất hiện của các tế bào bất thường trên vết phết, có thể phát hiện các trường hợp bệnh lý ở đường sinh dục gây ảnh hưởng đến khả năng sinh sản của chó cái Sự thay đổi số lượng các loại tế bào trong vết phết sẽ phục vụ cho công tác phối giống của người nuôi được tốt hơn nhờ biết được thời điểm phối giống Xuất phát từ những vấn đề trên, được sự chấp thuận của bộ môn Sinh lý –

3

Chương 2 TỔNG QUAN

2.1 Cơ quan sinh sản chó cái

2.1.1 Cấu tạo

Cơ quan sinh dục chó cái gồm buồng trứng (noãn sào), ống dẫn trứng, tử cung, âm đạo, tiền đình, âm hộ (âm môn), nhũ tuyến (Phan Quang Bá, 2008)

Hình 2.1 Cấu tạo cơ quan sinh dục chó cái

(Nguồn: Shauna O'Meara, 2009)

2.1.1.1 Buồng trứng

Buồng trứng gồm một đôi, hình hạt đậu nằm ở hai bên của xoang bụng, ở phía sau thận Mỗi buồng trứng được đính bởi dây riêng vào tử cung và dây treo vào cân mạc ngang cửa bụng, ngay phía trong của xương sườn chót, khoảng đốt sống thắt lưng thứ 3 hoặc thứ 4 Buồng trứng phải thường nằm về trước hơn buồng trứng

4

trái (vị trí khoảng 1/3 dưới thận trái) Buồng trứng vừa là tuyến ngoại tiết sản xuất

tế bào sinh dục cái (noãn bào), vừa là tuyến nội tiết tổng hợp và phân tiết kích thích

tố estrogen, progesterone Buồng trứng dính với thắt lưng nhờ vào phần trước của dây chằng rộng tử cung, phần này gọi riêng là màng treo buồng trứng

2.1.1.2 Ống dẫn trứng

Ống dẫn trứng là một ống ngoằn ngoèo, nối chuyển từ buồng trứng tới tử cung Ở đầu sau, ống dẫn trứng có đường kính nhỏ, càng về phía noãn sào, càng lớn dần, đến buồng trứng nở rất rộng, bao phủ phần lớn buồng trứng (nơi không có màng bụng) phần mở rộng này gọi là loa vòi (hay phễu ống dẫn trứng, vòi Fallop) Trứng rụng sẽ rơi vào phễu, đi vào ống dẫn trứng và đi tiếp vào tử cung

2.1.1.3 Tử cung

Tử cung của chó cái có dạng chữ Y; gồm hai sừng tử cung, thân tử cung và cổ

tử cung Tử cung định vị ở khoảng giữa phần bụng của bàng quang và kết tràng xuống (một phần nằm trong xoang bụng và một phần trong xoang chậu) Kích thước của tử cung rất thay đổi, phụ thuộc vào tầm vóc của thú, số lần mang thai, tình trạng bệnh lý sinh sản, chó cái có mang thai hay không mang thai

Sừng tử cung là một ống màng cơ, hơi hẹp từ vùng lưng xuống bụng, tiếp nối với ống dẫn trứng ở phía trước và thân tử cung ở phía sau Sừng tử cung nằm hoàn toàn trong xoang bụng, sừng bên phải thường dài hơn sừng bên trái.Thân tử cung nằm trong xoang bụng và một phần trong xoang chậu, phía trước tiếp nối với 2 nhánh của sừng tử cung và phía sau là âm đạo thông qua cổ tử cung Cổ tử cung là phần thu hẹp của thân tử cung tiếp nối với âm đạo

2.1.1.4 Âm đạo

Âm đạo là phần nối tiếp phía sau cổ tử cung, nằm hoàn toàn trong xoang chậu,

là một ống cơ, tiết diện có thể dãn nở rất lớn Phía trên âm đạo tiếp xúc với trực tràng, phía dưới với bàng quang và ống thoát tiểu Âm đạo đảm nhận các chức năng như tiếp nhận dương vật của thú đực trong quá trình phối giống và là đường tiếp dẫn thú con sinh ra

5

2.1.1.5 Tiền đình

Tiền đình là phần cuối âm đạo và âm hộ phía sau

2.1.1.6 Âm hộ hay âm môn

Âm hộ là cửa ngỏ của cơ quan sinh dục cái, nằm dưới hậu môn Cửa mở của

âm hộ có hình bầu dục, hai bên là hai môi

2.2 Sinh lý sinh sản chó cái

2.2.1 Tuổi thành thục

Tuổi thành thục sinh dục hay tuổi xuất hiện lần động dục đầu tiên, là tuổi mà

bộ phận sinh dục bắt đầu hoạt động, là thời kỳ thú trưởng thành sinh dục Có nghĩa

là buồng noãn bào khi ấy đã có thể xuất noãn và noãn có khả năng thụ tinh Bên ngoài thú có những biểu hiện lâm sàng, bên trong có hiện tượng nang noãn chín muồi và xuất noãn.Quá trình thành thục sinh dục phụ thuộc vào giống chó, đặc tính

