Đặc điểm hình thái cá bố mẹ và tỷ lệ giới tính con lai giữa cá cái rô phi vằn (oreochromis niloticus) dòng novit với cá đức rô phi xanh (oreochromis aureus) dòng israel và dòng philippine

Đặc điểm hình thái cá bố mẹ và tỷ lệ giới tính con lai giữa cá cái rô phi vằn (oreochromis niloticus) dòng novit với cá đức rô phi xanh (oreochromis aureus) dòng israel và dòng philippine

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI

-

HOÀNG NGUYỆT NGA

ðẶC ðIỂM HÌNH THÁI CÁ BỐ MẸ VÀ TỶ LỆ GIỚI TÍNH

CON LAI GIỮA CÁ CÁI RÔ PHI VẰN (Oreochromis niloticus) DÒNG NOVIT VỚI CÁ ðỰC RÔ PHI XANH (Oreochromis aureus)

DÒNG ISAREL VÀ DÒNG PHILIPPINE

LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP

Mã s ố : 60.62.70

Người hướng dẫn khoa học: TS NGUYỄN HỮU NINH

HÀ NỘI - 2010

LỜI CAM ðOAN

Tôi xin cam ñoan ñây là công trình nghiên cứu do chính tôi thực hiện, các kết quả và số liệu ñược trình bày trong luận văn hoàn toàn trung thực và chưa ñược ai công bố trong bất kỳ công trình nào khác

B ắc ninh, ngày 30 tháng 10 năm 2010

Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn ñến Ban giám ñốc, tập thể cán bộ công nhân viên Trung tâm Quốc gia giống thủy sản nước ngọt miền Bắc và Phòng Di truyền chọn giống Viện nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản I, nơi tôi tiến hành thực tập ñề tài tốt nghiệp ñã tạo ñiều kiện giúp ñỡ tôi trong quá trình thực hiện

ñề tài

Xin cám ơn các anh chị, bạn bè, người thân, ñồng nghiệp ñã giúp ñỡ, chia sẻ kinh nghiệm trong suốt 2 năm học qua

Tuy nhiên do trình ñộ còn hạn chế, khó khăn về thời gian và trang thiết

bị nên bài luận văn của tôi còn nhiều thiếu sót rất mong sự ñóng góp ý kiến của thầy cô và bạn bè ñồng nghiệp

Tôi xin chân thành c ảm ơn

Hoàng Nguy ệt Nga

2.1 Phân bố tự nhiên và sự di nhập cá Rô phi trên thế giới 4

2.7 Cơ Sở của việc hình thành giới tính ở con lai 12 2.8 Các giải pháp tạo quần ñàn cá Rô phi ñơn tính ñực 14 2.9 Thành tựu tạo cá Rô phi ñơn tính ñực bằng phương pháp lai khác loài 17

3.4 Phương pháp thu mẫu các gia ñình 23

3.7 Phương pháp thu thập và phân tích số liệu 24

4.3 Tỷ lệ giới tính của các công thức thí nghiệm 28

4.3.1 Tỷ lệ giới tính ở công thức 1 (♀ O niloticus NOVIT ×

4.3.2 Tỷ lệ giới tính ở công thức 2 (♀O niloticus NOVIT ×

4.4 Các yếu tố ảnh hưởng ñến hình thành giới tính của con lai 35 4.4.1 Ảnh hưởng của nhiệt ñộ lên tỷ lệ giới tính ở thế hệ con lai 36 4.4.2 Yếu tố di truyền ảnh hưởng ñến tỷ lệ ñực ở thế hệ con lai 39 4.5 Hình thái cá bố mẹ và tỷ lệ giới tính của ñàn con 41

DANH MỤC CÁC BẢNG

2.1 Phân biệt cá ñực, cá cái qua các ñặc ñiểm hình thái 7 2.2 Tỷ lệ ñực ở thế hệ con của một số công thức lai xa thí nghiệm 18 3.1 Số lượng cá và giai thí nghiệm lai ghép theo gia ñình 22

4.2 Tỷ lệ cá ñực ở thế hệ con trong các công thức lai thí nghiệm 28 4.3 Tỷ lệ % ñực ở thế hệ con của công thức 1 (♀ O niloticus

4.4 Tỷ lệ giới tính ñực thế hệ con ở công thức 2 (♀ O niloticus

4.5 Kết quả tỷ lệ giới tính của cá qua các ñợt sinh sản với mức tương

ứng nhiệt trung bình trong 10 ngày ñầu phát triển của thế hệ con lai 36 4.6 Tỷ lệ giới tính thế hệ con lai qua các lần sinh sản lặp lại ở công

DANH MỤC CÁC HÌNH

2.1 Hình thái ngoài của cá Rô phi vằn (O niloticus) và cá Rô phi

2.2 Tổng sản lượng ñánh bắt và nuôi cá Rô phi trên thế giới 10 2.3 Xuất phát tia vây lưng trước và sau so với cung nắp mang 21 2.4 Khoảng cách giữa gốc vây bụng và gốc vây ngực là gần 21 4.1 Biến ñộng nhiệt ñộ nước và không khí thời gian thí nghiệm 26 4.2 Biến ñộng nhiệt ñộ nước qua các tháng thí nghiệm 27 4.3 Phân bố tỷ lệ (%) cá ñực ở các gia ñình công thức 1

(♀ O niloticus NOVIT × ♂ O aureus Israel) 31 4.4 Phân bố tỷ lệ ñực ở các gia ñình công thức 2 (♀ O niloticus

4.5 Mối quan hệ tương quan giữa tổng nhiệt ñộ 10 ngày ñầu phát

triển với tỷ lệ ñực trung bình các ñợt công thức 1 (♀ O

4.6 Mối quan hệ tương quan giữa tổng nhiệt ñộ 10 ngày ñầu phát

triển với tỷ lệ ñặc trung trung bình các ñợt ở công thức 2

(♀ O niloticus-NOVIT × ♂ O aureus-Philippine) 38 4.7 Tỷ lệ cá ñực (%) qua các lần sinh sản lặp ở 2 công thức thí nghiệm 40 4.8 Hình thái quan sát của cá bố mẹ và tỷ lệ ñực trung bình ở 2 công

I MỞ ðẦU

Cá Rô phi là ñối tượng ñược nuôi ở rất nhiều nước trên thế giới và là mặt hàng thực phẩm có giá trị thương mại cao trên toàn cầu Những năm gần ñây, phong trào nuôi cá Rô phi ñược phát triển mạnh ở Việt Nam Diện tích và sản lượng nuôi không ngừng tăng lên năm 2004 sản lượng cá Rô phi ở Việt Nam ñạt khoảng 20 - 30 nghìn tấn (Bộ thủy sản, 2006) ñến năm 2009 sản lượng nuôi cá Rô phi ñã tăng lên ñạt hơn 30.000 tấn và sẽ tiếp tục tăng lên 31.000 triệu tấn vào năm 2010 (Bộ thủy sản, 2010) ñóng góp một phần không nhỏ vào việc cung cấp nguồn thực phẩm trong nước

