Xây dựng phương pháp định lượng ceftazidim trong huyết tương người bằng HPLC phục vụ cho giám sát điều trị

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN MAI HƯƠNG XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG CEFTAZIDIM TRONG HUYẾT TƯƠNG NGƯỜI BẰNG HPLC PHỤC VỤ CHO GIÁM SÁT ĐIỀU TRỊ LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN MAI HƯƠNG XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG CEFTAZIDIM TRONG HUYẾT TƯƠNG NGƯỜI BẰNG HPLC PHỤC VỤ CHO GIÁM SÁT ĐIỀU TRỊ LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: KIỂM NGHIỆM THUỐC VÀ ĐỘC CHẤT MÃ SỐ: 8720210 Người hướng dẫn khoa học: TS Lê Đình Chi HÀ NỘI 2018 LỜI CẢM ƠN Trước tiên, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc chân thành tới TS Lê Đình Chi, người thầy tận tình hướng dẫn quan tâm giúp đỡ, động viên tơi suốt q trình thực hồn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn lãnh đạo Bộ mơn Hóa Phân tích - Độc chất Ban giám hiệu trường Đại học Dược Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi cho học tập nghiên cứu Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới thầy cô giảng viên anh chị kỹ thuật viên đồng nghiệp mơn Hóa Phân tích – Độc chất tận tình giúp đỡ, động viên tạo điều kiện tốt cho suốt thời gian học tập thực luận văn Tôi xin gửi lời cảm ơn tới toàn thể cán bộ, giảng viên trường Đại học Dược Hà Nội dìu dắt, giảng dạy tơi năm tháng học tập trường Cuối cùng, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè sinh viên chia sẻ, giúp đỡ, khích lệ tơi suốt q trình hồn thành luận văn Hà Nội, ngày 03 tháng 04 năm 2018 Học viên Nguyễn Mai Hương MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG, BIỂU DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Trang ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ CEFTAZIDIM 1.1.1 Cơng thức hóa học 1.1.2 Tính chất hóa lý, độ ổn định 1.1.3 Dược lý, dược động học 1.1.3.1 Dược động học 1.1.3.2 Chỉ định 1.1.3.3 Liều lượng cách dùng 1.2 ỨNG DỤNG HPLC TRONG GIÁM SÁT ĐIỀU TRỊ CEFTAZIDIM 1.2.1 Giám sát điều trị (TDM) 1.2.1.1 Khái niệm 1.2.1.2 Giám sát điều trị ceftazidim 1.2.2 Ứng dụng HPLC phân tích thuốc phục vụ cho giám sát điều trị ceftazidim 1.2.3 Một số phương pháp định lượng ceftazidim huyết tương HPLC 1.3 THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH THUỐC TRONG DỊCH SINH HỌC 17 1.3.1 Độ chọn lọc 17 1.3.2 Đường chuẩn khoảng tuyến tính 18 1.3.3 Giới hạn định lượng (LLOQ) 19 1.3.4 Độ đúng, độ xác ngày khác ngày 19 1.3.5 Tỷ lệ thu hồi (hiệu suất chiết) 19 1.3.6 Độ ổn định 20 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG TIỆN NGHIÊN CỨU 22 2.1.1 Hóa chất – chất chuẩn 22 2.1.2 Thiết bị, dụng cụ 22 2.1.3 Đối tượng nghiên cứu 23 2.2 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.2.1 Chuẩn bị mẫu 23 2.2.2 Xây dựng phương pháp phân tích 25 2.2.2.1 Xác định điều kiện sắc ký lựa chọn chuẩn nội 25 2.2.2.2 Xây dựng quy trình xử lý mẫu huyết tương 26 2.2.3 Thẩm định phương pháp phân tích 27 2.2.3.1 Độ chọn lọc 27 2.2.3.2 Đường chuẩn khoảng tuyến tính 27 2.2.3.3 Giới hạn định lượng (LLOQ) 27 2.2.3.4 Độ đúng, độ xác ngày khác ngày 28 2.2.3.5 Tỷ lệ thu hồi (hiệu suất chiết) 28 2.2.3.6 Độ ổn định 28 