cá thể, điều kiện sống (khí hậu, thời tiết, độ dài ngày, sự vận động ) và thức ăn Hopkins và ctv (2002) (trích dẫn của Lê Vĩnh Nguyên Hân, 2005), ghi nhận

sự thành thục tính dục của các giống chó nhỏ thường xảy ra rất sớm và có nhiều biến động Chó có trọng lượng dưới 15 kg thành thục vào khoảng 6 - 8 tháng tuổi, các chó có trọng lượng lớn hơn động dục vào khoảng 8 - 10 tháng tuổi Do vậy, tuổi thành thục của chó cái biến động trong khoảng 5 - 12 tháng tuổi

ra làm bốn giai đoạn là trước động dục, động dục, sau động dục và nghỉ ngơi

6

Hình 2.2 Các giai đoạn trong chu kỳ động dục của chó cái

(Nguồn: Đỗ Hiếu Liêm, 2003)

2.2.2.1 Giai đoạn trước động dục

Feldman và Nelson (1996); Gilbert (1998); Root (2002); Conea (2002), (trích dẫn của Lê Vĩnh Nguyên Hân, 2005), nhận thấy giai đoạn trước động dục là giai đoạn đầu tiên của chu kỳ, kéo dài 6 – 11 ngày

Vũ Như Quán (2011) cho rằng thời gian trước động dục dao động 3 – 16 ngày, trung bình 9 ngày Tuy nhiên, khoảng thời gian này rất biến động, có thể là 2 – 3 ngày và có thể là 25 ngày Nó là giai đoạn từ khi hoàng thể thoái hóa hoàn toàn đến lần động dục tiếp theo Giai đoạn trước động dục bao gồm sự phát triển và chín của nang noãn trong buồng trứng Estrogen được phân tiết từ các nang noãn đi vào máu, lượng estrogen trong máu tăng cao dần và đạt đỉnh vào cuối giai đoạn trước khi chuyển qua giai đoạn động dục Do tác động của estrogen, xuất hiện những thay đổi

7

đặc trưng trong cơ quan sinh dục và hành vi của chó cái: Âm hộ lúc này xung huyết, sưng to lên, mọng nước, ửng đỏ, tươi tắn Từ âm hộ chó cái có máu chảy ra Theo Trần Thị Dân (2002), hiện tượng máu tiết ra ngoài ở giai đoạn này gọi là “hành kinh giả” Ở chó cái, sự chảy máu từ khe sinh dục xuất hiện trước khi rụng trứng Chó cái có biểu hiện liếm âm hộ, đi tiểu thường xuyên, trở nên khó bảo, thích chơi với chó đực nhưng chưa cho chúng giao phối

2.2.2.2 Giai đoạn động dục

Theo Feldman và Nelson (1996); Davel (2000); Corvea (2002) (trích dẫn của

Lê Vĩnh Nguyên Hân, 2005), giai đoạn động dục là khoảng thời gian chịu đực của chó cái, chúng cho phép chó đực chồm nhảy và phối giống Có thể xem ngày đầu tiên chó cái cho phép phối giống là thời điểm bắt đầu giai đoạn động dục

Beinmborn và ctv (2001),(trích dẫn của Lê Vĩnh Nguyên Hân, 2005), ghi nhận giai đoạn này kéo dài 9 – 18 ngày, nhưng có thể biến động trong khoảng 3 –

21 ngày Sự rụng noãn bào xảy ra sau 24 – 48 giờ

Theo Vũ Như Quán (2011), sự rụng trứng xảy ra 1 – 3 ngày từ khi bắt đầu có dấu hiệu ham muốn; đôi khi sớm hơn (trong vòng 2 ngày trước khi biểu hiện đòi đực) hay muộn hơn (5 – 7 ngày sau khi sự ham muốn) Trong giai đoạn này, âm hộ mềm, teo lại và thải máu nhiều ở giai đoạn trước động dục, sau đó giảm tiết dịch máu và có màu trong hơn Khi chó đực đến gần, chó cái cũng biểu hiện có phản ứng cong đuôi lên (còn gọi hiện tượng trổ cờ), đồng thời cho phép con đực ngửi âm hộ, tạo điều kiện thuận lợi nhất cho chó đực giao phối

2.2.2.3 Giai đoạn sau động dục

Nếu chó cái được phối giống và đậu thai thì giai đoạn tiếp theo giai đoạn động dục là giai đoạn mang thai Nếu chó cái không được phối giống hay phối giống không đậu thì giai đoạn tiếp theo là giai đoạn sau động dục

Olson và ctv (1982); Feldman và Nelson (1996) (trích dẫn của Lê Vĩnh Nguyên Hân, 2005), xác định lượng progesterone huyết thanh gia tăng trong khoảng thời gian này và kéo dài đến 56 – 59 ngày trong lúc mang thai hoặc 60 – 100 ngày

