Nghiên cứu khả năng nhân giống gừng núi đá zingiber purpureum roscoe bằng phương pháp in vitro

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NÔNG THỊ NHỊ Tên đề tài: NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN GIỐNG CÂY GỪNG NÚI ĐÁ (Zingiber purpureum Roscoe) BẰNG PHƢƠNG PHÁP IN VITRO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo Chuyên ngành Khoa Khóa học : Chính quy : Công nghệ Sinh học : CNSH - CNTP : 2012 - 2016 Thái Nguyên, năm 2016 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NÔNG THỊ NHỊ Tên đề tài: NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG NHÂN GIỐNG CÂY GỪNG NÚI ĐÁ (Zingiber purpureum Roscoe) BẰNG PHƢƠNG PHÁP IN VITRO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chuyên ngành : Công nghệ Sinh học Khoa : CNSH - CNTP Lớp : K44 - CNSH Khóa học : 2012 - 2016 Giảng viên hƣớng dẫn: 1.Th.S Nguyễn Thị Tình Th.S Nguyễn Xuân Vũ Khoa CNSH-CNTP- Trƣờng Đại học Nông Lâm Thái Nguyên Thái Nguyên, năm 2016 i LỜI CẢM ƠN Kết thúc thời gian tháng thực tập phòng thí nghiệm nuôi cấy mô Tế Bào Thực Vật, Khoa Công nghệ Sinh học & Công nghệ Thực phẩm, Trường Đại học Nông Lâm đến em hoàn thành đề tài thực tập tốt nghiệp Để hoàn thành khóa luận này, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tri ân sâu sắc đến Ban giám hiệu nhà trường, Ban chủ nhiệm khoa toàn thể thầy cô giáo khoa tạo điều kiện tốt giúp đỡ em thời gian qua để em hoàn thành đề tài tốt nghiệp Đại học đạt kết hôm Và đặc biệt Em xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến cô Th.S Nguyễn Thị Tình Th.S Ma Thị Hoàn tận tình hướng dẫn, dạy bảo suốt trình thực hoàn thành tốt đề tài tốt nghiệp: “Nghiên cứu khả nhân giống Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) phương pháp in vitro” đến em hoàn thành khóa luận tốt nghiệp Cuối cùng, Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến toàn thể gia đình, người thân, bạn bè, người bên cạnh em, cổ vũ tinh thần lớn lao ủng hộ em suốt thời gian học tập nghiên cứu Trong trình thực tập, trình làm báo cáo thực tập thời gian có hạn, trình độ, kỹ thân nhiều hạn chế nên khó tránh sai sót, em mong thầy cô bỏ qua Em mong nhận ý kiến đóng góp quý báu, bảo Thầy Cô bạn để em học thêm nhiều kinh nghiệm lĩnh vực đề tài đầy đủ hoàn thiện Em xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, ngày 28 thán 05 năm 2016 Sinh viên thực Nông Thị Nhị ii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Các loài thuộc chi Zingiber Mill Việt Nam [4] Bảng 4.1: Kết ảnh hưởng loại hóa chất khử trùng đến khả tạo vật liệu vô trùng (sau ngày nuôi cấy) 38 Bảng 4.2: Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ hóa chất thời gian khử trùng dung dịch HgCl2 đến khả tạo vật liệu bệnh (sau ngày) 40 Bảng 4.3: Ảnh hưởng số môi trường đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá (MS, B5, WPM *) 43 Bảng 4.4: Kết ảnh hưởng Kinetin đến khả nhân nhanh Gừng Núi Đá (sau 30 ngày) 45 Bảng 4.5: Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ kinitin kết hợp BA đến khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá (sau 30 ngày nuôi cấy) 47 Bảng 4.6: Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ kinetin BA kết hợp NAA đến khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá (sau 30 ngày nuôi cấy) .50 Bảng 4.7: Kết nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng nước dừa đến khả sinh trưởng phát triển Gừng Núi Đá (sau 30 ngày nuôi cấy) 53 Bảng 4.8: Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến khả rễ Gừng Núi Đá sau 40 ngày nuôi cấy 56 Bảng 4.9: Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA kết hợp với than hoạt tính đến khả rễ Gừng Núi Đá sau 40 ngày nuôi cấy .59 iii DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 2.1: Sự phân hóa phản phân hóa tế bào .13 Hình 3.1: Ảnh Củ Gừng Núi Đá (Zingber purpureum Roscoe) đưa vào nuôi cấy mô 26 Hình 4.1: Biểu đồ thể tỷ lệ mẫu với loại hóa chất khử trùng đến tỷ lệ sống mẫu tạo vật liệu vô trùng mẫu Gừng Núi Đá (sau ngày nuôi cấy) 38 Hình 4.2: Biểu đồ thể tỷ lệ mẫu không nhiễm với nồng độ thời gian khử trùng dung dịch HgCl2 đến tỷ lệ sống mẫu tạo vật liệu vô trùng (sau ngày nuôi cấy) 41 Hình 4.3: Chồi Gừng Núi Đá tái sinh loại môi trường (sau 40 ngày nuôi cấy) 43 Hình 4.4: Chồi Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe.) bổ sung Kinetin nồng độ khác (30 ngày nuôi cấy) 45 Hình 4.5: Chồi Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe.) bổ sung Kinetin kết hợp BA nồng độ khác (30 ngày nuôi cấy) .47 Hình 4.6: Chồi Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe.) bổ sung Kinetin kết hợp BA nồng độ khác (30 ngày nuôi cấy) .50 Hình 4.7: Chồi Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe.) bổ sung nước dừa nồng độ khác (30 ngày nuôi cấy) 54 Hình 4.8: Ảnh rễ Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) môi trường rễ bổ sung NAA (Sau 40 ngày nuôi cấy) .57 Hình 4.9: Ảnh rễ Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) môi trường rễ bổ sung NAA kết hợp với than hoạt tính (Sau 40 ngày nuôi cấy) 59 iv DANH MỤC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT B1 : Thiamin B3 : Nicotinic acid BA : 6-Benzylaminopurine CT : Công thức CTTN : Công thức thí nghiệm CV% : Hệ số biến động Coeficcinent of Variation ĐC : Đối chứng GA3 : Gibberellic acid IAA : Indole-3-acetic acid Kinetin : 6-Furfurylaminopurine LSD : So sánh theo giá trị khác biệt có nghĩa nhỏ mức   0,05 (Least Singnificant Difference Test) MS : Murashige and Skoog’s NAA : -Naphlene axetic acid Kin : Kinetin (6-furfuryl-aminopurien) TB : Trung bình TLTK : Tài liệu tham khảo Tn : Thí nghiệm WPM : Woody Plant Medium v MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i DANH MỤC CÁC BẢNG ii DANH MỤC CÁC HÌNH iii DANH MỤC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT iv MỤC LỤC v PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu yêu cầu đề tài .2 1.2.1 Mục tiêu đề tài 1.2.2 Yêu cầu đề tài 1.3 Ý nghĩa đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn .3 PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tổng quan chi Gừng (Zingiber) 2.1.1 Họ gừng chi Gừng 2.1.2 Vị trí phân loại Gừng núi đá (Zingiber) 2.1.3 Đặc điểm thực vật phân bố Họ Gừng (Zingiberraceae) 2.1.3.1 Đặc điểm thực vật chung họ Gừng 2.1.3.2 Phân bố sinh thái 2.1.4 Giới thiệu Gừng Núi Đá .9 2.1.4.1 Thân 2.1.4.2 Lá 10 2.1.4.3 Hoa .10 2.1.4.4 Củ 10 2.1.4.5 Phân bố sinh thái 10 2.1.4.6 Thành phần hóa học .10 vi 2.1.4.7 Giá trị dược liệu 11 2.2 Cơ sở khoa học nuôi cấy mô tế bào thực vật .12 2.2.1 Khái niệm nuôi cấy mô tế bào thực vật 12 2.2.2 Tính toàn tế bào thực vật 12 2.2.3 Sự phân hóa phản phân hóa tế bào .13 2.3 Các nhân tố ảnh hưởng tới trình nhân giống nuôi cấy mô tế bào thực vật 14 2.3.1 Môi trường nuôi cấy mô tế bào thực vật 14 2.3.1.1 Nguồn Cacbon 14 2.3.1.2 Các nguyên tố khoáng đa lượng, vi lượng 15 2.3.1.3 Vitamin 15 2.3.1.4 Các chất hữu tự nhiên 16 2.3.1.5 Các thành phần khác 16 2.3.1.6 pH môi trường .16 2.3.1.7 Các chất điều hòa sinh trưởng 17 2.3.2 Môi trường vật lý 18 2.3.2.1 Ánh sáng .18 2.3.2.2 Nhiệt độ 19 2.3.2.3 Độ ẩm 19 2.3.3 Vật liệu nuôi cấy .19 2.3.4 Điều kiện vô trùng 20 2.4 Tình hình nghiên cứu số thuộc Họ Gừng(Zingiber) giới Việt Nam 21 2.4.1 Tình hình nghiên cứu giới 21 2.4.2 Tình hình nghiên cứu Việt Nam 23 PHẦN VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 3.