Cá Rô phi là ñối tượng cá thành thục sớm, có khả năng sinh sản tự nhiên gần như quanh năm trong ñiều kiện nhiệt ñộ phù hợp nên mật ñộ cá thả trong

ao khó có thể kiểm soát ñược, từ ñó không thể ñáp ứng, cân ñối ñược lượng thức ăn cũng như nhu cầu ăn của cá Vì thế cá chậm lớn, cỡ cá thu hoạch

không ñồng ñều Mặt khác, cá Rô phi thuộc giống Oreochromis lại có tập tính

sau khi ñẻ xong cá mẹ ấp trứng trong miệng và nuôi bảo vệ con trong thời gian ñầu ñến khi con có khả năng kiếm ăn Trong thời gian này cá mẹ hầu như ngừng ăn nên cá cái thường chậm lớn hơn so với cá ñực trong cùng thời gian

và ñiều kiện nuôi (Phạm Anh Tuấn và ctv., 1998)

ðể nâng cao năng suất và hiệu quả nuôi cá Rô phi thì việc chủ ñộng tạo ñàn cá Rô phi ñơn tính ñực ñược nhiều nhà nghiên cứu quan tâm Hiện nay, ñã

có nhiều phương pháp khác nhau ñể tạo quần ñàn ñơn tính ñực ñược các nước trên thế giới áp dụng như chọn bằng mắt thường, chuyển giới tính bằng hormone, lai khác loài và tạo cá siêu ñực

Phương pháp chọn giới tính bằng mắt thường tốn nhiều công và chi phí,

cá nuôi ñến khi cá ñạt kích thước có thể phân biệt ñược dưa trên ñặc ñiểm sinh dục phụ Công nghệ tạo cá siêu ñực ñã ñược nghiên cứu thành công ở quy mô

thí nghiệm, tuy nhiên công nghệ thiếu tính ổn ñịnh và còn nhiều hạn chế khi ứng dụng sản xuất với số lượng lớn Phương pháp tạo quần ñàn cá Rô phi ñơn tính ñực ñang ñược áp dụng rộng rãi hiện nay là xử lý cá bằng hormon chuyển ñổi giới tính 17α_Methyltestosteron do mức ñầu tư sản xuất không cao và phương pháp áp dụng ñơn giản Tuy nhiên, phương pháp chuyển ñổi giới tính bằng hormone có nguy cơ tiềm ẩn ảnh hưởng không tốt ñến môi trường và sức khỏe người tiêu dùng, khó ñáp ứng ñược yêu cầu ngày càng cao về an toàn vệ sinh thực phẩm Giải pháp lai xa tạo quần ñàn cá Rô phi ñơn tính ñực không những

có khả năng khắc phục ñược những nguy cơ tiềm ẩn ảnh hưởng ñến môi trường

và sức khỏe người tiêu dùng của phương pháp xử lý bằng hormone mà còn giảm bớt ñược chi phí và thời gian cho sản xuất giống (Bạch Thị Tuyết, 1999) Hơn nữa, bằng phương pháp lai xa thế hệ con lai sẽ ñược thừa hưởng những ưu ñiểm của cá bố mẹ như tốc ñộ sinh trưởng, khả năng sinh sản, sức chống chịu với ñiều kiện môi trường và ñặc biệt con lai sẽ tránh ñược hiện tượng lai cận huyết (Phạm Anh Tuân và ctv, 1997)

Ở Việt Nam, có nhiều nghiên cứu về giải pháp lai xa tạo quần ñàn cá Rô

phi ñơn tính ñực Năm 1999, Bạch Thị Tuyết tiến hành cho lai giữa cá cái O

niloticus với cá ñực O aureus dòng Thái Lan thu ñược kết quả không có gia

ñình nào ñạt ñược 100% cá ñực ở thế hệ con Kết quả nghiên cứu của Ngô Thị

Thanh Hương (2005) khi cho lai giữa cá cái O niloticus với cá ñực O aureus

ñã thu ñược nhiều gia ñình ñạt tỷ lệ giới tính ñực thế hệ con lai là 100% nhưng

tỷ lệ giới tính ñực trung bình của các gia ñình chỉ ñạt 79,68%

ðặc biệt kết quả nghiên cứu của Phạm Anh Tuấn và ctv (2008) tiến hành

lai cá Rô phi vằn O niloticus dòng Israel với cá Rô phi xanh O aureus dòng

Israel cho kết quả về tỷ lệ cá ñực ở con lai là 80 - 95%; nhưng nếu chọn cá bố

mẹ với các chỉ tiêu về hình thái thì tỷ lệ giới tính ñực ở thế hệ con rất cao, ñạt 95,87 - 98,25% Kết hợp kết quả nghiên cứu này và sử dụng các ưu thế về tốc

ñộ tăng trưởng và khả năng chịu lạnh cao của dòng cá NOVIT thế hệ chọn giống thứ 8 Nhằm mục ñích tạo quần ñàn cá Rô phi ñơn tính ñực bằng phương pháp lai xa, tận dụng nguồn vật chất di truyền sẵn có, góp phần nghiên cứu giải pháp tạo quần ñàn cá Rô phi ñơn tính ñực nên cần tôi thực hiện nghiên cứu:

“ðặc ñiểm hình thái cá bố mẹ và tỷ lệ giới tính con lai giữa cá cái Rô phi

vằn (Oreochromis niloticus) dòng NOVIT với cá ñực Rô phi xanh (Oreochromis aureus) dòng Isarel và dòng Philippine”

- Mục tiêu ñề tài

Tìm hiểu mối liên hệ giữa ñặc ñiểm hình thái cá bố mẹ và tỷ lệ giới tính ở

con lai giữa cá cái Rô phi vằn (Oreochromis niloticus) dòng NOVIT với cá

ñực Rô phi xanh (Oreochromis aureus) dòng Isarel và dòng Philippine

- Nội dung nghiên cứu

+ Xác ñịnh tỷ lệ ñực trong quần ñàn con lai giữa cá cái Rô phi vằn dòng NOVIT với cá ñực rô phi xanh dòng Isarel

+ Xác ñịnh tỷ lệ ñực trong quần ñàn con lai giữa cá cái Rô phi vằn dòng NOVIT với cá ñực rô phi xanh dòng Philippine

II TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Phân bố tự nhiên và sự di nhập cá Rô phi trên thế giới

Cá Rô phi thuộc bộ cá vược Perciformes, họ Cichlidae, là loài cá ưa

nhiệt ñộ cao có nguồn gốc từ Châu Phi Có khoảng 80 loài Rô phi ñã ñược

phân loại thuộc 3 giống chính: giống Tilapia ñẻ trứng dính và có vùng phân bố rất rộng ở vùng Tây và Trung Phi; ngược lại, giống Sarotherodon làm tổ ñẻ

trứng và cá bố hoặc cá mẹ ấp trứng trong miệng (Trewavas, 1983)

Trong tự nhên, cá Rô phi sống trong các sông hồ, cửa sông, ñầm hồ nước ngọt, lợ, mặn và ñôi khi cả ở những vùng nước phèn (Philipart và Ruwet, 1982) Trong 3 giống cá Rô phi kể trên có khoảng 8 - 9 loài có giá trị kinh tế

trong nuôi trồng và sản xuất thuỷ sản, trong ñó cá Rô phi vằn O niloticus, cá

Rô phi xanh O aureus và cá Rô phi hồng Oreochromis sp ñược coi là quan

trọng nhất hiện nay, ñang ñược nuôi phổ biến ở hầu hết các nước nhiệt ñới và cận nhiệt ñới