Sự phân tiết progesterone của hoàng thể đạt được mức độ tối đa vào ngày

20 – 30 của giai đoạn sau động dục, đến ngày thứ 60, lượng progesterone chỉ đạt trung bình 1ng/ml Nếu chó mang thai thì trước khi đẻ, lượng progesterone đạt tới mức tối đa

Do vậy, nếu dựa vào hàm lượng progesterone trong máu, chúng ta không thể phân biệt chó cái đang mang thai hay mang thai giả; vì thế, tất cả biểu hiện sinh lý khác nhau đó được xem như dấu hiệu đặc trưng của giai đoạn sau động dục Ngoài

ra, ở giai đoạn này, các trường hợp bệnh lý ở tử cung, đặc biệt là tử cung tích mủ thường xuất hiện trên chó già

2.2.2.4 Giai đoạn nghỉ ngơi

Beimborn và ctv (2003) (trích dẫn của Lê Vĩnh Nguyên Hân,2005), xác định rằng thời kỳ nghỉ ngơi chấm dứt khi có hiện tượng chảy máu ở đầu thời kỳ trước động dục kế tiếp, giai đoạn này kéo dài trung bình 4 – 5 tháng.Thời gian của giai đoạn nghỉ ngơi khá thay đổi giữa những cá thể khác nhau và bị chi phối bởi nhiều yếu tố như: giống, môi trường, thức ăn, bệnh lý, tuổi tác Đây là giai đoạn dài nhất, trung gian giữa giai đoạn sau động dục với giai đoạn động dục kế tiếp Đây cũng là thời kỳ tuyến não thùy không hoạt động và cũng là thời gian phục hồi cơ quan sinh dục của chó cái

2.2.3 Một số yếu tố ảnh hưởng đến chu kỳ động dục của chó cái

Đỗ Hiệp (1994) (trích dẫn của Phan Thị Bích, 2004), nêu ra một số yếu tố ảnh hưởng đến chu kỳ động dục của chó:

9

 Tuổi: Những chó già thì động dục sẽ chậm và ít hơn những con chó đang ở thời

kỳ trưởng thành sinh dục Chó cái đạt đến tuổi thành thục sớm thì ở lần động dục đầu tiên số lượng trứng thấp hơn so với các lần động dục kế tiếp

 Giống: Các giống có tầm vóc nhỏ thì tuổi thành thục sớm hơn các giống có tầm vóc lớn Chó lai đạt tuổi thành thục sớm hơn chó thuần chủng

 Dinh dưỡng: Chế độ chăm sóc nuôi dưỡng hợp lý giúp cho cá thể đạt tuổi thành thục phù hợp với loại giống Ngoài ra khi chó lên giống và kỳ đẻ tới, khi động dục trở lại, nếu gia tăng mức dinh dưỡng thì sẽ làm gia tăng tỷ lệ rụng trứng

 Pheromon: Con cái mẫn cảm với mùi pheromon có trong nước tiểu con đực vì vậy nên đặt chuồng của con đực gần với chuồng con cái thì nó sẽ sớm động dục trở lại

 Tiếng kêu của con đực: Cũng là nhân tố bên ngoài quan trọng trong việc gợi cảm sự thèm muốn sinh dục chó cái, làm nó có biểu hiện động dục sớm

 Khí hậu: Chó ở vùng khí hậu nóng trưởng thành sớm hơn chó ở vùng khí hậu lạnh

 Yếu tố thần kinh: Khi con thú bị stress thì cũng ảnh hưởng đến chu kỳ động dục của con cái

 Kích thích tố: Các hormon FSH, LH, estrogen, progesterone…được phân tiết không đều cũng ảnh hưởng đến sự động dục của chó cái

 Bệnh lý: Chó cái bị rối loạn sinh sản, mang thai giả do tồn lưu hoàng thể, viêm

tử cung, viêm âm đạo, u nang buồng trứng…

2.2.4 Xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo chó cái

Lớp biểu mô âm đạo là lớp tế bào mỏng lót mặt trong âm đạo, có nguồn gốc từ

lá phôi trong), thuộc loại biểu mô phủ lát kép có thể hóa sừng, (Lâm Thị Thu Hương, 2005)

Sự phát triển của lớp biểu mô âm đạo phụ thuộc vào sự thay đổi các kích thích

tố sinh dục trong suốt thời kỳ động dục Lớp trong cùng tiếp xúc với hệ thống mạch quản gọi là tế bào gốc; sau đó tăng sinh và chuyển dần ra phía ngoài trở thành tế

10

bào cận gốc Lớp tế bào này tách dần xa hệ mạch máu chết dần đi do không được cung cấp dưỡng chất thành tế bào trung gian, sau đó chuyển sang dạng tế bào trung gian bề mặt, tế bào ngày càng xa hệ thống mạch máu chết hoàn toàn và bong tróc khỏi lớp niêm mạc gọi là tế bào bề mặt (trích dẫn của Nguyễn Duy Linh, 2005)

