[Luận văn]đánh giá hiệu lực của vacxin phòng bệnh cúm gia cầm trên địa bàn tỉnh bắc giang

Thạc sĩ, tiến sĩ, cao học, tự nhiên, kinh tế, nông nghiệp

LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan rằng: số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận văn này là trung thực và chưa từng ñược sử dụng ñể bảo vệ một học vị nào. BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP I NGUYỄN HOÀNG ðĂNG ðÁNH GIÁ HIỆU LỰC CỦA VACXIN PHÒNG BỆNH CÚM GIA CẦM TRÊN ðỊA BÀN TỈNH BẮC GIANG LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành: thú y Mã só: 60.62.50 Người hướng dẫn khoa học: TS. TÔ LONG THÀNH HÀ NỘI - 2008 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 1 Tôi xin cam ñoan rằng: mọi sự giúp ñỡ cho việc thực hiện luận văn này ñã ñược cảm ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn này ñã ñược chỉ rõ nguồn gốc. Hà Nội, ngày tháng 8 năm 2008 Tác giả Nguyễn Hoàng ðăng Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 2 LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn các thầy, cô giáo, các cán bộ, nhân viên của Trường ðH Nông nghiệp Hà Nội , Khoa Sau ñại học và Khoa Thú y ñã tạo ñiều kiện cho tôi ñược tiếp cận những kiến thức khoa học trong thời gian học tập tại trường Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS. Tô Long Thành, người hướng dẫn khoa học trực tiếp ñã tận tình giúp ñỡ tôi hoàn thành luận văn này. Xin ñược cảm ơn các thầy, cô giáo trong Khoa Thú y, ñặc biệt là các thầy, cô trong Bộ môn Vi sinh vật - Truyền nhiễm - Bệnh lý ñã truyền ñạt kiến thức và có nhiều ý kiến ñóng góp giúp tôi hoàn thành luận văn. Tôi xin cảm ơn các cán bộ, nhân viên Trung tâm Chẩn ñoán Thú y TW, ñặc biệt là các cán bộ, nhân viên Phòng Virus ñã nhiệt tình giúp ñỡ tôi trong thời gian thực tập tại ñây. Cám ơn sự ñộng viên, giúp ñỡ tạo ñiều kiện của lãnh ñạo cùng toàn thể cán bộ, nhân viên và bạn bè ñồng nghiệp ngành thú y tỉnh Bắc Giang. Nhân dịp hoàn thành luận văn, tôi xin ñược bày tỏ lòng biết ơn ñối với gia ñình và người thân, bạn bè và ñồng nghiệp ñã luôn ñộng viên, tạo mọi ñiều kiện cho tôi học tập và thực hiện ñề tài. Xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng 8 năm 2008 Tác giả Nguyễn Hoàng ðăng Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 3 MỤC LỤC Trang Lời cam ñoan Lời cảm ơn Mục lục Danh mục các chữ viết tắt Danh mục các bảng Danh mục các biểu ñồ Phần 1: Mở ñầu 1.1. ðặt vấn ñề 1.2. Mục tiêu của ñề tài 1.3. ý nghĩa khoa học và thực tiễn của ñề tài Phần 2: Tổng quan tài liệu 2.1. Lịch sử bệnh cúm gia cầm 2.1.1. Lịch sử bệnh cúm gia cầm trên thế giới 2.1.2. Bệnh cúm gia cầm ở Việt Nam 2.2. Căn bệnh của cúm gia cầm 2.2.1. Cấu trúc chung của virus cúm type A 2.2.2. Kháng nguyên của virus cúm 2.2.3. ðộc lực của virus 2.2.4. Khả năng biến chủng của virus 2.2.5. Sức ñề kháng của virus 2.2.6. Nuôi cấy và lưu giữ virus 2.3. Dịch tễ học bệnh cúm gia cầm 2.3.1. Loài vật mang virus 2.3.2. ðộng vật cảm nhiễm 2.3.3. Sự truyền lây 2.4. Triệu chứng và bệnh tích của bệnh cúm gia cầm 2.4.1. Triệu chứng 