2.2.4 Xác định nồng độ CFZ mẫu huyết tương thực người sử dụng ceftazidim vào mục đích điều trị nghiên cứu 30 2.3 PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ KẾT QUẢ 30 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 31 3.1 KẾT QUẢ XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 31 3.1.1 Khảo sát, xác định điều kiện sắc ký lựa chọn chuẩn nội 31 3.1.1.1 Lựa chọn chuẩn nội 31 3.1.1.2 Lựa chọn điều kiện detector 32 3.1.1.3 Lựa chọn pha động tốc độ dòng pha động 33 3.1.2 Khảo sát, lựa chọn điều kiện xử lý mẫu 35 3.1.2.1 Lựa chọn dung môi tủa protein 35 3.1.2.2 Lựa chọn dung môi chiết loại tạp 35 3.1.3 Kết xây dựng phương pháp định lượng CFZ huyết tương HPLC - UV 38 3.2 KẾT QUẢ THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 38 3.2.1 Độ phù hợp hệ thống 38 3.2.2 Độ chọn lọc 39 3.2.3 Đường chuẩn khoảng tuyến tính 41 3.2.4 Giới hạn định lượng (LLOQ) 42 3.2.5 Độ đúng, độ xác ngày khác ngày 43 3.2.5.1 Độ đúng, độ xác ngày 43 3.2.5.2 Độ đúng, độ xác khác ngày 46 3.2.6 Tỷ lệ thu hồi (hiệu suất chiết) 48 3.2.6.1 Độ lặp lại hiệu suất chiết 48 3.2.6.2 Hiệu suất chiết CFZ IS 49 3.2.7 Độ ổn định 51 3.2.7.1 Độ ổn định dung dịch IS làm việc sau thời gian ngắn 51 3.2.7.2 Độ ổn định dung dịch chuẩn gốc CFZ sau thời gian ngắn 51 3.2.7.3 Độ ổn định mẫu huyết tương sau thời gian ngắn nhiệt độ phòng 52 3.2.7.4 Độ ổn định mẫu huyết tương sau chu kỳ đông – rã đông 53 3.2.7.5 Độ ổn định mẫu sau xử lý 54 3.2.7.6 Độ ổn định dài ngày mẫu huyết tương 54 3.3 KẾT QUẢ ĐỊNH LƯỢNG CFZ TRONG HUYẾT TƯƠNG THỰC CỦA NGƯỜI ĐANG SỬ DỤNG CEFTAZIDIM 55 Chương BÀN LUẬN 58 4.1 PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG CFZ TRONG HUYẾT TƯƠNG NGƯỜI 58 4.1.1 Kỹ thuật xử lý mẫu 59 4.1.2 Phương pháp phân tích định lượng CFZ 60 4.1.3 Thẩm định phương pháp phân tích 61 4.2 KẾT QUẢ PHÂN TÍCH MẪU HUYẾT TƯƠNG BỆNH NHÂN 63 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 65 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT AN : Chất phân tích (Analyte) AR : Thuốc thử phân tích (Analytical reagent) CFE : Cefepim CFZ : Ceftazidim CT : Chiết tách CV : Hệ số biến thiên (Coefficient of Variation) ELISA : Kỹ thuật chất hấp phụ miễn dịch gắn enzym (Enzyme-linked Immunosorbent Assays) EMA : Cơ quan quản lý Dược Châu Âu (European Medicines Agency) HILIC : Sắc ký lỏng tương tác ưa nước (Hydrophilic interaction chromatography) HPLC : Sắc ký lỏng hiệu cao (High performance liquid chromatography) HQC : Mẫu kiểm tra nồng độ cao (High quality control) HT : Huyết tương HTT : Huyết tương trắng ICU : Khoa điều trị tích cực (Intensive care unit) IMI : Imipenem IS : Chuẩn nội (Internal standard) LLOQ : Giới hạn định lượng (Lower limit of quantitation) LQC : Mẫu kiểm tra nồng độ thấp (Low quality control) MeCN : Acetonitril MeOH : Methanol MERO : Meropenem MIC : Nồng độ ức chế tối thiểu (Minimum Inhibitory concentration) MQC : Mẫu kiểm tra nồng độ (Medium quality control) MS : Khối phổ (Mass spectrometry) PA : Tinh khiết phân tích (Pure analysis) QC : Mẫu kiểm tra chất lượng (Quality Control Sample) S/N : Tín hiệu/ nhiễu (Signal/ noise) SKĐ : Sắc ký đồ STT : Số thứ tự T > MIC : Thời gian nồng độ thuốc nồng độ ức chế tối