Hình 2.3 Lớp biểu mô âm đạo của chó cái

(Nguồn: Nelson, 1998 – trích dẫn của Lê Vĩnh Nguyên Hân, 2005)

2.2.4.1 Các loại tế bào biểu mô âm đạo

Tế bào cận gốc (hay tế bào cận nền) là tế bào biểu mô có kích thước nhỏ nhất

trong các loại, tế bào hình tròn hoặc bầu dục, nhân rất to và tròn đều, tỉ lệ nhân/tế bào chất thấp Lớp tế bào cận gốc nằm trong cùng, gần lớp tế bào mầm (tế bào nền), được cung cấp máu đầy đủ

Tế bào trung gian có kích thước rất thay đổi, thường lớn hơn tế bào cận gốc, nhưng nhân nhỏ hơn rất nhiều, hình dạng có góc cạnh Sự thay đổi hình thái tế bào biểu mô từ dạng cận nền chuyển sang trung gian là giai đoạn mở đầu cho sự chết của tế bào biểu mô âm đạo

Tế bào trung gian bề mặt là tế bào biểu mô âm đạo chết điển hình, chúng xuất

hiện trong vết phết âm đạo của chó cái vào cuối giai đoạn trước động dục, tế bào có nhiều góc cạnh, dẹp, vách tế bào không còn rõ ràng, tế bào chất và nhân bị tiêu hủy,

vì thế nhân rất nhỏ

11

Tế bào bề mặt hay tế bào vảy là các tế bào biểu mô chết hoàn toàn, không còn nhân, hình dạng dẹp và phẳng; vì thế trong vết phết, các tế bào bề mặt thường bị gấp nếp và hiện diện vào giai đoạn chó cái động dục

Hình 2.4 Các loại tế bào biểu mô âm đạo

(Nguồn: Eilts, 2001 - trích Đỗ Hiếu Liêm, 2006) Nếu dựa vào sự sừng hoá của tế bào có thể chia các tế bào biểu mô thành 2 nhóm: nhóm tế bào không sừng hoá gồm tế bào cận gốc và trung gian và nhóm tế bào sừng hoá gồm tế bào trung gian bề mặt và tế bào bề mặt

Ngoài ra còn có sự hiện diện của vi khuẩn, hồng cầu, bạch cầu

2.2.4.2 Tỷ lệ các loại tế bào biểu mô qua các giai đoạn trong chu kì động dục

Sự biến đổi lớp tế bào biểu mô âm đạo chịu ảnh hưởng bởi estrogen và progesterone Nếu lượng progesterone giảm và lượng estrogen tăng, từ đó gây tăng sinh các tế bào biểu mô, ảnh hưởng đến sự phát triển và biệt hóa các lớp tế bào bề mặt Xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo dựa vào sự biến đổi hình thái của các tế bào biểu mô bong tróc ra từ âm đạo Do đó, việc xác định số lượng từng loại tế bào biểu

mô giúp dự đoán tình trạng sinh lý sinh sản trong chu kỳ động dục của chó cái

12

Sự thay đổi tỷ lệ các tế bào âm đạo bị bong tróc phản ánh ít nhiều về động thái của lượng estrogen tương ứng và ước lượng tác động của progesterone Do đó, có thể nói rằng xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo là xét nghiệm gián tiếp liên quan đến hoạt động nội tiết (Nelson, 1998) (trích dẫn của Đỗ Hiếu Liêm, 2006)

(1) Các loại tế bào biểu mô âm đạo ở giai đoạn trước động dục

Ghi chú: TG tế bào trung gian, TG - BM tế bào trung gian bề mặt ,

BM tế bào bề mặt, HC hồng cầu, BC Bạch cầu

Hình 2.5 Vết phết âm đạo ở giai đoạn trước động dục

(Nguồn: Spano, 2002 - trích Đỗ Hiếu Liêm, 2006) Trong nghiên cứu của Feldman và Nelson (1996),(trích dẫn của Đỗ Hiếu Liêm, 2006), các loại tế bào biểu mô âm đạo vào đầu giai đoạn trước động dục tương tự như ở cuối giai đoạn nghỉ ngơi; chủ yếu gồm tế bào cận gốc và tế bào trung gian, nhưng có thể phân biệt hai giai đoạn này bằng cách dựa vào sự hiện diện của hồng cầu, bạch cầu trung tính và vi khuẩn

13

Giữa giai đoạn trước động dục, bạch cầu trung tính không còn thấy trên tiêu bản vết phết âm đạo, nhiều hồng cầu và tỷ lệ tế bào bề mặt gia tăng, thay thế dần các tế bào trung gian và trung gian bề mặt

Cuối giai đoạn trước động dục, vết phết có thể có một ít hồng cầu, không có bạch cầu; vì thế, tiêu bản dễ quan sát hơn, tế bào bề mặt chiếm tỷ lệ cao

