KHẢO SÁT MỘT SỐ CHỈ TIÊU VI SINH TRONG THỨC ĂN HỖN HỢP CHO GÀ

BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CHĂN NI − THÚ Y ∗∗∗∗∗∗∗∗∗∗∗∗∗∗∗∗ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT MỘT SỐ CHỈ TIÊU VI SINH TRONG THỨC ĂN HỖN HỢP CHO GÀ Sinh viên thực hiện: ĐINH THỊ HOÀNG OANH Lớp: DH06DY Ngành: Dược Thú Y Niên khóa: 2006 – 2011 Tháng 08/2011 BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CHĂN NI − THÚ Y ∗∗∗∗∗∗∗∗∗∗∗∗∗∗∗∗ ĐINH THỊ HOÀNG OANH KHẢO SÁT MỘT SỐ CHỈ TIÊU VI SINH TRONG THỨC ĂN HỖN HỢP CHO GÀ Khóa luận đệ trình để đáp ứng yêu cầu cấp Bác sỹ thú y chuyên ngành Dược Giáo viên hướng dẫn PGS.TS NGUYỄN NGỌC HẢI Tháng 08/2011 i PHIẾU XÁC NHẬN CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN Họ tên sinh viên thực hiện: ĐINH THỊ HOÀNG OANH Tên khóa luận: “Khảo sát số tiêu vi sinh thức ăn hỗn hợp cho gà” Đã hồn thành khóa luận theo u cầu giáo viên hướng dẫn ý kiến nhận xét, đóng góp hội đồng chấm thi tốt nghiệp khóa ngày… ……………… Giáo viên hướng dẫn PGS TS NGUYỄN NGỌC HẢI ii LỜI CẢM TẠ Thành kính ghi ơn Ơng bà, cha mẹ sinh thành nuôi dưỡng dạy dỗ đến ngày hôm Trân trọng cảm ơn Ban giám hiệu trường Đại Học Nơng Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh Ban Chủ nhiệm khoa Chăn Nuôi Thú Y Quý Thầy Cô khoa Chăn Nuôi Thú Y tận tình giảng dạy, truyền đạt kiến thức kinh nghiệm cho ngày học tập trường Trân trọng biết ơn Thầy PGS TS Nguyễn Ngọc Hải Đã hết lòng giúp đỡ, dẫn tơi suốt thời gian thực đề tài hoàn thành luận văn tốt nghiệp Chân thành cảm ơn Bộ môn vi sinh truyền nhiễm, Bệnh xá Thú Y, khoa CNTY Thầy Cơ, anh chị, bạn ngồi phòng vi sinh truyền nhiễm Đã tạo điều kiện tận tình giúp đỡ tơi thời gian thực tập Cuối cùng, tơi kính chúc q Thầy Cơ, anh chị bạn nhiều sức khỏe, thành đạt hạnh phúc Tơi xin chân thành cảm ơn! Đinh Thị Hồng Oanh iii TÓM TẮT Đề tài nghiên cứu: “Khảo sát số tiêu vi sinh thức ăn hỗn hợp cho gà” tiến hành từ tháng 01 đến tháng 05/ 2011 phòng vi sinh, mơn vi sinh truyền nhiễm Qua kiểm tra 30 mẫu thức ăn hỗn hợp hồn chỉnh cho gà cơng ty sản xuất thức ăn gia súc, thu nhận kết sau: Vi sinh vật nhiễm vào mẫu vượt giới hạn cho phép tổng số vi khuẩn hiếu khí coliforms Kế đến nhiễm Clostridium perfringens khơng có mẫu nhiễm Staphylococcus aureus, E coli, Salmonella Với mẫu thức ăn cho gà từ - 28 ngày tuổi:  Tỷ lệ đạt tổng số VKHK công ty %  Tỷ lệ đạt tổng số coliforms công ty A, B 33,33 %; cao công ty E 100 %; thấp công ty D % công ty C đạt 66,67 %  Tỷ lệ đạt tiêu Salmonella , E coli, S aureus, C perfringens công ty 100 % Với mẫu thức