thiểu (Time above the minimum inhibitory concentration) TB : Trung bình TCCS : Tiêu chuẩn sở TDM : Theo dõi điều trị (Therapeutic drug monitoring) TLTK : Tài liệu tham khảo TM : Tĩnh mạch tR : Thời gian lưu (retention time) tt/ tt : thể tích/ thể tích ULOQ : Giới hạn định lượng (Upper limit of quantitation) US - FDA : Cơ quan quản lý thuốc thực phẩm Mỹ (United States – Food and Drug Administration) UV : Tử ngoại (Ultra Violet) DANH MỤC CÁC BẢNG, BIỂU Trang Bảng 1.1 Nồng độ thuốc huyết sau tiêm ceftazidim… Bảng 1.2 Một số phương pháp định lượng CFZ huyết tương HPLC 10 Bảng 2.1 Các chất chuẩn dùng nghiên cứu 22 Bảng 2.2 Các dung mơi hóa chất dùng nghiên cứu 22 Bảng 2.3 Các thiết bị, dụng cụ dùng nghiên cứu 23 Bảng 2.4 Cách chuẩn bị mẫu chuẩn huyết tương, mẫu huyết tương trắng 24 Bảng 2.5 Cách chuẩn bị mẫu kiểm tra huyết tương 25 Bảng 3.1 Kết khảo sát độ phù hợp hệ thống phương pháp 38 Bảng 3.2 Ảnh hưởng mẫu trắng thời gian lưu CFZ IS 41 Bảng 3.3 Kết khảo sát đường chuẩn 41 Bảng 3.4 Kết thẩm định giới hạn định lượng 42 Bảng 3.5-1 – 3.5-4 Kết thẩm định độ đúng, độ xác ngày 44 Bảng 3.6 Kết thẩm định độ đúng, độ xác khác ngày 46 Bảng 3.7 Kết độ lặp lại hiệu suất chiết CFZ IS 48 Bảng 3.8 Kết hiệu suất chiết IS 49 Bảng 3.9 Kết hiệu suất chiết CFZ 50 Bảng 3.10 Độ ổn định dung dịch IS làm việc thời gian ngắn 51 Bảng 3.11 Độ ổn định dung dịch chuẩn gốc CFZ thời gian ngắn 51 Bảng 3.12 Kết độ ổn định mẫu HT nhiệt độ phòng sau 52 Bảng 3.13 Kết độ ổn định mẫu HT sau chu kỳ đông – rã đông 53 Bảng 3.14 Kết độ ổn định mẫu sau xử lý 54 Bảng 3.15 Kết độ ổn định dài ngày mẫu HT 55 Bảng 3.16 Kết định lượng mẫu huyết tương bệnh nhân dùng CFZ 56 Data File D:\CHEM32\1\DATA\CEFTAZIDIM\05032018000071.D Sample Name: LLOQ5 RetTime k' Area Height Symm Width Plates Resol Select [min] [mAU*s] [mAU] [min] ution ivity -| | | | -| -| -| -| -2.059 298.14120 40.67345 0.63 0.1183 1677 2.244 27.60357 5.14569 0.62 0.0905 3409 1.04 1.09 2.765 13.77029 1.16368 0.51 0.2444 709 1.83 1.23 4.428 492.22964 34.82198 0.94 0.2178 2288 4.23 1.60 6.178 40.29713 2.74053 0.79 0.2178 4460 4.72 1.40 7.516 37.36038 1.66432 0.94 0.3333 2819 2.85 1.22 ===================================================================== *** End of Report *** Instrument 3/5/2018 2:50:52 PM HUONG Page of Data File D:\CHEM32\1\DATA\CEFTAZIDIM\05032018000072.D Sample Name: LLOQ6 ===================================================================== Acq Operator : HUONG Acq Instrument : Instrument Location : Vial 26 Injection Date : 3/5/2018 2:34:20 PM Inj Volume : 20.0 µl Acq Method : D:\CHEM32\1\METHODS\HUONGPT.M Last changed : 3/5/2018 2:33:58 PM by HUONG (modified after loading) Analysis Method : D:\CHEM32\1\METHODS\HUONGPT.M Last changed : 3/5/2018 11:11:32 AM by HUONG (modified after loading) Method Info : nguyen hoang dam Sample Info : 1,5 ml/ph; 20mcl; dem-acn = 90-10, 260nm 2.057 DAD1 A, Sig=260,4 Ref=360,100 (CEFTAZIDIM\05032018000072.D) Norm 4.423 40 35 30 25 20 15 7.486 2.762 6.157 2.240 10 ===================================================================== Area Percent Report with Performance ===================================================================== Multiplier: : 1.0000 Dilution: : 1.0000 Sample Amount: : 1.00000 Use Multiplier & Dilution Factor with ISTDs [ng/ul] (not used in calc.) Signal 1: DAD1 A, Sig=260,4 Ref=360,100 Instrument 3/5/2018 2:50:08 PM HUONG Page of Data File D:\CHEM32\1\DATA\CEFTAZIDIM\05032018000072.D Sample Name: LLOQ6 RetTime k' Area Height Symm Width Plates Resol Select [min] [mAU*s] [mAU] [min] ution ivity -| | | | -| -| -| -| -2.057 305.56473 41.42080 0.61 0.1192 1647 2.240 27.18746 5.13308 0.51 0.0869 3683 1.04 1.09 2.762 13.34610 1.20819 0.50 0.2367 754 1.90 1.23 4.423 492.96106 35.58271 0.92 0.2133 2380 4.34 1.60 6.157 38.22308 2.66242 0.79 0.2111 4709 4.80 1.39 7.486 34.90152 1.64532 0.91 0.3267 2911 2.90 1.22 ===================================================================== *** End of Report *** Instrument 3/5/2018 2:50:08 PM HUONG Page of Data File D:\CHEM32\1\DATA\CEFTAZIDIM\1308000039.D Sample Name: LQC6-1 ===================================================================== Acq Operator : huong Acq Instrument : Instrument Location : Vial 41 Injection Date : 8/13/2017 7:29:50 AM Inj Volume : 20.0 µl Acq Method : D:\CHEM32\1\METHODS\HUONGPT.M Last changed : 8/13/2017 7:29:06 AM by huong (modified after loading) Analysis Method : D:\CHEM32\1\METHODS\HUONGPT.M Last changed : 8/14/2017 2:37:58 AM by huong (modified after loading) Method Info : nguyen hoang dam Sample Info : LQC6-1; dem PH3.2-acn = 90:10; 260nm, 1.5ml/ph; 20mcl ===================================================================== Column(s) ===================================================================== Column Description : Serial# : Product# : Diameter : Particle size : # Injections : Maximum Pressure : Minimum pH : Maximum Temperature: Comment : Inertsil ODS-3 autoID-13 Batch# : Length : 150.0 mm Void volume : 60.0 % 4.6 mm 5.0 µm 545 400.0 bar 2.0 60.0 °C Maximum pH : 7.0 2.158 DAD1 A, Sig=260,4 Ref=360,100 (CEFTAZIDIM\1308000039.D) 4.506 mAU 40 35 30 25 20 6.192 5.720 1.741 2.668 2.355 10 7.321 15 ===================================================================== Area Percent Report with Performance Instrument 8/14/2017 3:27:05 AM huong Page of Data File D:\CHEM32\1\DATA\CEFTAZIDIM\1308000039.D Sample Name: LQC6-1 ===================================================================== Multiplier: : 1.0000 Dilution: : 1.0000 Sample Amount: : 1.00000 Use Multiplier & Dilution Factor with ISTDs [ng/ul] (not used in calc.) Signal 1: DAD1 A, Sig=260,4 Ref=360,100 RetTime k' Area Height Symm Width Plates Resol Select [min] [mAU*s] [mAU] [min] ution ivity -| | | | -| -| -| -| -1.741 0.75 13.68179 1.15378 1.70 0.1667 604 2.158 1.16 267.31302 43.70894 0.89 0.0886 3295 1.92 1.56 2.355 1.36 36.98881 5.50703 0.71 0.1145 2341 1.14 1.17 2.668 1.68 19.02556 3.15717 0.82 0.0790 6305 1.90 1.23 4.506 3.52 488.16043 38.43844 0.83 0.1995 2827 7.76 2.10 5.720 4.74 31.25568 2.14572 0.96 0.2262 3543 3.35 1.35 6.192 5.21 39.90125 3.75898 0.92 0.1667 7650 1.41 1.10 7.321 6.34 113.49087 7.35340 0.92 0.2422 5059 3.24 1.22 ===================================================================== *** End of Report *** Instrument 8/14/2017 3:27:05 AM huong Page of Data