KHẢO SÁT SỰ BIẾN THIÊN TẾ BÀO BIỂU MÔ ÂM ĐẠO TRONG CHU KỲ ĐỘNG DỤC CỦA CHÓ GREYHOUND VÀ MỘT SỐ TRƯỜNG HỢP BỆNH LÝ BẰNG VẾT PHẾT ÂM ĐẠO

BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CHĂN NI – THÚ Y ********* KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT SỰ BIẾN THIÊN TẾ BÀO BIỂU MÔ ÂM ĐẠO TRONG CHU KỲ ĐỘNG DỤC CỦA CHÓ GREYHOUND VÀ MỘT SỐ TRƯỜNG HỢP BỆNH LÝ BẰNG VẾT PHẾT ÂM ĐẠO Sinh viên thực hiện: ĐỖ THỤY HỒNG ĐIỆP Lớp: DH07TY Ngành: Thú Y Niên khóa: 2007 – 2012 Tháng 07/2012 i BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CHĂN NI – THÚ Y ********* KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT SỰ BIẾN THIÊN TẾ BÀO BIỂU MÔ ÂM ĐẠO TRONG CHU KỲ ĐỘNG DỤC CỦA CHÓ GREYHOUND VÀ MỘT SỐ TRƯỜNG HỢP BỆNH LÝ BẰNG VẾT PHẾT ÂM ĐẠO Sinh viên thực hiện: ĐỖ THỤY HỒNG ĐIỆP Lớp: DH07TY Ngành: Thú Y Niên khóa: 2007 – 2012 Tháng 07/2012 ii TÓM TẮT Đề tài “Khảo sát thay đổi loại tế bào biểu mơ âm đạo chu kỳ động dục chó Greyhound chẩn đoán số trường hợp bệnh lý” thực từ tháng 02/2012 đến tháng 05/2012 trung tâm ni huấn luyện chó đua Bà Rịa Thí nghiệm bố trí theo kiểu cắt ngang, gồm nội dung kết sau: (1) Phân tích 428 mẫu vết phết âm đạo 24 chó Greyhound sinh sản bình thường phân chia theo nhóm tuổi (4 – năm tuổi > năm tuổi) Kết khảo sát cho thấy giai đoạn chu kỳ động dục xác định dựa vào đặc điểm vết phết âm đạo tỉ lệ loại tế bào biểu mô Ở giai đoạn trước động dục, tỉ lệ trung bình loại tế bào cận nền, trung gian, trung gian – bề mặt bề mặt %, 16 %, 29 % 53 % Trong giai đoạn động dục, tỉ lệ tế bào sừng hóa gia tăng với 17 % tế bào trung gian – bề mặt 79 % tế bào bề mặt Qua giai đoạn sau động dục, tế bào biểu mơ khơng sừng hóa xuất trở lại với 11 % tế bào cận nền, 16 % tế bào trung gian tế bào bề mặt giảm 43 % Vào giai đoạn nghỉ ngơi, vết phết âm đạo có đủ loại tế bào biểu mơ với tỉ lệ trung bình 50 % tế bào cận nền, 31 % tế bào trung gian, 13 % tế bào trung gian – bề mặt % tế bào bề mặt Chu kỳ động dục chó Greyhound kéo dài tháng, tương ứng với khoảng thời gian trung bình giai đoạn trước động dục, động dục, sau động dục nghỉ ngơi ngày, ngày, 72 ngày tháng (2) Khảo sát tiến hành 16 chó Greyhound chờ phối chia thành nhóm (phối giống theo xét nghiệm tế bào phối giống theo kinh nghiệm) Kết cho thấy tỉ lệ đậu thai nhóm 50 % 25 % (3) Xét nghiệm tế bào âm đạo chẩn đốn xác số bệnh lý đường sinh dục chó cái, kể trường hợp nhẹ chưa biểu bên ngoài, chấn đoán phân biệt viêm bướu iii MỤC LỤC TRANG Trang phụ bìa i Xác nhận giáo viên hướng dẫn ii Lời cảm ơn iii Tóm tắt iv Mục lục v Danh mục chữ viết tắt x Danh mục bảng xii Danh mục hình xiv Chương MỞ ĐẦU 1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ 1.2 MỤC ĐÍCH VÀ YÊU CẦU 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu Chương TỔNG QUAN 2.1 BỘ MÁY SINH DỤC CHÓ CÁI 2.1.1 Chức 2.1.2 Cấu tạo 2.1.2.1 Dây rộng 2.1.2.2 Buồng trứng 2.1.2.3 Ống dẫn trứng 2.1.2.4 Tử cung 2.1.2.5 Âm đạo 2.1.2.6 Tiền đình 2.1.2.7 Âm hộ iv 2.2 CHU KỲ ĐỘNG DỤC CỦA CHÓ CÁI 2.2.1 Tuổi thành thục tính dục 2.2.2 Các giai đoạn chu kỳ động dục chó 2.2.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến chu kỳ động dục 2.3 XÉT NGHIỆM TẾ BÀO ÂM ĐẠO 10 10 2.3.1 Lớp biểu mô âm đạo 10 2.3.2 Các loại tế bào biểu mô âm đạo 11 2.3.3 Một số ứng dụng xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo 12 2.4 LƯỢC DUYỆT MỘT SỐ CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU LIÊN 13 QUAN ĐẾN ĐỀ TÀI 2.5 SƠ LƯỢC VỀ TRUNG TÂM NUÔI VÀ HUẤN LUYỆN CHÓ ĐUA 14 TẠI BÀ RỊA 2.4.1 Tổng quan 14 2.4.2 Nhiệm vụ 14 2.4.3 Cơ cấu đàn giống chó Greyhound 14 2.4.3.1 Cơ cấu đàn 14 2.4.3.2 Giống chó Greyhound 15 2.4.4 Chuồng trại 16 2.4.5 Huấn luyện chăm sóc 18 2.4.6 Quy trình phòng bệnh vệ sinh sát trùng 19 Chương NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP KHẢO SÁT 21 3.1 21 THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM KHẢO SÁT 3.1.1 Thời gian 21 3.1.2 Địa điểm 21 3.2 VẬT LIỆU 21 3.2.1 Dụng cụ thiết bị 21 3.2.2 Hóa chất 21 3.2.3 Thú khảo sát 21 v 3.3 NỘI DUNG KHẢO SÁT 3.3.1 NỘI DUNG 1: Khảo sát biến thiên tế bào biểu mô âm đạo 21 21 giai đoạn chu kỳ động dục 3.3.1.1 Mục tiêu 21 3.3.1.2 Đối tượng bố trí khảo sát 22 3.3.1.3 Chỉ tiêu khảo sát 22 3.3.2 NỘI DUNG 2: Ứng dụng xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo để 23 chẩn đốn tình trạng mang thai đánh giá hiệu công tác phối giống 3.3.2.1 Mục tiêu 23 3.3.2.2 Đối tượng bố trí khảo sát 23 3.3.2.3 Chỉ tiêu khảo sát 24 3.3.3 NỘI DUNG 3: Ứng dụng xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo để 24 phát trường hợp rối loạn sinh sản chẩn đoán số trường hợp bệnh lý đường sinh dục 3.3.3.1 Mục tiêu 24 3.3.3.2 Đối tượng bố trí khảo sát 24 3.3.3.3 Chỉ tiêu khảo sát 24 3.4 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 3.4.1 Xác định tuổi chó 24 3.4.2 Xác định giai đoạn chu kỳ động dục dựa vào vết phết âm 24 đạo 3.4.3 Phương pháp thu thập phân tích mẫu vết phết âm đạo 25 3.4.3.1 Thu thập vết phết 26 3.4.3.2 Cố định vết phết 27 3.4.3.3 Nhuộm vết phết 27 3.4.3.4 Đọc kết 27 3.4.4 Phương pháp nghiên cứu, xử lý số liệu phân tích thống kê 27 vi Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 4.1 28 KHẢO SÁT SỰ BIẾN THIÊN TẾ BÀO BIỂU MÔ ÂM ĐẠO TRONG CÁC GIAI ĐOẠN CỦA CHU KỲ ĐỘNG DỤC 4.1.1 Tỉ lệ loại tế bào biểu mô âm đạo 28 4.1.1.1 Giai đoạn trước động dục 28 4.1.1.2 Giai đoạn động dục 31 4.1.1.3 Giai đoạn sau động dục 34 4.1.1.4 Giai đoạn nghỉ ngơi 37 4.1.1.5 Nhận định chung nội dung xác định giai đoạn chu 41 kỳ động dục chó Greyhound 4.1.2 Ước lượng khoảng thời