Ngày nay, do nhiều mục ñích sử dụng mà cá Rô phi ñược di nhập ñến các vùng nhiệt ñới, cận nhiệt ñới và các vùng ôn ñới trên thế giới ðặc biệt cá Rô phi

có nhiều ñặc tính vượt trội so với một số loài cá nước ngọt khác như khả năng lớn nhanh, ngưỡng chịu ñựng rộng ñối với các yếu tố môi trường (nhiệt ñộ, ñộ mặn, nồng ñộ ôxy hoà tan,…), sức ñề kháng với stress và bệnh tốt, thời gian thành thục sớm và sinh sản tốt nên trở thành ñối tượng nuôi lí tưởng của nhiều nước trên thế giới ñặc biệt là các nước ñang phát triển thuộc châu Á

2.2 ðặc ñiểm sinh học

2.2.1 ðặc ñiểm hình thái

Cá Rô phi vằn Oreochromis niloticus có ñặc ñiểm toàn thân phủ vảy, ở

phần lưng có màu xám nhạt, phần bụng có màu trắng ngà hoặc xanh nhạt Trên

thân có 7 - 9 vạch ñậm chạy từ lưng xuống bụng Vây ñuôi có sọc ñen ñậm song song từ phía trên xuống phía dưới và phân bố khắp vây ñuôi Vây lưng có những sọc trắng chạy song song trên nền xám ñen Viền vây lưng và vây ñuôi

có viền hồng nhạt

Loài cá Rô phi xanh Oreochromis aureus thân và ñầu phủ vảy lược,

ñường bên chia hai phần: phần trước trên trục thân có 23 - 25 vẩy; phần sau dưới trục thân có 13 - 14 vẩy, có 5 vẩy gối nhau và cách ñường bên trước hai hàng vẩy Thân phủ vẩy to, phần ngực bụng ñến hậu môn phủ vẩy nhỏ Vẩy trước vây lưng kéo dài ñến ngang viền trước mắt, má có 5 hàng vẩy Mật ñộ ở gốc vây ñuôi dày Gốc vây lưng và vây hậu môn có hàng vẩy bẹ Thân màu xám xanh, bụng xám nhạt, hai bên thân có 7 - 8 vân, các vân này kéo dài ñến phía bụng Các vân ñen ở vây ñuôi thưa và không chiếm chiều cao, còn các vân ở vây lưng chỉ có nửa sau của vây Vây lưng và vây ñuôi ở cá ñực có nhiều mầu ñỏ, thân màu xanh (Nguyễn Văn Hảo, 1993)

Hình 2.1 Hình thái ngoài của cá Rô phi vằn (O niloticus) và cá Rô phi

xanh (O aureus)

2.2.2 ðặc ñiểm sinh trưởng

ðặc ñiểm sinh trưởng của cá Rô phi mang tính chất ñặc trưng của loài,

các loài khác nhau có tốc ñộ sinh trưởng khác nhau Loài O niloticus có tốc ñộ sinh trưởng và phát triển nhanh vượt trội so với các loài khác sau ñó là ñến O

A

galileaus và O aureus (Lowe và McConnell, 1982) Tốc ựộ sinh trưởng còn

phụ thuộc nhiều vào các yếu tố như nhiệt ựộ, môi trường ao nuôi, chế ựộ dinh dưỡng và phương pháp chăm sóc quản lý

Trong cùng một loài các dòng cá Rô phi khác nhau cũng có tốc ựộ sinh

trưởng khác nhau Khi nghiên cứu về sự sinh trưởng của cá O niloticus dòng GIFT, dòng Ivory Coast và dòng Ghana trong cùng ựiều kiện nuôi cho thấy dòng GIFT có tốc ựộ tăng trưởng nhanh nhất, kém nhất là dòng Ghana (Khater

và Smistherman, 1988)

Pillin (1988) cho rằng con lai giữa O niloticus với O aureus có ưu thế

về sinh trưởng tốt hơn so với bố mẹ của chúng Lê Ngọc Khánh (2008), cho

rằng tốc ựộ tăng trưởng của con lai ♂ O aureus ừ ♀ O niloticus dòng Irsael >

♂ O aureus Trung Quốc ừ ♀ O niloticus đài Loan > ♂ O aureus NOVIT 4

ừ ♀ O niloticus NOVIT 4

2.2.3 đặc ựiểm sinh sản

Cá Rô phi thường sinh sản theo cặp, con sinh ra ựược bố mẹ chăm sóc

và bảo vệ (Barlow, 1991) Dựa vào ựặc ựiểm sinh sản và hình thái học người ta chia cá Rô phi thành 3 giống (Trewavas, 1983)

Ớ Giống Tilapia: Cá ựẻ cần giá thể cho trứng bám

Ớ Giống Sarotherodon: Cá bố hoặc cá mẹ ấp trứng trong miệng

Ớ Giống Oreochromis: Cá mẹ ấp trứng trong miệng

Cá Rô phi có khả năng phát dục sớm, tuỳ thuộc vào từng giai ựoạn, từng loài, ựiều kiện dinh dưỡng khác nhau mà tuổi và cỡ cá thành thục khác nhau Trong tự nhiên khi cá ựược 4 - 5 tháng tuổi ựã có khả năng sinh sản và chúng

có thể sinh sản tới 12 lần trong 1 năm (Macintosh và Little, 1995) Ở Việt Nam do ựiều kiện nhiệt ựới gió mùa nên cá sinh sản gần như quanh năm ở khu vực phắa Nam và miền Bắc có mùa ựông lạnh nên thời ựiểm ựầu xuân và cuối thu thường xảy ra hiện tượng cá ngừng ựẻ hoặc vẫn ựẻ nhưng trứng ấp kéo dài

dẫn ñến khi nở thành cá bột hay bị dị hình Cá Rô phi ñen O mossambicus tuổi

thành thục bắt ñầu từ 3 - 4 tháng tuổi, cỡ cá thành thục 40 - 50g/con; cá Rô phi

vằn O niloticus tuổi thành thục từ 5 - 6 tháng tuổi, cỡ thành thục 100 -

150g/con Chu kỳ sinh sản của cá Rô phi thường kéo dài 3 - 4 tuần (Macintosh

Lỗ sinh dục Hai lỗ: lỗ liệu sinh dục và

lỗ hậu môn

Ba lỗ: lỗ liệu, lỗ sinh dục, lỗ hậu môn Hình dạng huyệt dạng lồi, hình nón và nhọn ðầu thoát lỗ liệu sinh dục không nhọn như cá ñực Dạng tròn hơi lồi và

Dựa vào phương pháp giải phẫu tuyến sinh dục: Khi cá ñạt kích cỡ 3 - 5g mổ lấy tuyến sinh dục sau ñó nhuộm bằng dung dịch bắt màu Aceto - Carmine, dùng kính hiển vi quan sát thấy có những chấm nhỏ li ti ñấy là tế bào sinh dục ñực, nếu là những vòng tròn nhỏ xếp sít nhau từng khối thì là cá cái (Guerrero và Shelton, 1974)

2.2.4 Nhi ệt ñộ

Nhiệt ñộ là một trong những yếu tố môi trường quan trọng nhất ảnh hưởng ñến quá trình sinh trưởng và phát triển của cá Rô phi Có nguồn gốc từ

châu Phi nên khả năng chịu lạnh của cá Rô phi kém hơn so với khả năng thích nghi ở nhiệt ñộ cao Theo Chervinski (1982), cá Rô phi có thể chịu ñựng ñược

ở nhiệt ñộ 10 - 40oC và khoảng nhiệt ñộ thích hợp cho sinh trưởng, phát triển

là 28 - 35oC Khi nhiệt ñộ xuống thấp hơn 20oC kéo dài thì cá giảm ăn, ức chế

sự tăng trưởng và tăng rủi ro về bệnh Khi nhiệt ñộ xuống thấp dưới 14oC kéo dài làm cho cá Rô phi ñực mất khả năng tiết sẹ (Lê Quang Long, 1961)