File D:\CHEM32\1\DATA\CEFTAZIDIM\05032018000074.D Sample Name: MQC1 ===================================================================== Acq Operator : HUONG Acq Instrument : Instrument Location : Vial 41 Injection Date : 3/5/2018 2:57:54 PM Inj Volume : 20.0 µl Acq Method : D:\CHEM32\1\METHODS\HUONGPT.M Last changed : 3/5/2018 2:57:28 PM by HUONG (modified after loading) Analysis Method : D:\CHEM32\1\METHODS\HUONGPT.M Last changed : 3/5/2018 11:11:32 AM by HUONG (modified after loading) Method Info : nguyen hoang dam Sample Info : 1,5 ml/ph; 20mcl; dem-acn = 90-10, 260nm 2.054 DAD1 A, Sig=260,4 Ref=360,100 (CEFTAZIDIM\05032018000074.D) Norm 4.427 40 7.431 50 30 2.756 2.508 10 6.145 2.239 20 ===================================================================== Area Percent Report with Performance ===================================================================== Multiplier: : 1.0000 Dilution: : 1.0000 Sample Amount: : 1.00000 Use Multiplier & Dilution Factor with ISTDs [ng/ul] (not used in calc.) Signal 1: DAD1 A, Sig=260,4 Ref=360,100 Instrument 3/5/2018 3:11:57 PM HUONG Page of Data File D:\CHEM32\1\DATA\CEFTAZIDIM\05032018000074.D Sample Name: MQC1 RetTime k' Area Height Symm Width Plates Resol Select [min] [mAU*s] [mAU] [min] ution ivity -| | | | -| -| -| -| -2.054 452.57214 59.57293 0.63 0.1219 1575 2.239 49.99595 8.20638 0.46 0.0919 3294 1.01 1.09 2.508 7.96989 1.22383 1.84 0.1289 2097 1.43 1.12 2.756 23.55260 2.17820 0.48 0.1433 2046 1.07 1.10 4.427 478.90802 33.90846 0.91 0.2142 2367 5.49 1.61 6.145 54.42505 3.89989 0.82 0.2067 4903 4.80 1.39 7.431 846.47778 38.47737 0.83 0.3133 3113 2.91 1.21 ===================================================================== *** End of Report *** Instrument 3/5/2018 3:11:57 PM HUONG Page of Data File D:\CHEM32\1\DATA\CEFTAZIDIM\DEF_LC 2018-03-09 11-54-40\090318000056.D Sample Name: HQC1 ===================================================================== Acq Operator : HUONG Seq Line : Acq Instrument : Instrument Location : Vial 41 Injection Date : 3/9/2018 1:05:08 PM Inj : Inj Volume : 20.0 µl Acq Method : D:\CHEM32\1\DATA\CEFTAZIDIM\DEF_LC 2018-03-09 11-54-40\HUONGPT.M Last changed : 3/9/2018 11:55:25 AM by HUONG (modified after loading) Analysis Method : D:\CHEM32\1\METHODS\HUONGPT.M Last changed : 3/9/2018 2:20:51 PM by HONG (modified after loading) Method Info : nguyen hoang dam mAU 7.759 2.068 DAD1 A, Sig=260,4 Ref=360,100 (CEFTAZIDIM\DEF_LC 2018-03-09 11-54-40\090318000056.D) 4.382 40 30 20 2.949 6.318 2.241 10 ===================================================================== Area Percent Report with Performance ===================================================================== Multiplier: : 1.0000 Dilution: : 1.0000 Use Multiplier & Dilution Factor with ISTDs Signal 1: DAD1 A, Sig=260,4 Ref=360,100 RetTime k' Area Height Symm Width Plates Resol Select [min] [mAU*s] [mAU] [min] ution ivity -| | | | -| -| -| -| -2.068 325.09998 50.02980 0.80 0.0967 2543 2.241 38.14235 5.90058 0.52 0.0990 2845 1.04 1.08 2.949 20.57567 1.11666 1.19 0.1933 1291 2.84 1.32 4.382 444.92892 29.79718 0.85 0.2288 2035 3.99 1.49 Instrument 3/9/2018 2:39:39 PM