2.4.2. Bệnh tích 2.5. Phương pháp chẩn ñoán bệnh cúm gia cầm 2.5.1. Chẩn ñoán dựa vào ñặc ñiểm dịch tễ, triệu chứng và bệnh tích 2.5.2. Chẩn ñoán trong phòng thí nghiệm 2.6. Phòng chống bệnh cúm gia cầm i ii iii vi vii viii 1 1 2 3 4 4 4 6 8 8 8 9 10 12 12 13 13 13 14 15 15 16 17 17 17 17 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 4 2.7. ðáp ứng miễn dịch chống virus cúm ở gia cầm 2.7.1. ðáp ứng miễn dịch không dặc hiệu 2.7.2. ðáp ứng miễn dịch ñặc hiệu 2.7.2.1. ðáp ứng miễn dịch qua trung gian tế bào 2.7.2.2. ðáp ứng miễn dịch dịch thể 2.8. Sử dụng vacxin phòng chống bệnh cúm gia cầm 2.8.1. Các loại vacxin ñược dùng hiện nay 2.8.1.1. Vacxin truyền thống 2.8.1.2. Vacxin tái tổ hợp 2.8.2. Tình hình sử dụng vacxin cúm gia cầm trên thế giới 2.8.3. Những ñiểm cần lưu ý khi sử dụng vacxin cúm gia cầm 2.9. Tình hình sử dụng vacxin cúm gia cầm tại Việt Nam Phần 3: Nội dung và phương pháp nghiên cứu 3.1. Nội dung nghiên cứu 3.2. Phương pháp nghiên cứu 3.2.1. Nguyên liệu và dụng cụ thí nghiệm 3.2.2. Phương pháp xử lý mẫu 3.2.3. Phương pháp phát hiện virus 3.2.3.1. Phân lập virus trên trứng có phôi 3.2.3.2. Kiểm tra nước trứng bằng phản ứng ngưng kết hồng cầu - HA 3.2.3.3. Giám ñịnh virus phân lập bằng phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu - HI 3.2.3.4. Phương pháp RRT-PCR 3.2.4. Phương pháp phát hiện kháng thể 3.2.5. Xử lý số liệu 18 18 18 18 19 20 20 20 21 22 23 25 27 27 27 28 28 29 29 30 30 32 38 40 PHẦN 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 41 4.1. Tình hình chăn nuôi gia cầm và sử dụng vacxin cúm gia cầm tại Bắc Giang 41 4.1.1. Tình hình chăn nuôi gia cầm tại Bắc Giang một số năm gần ñây 41 4.1.2. Tình hình sử dụng vacxin cúm gia cầm tại Bắc Giang qua các năm 2007 - 2008 43 4.2. Dịch cúm gia cầm năm 2007 trên ñịa bàn tỉnh Bắc Giang 44 4.3. ðánh giá ñáp ứng miễn dịch chống cúm ở gia cầm trên ñịa bàn tỉnh Bắc Giang năm 2007 48 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 5 4.3.1. Giám sát huyết thanh học ñối với các ñàn gia cầm, thuỷ cầm trên ñịa bàn tỉnh Bắc Giang năm 2007 48 4.3.2. Hiệu giá kháng thể kháng virus cúm subtype H5 của gà - vịt - ngan ñược tiêm phòng năm 2007 51 4.3.3. So sánh ñáp ứng miễn dịch chống cúm của 3 loài gà - vịt - ngan năm 2007 56 4.4. ðánh giá ñáp ứng miễn dịch chống cúm ở gia cầm trên ñịa bàn tỉnh Bắc Giang năm 2008 59 4.4.1. Giám sát huyết thanh học ñối với các ñàn gia cầm, thuỷ cầm ñược tiêm phòng trên ñịa bàn tỉnh Bắc Giang năm 2008 59 4.4.2. Hiệu giá kháng thể kháng virus cúm subtype H5 của gà - vịt ñược tiêm phòng năm 2008 62 4.4.3. So sánh ñáp ứng miễn dịch của 2 loài gà - vịt năm 2008 65 4.4.4. So sánh ñáp ứng miễn dịch của gia cầm các ñịa phương trong 2 năm 2007 và 2008 68 4.4.5. So sánh ñáp ứng miễn dịch của gà và vịt trong 2 năm 2007 - 2008 71 4.4.6. Khảo sát ñáp ứng miễn dịch của gà tại thời ñiểm 1, 2, 3 và 4 tháng sau tiêm phòng 72 4.5. Giám sát lưu hành virus cúm ở gia cầm trên ñịa bàn tỉnh Bắc Giang năm 2007 77 4.5.1. Giám sát huyết thanh học ñối với các ñàn thủy