(2) Các loại tế bào biểu mô âm đạo ở giai đoạn động dục

Dore (1978); Eilts (2001); Hopkins (2003) (trích dẫn của Đỗ Hiếu Liêm, 2006), nhận định chó cái ở giai đoạn động dục, số lượng tế bào bề mặt chiếm cao nhất, có thể lên đến  90 % Số tế bào bề mặt tăng phản ảnh của sự gia tăng hàm lượng estrogen huyết thanh ở giai đoạn trước động dục Trong vết phết không có sự hiện diện tế bào cận gốc và trung gian; ngoài ra, hồng cầu và vi khuẩn có thể có hoặc không

Ghi chú: BM tế bào bề mặt, BC bạch cầu

Hình 2.6 Vết phết âm đạo ở giai đoạn động dục

(Nguồn: Spano, 2002 - trích của Đỗ Hiếu Liêm, 2006)

(3) Các loại tế bào biểu mô âm đạo ở giai đoạn sau động dục

Nếu thú cái không được phối hoặc phối không đậu thai sẽ chuyển từ giai đoạn động dục sang giai đoạn sau động dục

14

Các loại tế bào biểu mô âm đạo vào giai đoạn sau động dục có những thay đổi

rõ rệt so với vết phết ở giai đoạn động dục, số lượng tế bào bề mặt giảm xuống còn khoảng 20 % và chúng được thay thế dần bằng tế bào cận gốc và trung gian Ngoài

ra, bạch cầu trung tính có thể xuất hiện trở lại (Dore, 1978; Feldman và Nelson, 1996) (trích dẫn của Đỗ Hiếu Liêm, 2006)

Giữa và cuối giai đoạn sau động dục, các tế bào biểu mô trong vết phết chủ yếu là tế bào cận gốc, tương tự như vết phết âm đạo ở giai đoạn nghỉ ngơi

Ghi chú: CN tế bào cận nền (tế bào cận gốc), TG tế bào trung gian,

TG - BM tế bào trung gian bề mặt, BC bạch cầu

Hình 2.7 Vết phết âm đạo ở giai đoạn sau động dục

(Nguồn: Spano, 2002 - trích Đỗ Hiếu Liêm, 2006)

(4) Các loại tế bào biểu mô âm đạo ở giai đoạn nghỉ ngơi

Trong giai đoạn nghỉ ngơi, chó cái không thể hiện dục tính, cơ quan sinh dục phục hồi và sửa chữa lớp niêm mạc ở đường sinh dục Vì thế, các tế bào biểu mô

âm đạo bong tróc rất ít, vết phết âm đạo được ghi nhận chủ yếu là tế bào cận gốc và

tế bào trung gian, có thể có vài tế bào bạch cầu và vi khuẩn (Hình 2.8)

15

Ghi chú: CN tế bào cận nền (hay tế bào cận gốc),

TG tế bào trung gian, BC bạch cầu

Hình 2.8 Vết phết âm đạo ở giai đoạn nghỉ ngơi

(Nguồn: Spano, 2002 - trích Đỗ Hiếu Liêm, 2006)

2.3 Các ứng dụng xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo

(1) Quản trị phối giống

Theo Concannon và De Gregario (1986); Jonhson, 1989; Spano (2002); Eilts (2004) (trích dẫn của Lê Vĩnh Nguyên Hân, 2005), thời điểm xuất noãn rất biến động ( khoảng 24 - 48h sau khi chuyển qua giai đoạn động dục, đôi khi sớm hơn trước khi xuất hiện sự ham muốn, đôi khi muộn hơn) vì thế rất khó xác định được thời điểm rụng trứng thích hợp Mặc khác, trứng sau khi rụng khoảng 2 ngày sau mới có khả năng thụ tinh Trong khi đó tinh trùng khi phóng vào đường sinh dục cái giữ được khả năng thụ tinh tới 4 - 7 ngày Vì vậy, để đạt tỉ lệ thụ tinh và số con sinh

ra cao, nên tiến hành phối chó cái vào ngày đầu của giai đoạn động dục và lập lại lần 2 khoảng 3 ngày sau Để xác định ngày đầu tiên của giai đoạn động dục, ngoài kinh nghiệm về hành vi và sinh lý chó cái, thì sự thay đổi rõ nét  90 % tế bào bề mặt hiện diện trên vết phết âm đạo càng giúp cho việc xác định ngày động dục chính xác hơn, hỗ trợ cho công tác phối giống đạt hiệu quả

16

(2) Chẩn đoán bệnh lý

 Chu kỳ động dục không bình thường

Cheri (1989) (trích dẫn của Lê Vĩnh Nguyên Hân, 2005), nhận định trung bình giai đoạn trước động dục trên chó là 9 ngày, kéo dài có thể đến 17 - 21 ngày; do đó, chó cái động dục kéo dài hơn 3 tuần là không bình thường Nguyên nhân gây ra sự động dục dai dẵng trên chó bao gồm u nang buồng noãn bào, ung thư buồng noãn bào, cung cấp estrogen liều cao

