ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư dạ dày là loại ung thư phổ biến và là nguyên nhân tử vong do ung thư cao thứ tư trên thế giới; Việt Nam thuộc khu vực có trung bình nguy cơ ung thư dạ dày cao, với tỷ lệ mắc mới cả nam và nữ là 16,3/ 100.000 dân [119]. Mặc dù đã có nhiều tiến bộ trong chẩn đoán, điều trị nhưng tiên lượng ung thư dạ dày hiện nay vẫn còn xấu với tỷ lệ sống thêm 5 năm chỉ khoảng 28%. Các liệu pháp hóa trị là cần thiết ở đa số bệnh nhân nhưng với độc tính cao do những hoá chất tổng hợp tấn công không đặc hiệu cả tế bào ung thư và tế bào bình thường làm ảnh hưởng đến sức khỏe bệnh nhân. Vì vậy, việc hướng tới tìm các hợp chất có nguồn gốc dược liệu để hỗ trợ điều trị vừa hiệu quả và vừa an toàn đang thu hút sự quan tâm của nhiều nhà nghiên cứu. Curcumin là thành phần chính của thân rễ Nghệ vàng (Curcuma longa L. Zingiberaceae) đã được nghiên cứu với nhiều công dụng như kháng ung thư (ung thư dạ dày, ung thư gan, ung thư phổi, ung thư kết tràng, ung thư vú, ung thư da), kháng viêm, chống oxy hóa, kháng khuẩn (Helicobacter pylori), kháng virus, kháng nấm [37], [49], [59], [68], [71], [87]… Các thử nghiệm sinh học đã chứng minh, curcumin thật sự hiệu quả trong việc phối hợp điều trị ung thư đặc biệt là ung thư dạ dày [8], [37], [81] và an toàn ngay cả khi dùng liều cao. Với sự an toàn và hiệu quả, curcumin là hợp chất thiên nhiên có nhiều tiềm năng ứng dụng trong phòng ngừa và hỗ trợ điều trị bệnh ung thư dạ dày. Tuy nhiên, cho đến nay curcumin vẫn chưa được ứng dụng nhiều trong các dạng thuốc đường uống do curcumin có độ tan thấp, tốc độ hòa tan kém, không bền trong môi trường kiềm, chuyển hóa nhanh [11], [49], [75], [87], [91]… Sinh dược học đã chứng minh rằng độ tan và tốc độ hòa tan của dược chất là một trong những yếu tố quyết định mức độ và tốc độ giải phóng, hấp thu dược chất từ đường uống [11]. Vì thế, để góp phần nâng cao sinh khả dụng của curcumin, việc áp dụng các kỹ thuật bào chế thích hợp nhằm cải thiện đặc tính ít tan của curcumin như giảm kích thước tiểu phân, tạo phức hệ phân tán rắn, sử dụng tá dược mới… trước khi đưa vào bào chế các dạng thuốc là vấn đề cần phải thực hiện. Ngoài ra, để tránh tác động bị phân hủy bởi pH kiềm của môi trường ruột non lên curcumin thì việc nghiên cứu các dạng bào chế mới là điều rất cần thiết. Có nhiều dạng bào chế mới ra đời trong đó có thuốc nổi, là một trong những dạng thuốc có nhiều tiềm năng ứng dụng, hứa hẹn mang đến phương pháp trị liệu mới có hiệu quả nhờ thuốc có tỉ trọng thấp hơn dịch dạ dày (≈1,004g/cm3) nên có khả năng nổi và lưu ở dạ dày mà không bị tác động bởi tốc độ làm rỗng dạ dày trong một thời gian dài [110] từ đó giúp thuốc không bị phân hủy bởi pH kiềm của ruột non, giúp giảm liều, giảm tần số dùng thuốc, giảm sự dao động của nồng độ thuốc trong máu, tăng sự hấp thu… khắc phục được những hạn chế vốn có của những dạng thuốc truyền thống, nâng cao hiệu quả điều trị lâm sàng [101], [110]. Cho đến nay, trên thị trường Việt Nam chưa có dạng thuốc nổi chứa curcumin và chưa có bất kỳ nghiên cứu nào về tác dụng ức chế sự phát triển tế bào ung thư dạ dày của curcumin được thực hiện. Vì vậy, với mong muốn