gian giai đoạn chu kỳ 42 động dục 4.2 ỨNG DỤNG XÉT NGHIỆM TẾ BÀO BIỂU MÔ ÂM ĐẠO ĐỂ 44 XÁC ĐỊNH THỜI ĐIỂM PHỐI GIỐNG VÀ MANG THAI TRÊN CHÓ GREYHOUND 4.2.1 Kết phối giống chó nhóm I 44 4.2.2 Kết phối giống chó nhóm II 48 4.2.3 Nhận định chung nội dung ứng dụng xét nghiệm tế bào âm đạo 52 để xác định thời điểm phối giống mang thai chó Greyhound 4.3 CHẨN ĐỐN MỘT SỐ TRƯỜNG HỢP BỆNH LÝ TRÊN 54 ĐƯỜNG SINH DỤC CỦA CHĨ GREYHOUND CÁI 4.3.1 Tỉ lệ chó có bệnh lý đường sinh dục 54 4.3.2 Hiệu điều trị chứng viêm đường sinh dục 58 Chương KẾT LUẬN, TỒN TẠI VÀ ĐỀ NGHỊ 60 5.1 KẾT LUẬN 60 5.2 TỒN TẠI 61 5.3 ĐỀ NGHỊ 61 vii TÀI LIỆU THAM KHẢO 62 PHỤ LỤC 66 viii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Tiếng Việt BC Bạch cầu BM Tế bào bề mặt CN Tế bào cận GĐ Giai đoạn HC Hồng cầu PG Phối giống T Nhóm tuổi chó khảo sát TBB Tế bào bướu TG Tế bào trung gian TG-BM Tế bào trung gian-bề mặt VK Vi khuẩn Tiếng Anh ANOVA Analysis of variance Phân tích phương sai ANS Animal sciences Khoa học động vật DF Degree of freedom Độ tự FSH Follicle stimulating hormone Kích nang nỗn tố LH Luteinizing hormone Kích tố gây xuất nỗn LTH Luteotropic hormone Kích tố tác động thể vàng gây sản xuất sữa MS Mean of square Trung bình bình phương ns Non sense Không ý nghĩa thống kê SCC Squamous cell carcinoma Bướu độc tế bào vảy SE Standard error Sai số chuẩn ix SES Sport and Entertainment Service Công ty Dịch vụ Thể thao Thi Center đấu giải trí SS Sum of square Tổng bình phương TCC Transitional cell carcinoma Bướu độc tế bào chuyển tiếp TVT Transmissible veneral tumor Bướu truyền lây giao phối Đơn vị tính Hectare (10.000 square meter) USD United States dollars 57 màu Các tế bào không nằm tập trung thành mảng lớn mà rải rác theo đám nhỏ vài tế bào phân bố khắp vết phết Ngoài ra, vết phết có nhiều hồng cầu bạch cầu (Hình 4.11) Chú thích: TBB Tế bào bướu, HC Hồng cầu, BC Bạch cầu Hình 4.11 Vết phết âm đạo chó Greyhound nghi ngờ bị bướu (400x) Theo Beimborn (2003), tuổi trung bình xuất khối u âm đạo chó khoảng 10 năm biểu lâm sàng thường gặp khối u lồi âm hộ, tiết dịch âm đạo khó tiểu, tiểu són đau, tiểu khơng kiểm sốt tầng sinh mơn sưng lên khối u gây trở ngại cho cấu trúc lân cận Xét nghiệm tế bào âm đạo hữu ích việc chẩn đoán trường hợp ung thư tế bào chuyển tiếp (TCC), ung thư tế bào vảy (SCC) bướu truyền lây giao phối (TVT)  Nhận định chung nội dung chẩn đoán bệnh lý đường sinh dục Trong chẩn đoán lâm sàng, nhà chuyên môn thường vào biểu sốt cao (thân nhiệt > 39oC), dịch thải mủ vùng bụng bị sưng, thú có cảm 58 giác đau sờ nắn để kết luận chó bị viêm đường sinh dục viêm tử cung Tuy nhiên, số chó không biểu dấu hiệu lâm sàng sốt hay vùng bụng sưng mà thải dịch mủ hay dịch máu âm hộ chẩn đốn khơng xác Hơn nữa, chó có thói quen hay