ăn cho gà thịt:  Tỷ lệ đạt tổng số VKHK công ty %  Tỷ lệ đạt tổng số coliforms công ty A, B, C 33,33 %; cao công ty E 100 % công ty D đạt 66,67 %  Tỷ lệ đạt tiêu Salmonella , E coli, S aureus, C perfringens công ty 100 % iv MỤC LỤC TRANG Trang tựa i PHIẾU XÁC NHẬN CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN ii LỜI CẢM TẠ iii TÓM TẮT iv MỤC LỤC v DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT viii DANH SÁCH CÁC BẢNG ix DANH SÁCH CÁC HÌNH x DANH SÁCH CÁC SƠ ĐỒ xi Chương MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề .1 1.2 Mục đích 1.3 Yêu cầu Chương TỔNG QUAN 2.1 Quy chuẩn quy định giới hạn hàm lượng vi sinh vật tối đa cho phép thức ăn hỗn hợp hoàn chỉnh cho gà 2.2 Giới thiệu thức ăn hỗn hợp (TĂHH) 2.3 Sơ lược tiêu vi sinh vật kiểm tra thức ăn cho gà .5 2.3.1 Vi khuẩn hiếu khí (VKHK) 2.3.2 Tổng số coliforms 2.3.3 Vi khuẩn Escherichia coli (E coli) 2.3.3.1 Đặc điểm 2.3.3.2 Yếu tố kháng nguyên độc tố .6 2.3.3.3 Phân loại v 2.3.3.4 Cơ chế gây bệnh 2.3.3.5 Bệnh gà 2.3.4 Vi khuẩn Salmonella 2.3.4.1 Đặc điểm 2.3.4.2 Yếu tố kháng nguyên độc tố .9 2.3.4.3 Cơ chế gây bệnh 10 2.3.4.4 Bệnh gà 10 2.3.5 Vi khuẩn Staphylococcus aureus (S aureus) 11 2.3.5.1 Đặc điểm .11 2.3.5.2 Cấu trúc kháng nguyên độc tố 12 2.3.5.3 Bệnh gà 13 2.3.6 Vi khuẩn Clostridium perfringens (C perfringens) 13 2.3.6.1 Đặc điểm .13 2.3.6.2 Các loại độc tố .14 2.3.6.3 Bệnh gà 14 Chương 16 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 3.1 Thời gian địa điểm 16 3.2 Đối tượng nghiên cứu 16 3.3 Nội dung nghiên cứu 16 3.4 Dụng cụ hóa chất 17 3.5 Phương pháp tiến hành 17 3.5.1 Đếm tổng số vi khuẩn hiếu khí 18 3.5.2 Định lượng coliforms phương pháp pha loãng tới hạn (MPN – Most Probable Number) .19 3.5.3 Định lượng Staphylococcus aureus 20 3.5.4 Định lượng Clostridium perfringens 23 3.5.5 Định tính Escherichia coli .25 3.5.6 Định tính Salmonella 25 vi Chương 28 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 4.1 Đánh giá mức độ nhiễm tiêu vi sinh thức ăn cho gà gà thịt theo công ty .28 4.1.1 Đánh giá mức độ nhiễm tiêu vi sinh mẫu thức ăn cho gà gà thịt công ty A 28 4.1.2 Đánh giá mức độ nhiễm tiêu vi sinh mẫu thức ăn cho gà gà thịt công ty B 29 4.1.3 Đánh giá mức độ nhiễm tiêu vi sinh mẫu thức ăn cho gà gà thịt công ty C 30 4.1.4 Đánh giá mức độ nhiễm tiêu vi sinh mẫu thức ăn cho gà gà thịt công ty D 32 4.1.5 Đánh giá mức độ nhiễm tiêu vi sinh mẫu thức ăn cho gà gà thịt công ty E .33 4.2 Đánh giá chung mức độ nhiễm tiêu vi sinh mẫu thức ăn cho gà gà thịt công ty 35 Chương 37 