tìm ra một dạng thuốc mới, có thể khai thác hết tiềm năng chữa bệnh của một hoạt chất có nguồn gốc từ thiên nhiên, ít tác dụng phụ cũng như góp phần nghiên cứu đánh giá hiệu quả kháng ung thư của curcumin trên chuột nhắt trắng, đề tài “Nghiên cứu bào chế và đánh giá tác dụng kháng ung thư của viên nén nổi chứa curcumin” được thực hiện với mục tiêu như sau: 1) Xây dựng và thẩm định quy trình định lượng curcumin trong hệ phân tán rắn bằng phương pháp quang phổ tử ngoại khả kiến (UV-Vis) và trong viên nén nổi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC). 2) Nghiên cứu bào chế hệ phân tán rắn (HPTR) chứa curcumin có độ hòa tan cao bằng các phương pháp và chất mang khác nhau. 3) Nghiên cứu bào chế viên nén nổi chứa HPTR curcumin 100 mg. 4) Đánh giá tác dụng kháng ung thư dạ dày của thành phần công thức viên nén nổi chứa HPTR curcumin 100 mg trên dòng tế bào ung thư ở người (in vitro) và trên chuột nhắt trắng (in vivo).
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH HUỲNH THỊ MỸ DUYÊN NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VÀ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG KHÁNG UNG THƯ CỦA VIÊN NÉN NỔI CHỨA CURCUMIN LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC Thành phố Hồ Chí Minh-Năm 2017 ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư dày loại ung thư phổ biến nguyên nhân tử vong ung thư cao thứ tư giới; Việt Nam thuộc khu vực có trung bình nguy ung thư dày cao, với tỷ lệ mắc nam nữ 16,3/ 100.000 dân [119] Mặc dù có nhiều tiến chẩn đốn, điều trị tiên lượng ung thư dày xấu với tỷ lệ sống thêm năm khoảng 28% Các liệu pháp hóa trị cần thiết đa số bệnh nhân với độc tính cao hố chất tổng hợp cơng không đặc hiệu tế bào ung thư tế bào bình thường làm ảnh hưởng đến sức khỏe bệnh nhân Vì vậy, việc hướng tới tìm hợp chất có nguồn gốc dược liệu để hỗ trợ điều trị vừa hiệu vừa an toàn thu hút quan tâm nhiều nhà nghiên cứu Curcumin thành phần thân rễ Nghệ vàng (Curcuma longa L Zingiberaceae) nghiên cứu với nhiều công dụng kháng ung thư (ung thư dày, ung thư gan, ung thư phổi, ung thư kết tràng, ung thư vú, ung thư da), kháng viêm, chống oxy hóa, kháng khuẩn (Helicobacter pylori), kháng virus, kháng nấm [37], [49], [59], [68], [71], [87] … Các thử nghiệm sinh học chứng minh, curcumin thật hiệu việc phối hợp điều trị ung thư đặc biệt ung thư dày [8], [37], [81] an toàn dùng liều cao Với an toàn hiệu quả, curcumin hợp chất thiên nhiên có nhiều tiềm ứng dụng phòng ngừa hỗ trợ điều trị bệnh ung thư dày Tuy nhiên, curcumin chưa ứng dụng nhiều dạng thuốc đường uống curcumin có độ tan thấp, tốc độ hòa tan kém, khơng bền mơi trường kiềm, chuyển hóa nhanh [87], [91] [11], [49], [75], … Sinh dược học chứng minh độ tan tốc độ hòa tan dược chất yếu tố định mức độ tốc độ giải phóng, hấp thu dược chất từ đường uống [11] Vì thế, để góp phần nâng cao sinh khả dụng curcumin, việc áp dụng kỹ thuật bào chế thích hợp nhằm cải thiện đặc tính tan curcumin giảm kích thước tiểu phân, tạo phức hệ phân tán rắn, sử dụng tá dược mới… trước đưa vào bào chế dạng thuốc vấn đề cần phải thực Ngoài ra, để tránh tác động bị phân hủy pH kiềm môi trường ruột non lên curcumin việc nghiên cứu