liếm thể mình, mà viêm thường viêm tử cung dạng đóng, vậy, người ni phát dịch thải mủ âm hộ chó bị viêm mức độ nặng viêm âm đạo trình truyền lây từ đường tiết niệu Do đó, phương pháp xét nghiệm tế bào âm đạo chẩn đốn xác tình trạng viêm đường sinh dục, phát trường hợp viêm mức độ nhẹ giúp cho công tác điều trị dễ dàng Tuy nhiên, xét nghiệm lại có hạn chế khơng xác định vị trí bị viêm nguyên nhân gây viêm Còn chẩn đốn bướu đường sinh dục, xét nghiệm tế bào âm đạo chưa thể phân biệt rõ ràng trường hợp bướu, nguyên nhân gây bướu… phát sớm tình trạng bướu (đối với trường hợp bệnh nhẹ, chưa biểu triệu chứng) phân biệt trường hợp bị bướu hay bị viêm đường sinh dục 4.3.2 Hiệu điều trị chứng viêm đường sinh dục Chú thích: CN Tế bào cận nền, TG Tế bào trung gian, BM Tế bào bề mặt, BC bạch cầu Hình 4.12 Vết phết âm đạo chó Greyhound bị viêm trước (a) sau (b) điều trị 59 Trong thời gian thực đề tài, ghi nhận có ca bị viêm đường sinh dục; có ca khơng điều trị mà chích chết (H46), trường hợp lại điều trị với Baytril (enrofloxacin) với liệu trình 1,5 ml/3 ngày Hiệu điều trị viêm đường sinh dục đạt 100 % với 2/2 trường hợp điều trị khỏi bệnh sau 10 ngày (E90) 15 ngày (N29) Vết phết âm đạo E90 N29 sau hết chảy dịch viêm ghi nhận khơng bạch cầu vi khuẩn (Hình 4.12) 60 Chương KẾT LUẬN, TỒN TẠI VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 KẾT LUẬN Từ kết khảo sát ứng dụng xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo 26 chó giống Greyhound trung tâm ni huấn luyện chó đua Bà Rịa, số kết luận rút sau: (1) Tỉ lệ loại tế bào biểu mô âm đạo thay đổi đặc trưng qua giai đoạn chu kỳ động dục cho dù chịu ảnh hưởng tuổi Ở giai đoạn trước động dục, vết phết có nhiều hồng cầu, tỉ lệ tế bào cận trung gian giảm dần, thay vào tỉ lệ tế bào trung gian – bề mặt bề mặt lại tăng dần chiếm ưu Sang giai đoạn động dục, vết phết hồng cầu, khơng có bạch cầu, tỉ lệ sừng hóa > 90 %, riêng tế bào bề mặt chiếm ưu (≥ 80 %) Đến giai đoạn sau động dục, vết phết có loại tế bào biểu mô tương tự vết phết đầu giai đoạn trước động dục nghỉ ngơi hồng cầu Vào giai đoạn nghỉ ngơi, vết phết có tỉ lệ tế bào cận chiếm ưu (≥ 50 %), tế bào bề mặt < 10 % Chu kỳ động dục chó Greyhound kéo dài khoảng tháng (7 – 12 tháng), tương ứng với khoảng thời gian trung bình giai đoạn trước động dục, động dục, sau động dục nghỉ ngơi ngày (1 – 12 ngày), ngày (5 – 13 ngày), 72 ngày (50 – 100 ngày) tháng (4 – tháng) (2) Ứng dụng xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo công tác phối giống cho hiệu tỉ lệ đậu thai cao hẳn (50 %) so với việc phối giống dựa vào dấu hiệu lâm sàng (kinh nghiệm) (25 %) Nếu việc phối giống vào tỉ lệ tế bào bề mặt > 90 % tương đương với ngày thứ – chu kỳ động dục tỉ lệ đậu thai đạt 100 % 61 (3) Xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo có tỉ lệ chẩn đốn xác trường hợp viêm bướu đường sinh dục so với chẩn đoán lâm sàng (27 % so với %) với trường hợp bệnh lý nhẹ chưa biểu bên 5.2 TỒN TẠI (1) Chưa khảo sát liên tục giai đoạn chu kỳ động dục cá thể chó Greyhound số lượng chó khảo sát q Đồng thời, chưa ước lượng thời điểm sinh (2) Chưa so sánh hiệu chẩn đoán trường hợp bệnh lý đường sinh dục xét nghiệm tế bào âm đạo với xét nghiệm khác 5.3 ĐỀ NGHỊ (1) Tiếp tục khảo sát giai đoạn chu kỳ động dục cá thể với số chó Greyhound nhiều Đồng thời, ứng dụng xét nghiệm để ước đoán thời điểm sinh (2) So sánh hiệu chẩn đoán trường hợp bệnh lý đường sinh dục chó xét nghiệm tế bào âm đạo với kỹ thuật tiên tiến khác 62 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHẦN TIẾNG VIỆT Phan Quang Bá, 2002 Bộ máy sinh dục, trang 153−162 Trong Phan Quang Bá, Cơ thể học gia súc Nhà xuất Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh Trần Thị Dân Dương Nguyên Khang, 2006 Sinh lý sinh sản, trang 308−313 Trong Trần Thị Dân Dương Nguyên Khang, Sinh lý vật nuôi Nhà xuất Nông Nghiệp TP Hồ Chí Minh Lâm Thị Thu Hương, 2005 Hệ thống sinh dục, trang 172−183 Trong Lâm Thị Thu Hương, Mô phôi gia súc Nhà xuất Đaị học Quốc Gia TP Hồ Chí Minh Đỗ Hiếu Liêm, 2006 Ứng dụng kỹ thuật xét nghiệm tế bào biểu mô vết phết âm đạo để xác định giai đoạn chu kỳ sinh dục, chọn thời điểm phối giống chẩn đốn viêm đường sinh dục chó Luận án Tiến sĩ Nông nghiệp, Đại học Nông Lâm, TP Hồ Chí Minh, Việt Nam Phan Thị Nhi Mỹ, 2010 Khảo sát số trường hợp bệnh lý đường sinh dục chó ghi nhận kết điều trị Luận văn tốt nghiệp Bác sĩ Thú y, Đại học Nơng Lâm, TP Hồ Chí Minh, Việt Nam Nguyễn Hiếu Nhân, 2004 Xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo để xác định chu kỳ động dục, viêm bướu đường sinh dục chó Luận văn tốt nghiệp, Đại học Nông Lâm, TP Hồ Chí Minh, Việt Nam Bùi Văn Phước, 2003 Bước đầu áp dụng xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo để xác định thời điểm phối giống chẩn đoán số trường hợp bệnh lý đường sinh dục chó Luận văn tốt nghiệp Bác sĩ Thú y, Đại học Nơng Lâm, TP Hồ Chí Minh, Việt Nam Nguyễn Phạm Minh Phương, 2003 Ảnh hưởng estrogen progesterone đến cấu tạo mô học âm đạo tử cung chu kỳ động dục chó Luận văn tốt nghiệp Bác sĩ Thú y, Đại học Nơng Lâm, TP Hồ Chí Minh, Việt Nam Nguyễn Đỗ Bảo Quốc, 2005 Khảo sát chu kỳ động dục số trường hợp bệnh lý đường sinh dục chó xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo Luận văn tốt nghiệp Bác sĩ Thú y, Đại học Nơng Lâm, TP Hồ Chí Minh, Việt Nam 63 10 Hoàng Như Quỳnh, 2005 Xác định thời điểm phối giống, mang thai sinh chó Greyhound xét nghiệm tế bào biểu mơ âm đạo Luận văn tốt nghiệp Bác sĩ Thú y, Đại học Nơng Lâm, TP Hồ Chí Minh, Việt Nam 