Quá trình sinh sản của cá Rô phi xảy ra khi nhiệt ñộ nước trên 22oC, nhiệt ñộ thích hợp cho cá Rô phi sinh sản 26 - 29oC Nhiệt ñộ nước xuống dưới

20oC tuyến sinh dục ngừng phát triển (Chervinski, 1982) Nhiệt ñộ thích hợp cho ấp trứng cá Rô phi là trên 20oC (Pillay, 1990) và cá bột phát triển bình thường ở khoảng nhiệt 20 - 30oC nhưng nếu nhiệt ñộ xuống dưới 20oC trứng sẽ

bị hỏng Khi nghiên cứu thời gian ấp trứng trong miệng của cá Rô phi mẹ ở các mức nhiệt ñộ khác nhau thì thời gian nở cũng khác nhau, theo Macintosh

và Little (1995) cá Rô phi ấp trứng trong miệng kéo dài khoảng 10 - 15 ngày ở nhiệt ñộ 20oC, 4 - 6 ngày với nhiệt ñộ 28oC và 3 - 5 ngày khi nhiệt ñộ ở mức

35oC Trong mỗi giai ñoạn phát triển khác nhau thì ngưỡng nhiệt ñộ cũng khác nhau, giai ñoạn ñầu cao hơn các giai ñoạn phát triển sau Cá bột nhạy cảm nhất

với nhiệt ñộ ở giai ñoạn sau khi nở Tỷ lệ trứng nở của cá Rô phi O niloticus

khoảng 80% khi nhiệt ñộ trong quá trình ấp ñược ñảm bảo ổn ñịnh 24 - 32oC (Macitosh và Little, 1995)

Theo Capili (1995) giới hạn nhiệt ñộ cũng thay ñổi tuỳ theo loài, giới

hạn nhiệt ñộ thấp của O aureus là 8 - 8,5oC, cao là 41oC; O niloticus thấp là

11 - 13oC, cao là 42 oC Trong cùng một loài thì ngưỡng chịu nhiệt của các

dòng cũng có sự sai khác về khả năng chịu lạnh, loài O nilotius dòng GIFT là

10oC, dòng Ivory Coast là 12,2oC và dòng Ghana là 14,4oC (Khater và Smistherman, 1988) Khả năng thích ứng nhiệt của cá Rô phi phụ thuộc vào kích cỡ cá, sự thuần hoá và ñộ mặn của môi trường nước Cá bột, cá hương

chịu lạnh kém hơn cá trưởng thành và ở môi trường nước lợ cá chịu ñược mức nhiệt ñộ thấp tốt hơn trong môi trường nước ngọt do ở môi trường nước lợ khống chế ñược sự phát triển và gây bệnh của nấm lên cá Rô phi (Lê Quang Long, 1961)

2.2.5 Các y ếu tố môi trường khác

Cá Rô phi là loài có thể sống trong các môi trường khác nhau, từ môi trường nước ngọt ñến môi trường nước mặn Chúng có thể sống tốt trong ñiều kiện môi trường nước có nhiệt ñộ cao, hàm lượng ôxy hòa tan thấp, hàm lượng

NH3 cao…

 ðộ mặn

Cá Rô phi là loài rộng muối, có khả năng sống ñược trong môi trường nước nước ngọt, nước lợ và nước mặn có ñộ muối từ 0 - 40‰ Khả năng thích ứng với ñộ mặn của mỗi loài ñều khác nhau Loài O niloticus có ngưỡng muối

thấp nhất và loài có ngưỡng muối cao nhất là T zillii, O aureus (Philipart và

 Hàm lượng ôxy hòa tan

Cá Rô phi có khả năng sống trong môi trường nước có hàm lượng ôxy hoà tan thấp như ao, ñầm có màu nước ñậm, mật ñộ tảo dày, có hàm lượng chất hữu cơ cao Trong môi trường nước có hàm lượng ôxy hoà tan thấp dưới 1mg/l, cá Rô phi vẫn có thể sống ñược nhưng không thể kéo dài khi hàm lượng ôxy dưới 0,7mg/l (Balarin và Heller, 1982) Hàm lượng ôxy thường giảm ở buổi sáng sớm ảnh hưởng ñến sự phát triển của tuyến sinh dục và giảm tần số

ựẻ của cá, hoạt ựộng sinh sản xảy ra mạnh hơn khi hàm lượng ôxy cao vào buổi chiều (Little, 1990)

2.3 Tình hình nuôi cá Rô phi trên thế giới

Hiện nay cá Rô phi là ựối tượng ựược nuôi phổ biến ở nhiều nước trên thế giới, chiếm vị trắ quan trọng chỉ ựứng sau nhóm cá chép trong các thuỷ vực nước ngọt Nhờ có những ựặc tắnh tốt như phổ thức ăn ựa dạng, ắt bệnh tật, chất lượng thịt thơm ngon, ựầu tư chi phắ ựể hình thành lên sản phẩm thấp,Ầ

vì thế mà loài này ựược nuôi phổ biến, diện tắch và sản lượng cũng như chất lượng sản phẩm không ngừng tăng lên, ựặc biệt trong những năm gần ựây Trong tương lai, cá Rô phi sẽ là sản phẩm thay thế cho các loại thịt cá trắng ựang ngày càng cạn kiệt (WFC 2003)

(Ngu ồn: FAO,2008)

Hình 2.2.Tổng sản lượng ựánh bắt và nuôi cá Rô phi trên thế giới

Theo báo cáo năm 2007, mười nước ựứng ựầu về sản xuất cá Rô phi ựó là: Trung Quốc, Colombia, Honduras, Malaysia, đài Loan, Brazil, Thái lan, Philippines, Indonesia, Egypt Tổng sản lượng cá Rô phi của các nước này ựạt 2.339.440 tấn chiếm 94% tổng sản lượng cá Rô phi trên toàn thế giới (Trong

và Son, 2007)

Mặc dù cá Rô phi có nguồn gốc không phải từ châu Á nhưng ựây lại là khu vực sản xuất cá Rô phi quan trọng nhất thế giới Sản lượng cá Rô phi ở châu Á trong thời gian qua ựược coi là nhanh nhất thế giới Các nước châu Á ựại diện có nghề nuôi cá Rô phi phát triển mạnh ựó là Philippine, Indonesia, ThaiLand, Trung Quốc và đài Loan Tổng sản lượng cả năm nước này chiếm 94% tổng sản lượng cá Rô phi của châu Á Trong ựó Trung Quốc là quốc gia sản xuất cá Rô phi lớn nhất Tắnh ựến năm 2009, sản lượng cá Rô phi của nước này tương ựối ổn ựịnh ước ựạt 1,15 triệu tấn và dự kiến vẫn tiếp tục tăng vào các năm tới đối tượng chiếm ưu thế và ựược nuôi phổ biến là giống cá Rô phi

vằn Oreochromis, với tổng sản lượng là 1.001.302 tấn năm 2002, chiếm 84%

của tổng sản lượng cá Rô phi ở lục ựịa (FAO, 2004) Cá Rô phi ựược nuôi chủ yếu ở trong môi trường nước ngọt