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .37 5.1 Kết luận .37 5.2 Đề nghị 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO 39 PHỤ LỤC 41 vii DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT CFU colony forming unit BNNPTNT Bộ Nông Nghiệp Phát Triển Nông Thôn kl Khuẩn lạc QCVN Quy chuẩn Việt Nam TĂHH Thức ăn hỗn hợp TĂGS Thức ăn gia súc VKHK Vi khuẩn hiếu khí VS Vi sinh VSV Vi sinh vật viii DANH SÁCH CÁC BẢNG TRANG Bảng 2.1 Tổng số vi khuẩn tối đa cho phép thức ăn hỗn hợp hoàn chỉnh cho gà Bảng 4.1 Tỷ lệ đạt tiêu VS mẫu thức ăn cho gà công ty A 28 Bảng 4.2 Tỷ lệ đạt tiêu VS mẫu thức ăn cho gà thịt công ty A 29 Bảng 4.3 Tỷ lệ đạt tiêu VS mẫu thức ăn cho gà công ty B 30 Bảng 4.5 Tỷ lệ đạt tiêu VS mẫu thức ăn cho gà công ty C 31 Bảng 4.6 Tỷ lệ đạt tiêu VS mẫu thức ăn cho gà thịt công ty C 31 Bảng 4.7 Tỷ lệ đạt tiêu VS mẫu thức ăn cho gà công ty D 32 Bảng 4.8 Tỷ lệ đạt tiêu VS mẫu thức ăn cho gà thịt công ty D 33 Bảng 4.9 Tỷ lệ đạt tiêu VS mẫu thức ăn cho gà công ty E 34 Bảng 4.10 Tỷ lệ đạt tiêu VS mẫu thức ăn cho gà thịt công ty E 34 ix Bảng 4.9 Tỷ lệ đạt tiêu VS mẫu thức ăn cho gà công ty E GÀ CON Mẫu Tiêu chuẩn (CFU/g) Chỉ tiêu vi sinh VKHK 10 coliforms 10 C perfringens Số khuẩn lạc TB (CFU/g) Lần Lần Lần (n=1) (n=1) (n=1) 5 Tỷ lệ đạt (%) 8255 10 2787,5 10 16953 10 0/ 90 0 3/ 100 10 0 3/ 100 10 Đạt S aureus 10 0 3/ 100 E coli Khơng có - - - 3/ 100 Salmonella Khơng có - - - 3/ 100 Bảng 4.10 Tỷ lệ đạt tiêu VS mẫu thức ăn cho gà thịt công ty E GÀ THỊT Mẫu Chỉ tiêu vi sinh VKHK coliforms Tiêu chuẩn (CFU/g) Số khuẩn lạc TB (CFU/g) Lần Lần Lần (n=1) (n=1) (n=1) 10 10 726 10 893,75 10 70 1778,5 10 Đạt Tỷ lệ đạt (%) 0/ 3/ 100 3/ 100 3/ 100 0 0 E coli 10 Khơng có 10 - - - 3/ 100 Salmonella Khơng có - - - 3/ 100 C perfringens 10 S aureus 34 4.2 Đánh giá chung mức độ nhiễm tiêu vi sinh mẫu thức ăn cho gà gà thịt công ty Bảng 4.11 Tỷ lệ đạt yêu cầu tiêu vi sinh công ty Mẫu GÀ CON GÀ THỊT Công ty Chỉ tiêu không đạt Đánh giá A 2/ - B 2/ - C 2/ - D 2/ - E 1/ - A 2/ - B 2/ - C 2/ - D 2/ - E 1/ - Tóm lại, theo tiêu chuẩn QCVN 01 - 10: 2009/ BNNPTNT, mẫu đạt yêu cầu vi sinh mẫu phải đạt tất tiêu vi sinh, có tiêu khơng đạt xem mẫu khơng đạt Qua khảo sát 30 mẫu thức ăn cho gà gà thịt, nhận thấy: khơng có mẫu đạt u cầu tất tiêu Đối với VKHK, tất mẫu nhiễm vượt giới hạn cho phép Sự vấy nhiễm lúc lấy mẫu bao thức ăn mở trước đó, q trình vận chuyển tùy thuộc vào mơi trường xung quanh Chỉ tiêu khơng mang tính thị cao mức nguy hại cho vật nuôi, không trực tiếp gây nguy hiểm tới sức khỏe, lại thể mức độ vệ sinh thức ăn trình chế biến, bảo quản nguyên liệu phân phối Đối với việc định tính vi khuẩn E coli vi khuẩn Salmonella theo kết kiểm tra âm tính, khơng phát có mẫu Điều sức đề kháng loại vi khuẩn yếu chúng sống chủ yếu đường ruột Còn với tổng số coliforms có số mẫu nhiễm vượt giới hạn, số mẫu nhiễm mức độ cho phép Tuy nhiên coliforms tiêu VSV không trực tiếp gây hại nguy hiểm Điều cho thấy từ khâu nhập nguyên liệu, kho chứa kỹ thuật sơ chế 35 công ty quy định, hợp vệ sinh kết hợp với nhiệt độ tạo viên cám tiêu diệt hạn chế phát triển vi khuẩn Đối với Staphylococcus aureus, chúng tồn tự nhiên, vết thương có mũ, da niêm mạc đường tiêu hóa Sau kiểm tra không thấy mẫu bị nhiễm, chứng tỏ khâu sơ chế nguyên liệu kiểm tra chặt chẽ, quy trình sản xuất thức ăn cơng ty theo dây chuyền tự động hóa, cơng nhân khám sức khỏe định kỳ trang bị đầy đủ dụng cụ sản xuất Đối với Clostridium perfringens, loại vi khuẩn sống yếm khí, bào tử chúng tồn tự nhiên chịu nhiệt nên nhiễm ảnh hưởng môi trường, nguyên liệu, hàm lượng đạm Sự nhiễm vi khuẩn thời gian tỗn trữ kéo dài, ẩm độ cao, quy trình bảo quản ngun liệu cơng ty, vị trí bày bán đại lý khác 36 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Qua thời gian kiểm tra đánh giá mức độ nhiễm VSV gây bệnh thức ăn hỗn hợp hoàn chỉnh cho gà gà thịt công ty theo QCVN 01 - 10: 2009/ BNNPTNT, chúng tơi có kết luận sau: Vi sinh vật nhiễm vào mẫu vượt giới hạn cho phép tổng số vi khuẩn hiếu khí coliforms Kế đến nhiễm Clostridium perfringens khơng có mẫu nhiễm Staphylococcus aureus, E coli, Salmonella Với mẫu thức ăn cho gà từ - 28 ngày tuổi:  Tỷ lệ đạt tổng số VKHK công ty %  Tỷ lệ đạt tổng số coliforms công ty A, B 33,33 %; cao công ty E 100 %; thấp công ty D % công ty C đạt 66,67 %  Tỷ lệ đạt tiêu Salmonella , E coli, S aureus, C perfringens công ty 100 % Với mẫu thức ăn cho gà thịt:  Tỷ lệ đạt tổng số VKHK công ty %  Tỷ lệ đạt tổng số coliforms công ty A, B, C 33,33 %; cao công ty E 100 % công ty D đạt 66,67 %  Tỷ lệ đạt tiêu Salmonella , E coli, S aureus, C perfringens công ty 100 % 5.2 Đề nghị Tiếp tục khảo sát với số mẫu nhiều công ty khác nhau, số lần lặp lại nhiều để xử lý thống kê cho kết có ý nghĩa 37 Để có kết xác cần lấy mẫu nhiều nơi bao lấy bao thức ăn chưa khui Lưu ý đến thời gian nhiệt độ bảo quản sản phẩm Cần phải kiểm sốt chặt chẽ nguồn ngun liệu có quy trình lấy mẫu kiểm tra thời gian tồn trữ phù hợp Thường xuyên kiểm tra vệ sinh dụng cụ chế biến, dụng cụ chuyên chở, sức khỏe đồ bảo hộ lao động cơng nhân q trình sản xuất thức ăn hỗn hợp hồn chỉnh