Beimborn và ctv (2003) (trích dẫn của Lê Vĩnh Nguyên Hân, 2005), ghi nhận trên một vài cá thể chó không có những biểu hiện tính dục trong giai đoạn trước động dục và động dục Hiện tượng này gọi là động dục thầm lặng Có thể dùng xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo hoặc định nồng độ progesterone trong huyết thanh, khi progesterone huyết thanh đạt ≥ 2ng/ml là dấu hiệu cho thấy sự tồn lưu hoàng thể

 Viêm đường sinh dục

Viêm âm đạo trên chó cái có thể do các nguyên nhân cấu tạo âm đạo bất thường hoặc chưa phát triển, do tác động cơ học hay các chất hóa học trong nước

tiểu, do tác động của vi sinh vật: Brucella canis, Ureaplasma, Herpes virus

Theo Feldman và Nelson (1996); Beimborn (2003) (trích dẫn của Đỗ Hiếu Liêm, 2006), sự hiện diện của bạch cầu trung tính trong vết phết là dấu hiệu điển hình để xác định tình trạng viêm âm đạo

17

Ghi chú: CN tế bào cận nền (hay tế bào cận gốc), TG tế bào trung gian,

BC bạch cầu

Hình 2.9 Vết phết âm đạo của chó cái bị viêm đường sinh dục

( 400 X), (Nguồn: Đỗ Hiếu Liêm, 2006)

Sơ đồ 2.1 Xét nghiệm tế bào trong vết phết âm đạo ở các trường hợp dịch thải máu

(Nguồn: Đỗ Hiếu Liêm, 2006)

18

Sơ đồ 2.2 Xét nghiệm tế bào trong vết phết âm đạo ở các trường hợp dịch thải mủ

(Nguồn: Đỗ Hiếu Liêm, 2006)

 Bướu đường sinh dục

Ghi chú: TBB Tế bào bướu, HC hồng cầu, BC bạch cầu

Hình 2.10 Vết phết âm đạo của chó ta bị bướu

(400 X) (nhuộm Leischman) (Nguồn: Đỗ Hiếu Liêm, 2006)

19

Frost và ctv (2001); Nesbit và ctv (2002); Beimborn và ctv (2003) (trích dẫn của Lê Vĩnh Nguyên Hân, 2005), ghi nhận bướu ở đường sinh dục chó cái bao gồm các dạng: TCC (Transitional cell tumor – ung thư tế bào chuyển tiếp tử cung), TVT (Transismissible venereartumor – bướu truyền lây do giao phối) và SCC (Squamous cell carcinoma - ung thư tế bào vảy) Các loại tế bào bất thường này có thể xác định trong vết phết âm đạo của chó cái

(1) TCC (Transitional cell carcinoma - ung thư tế bào chuyển tiếp ở tử cung): Trong các trường hợp bệnh lý ở đường sinh dục chó cái thì bướu chiếm khoảng 1 % nhưng thường gặp là ung thư tế bào chuyển tiếp Trong vết phết âm đạo, tế bào biểu

mô âm đạo có những bất thường ở nhân như nhân to, không đồng đếu, tế bào và nhân bị phân hủy, tế bào chất bắt màu kiềm và có nhiều không bào

(2) TVT (Transismissible venereartumor – bướu truyền lây do giao phối):

Thường gặp trên chó tơ; chó cái bị lây nhiễm nhiều hơn chó đực, nhất là chó thả rông Các tế bào bướu định vị và phát triển ở lớp màng nhầy của bộ phận sinh dục ngoài Trong vết phết âm đạo tế bào bướu có nhân tròn hoặc nhân đơn vì tế bào mỏng và trong tế bào chất có nhiều không bào

(3) SCC (Squamous cell carcinoma - ung thư tế bào vảy): Các tế bào có dạng

không đồng nhất, nhân rất to, không đồng đều, có dấu hiệu phân hủy tế bào và nhân,

tế bào chất bắt màu sậm đen, ngoài ra trên vết phết còn có nhiều hồng cầu và bạch cầu trung tính

2.4 Kỹ thuật siêu âm

2.4.1 Nguyên lý

Sóng siêu âm là sóng âm đặc biệt có tần số cao ước chừng 20.000 Hz mà tai người không thể nghe thấy được Kỹ thật siêu âm là đưa sóng âm có tần số cao nhưng với cường độ thấp đến những vùng khác nhau của cơ thể và truyền qua các

mô ở vùng cần chẩn đoán Mattoon và Nyland, 1995; Floss và Jeanetta, 2002; England và ctv (2003) (trích dẫn của Phan Thị Bích, 2004), ghi nhận các mô khác nhau của cơ thể bị sóng âm đi xuyên qua hoặc hấp thu hay phản hồi chùm sóng trở

20

lại và bộ phận phân giải trong máy xử lí tạo ra hình ảnh đọc trên màn hình Hình ảnh siêu âm cho chúng ta thấy có nhiều vùng sáng và tối có nhiều hình dạng khác nhau, điều này có được là do độ phản âm hay hồi âm đặc trưng của từng cơ quan;