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu, hóa chất thiết bị 26 3.1.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu 26 3.1.2 Hóa chất thiết bị 26 vii 3.2 Phạm vi, địa điểm thời gian nghiên cứu 27 3.3 Nội dung nghiên cứu 27 3.3.1 Nội dung 1: Nghiên cứu ảnh hưởng hóa chất khử trùng, nồng độ hóa chất khử trùng thời gian khử trùng đến đến tỷ lệ sống mẫu đế tạo vật liệu bệnh 27 3.3.2 Nội dung 2: Nghiên cứu ảnh hưởng số môi trường đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá .27 3.3.3 Nội dung 3: Nghiên cứu ảnh hưởng nồng chất kích thích sinh trưởng Kinetin, BA, NAA tới khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá 27 3.3.4 Nội dung 4: Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ nước dừa đến khả sinh trưởng phát triển Gừng Núi Đá .28 3.3.5 Nội dung 5: Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ chất kích thích sinh trưởng NAA, than hoạt tính đến khả rễ tạo hoàn chỉnh Gừng Núi Đá .28 3.4 Phương pháp nghiên cứu 28 3.4.1 Điều kiện bố trí thí nghiệm .28 3.4.2 Chuẩn bị môi trường nuôi cấy in vitro 28 3.4.3 Phương pháp nghiên cứu .28 3.4.3.1 Nội dung 1: Nghiên cứu ảnh hưởng hóa chất khử trùng chất khử trùng, nồng độ hóa chất khử trùng thời gian khử trùng đến đến tỷ lệ sống mẫu đế tạo vật liệu bệnh 28 3.4.3.2 Nội dung 2: Nghiên cứu ảnh hưởng số môi trường đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá .30 3.4.3.3 Nội dung 3: Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ chất kích thích sinh trưởng Kinitin, BA, NAA tới khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá .31 3.4.3.4 Nội dung 3: Nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng nước dừa đến khả sinh trưởng phát triển Gừng Núi Đá .33 3.4.3.5 Nội dung 4: Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ kích thích sinh trưởng NAA than hoạt tính đến khả rễ tạo hoàn chỉnh Gừng Núi Đá 33 viii 3.6 Phương pháp thu thập, xử lý số liệu tiêu đánh giá 35 3.6.1 Thu thập số liệu .35 3.6.2 Các tiêu theo dõi 35 3.6.3 Phương pháp xử lý số liệu .36 PHẦN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN .37 4.1 Nghiên cứu ảnh hưởng hóa chất khử trùng chất khử trùng, nồng độ hóa chất khử trùng thời gian khử trùng đến khả tạo vật liệu bệnh .37 4.1.1 Nghiên cứu ảnh hưởng số hóa chất khử trùng đến tỷ lệ sống mẫu tạo vật liệu bệnh 37 4.1.2 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ hóa chất thời gian khử trùng dung dịch HgCl2 đến tỷ lệ sống mẫu tạo vật liệu bệnh 39 4.2 Nghiên cứu ảnh hưởng số môi trường đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá .42 4.3 Nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng chất kích thích sinh trưởng Kinetin, BA, NAA tới khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá 44 4.3.1 Nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng Kinetin đến khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá 45 4.3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng Kinetin kết hợp với nồng độ BA đến khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá 46 4.3.3 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ kinetin BA kết hợp NAA đến khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá 49 4.4 Nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng nước dừa đến khả sinh trưởng phát triển Gừng Núi Đá 52 4.5 Nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng chất kích thích sinh trưởng đến khả rễ tạo hoàn chỉnh Gừng Núi Đá 55 4.5.1 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA than hoạt tính đến khả rễ Gừng Núi Đá 56 4.5.2 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA kết hợp than hoạt tính đến khả rễ Gừng Núi Đá .59 29 Đặng Ngọc Phúc, Nguyễn Thanh Tùng, Dương Thị Thùy