q trình phối hợp nguyên liệu 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO Trần Thị Thái Bình, 2008 Xác định diện số vi sinh vật nấm mốc thức ăn hỗn hợp cho vịt sau bổ sung Formycine gold premix Luận văn tốt nghiệp, trường Đại học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh Nguyễn Xn Bình, Trần Xuân Hạnh BS Tô Thị Phấn, 2004 109 bệnh gia cầm cách phòng trị Nhà xuất Nông Nghiệp Hà Nội Võ Lâm Chiêu Dương, 2006 Tỷ lệ nhiễm Eimeria, E coli, Salmonella phân bê tiêu chảy thử nghiệm số thuốc điều trị Eimeria Luận văn thạc sĩ khoa học Nông Nghiệp Nguyễn Thị Anh Đào, 2005 Tình hình nhiễm vi sinh vật gây bệnh bột cá thức ăn hỗn hợp số trại chăn nuôi heo khu vực Tp Hồ Chí Minh Luận văn tốt nghiệp, trường Đại học Nông Lâm Tp HCM Nguyễn Ngọc Hải, 1999 Phân lập vi khẩn E coli gây bệnh phù heo sau cai sữa khảo sát khả nhạy cảm chúng số kháng sinh Luận án thạc sĩ khoa học Nông Nghiệp Nguyễn Ngọc Hải, Nguyễn Thị Kim Loan, 2009 Thực hành nghiên cứu vi sinh vật Nhà xuất Nông Nghiệp Võ Thanh Kiều, 2007 Khảo sát tỷ lệ vấy nhiễm Salmonella Campylobacter quày thịt heo số sở giết mổ chợ sỉ địa bàn Tp Hồ Chí Minh Luận văn tốt nghiệp trường Đại học Nông Lâm Tp HCM 39 Đinh Nam Lâm, 1999 Nghiên cứu vi khuẩn học tình hình nhiễm Salmonella vịt tỉnh Cần Thơ Luận án thạc sĩ khoa học Nông Nghiệp Đỗ Hiếu Liêm, 1999 Khảo sát số tiêu vệ sinh quầy thịt gà tươi lò mổ bày bán số chợ TP Hồ Chí Minh Luận án thạc sĩ khoa học Nông Nghiệp 10 Bùi Thị Lưu Ly, 2006 Nghiên cứu số đặc tính sinh học vi khuẩn Escherichia coli gây phù heo Luận văn thạc sĩ khoa học Nông Nghiệp 11 Nguyễn Vĩnh Phước, 1977 Vi sinh vật học thú y, tập II Nhà xuất Đại học Trung học chuyên nghiệp Hà Nội 12 Tơn Thất Sơn, 2005 Giáo trình dinh dưỡng thức ăn vật nuôi Nhà xuất Hà Nội 13 Trần Linh Thước, 2009 Phương pháp phân tích vi sinh vật nước, thực phẩm mĩ phẩm Nhà xuất Giáo Dục 14 Phạm Ngọc Kim Thanh, 1999 Khảo sát số tiêu vệ sinh trình giết mổ phân phối thịt heo từ sở giết mổ Nam Phong đến số chợ Tp Hồ Chí Minh Luận văn thạc sĩ khoa học Nơng Nghiệp 15 Nguyễn Ngọc Tuân, 2002 Vệ sinh thịt Nhà xuất Nông Nghiệp 16 Vũ Thị Thu Trang, 2010 Khảo sát tình hình vấy nhiễm vi sinh vật thịt heo tươi số sở giết mổ chợ sỉ thuộc địa bàn Tp Hồ Chí Minh Luận văn tốt nghiệp, trường Đại học Nông Lâm Tp HCM 40 PHỤ LỤC BẢNG SỐ LIỆU KẾT QUẢ KIỂM TRA VI SINH Bảng Kết theo dõi tiêu tổng số vi khuẩn hiếu khí Cty Cty A Cty B Cty C Cty D Cty E 2120×105 8490×105 2347,5×105 8777,5×105 8255×105 2370×105 7290×105 2017×105 9155×105 2787,5×105 1810×105 3925×105 2195×105 19885×105 16952,5×105 547,5×106 531,25×106 794,5×106 915,75×106 726×106 608,25×106 542,75×106 284,3×106 933×106 893,75×106 470,75×106 241,25×106 525,5×106 719×106 1778,5×106 Mẫu GÀ CON GÀ THỊT Bảng Kết theo dõi tiêu tổng số coliforms Cty Cty A Cty B Cty C Cty D Cty E 400 0 450 90 14000 11000 14000 14000 14000 14000 14000 4500 10000 0 0 70 14000 2500 0 Mẫu GÀ CON GÀ THỊT Bảng Kết theo dõi tiêu Clostridium perfringens Cty Cty A Cty B Cty C Cty D Cty E 3.102 5,5.102 102 5,5.102 102 5,5.102 8,5.102 102 6,5.102 2.102 2.102 130.10 0 Mẫu GÀ CON GÀ THỊT 2 10 0 6,25.102 5,75.102 6.102 102 102 41 Bảng Kết theo dõi tiêu định tính: E coli, Salmonella Cty Cty A Cty B Cty C Cty D Cty E (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Mẫu GÀ CON GÀ THỊT Đánh giá chung Bảng Kết theo dõi tiêu định lượng Staphylococcus aureus Cty Cty A Cty B Cty C Cty D Cty E 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Đạt Đạt Đạt Đạt Đạt Mẫu GÀ CON GÀ THỊT Đánh giá chung 42 BẢNG MAC CRADY Số ống dương tính Chỉ số Số ống dương tính Chỉ số Số ống dương tính Chỉ số NC 1/10 1/100 MPN NC 1/10 1/100 MPN NC 1/10 1/100 MPN 0 0,0 0 0,9 0 2,5 0 0,3 1,4 4,0 0,3 2 2,0 6,5 1 0,6 1,5 4,5 0,6 1 2,0 1 7,5 0 0,4 2 3,0 11,5 1 0,7 2 2,0 3 16,5 1,1 2 3,0 9,5 1 0,7 2 3,5 15,5 1 1,1 2 4,0 2 20,0 1,1 3,0 3 30,0 1,5 2,5 3 25,0 1,6 4,0 3 45,0 3 110,0 3 140,0 43 3.1 Công thức môi trường dùng kiểm nghiệm vi sinh 3.1.1 Môi trường TSB (Tryptone Soya Broth) Pancreatic digest of casein 17 g Papaic digest of soyabean meal g Sodium chloride g Dipotassium hydrogen phosphate 2,5 g Dextrose 2,5 g pH = 7,3 ± 0,2 3.1.2 Môi trường BGBB % (Brilliant Green Bile Broth %) Peptic digest of animal tissue .10 g Lactose 10 g Oxgall 20 g Brilliant green .0,0133 g pH = 7,2 ± 0,2 3.1.3 Môi trường BP (Baird Parker Agar Base) Casein enzymic hydrolysate 10 g Beef extract g Yeast extract g Glycine 12 g Sodium pyruvate 10 g Lithium chloride g Agar 20 g pH = ± 0,2 Hấp tiệt trùng 121°C/ 15 phút, trì 48 – 50°C sau cho nước trứng vào, lắc  Môi trường nước trứng (Egg Yolk Tellurite Emulsion 100 ml) Egg yolk 30 ml Sterile saline 64 ml Sterile 3,5% potassium tellurite solution ml 44 3.1.4 Môi trường BHI (Brain Heart Infusion) Broth Calf brain infusion 200 g Beef heart infusion .250 g Proteose peptone 10 g Na H PO 12H O 2,5 g Dextrose g NaCl g Nước cất .1 lít pH = 7,4 ± 0,2 3.1.5 Môi trường Perfringens Agar Base (TSC – Tryptone sulfit cycloserin) Tryptose 15 g Papaic digest of soyabean meal g Beef extract g Yeast extract g Sodium metabisulphite g Ferric ammonium citrate