2.4 Tình hình nuôi cá Rô phi tại Việt Nam

Nghề nuôi cá Rô phi ở nước ta có lịch sử hơn 50 năm, khởi ựầu từ khi

nhập nội cá Rô phi ựen (O mossambicus) vào nước ta ựầu những năm 1950

Những thập niên 50 và 60 của thế kỷ trước, cá Rô phi ựược nuôi chủ yếu ở hình thức quảng canh và quảng canh cải tiến, nuôi chung cá ựực và cá cái Phong trào nuôi cá Rô phi ựặc biệt phát triển từ những năm ựầu của thập kỷ 90 sau khi chúng ta nhập lại những dòng cá Rô phi vằn có chất lượng tốt, ựặc biệt

là cá chọn giống dòng Thái Lan và dòng GIFT từ Phillippine Cá ựược nuôi ở nhiều ựịa phương với các hình thức khác nhau: nuôi ựơn, nuôi ghép, với mức

ựộ canh tác từ quảng canh, bán thâm canh ựến thâm canh

Theo Cục thống kê năm 2005, diện tắch nuôi cá Rô phi của cả nước là 22.340 ha chiếm 3% tổng diện tắch nuôi trồng thủy sản, trong ựó nuôi nước lợ, mặn là 2.068 ha và nuôi nước ngọt là 20.272 ha Tổng sản lượng cá Rô phi ước tắnh ựạt 54.486,8 tấn; chiếm 9,08% tổng sản lượng cá nuôi Hai khu vực đồng Bằng Sông Cửu Long và đồng Bằng Sông Hồng là hai vùng nuôi chủ yếu, lần

lượt chiếm 58,4% và 17,6% tổng sản lượng cá Rô phi của cả nước còn lại là các tỉnh miền núi phía Bắc chiếm 5,3%, miền Trung chiếm 9,1%, Tây Nguyên chiếm 4,1% Sản lượng cá Rô phi trong cả nước bao gồm: nuôi trong ao và ñầm 37.931,8 tấn, nuôi lồng 10.182 tấn (Phạm Anh Tuấn, 2006)

Nhìn chung cá Rô phi là loài cá nuôi phù hợp với ñiều kiện của nước ta

về tự nhiên và kinh tế, nó ñang ngày càng trở thành ñối tượng nuôi chiếm tỉ lệ lớn trong cơ cấu loài nuôi Tuy nhiên, dù cá Rô phi ñược nuôi khá phổ biến ở nhiều ñịa phương, nhưng vùng nuôi phần lớn còn phân tán, manh mún, quy mô nhỏ lẻ, chưa hình thành vùng sản xuất hàng hoá tập trung quy mô lớn vì thế chủ yếu là tiêu thụ nội ñịa và tại chỗ Theo Cục thống kê năm 2004, trong số 64 tỉnh thành trong cả nước chỉ có 6 tỉnh tham gia nuôi nhằm mục ñích xuất khẩu

cá Rô phi với tỷ lệ khiêm tốn 5 - 6% sản lượng cá Rô phi nuôi Năm 2006, sản lượng cá Rô phi xuất khẩu chỉ ñạt 869 tấn (Phạm Anh Tuấn, 2007)

2.7 Cơ Sở của việc hình thành giới tính ở con lai

Cơ chế của việc hình thành giới tính ở con lai ñã ñược nhiều nhà khoa học trên thế giới quan tâm và nghiên cứu Tuy nhiên cơ chế xác ñịnh giới tính

ở cá chưa thật sự hoàn chỉnh Sự tiến hóa có thể ñi theo một trong hai hướng:

Dị giao tử ñực (XX-XY) hoặc dị giao tử cái (WZ-ZZ) Ở những kiểu gen XY nhân tố di truyền tính ñực mạnh hơn, ngược lại ở kiểu gen WZ thì tính cái lại ñược thể hiện mạnh hơn Tuy nhiên có một số loài cá hoàn toàn không có nhiễm sắc thể (NST) sinh dục, giới tính của chúng ñược xác ñịnh mà những nhân tố di truyền ñực và cái nằm trên NST thường

Các gen chính có thể bị kìm hãm bởi những gen ñối lập nằm trong các autoxom Hiệu quả ñó dẫn ñến sự tạo thành “ñổi giới”, có giới tính genotype hoạt ñộng chức năng không phù hợp với giới tính genotype (cấu trúc NST sinh dục) (Phan Cự Nhân và ctv, 1978)

Theo Kossurig (1964) ñược trích dẫn bởi Phan Cự Nhân và ctv (1987) giả thuyết rằng sự xác ñịnh giới tính cấp 1 (giai ñoạn hình thành hợp tử) ñược

thực hiện nhờ sự cân bằng của những nhân tố tính cái F và ñực M nằm trong các NTS sinh dục cũng như NST thường, bình thường ở trạng thái cân bằng triệt tiêu lẫn nhau, còn các nhân tố giới tính không cân bằng nằm trong các dị NST giới tính Nhưng trong một số trường hợp các NST thường ñược tích lũy (ñôi khi bằng cách trao ñổi chéo) và khi vắng mặt sự cân bằng giữa F và M thì các tác dụng của chúng lấn át những tác ñộng của gen nằm trên NST sinh dục Giới tính của những cá thể “ñổi giới” có thể ñối lập với giới tính do NST quy ñịnh Khi vắng mặt hoàn toàn NST sinh dục, giới tính ñược xác ñịnh do mối cân bằng của các nhân tố sinh dục của toàn bộ karyotype

Qua các thực nghiệm về chuyển ñổi giới tính của cá (Vanyakina, 1969; Yamamoto, 1969; Hunter và Donaldson, 1983; Pandian và Sheele, 1995 do Nguyễn Tường Anh và ctv, 1999 trích dẫn) có thể thấy mô hình về sự kiểm soát giới tính ở cá có nhiều nét tương ñồng với mô hình này ở ñộng vật có vú

ðịnh ñoạt giới tính Biệt hóa tuyến sinh dục

Ở cá rõ ràng bằng những hormone sinh dục (Androgen hoặc Estrogen) người ta có thể chuyển ñổi giới tính, vốn ñã ñược xác lập bởi các yếu tố di

truyền và nội tiết bằng một giới tắnh ựối lập, nếu tác ựộng vào thời ựiểm tuyến sinh dục chưa biệt hóa với nồng ựộ và thời gian thắch hợp, chẳng hạn các androgen có thể ựực hóa và các estrogen có thể cái hóa bất kể cá mang bộ NST giới tắnh nào Nhìn chung thì quá trình biệt hóa giới tắnh ở cá xương là ựa dạng

và nhạy cảm (Francis, 1992 do Nguyễn Tường Anh và ctv, 1999 trắch dẫn)

2.8 Các giải pháp tạo quần ựàn cá Rô phi ựơn tắnh ựực

Dựa trên cơ sở của việc hình thành giới tắnh của cá Rô phi mà các phương pháp tạo ựàn cá Rô phi ựơn tắnh ựược ựưa ra và ứng dụng một cách hiệu quả Hiện nay có nhiều biện pháp ựược sử dụng ựể tạo quần ựàn cá Rô phi ựực như:

- Chọn lọc cá ựực dựa vào hình thái ngoài: Khi cá ựạt cỡ 7 - 10 cm, khối

lượng ≥ 30g (Mc Andrew, 1993) thì tiến hành lựa chọn dựa vào sự khác biệt về hình thái giữa con ựực và con cái ựể tách riêng Phương pháp này tuy ựơn giản nhưng cần nhiều công lao ựộng có trình ựộ và nhiều kinh nghiệm, tốn nhiều thời gian, ựộ chắnh xác không cao (ựộ chắnh xác chỉ ựạt 80%) (Hickling, 1963)