11 Nguyễn Văn Thanh, 2005, “Xác định số tiêu sinh sản bệnh sản khoa thường gặp đàn chó nghiệp vụ giống BERGER”, Bộ nơng nghiệp phát triển chăn nuôi, Viện chăn nuôi, 30 tháng 01 năm 2012 12 Nguyễn Văn Thanh Nguyễn Thị Mai Thơ, 2008 Một số tiêu sinh sản bệnh thường gặp số giống chó sử dụng làm chó nghiệp vụ cơng tác kiểm lâm bảo vệ tài ngun rừng Tạp chí Chăn ni 12 (2): 50−51 13 Trịnh Công Thành, 2003 Thống kê ứng dụng nghiên cứu thú y Nhà xuất Đại học Nơng Lâm, TP Hồ Chí Minh, 220 trang 14 Bùi Quang Thể, 2003 Bước đầu áp dụng xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo để xác định thời điểm phối giống, mang thai sinh chó Luận văn tốt nghiệp Bác sĩ Thú y, Đại học Nơng Lâm, TP Hồ Chí Minh, Việt Nam 15 Đỗ Thanh Thủy, 2004 Xác định chu kỳ động dục, viêm bướu đường sinh dục chó xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo Luận văn tốt nghiệp Bác sĩ Thú y, Đại học Nông Lâm, TP Hồ Chí Minh, Việt Nam 16 Đức Trường Hồi Sơn, 2005 Đua chó ni dạy chó đua Việt Nam Nhà xuất Thanh Niên, 43 trang 17 Hồ Trường Tú, 2005 Khảo sát chu kỳ động dục số trường hợp bệnh lý đường sinh dục chó phương pháp tế bào biểu mơ âm đạo Luận văn tốt nghiệp, Đại học Nông Lâm, TP Hồ Chí Minh, Việt Nam 18 Lê Thanh Bích Vân, 2003 Áp dụng xét nghiệm tế bào biểu mô âm đạo xác định giai đoạn chu kỳ động dục, mang thai viêm đường sinh dục chó Luận văn tốt nghiệp Bác sĩ Thú y, Đại học Nơng Lâm, TP Hồ Chí Minh, Việt Nam 64 PHẦN TIẾNG NƯỚC NGOÀI 19 ANS 3319C, 2011, “ANS 3319C Reproductive Physiology and Endocrinology Lab – Female Reproductive Anatomy”, University of Florida ANS 3319C, 2012 January 27th 20 Beimborn V.R., Tarpley H.L., Bain P.J and Latimer K.S., 2003, “The Canine Estrous Cycle: Staging Using Vaginal Cytological Examination”, February 4th 2012, 21 Bowen R., 1998, “Classification of Vaginal Epithelian Cells”, February 4th 2012 2012 22 Bowen R., 2001, “Vaginal Cytology”, February 10th 23 Cibas E.S., 2002, “Cervical And Vaginal Cytology”, July 25th 2012 24 Eilts B.E., 2006, “Canine Vaginal Cytology”, January 28th 2012 25 Eilts B.E., 2009, “The Normal Canine Estrous Cycle”, January 30th 2012 26 England G and Concannon P.W., 2002, “Determination of the Optimal Breeding Time in the Bitch: Basic Considerations”, January 28th 2012 27 Enpevet, 2011, “Dog: Urinary Tract Infection”, July 23th 2012 65 28 Marnie G., “American Greyhound Track Operator: Official Color Chart”, 2012 Recycled Racers, FAQ’ and Info, January 29th 29 Prezer S.D., 2009, “Canine Estrous Cycle”, Abilene Animal Hospital, May 25th 2012 30 William B., 2008, “Canine Reproduction”, February 14th 2012 66 PHỤ LỤC DUNG DỊCH NHUỘM LEISHMAN (1) Dung dịch đệm phosphate (pH 6,8) Sodium di-hydrogen orthophosphate (dung dịch A) 3,12 g Di-sodium hydrogen