Châu, Trương Thị Bích Phượng (2011), “Nhân giống in vitro sa nhân tím (Amomum longiligulare T.L.Wu)”, Tạp chí Công nghệ Sinh học, 9(4A): 689-698 30 Hoàng Thị Sản (2009), Phân loại thực vật, Nxb Giáo dục 31 Phạm Hà Thanh Tùng, Giáo trình thực vật dược-Phân loại học thực vật (phần 3), Bộ môn Thực vật- Trường Đại học Dược Hà Nội Trang 347-349 32 Phạm Hà Thanh Tùng, Giáo trình thực vật dược-Phần mở đầu (phần 1), Bộ môn Thực vật- Trường Đại học Dược Hà Nội 33 Nguyễn Đức Thành (2000), Nuôi cấy mô tế bào thực vật, nghiên cứu ứng dụng, Nxb Nông Nghiệp Hà Nội 34 Lưu Ngọc Trình, Nguyễn Thị Ngọc Huệ, Trần Danh Sửu, Hoàng Thị Huệ (2003), Nghiên cứu thăm dò quy trình vi nhân giống hai loài hoa riềng tía nghệ đỏ làm hoa cảnh, Báo cáo khoa học, Trung tâm Tài Nguyên Thực vật, Viện khoa học Nông nghiệp Việt Nam 35 Trần Thị Tuyến (2011), Nghiên cứu hợp chất có hoạt tính sinh học vài loài thuộc chi gừng (Zingiber), Luận văn ThS Hóa học, Đại học Quốc Gia Hà Nội, Trường Đại học Khoa Học Tự Nhiên 36 Võ Châu Tuấn (2014), Nghiên cứu nuôi cấy tế bào nghệ đen (Curcuma zedoaria Roscoe) khảo sát khả tích lũy số hợp chất có hoạt tính sinh học chúng, Luận án Tiến sĩ sinh học, Trường Đại học Khoa Học, Đại học Huế 37 Vũ Văn Vụ, Nguyễn Mộng Hùng, Lê Hồng Điệp (2009), “Công nghệ sinh học tập 2-Công nghệ sinh học tế bào”, Nxb Giáo dục 38 Nguyễn Quang Thạch (1995), Công nghệ sinh học thực vật, Nxb nông nghiệp, Hà Nội 39 Theo Quyết định số 80/2005/QĐ - BNN Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn II Tài liệu tiếng Anh 40 Abbas M.S., Taha H.S., Aly U.I., El-Shabrawi H.M and Gaber E.I (2011), “In vitro propagation of ginger (Zingiber officinale Rosco)”, Journal of Genetic Engineering and Biotechnology, 9(2), 165-172 41 Duong Tan Nhut, Nguyen Phuc Huy, Vu Quoc Luan, Nguyen Van Binh, Nguyen Ba Nam, le Nu Minh Thuy, Dang Thi Ngoc Ha, Hoang Xuan Chien, Trinh Thi Huong, Hoang Van Cuong, Le Kim Cuong and Vu Thi hien (2011), “Shoot regeneration and micropropagation of Panax vietnamensis Ha et Grushv From ex vitro leaf-derived callus”, African Journal of Biotechnology, 10(84): 19499-19504 42 Faridah Q Z., Abdelmageed A H A., Julia A A., Nor Hafizah R (2011), “Efficient in vitro regeneration of Zingiber zerumbet Smith (a valuable medicinal plant) plantlets from rhizome bud explants”, African Journal of Biotechnology, 10(46), p 9303-9308 43 Greetha S.P.,Manjula C.,john C.Z., Minoo D., Nirmal Babu K And P.N.(1997), “Micropropagation of Kaempferia spp (K Galanga L And K rotunda L.)”, Journal of Spicies and Aromatic Crops, 6(2): 129-135 44 Jung San Chang, Kuo Chih Wang, Chia Feng Yeh, Den En Shieh, Lien Chai Chiang (2013), “Fresh ginger (Zingiber officinale) has anti-viral activity against human respiratory syncytial virus in human respiratory tract cell lines” 45 Muhammad Shahinozzaman, Muhammad Omar Faruq, Mustafa Abul Kalam Azad and Muhammad Nurul Amin (2013), “Studies on in vitro propagation of an important medicinal plant-Curcuma zedoaria Roscoe using rhizome explants”, Persian Gulf Crop Protection, 2(4), p 1-6 46 Mohamed S.Abbas, Husein S Taha, Usama I Aly, Hattem M El-Shabrawi, ElSayed I Gaber (2011), “In vitro propagation of ginger (Zingiber officinale Roscoe)”, Journal of Genetic Engineering and Biotechnology,9,p.165-172 47 P.Raven and W.Zhengyi (2000), Flora of China, Volume 24, pp 322-377 48 Rout J R., Palai S K., Samantaray S and Das P (2001), “Effect of growth regulator and culture conditions on shoot multiplication and rhizome formation in ginger (Zingiber officinale Rosc.) in vitro”, In vitro Cell Dev Biol.