dạng bào chế điều cần thiết Có nhiều dạng bào chế đời có thuốc nổi, dạng thuốc có nhiều tiềm ứng dụng, hứa hẹn mang đến phương pháp trị liệu có hiệu nhờ thuốc có tỉ trọng thấp dịch dày (≈1,004g/cm ) nên có khả lưu dày mà không bị tác động tốc độ làm rỗng dày thời gian dài [110] từ giúp thuốc không bị phân hủy pH kiềm ruột non, giúp giảm liều, giảm tần số dùng thuốc, giảm dao động nồng độ thuốc máu, tăng hấp thu… khắc phục hạn chế vốn có dạng thuốc truyền thống, nâng cao hiệu điều trị lâm sàng [101], [110] Cho đến nay, thị trường Việt Nam chưa có dạng thuốc chứa curcumin chưa có nghiên cứu tác dụng ức chế phát triển tế bào ung thư dày curcumin thực Vì vậy, với mong muốn tìm dạng thuốc mới, khai thác hết tiềm chữa bệnh hoạt chất có nguồn gốc từ thiên nhiên, tác dụng phụ góp phần nghiên cứu đánh giá hiệu kháng ung thư curcumin chuột nhắt trắng, đề tài “Nghiên cứu bào chế đánh giá tác dụng kháng ung thư viên nén chứa curcumin” thực với mục tiêu sau: 1) Xây dựng thẩm định quy trình định lượng curcumin hệ phân tán rắn phương pháp quang phổ tử ngoại khả kiến (UV-Vis) viên nén phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 2) Nghiên cứu bào chế hệ phân tán rắn (HPTR) chứa curcumin có độ hòa tan cao phương pháp chất mang khác 3) Nghiên cứu bào chế viên nén chứa HPTR curcumin 100 mg 4) Đánh giá tác dụng kháng ung thư dày thành phần công thức viên nén chứa HPTR curcumin 100 mg dòng tế bào ung thư người (in vitro) chuột nhắt trắng (in vivo) CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ CURCUMIN Curcumin tên gọi curcuminoid-một nhóm hợp chất có nguồn gốc từ Nghệ vàng (Curcuma longa L Zingiberaceae) Bao gồm curcumin I-chiếm khoảng 77%; curcumin II (demethoxycurcumin)-chiếm tỷ lệ khoảng 17%; curcumin III (bisdemethoxycurcumin)-chiếm tỷ lệ khoảng 3% Trong đó, thành phần có hoạt tính sinh học curcumin I [11], [91], [100] Hình 1 Cấu trúc curcumin Curcumin bột tinh thể có màu vàng cam, khơng tan nước pH acid trung tính, khơng tan ether, tan methanol, ethanol, dimethyl sulfoxid aceton Cực đại hấp thu (max) curcumin methanol 430 nm Điểm chảy o 183 C Hệ số phân bố độ tan nước curcumin tương ứng 3,2 0,6 g/mL [82], [96] Curcumin bền với ánh sáng, bền môi trường kiềm bị phân hủy nhanh chóng khoảng thời gian chưa đầy 30 phút [111] Curcumin có giá trị hoạt tính sinh học cao công thức cấu tạo curcumin có nhóm hoạt tính sau: - Nhóm parahydroxyl: hoạt tính chống oxi hố - Nhóm ceton: kháng viêm, kháng ung thư - Nhóm liên kết đơi: kháng viêm, kháng ung thư, chống đột biến tế bào Nhiều cơng trình nghiên cứu hoạt tính tác dụng dược lý curcumin Kết cho thấy, curcumin có hoạt tính sinh học mạnh đa dạng, bao gồm: hoạt tính chống viêm, chống ung thư, chống đơng máu, chống vi khuẩn, chống nấm, chống virus, làm lành vết thương, giảm cholesterol; chữa số bệnh như: đái tháo đường, , tim mạch [8], [37], [75], [81], [91] … Curcumin có khả ngăn chặn loại ung thư dày, da, tuyến vú, miệng, phổi, gan, thực quản, ruột non, ruột già… Curcumin tác động đến hầu hết giai đoạn hình thành phát triển khối u Cơ chế kháng ung thư curcumin đa dạng như: ức chế sinh sản tăng sinh mạch máu tế bào ung thư, ức chế isoenzym cytochrom