orthophosphate (dung dịch B) 2,83 g Nước cất 100 ml Hòa tan hồn tồn 3,12 g sodium di-hydrogen orthophosphate 100 ml nước cất (dung dịch A) hòa tan hồn tồn 2,83 g di-sodium hydrogen orthophosphate 100 ml nước cất (dung dịch B) Khi sử dụng, pha 25,5 ml dung dịch A vào 24,5 ml dung dịch B thêm nước cất vừa đủ 100 ml (2) Dung dịch Leishman gốc Bột Leishman mg Glycerol 66 ml Methyl alcohol 66 ml Hòa tan hồn tồn mg bột Leishman 66 ml glycerol đặt mơi trường 66oC/2 Sau hòa tan hồn toàn, thêm 66 ml methyl alcohol, khuấy đều, lọc giấy lọc Whatman, đựng chai màu tránh ánh sáng (3) Dung dịch Leishman pha loãng Khi sử dụng, pha chế hỗn hợp Leishman gốc dung dịch đệm phosphate theo tỉ lệ : Hỗn hợp pha chế sử dụng vòng 24 PHÂN TÍCH THỐNG KÊ 2.1 PHÂN TÍCH THỐNG KÊ CÁC LOẠI TẾ BÀO BIỂU MÔ ÂM ĐẠO 2.1.1 GIAI ĐOẠN TRƯỚC ĐỘNG DỤC General Linear Model: CN, TG, TGBM, BM versus TUOI Factor Type Levels Values 67 TUOI fixed 1, Analysis of Variance for CN, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 0.000319 0.000319 0.000319 0.06 0.803 Error 58 0.293987 0.293987 0.005069 Total 59 0.294306 TUOI S = 0.0711951 R-Sq = 0.11% R-Sq(adj) = 0.00% Analysis of Variance for TG, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 0.21586 0.21586 0.21586 9.26 0.004 Error 58 1.35173 1.35173 0.02331 Total 59 1.56759 TUOI S = 0.152662 R-Sq = 13.77% R-Sq(adj) = 12.28% Analysis of Variance for TGBM, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 0.00385 0.00385 0.00385 0.19 0.668 Error 58 1.20026 1.20026 0.02069 Total 59 1.20412 TUOI S = 0.143855 R-Sq = 0.32% R-Sq(adj) = 0.00% Analysis of Variance for BM, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 0.13044 0.13044 0.13044 7.12 0.010 Error 58 1.06304 1.06304 0.01833 Total 59 1.19348 TUOI S = 0.135382 R-Sq = 10.93% R-Sq(adj) = 9.39% 68 2.1.2 GIAI ĐOẠN ĐỘNG DỤC General Linear Model: CN, TG, TGBM, BM versus TUOI Factor Type Levels TUOI fixed Values 1, Analysis of Variance for CN, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 0.000780 0.000780 0.000780 0.55 0.460 Error 62 0.087389 0.087389 0.001410 Total 63 0.088169 TUOI S = 0.0375434 R-Sq = 0.88% R-Sq(adj) = 0.00% Analysis of Variance for TG, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 0.01590 0.01590 0.01590 1.38 0.245 Error 62 0.71508 0.71508 0.01153 Total 63 0.73098 TUOI S = 0.107395 R-Sq = 2.17% R-Sq(adj) = 0.60% Analysis of Variance for TGBM, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 0.00748 0.00748 0.00748 0.39 0.532 Error 62 1.17508 1.17508 0.01895 Total 63 1.18256 TUOI S = 0.137669 R-Sq = 0.63% R-Sq(adj) = 0.00% Analysis of Variance for BM, using Adjusted SS for Tests Source TUOI DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 0.02849 0.02849 0.02849 0.92 0.342 69 