độ sáng càng cao thì độ phản âm hay hồi âm càng dày và ngược lại

Phản âm dày hay cao: đối với mô xương

Phản âm kém hay thấp: đối với mô mềm và dịch thể

Phản âm trong: đối với dịch

Hiện tượng phản âm được thể hiện qua độ sáng hay tối quan sát được trên màn hình Độ sáng càng cao thì độ phản âm càng dày và ngược lại ngoài ra, căn cứ vào

độ phản âm có thể ước lượng được tổn thương ở dạng lỏng hay đặc, ước lượng tính đồng nhất hay không đồng nhất của dịch thể

2.4.2 Ứng dụng siêu âm để chẩn đoán bệnh lý

(1) U nang buồng trứng

Các u trong noãn nang và hoàng thể có thể được chẩn đoán bằng kỹ thuật siêu

âm Siêu âm phát hiện được các u trong buồng trứng với những bệnh tích thực sự cùng với tính chất đặc hiệu như: vách mỏng, hình thành bờ vách xa và cản âm Các trường hợp bệnh lý gây ra chứng u nang như: Tử cung có mủ, triển dưỡng khối u lớp nội mạc tử cung, tích nước trong tử cung

(2) Ung thư buồng trứng

Maltoon và Nyland (1995) (trích dẫn của Nguyễn Duy Linh, 2005), đã ghi nhận một số báo cáo đặc biệt về kết quả siêu âm là: trường hợp ung thư buồng trứng rất ít xảy ra trên chó và rất khó phân biệt giữa ung thư buồng trứng với u nang buồng trứng bằng phương pháp siêu âm

21

khuẩn; lớp nội mạc tử cung triển dưỡng và tăng tiết dịch vào lòng tử cung kết hợp với những vi khuẩn hiện diện tại đây Thường tình trạng viêm tử cung có mủ thường xảy ra vào giai đoạn pha hoàng thể do cổ tử cung đã đóng lại dưới sự tác động của progesteron

Tử cung có mủ qua hình ảnh siêu âm: lòng tử cung rộng ra, chứa đầy dịch chất

do đó cho hồi âm kém từ đó xác định chó viêm tử cung

Tuy nhiên trong quá trình chẩn đoán tử cung có mủ cần phân biệt với trường hợp tích nước, tích nhiều dịch nhầy trong tử cung (trích dẫn của Nguyễn Duy Linh, 2005)

2.5 Một số công trình nghiên cứu liên quan

GĐ

Tế bào

Trước động dục Động dục Sau động dục Nghỉ ngơi Tác giả,

năm XSE XSE XSE XSE

CG 5,31,29 0 28,75,13 56,96,77

Nguyễn Phạm Minh Phương,

2004

TG 334 11 374 443

BM 295 872 133 51

22

GĐ

Tế bào

Trước động dục Động dục

Sau động dục Nghỉ ngơi Tác giả,

năm XSE XSE XSE XSE

CG 164 11 264 604

Nguyễn Hiếu Nhân, 2004

23

Chương 3 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP KHẢO SÁT

3.1 Thời gian và địa điểm khảo sát

3.1.1 Thời gian thực hiện

Đề tài đã được thực hiện từ tháng 2/2012 đến tháng 6/2012

3.1.2 Địa điểm thu thập mẫu và phân tích

Thu thập mẫu vết phết trên các chó cái bất kỳ trên 1 năm tuổi tại phòng mạch

tư nhân số 6; đường Trần Hưng Đạo; phường Hiệp Phú; Quận 9; Tp Hồ Chí Minh Phân tích mẫu vết phết tại phòng thực hành sinh lý - sinh hóa; khoa Chăn nuôi thú y trường đại học Nông Lâm Tp Hồ Chí Minh

Nước muối sinh lý Nacl 0,9 %, nước cất

Cồn 700, methanol, dung dịch nhuộm màu Giemsa, Leishman

Nhóm chó bình thường được ghi nhận những biểu hiện hành vi, dấu hiệu sinh

lý trên cơ thể và thu thập mẫu vết phết âm đạo

24

Bảng 3.1 Bảng theo dõi chó cái bình thường

STT

Chó khảo sát Giống Tuổi Lứa

Nhóm chó cái bệnh lý về sinh sản (dựa vào chẩn đoán lâm sàng) được thu thập

mẫu vết phết âm đạo

Bảng 3.2 Bảng theo dõi chó cái bệnh lý

Tên chủ: STT

Địa chỉ: Số điện thoại:

Vật nuôi: Giống: Tuổi: Lứa đẻ:

Hành

vi

Kết quả phân tích

tế bào âm đạo Giống

i

Xác định các giai đoạn trong chu kỳ sinh dục của chó cái dựa vào tỷ lệ các loại

tế bào biểu mô trong vết phết âm đạo

3.4.1.2 Đối tượng và bố trí khảo sát

Chó cái mang đến phòng mạch được khảo sát qua 3 bước

Bước 1 Chẩn đoán lâm sàng

Ghi nhận lý lịch, đã sinh sản lần nào chưa, mấy lần, tiền sử bệnh lý như thế nào?

