Nghiên cứu khả năng nhân giống cây Giảo cổ lam Gynostemma pentaphyllum bằng phương pháp in vitro (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu khả năng nhân giống cây Giảo cổ lam Gynostemma pentaphyllum bằng phương pháp in vitro (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu khả năng nhân giống cây Giảo cổ lam Gynostemma pentaphyllum bằng phương pháp in vitro (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu khả năng nhân giống cây Giảo cổ lam Gynostemma pentaphyllum bằng phương pháp in vitro (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu khả năng nhân giống cây Giảo cổ lam Gynostemma pentaphyllum bằng phương pháp in vitro (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu khả năng nhân giống cây Giảo cổ lam Gynostemma pentaphyllum bằng phương pháp in vitro (Khóa luận tốt nghiệp)Nghiên cứu khả năng nhân giống cây Giảo cổ lam Gynostemma pentaphyllum bằng phương pháp in vitro (Khóa luận tốt nghiệp)
i - (Gynostemma pentaphyllum) Chuyên ngành Khoa IN VITRO : Chính quy : : CNSH - CNTP : 2011 - 2015 : PGS.TS Ngơ Xn Bình Thái Nguyên 2015 ii em Qua e KS Thái Nguyê iii ADN : Acid deoxyribonucleic B1 : Thiamin B3 : Nicotinic acid B5 B6 : Pyridoxine BA : 6-Benzylaminopurine Cs CT CV : Coefficient of Variation IBA - Indol axetic acid Kinetin : 6-Furfurylaminopurine LSD : Least Significant Difference Test MS NAA : - Naphlene axetic acid iv 25 26 27 28 Error! Bookmark not defined 30 ) 32 34 35 37 39 41 v 34 36 38 40 42 vi PH N 1: M U tv 1.2 M u 1.3 Yêu c u c tài .2 tài .2 PH N 2: T NG QUAN TÀI LI U 2.1 Khái quát v Gi o c lam .3 2.1.1 Ngu n g c phân b c a c y Gi o c lam .3 2.1.2 Phân lo i m th c v t h c c a Gi o c lam .3 u ki n sinh thái c a Gi o c lam .4 2.1.5 V trí Gi o c lam h th ng th c v t h c li u 2.1.6 Nghiên c u v giá tr y h c c a Gi o c lam 2.2 Khái quát v nuôi c y mô t bào th c v t 10 10 12 2.2.3 M t s y u t n n q trình ni c y mơ t bào th c v t 13 ng tr ng 15 2.3.1 Nhân gi ng h t) 16 2.3.2 Nhân gi ng vơ tính 16 2.3.3 Nhân gi ng vơ tính in vitro 17 2.4 18 18 2.4.1 Tình hình nghiên c u v Gi o c PH N 3: NG, N c 20 U 23 vii ng, v t li u ph m vi nghiên c u 23 ng nghiên c u 23 3.1.2 Ph m vi nghiên c u .23 3.1.3 Hóa ch t thi t b 23 u ki n nuôi c y 24 m th i gian ti n hành nghiên c u 24 3.4 N i dung nghiên c u .24 3.4.1 N i dung nghiên c u .24 u 24 3.5.1 Thu th p s li u .30 3.5.2 Các ch tiêu theo dõi 30 lý s li u 31 4: K T QU VÀ TH O LU N 32 4.1 K t qu ng c a th i gian kh trùng b ng HgCl2 n kh o v t li u s ch n m, vi khu n Gi o c lam .32 4.2 K t qu ng c n kh ch i Gi o c lam (sau 20 ngày nuôi c y) 33 4.3 K t qu ng c a ng kinetin 4.4 K t qu ng c ng kinetin t t nh t k t h p v i thích h p 4.5 K t qu n kh n c m ng ch i Gi o c lam 35 ng BA ch i Gi o c lam 37 ng c ng kinetin t t nh t k t h p v n kh ng Gi o c lam .39 5: K T LU N VÀ KI N NGH 43 5.1 K t lu n .43 43 TÀI LI U THAM KH O viii Thái Nguyên, ngày GVHD1 GVHD2 ( tháng Sinh Viên ) PH N M 1.1 U tv Gynostemma pentaphyllum (Thunb) lam Cucurbitaceae ( [14] Theo ngh cung, da, ( , 2009) [6] g , Theo ( [5] có t Tuy nhiê (gynostemma