- Phương pháp chuyển ựổi giới tắnh cá Rô phi toàn ựực bằng việc xử lắ

tr ực tiếp bằng các loại hormone: MT (17_Methyltestosteron) và ET (17α_

Ethynyl Testosteron) Xử lý bằng hai cách: Phương pháp ngâm trực tiếp cá rô phi trong dung dịch hormone, hoặc phối trộn hormone vào thức ăn của cá cho

cá ăn trong 21 ngày

Hiện nay, phương pháp này ựã và ựang ựược nhiều nước trên thế giới như: Thái Lan, Philippine, đài Loan, Brazil và Việt Nam ứng dụng cho kết quả chuyển ựổi giới tắnh cao và ổn ựịnh Tuy nhiên, với phương pháp này gặp một

số khó khăn ựối với việc sử dụng ựó là giá thành sản phẩm con giống cao và thường có nguy cơ ảnh hưởng không tốt ựến môi trường cũng như sức khoẻ con người (Guerrero, 1988; Mair và Little, 1991)

- Tạo quần ựàn ựơn tắnh ựực bằng phương pháp lai hai loài cùng thuộc

gi ống Oreochromis: Phương pháp này một số nước như Israel, đài Loan,

Trung Quốc ựã và ựang ứng dụng Tuy nhiên tỷ lệ % cá ựực thế hệ con lai F1 của một số công thức lai không ổn ựịnh, ngay cả cùng công thức lai tỷ lệ cá ựực ở con lai thay ựổi theo nguồn gốc ựịa lý của cá bố mẹ Việc lai khác loài yêu cầu công tác lưu giữ ựược dòng cá bố mẹ thuần một cách nghiêm ngặt

- Tạo cá ựơn tắnh ựực bằng cách sử dụng cá siêu ựực (YY): Cho sinh sản

với cá cái thường cho phép tạo ra thế hệ con có tỷ lệ ựực gần 100% Thế hệ con XY gọi là Rô phi ựực về mặt di truyền ựược sản xuất và ựưa ra ngoài thị trường ựã cung cấp một lượng cá Rô phi ựực lớn trong cùng một thời gian và

nó giải quyết ựược vấn ựề sinh sản không kiểm soát ựược ở cá Rô phi (Mair và ctv, 1995)

Các công trình nghiên cứu tạo quần ựàn ựơn tắnh ựực bằng kỹ thuật siêu ựực ở cá Rô phi O niloticus ựược tiến hành trong 10 năm trở lại ựây Cá siêu ựực (YY) O niloticus ựược tạo trên dòng Egypt-AIT (Tuan, 1997) khi sinh sản với cá cái cùng dòng cho thế hệ con có tỷ lệ ựực từ 74 - 100% (trung bình 96,9%) và thể hiện các mặt như sinh trưởng tốt khi ựưa nuôi ở các ựiều kiện nuôi khác nhau

Ở Thái Lan, cá siêu ựực phát triển thành công trên cá O niloticus dòng Egypt-AIT và trên con lai giữa dòng Egypt-Swansea với dòng Egypt-AIT Tuy nhiên tỷ lệ giới tắnh thế hệ con lai giữa hai dòng này không ổn ựịnh (Tuan và ctv, 1997)

Hướng nghiên cứu này cũng ựược áp dụng ựối với cá Rô phi xanh O

aureus , bằng chuyển giới tắnh ựực của O aureus (gọi là cá thể mới ZZ) cùng

với dạng ựực ZZ bình thường Theo hướng này, cá Rô phi ựơn tắnh ựực ở thế

hệ con ựạt tỷ lệ cao và ựã ựưa vào sản xuất ựại trà cung cấp nguồn giống cho thị trường

Tuy nhiên, theo hướng sử dụng công nghệ này tỷ lệ giới tắnh ở thế hệ

con của cá siêu ñực ở một số dòng cá không thật ổn ñịnh và thời gian ñể tạo ra con siêu ñực (YY) dài mất 3-4 năm và phải áp dụng các biện pháp kỹ thuật phức tạp

- Phương pháp tăng nhiệt trong giai ñoạn ương ñể thu ñược nhiều cá ñực:

Người ta ương những cá Rô phi có kiểu nhiễm sắc thể XX từ ngày thứ 13 sau khi thụ tinh (100% cá có bộ nhiễm sắc thể giới tính là XX, về lí thuyết sẽ thành 100% cá cái), trong nhiệt ñộ nước là 36oC ít nhất 10 ngày (ñến ngày thứ 23 sau khi thụ tính cá ñược ương trong nhiệt ñộ bình thường (27oC), sau 2-3 tháng tuổi có từ 33 - 82% là cá ñực

Trên cá Rô phi xanh, nghiên cứu cũng chứng minh ñược trong thời kỳ ương nhiệt ñộ nước cao thì cũng tăng tỷ lệ ñực một cách ñáng kể Nếu cá 9 ngày tuổi sau khi nở ñược ương 25 ngày trong nhiệt ñộ nước 34oC thì thu ñược 97,8% cá ñực (Nguyễn Tường Anh, 2005)

Theo Tessema và ctv (2006) tỷ lệ giới tính ñực cũng chịu sự ảnh hưởng của nhiệt ñộ Khi cho ương thử nghiệm ở ba mức nhiệt (18oC, 36oC, 38oC) cho

thấy tỷ lệ ñực cá Rô phi O niloticus dòng Lake Manzala (Egypt) tăng từ 66%

lên hơn 80% chỉ ở mức nhiệt 360C, tuy nhiên với mức nhiệt này thử nghiệm

trên cá Rô phi O niloticus dòng Lake Rudolph tỷ lệ ñực chỉ tăng khoảng từ 2 -

6% Như vậy, mức ñộ nhạy cảm của con lai trong 10 ngày biệt hóa giới tính ñối với nhiệt ñộ còn mang tính di truyền

- Ph ương pháp tạo cá cái giả mang gen ZZ

ðây là phương pháp nghiên cứu ứng dụng cơ chế di truyền giới tính

Nhóm tác giả ñã nghiên cứu ở cá Rô phi O.niloticus thấy rằng giới tính ñiều

khiển bởi cơ chế di tryền một yếu tố, bộ nhiễm sắc thể/gen ñiều khiển giới tính

ở cá cái là ñồng giao tử XX, ở cá ñực là XY Trong khi ñó ở cá Rô phi

O.aureus bộ NST ñiều khiển giới tính ở cá ñực là ñồng giao tử ZZ còn cá cái là

dị giao tử ZW Nếu sử dụng hormone sinh dục cái Estrogen tạo cá cái giả

mang gen ZZ cho lai với cá ựực bình thường sẽ thu ựược toàn cá ựực ở thế hệ con nhưng phương pháp này tỷ lệ ựực ở thế hệ con lai cũng không ổn ựịnh (Phạm Anh Tuấn, 2006)