Error 62 1.92739 Total 63 1.95588 S = 0.176315 1.92739 R-Sq = 1.46% 0.03109 R-Sq(adj) = 0.00% 2.1.3 GIAI ĐOẠN SAU ĐỘNG DỤC General Linear Model: CN, TG, TGBM, BM versus TUOI Factor Type Levels TUOI fixed Values 1, Analysis of Variance for CN, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 0.10992 0.10992 0.10992 1.38 0.259 Error 15 1.19816 1.19816 0.07988 Total 16 1.30808 TUOI S = 0.282626 R-Sq = 8.40% R-Sq(adj) = 2.30% Analysis of Variance for TG, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 0.00035 0.00035 0.00035 0.01 0.943 Error 15 0.96318 0.96318 0.06421 Total 16 0.96352 TUOI S = 0.253400 R-Sq = 0.04% R-Sq(adj) = 0.00% Analysis of Variance for TGBM, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 0.00038 0.00038 0.00038 0.01 0.925 Error 15 0.61174 0.61174 0.04078 Total 16 0.61212 TUOI S = 0.201948 R-Sq = 0.06% R-Sq(adj) = 0.00% 70 Analysis of Variance for BM, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 0.07878 0.07878 0.07878 0.84 0.374 Error 15 1.40508 1.40508 0.09367 Total 16 1.48386 TUOI S = 0.306059 R-Sq = 5.31% R-Sq(adj) = 0.00% 2.1.4 GIAI ĐOẠN NGHỈ NGƠI General Linear Model: CN, TG, TGBM, BM versus TUOI Factor Type Levels TUOI fixed Values 1, Analysis of Variance for CN, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 1.3279 1.3279 1.3279 27.00 0.000 Error 285 14.0150 14.0150 0.0492 Total 286 15.3429 TUOI S = 0.221755 R-Sq = 8.65% R-Sq(adj) = 8.33% Analysis of Variance for TG, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 0.08992 0.08992 0.08992 5.23 0.023 Error 285 4.90149 4.90149 0.01720 Total 286 4.99141 TUOI S = 0.131142 R-Sq = 1.80% R-Sq(adj) = 1.46% Analysis of Variance for TGBM, using Adjusted SS for Tests Source TUOI Error DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 0.06913 0.06913 0.06913 2.60 0.108 285 7.57438 7.57438 0.02658 71 Total 286 S = 0.163024 7.64351 R-Sq = 0.90% R-Sq(adj) = 0.56% Analysis of Variance for BM, using Adjusted SS for Tests Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P 0.48468 0.48468 0.48468 21.62 0.000 Error 285 6.38968 6.38968 0.02242 Total 286 6.87436 TUOI S = 0.149733 R-Sq = 7.05% R-Sq(adj) = 6.72% ... Địa điểm 21 3.2 VẬT LIỆU 21 3.2.1 Dụng cụ thi t bị 21 3.2.2 Hóa chất 21 3.2.3 Thú khảo sát 21 v 3.3 NỘI DUNG KHẢO SÁT 3.3.1 NỘI DUNG 1: Khảo sát biến thi n tế bào biểu mô âm đạo 21 21 giai đoạn... phát triển, đời sống vật chất tinh thần người dân ngày phong phú Trong đó, ni chó hoạt động liên quan đến chó thú vui tinh thần ưa chuộng Do đó, thị hiếu người nuôi mở rộng dần, từ giống chó nội... sinh nuôi đến cai sữa nuôi chuồng Gồm dãy chuồng thi t kế song song tạo thơng thống, dễ vệ sinh, hạn chế lây lan mầm bệnh Mỗi chuồng có ngăn, ngăn thi t kế tránh mưa tạt gió lùa đảm bảo thơng thống