-Plant, 37, p 814-819 49 Sen A., Goyal A.K., Ganguly K And Mishra T (2010) “In vitro multiplication of Curcuma Longa Linn - an important medicinal zingiber”, Journal of plant Science, 4: 21-24 50 Toshi Masuda and Akiko Jitoe (1994), “Antioxidative and Antiinflammatory Compounds from Tropical Gingers: Isolation, Structure Determination, and Activities of Cassumunins A, B, and C, New Complex Curcuminoids from Zingiber cassumunar”, 42(9), p 1850-1856 III Tài liệu Internet 51 http://botanyvn.com/, Trung tâm liệu thực vật Việt Nam 52 http://www.prc.org.vn/Content.aspx?tab=news&lang=vi&pid=26&cid=50&id= 128 53 http://www.baomoi.com/tac-dung-chua-benh-cua-cay-gung-nui/c/11628285.epi 54 http://www.baobackan.org.vn/channel/1104/201508/trong-gung-nui-da-tunguon-giong-nuoi-cay-mo-2404373/ PHỤ LỤC 1: MÔI TRƢỜNG NUÔI CẤY Bảng 1: Môi trƣờng MS Bottle I II III IV V Component NH4NO3 KNO3 MgSO4.7H2O MnSO4.4H2O ZnSO4.7H2O CuSO4.5H2O CaCl2.2H2O KI CoCl2.6H2O KH2PO4 H3BO4 Na2MoO4.2H2O FeSO4.7H2O Na2EDTA.2H2O 82,5 95 37 2,23 1,058 0,0025 44 0,083 0,0025 17 0,62 0,025 2,784 3,724 mg/100ml 100 100 100 100 Amount to take preparation (ml) 20 10 10 10 10 1.650,0 1.900,0 370,0 22,3 10,6 0,025 440,0 0,83 0,025 170,0 6,2 0,25 27,85 37,25 Sucrose Agar 5.000,0 pH 5,6-5,8 0,5 2,0 0,1 0,5 Final concentratic (mg/l) 0,5 2,0 0,1 0,5 20.0000,0 Vitamin Nicotinic acid Glycine Thiamine acid Pyridocine HCl Stock Solution (g/l Bảng 2: Môi trƣờng WPM Nồng độ Muối khoáng Nồng độ Muối khoáng (mg/l) (mg/l) NH4NO3 400 H3BO3 6,2 Ca(NO3)2.4H2O 556 ZnSO4.7H2O 8,6 CaCl2.2H2O 96 Na2EDTA.2 H2O 37,2 MgSO4.7H2O 370 CuSO4.5H2O 0,25 K2SO4 990 FeSO4.7H2O 27,8 KH2PO4 170 MgSO4.4H2O 22,3 Na2MoO4.2H2O 0,25 Các chất hữu Myo-inositol 100 Nicotinic acid 0,5 Pyridoxine HCL 0,5 Thiamine HCL 1,0 Glycine 2,0 Agar 5,0 Sucrose 20 pH 5,6 - 5,8 Bảng 3: Môi trƣờng B5 Bottle Component Stock Solution (g/l) KNO3 250 Amount to take preparation (ml) 20 (NH4)2SO4 13,4 10 134,0 MgSO4.7H2O 15,0 NaH2PO4.H2O 15 10 150,0 MnSO4.H2O 1,0 10 10,0 H3BO3 0,3 3,0 ZnSO4.7H2O 0,2 2,0 KI 0,075 10 0,75 Na2MoO4.2H2O 0,025 10 0,25 CuSO4.5H2O 0,0025 0,025 CoCl2.6H2O 0,0025 0,025 FeSO4.7H2O 2,785 Na2EDTA 3,725 37,25 CaCl2.2H2O 15,0 150,0 10 Inositol Final concentratic (mg/ l) 2500,0 27,85 160 mg/100ml Vitamins Nicotinic acid 100 1,0 Thiamine HCL 100 10 10,0 Pyridoxine HCL 100 1,0 Sucrose 5000,0 Agar PH 5,6 - 5,8 PHỤ LỤC 3: KẾT QUẢ XỬ LÝ SỐ LIỆU Thí Nghiệm 1: Nghiên cứu ảnh hƣởng số loại hóa chất khử trùng đến tỷ lệ mẫu sống để tạo vật liệu vô trùng BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMSKN FILE KT1 15/ 5/** 20:59 PAGE Nghien cuu mot so loai hoa chat khu trung den ty le mau song de tao vat lieu vo trung VARIATE V003 TLMSKN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 7466.67 2488.89 149.33 0.000 * RESIDUAL 133.333 16.6667 * TOTAL (CORRECTED) 11 7600.00 690.909 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMN FILE KT1 15/ 5/** 20:59 PAGE Nghien cuu mot so loai hoa chat khu trung den ty le mau song de tao vat lieu vo trung VARIATE V004 TLMN LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 13358.3 4452.78 267.16 0.000 * RESIDUAL 133.335 16.6668 * TOTAL (CORRECTED) 11 13491.7 1226.52 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMC FILE KT1 15/ 5/** 20:59 PAGE Nghien cuu mot so loai hoa chat khu trung den ty le mau song de tao vat lieu vo trung VARIATE V005 TLMC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 1091.67 363.889 14.56 0.002 * RESIDUAL 200.000 25.0000 * TOTAL (CORRECTED) 11 1291.67 117.424 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KT1 15/ 5/** 20:59 PAGE Nghien cuu mot so loai hoa chat khu trung den ty le mau song de tao vat lieu vo trung MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SE(N= 