Xác định giống chó (nội hay ngoại) qua ngoại hình, xác định tuổi chó bằng cách xem răng kết hợp hỏi chủ nuôi

Đo nhiệt độ cơ thể chó (ở trực tràng),

Quan sát hành vi chó, biểu hiện ở âm hộ (màu sắc, mức độ trương phồng, dịch thải từ âm hộ…)

Chó được đánh giá là không có biểu hiện lâm sàng của bệnh lý sinh sản khi thân nhiệt trung bình biến thiên 3705 - 390 không biểu hiện đau khi sờ nắn vùng bụng, không có gì bất thường ở âm hộ như khối u lồi hoặc dịch thải mủ ở âm hộ, nếu dịch thải có lẫn máu thì dịch không có mùi hôi thối

Bước 2 Thu thập mẫu vật

Sau khi kiểm tra lâm sàng ta bắt đầu lấy vết phết Do điều kiện thực tế, vết phết chỉ được lấy một lần trên 1 cá thể

Bước 3 Xác định giai đoạn của chu kỳ động dục

Dựa vào triệu chứng lâm sàng, những biểu hiện hành vi của chó cái, kích thước, màu sắc của âm hộ cộng với tỷ lệ các tế bào biểu mô trên vết phết, từ đó ước định giai đoạn của chu kỳ động dục

26

Khảo sát được tiến hành trên 37 chó cái không có biểu hiện bệnh lý sinh sản

về lâm sàng với 37 mẫu vết phết âm đạo, chúng được phân chia theo nhóm giống và nhóm tuổi (Bảng 3.4) Các số liệu thu thập được dùng để phân tích tỷ lệ các loại tế bào biểu mô âm đạo

Bảng 3.4 Số chó cái bình thường khảo sát ngẫu nhiên tại phòng khám

3.4.1.3 Chỉ tiêu khảo sát nội dung 1

(1) Tỷ lệ các loại tế bào âm đạo qua các giai đoạn của chu kỳ động dục

3.4.2 Nội dung 2

Chẩn đoán bệnh lý trên đường sinh dục của chó cái bằng xét nghiệm tế bào

biểu mô âm đạo

3.4.2.1 Mục tiêu

Chẩn đoán bệnh lý trên đường sinh dục của chó cái bằng xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo

3.4.2.2 Đối tượng và bố trí khảo sát

Khảo sát được tiến hành ngẫu nhiên trên 51 chó cái trưởng thành sinh dục đã đến phòng mạch kết quả có 37 chó bình thường và 14 chó có biểu hiện bệnh lý đường sinh dục dựa trên triệu chứng lâm sàng (Bảng 3.5)

Chó cái được đánh giá là có biểu hiện lâm sàng của bệnh lý sinh sản khi thú bị sốt (> 390C ), bụng sưng và có dấu hiệu đau khi sờ nắn, có khối u lồi ở âm hộ, dịch thải mủ hoặc dịch thải có lẫn máu hôi thối… (Đỗ Hiếu Liêm, 2006)

(2) Tần suất của các biểu hiện lâm sàng

(3) Nhận định kết quả xét nghiệm tế bào với triệu chứng lâm sàng và siêu âm (4) Nhận định kết quả điều trị

3.5 Phương pháp nghiên cứu

3.5.1 Xác định giống chó

Giống chó được xác định dựa vào ngoại hình, màu sắc lông, tầm vóc…Hoặc

từ chủ nuôi, sự hiểu biết về chó, phân ra làm 2 giống: nội và giống ngoại (gồm có ngoại thuần và ngoại lai)

28

3.5.3 Xác định các giai đoạn trong chu kỳ động dục dựa vào vết phết âm đạo

Các giai đoạn trong chu kỳ sinh dục của chó cái được dự đoán dựa vào các loại tế bào trong vết phết âm đạo theo dẫn liệu của Feldman và Nelson (1996) (trích

dẫn của Đỗ Hiếu Liêm, 2006) (Bảng 3.6) và kết quả nghiên cứu của Đỗ Hiếu Liêm

(2006) (Bảng 3.7)

Bảng 3.6 Xác định các giai đoạn của chu kỳ sinh dục dựa vào tỷ lệ các loại tế bào

trong vết phết âm đạo (Nguồn: Feldman và Nelson, 1996 - trích dẫn của Đỗ Hiếu Liêm, 2006)

tế bào bề mặt Cuối trước

động dục

Thường xuyên

Cận gốc, trung gian và tế bào bề mặt giảm

Bảng 3.7 Xác định các giai đoạn của chu kỳ sinh dục

(Nguồn: Đỗ Hiếu Liêm, 2006)

Tế bào

Giai đoạn

CG XSE(%)

TG XSE(%)

TG - BMXSE (%)

BM XSE(%)

HC BC

Trước động dục 7±1 16±1 22±1 55±1 Rất nhiều ít Động dục 1±0 3±0 10±1 86±1 Rất ít / không không