2.9 Thành tựu tạo cá Rô phi ựơn tắnh ựực bằng phương pháp lai khác loài

Mục tiêu của các công trình nghiên cứu về cá Rô phi hiện nay ựó là tạo

ra các quần ựàn ựơn tắnh một cách hiệu quả, ắt ảnh hưởng ựến môi trường cho

tỷ lệ ựực cao và ổn ựịnh hơn

đầu những năm 1960, những nghiên cứu về cơ chế di truyền ựiều khiển

giới tắnh ở cá Rô phi Nghiên cứu cho thấy ở O niloticus cá cái có bộ nhiễm

sắc thể ựiều khiển giới tắnh là ựồng giao tử XX, còn cá ựực là dị giao tử XY

(Mair, 1988) Ở cá O aureus thì cá cái có bộ nhiễm sắc thể ựiều khiển giới

tắnh là dị giao tử WZ, cá ựực ựồng giao tử ZZ Do ựó hướng nghiên cứu tạo

dòng cá ựơn tắnh ựực bằng lai khác loài ở cá rô phi Oreochromis ựược phát

triển và ựang ựược ứng dụng ựạt hiệu quả cao

Năm 1975, Pruginin ựã tiến hành cho lai loài O niloticus với O aureus

ựược nuôi ở các vùng ựịa lý khác khau, kết quả thu ựược ở thế hệ con lai là 52

- 100% cá ựực Tuy nhiên, Lovshin (1982) cho rằng kết quả sản xuất cá ựơn tắnh ựực bằng phương pháp lai xa là không ổn ựịnh bởi rất khó giữ ựược cá bố

mẹ thuần chủng làm nguyên liệu ban ựầu

Gần ựây phương pháp lai xa ựược quan tâm trở lại bởi nhiều ưu ựiểm của con lai về sinh trưởng và khả năng thắch nghi mà chúng ựược thừa hưởng

từ cá bố mẹ Theo một số kết quả ựã công bố, thế hệ con lai toàn ựực có thể ựược tạo ra một cách ổn ựịnh từ công thức lai xa giữa cá cái O niloticus và cá ựực O aureus (Lahav, 1990; Wohlfarth, 1994) và công thức lai giữa hai loài này ựã ựược áp dụng rộng rãi tại nhiều nước như Israel, đài Loan,Ầ

Việc sử dụng con lai xa phục vụ nuôi cá Rô phi vẫn có rất nhiều thuận lợi

Năm 1983, Guerrero ựã tiến hành nghiên cứu tốc ựộ tăng trưởng của cá O

niloticus thuần và con lai của cá cái O niloticus với cá ñực O aureus Kết quả

cho thấy tốc ñộ tăng trưởng của con lai cao hơn hẳn thế hệ con thuần Hơn nữa, khi sử dụng phương pháp lai xa này sẽ tránh ñược hiện tượng lai cận huyết giữa các cá thể cùng loài và sự ô nhiễm môi trường do chuyển ñổi giới tính bằng hormone Mặt khác thế hệ con lai có thể ñược thừa hưởng kết hợp những ưu ñiểm từ cá bố mẹ truyền cho như: tốc ñộ sinh trưởng nhanh của cá

Rô phi O niloticus và khả năng chịu ñựng nhiệt ñộ thấp của cá Rô phi xanh

O.aureus

Tuy nhiên, do vấn ñề thuần chủng di truyền của cá bố mẹ nên phần lớn

các cặp lai giữa cá Rô phi cái O niloticus và cá ñực O aureus chưa tạo ñược

thế hệ con lai 100% cá ñực Theo Hulata và ctv (1993) cho rằng hiệu quả của các công thức lai còn phụ thuộc nhiều yếu tố khác nhau như: yếu tố di truyền của cá bố mẹ, yếu tố môi trường, sự tương tác của các yếu tố môi trường và các yếu tố di truyền

Bảng 2.2 Tỷ lệ ñực ở thế hệ con của một số công thức lai xa thí nghiệm

Tại Việt Nam, nghiên cứu tạo quần ñàn cá Rô phi ñơn tính ñực sử dụng công nghệ cá siêu ñực ñược tiến hành năm 1997 trên dòng cá siêu ñực Egypt-swansea với dòng GIFT không cho kết quả khác biệt khi so sánh với dòng Egypt-AIT ðối với phương pháp lai xa, năm 1970 công nghệ này mới ñược

bắt ñầu ở Việt Nam khi tiến hành lai xa cá Rô phi vằn O niloticus với cá Rô phi ñen O mossambicus của Trần Bình Trọng, kết quả cho tỷ lệ ñực ñạt 60 - 70% Năm 1999, Bạch Thị Tuyết tiến hành lai giữa cá cái O niloticus với cá

ñực O aureus dòng Thái Lan kết quả không có gia ñình nào ñạt ñược 100% cá ñực Kết quả nghiên cứu của Nguyễn thị Hương (2005) khi cho lai giữa cá cái

O niloticus với cá ñực O aureus ñã thu ñược nhiều gia ñình ñạt tỷ lệ giới tính

ñực thế hệ con lai là 100% nhưng tỷ lệ giới tính ñực trung bình giữa các gia ñình là 79,68% Tuy nhiên kết quả nghiên cứu của Phạm Anh Tuấn (2008) khi

lai cá rô phi vằn O niloticus và cá rô phi xanh O aureus cho kết quả tỷ lệ giới

tính ñực ở con lai là 80 - 95% nhưng nếu kết hợp chọn cá bố mẹ với các chỉ tiêu chọn lựa về hình thái thì tỷ lệ giới tính ñực ở con lai tăng lên ñáng kể ñạt 95,87 - 98,25% Theo tác giả thì tỷ lệ ñực thấp và không ổn ñịnh ở thế hệ con lai F1 của các công thức trên chịu ảnh hưởng bởi nhiều nguyên nhân khác nhau như nguồn gốc của hai dòng cá sử dụng, ñộ thuần chủng của cá bố mẹ, ảnh hưởng của các yếu tố môi trường và tỷ lệ sống,… ñã ñược nhiều nhà nghiên cứu ñề cập tới ở trên

III PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

3.1 ðịa ñiểm, thời gian nghiên cứu

- ðịa ñiểm: Trung tâm Quốc gia giống thuỷ sản nước ngọt miền Bắc - Hải Dương và Phòng Di truyền - Chọn giống thuộc Viện nghiên cứu NTTS I

- Thời gian: Từ tháng 04 ñến tháng 08 năm 2010

3.2 Vật liệu nghiên cứu

3.2.1 Cá thí nghi ệm

Trong thí nghiệm này cá bố mẹ sử dụng là cá Rô phi vằn O niloticus dòng NOVIT, cá Rô phi xanh O aureus dòng Israel và dòng Philippine

- Cá cái Rô phi vằn O niloticus dòng NOVIT thế hệ chọn giống thứ 8

Cá là kết quả chọn lọc thuộc tạo ra từ ñề tài “Chọn giống cá rô phi theo tính trạng sinh trưởng và khả năng chịu lạnh” do hợp phần chọn giống cá Rô

phi, dự án NORAD, Viện nghiên cứu nuôi trồng thuỷ sản I thực hiện Chương trình chọn giống ñối tượng này thực hiện trong thời gian dài từ năm 1999 ñến năm 2007, qua 8 thế hệ chọn giống tốc ñộ tăng trưởng và khả năng chịu lạnh vẫn tiếp tục tăng so với dòng cá GIFT nhập về ban ñầu Cá ñược lưu giữ trong

ao, giai riêng biệt tại Viện nghiện cứu nuôi trồng thủy sản I

- Cá Rô phi xanh ñực O aureus thuộc các dòng: Isarel (nhập 2006),

Philippine (nhập năm 1996) ñược nhập từ Phllippin và ñược lưu giữ trong bể riêng trong bể xi măng tại Hải Dương và Viện I ðây là loài cá có khả năng chịu lạnh tốt hơn những dòng cá Rô phi khác, sinh trưởng tốt trong ñiều kiện nuôi lồng nhất là những vùng có khí hậu nhiệt ñới (Pullin, 1988)