cầm chưa tiêm phòng năm 2007 77 4.5.2. Giám sát virus học ñối với gia cầm tại các chợ và ñiểm giết mổ 78 4.6. Giám sát lưu hành virus cúm ở gia cầm trên ñịa bàn tỉnh Bắc Giang năm 2008 79 4.7. ðánh giá tính khả thi của chương trình sử dụng vacxin cúm gia cầm trên ñịa bàn tỉnh Bắc Giang 81 PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 82 5.1. Kết luận 82 5.2. ðề nghị 83 Danh mục tài liệu tham khảo 84 Phụ lục 88 Một số hình ảnh trong thời gian làm luận văn 93 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 6 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Viết tắt tiếng Việt ðƯMD HGKT TLBH (+) (-) ðáp ứng miễn dịch Hiệu giá kháng thể Tỷ lệ bảo hộ Dương tính Âm tính Viết tắt tiếng Anh ELISA FAO GMT HA HI OIE RNA RT-PCR RRT-PCR WHO Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay Food and Agriculture Organization of the United Nations Geometric Mean Titer Haemagglutination Assay Haemagglutination Inhibition Assay Office International des Epizooties Ribonucleic acid Reverse Transcription - Polymerase Chain Reaction Realtime RT-PCR World Health Organization Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 7 DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 4.1: Tình hình chăn nuôi gia cầm tại Bắc Giang một số năm gần ñây 42 Bảng 4.2: Dịch cúm năm 2007 tại Bắc Giang 45 Bảng 4.3: Hiệu giá kháng thể kháng cúm H5 trong huyết thanh gia cầm, thủy cầm ñã tiêm phòng năm 2007 49 Bảng 4.4a: Hiệu giá kháng thể kháng cúm H5 trong huyết thanh gà ñã tiêm phòng năm 2007 52 Bảng 4.4b: Hiệu giá kháng thể kháng cúm H5 trong huyết thanh vịt ñã tiêm phòng năm 2007 54 Bảng 4.4c: Hiệu giá kháng thể kháng cúm H5 trong huyết thanh ngan ñã tiêm phòng năm 2007 55 Bảng 4.5: Hiệu giá kháng thể kháng cúm H5 trong huyết thanh gà - vịt - ngan ñã tiêm phòng năm 2007 57 Bảng 4.6: Tỷ lệ bảo hộ theo ñàn của gà - vịt - ngan ñã tiêm phòng năm 2007 57 Bảng 4.7: Hiệu giá kháng thể kháng cúm H5 trong huyết thanh gia cầm, thủy cầm ñã tiêm phòng năm 2008 60 Bảng 4.8a: Hiệu giá kháng thể kháng cúm H5 trong huyết thanh gà ñã tiêm phòng năm 2008 63 Bảng 4.8b: Hiệu giá kháng thể kháng cúm H5 trong huyết thanh vịt ñã tiêm phòng năm 2008 64 Bảng 4.9: Hiệu giá kháng thể kháng cúm H5 trong huyết thanh gà - vịt ñã tiêm phòng năm 2008 66 Bảng 4.10: Tỷ lệ bảo hộ theo ñàn của gà - vịt năm 2008 66 Bảng 4.11: So sánh ñáp ứng miễn dịch của gia cầm các ñịa phương trong 2 năm 2007 và 2008 69 Bảng 4.12: So sánh ðƯMD của gà - vịt trong 2 năm 2007 và 2008 71 Bảng 4.13: HGKT kháng cúm H5 ở các thời ñiểm 1, 2, 3 và 4 tháng sau tiêm phòng nhắc lại 73 Bảng 4.14: Giám sát huyết thanh thủy cầm chưa tiêm phòng năm 2007 77 Bảng 4.15: Kết quả giám sát virus học ñối với gia cầm tại chợ, ñiểm giết 78 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 8 mổ năm 2007 Bảng 4.16: Giám sát lưu hành virus ở cúm gia cầm năm 2008 80 DANH MỤC CÁC BIỂU ðỒ Trang Biểu ñồ 1: HGKT kháng kháng nguyên H5 trong huyết thanh gia cầm ñã tiêm phòng năm 2007 50 Biểu ñồ 2: Tỷ lệ bảo hộ theo cá thể của ñàn gia cầm ñã tiêm