g Agar 15 g pH = 7,6 ± 0,2 3.1.6 Môi trường EMB (Eosine Methylen Blue Agar) Peptic digest of animal tissue .10 g Lactose g K HPO g Succrose g Eosin Y 0,4 g Methylen blue .0,065g Agar 13,5g Nước cất .1 lít pH = 7,2 ± 0,2 45 3.1.7 Môi trường EC Broth (Enrichement coli) Casein enzymic hydrolysate 20 g Lactose g Bile salt mixture 1,5 g Dipotassium phosphate .4 g Monopotassium phosphate 1,5 g Sodium chloride g pH = 6,9 ± 0,2 3.1.8 Nước Peptone đệm Peptone 10 g NaCl g Na HPO 12H O g KH PO 1,5 g Nước cất .1 lít 3.1.9 Rappaport – Vassiliadis (Thành phần 1110 ml) NaCl g Papaic digest of sotenbean meal g KH PO 1,6 g Magnesium chloride solution .100 ml Malachite green Oxalate solution 10 ml 3.1.10 Môi trường BSA (Bismuth Sulphite Agar) Peptic digest of animal tissue .10 g Beef extract g Dextrose g Disodium phosphate .4 g Ferrouse sulphate 0,3 g Bismuth sulphite indicator g Brilliant green .0,025 g Agar 20 g 46 pH = 7,7 ± 0,2 Môi trường không hấp tiệt trùng, đun sơi đỗ đĩa 3.2 Các mơi trường sinh hóa 3.2.1 KIA (Kligler Iron Agar) Peptic digest of animal tissue .15 g Beef extract g Yeast extract g Proteose peptone g Lactose 10 g Dextrose g Ferrous sulphate 0,2 g Sodium chloride g Sodium thiosulphate .0,3 g Phenol red .0,024 g Agar 15 g pH = 7,4 ± 0,2 3.2.2 Simmons citrate agar Magnesium sulphate .0,2 g Ammonium dihydrogen phosphate g Dipotassium phosphate .1 g Sodium citrate .2 g Sodium chlorite g Brothymol blue .0,08 g Agar 15 g pH = 6,8 ± 0,2 3.2.3 Môi trường MR - VP Pepton g Glucose g K HPO g 47 Nước cất .1 lít pH = 6,9 ± 0,2 3.3 Thành phần thuốc thử 3.3.1 Dung dịch Kowacs D.dimetylaminobenzaldehyte .5 g Cồn ethanol 75 ml HCl đặc 25 ml Hòa D.dimetylaminobenzaldehyte vào cồn, cho từ từ HCl vào, giữ 4°C 3.3.2 Dung dịch methyl red Methyl red 0,1 g Ethanol 95 % 300 ml Nước cất .500 ml 3.3.3 Dung dịch α - Naphtol % cồn α - Naphtol g Cồn ethylic 100 ml 3.3.4 Dung dịch NaOH 40 % Potassium hydroxyt 40 g Nước cất .100 ml 48 ... ĐINH THỊ HOÀNG OANH Tên khóa luận: “Khảo sát số tiêu vi sinh thức ăn hỗn hợp cho gà” Đã hoàn thành khóa luận theo yêu cầu giáo viên hướng dẫn ý kiến nhận xét, đóng góp hội đồng chấm thi tốt nghiệp... 2.2 Giới thi u thức ăn hỗn hợp (TĂHH) Nguyên lý pha trộn TĂHH:  Các loại thức ăn đơn như: bắp, tấm, bột cá, khoai củ, bánh dầu, vỏ sò…khơng có loại tự chứa đầy đủ tất dưỡng chất cần thi t cho... Thầy Cơ, anh chị bạn nhiều sức khỏe, thành đạt hạnh phúc Tôi xin chân thành cảm ơn! Đinh Thị Hoàng Oanh iii TÓM TẮT Đề tài nghiên cứu: “Khảo sát số tiêu vi sinh thức ăn hỗn hợp cho gà” tiến hành