5%LSD 3) 8DF TLMSKN 0.000000 40.0000 66.6667 53.3333 2.35702 7.68601 TLMN 100.000 46.6667 16.6667 20.0000 TLMC 0.000000 13.3333 16.6667 26.6667 2.35703 7.68605 2.88675 9.41341 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KT1 15/ 5/** 20:59 PAGE Nghien cuu mot so loai hoa chat khu trung den ty le mau song de tao vat lieu vo trung F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLMSKN TLMN TLMC GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 40.000 12 45.833 12 14.167 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 26.285 4.0825 8.2 0.0000 35.022 4.0825 8.9 0.0000 10.836 5.0000 35.3 0.0016 | | | | Thí nghiệm 2: Nghiên cứu ảnh hƣởng nồng độ hóa chất thời gian khử trùng HgCl2 đến tỷ lệ mẫu sống để tạo vật liệu bệnh BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMS FILE KTNHUNG 18/ 5/** 7:17 PAGE nghien cuu anh huong cua nong va thoi gian khu trung bang HgCl den kha nang tao vat lieu vo trung VARIATE V003 TLMS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 8495.24 1415.87 59.47 0.000 * RESIDUAL 14 333.334 23.8095 * TOTAL (CORRECTED) 20 8828.57 441.429 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMN FILE KTNHUNG 18/ 5/** 7:17 PAGE nghien cuu anh huong cua nong va thoi gian khu trung bang HgCl den kha nang tao vat lieu vo trung VARIATE V004 TLMN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 22790.5 3798.41 159.53 0.000 * RESIDUAL 14 333.335 23.8096 * TOTAL (CORRECTED) 20 23123.8 1156.19 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMC FILE KTNHUNG 18/ 5/** 7:17 PAGE nghien cuu anh huong cua nong va thoi gian khu trung bang HgCl den kha nang tao vat lieu vo trung VARIATE V005 TLMC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 8647.62 1441.27 60.53 0.000 * RESIDUAL 14 333.334 23.8096 * TOTAL (CORRECTED) 20 8980.95 449.048 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KTNHUNG 18/ 5/** 7:17 PAGE nghien cuu anh huong cua nong va thoi gian khu trung bang HgCl den kha nang tao vat lieu vo trung MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 3 TLMS 0.000000 40.0000 70.0000 56.6667 50.0000 43.3333 40.0000 TLMN 100.000 50.0000 16.6667 6.66667 16.6667 3.33333 3.33333 TLMC 0.000000 10.0000 13.3333 36.6667 33.3333 53.3333 56.6667 SE(N= 3) 2.81718 2.81719 2.81718 5%LSD 14DF 8.54514 8.54515 8.54514 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KTNHUNG 18/ 5/** 7:17 PAGE nghien cuu anh huong cua nong va thoi gian khu trung bang HgCl den kha nang tao vat lieu vo trung F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLMS TLMN TLMC GRAND MEAN (N= 21) NO OBS 21 42.857 21 28.095 21 29.048 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 21.010 4.8795 8.4 0.0000 34.003 4.8795 9.4 0.0000 21.191 4.8795 16.8 0.0000 | | | | Thí nghiệm 3:Nghiên cứu ảnh hƣởng số môi trƣờng đến khả tái sinh chồi Gừng Núi Đá BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTS FILE TN1 14/ 5/** 16: PAGE Ket qua anh huong cua moi truong nuoi cay den kha nang tai sinh choi Gung Nui Da VARIATE V003 TLTS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 1755.56 877.778 39.50 0.001 * RESIDUAL 133.333 22.2222 * TOTAL (CORRECTED) 1888.89 236.111 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN1 14/ 5/** 16: PAGE Ket qua anh huong cua moi truong nuoi cay den kha nang tai sinh choi Gung Nui Da MEANS FOR EFFECT CT - CT NOS 3 TLTS 63.3333 53.3333 30.0000 SE(N= 3) 2.72165 5%LSD 6DF 9.41464 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN1 14/ 5/** 16: PAGE Ket qua anh huong cua moi truong nuoi cay den kha nang tai sinh choi Gung Nui Da F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLTS GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 48.889 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 15.366 4.7140 9.6 0.0006 | | | | Thí Nghiêm 4: Nghiên cứu ảnh hƣởng Kinetin đến khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNN FILE TN22 14/ 5/** 22:54 PAGE Nghien cuu anh huong cua kinitin den kha nang nhan nhanh choi cay Gung Nui Da VARIATE V003 HSNN LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 3.37833 675667 121.62 0.000 * RESIDUAL 12.666671E-01.555559E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 3.44500 202647 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN22 14/ 5/** 22:54 PAGE Nghien cuu anh huong cua kinitin den kha nang nhan nhanh choi cay Gung Nui Da MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 3 DF HSNN 0.666667 1.00000 1.50000 2.03333 1.56667 1.33333 SE(N= 3) 0.430333E-01 5%LSD 12DF 0.132600 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN22 14/ 5/** 22:54 PAGE Nghien cuu anh huong cua kinitin den kha nang nhan nhanh choi cay Gung Nui Da F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN (N= 18) STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | | | HSNN NO OBS 18 1.3500 BASED ON TOTAL SS 0.45016 BASED ON % | RESID SS | 0.74536E-01 3.5 0.0000 | | Thí nghiệm 5: Nghiên cứu ảnh hƣởng kết hợp nồng độ kinitin BA đến khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE TN3BAKI2 14/ 5/** 23:21 Nghien cuu anh huong ket hop cua kinitin va BA den kha nang nhan nhanh choi Gung Nui Da PAGE VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 2.61333 522667 94.08 0.000 * RESIDUAL 12.666668E-01.555556E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 2.68000 157647 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN3BAKI2 14/ 5/** 23:21 PAGE Nghien cuu anh huong ket hop cua kinitin va BA den kha nang nhan nhanh choi Gung Nui Da MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 3 DF HSN 2.03333 2.36667 2.50000 2.63333 3.26667 2.80000 SE(N= 3) 0.430332E-01 5%LSD 12DF 0.132600 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN3BAKI2 14/ 5/** 23:21 PAGE Nghien cuu anh huong ket hop cua kinitin va BA den kha nang nhan nhanh choi Gung Nui Da F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 2.6000 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.39705 0.74536E-01 2.9 0.0000 | | | | - Thí nghiệm 6: Nghiên cứu ảnh hƣởng kết hợp nồng độ kinetin, BA NAA đến khả nhân nhanh chồi Gừng Núi Đá BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNN FILE TN4 14/ 5/** 16:29 PAGE Nghien cua anh huong ket hop kinetin, BA NAA den kha nang nhan nhan choi Gung Nui Da VARIATE V003 HSNN LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 2.52944 505889 45.53 0.000 * RESIDUAL 12.133333 111111E-01 * TOTAL (CORRECTED) 17 2.66278 156634 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN4 14/ 5/** 16:29 PAGE Nghien cua anh huong ket hop kinetin, BA NAA den kha nang nhan nhan choi Gung Nui Da MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 3 DF HSNN 3.26667 3.46667 3.80000 4.43333 3.96667 2.63333 SE(N= 3) 0.608581E-01 5%LSD 12DF 0.187524 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN4 14/ 5/** 16:29 PAGE Nghien cua anh huong ket hop kinetin, BA NAA den kha nang nhan nhan choi Gung Nui Da F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSNN GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 3.7611 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.39577 0.10541 3.3 0.0000 | | | | Thí nghiệm 7: Nghiên cứu ảnh hƣởng hàm lƣợng nƣớc dừa đến sinh trƣởng phát triển Cây Gừng Núi Đá BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNN FILE ND 17/ 5/** 6:37 PAGE nghien cuu anh huong cua ham