phòng năm 2007 51 Biểu ñồ 3: So sánh HGKT kháng kháng nguyên H5 trong huyết thanh gà - vịt - ngan ñã tiêm phòng năm 2007 58 Biểu ñồ 4: So sánh TLBH theo cá thể và theo ñàn của gà - vịt - ngan ñã tiêm phòng năm 2007 59 Biểu ñồ 5: HGKT kháng kháng nguyên H5 trong huyết thanh gia cầm, thủy cầm ñã tiêm phòng năm 2008 61 Biểu ñồ 6: Tỷ lệ bảo hộ theo cá thể của ñàn gia cầm, thủy cầm ñã tiêm phòng năm 2008 62 Biểu ñồ 7: So sánh hiệu giá kháng thể kháng cúm H5 giữa 2 loài gà - vịt năm 2008 67 Biểu ñồ 8: So sánh TLBH theo cá thể và theo ñàn của gà - vịt năm 2008 68 Biểu ñồ 9: So sánh về tỷ lệ bảo hộ cá thể giữa 2 năm 2007 - 2008 theo ñịa phương 70 Biểu ñồ 10: So sánh TLBH theo cá thể và theo ñàn của gà - vịt trong 2 năm 2007 - 2008 72 Biểu ñồ 11: Diễn biến hiệu giá kháng thể kháng cúm H5 tại các thời ñiểm 1, 2, 3, và 4 tháng sau tiêm nhắc lại 75 Biểu ñồ 12: Diễn biến của tỷ lệ bảo hộ trong ðƯMD kháng cúm H5 tại các thời ñiểm 1, 2, 3, và 4 tháng sau tiêm nhắc lại 76 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 9 PHẦN 1 MỞ ðẦU 1.1. ðẶT VẤN ðỀ Chăn nuôi gia cầm hiện nay là một trong những ngành quan trọng, có ñóng góp ñáng kể trong nền kinh tế của các quốc gia. ðặc biệt ở Việt Nam, ngành chăn nuôi gia cầm ñã và ñang ñược chú trọng phát triển với hàng ngàn trang trại ñủ các quy mô và hàng trăm triệu con gia cầm, thuỷ cầm các loại. ðây là một trong những ngành phục vụ tiêu dùng thế mạnh ở nước ta, ñem lại lợi nhuận cao cho người chăn nuôi. Do ñó, các dịch bệnh xảy ra ñối với gia cầm ñều gây ảnh hưởng lớn tới chăn nuôi gia cầm và thu nhập quốc dân, nhất là các bệnh dịch xảy ra trên quy mô khu vực và quốc tế thì không chỉ là vấn ñề của riêng nước ta mà còn là mối lo ngại của toàn thế giới. Bệnh cúm gia cầm ñã từng ñược biết ñến từ lâu sau những vụ ñại dịch gây ra cho các ñàn gia cầm ở nhiều nước trên thế giới. Trong mấy năm gần ñây, dịch cúm gia cầm chủng ñộc lực cao (HPAI - Highly Pathogenic Avian Influenza) xuất hiện và ñã giết chết hàng chục triệu gia cầm trên thế giới, ñồng thời khiến hàng tỷ gia cầm khác phải tiêu huỷ bắt buộc ñể tránh lây lan, gây thiệt hại nghiêm trọng cho ngành chăn nuôi và kinh tế các nước có dịch. Nguyên nhân của HPAI là các loại virus cúm typ A - loại virus có khả năng biến chủng rất mạnh. Bệnh lây lan nhanh chóng trong các ñàn gia cầm với tỷ lệ nhiễm và tỷ lệ chết rất cao. Không những thế, bệnh còn truyền sang các loài ñộng vật có vú khác, và ñặc biệt nguy hiểm là có thể lây sang người, gây tử vong hoặc ảnh hưởng lớn ñến sức khỏe. Hiện nay cả thế giới ñang phải ñối mặt với nguy cơ xảy ra một vụ ñại dịch cúm ở người mà nguyên nhân là do các chủng virus cúm gia cầm biến ñổi thành những loại mới thích nghi gây bệnh ở người [2]. . "ðánh giá hiệu lực của vacxin phòng bệnh Cúm gia cầm trên ñịa bàn tỉnh Bắc Giang& quot;. 1.2. MỤC TIÊU CỦA ðỀ TÀI - ðánh giá ñược thiệt hại do dịch cúm ñối. cầm ñối với vacxin cúm ñược sử dụng trong giai ñoạn 2007 - 2008 trên ñịa bàn tỉnh Bắc Giang. - ðánh giá khả năng bảo hộ của vacxin phòng bệnh cúm gia cầm