Dựa trên kết quả nghiên cứu của Phạm Anh Tuấn và ctv (2008) khi nghiên cứu sản xuất cá Rô phi ñực bằng phương pháp lai xa, cá bố mẹ trong thí nghiệm trước khi ñưa vào nuôi ghép ñược lựa chọn theo một số chỉ tiêu hình thái gồm:

+ Xuất phát ñiểm của tia vây lưng sau và trước so với nắp mang

+ Khoảng cách từ gốc vây ngực ñến gốc vây bụng là gần Khoảng cách này ñược xác ñịnh, chọn lựa so sánh trong quần ñàn mình chọn lựa ra cá thể

có khoảng cách là gần

Xuất phát sau so với cung nắp mang Xuất phát trước so với cung nắp mang

Hình 2.3 Xuất phát tia vây lưng trước và sau so với cung nắp mang

Hình 2.4 Khoảng cách giữa gốc vây bụng và gốc vây ngực là gần

3.2.2 Các d ụng cụ thí nghiệm

Giai giữ và cho cá bố mẹ sinh sản ghép theo gia ñình có diện tích 5m2

Số lượng cá và giai như ở trong bảng 4

Sử dụng thức ăn: bột cá, cám Cargill 22% protein

Bảng 3.1 Số lượng cá và giai thí nghiệm lai ghép theo gia ñình

× cái)

Số lượng giai ghép

1 ♀ O niloticus-NOVIT × ♂ O aureus-Israel 1 × 5 20

2 ♀ O.niloticus-NOVIT × ♂O.aureus-Philippine 1 × 5 15

3.3 Bố trí thí nghiệm

- Bố trí thí nghiệm tại Hải Dương

Bố trí 2 công thức (CT) thí nghiệm lai giữa các dòng cá Rô phi với nhau, tỷ lệ ñực : cái ghép ñể tạo các gia ñình là 1♂ : 5♀

Bảng 3.2 Sơ ñồ thí nghiệm

Công thức 2 O.niloticus - NOVIT × O aureus - Philippine

Lai kiểm tra theo gia ñình nhằm mục ñích nghiên cứu kiểm tra về hiệu quả của các chỉ tiêu chọn lọc trên cá bố mẹ, ñặc biệt là cá cái NOVIT trong công thức lai với hai dòng cá rô phi xanh nên số lượng cá cái gấp ñôi số lượng

cá ñực số lượng cá cái nhiều và số lượng các giai thí nghiệm nhiều nhằm thu ñược nhiều gia ñình

- Bố trí thí nghiệm tại Viện I - Từ Sơn - Bắc Ninh

Chỉ bố trí thí nghiệm theo công thức 1:

♀ O niloticus-NOVIT × ♂ O.aureus-Isarel

3.4 Phương pháp thu mẫu các gia ñình

Trước khi ñưa vào ghép cặp cho sinh sản, cá ñực ñều ñược bắn số PIT tag và cá cái chỉ ñược bắn số PIT tag khi thu ñược trứng ở mỗi lần kểm tra và thu trứng

Số PIT tag ñược bắn vào cơ lưng bằng dụng cụ bắn số Tất cả các gia ñình thu ñược cá bột ñều ñược ñánh số quy ñịnh theo số PIT tag của cá bố mẹ,

ñể thuận tiện cho việc truy xuất nguồn gốc của thế hệ con sau này

ðịnh kỳ 8-10 ngày thu trứng 1 lần ñối với thí nghiệm lai tạo các gia ñình Thu và ương nuôi 200 cá bột từ mỗi gia ñình trong giai cước có diện tích 1m2 mắc trong ao ñất, khi cá ñạt cỡ khoảng 3 - 5g/con, thu 100 con mổ lấy tuyến sinh dục ñể xác ñịnh tỷ lệ giới tính

3.5 Phương pháp xác ñịnh giới tính

Dựa vào phương pháp của Guerrero và Shelton (1974) theo các bước sau:

3.5.1 Chu ẩn bị thuốc nhuộm

Cân 0,5g Carmine hoà tan trong 100ml dung dịch gồm 45ml axit axetic ñậm ñặc và 55ml nước cất, lắc ñều

ðun sôi dung dịch khoảng 2 - 4 phút, ñể nguội sau ñó dùng giấy lọc loại bỏ hết cặn và ñược bảo quản trong lọ thuỷ tinh tối màu

3.5.2 Ki ểm tra xác ñịnh tuyến sinh dục

Khi cá ñạt kích cỡ khoảng 3-5g/con, tiến hành mổ cá lấy tuyến sinh dục

nằm sát xương sống (hai dải có màu trắng ñục), cắt một ñoạn nhỏ ñưa lên lam

có sẵn thuốc nhuộm Aceto - carmine Chờ một vài phút cho thuốc nhuộm

ngấm sau ñó dùng lam khác ép giải sinh dục giàn ñều mỏng và ñưa lên kính

hiển vi quan sát

- Cá ñực: Quan sát trên tiêu bản thấy những chấm nhỏ

- Cá cái: Quan sát thấy những tế bào trứng hình tròn, hình oval xếp sít

- Cá bột ñược cho ăn bột cá và thức ăn công nghiệp xay mịn 3lần/ngày

vào sáng, trưa, chiều với khẩu phần ăn 10 - 15% trọng lượng thân

- Theo dõi yếu tố nhiệt ñộ hai lần một ngày lúc 7h sáng và 14h chiều

bằng nhiệt kế trong giai ñoạn cá ấp nở

3.7 Phương pháp thu thập và phân tích số liệu

3.7.1 Thu th ập số liệu

- Tỷ lệ giới tính của con lai ở các công thức theo gia ñình

- Nhiệt ñộ nước hàng ngày

3.7.2 Phân tích s ố liệu

Sử dụng phần mềm Microsoft Office Ecxell phân tích số liệu Tỷ lệ cá ñực ở thế hệ con của từng gia ñình ñược phân tích so sánh với tỷ lệ lý thuyết 1:1 (ñực : cái) bằng phương pháp χ2 theo Gomez (1984) với mức ý nghĩa p< 0,05

IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

4.1 Nhiệt ñộ trong thời gian thí nghiệm

Nhiệt ñộ nước ao nuôi cá bố mẹ cũng như ao ương cá bột ñược ño hàng ngày vào 7giờ sáng và 14giờ chiều Nhiệt ñộ nước tính trung bình qua các tháng từ tháng 4 (lúc bắt ñầu ghép cá bố mẹ cho ñẻ) ñến tháng 8 (thu cá) biến ñộng tăng dần Biến ñộng nhiệt ñộ nước trung bình ngày trong suốt thời gian thí nghiệm là 29.5 ± 2.9oC và dao ñộng từ 23 - 36oC

Hình 4.1 Biến ñộng nhiệt ñộ nước và không khí thời gian thí nghiệm

Trong thời gian thí nghiệm nhiệt ñộ nước buổi sáng dao ñộng 23 -

34oC, trung bình 28.1oC và nhiệt ñộ nước buổi chiều dao ñộng từ 24 - 38oC trung bình 31oC Nhiệt ñộ không khí buổi sáng dao ñộng 17.5 - 31oC trung bình 25.8oC, nhiệt ñộ không khí buổi chiều dao ñộng 20 - 35oC trung bình

28oC Khoảng thời gian tiến hành ghép cá bố mẹ vào ñầu tháng tư có sự biến ñộng nhiệt ñộ tương ñối phức tạp dao ñộng nhanh 23 - 27oC có thể gây sốc