luong nuoc dua den su sinh truong va phat trien cho VARIATE V003 HSNN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 3.08000 616000 73.92 0.000 * RESIDUAL 12.100000 833336E-02 * TOTAL (CORRECTED) 17 3.18000 187059 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE ND 17/ 5/** 6:37 PAGE nghien cuu anh huong cua ham luong nuoc dua den su sinh truong va phat trien cho MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 3 HSNN 4.43333 4.63333 5.20000 4.80000 4.23333 3.90000 SE(N= 3) 0.527047E-01 5%LSD 12DF 0.162401 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE ND 17/ 5/** 6:37 PAGE nghien cuu anh huong cua ham luong nuoc dua den su sinh truong va phat trien cho F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSNN GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 4.5333 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.43250 0.91287E-01 3.0 0.0000 | | | | Thí nghiệm 8: Nghiên cứu ảnh hƣởng nồng độ NAA đến khả rễ Gừng Núi Đá BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLRR FILE NAA 16/ 5/** 0: PAGE Nghien cuu anh huong cua nong NAA den kha nang re cay Gung Nui Da VARIATE V003 TLRR LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 14827.8 2965.56 177.93 0.000 * RESIDUAL 12 200.000 16.6667 * TOTAL (CORRECTED) 17 15027.8 883.987 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NAA 16/ 5/** 0: PAGE Nghien cuu anh huong cua nong NAA den kha nang re cay Gung Nui Da MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 3 DF TLRR 0.0000 20.0000 46.6667 90.0000 73.3333 40.0000 SE(N= 3) 2.35702 5%LSD 12DF 7.26279 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NAA 16/ 5/** 0: PAGE Nghien cuu anh huong cua nong NAA den kha nang re cay Gung Nui Da F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLRR GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 46.111 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 29.732 4.0825 8.2 0.0000 | | | | Thí nghiệm 9: Nghiên cứu ảnh hƣởng kết hợp nồng độ NAA than hoạt tính đến khả rễ Gừng Núi Đá BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLRR FILE THAN HT 19/ 5/** 17:34 PAGE Nghien cuu anh huong ket hop cua nong NAA va than hoat tinh den kha nang re VARIATE V003 TLRR LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 2040.00 510.000 38.25 0.000 * RESIDUAL 10 133.333 13.3333 * TOTAL (CORRECTED) 14 2173.33 155.238 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE THAN HT 19/ 5/** 17:34 PAGE Nghien cuu anh huong ket hop cua nong NAA va than hoat tinh den kha nang re MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 DF TLRR 90.0000 90.0000 100.000 76.6667 66.6667 SE(N= 3) 2.10819 5%LSD 10DF 6.64297 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE THAN HT 19/ 5/** 17:34 PAGE Nghien cuu anh huong ket hop cua nong NAA va than hoat tinh den kha nang re F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLRR GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 84.667 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 12.459 3.6515 4.3 0.0000 | | | | ... hành đề tài: Nghiên cứu khả nhân giống Gừng Núi Đá (Zingiber purpureum Roscoe) phương pháp invitro” Kết đề tài nghiên cứu nhằm tìm phương pháp nuôi cấy tối ưu cho viêc nhân nhanh in vitro góp phần... nhiên nghiên cứu nhân giống Gừng Núi Đá nước hạn chế Do việc nghiên cứu khả nhân nhanh giống nhằm nâng cao hệ số nhân chồi Gừng Núi Đá cần thiết Đồng thời kết trình nhân giống phương pháp in vitro. .. nghiên cứu góp phần hoàn thiện trình nghiên cứu khả nhân nhanh giống Cây gừng núi đá phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật - Quy trình nhân nhanh giống Gừng Núi Đá phương pháp nuôi cấy in vitro