P450, ức chế chuyển hóa sinh học chất gây ung thư, ức chế protein liên quan đến chu trình tế bào NF-kB, cảm ứng enzyme glutathion S-transferase (GST), thúc đẩy tế bào ung thư vào chu trình chết tự nhiên [8], [37], [49], [71], [81], [91], [116] … Hình Quá trình hình thành di khối u tác động curcumin Các nghiên cứu khác trình chuyển hóa curcumin thực Khi dùng đường uống, curcumin chuyển hóa chủ yếu theo đường glucuronid hóa Q trình chuyển hóa curcumin xảy chủ yếu gan, thận ống tiêu hóa [41],[ 100] Curcumin bị chuyển hóa lần đầu cho dihydrocurcumin tetrahydrocurcumin, hợp chất sau chuyển sang dạng liên hợp monoglucuronid Vì vậy, chất chuyển hóa curcumin curcuminglucuronid, dihydrocurcumin-glucuronid, tetrahydrocurcumin-glucuronid tetrahydrocurcumin Những chất chuyển hóa curcumin có hoạt tính tương tự curcumin khơng rõ ràng Trong hầu hết nghiên cứu cho thấy curcumin-glucuronid tetrahydrocurcumin có hoạt tính curcumin số nghiên cứu khác cho hợp chất có hoạt tính mạnh curcumin 1.2 TỔNG QUAN VỀ THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH PHÂN TÍCH-ĐỘ ỔN ĐỊNH VÀ TUỔI THỌ CỦA THUỐC 1.2.1 Thẩm định qui trình phân tích Thẩm định quy trình phân tích theo hướng dẫn Q2 (R1) tháng 11-2005 ICH (International Conference on Harmonisation) [2], [3], [5], [34] 1.2.1.1 Các nghiên cứu định lượng curcumin phương pháp quang phổ UVVis Tang Bo cộng (2002) sử dụng máy quang phổ Shimadzu UV-265 để định lượng phức chất curcumin -cydclodextrin Kết quả, max 431 nm có [115] khoảng tuyến tính 0-15 g/mL với hệ số tương quan bình phương r = 0,9991 Goindi Shishu cộng (2011) định lượng curcumin methanol đệm pH 1,2 với hệ thống quang phổ Shimadzu Kết quả, khoảng tuyến tính 1-10 µg/mL với hệ số tương quan r = 0,9999; phương trình hồi quy ŷ = 0,145x max 421 nm ŷ = 0,054x 430 nm (đệm pH 1,2) [29] Sharma Kiran cộng (2012) sử dụng máy quang phổ Doublebeam Shimadzu 1601 định lượng curcumin (10 g/mL) methanol Kết quả, max 421 nm có khoảng tuyến tính 1-7 g/mL với hệ số tương quan bình phương r = 0,9995 [99] Kadam Prasad Vijay cộng (2013) sử dụng máy quang phổ Doublebeam Shimadzu 1800 định lượng curcumin công thức cream Kết quả, max 422 nm có khoảng tuyến tính 1-7 g/mL với hệ số tương quan bình phương r = 0,999; phương trình hồi quy ŷ = 0,166x – 0,01 [50] Hazra Kalyan cộng (2015) sử dụng máy quang phổ Doublebeam Shimadzu định lượng curcumin công thức nanocurcumin Kết quả, max 421 nm có khoảng tuyến tính 5-25 g/mL với hệ số tương quan bình phương r = 0,9997 [39] Holkar Vishal Vasant cộng (2015) sử dụng máy quang phổ Doublebeam Shimadzu 1800 định lượng curcumin (10 g/mL) methanol Kết quả, max421 nm có khoảng tuyến tính 1-6 g/mL với hệ số tương quan bình phương r = 0,999; phương trình hồi qui ŷ = 0,150x + 0,005 [40] Tất nghiên cứu cho thấy qui trình đạt độ đặc hiệu, độ độ xác 1.2.1.2 Các nghiên cứu định lượng curcumin phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) Jadhav B-K cộng (2007) sử dụng HPLC đầu dò UV-Vis bước sóng 420 nm với chương trình rửa giải isocratic để định lượng curcumin, ct RP-C18 đ Vydac (250 x 4,6mm, àm) vi pha động acetonitril:0,1% acid trifluro-acetic (50:50); tốc độ dòng 1,5 mL/phút; thể tích tiêm mẫu 