HONG Page of Data File D:\CHEM32\1\DATA\CEFTAZIDIM\DEF_LC 2018-03-09 11-54-40\090318000056.D Sample Name: HQC1 RetTime k' Area Height Symm Width Plates Resol Select [min] [mAU*s] [mAU] [min] ution ivity -| | | | -| -| -| -| -6.318 43.70308 2.86281 0.78 0.2244 4389 5.02 1.44 7.759 1161.98621 48.73232 0.80 0.3462 2781 2.97 1.23 ===================================================================== *** End of Report *** Instrument 3/9/2018 2:39:39 PM HONG Page of Data File D:\CHEM32\1\DATA\CEFTAZIDIM\230318000001.D Sample Name: mau thuc ===================================================================== Acq Operator : huong Acq Instrument : Instrument Location : Vial Injection Date : 3/23/2018 11:45:00 AM Inj Volume : 20.0 µl Acq Method : D:\CHEM32\1\METHODS\HUONGPT.M Last changed : 3/23/2018 12:06:17 PM by huong (modified after loading) Analysis Method : D:\CHEM32\1\METHODS\HUONGPT.M Last changed : 3/23/2018 1:10:25 PM by Hoang (modified after loading) Method Info : nguyen hoang dam ===================================================================== Column(s) ===================================================================== Column Description : Cot phenomenex Serial# : phenyl Product# : Batch# : Diameter : 4.6 mm Length : 250.0 mm Particle size : 3.0 µm Void volume : 60.0 % # Injections : 1226 Maximum Pressure : 400.0 bar Maximum pH : 7.0 Minimum pH : 2.0 Maximum Temperature: 60.0 °C Comment : 7.001 2.041 DAD1 A, Sig=260,4 Ref=360,100 (CEFTAZIDIM\230318000001.D) mAU 60 50 4.547 40 30 20 6.011 10 2.5 7.5 10 12.5 15 17.5 ===================================================================== Area Percent Report with Performance ===================================================================== Multiplier: : Instrument 3/23/2018 1:10:27 PM Hoang 1.0000 Page of Data File D:\CHEM32\1\DATA\CEFTAZIDIM\230318000001.D Sample Name: mau thuc Dilution: : 1.0000 Sample Amount: : 1.00000 Use Multiplier & Dilution Factor with ISTDs [ng/ul] (not used in calc.) Signal 1: DAD1 A, Sig=260,4 Ref=360,100 RetTime k' Area Height Symm Width Plates Resol Select [min] [mAU*s] [mAU] [min] ution ivity -| | | | -| -| -| -| -2.041 0.23 518.64307 66.00518 0.61 0.0987 2364 4.547 1.74 557.19891 34.18938 0.68 0.2333 2102 8.87 7.60 6.011 2.62 45.72316 2.66125 0.74 0.2400 3476 3.64 1.51 7.001 3.21 1485.49329 56.86744 0.58 0.3457 2271 1.99 1.23 ===================================================================== *** End of Report *** Instrument 3/23/2018 1:10:27 PM Hoang Page of ... TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN MAI HƯƠNG XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG CEFTAZIDIM TRONG HUYẾT TƯƠNG NGƯỜI BẰNG HPLC PHỤC VỤ CHO GIÁM SÁT ĐIỀU TRỊ LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH:... Ứng dụng HPLC phân tích thuốc phục vụ cho giám sát điều trị ceftazidim 1.2.3 Một số phương pháp định lượng ceftazidim huyết tương HPLC 1.3 THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP PHÂN... sau: Xây dựng thẩm định phương pháp định lượng ceftazidim huyết tương người HPLC theo hướng dẫn thẩm định phương pháp phân tích thuốc dịch sinh học US - FDA Áp dụng phương pháp xây dựng để xác định