pentaphyllum in vitro 1.3 Yêu c u c tài - ây tài - - 0, 42 in vitro a b c e d a, b, c, e, d, 43 - m 0,1% - : MS + Inositol r 5g/l, pH: 5,6- - Môi tr agar : MS + Kinetin 0,5 mg/l, pH: 5,6- r 5g/l b sung Kinetin 0,5mg/l 0,5mg/l, pH: 5,6- , xanh r 5g/l + Kinetin 0,5 mg/l - 0,2mg/l, pH: 5,6-5,8 cho MS r 5g/l 0,1 mg/l, pH: 5,6- Ngô Xn Bình, cơng ngh sinh Nguy n Th Th Hà (2003), Giáo trình c, Nxb Nơng nghi p, Hà N i (2002), 07), 143, 259 289 , Gynostemma pentaphyllum (Thunb) Makinio Cucurbitaceae, 10 11 12 , 13 14 15 CKH 1987 - 16 17 (2006), , trung tâm Nghiên 18 (cây Gynostemma pentaphyllum (Thunb) Makinio,T 19 20 /2010, trang 21 in vitro Sa Nhân tím (Amomum longiligulare 9(4A), 689-698 22 23 200 KH&KT - 24 25 (Gynostemma 26 Hoàng Ng c Thu n (2000), Nhân gi (chi t, ghép, giâm cành, tách ch i nuôi c y in vitro, Nxb Nông nghi p, Hu 27 1993) 28 1996), 29 (1998), 30 2010), 31 32 - methyl sterol isolated from - 1651 33 NAA and 2,4D on Micropropagation of Tiaogulan (Gynostemma pentaphy llum Makino), International Transaction Journal of Engineering, Management 34 Ankang Pharmaceutical Intitution of Beijing Medcal University Promotional meterial, 1999 35 Arichi S, Takemoto T & Uchida Y (1986) Prevention of glucocorticoid side effects by saponin of Gynostemma pentaphyllum, Paten - Japan Kokai Tokyo Koho - 60 105 625 36 Carlson R.F (1964), Dwarf fruit trees, Mich Arg Ext Serv.Bull, pp 432 37 Chen J.C et al (2000), Am J Chin Med, 28 (2), 175 - 185 38 Cui J., Eneroth., Bruhl J.G (1999), Gynostemma pentaphyllum : - 191 39 and bio-as Physiol Plant, 15(3), p 473-497 40 Vander et traitement Brochure de vulgaristion VIVAA 41 Zhang ZH, et al.Propagation of Gynostemma pentaphyllum by tissue culture China J Chinese Materia Medica (1989) 14(6) (sau 20 Nhân nhanh (sau 30 ngày) (sau 30 ngày) 0,1 % tái sinh Gi Kinetin Kinetin Kinetin B Table 1: Preparation of modified Bottle I II III Component NH4NO3 KNO3 MgSO4 7H2O MgSO4 4H2O ZnSO4 7H2O CuSO4 5H2O CaCl2.2H2O KI CoCl2.6H2O IV KH2PO4 H3BO3 Na2MoO4.2H2O V FeSO4 7H2O Na2EDTA 2H2O 82,5 95 37,0 2,23 1,058 0,0025 44,0 0,083 0,0025 17,0 0,62 0,025 2,784 3,724 mg/100ml 100 100 100 100 Amount to take preparation (ml) 20 10 10 Final concentratic (mg/ l) 1.650,0 1.900,0 370,0 22,3 10,6 0,025 440,0 0,83 0,025 10 170,0 6,2 0,25 10 27,85 37,25 Inositol 0,5 2,0 0,1 0,5 100,0 Sucrose 30.000,0 Agar 8.000,0 Vitamin PH Nicotinic acid Glycine ThiamineHCl PyridoxineHCl Stock Solution (g/l) 5,8 0,5 2,0 0,1 0,5 ... (Arichi S and et, 1986) [35] in vitro in vitro 14 in vitro in vitro ã qua in vitro HgCl2 0,1% in vitro -18 C-270C, -75% (Arichi S and et, 1986) [35] M sau: - in vitro (Arichi S and et, 1986)... deoxyribonucleic B1 : Thiamin B3 : Nicotinic acid B5 B6 : Pyridoxine BA : 6-Benzylaminopurine Cs CT CV : Coefficient of Variation IBA - Indol axetic acid Kinetin : 6-Furfurylaminopurine LSD : Least Significant... vô trùng tái sinh chúng thành Nhân gi ng in vitro i b sung cho k thu t nhân gi ng truy n th ng nhi u k thu t ti n b - 18 Tuy nhiên, có kích in vitro in vitro ( cs, 2010) [25 in vitro 2.4 i 30%