20 µL Kết khoảng tuyến tính curcumin 100-200 ng/mL với hệ số tương quan bình phương r = 0,9996; thời gian lưu khoảng 7,2 phút [43] Ramshankar Yadav Vivek Suresh Sarasija (2009) sử dụng HPLC đầu dò UVVis bước sóng 425 nm để xác định curcumin, cột Merck C15 (250 x 4,6 mm, µm) với pha động acetonitril:tetrahydrofuran: 2% acid acetic (50:30:20); tốc độ dòng 0,7 mL/phút; thể tích tiêm mẫu 50 µL Kết khoảng tuyến tính curcumin 50-100000 ng/mL với hệ số tương quan bình phương r = 0,9997; thời gian lưu 4,587 phút [93] Ramshankar Yadav Vivek cộng (2009) sử dụng HPLC đầu dò UV-Vis bước sóng 425 nm để định lượng curcumin, demethoxy bismethoxy curcumin, cột pha đảo Merck C15 (4,6 x 250 mm, m) pha động tetrahydrofuran:1% acid citric (35:65); tốc độ dòng 1,2 mL/phút; thể tích tiêm mẫu 50 µL Kết khoảng tuyến tính curcumin 50-5000 ng/mL với hệ số tương quan bình phương r = 0,9997; thời gian lưu 15,892 phút [94] Li Rui cộng (2011) sử dụng HPLC đầu dò LC/MS/MS để định lượng curcumin, demethoxycurcumin (DMC) bis demethoxycurcumin (BDMC) khối u chuột, Zorbax SB-C18 (4,6 x 12,5 mm; m) pha động acetonitril:nước (chứa 0,1% acid formic) (50:50); tốc độ dòng 0,2 mL/phút Kết khoảng tuyến tính 2-6000 ng/mL với hệ số tương quan bình phương r = 0,997-0,99; thời gian lưu 12,59; 11,28 10,11 phút [61] Sonavaran C cộng (2011), sử dụng HPLC pha đảo đầu dò UV-Vis bước sóng 250 nm với chương trình rửa giải gradient để định lượng curcumin chế phẩm thuốc viên nén, cột Lichrocart Lichrosphere (250 x 4,0 mm; µm) với pha động acetonitril:đệm natri acetat pH 4,5 (10:90); tốc độ dòng mL/phút; thể tích tiêm mẫu 20 µL Kết khoảng tuyến tính curcumin 50-150 µg/mL với hệ số tương quan bình phương r = 0,999; thời gian lưu 4,476 phút [107] Gugulothu Dalapathi cộng (2013), áp dụng phương pháp HPLC đầu dò UV-Vis bước sóng 425 nm, sử dụng cột Zorbax Eclipse C18 (4,6 x 150 mm, m) MP acid acetic 1% (pH điều chỉnh với 50% triethanolamine):acetonitril (55:45); tốc độ dòng 1,25 mL/phút; thể tích tiêm mẫu 50 µL để định lượng curcumin huyết tương người Kết khoảng tuyến tính 10-1000 ng/mL với hệ số tương quan bình phương r = 0,999; thời gian lưu phút [32] Jangle RD Thorat BN (2013), sử dụng HPLC đầu dò UV-Vis bước sóng 425 nm để xác định liposome curcuminoid, cột Zorbax Eclipse XDB-C18 (150 ì mm, àm) v pha ng l acid orthophosphoric 0,1% :acetonitril (50:50); tốc độ dòng mL/phút; thể tích tiêm mẫu µL Kết khoảng tuyến tính curcumin 50-300 ng/mL với hệ số tương quan bình phương r = 0,997; thời gian lưu curcumin 6,36 phút [45] Ang Lee Fung cộng (2014) sử dụng HPLC đầu dò UV-Vis bước sóng 370 nm với chương trình rửa giải isocratic để định lượng curcumin quercetin, cột Thermo Hypersil (250 x 4,6mm, µm) với pha động acetonitril:acid acetic pH 2,6 (40:60); tốc độ dòng 1,3 mL/phút; thể tích tiêm mẫu 20 µL Kết khoảng tuyến tính curcumin 1,25-200 µg/mL với hệ số tương quan bình phương r = 0,99993; thời gian lưu khoảng 16,72 phút [13] Long Yuling cộng (2014) sử dụng HPLC đầu dò UV-Vis bước sóng 425 nm để xác định đồng thời curcumin, demethoxycurcumin bisdemethoxycurcumin, cột Wondasil C18 (250 cm X 4,6 mm, µm) với pha động acetonitril: đệm phosphat 10 mM pH 5,0 (50:50); tốc độ dòng mL/phút; thể tích tiêm mẫu 20 µL Kết khoảng tuyến tính curcumin 0,208-41,6 µg/mL với hệ số tương quan bình phương r = 0,9985; thời gian lưu khoảng 14 phút [66] Tất nghiên cứu cho thấy qui trình đạt tính tương thích hệ thống, độ đặc hiệu, độ độ xác 1.2.2 Độ ổn định tuổi thọ thuốc Thực theo hướng dẫn thử độ ổn định xác định tuổi thọ thuốc theo WHO, ASEAN quy định đăng ký thuốc-BYT [1], [6], [7], [33], [131] Các nghiên cứu khảo sát độ ổn định curcumin Wang YingJan cộng (1997) nghiên cứu độ ổn định curcumin dung dịch đệm đặc tính sản phẩm thối hóa Một loạt điều kiện pH khác từ 3-10 thử nghiệm kết cho thấy tốc độ phân hủy phụ thuộc vào pH xảy nhanh điều kiện trung tính Kết cho thấy curcumin ổn định mơi trường ni cấy có chứa 10% huyết bê máu người, 20% curcumin phân hủy vòng sau khoảng 50% curcumin tồn Trans-6-(4ʼ-hydroxy-3ʼ-methoxyphenyl)2,4-dioxo-5-hexenal dự đốn sản phẩm thối hóa chính; vanillin, acid ferulic, feruloylmethan xác định sản phẩm thối hóa nhỏ lượng vanillin tăng theo thời gian ủ [130] Gugulothu Dalapathi B Vandana B Patravale (2012) nghiên cứu ổn định chế phầm chứa đồng thời curcumin celecoxib Tác giả tiến hành phân hủy chế phẩm điều kiện khắc nghiệt như: tiếp xúc với tác nhân oxi hóa, chiếu sáng, mơi trường acid, kiềm nhiệt độ cao Kết quả, mẫu phân hủy tiêm vào hệ thống HPLC, thu sắc ký đồ cho thấy pic curcumin giảm nhanh tiếp xúc với tác nhân oxy hóa, môi trường kiềm, acid, ánh sáng nhiệt độ cao curcumin không thay đổi đáng kể [31] Korany Mohamed A cộng (2013) nghiên cứu ổn định curcumin silymarin chế phẩm chứa thành phần Tác giả tiến hành phân tích phân hủy chế phẩm mơi trường acid, trung tính, kiềm, chiếu sáng, tác nhân oxy hóa nhiệt độ cao Kết cho thấy, mơi trường acid, trung tính, ánh sáng tác nhân oxi hóa, pic curcumin sắc ký đồ giảm 43%, 26%, 37%, 41%, xuất pic lạ nằm xa pic Trong mơi trường kiềm, curcumin gần phân hủy hồn tồn, diện tích pic giảm 92% với xuất pic lạ nằm cách xa pic sắc ký đồ Ở mẫu chế phẩm bị sấy nhiệt độ cao, pic curcumin khơng có thay đổi, độ tinh khiết pic giảm [54] 1.3 TỔNG QUAN VỀ PHƯƠNG PHÁP ĐIỀU CHẾ HỆ PHÂN TÁN RẮN (HPTR) ĐỂ CẢI THIỆN ĐỘ HÒA TAN CỦA CURCUMIN 1.3.1 Khái niệm Hệ phân tán rắn (HPTR) coi hệ pha rắn có hay nhiều dược chất phân tán hay nhiều chất mang khung trơ mặt dược lý, điều chế phương pháp thích hợp 1.3.2 Một số phương pháp điều chế HPTR thường sử dụng Phương pháp nghiền ướt (Kneading method): dược chất chất mang nghiền trộn với lượng tối thiểu chất lỏng thích hợp (có thể nước) thời gian dài cối, chày máy nghiền để thu khối nhão, sau làm khơ nghiền tán thành hạt có kích thước thích hợp Phương pháp kinh tế, thân thiện với môi trường, tránh phân huỷ dược chất, hạn chế sử dụng dung môi hữu [16], [25], [83], [123] Phương pháp đun chảy (Melting method): dược chất phối hợp với chất mang thân nước theo tỷ lệ thích hợp cách đun chảy Làm nguội nhanh hỗn hợp nước đá Để ổn định thời gian ngắn nhiệt độ phòng, sấy khơ Nghiền nhỏ, rây lấy hạt có kích thước thích hợp Phương pháp áp dụng cho dược chất rắn không bị phân hủy nhiệt chất mang trơ thân nước dạng rắn có nhiệt độ nóng chảy thấp, độ linh động chất mang trạng thái nóng chảy đủ để thay đổi kết hợp phân tử dược chất Ngoài ra, để hạn chế ảnh hưởng nhiệt độ lê bền vững hoạt chất, phương pháp thực bình kín chân khơng có diện nitơ lỏng [16], [25], [83], [123] Phương pháp dung môi (Solvent evaporation method): dược chất chất mang hòa tan lượng dung mơi tối thiểu Sau loại dung mơi để thu đồng kết tủa dược chất chất mang Nếu dược chất chất mang không đồng tan dung mơi phối hợp hai nhiều dung mơi khác để hòa tan dược chất chất mang Dung môi, dược chất chất mang khuấy trộn, sau bốc thu hồi dung mơi HPTR nghiền, rây chọn hạt có kích thước thích hợp Phương pháp dung mơi thường áp dụng dược chất chất mang không bền với nhiệt tan hay hai dung mơi khác Phương pháp thích hợp với polyme có điểm chảy cao nhiên phương pháp đắt tiền, khó loại bỏ dung mơi hồn tồn, khó lựa chọn dung mơi chung [16], [25], [83], [123] PL-41 6b 10 10 Bình thường Viêm mạn Bình thường Ung thư Viêm mạn Bình thường Bình thường Bình thường Bình thường Bình thường Viêm mạn Bình thường Bình thường Ung thư PL-6 Hình ảnh đại thể đại diện lô Lô Lô Lô 3a Lô Lô 5a Lô 6a PL-42 PL-43 PL-6 Hình ảnh vi thể chuột Lơ Con (ung thư) Con (ung thư) Con (ung thư) Con (ung thư) Con (ung thư) Con 10 (viêm mạn) Con (ung thư) Con (viêm mạn) CHẾT CHẾT Con (chết) Con (chết) PL-43 PL-44 Lơ 3a CHẾT Con (chết) Con (bình thường) Con (viêm mạn) Con (bình thường) Con (ung thư) Con (bình thường) Con (ung thư) Con (ung thư) CHẾT Con (bình thường) Con 10 (chết) PL-44 PL-45 Lô 3b CHẾT Con (bình thường) Con (chết) Con (bình thường) Con (viêm mạn) Con (bình thường) Con (ung thư) Con (ung thư) Con (bình thường) Con (bình thường) Con 10 (ung thư) PL-45 PL-46 Lơ CHẾT Con (ung thư) Con (ung thư) Con (chết) Con (ung thư) Con (ung thư) Con (ung thư) Con (bình thường) Con (viêm mạn) Con (ung thư) Con 10 (ung thư) PL-46 Lô 5a Con (ung thư) Con (bình thường) Con (viêm mạn) Con (viêm mạn) Con (bình thường) Con 10 (viêm mạn) Con (bình thường) Con (ung thư) Con (bình thường) Con (ung thư) PL-47 Lô 5b CHẾT CHẾT Con (ung thư) Con (chết) Con (bình thường) Con (chết) Con (viêm mạn) Con (bình thường) Con (bình thường) Con (viêm mạn) Con (viêm mạn) Con 10 (bình thường) PL-48 Lơ 6a Con (ung thư) Con (ung thư) Con (viêm mạn) Con (bình thường) Con (bình thường) Con 10 (bình thường) Con (bình thường) Con (bình thường) Con (ung thư) Con (viêm mạn) PL-49 PL-50 Lơ 6b CHẾT Con (bình thường) Con (bình thường) CHẾT CHẾT Con (chết) Con (chết) Con (bình thường) Con 10 (ung thư) Con (chết) Con (bình thường) Con (viêm mạn) Con (bình thường) PL-50 PL-6 Phiếu trả kết phân tích vi phẫu chuột ... mang khác 3) Nghiên cứu bào chế viên nén chứa HPTR curcumin 100 mg 4) Đánh giá tác dụng kháng ung thư dày thành phần công thức viên nén chứa HPTR curcumin 100 mg dòng tế bào ung thư người (in vitro)... kháng ung thư curcumin chuột nhắt trắng, đề tài “Nghiên cứu bào chế đánh giá tác dụng kháng ung thư viên nén chứa curcumin thực với mục tiêu sau: 1) Xây dựng thẩm định quy trình định lượng curcumin. .. vừa an toàn thu hút quan tâm nhiều nhà nghiên cứu Curcumin thành phần thân rễ Nghệ vàng (Curcuma longa L Zingiberaceae) nghiên cứu với nhiều công dụng kháng ung thư (ung thư dày, ung thư gan, ung